CN108779099A

CN108779099A - 哌啶衍生物及其使用方法

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Publication number: CN108779099A
Application number: CN201780014649.0A
Authority: CN
Inventors: 阿德南·M·M·姆加利; 阿尼塔·哈里; 巴普·加德姆; 丹尼尔·克里森; D·R·泊利赛缇; 威廉·肯尼思·班纳; 拉朱·博尔·高达; R·C·安德鲁斯; 苏帕尔纳·古普塔
Original assignee: Point Health Treatment Co Ltd
Current assignee: Point Health Treatment Co Ltd
Priority date: 2016-03-01
Filing date: 2017-02-23
Publication date: 2018-11-09
Anticipated expiration: 2037-02-23
Also published as: US20180362505A1; CN108779099B; JP6860583B2; KR20180113597A; CA3015483C; JP2019511477A; EP3423447A1; WO2017151376A1; CA3015483A1; MX2018010008A; AU2017225537B2; EP3423447B1; AU2017225537A1; US10364233B2

Abstract

本发明提供N‑[1‑(1‑环己基‑3,5‑二甲基‑1H‑吡唑‑4‑磺酰基)‑4‑苯基‑哌啶‑4‑基甲基]‑N‑异丁基‑4‑{[(哌啶‑4‑基甲基)‑氨基]‑甲基}‑苯磺酰胺及其药学上可接受的盐。这些化合物可以在治疗疾病，例如阿尔茨海默病或肾衰竭中是有用的。本发明还涉及用于制备式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的方法、包含这样的化合物的药物组合物、以及这样的化合物和/或药物组合物在治疗某些疾病中的用途。

Description

哌啶衍生物及其使用方法

发明领域

本发明涉及化合物，所述化合物是晚期糖基化终产物受体(receptor foradvanced glycation endproduct)(RAGE)与其生理学配体例如晚期糖基化终产物(AGE)、S100/钙粒蛋白/EN-RAGE、β-淀粉样蛋白以及神经轴突生长因子(amphoterin)之间相互作用的抑制剂，用于治疗RAGE介导的疾病。

发明背景

晚期糖基化终产物受体(RAGE)是细胞表面分子的免疫球蛋白超家族的成员。RAGE在大多数组织中表达，并且特别地，在胚胎发生(embryogenesis)期间在皮层神经元中被发现。增加的RAGE水平还在老化组织(aging tissue)和糖尿病视网膜(diabetic retina)、脉管系统和肾中被发现。RAGE在不同组织和器官中的活化导致许多病理生理学后果。RAGE已经涉及多种状况，包括：急性和慢性炎症、糖尿病晚期并发症的发展例如增加的血管通透性(vascular permeability)、肾病变、动脉粥样硬化以及视网膜病变。RAGE还已经涉及阿尔茨海默病、勃起功能障碍以及肿瘤侵袭和转移。

晚期糖基化终产物(AGE)已经涉及多种紊乱，包括与糖尿病相关的并发症和正常老化。蛋白质或脂质与醛糖的温育导致蛋白质上的氨基基团的非酶促糖基化和氧化以形成阿马多利(Amadori)加合物。随着时间的推移，加合物经历另外的重排、脱水以及与其他蛋白质交联以形成被称为AGE的复合物。促进AGE的形成的因素包括延迟的蛋白质周转(protein turnover)(例如如在淀粉样变性中)、具有高赖氨酸含量的大分子的累积和高血糖水平(例如如在糖尿病中)。

AGE显示出与微脉管系统(microvasculature)的内皮细胞、单核细胞和巨噬细胞、平滑肌细胞、系膜细胞和神经元上的细胞表面受体的特异性和饱和性结合。

除了AGE之外，其他化合物还可以与RAGE结合，并抑制生理学配体与RAGE的相互作用。在正常发育中，RAGE与神经轴突生长因子相互作用，所述神经轴突生长因子是介导培养的胚胎神经元中的神经突起(neurite)生长的多肽。RAGE还已经被示出与β-淀粉样蛋白(β-amyloid)相互作用。

配体例如AGE、S100/钙粒蛋白/EN-RAGE、β-淀粉样蛋白、CML(Nε-羧甲基赖氨酸)和神经轴突生长因子与RAGE的结合已被示出改变多种基因的表达。例如，在许多细胞类型中，RAGE和其配体之间的相互作用产生氧化应激，这从而导致自由基敏感转录因子NF-κB的活化，以及NF-κB调节基因例如细胞因子IL-1β、TNF-α及类似基因的活化。

此外，若干其他调节通路，例如涉及p21ras、MAP激酶、ERK1和ERK2的调节通路，已经被示出通过使AGE和其他配体与RAGE结合来活化。事实上，RAGE本身的转录至少部分地由NF-κB调节。因此，上升(ascending)且通常有害的螺旋由通过配体结合引发的正反馈回路来推动。抑制生理学配体与RAGE的结合提供由过量浓度的AGE和RAGE的其他配体引起的病理生理学变化的下调，如上文描述的。

因此，对于开发抑制生理学配体与RAGE的结合的化合物存在需求。

发明概述

本发明涉及式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，如本文描述的。式(I)的化合物被称为N-[1-(1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰基)-4-苯基-哌啶-4-基甲基]-N-异丁基-4-{[(哌啶-4-基甲基)-氨基]-甲基}-苯磺酰胺。

本发明还提供了用于制备式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的方法、包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物；以及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在治疗由RAGE介导的疾病中的使用方法。本发明还提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的用途。本发明还提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗下文列出的状况中的一种或更多种的药物中的用途。

式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可用作晚期糖基化终产物受体(RAGE)与配体例如晚期糖基化终产物(AGE)、S100/钙粒蛋白/EN-RAGE、β-淀粉样蛋白和神经轴突生长因子的相互作用的抑制剂。该化合物还可以在治疗人类中的可以响应于RAGE的抑制的多种疾病或状况中是有用的。这样的疾病或状况包括但不限于急性和慢性炎症、糖尿病晚期并发症的发展例如增加的血管通透性、肾病变、动脉粥样硬化和视网膜病变、阿尔茨海默病和相关紊乱的发展、勃起功能障碍、肿瘤侵袭和转移以及骨质疏松症。

本发明的范围还包括如本文描述的多个方面、实施方案和优选(preference)的组合。

发明详述

本发明提供了式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物的盐酸盐。在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物的二盐酸盐。

本发明的另一个实施方案包括药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

本发明的一个实施方案包括用于治疗RAGE介导的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的用途。本发明还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗下文列出的状况中的一种或更多种的药物中的用途。另一个实施方案包括式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于制造用于治疗RAGE介导的疾病的药物的用途。又另外的实施方案包括式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗RAGE介导的疾病中使用。在一个实施方案中，疾病是阿尔茨海默病。在一个实施方案中，这样的治疗改变阿尔茨海默病的表现(presentation)。在另一个实施方案中，这样的治疗改进患有轻度至中度阿尔茨海默病的受试者的认知表现。

