CN108802021B - 一种过氧化苯甲酰检测试纸及其制备方法及检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种过氧化苯甲酰检测试纸,包括试纸基片及设于试纸基片上的检测层,检测层包括检测基层及显色层,显色层由检测基层浸润于显色液中后烘干而成;显色液包括按质量浓度计的如下组份:硫代米氏酮0.3~2g/L、Tween‑80 0.05~0.5g/L、3,3,5,5‑四甲基联苯胺0.1~1.5g/L、甲基乙烯基醚‑马来酸酐共聚物3~15g/L、无水乙醇500~800g/L,其余为纯水。本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸具有操作简单便捷、反应时间短、检出限低、灵敏度高、准确度高、单次检测费用低、保质期长。
Description
技术领域
本发明属于食品检测领域,尤其是涉及一种过氧化苯甲酰检测试纸及其制备方法及检测方法。
背景技术
在食品安全检测领域,关于过氧化苯甲酰的分析方法有气相色谱法、液相色谱法、分光光度法、化学发光法、离子色谱法等。这些方法虽然存在着检测精度高、检测限低、重复性好等优点,但是也存在着样品前处理步骤繁琐费时、检测仪器昂贵、检测周期长、成本高、过度依赖专业技术人员等问题,不利于基层质检部门大面积初筛,不利于现场的快速检测。
而目前存在的试剂盒比色法及试纸法虽然相较于上述方法更加便捷,但仍存在着许多问题,如授权公告号为CN102323258B,名称为一种检测面粉中过氧化苯甲酰的检测试纸及其制备方法,其采用淀粉-碘化钾试纸,面粉样品检出限为36mg/kg,检出限过高,灵敏度较低,而质检总局2011年第28号公告:自2011年5月1日起,禁止在面粉生产中添加过氧化苯甲酰;此外,目前的试纸或试剂盒检测方法在操作便捷性上、准确度上、反应时间上、检测费用上、保存时长上都有待改进。
发明内容
有鉴于此,为了解决上述问题,本发明旨在提出一种操作简单便捷、反应时间短、检出限低、灵敏度高、准确度高、单次检测费用低、保质期长的过氧化苯甲酰检测试纸;
本发明还提供了一种制备简单、制备成本低、可批量生产过氧化苯甲酰检测试纸的制备方法;
本发明还提供了一种操作简单快捷、检测周期短、无需专业人员操作的测定面粉及面制品中过氧化苯甲酰的检测方法;
本发明还提供了一种试剂盒,试剂盒内除了设有本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸,还设有标准比色卡,无需使用者在实验时再单独制作标准样,进一步提高检测效率,同时方便携带至现场对样品进行快速筛查。
为达到上述目的,本发明的技术方案是这样实现的:
一种过氧化苯甲酰检测试纸,包括试纸基片及设于所述试纸基片上的检测层,所述检测层包括检测基层及显色层,所述显色层由所述检测基层浸润于显色液中后烘干而成;所述显色液包括按质量浓度计的如下组份:硫代米氏酮0.3~2g/L、Tween-80 0.05~0.5g/L、3,3,5,5-四甲基联苯胺0.1~1.5g/L、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物3~15g/L、无水乙醇500~800g/L,其余为纯水。
进一步的,所述试纸基片的长度为6~10cm,宽度为0.5~1cm,厚度为0.02~0.05cm;所述检测基层的长度为0.5~1cm,宽度为0.5~1cm。
进一步的,所述检测基层设置于所述试纸基片上端面的至少一端上。
进一步的,所述检测基层为吸水纸;吸水纸具有显色灵敏度高、对试剂吸附性好、耐保存等优点。
一种过氧化苯甲酰检测试纸的制备方法,包括以下步骤:
1)配制质量浓度为硫代米氏酮0.3~2g/L、Tween-80 0.05~0.5g/L、3,3,5,5-四甲基联苯胺0.1~1.5g/L、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物3~15g/L、无水乙醇500~800g/L,其余为纯水的显色液;
2)将吸水纸从步骤1)中配制的显色液中浸过,取出后悬挂沥水,在50~65℃下烘干10~25min,得到具有显色层的吸水纸;
