CN108739357A - 一种光身耐盐耐旱抗倒两系杂交水稻组合的选育方法 - Google Patents

一种光身耐盐耐旱抗倒两系杂交水稻组合的选育方法 Download PDF

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CN108739357A CN201810559358.6A CN201810559358A CN108739357A CN 108739357 A CN108739357 A CN 108739357A CN 201810559358 A CN201810559358 A CN 201810559358A CN 108739357 A CN108739357 A CN 108739357A
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吴为人
兰涛
程祖锌
蒋云林
黄昕颖
康水英
李忠金
张立
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Abstract

本发明涉及一种光身耐盐耐旱抗倒两系杂交水稻组合的选育方法，属于作物遗传育种技术领域。该方法涉及到耐盐（含有sst基因）、光身、抗旱的水稻新种质(光温敏核不育系与恢复系)的创制，并利用创制的具有上述特性的两系不育系与恢复系大量配组，选育出高产、耐盐，抗旱、抗倒伏的光身两系杂交稻新组合，适宜沿海滩涂盐碱地直播生产，有效提高耐盐地利用率，对保障我国粮食生产安全具有重要意义。

Description

一种光身耐盐耐旱抗倒两系杂交水稻组合的选育方法
技术领域
本发明提供一种光身耐盐耐旱抗倒两系杂交水稻组合的选育方法，属于作物遗传育种技术领域。
背景技术
土壤盐渍化是一个世界性问题，生态恶化和水资源短缺，盐渍化等影响涉及将全球近50%的灌溉土壤，且以每年100万公顷的速度递增。加上人类不当灌溉等农事操作，使得水田出现盐碱危害，全世界现在有6% 以上的陆地面积受到盐碱的危害，在可耕地中有19.5% 的水田和2.1% 的旱地已经受到盐碱的危害。据统计，我国15% 的水田已经受到不同程度盐害的影响。盐碱土的总面积约有5亿多亩，还有3亿多亩盐碱地有待开发利用。水稻是我国乃至世界主要粮食作物之一。粮食既是关系国计民生和国家经济安全的重要战略物资，也是人民群众最基本的生活资料。鉴于目前我国的盐碱危害的不良影响与范围，使得当前我国水稻抗盐碱化的相关研究具有重要的实际意义。
水稻耐盐性是一个复合性状，机理复杂，随着分子生物学与基因组学的发展，其遗传研究也取得了一定的进展。迄今为止运用数量遗传学的方法，己经定位了许多水稻耐盐性QTL。在水稻耐盐碱基因源的鉴定、重要基因的分离、克隆和转导等方面取得了较大进展。在应用研究上，当前国内的水稻耐盐育种仍以常规育种为主，并已筛选出水稻耐盐种质资源，虽在生产上得到应用，但均未能在盐浓度较高的滩涂盐碱地推广。在传统的“淡水农业”模式即将超负荷运转的情况下，海水稻的巨大价值受到了各方各界的关注。2014年育成了“海稻86”，植株高、芒长，亩产在150公斤左右，具有很大应用潜力。随着现代分子生物学理论和基因工程技术的飞速发展，为作物耐盐育种研究提供了新思路和新方法。转基因技术可以打破物种间的生殖隔离障碍，定向创造更多的特异资源，直接在基因水平上改造植物的遗传物质。为水稻抗盐育种的研究开辟了广阔的应用前景，特别是将现代生物技术与传统育种方法相结合，为水稻抗盐育种取得突破带来了希望。随着突变体筛选、分子生物学研究手段及基因工程技术在植物耐盐研究中的广泛应用，人们对水稻耐盐机制的了解将更深入；同时，将获得更多的耐盐突变体和耐盐转基因水稻品种，并最终培育出能用于生产的耐盐水稻品种，从而推动中国和世界盐碱地及次生盐碱地水稻生产的开发利用。在转基因技术培育耐盐品种上，尽管研究者已从盐分胁迫对植物的影响及植物的抗盐研究方面开展了大量研究，但由于其机制十分复杂，仍有许多重要问题有待于进一步探索。转基因水稻的安全评价仍是当前食物安全争论不休的焦点，未能获得应用批准。因此，通过常规杂交和分子育种的方法，弄清盐胁迫机理和植物耐盐机制，将耐盐基因转入综合性状优良的优质水稻品种之中，创制耐盐、耐旱及耐沿海抗倒种植的水稻新品种，并通过耐盐水稻种植生产，不仅能有效提高沿海的生态效应，改良盐碱地土壤，提高盐碱地利用率，为更好地指导农业生产实际、保障粮食安全具有重要意义。
发明内容
本发明目的在于提供一种光身耐盐耐旱抗倒两系杂交水稻组合的选育方法，通过选育含有耐盐基因sst、耐旱、抗倒伏的光身粳型亲籼光温敏核不育系与含有耐盐基因sst、耐旱的光身恢复系，进行配制出一种耐盐、耐旱、抗倒伏的光身两系杂交水稻新组合。