如本文使用的术语“药学上可接受的盐”指的是式(I)的化合物的无毒盐，所述盐通常通过使游离碱与合适的有机酸或无机酸反应或者通过使酸与合适的有机碱或无机碱反应来制备。代表性的盐包括以下盐:乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、乙二胺四乙酸钙、右旋樟脑磺酸盐(Camsylate)、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐(Estolate)、乙磺酸盐(Esylate)、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰基阿散酸盐(Glycollylarsanilate)、己基间苯二酚盐、海巴胺(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、马来酸单钾、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺(N-methyl glucamine)、草酸盐、双羟萘酸盐(Pamoate)(恩波酸盐(Embonate))、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、钾盐、水杨酸盐、钠盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐(Subacetate)、琥珀酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐(Teoclate)、甲苯磺酸盐、三乙基碘(Triethiodide)、三甲铵以及戊酸盐。当存在酸性取代基，例如-COOH时，可以形成铵盐、吗啉鎓盐、钠盐、钾盐、钡盐、钙盐及类似盐，用作剂型。当存在碱性基团例如氨基或碱性杂芳基基团例如吡啶基时，可以形成酸式盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、三氟乙酸盐、三氯乙酸盐、乙酸盐、草酸盐、马来酸盐、丙酮酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、肉桂酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苦味酸盐及类似盐，并且包括与Journal of Pharmaceutical Science，第66卷，2(1977)第1-19页中列出的药学上可接受的盐有关的酸。

除非另外陈述，否则本文描述的结构还意指包括仅在一个或更多个同位素富集原子的存在方面不同的化合物。例如，具有本发明结构但用氘或氚替代氢原子、或者用¹³C-富集的碳或¹⁴C-富集的碳替代碳原子的化合物在本发明的范围内。

式(I)的化合物或其药学上可接受的盐抑制RAGE与其生理学配体的相互作用的能力用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，使用类似于在以下实施例部分中描述的测定来确定。另外，被用于制备式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的中间体还可以对于抑制RAGE与其生理学配体的相互作用是有用的。

本发明还提供了药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。术语“药物组合物”在本文中被用于表示可以以包含常规的无毒载体、稀释剂、佐剂、媒介物和类似物的单位剂量制剂，例如口服地、局部地、肠胃外地、通过吸入喷雾或直肠地被施用至哺乳动物宿主的组合物。如本文使用的术语“肠胃外的”包括皮下注射、静脉内注射、肌内注射、脑池内注射或通过输注技术。

包含本发明的化合物的药物组合物可以呈适合于口服用途的形式，例如作为片剂、锭剂(troche)、锭剂(lozenge)、水性或油性悬浮液、可分散性粉末或颗粒、乳液、硬胶囊或软胶囊、或糖浆或酏剂。意图用于口服用途的组合物可以根据任何已知的方法来制备，并且这样的组合物可以包含选自由以下组成的组的一种或更多种剂：甜味剂、调味剂、着色剂以及防腐剂，以便提供药学上精致且适口的(palatable)制品(preparation)。片剂可以包含与适合于制造片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂掺合的活性成分。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是未包衣的或者它们可以通过已知的技术包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收并且从而在较长的时间段内提供持续作用。例如，可以采用例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的延时材料。

用于口服用途的制剂还可以作为其中活性成分与例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土的惰性固体稀释剂混合的硬明胶胶囊来呈现，或者作为其中活性成分与水或例如花生油、液体石蜡或橄榄油的油介质混合的软明胶胶囊来呈现。

水性悬浮液可以包含与适合于制造水性悬浮液的赋形剂掺合的活性化合物。这样的赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂可以是天然存在的磷脂例如卵磷脂，或环氧烷与脂肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪族醇的缩合产物例如十七亚乙基氧基鲸蜡醇(heptadecaethyl-eneoxycetanol)，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物例如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐(hexitol anhydride)的偏酯的缩合产物例如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯(polyethylene sorbitan monooleate)。水性悬浮液还可以包含一种或更多种着色剂、一种或更多种调味剂以及一种或更多种甜味剂例如蔗糖或糖精。

油性悬浮液可以通过将活性成分悬浮在植物油例如落花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中，或悬浮在矿物油例如液体石蜡中来配制。油性悬浮液可以包含增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以添加甜味剂例如上文陈述的那些、和调味剂，以提供适口的口服制品。这些组合物可以通过添加抗氧化剂例如抗坏血酸来保存。

适合于通过添加水来制备水性悬浮液的可分散性粉末和颗粒提供与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或更多种防腐剂掺合的活性化合物。合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂由上文已经提及的那些来例示。还可以存在另外的赋形剂，例如甜味剂、调味剂以及着色剂。

本发明的药物组合物还可以呈水包油乳液的形式。油相可以是植物油例如橄榄油或落花生油，或矿物油例如液体石蜡，或其混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的树胶，例如阿拉伯胶或黄蓍胶；天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂；和衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如脱水山梨糖醇单油酸酯；以及所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。乳液还可以包含甜味剂和调味剂。

糖浆和酏剂可以用例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖的甜味剂来配制。这样的制剂还可以包含缓和剂、防腐剂和调味剂以及着色剂。药物组合物可以呈无菌的可注射的水性悬浮液或油性悬浮液的形式。此悬浮液可以根据已知的方法使用上文描述的合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制。无菌的可注射的制品还可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌的可注射的溶液或悬浮液，例如作为在1,3-丁二醇中的溶液。在可以被采用的可接受的媒介物和溶剂中的是水、林格氏溶液、和等渗氯化钠溶液。此外，无菌的固定油被方便地用作溶剂或悬浮介质。为了此目的，可以采用任何柔和的固定油(bland fixed oil)，使用合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸例如油酸应用于制备注射剂 (injectables)。

组合物还可以呈用于直肠施用本发明的化合物的栓剂的形式。这些组合物可以通过将药物与合适的非刺激性赋形剂混合来制备，所述非刺激性赋形剂在常温是固体，但在直肠温度是液体，并且因此将在直肠中熔化以释放药物。例如，这样的材料包括可可脂和聚乙二醇。

对于局部用途，预期包含本发明的化合物的霜剂、软膏、胶状物(jelly)、溶液或悬浮液、洗剂、眼膏和滴眼剂或滴耳剂、浸渍敷料和气溶胶等。这些局部制剂可以包含适当的常规添加剂例如防腐剂、帮助药物渗透的溶剂以及软膏和霜剂中的润肤剂。该制剂还可以包含相容的常规载体，例如霜剂或软膏基质以及用于洗剂的乙醇或油醇。这样的载体可以以从制剂的约.1％至多达约99％存在。更通常地，它们将形成制剂的多达约80％。为了本申请的目的，局部应用将包括漱口液(mouth wash)和漱口剂(gargle)。

本发明的化合物还可以与作为可靶向药物载体(targetable drug carrier)的可溶性聚合物偶联。这样的聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚(polyhydroxyethylaspartamidephenol)或被棕榈酰基残基取代的聚环氧乙烷聚赖氨酸(polyethyleneoxidepolylysine)。此外，本发明的化合物可以被偶联至可用于实现药物的受控释放的一类可生物降解的聚合物，例如聚乳酸、聚ε己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯以及水凝胶的交联的或两亲性嵌段共聚物。