3)将步骤2)中的得到的具有显色层的吸水纸裁切成型后粘贴到试纸基片上压紧,裁切成型后得到过氧化苯甲酰检测试纸。
一种过氧化苯甲酰检测试纸测定面粉及面制品中过氧化苯甲酰的检测方法,包括如下步骤:
1)样品液的制备:称取定量的样品,向样品中加入量取好的无水乙醇,振动摇匀后静置,上层液即为样品液;
2)吸取样品液后,加入与样品液等体积量的纯水,混匀后,将所述过氧化苯甲酰试纸设有检测层的一端浸入其中,取出显色后与标准比色卡进行比色,确定过氧化苯甲酰含量。
一种试剂盒,包括本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸及标准比色卡,所述标准比色卡设有八个色阶,由浅到深对应着过氧化苯甲酰在样品中的含量分别为0mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg、120mg/kg、200mg/kg。
进一步的,所述标准比色卡的制备方法为:配制不同浓度的过氧化苯甲酰溶液,溶剂为无水乙醇;将配制好的不同浓度的过氧化苯甲酰溶液分别在所述过氧化苯甲酰检测试纸上进行显色,根据显色结果与质量浓度对应的关系制作标准比色卡。
本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸测定过氧化苯甲酰的检测原理是:以3,3,5,5-四甲基联苯胺为显色剂,硫代米氏酮为促进剂,与过氧化苯甲酰反应生成绿色化合物,颜色的深浅与过氧化苯甲酰的含量成正相关,因此,过氧化苯甲酰检测试纸的颜色随样品中过氧化苯甲酰含量的增多而加深,在不同浓度范围内,可以用肉眼将颜色分辨出来,然后与标准比色卡比对计算样品中过氧化苯甲酰的含量。
相对于现有技术,本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸具有以下优势:
(1)本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸采用3,3,5,5-四甲基联苯胺为显色剂,硫代米氏酮为促进剂,通过两种试剂的协同作用,可使产品检出限更低,检出限可为5mg/kg;硫代米氏酮能够促发反应,提高过氧化苯甲酰检测试纸的灵敏度,有效缩短反应时间;硫代米氏酮的价格便宜且性质稳定,能够有效延长过氧化苯甲酰检测试纸的保存时间,在室温下保存期可达1.5年;
(2)本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸检测成本低廉,单次样品检测成本在0.04元,远低于现有的检测试纸及其他检测方法单次检测的成本;
(3)本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸的显色层通过显色液浸渍在吸水纸上烘干而成,显色液内含有Tween-80及甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物,Tween-80具有乳化、分散、增溶的作用,使显色液中的试剂均匀的分散于吸水纸的空隙中;甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物具有粘合性,聚结性,促进实际稳定的粘附于吸水纸上,与Tween-80共同作用,可以使过氧化苯甲酰检测试纸在检测过程中显色更加均匀。
相对于现有技术,本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸的制备方法具有以下优势:制备工艺简单、生产周期短、制造成本低廉、可批量生产。
相对于现有技术,本发明所述的过氧化苯甲酰检测试纸测定面粉及面制品中过氧化苯甲酰的检测方法,具有以下优势:
(1)从时间及操作复杂度上看,本发明所述的检测方法只需取样于离心管中经无水乙醇提取后,将过氧化苯甲酰检测试纸蘸取样液后,放置1min即可与标准比色卡进行比色判定,整个操作过程简单,快捷;
(2)从费用上看,单次样片检测成本为0.04元,远低于现有的检测试纸及其他检测方法单次检测的成本;