、本发明方法包括以下步骤：
(1) 耐盐、耐旱、抗倒伏的光身粳型亲籼光温敏核不育系系选育
1）以粳型亲籼光温敏核不育系-A、耐旱陆稻品种-B以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质-C为亲本，作杂交组合FA/FB，FA/FC，分别以FAB、FAC表示；种植FAB、FAC，并做杂交FAB/FAC，获得复交一代F1ABC表示；种植F1ABC并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择株型偏粳、粒型偏籼、叶片无茸毛（光身、即含sst耐盐基因），且结实率>85%的F2单株，每株取1-2穗混合脱粒获得F3，置于1.0 wt.%NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0 wt.%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长2-5mm，胚根为一粒谷长4-10mm，符合发芽标准的种子F3代。
3）将F3代种子直播于防雨透光的玻璃房内、并含为盐浓度为0.6%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩，但叶片青绿，恢复供水5d后仍存活的单株。秧龄35d后移至盐浓度为0.6 wt%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但在盐碱地正常生产的单株；进行后期成苗干旱胁迫：在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择正常存活植株；抽穗时，选择育性为雄性不育，株型粳型，籽粒长型，柱头外露率高，花时早、植株耐倒伏、综合性状优良的光身两系不育单株，割蔸再生，冬季移至三亚短日照低温下自交结实加代，混合收获不育株系的自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0 wt.%NaCl浓度的水溶液，如步骤2）进行催芽，进行耐盐性鉴定。将正常发芽的种子播至玻璃房的0.6 wt.%盐碱土壤，重复步骤3）的苗期干旱胁迫，并采用早季低温、高海拔以及人工气候箱等鉴定技术，对入选的两系不育株系的不育性进行鉴定，生长孕穗期重复步骤3）的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择育性稳定、耐盐、耐旱的光身粳型亲籼两系不育单株；割蔸再生；以低温敏两系核不育系为对照，选择育性优于对照，临界温度低的温敏粳型亲籼不育株系；
5)重复步骤(1)中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、植株粳型、籽粒长粒籼型，花时早、育性稳定，综合性状优良的光身粳型亲籼光温敏核不育系。
耐盐、耐旱、抗倒的光身恢复系的选育
1）以生产推广应用的恢复系-E、耐旱陆稻恢复系-D以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质-C为亲本，作杂交组合FE/FD//FC；种植F1CDE并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择叶片无茸毛（光身、即含sst耐盐基因），且结实率>85%的F2单株，每株取1-2穗混合脱粒获得F3，置于1.0 wt.%NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0 wt.%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长2-5mm，胚根为一粒谷长4-10mm，符合发芽标准的种子F3代；
3）将F3代种子直播于防雨透光的玻璃房内并含为盐浓度为0.6 wt%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩，但叶片青绿，恢复供水5d后仍可存活的单株。秧龄35d后移至0.6 wt%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但可以在耐盐地正常生产的单株；进行后期成苗干旱胁迫：在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择植株能正常存活；抽穗时，选择结实率高于85%，光身、花粉量大、综合性状优良的单株，收获自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0 wt%NaCl浓度的水溶液，如步骤2）进行催芽，进行耐盐性鉴定。将正常发芽的种子播至玻璃房盐浓度为0.6 wt%的盐碱土壤，重复步骤3）的苗期干旱胁迫，孕穗期重复步骤3）的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择性状整齐、综合性状好的株系；