对于通过吸入的施用，在使用合适的推进剂(propellant)例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、四氟乙烷、七氟丙烷、二氧化碳或其他合适的气体的情况下，根据本发明的化合物以来自加压包或喷雾器的气溶胶喷雾呈现的形式被便利地递送。在加压的气溶胶的情况下，剂量单位可以通过提供阀以递送计量的量来确定。用于在吸入器或吹入器中使用的胶囊和药筒(cartridge)，例如明胶的胶囊和药筒，可以被配制为包含本发明的化合物和合适的粉末基质例如乳糖或淀粉的粉末混合物。

拮抗RAGE与其生理学配体的相互作用的化合物潜在地可用于治疗可以响应于RAGE受体的抑制的疾病或状况。

本发明提供治疗的方法，所述方法包括：向受试者施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在此实施方案的实施方案中，本发明提供了用于抑制RAGE与其生理学配体的相互作用的方法。在此实施方案的另一个实施方案中，本发明提供了用于治疗选自由以下组成的组的疾病状态的方法：急性和慢性炎症，包括皮肤炎症，例如银屑病、异位性皮肤炎、与器官、组织或细胞移植相关的炎症，和肺部炎症，包括哮喘和慢性阻塞性肺病；败血症；糖尿病；糖尿病相关并发症；肾衰竭；与糖尿病相关的高脂血症动脉粥样硬化；神经元细胞毒性；再狭窄；唐氏综合征；与头部创伤相关的痴呆症、肌萎缩性侧索硬化症、多发性硬化症、淀粉样变性、自身免疫疾病、伤口愈合、牙周病、神经病变、神经元变性、血管通透性、肾病变、动脉粥样硬化、视网膜病变、阿尔兹海默病、勃起功能障碍、肿瘤侵袭和/或转移以及骨质疏松症，所述方法包括向受试者施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

在另一个实施方案中，受试者患有糖尿病。在另一个实施方案中，受试者患有1型糖尿病(T1D)。在另一个实施方案中，受试者患有2型糖尿病(T2D)。

如上文指出的，本发明的化合物可以在治疗糖尿病的并发症中是有用的。已经示出，在高血糖症和与全身或局部氧化应激相关的其他状况的存在下，最终导致晚期糖基化终产物(AGE)的形成的大分子的非酶促糖氧化(glycoxidation)在肾衰竭中在炎症的部位处被增强(Dyer,D.等人，J.Clin.Invest.,91:2463-2469(1993)；Reddy,S.等人，Biochem.,34:10872-10878(1995)；Dyer,D.等人，J.Biol.Chem.,266:11654-11660(1991)；Degenhardt,T.等人，Cell Mol.Biol.,44:1139-1145(1998))。AGE在脉管系统中的累积可以集中地发生，如在具有透析有关的淀粉样变性的患者中发现的包含AGE-β2-微球蛋白的关节淀粉样蛋白中(Miyata,T.等人，J.Clin.Invest.,92:1243-1252(1993)；Miyata,T.等人，J.Clin.Invest.,98:1088-1094(1996))，或通常如由具有糖尿病的患者的脉管系统和组织例示的(Schmidt,A-M.等人，Nature Med.,1:1002-1004(1995))。具有糖尿病的患者中的AGE随着时间的进展性累积表明，内源性清除机制不能在AGE沉积的部位处有效地起作用。这样的累积的AGE具有通过许多机制改变细胞性质的能力。尽管RAGE在正常的组织和脉管系统中以低水平表达，但是在其中受体的配体累积的环境中，已经示出RAGE变得被上调(Li,J.等人，J.Biol.Chem.,272:16498-16506(1997)；Li,J.等人，J.Biol.Chem.,273:30870-30878(1998)；Tanaka,N.等人，J.Biol.Chem,.275:25781-25790(2000))。RAGE表达在糖尿病患者的脉管系统中的内皮细胞、平滑肌细胞和浸润单核吞噬细胞中增加。另外，细胞培养的研究已经证明，AGE-RAGE相互作用造成血管体内平衡中重要的细胞性质的变化。

另外，如上文指出的，本发明的化合物可以在治疗淀粉样变性和/或阿尔茨海默病中是有用的。不考虑亚单位的组成(淀粉样β-肽、Aβ、胰淀素(amylin)、血清淀粉样蛋白A、朊病毒衍生的肽)，RAGE似乎是结合β-折叠原纤维材料的细胞表面受体(Yan,S.-D.等人，Nature,382:685-691(1996)；Yan,S-D.等人，Nat.Med.,6:643-651(2000))。淀粉样蛋白的沉积已经被示出导致RAGE的增强的表达。例如，在具有阿尔茨海默病(AD)的患者的脑中，RAGE表达在神经元和神经胶质(glia)中增加(Yan,S.-D.等人，Nature 382:685-691(1996))。相对于小神经胶质(microglia)，Aβ与RAGE的相互作用的结果对于神经元似乎相当不同。尽管小神经胶质由于Aβ-RAGE相互作用的结果被活化，如通过细胞因子的增加的运动性(motility)和表达所反映的，但早期RAGE介导的神经元活化在后期被细胞毒性代替。对于RAGE在Aβ的细胞相互作用中的作用的另外的证据涉及当受体被阻断时抑制Aβ诱导的脑血管收缩以及肽穿过血脑屏障转移至脑实质(brain parenchyma)(Kumar,S.等人，Neurosci.Program,第141页(2000))。RAGE-淀粉样蛋白相互作用的抑制已经被示出降低细胞RAGE和细胞应激标志物的表达(以及NF-kB活化)，并减少淀粉样蛋白沉积(Yan,S-D.等人，Nat.Med.,6:643-651(2000))，这表明了RAGE-淀粉样蛋白相互作用在富含淀粉样蛋白的环境中(甚至在早期)的细胞性质的扰动以及在淀粉样蛋白累积两者中的作用。

在使用阿尔茨海默病的小鼠模型的其他研究中，已经示出RAGE拮抗剂可以逆转斑块的形成和认知的损失。在美国专利公布第US 2005/0026811号中，小分子RAGE拮抗剂被用于抑制Aβ沉积的进展，并减少阿尔茨海默病小鼠中的预先存在的斑块的体积(US 2005/0026811在第581-590段处)。