(3)本发明采用无水乙醇为提取剂提取样品中的过氧化苯甲酰,操作便捷,成本低,无毒无害。
相对于现有技术,本发明所述的试剂盒内设有所述过氧化苯甲酰检测试纸及标准比色卡,便于携带,标准比色卡的设置,无需使用者在实验时再单独制作标准样,适合相关部门、企业深入基层对样品的快速筛查。
具体实施方式
除有定义外,以下实施例中所用的技术术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂,如无特殊说明,均为常规生化试剂;所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。
下面结合实施例来详细说明本发明。
实施例1
1.1过氧化苯甲酰检测试纸及其制备
1)配制质量浓度为硫代米氏酮0.3g/L、Tween-80 0.2g/L、3,3,5,5-四甲基联苯胺1g/L、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物10g/L、无水乙醇600g/L,其余为纯水的显色液;
2)将配制好的显色液倒入专用搪瓷盘中,将吸水纸从显色液中匀速浸过,取出后悬挂沥水,送入60℃干燥箱内烘干10~25min,得到具有显色层的吸水纸;
3)将步骤2)中的得到的具有显色层的吸水纸裁切成宽度为0.6cm的条状物,再粘贴到30×8cm的试纸基片上压紧,裁切成8×0.6cm条状物即得到过氧化苯甲酰检测试纸。
1.2上述1.1所述过氧化苯甲酰检测试纸测定样品中过氧化苯甲酰的检测方法
1)样品液的制备:称取1g样品于5ml样品管中,向样品中加入2ml无水乙醇,振摇1min以上,静置5分钟,上层液即为样品液;
2)滴加5滴样品液于1.5ml离心管中,向离心管中滴加5滴纯水,混匀后,将过氧化苯甲酰试纸设有检测层的一端浸入其中1~2秒后取出,1min后与标准比色卡进行比色,观察颜色变化,读取结果。
1.3标准比色卡的制备
配制0mg/L、1.25mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L、50mg/L的过氧化苯甲酰标准溶液,溶剂为乙醇;将上述不同浓度的过氧化苯甲酰标准溶液分别在1.1中制备得到的过氧化苯甲酰检测试纸上进行显色,根据显色结果与质量浓度对应的关系制作标准比色卡,得到具有八个色阶的标准比色卡,由于上述1.2中样品稀释倍数为4倍,为了便于使用者在测试时直接得到面粉及面制品中过氧化苯甲酰的含量,故八个色阶由浅到深对应着换算为样品中过氧化苯甲酰含量分别为0、5、10、20、40、80、120、200mg/kg。
1.4上述1.1所述过氧化苯甲酰检测试纸的检出限的测定
取小麦粉阴性样品,进行过氧化苯甲酰标准溶液加入实验,过氧化苯甲酰加入量及实验结果见表1。
表1
根据表1的实验结果,使用本实施例所述的过氧化苯甲酰检测试纸检测小麦粉中的过氧化苯甲酰含量,在过氧化苯甲酰加入量为5mg/kg时,可以观察到明显的试纸颜色变化。因此将该实验的检出限定为5mg/kg,其后随着过氧化苯甲酰含量的增加过氧化苯甲酰检测试纸的颜色也在逐渐加深。
1.5上述1.1所述过氧化苯甲酰检测试纸的检测准确性验证
对小麦粉、馒头、挂面各3批次样品及样品加标(向样品中加入过氧化苯甲酰)进行测定,同时用GB/T 22325-2008进行对比实验,结果见表2。
表2
从表2可以看出,本实施例所述的过氧化苯甲酰检测试纸检测结果与GB/T 22325-2008检测结果符合,与加标值也符合。
1.6上述1.1所述过氧化苯甲酰检测试纸的特异性检测
向具有不同浓度的过氧化苯甲酰-乙醇溶液中加入其他干扰离子(吊白块、甲醛、Cl-、SO4 2-、Mg2+、Al3+、Cu2+、Fe3+、Pb2+、Cd2+、Cr6+、Mn2+、K+),加入干扰物的浓度为30umol/L,然后用本实施例所述的过氧化苯甲酰检测试纸进行检测,结果见表3。
表3
从表3可以看出,上述吊白块、甲醛、Cl-、SO4 2-、Mg2+、Al3+、Cu2+、Fe3+、Pb2+、Cd2+、Cr6+、Mn2+、K+对本实施例所述的过氧化苯甲酰检测试纸检测无干扰。
实施例2