5)重复步骤(2)中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、花粉量大、综合性状优良的光身籼型恢复系；
(3)耐盐、耐旱光身两系杂交水稻新组合的选育：
在获得具有上述所述的特性的不育系和恢复系的基础上，通过大量测交配组，杂种后代在保证产量的前提下，筛选出一种光身、耐盐、耐旱、抗倒伏两系杂交水稻新组合，经步骤(2)中的3）、4）的耐盐、耐旱筛选，最终获得高产，耐盐、耐旱、抗倒伏的光身两系杂交水稻新组合。
粳型亲籼光温敏核不育系-A为不育系品42s、珍s和银s中的一种（品种已公开在福建省种子总站，http://www.seedchina.com.cn/shengzhan/model1/page3.aspID=10358&styleid=1418&menustyle=headline&sname=%B8%A3%BD%A8）；耐旱陆稻品种-B为永旱1号或旱恢3号；光身水稻种质-C为水稻耐盐突变体sst；恢复系-E为明恢2155、闽恢3301或粤禾丝苗；耐旱陆稻恢复系-D为旱恢3号。
本发明的突出优点：
该方法具有下列优点：(1) 培育出的耐盐、耐旱、抗倒伏的光身两系杂交水稻新组合可在沿海盐碱滩涂种植，不仅有效提高沿海的生态效应，改良盐碱地土壤，提高盐碱地利用率，对保障我国粮食生产安全具有重要意义。（2）充分利用分离群体的遗传背景多样性，在对耐盐主基因sst及耐旱性选择基础上，利用微效基因的互作，通过光身和耐旱表型性状选择，技术方法简单易行，育种目标明确，从中选择耐盐性更强、耐旱、结实率正常的植株，经多代鉴定，最终获得高利用价值的水稻育种材料。（3）根据沿海淡水缺乏、海风大等不良气候条件，培育适合于盐碱地直播生产的耐盐、耐旱、抗倒伏、植株矮壮的光身两系杂交水稻组合，对盐碱地的水稻生产具有重要的应用价值。
具体实施方式
实施例1：
(1) 耐盐、耐旱、抗倒伏的光身粳型亲籼光温敏核不育系系选育：
1）以粳型亲籼光温敏核不育系品42s（A）、耐旱陆稻品种永旱1号（B）以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质sst（含耐盐sst，记为品种C）为亲本，作杂交组合FA/FB，FA/FC，分别以FAB、FAC表示；种植FAB、FAC，并做杂交FAB/FAC，获得复交一代F1ABC表示；种植F1ABC并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择株型偏粳、粒型偏籼、叶片无茸毛（光身、即含sst耐盐基因），且结实率>85%的F2单株，每株取2穗混合脱粒获得F3，置于1.0 wt %NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0 wt%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长5mm，胚根为一粒谷长10mm，符合发芽标准的种子F3代。
3）将F3代种子直播于防雨透光的玻璃房内、并含为盐浓度为0.6 wt%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩，但叶片青绿，恢复供水5d后仍可存活的单株。秧龄35d后移至盐浓度为0.6%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但可以在盐碱地正常生产的单株；进行后期成苗干旱胁迫：在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择植株正常存活；抽穗时，选择育性为雄性不育，株型粳型，籽粒长型，柱头外露率高，花时早、植株耐倒伏、综合性状优良的光身两系不育单株，割蔸再生，冬季移至三亚短日照低温下自交结实加代，混合收获不育株系的自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0%NaCl浓度的水溶液，如步骤2进行催芽，进行耐盐性鉴定。将正常发芽的种子播至玻璃房的盐浓度为0.6 wt%盐碱土壤，重复步骤3的苗期干旱胁迫，并采用早季低温、高海拔以及人工气候箱等鉴定技术，对入选的两系不育株系的不育性进行鉴定，生长孕穗期重复步骤3的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择育性稳定、耐盐、耐旱的光身粳型亲籼两系不育单株；割蔸再生。以水稻光温敏核不育系272S为对照，选择育性明显优于对照，临界温度低的低温敏粳型亲籼不育株系；