另外，在细胞测定和动物研究两者中已经示出，RAGE介导循环的Aβ穿过血脑屏障(BBB)的转胞吞作用(transcytosis)。这样的增加的Aβ的转胞吞作用导致神经元氧化应激和脑血流量的持续减少。RAGE的效果可以通过RAGE调节剂(例如抗RAGE抗体或sRAGE)抑制(参见例如，Mackic等人，J.Clin.Invest.,102:734-743(1998)；还参见Kumar等人，Neurosci.,Program，第141页(2000))。这些发现通过另外的研究来证实(参见例如美国专利第6,825,164号在第17栏第48行至第18栏第43行；Deane等人，Nature Medicine,9:907-913(2003))。减少的脑灌注可以促进缺血性病变，其可以与Aβ协同作用以加剧痴呆症。另外，不足的脑血流量可以改变穿过血脑屏障的Aβ运输，从而减小Aβ清除率并促进Aβ在脑中的累积(参见Girouard和Iadecola,J.Appl.Physiol.,100,328-335(2006)，在第332页)。因此，由RAGE拮抗剂促进的脑血流量的增加可以减少阿尔茨海默病的症状或延迟阿尔茨海默病的发展的开始，或两者。例如，RAGE拮抗剂可以延迟或减慢认知表现的损失，或者可以改进患有阿尔兹海默类型的痴呆症的受试者的认知表现，或两者。

如上文指出的，本发明的化合物可以在治疗炎症中是有用的。例如，S100/钙粒蛋白已经被示出包含紧密相关的钙结合多肽的家族，其特征为由连接肽连接的两个EF-手区(EF-hand region)(Schafer,B.等人，TIBS,21:134-140(1996)；Zimmer,D.等人，BrainRes.Bull.,37:417-429(1995)；Rammes,A.等人，J.Biol.Chem.,272:9496-9502(1997)；Lugering,N.等人，Eur.J.Clin.Invest.,25:659-664(1995))。尽管它们缺少信号肽，但早就已经已知的是，S100/钙粒蛋白获得进入细胞外空间，特别是在慢性免疫/炎症性响应的部位处，如在囊性纤维化和类风湿性关节炎中。RAGE是用于S100/钙粒蛋白家族的许多成员的受体，介导它们对例如淋巴细胞和单核吞噬细胞的细胞的促炎作用。另外，对于延迟型超敏响应、IL-10缺陷型小鼠(IL-10null mice)中的结肠炎、胶原诱导的关节炎以及实验性自身免疫性脑炎模型的研究表明，RAGE-配体相互作用(可能与S100/钙粒蛋白)在炎症性级联(inflammatory cascade)中具有近端作用，如涉及炎症性疾病，例如但不限于类风湿性关节炎和多发性硬化症。

RAGE还涉及皮肤的炎症性疾病，例如但不限于异位性皮肤炎、湿疹和银屑病。特别地，银屑病的特征为发炎的发痒病变。银屑病可以伴有类似于在类风湿性关节炎中看到的那些的关节病变症状。关于银屑病是多基因自身免疫紊乱存在相当多的证据。银屑病病变富含细胞因子，特别是IL-1和IL-8，两者为有效的促炎介质。特别地，IL-8是用于中性粒细胞的趋化因子；中性粒细胞还已知合成并分泌S100蛋白，S100蛋白是RAGE的配体中的一种，涉及免疫和炎症性响应的传播。牛皮癣素(Psoriasin)(S100A7)，S100基因家族的新成员，是从银屑病皮肤中分离的分泌蛋白。Semprini等人(Hum.Genet.2002Oct,111(4-5),310-3)已经示出银屑病遗传易感性与S100蛋白在皮肤中的明显过度表达的联系。因此，RAGE的调节剂将被预期调节银屑病中的免疫响应。

如上文指出的，本发明的化合物可以在治疗肿瘤和肿瘤转移中是有用的。例如，神经轴突生长因子是高迁移率的组I非组蛋白染色体DNA结合蛋白(high mobility group Inonhistone chromosomal DNA binding protein)(Rauvala,H.等人，J.Biol.Chem.,262:16625-16635(1987)；Parkikinen,J.等人，J.Biol.Chem.268:19726-19738(1993))，其已经被示出与RAGE相互作用。已经示出神经轴突生长因子促进神经突起生长，以及用作用于在纤溶系统中装配蛋白酶复合物的表面(还已知有助于细胞迁移)。此外，阻断RAGE的局部肿瘤生长抑制效果已经在原发肿瘤模型(C6胶质瘤)、Lewis肺转移模型(Taguchi,A.等人，Nature 405:354-360(2000))中被观察到，并在表达v-Ha-ras转基因的小鼠中自发地出现乳头瘤(papillomas)(Leder,A.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.,87:9178-9182(1990))。

气道炎症在哮喘的发病机制中非常重要。这样的炎症可以引起显著的加剧并增加哮喘严重程度，以及是哮喘状态的衰退期(decline)的主要因素。在哮喘的严重加剧中，存在涉及中性粒细胞和嗜酸性粒细胞累积和活化的强烈的、机械上非均质的炎症性响应。中性粒细胞是S100蛋白的重要来源，所述S100蛋白是涉及免疫响应和炎症的传播的RAGE的关键配体。因此，RAGE的调节剂将被预期在哮喘的治疗中具有治疗价值。另外，由S100-RAGE相互作用驱动的肺中的免疫响应的传播步骤将被预期导致炎症性细胞例如中性粒细胞的活化和/或募集，所述炎症性细胞在慢性阻塞性肺病例如肺气肿中是损伤蛋白酶的重要来源。因此，RAGE调节剂将被预期在慢性阻塞性肺病的治疗中具有潜力。

如本文使用的，措辞“治疗有效量”将意指将引发正在寻求的受试者的治疗响应的药物或药剂的量。

在这些方法中，可以影响构成治疗有效量的因素包括但不限于受试者的尺寸和重量、治疗剂的生物降解性、治疗剂的活性、受影响区域的尺寸及其生物利用度。该措辞包括相比于未曾接受这样的量的对应的受试者，导致改进的治疗、治愈或副作用的减轻，或疾病或紊乱的进展速率的减小的量。

在另一个实施方案中，本发明提供了用于治疗再狭窄的方法，所述方法包括：向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

在实施方案中，本发明提供了用于治疗急性或慢性炎症的方法，所述方法包括：向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

在实施方案中，本发明提供了用于治疗与头部创伤相关的痴呆症的方法，所述方法包括：向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在实施方案中，受试者的认知表现被改进。在另一个实施方案中，受试者的认知表现被保持。在另一个实施方案中，受试者的认知表现的损失速率被减慢。

在实施方案中，本发明提供了用于治疗阿尔兹海默病的方法，所述方法包括：向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。关于阿尔茨海默病，本发明被认为可用于改变潜在的痴呆化(dementing)过程的进程。阿尔茨海默病可以通过NINCDS和DSM标准、简短精神状态检查(Mini-Mental State Examination)和特定限制内的临床痴呆评定量表(Clinical Dementia Rating)来诊断。本发明的一个实施方案包括改进认知表现，包括施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。如本领域已知的，认知表现可以用阿尔茨海默病评估量表(Alzheimer’s Disease Assessment Scale)(ADAS-cog)的认知子量表(cognitive subscale)来评估，其在0标度至70标度上对认知功能评分，其中较高的评分指示更大的认知损伤。因此，评分的降低证实认知改进。本发明的一个实施方案包括向受试者施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，以降低需要这样的降低的受试者的ADAS-cog评分。这样的受试者可以是患有阿尔茨海默型痴呆症、轻度至中度阿尔茨海默病或重度阿尔茨海默病的人类。