2.1过氧化苯甲酰检测试纸及其制备
1)配制质量浓度为硫代米氏酮0.5g/L、Tween-80 0.05g/L、3,3,5,5-四甲基联苯胺0.1g/L、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物3g/L、无水乙醇500g/L,其余为纯水的显色液;
2)和3)同实施例1。
本实施例中的过氧化苯甲酰的检测方法与实施例1中的1.2相同,标准比色卡的制备与实施例1中的1.3相同,在此不做赘述。
上述2.1所得的过氧化苯甲酰检测试纸的检出限的测定、检测准确性验证、特异性的检测方式及结果与实施例1基本相同,在此不做赘述。
实施例3
3.1过氧化苯甲酰检测试纸及其制备
1)配制质量浓度为硫代米氏酮1g/L、Tween-80 0.5g/L、3,3,5,5-四甲基联苯胺0.7g/L、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物15g/L、无水乙醇800g/L,其余为纯水的显色液;
2)和3)同实施例1。
本实施例中的过氧化苯甲酰的检测方法与实施例1中的1.2相同,标准比色卡的制备与实施例1中的1.3相同,在此不做赘述。
上述3.1所得的过氧化苯甲酰检测试纸的检出限的测定、检测准确性验证、特异性的检测方式及结果与实施例1基本相同,在此不做赘述。
实施例4
4.1过氧化苯甲酰检测试纸及其制备
1)配制质量浓度为硫代米氏酮2g/L、Tween-80 0.3g/L、3,3,5,5-四甲基联苯胺1.5g/L、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物8g/L、无水乙醇800g/L,其余为纯水的显色液;
2)和3)同实施例1。
本实施例中的过氧化苯甲酰的检测方法与实施例1中的1.2相同,标准比色卡的制备与实施例1中的1.3相同,在此不做赘述。
上述4.1所得的过氧化苯甲酰检测试纸的检出限的测定、检测准确性验证、特异性的检测方式及结果与实施例1基本相同,在此不做赘述。
对比例1
本对比例中的显色液与实施例1中显色液相比,缺少硫代米氏酮,其余组分不变;采用与实施例1中1.1的步骤2)和3)相同方法生产试纸,得到对比例1的试纸。
采用对比例1的试纸对实施例1中1.5所述的小麦粉1#样品加标5mg/kg和馒头2#样品加标40mg/kg过氧化苯甲酰进行检测,结果表明,1min后,小麦粉1#样品加标5mg/kg过氧化苯甲酰试纸不变色,与比色卡0mg/kg色阶颜色近似,馒头2#样品加标40mg/kg过氧化苯甲酰试纸显色与比色卡0mg/kg色阶颜色近似。
由此,说明硫代米氏酮的存在能够促发反应,使检测灵敏度提高,检测限降低,从而能够更为准确地对过氧化苯甲酰进行检测。3,3,5,5,-四甲基联苯胺经常用过氧化物酶进行催化反应,硫代米氏酮与过氧化物酶相比较,价格更便宜,某品牌硫代米氏酮5g装69元,过氧化物酶100mg则需要330元,此外,过氧化物酶在固定到滤纸的过程中以及试纸保存中容易失活,而硫代米氏酮则比较稳定,能够延长试纸保存期。
对比例2
本对比例中的显色液与实施例1中显色液相比,缺少Tween-80,其余组分不变;采用与实施例1中1.1的步骤2)和3)相同方法生产试纸,得到对比例2的试纸。
采用对比例2的试纸对实施例1中1.5所述的小麦粉3#样品加标5mg/kg和馒头1#样品加标40mg/kg过氧化苯甲酰进行检测,结果表明,1min后取出试纸,试纸呈中间、两侧边缘部分显色深,颜色出现不均一的现象,影响判断,说明添加Tween-80后的能够使试剂更好的分散于吸水纸孔隙中,从而能够使显色均一,更有利于与标准比色卡的比对判断。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种过氧化苯甲酰检测试纸,包括试纸基片及设于所述试纸基片上的检测层,所述检测层包括检测基层及显色层,所述显色层由所述检测基层浸润于显色液中后烘干而成,其特征在于:所述显色液包括按质量浓度计的如下组份:硫代米氏酮0.3~2g/L、Tween-800.05~0.5g/L、3,3,5,5-四甲基联苯胺0.1~1.5g/L、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物3~15g/L、无水乙醇500~800g/L,其余为纯水。