此外，阿尔茨海默病的进展还可以在人类中通过四个功能区的检查来评估：日常生活的一般状态(General)、认知、行为和活动。这样的评估可以使用临床医师访视印象变化(Clinician’s Interview Based Impression of Change)(CIBIC或CIBIC+)来进行。本发明的一个实施方案包括受试者的功能的改进，包括施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，受试者的功能是日常生活的一般状态、认知、行为和活动中的一种或更多种。

在另一个实施方案中，本发明提供了延迟1型糖尿病或2型糖尿病的发作的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。该方法可以包括在1型糖尿病的发作之前或在2型糖尿病的发作之前施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

在另一个实施方案中，本发明提供了延迟1型糖尿病或2型糖尿病的发作的方法，所述方法包括：向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，以便保持胰腺功能。胰腺功能可以包括保持β-细胞分泌胰岛素的能力。该方法可以包括在1型糖尿病的发作之前或在2型糖尿病的发作之前施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

在实施方案中，本发明提供了用于改进糖尿病受试者中的伤口愈合的方法，所述方法包括：向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，以便相对于未处理的伤口，改进受试者中的伤口愈合的速率。

在实施方案中，本发明提供了用于在受试者中治疗与器官、组织或多个细胞从第一部位移植到第二部位相关的炎症的方法，所述方法包括：向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，以便降低受试者中的炎症。在实施方案中，第一部位和第二部位在不同的受试者中。在另一个实施方案中，第一部位和第二部位在相同的受试者中。在另一个实施方案中，移植的器官、细胞或组织包括胰腺、皮肤、肝、肾、心脏、骨髓、血液、骨、肌肉、动脉、静脉、软骨、甲状腺、神经系统或干细胞的细胞或组织。

在实施方案中，本发明提供了用于减少患有T1D的受试者中的肾损伤的方法，所述方法包括：向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，以便减少受试者中的肾损伤。

在另一个实施方案中，单独地或与一种或更多种已知治疗剂组合地使用至少一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

如本文使用的，措辞“受试者”指的是哺乳动物受试者，并且在一组实施方案中，指的是患有上述疾病或疾病状态中的一种或更多种或者处于此类疾病或疾病状态的风险的人类。

在本发明的另外的实施方案中，本发明的RAGE抑制剂可以在用其他已知的治疗剂的辅助治疗性治疗或组合治疗性治疗中使用。

以下是可以与本发明的RAGE抑制剂组合使用的佐剂和另外的治疗剂的非详尽的清单：

抗癌剂的药理学分类：

1.烷基化剂：环磷酰胺、亚硝基脲、卡铂、顺铂、丙卡巴肼

2.抗生素：博来霉素、柔红霉素、多柔比星

3.抗代谢物：甲氨蝶呤、阿糖胞苷、氟尿嘧啶

4.植物生物碱：长春碱、长春新碱、依托泊苷、紫杉醇，

5.激素：他莫昔芬、醋酸奥曲肽、非那雄胺、氟他胺

6.生物响应改性剂：干扰素、白细胞介素、抗肿瘤抗体

用于类风湿性关节炎(炎症)的治疗的药理学分类

1.镇痛药：阿司匹林

2.NSAID(非甾体抗炎药)：布洛芬、萘普生、双氯芬酸

3.DMARD(疾病改性抗风湿药(Disease-Modifying Antirheumatic drug))：甲氨蝶呤、金制品、羟基氯喹、柳氮磺吡啶

4.生物响应改性剂，DMARD：依那西普、英夫利昔单抗

糖皮质激素

用于糖尿病的治疗的药理学分类

1.磺酰脲：甲苯磺丁脲、妥拉磺脲、格列本脲、格列吡嗪

2.双胍：二甲双胍

3.混杂口服剂(Miscellaneous oral agent)：阿卡波糖、曲格列酮(Troglitazone)

4.胰岛素

用于阿尔茨海默病的治疗的药理学分类

1.胆碱酯酶抑制剂：他克林、多奈哌齐

2.抗精神病药：氟哌啶醇、硫醚嗪

3.抗抑郁剂：地昔帕明、氟西汀、曲唑酮、帕罗西汀

4.抗惊厥剂：卡马西平、丙戊酸

5.NMDA受体拮抗剂：美金刚

在另外的实施方案中，本发明提供了治疗RAGE介导的疾病的方法，该方法包括向受试者施用与治疗剂组合的治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述治疗剂选自由以下组成的组：烷基化剂、抗代谢物、植物生物碱、抗生素、激素、生物响应改性剂、镇痛药、NSAID、DMARD、糖皮质激素、磺酰脲、双胍、胰岛素、胆碱酯酶抑制剂、抗精神病药、抗抑郁剂、抗惊厥剂以及NMDA受体拮抗剂。

在另外的实施方案中，本发明提供了如上文描述的本发明的药物组合物，所述药物组合物还包含选自由以下组成的组的一种或更多种治疗剂：烷基化剂、抗代谢物、植物生物碱、抗生素、激素、生物响应改性剂、镇痛药、NSAID、DMARD、糖皮质激素、磺酰脲、双胍、胰岛素、胆碱酯酶抑制剂、抗精神病药、抗抑郁剂、抗惊厥剂以及NMDA受体拮抗剂。

这样的其他治疗剂可以通过与式(I)的化合物或其药学上可接受的盐相同的途径或不同的途径来施用。在式(I)的化合物或其药学上可接受的盐与另一种治疗剂组合使用的情况下，该组合物可以包含与其他治疗剂组合的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。可选择地，在使用单独的剂量制剂的情况下，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和一种或更多种另外的治疗剂可以在基本上相同的时间(例如同时)或分开交错的时间(例如顺序地)施用。

一般来说，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以以从约0.003mg/kg待被治疗的受试者的体重至约500mg/kg待被治疗的受试者的体重的剂量水平来施用。在实施方案中，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以以在约0.003mg/kg体重/天和约200mg/kg体重/天之间的剂量范围来施用。在实施方案中，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以以在约0.1mg/kg体重/天至约100mg/kg体重/天之间或者在约0.05mg/kg体重/天至约2mg/kg体重/天之间的剂量范围来施用。可以与载体材料组合以产生单个剂量的活性成分的量可以取决于被治疗的宿主和特定的施用模式而变化。例如，意图口服施用至人类的制剂可以包含1mg至2g的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，与合适且常规的量的载体材料，该量可以从总组合物的约5％至95％变化。意图局部施用至皮肤的剂型可以以0.1％至99％的化合物与局部赋形剂比率来制备。意图吸入施用.01mg至200mg的化合物的剂型可以在合适的载体中制备以递送吸入剂量的该化合物。全身递送的化合物的剂量单位形式通常可以包含在从约5mg至约500mg的活性成分之间或从约1mg至约500mg的活性成分之间。此剂量可以由临床医师基于待被治疗的受试者的具体临床状况来个体化。因此，将理解，用于任何特定受试者的特定剂量水平将取决于多种因素，包括采用的特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、施用途径、排泄率、药物组合、受影响区域的尺寸以及经历疗法的特定疾病的严重程度。

本发明的化合物可以通过本领域普通技术人员熟知的多种方法来制成，所述方法包括下文实施例中陈述的方法。

在另一个实施方案中，本发明还提供了用于合成可用作制备本发明的化合物中的中间体的化合物的方法连同它们的制备方法。

虽然已经参考某些实施方案来描述和例证本发明，但是本发明还提供可以使用如上文实施方案的任何中描述的要素的任何组合或子集(subset)的其他实施方案。

实施例

LC-MS数据使用平行MUX^TM系统上的梯度洗脱来获得，所述平行MUX^TM系统运行四个Waters 1525二元HPLC泵，装配有Mux-UV 2488多通道UV-Vis检测器(在215nM和254nM处记录)和Leap Technologies HTS PAL自动取样器，使用Sepax GP-C18，4.6×50mm；5微米粒度柱。通常，三分钟梯度(three minute gradient)从25％B(97.5％乙腈、2.5％水、0.05％TFA)和75％A(97.5％水、2.5％乙腈、0.05％TFA)运行至100％B。该系统与使用电喷雾离子化的Waters Micromass ZQ质谱仪接合。采用MassLynx软件。除非另外指出，否则所有MS数据都以正模式获得。对于M+离子，报告的m/z数据通常在约±1内是准确的。

¹H NMR数据在Varian Mercury 400MHz光谱仪上获得，并且使用残余的溶剂质子信号(例如，CDCl₃中的残余的CHCl₃)或TMS信号作为内部参考来提及化学位移。在某些实验中使用微波加热程序，并且在这些情况下，使用DISCOVER微波合成系统(CEM,Matthews,NC,USA)，这包括在升高的温度，使用加压的玻璃反应容器。

缩写

以下是说明书中使用的一些常用缩写的定义。说明书还可以采用其他缩写，所述其他缩写的含义在相关领域中是熟知的。

d＝天

DCM＝二氯甲烷

DMAP＝4-(二甲基氨基)-吡啶

g＝克

h＝小时

Hz＝赫兹

L＝升

LC＝液相色谱法

LCMS、LC-MS＝液相色谱法-质谱法

M＝摩尔浓度(molar)

m/z＝质荷比(Mass to charge ratio)

mg＝毫克

min＝分钟

mL＝毫升

mM＝毫摩尔浓度(millimolar)

mmol＝毫摩尔

mol＝摩尔

MS＝质谱法

N＝当量浓度(normal)

NMP＝N-甲基吡咯烷酮

NMR＝核磁共振光谱法

ppm＝百万分率

rt或RT＝室温

TFA＝三氟乙酸

THF＝四氢呋喃

一般程序

以下程序提供了用于进行可用于制备式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的合成的说明。这些程序意图在本质上是一般性的。根据技术人员的知识，某些溶剂的替代、规模的调整及类似的是可能的。当被并入到式(I)的化合物或中间体的合成中时，一般程序可以已经被调节至较小或较大的规模。

程序A：酰胺键的还原

将在THF(1mL)中的酰胺(1mmol)的溶液和硼烷-THF络合物(1.44mmol)放入(takein)微波反应容器中。在没有连续冷却的情况下，将反应以300瓦加热至140℃持续12min。在冷却后，反应通过添加10mL甲醇来猝灭，并且搅拌持续30min。将溶剂在减压下蒸发，并且将粗产物与N,N-二甲基乙胺(10mmol)一起搅拌持续1h。在减压下蒸发胺后，粗产物被吸收在乙酸乙酯(20mL)中，并用水(2×5mL)、盐水(2×5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且在减压下浓缩，以提供产物。粗产物通过硅胶快速柱色谱法来纯化。

程序B：磺酰胺的合成

在N₂气氛下，向在DCM(1mL)中的胺(1mmol)的搅拌的溶液中添加三乙胺(3mmol)，随后是磺酰氯(1.2mmol至1.5mmol)。向其中添加催化量的DMAP(0.1mmol)。将所得的反应在室温搅拌持续2h。反应混合物用DCM(10mL)稀释，用水(2×5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩。粗制的磺酰胺通过硅胶快速柱色谱法来纯化。

程序C：除去BOC基团

向在DCM(1mL)中的氨基甲酸酯(1mmol)的搅拌的溶液中添加在二噁烷中的4N HCl(5mL)。将反应在室温搅拌持续30min。将溶剂在减压下除去。残余物用乙醚研磨，并且将沉淀的固体过滤并在真空下干燥。

程序D：醛或酮的还原胺化

将在DCM(5ml)中的醛或酮(1mmol)和胺(1.5mmol)的混合物在室温搅拌持续15min。向其中一次性地添加NaBH(OAc)₃(5mmol)，并将反应混合物搅拌，直到所有羰基衍生物被消耗，如通过LCMS判断的。反应用饱和的NaHCO₃溶液(10ml)猝灭，并搅拌持续30min。将有机层分离并且水层用DCM(5mL)提取。合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩。粗制的胺通过硅胶快速柱色谱法来纯化。

程序E：1-N-取代的3,5-二甲基吡唑的合成

将2,4-戊二酮(83mmol)和烷基肼或芳基肼盐酸盐(66.4mmol)的混合物放入到在80ml微波反应容器中的乙醇(20mL)中。向此溶液中添加对甲苯磺酸一水合物(3.32mmol)，并且在没有连续冷却的情况下，将反应在微波反应器中以300瓦在150℃加热持续12min。将溶剂蒸发，并且残余物通过硅胶快速柱色谱法来纯化。

程序F：1-N-取代的3,5-二甲基吡唑的氯磺化

在N₂气氛下，在0℃-5℃(冰浴)，向在DCM(20mL)中的N-取代的-3,5-二甲基-1H-吡唑(100mmol)的搅拌的溶液中逐滴地添加氯磺酸(900mmol)。将冷浴移除。允许反应混合物到达室温，然后加热至90℃持续2h。在冷却至室温后，将反应小心地倾倒在300g的冰上(注意：氯磺酸与水剧烈地反应)。混合物用乙酸乙酯或DCM(2×200mL)提取。合并的有机层用水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩。残余物通过硅胶快速柱色谱法来纯化。

中间体的制备

在制备式(I)的化合物或其盐中，合成某些中间体化合物可以是有用的。提供用于这些中间体的合成程序专门用于例证的目的。如技术人员将认识到的，下文中的程序可以不是通过其制备这样的中间体的唯一手段。

中间体1：1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰氯

步骤1：使用程序E，由环己基肼盐酸盐和2,4-戊二酮来制备1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑。产物使用在己烷中的12％乙酸乙酯在硅胶上纯化。

步骤2：使用程序F，由1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑来制备1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰氯(中间体1)。产物使用在己烷中的10％乙酸乙酯在硅胶上纯化。