2.根据权利要求1所述的过氧化苯甲酰检测试纸,其特征在于:所述试纸基片的长度为6~10cm,宽度为0.5~1cm,厚度为0.02~0.05cm;所述检测基层的长度为0.5~1cm,宽度为0.5~1cm。
3.根据权利要求1所述的过氧化苯甲酰检测试纸,其特征在于:所述检测基层设置于所述试纸基片上端面的至少一端上。
4.根据权利要求1到3任一项所述的过氧化苯甲酰检测试纸,其特征在于:所述检测基层为吸水纸。
5.一种过氧化苯甲酰检测试纸的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)配制质量浓度为硫代米氏酮0.3~2g/L、Tween-80 0.05~0.5g/L、3,3,5,5-四甲基联苯胺0.1~1.5g/L、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物3~15g/L、无水乙醇500~800g/L,其余为纯水的显色液;
2)将吸水纸从步骤1)中配制的显色液中浸过,取出后悬挂沥水,在50~65℃下烘干10~25min,得到具有显色层的吸水纸;
3)将步骤2)中的得到的具有显色层的吸水纸裁切成型后粘贴到试纸基片上压紧,裁切成型后得到过氧化苯甲酰检测试纸。
6.一种采用权利要求1到4任一项所述的过氧化苯甲酰检测试纸测定面粉及面制品中过氧化苯甲酰的检测方法,其特征在于:包括如下步骤:
1)样品液的制备:称取定量的样品,向样品中加入量取好的无水乙醇,振动摇匀后静置,上层液即为样品液;
2)吸取样品液后,加入与样品液等体积量的纯水,混匀后,将所述过氧化苯甲酰试纸设有检测层的一端浸入其中,取出显色后与标准比色卡进行比色,确定过氧化苯甲酰含量。
7.一种包括权利要求1到4任一项所述的过氧化苯甲酰检测试纸的试剂盒,其特征在于:还包括标准比色卡,所述标准比色卡设有八个色阶,由浅到深对应着过氧化苯甲酰在样品中的含量分别为0mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg、120mg/kg、200mg/kg。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于:所述标准比色卡的制备方法为:配制不同浓度的过氧化苯甲酰溶液,溶剂为无水乙醇;将配制好的不同浓度的过氧化苯甲酰溶液分别在所述过氧化苯甲酰检测试纸上进行显色,根据显色结果与质量浓度对应的关系制作标准比色卡。
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A rapid and sensitive spectrophotometric method for the determination of benzoyl peroxide in wheat flour samples;Kraingkrai Ponhong et al;《journal of food and drug analysis》;20150519;第23卷;第652-659页 * |
Naked eye detection of benzoyl peroxide in wheat flour using 3,30,5,50-tetramethylbenzidine as a chromogenic agent;Jing Hu et al;《RSC Adv》;20131231;第3卷;第26307–26312页 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
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CN108802021A (zh) | 2018-11-13 |
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