中间体2：4-甲酰基-N-异丁基-N-(4-苯基-哌啶-4-基甲基)-苯磺酰胺盐酸盐

步骤1：根据程序E，4-异丁基氨基甲酰基-4-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯由1-叔丁氧基羰基-4-苯基-哌啶-4-羧酸和异丁胺来制备。LCMS：m/z 362[M+2]。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ7.37-7.41(m,4H),7.27-7.36(m,1H),5.20(br t,1H),3.50(m,4H),2.96(t,2H),2.34(m,2H),2.03(br d,2H),1.58-1.71(m,1H),1.44(s,9H),0.72(d,6H)ppm。

步骤2：遵循程序A，4-(异丁基氨基-甲基)-4-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯由4-异丁基氨基甲酰基-4-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯来制备。LCMS：m/z 348[M+2]¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ7.32-7.38(m,4H),7.20-7.24(m,1H),3.64(br d,2H),3.10-3.17(m,2H),2.65(s,2H),2.05-2.23(m,4H),1.78-1.84(m,2H),1.55-1.62(m,1H),0.1.44(s,9H),0.72(d,6H)(NH氢不可见)ppm。

步骤3：根据程序B，4-{[(4-甲酰基-苯磺酰基)-异丁基-氨基]-甲基}-4-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯由4-(异丁基氨基-甲基)-4-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-甲酰基苯磺酰氯来制备。LCMS：m/z 516[M+2]。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ10.08(s,1H),7.96-7.99(m,2H),7.90-7.92(m,2H),7.33-7.38(m,4H),7.23-7.25(m,1H),3.91(br d,2H),3.44(br d,2H),2.76-2.98(m,2H),2.20-2.42(m,4H),1.83(br s,2H),0.1.44(s,9H),1.31-1.38(m,1H),0.29(d,6H)ppm。

步骤4：根据程序C，4-甲酰基-N-异丁基-N-(4-苯基-哌啶-4-基甲基)-苯磺酰胺盐酸盐(中间体2)由4-{[(4-甲酰基-苯磺酰基)-异丁基-氨基]-甲基}-4-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯来制备。LCMS：m/z 416[M+2]。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ10.08(s,1H),9.49(br d,2H),7.94-8.00(m,4H),7.36-7.40(m,4H),7.28-7.32(m,1H),3.71(s,2H),3.45-3.52(m,1H),2.92-2.97(m,2H),2.55-2.58(m,2H),2.26-2.36(m,4H),2.06(br s,1H),1.25-1.31(m,1H),0.23(d,6H)ppm。

N-[1-(1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰基)-4-苯基-哌啶-4-基甲基]-N-异丁基-4-{[(哌啶-4-基甲基)-氨基]-甲基}-苯磺酰胺二盐酸盐的合成

步骤1：N-[1-(1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰基)-4-苯基-哌啶-4-基甲基]-4-甲酰基-N-异丁基-苯磺酰胺可以使用程序B使用4-甲酰基-N-异丁基-N-(4-苯基-哌啶-4-基甲基)-苯磺酰胺盐酸盐(中间体2)和1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰氯(中间体1)来制备。产物可以使用在己烷中的30％乙酸乙酯在硅胶上纯化。

步骤2：4-[(4-{[1-(1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰基)-4-苯基-哌啶-4-基甲基]-异丁基-氨磺酰基}-苄基氨基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯可以使用程序D由N-[1-(1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰基)-4-苯基-哌啶-4-基甲基]-4-甲酰基-N-异丁基-苯磺酰胺和4-氨基甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯来制备。产物可以使用在DCM中的2％2NNH₃/MeOH在硅胶上纯化。

步骤3：标题化合物(N-[1-(1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰基)-4-苯基-哌啶-4-基甲基]-N-异丁基-4-{[(哌啶-4-基甲基)-氨基]-甲基}-苯磺酰胺二盐酸盐)可以使用程序C由4-[(4-{[1-(1-环己基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-磺酰基)-4-苯基-哌啶-4-基甲基]-异丁基-氨磺酰基}-苄基氨基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯来制备。产物可以用乙醚研磨并干燥以给出产物。LCMS：m/z754.7[M+2]。¹HNMR(400MHz,CD₃OD)：δ7.78(d,2H),7.66(d,2H),7.37-7.30(m,4H),7.24-7.18(m,1H),4.13(s,2H),4.12-4.04(m,1H),3.44-3.39(m,6H),3.04-2.97(m,2H),2.82(d,2H),2.68-2.61(m,2H),2.44(s,3H),2.34(br d,2H),2.30(s,3H),2.26(d,2H),2.04-1.69(m,13H),1.52-1.40(m,4H),1.31-1.22(m,1H),0.28(d,6H)(HCl阳离子的质子不可见)ppm。

一般结合测定

以下是用于筛选的一种可能的方法。将在100mM碳酸氢钠/碳酸钠缓冲液(pH 9.8)中的S100b或β-淀粉样蛋白(500ng/100μL/孔)加载到NUNC Maxisorp平底96孔-微滴定板的孔上。将板在4℃温育过夜。将孔抽吸并用包含1％牛血清白蛋白(BSA)(300μL/孔)的50mM咪唑缓冲盐水(pH 7.2)(具有5mM CaCl₂/MgCl₂)在室温处理持续1h。将孔抽吸。

将测试化合物溶解在纳米纯水(nanopure water)中(浓度：10μM-100μM)。DMSO可以被用作共溶剂。将25μL的在4％DMSO中的测试化合物溶液连同75μL sRAGE(6nM FAC)添加至每个孔，并将样品在37℃温育持续1h。孔用155mM NaCl pH 7.2缓冲盐水洗涤若干次，并在每次洗涤之间浸泡持续若干秒。

非放射性检测通过以下来进行：

将10μL生物素化的山羊F(ab’)2抗小鼠IgG(8.0×10^-4mg/mL,FAC)、5μL Alk-phos-链霉亲和素(3×10^-3mg/mL FAC)、0.42μL/5ml的用于sRAGE的单克隆抗体(FAC 6.0×10^- ³mg/mL)添加至包含0.2％牛血清白蛋白和5mM CaCl₂的5ml 50mM咪唑缓冲盐水(pH 7.2)中。将混合物在室温温育持续30分钟。

将100μL的复合物添加至每个孔中，并允许温育在室温进行持续1h。孔用洗涤缓冲液洗涤若干次，并且在每次洗涤之间浸泡若干秒。添加100μL的在1M二乙醇胺中的1mg/mL(pNPP)(用HCl将pH调节至9.8)。允许在室温在暗处显色持续30min至1h。反应用10μL的停止溶液(stop solution)(在50％乙醇中的0.5N-1.0N NaOH)猝灭，并且用微孔板读数器(microplate reader)在405nm处用分光光度法测量吸收度。

使用与上文描述的程序类似的程序，采用S100b或β-淀粉样蛋白作为RAGE配体，在测定中筛选作为盐酸盐的式(I)的化合物，并且发现该作为盐酸盐的式(I)的化合物具有以下示出的IC50浓度。测定中的IC50(μM)值代表50％信号已经被抑制的化合物的浓度。

功能测定

先前，已经引用THP-1细胞响应于RAGE配体分泌TNFα的文献(Yeh C-H等人，Diabetes.，第50卷，2001年6月，第1495-1504页)。以下测定方法可以被用于确定可用作RAGE信号传导的拮抗剂的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

将骨髓细胞系，THP-1(ATTC#TIB-202)，在RPMI-1640培养基(ATCC，目录号30-2001)中培养，所述RPMI-1640培养基用胎牛血清补充至按体积计10％的最终浓度的胎牛血清并且用青霉素-链霉素(Gibco，目录号15140-122)补充。可选择地，根据ATCC说明，可以使用RPMI 1640(Bio-Whitaker#12-702F)来配制培养基，所述RPMI 1640补充有2mM L-谷氨酰胺(Gibco#12381-018)，被调节以包含1.5g/L碳酸氢钠(Gibco#25080-094)、4.5g/L葡萄糖、10mM HEPES(Cellgro#25-060-L1)和1.0mM丙酮酸钠(Gibco#11360-070)，并且补充有0.05mM 2-巯基乙醇和90％胎牛血清(培养基中胎牛血清的最终浓度为按体积计10％)。在培养期间，可以将培养细胞保持在5×10⁴个和1×10⁶个活细胞/mL之间的密度。细胞倍增时间(cell doubling time)是约20小时，并且细胞应当每隔3-4天传代(pass)。

THP-1细胞可以首先通过离心收集，并且然后用包含Pen Strep而没有血清的RPMI洗涤1次。在没有血清的RPMI中，将细胞重悬浮至在5×10⁵个和1×10⁶个细胞/mL之间的最终浓度。将细胞以50,000个-100,000个细胞/孔在100μL的RPMI中分配到96-孔组织培养板中(Corning,CSL3599)。在将细胞平板接种之后，将化合物分配并使用DMSO连续地稀释。DMSO和化合物浓度可以用RPMI来调节，以给出在细胞培养物中不大于0.5％的DMSO的最终浓度。典型地，在添加至培养物之前，可以将化合物稀释到50μL的RPMI中。化合物与细胞在37℃和5％CO₂温育持续30分钟，以平衡培养物中的化合物。在30分钟预温育后，细胞用以100μg/mL的最终浓度的牛S100b来刺激。此材料可以通过将牛S100b(Calbiochem，#559290)溶解在RPMI中至0.4mg/mL的最终浓度来制备。测定可以在RAGE融合蛋白的存在下，或在作为阳性对照的sRAGE或作为阴性对照的人类IgG(Sigma#I4506)的情况下来运行。

由THP-1细胞分泌的TNF-α的量可以使用可商购的ELISA试剂盒(R&D Systems,Minneapolis,MN#DY210)在将刺激蛋白(stimulant protein)添加至细胞培养物中之后24小时来测量。所有试剂和标准品可以如按照制造商指导来制备。然后，可以将100μL的标准品、培养基对照或培养基样品添加至合适的ELISA孔。可以将板在室温(22℃-25℃)温育持续2小时。然后可以将板抽吸并用400μL的洗涤缓冲液(PBS+0.1％Tween-20)洗涤，并重复三次，持续总计四次洗涤。接下来，可以将100μL的TNF-α检测缀合物添加至每个ELISA孔，并允许在室温温育持续1小时。然后可以将板抽吸并用400μL的洗涤缓冲液洗涤，并重复三次，持续总计四次洗涤。接下来，可以将100μL的被缀合至辣根过氧化物酶的链霉亲和素的制品添加至每个孔中，并允许温育持续20分钟。然后可以将板抽吸并用400μL的洗涤缓冲液洗涤，并重复三次，持续总计四次洗涤。显色可以通过添加100μL的TMB底物溶液(Sigma，T0440-1L)启动，并温育持续10-20分钟。显色可以通过添加100μL的1M磷酸来停止。可以在30分钟内在450nm处读取板。在S100b刺激的情况下，看到在背景以上的125pg/mL-250pg/mL。

使用与上文描述的程序类似的程序，在抑制S100b介导的TNF从THP-1细胞测定中释放的过程中，筛选出作为盐酸盐的式(I)的化合物，并发现该作为盐酸盐的式(I)的化合物具有约0.5μM的IC50浓度。

虽然已经参考本发明的某些优选的实施方案来描述并例证本发明，但是本领域技术人员将理解，在其中可以做出多种变化、修改和替换，而不偏离本发明的精神和范围。例如，由于待被治疗RAGE介导的疾病的哺乳动物的响应性的变化，除了如本文陈述的优选的剂量外的有效剂量也可以是适用的。同样地，观察到的特定药理学响应可以根据并取决于以下而变化：选择的特定活性化合物或者是否存在药物载体，以及使用的制剂的类型和施用模式，并且结果中的这样的预期的变化或差异根据本发明的目的和实践来预期。

Claims

1.一种化合物，其中所述化合物是式(I)的化合物

或其药学上可接受的盐。

2.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是所述式(I)的化合物。

3.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是所述式(I)的化合物的药学上可接受的盐。

4.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是所述式(I)的化合物的盐酸盐。

5.一种药物组合物，包含权利要求1所述的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、以及药学上可接受的载体。

6.一种治疗状况的方法，包括向受试者施用权利要求1所述的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述状况选自由以下组成的组：急性和慢性炎症、皮肤炎症、银屑病、异位性皮肤炎、与器官、组织或细胞移植相关的炎症、肺部炎症、哮喘、慢性阻塞性肺病、败血症、糖尿病、糖尿病相关并发症、肾衰竭、与糖尿病相关的高脂血症动脉粥样硬化、神经元细胞毒性、再狭窄、唐氏综合征、与头部创伤相关的痴呆症、肌萎缩性侧索硬化症、多发性硬化症、淀粉样变性、自身免疫疾病、伤口愈合、牙周病、神经病变、神经元变性、血管通透性、肾病变、动脉粥样硬化、视网膜病变、勃起功能障碍、肿瘤侵袭、转移以及骨质疏松症。

7.权利要求1所述的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于制造药物的用途。

8.权利要求1所述的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于制造用于治疗状况的药物的用途，其中所述状况选自由以下组成的组：急性和慢性炎症，包括皮肤炎症、银屑病、异位性皮肤炎、与器官、组织或细胞移植相关的炎症、肺部炎症、哮喘和慢性阻塞性肺病；败血症、糖尿病、糖尿病相关并发症、肾衰竭、与糖尿病相关的高脂血症动脉粥样硬化、神经元细胞毒性、再狭窄、唐氏综合征、与头部创伤相关的痴呆症、肌萎缩性侧索硬化症、多发性硬化症、淀粉样变性、自身免疫疾病、伤口愈合、牙周病、神经病变、神经元变性、血管通透性、肾病变、动脉粥样硬化、视网膜病变、勃起功能障碍、肿瘤侵袭、转移以及骨质疏松症。