5)重复步骤(1)中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、植株粳型、籽粒长粒籼型，花时早、育性稳定，综合性状优良的光身粳型亲籼光温敏核不育系“耐品42s”。
耐盐、耐旱、抗倒的光身恢复系的选育
1）以生产推广应用的恢复系闽恢3301-E、耐旱陆稻恢复系旱恢3号-D以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质sst -C为亲本，作杂交组合FE/FD//FC；种植F1CDE并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择叶片无茸毛（光身、即含sst耐盐基因），且结实率>85%的F2单株，每株取2穗混合脱粒获得F3，置于1.0wt%NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0wt%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长(约4mm)，胚根为一粒谷长（约6mm），符合发芽标准的种子F3代。
3）将F3代种子直播于防雨透光的玻璃房内并含为盐浓度为0.6%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩，但叶片青绿，恢复供水5d后仍可存活的单株。秧龄35d后移至盐浓度为0.6wt%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但可以在耐盐地正常生产的单株；进行后期成苗干旱胁迫：在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择植株能正常存活；抽穗时，选择结实率高于85%，光身、花粉量大、综合性状优良的单株，收获自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0%NaCl浓度的水溶液，如步骤2进行催芽，进行耐盐性鉴定。将正常发芽的种子播至玻璃房盐浓度为0.6wt%的盐碱土壤，重复步骤3的苗期干旱胁迫，孕穗期重复步骤3的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择性状整齐、综合性状好的株系；
5)重复步骤(2)中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、花粉量大、综合性状优良的光身籼型恢复系多耐3301。
耐盐、耐旱光身两系杂交水稻新组合的选育：
在获得具有上述所述的特性的不育系耐品42s等和恢复系多耐3301等的基础上，通过配组，杂种后代在保证产量的前提下，筛选出一种光身、耐盐、耐旱、抗倒伏两系杂交水稻新组合，经步骤(2)中的3）、4）的耐盐、耐旱筛选，最终获得高产，耐盐、耐旱、抗倒伏的光身两系杂交水稻新组合耐两优3301。
优点：耐两优3301为高产，耐盐、耐旱、抗倒伏的光身两系杂交水稻新组合。该组合可在沿海盐碱滩涂种植，具有耐盐、耐旱、抗倒伏、植株矮壮，适应性广等特性，不育系异交特性好，耐高温，制种产量高，该组合的推广应用对我省盐碱地的水稻生产具有重要的应用价值。
实施例2：
(1) 耐盐、耐旱、抗倒伏的光身粳型亲籼光温敏核不育系系选育
1）以粳型亲籼光温敏核不育系品珍s（A）、耐旱陆稻品种永旱1号（B）以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质sst（含耐盐sst，记为品种C）为亲本，作杂交组合FA/FB，FA/FC，分别以FAB、FAC表示；种植FAB、FAC，并做杂交FAB/FAC，获得复交一代F1ABC表示；种植F1ABC并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择株型偏粳、粒型偏籼、叶片无茸毛（光身、即含sst耐盐基因），且结实率>85%的F2单株，每株取2穗混合脱粒获得F3，置于1.0%NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长(约2-5mm)，胚根为一粒谷长（约4-10mm），符合发芽标准的种子F3代。
3）将F3代种子直播于防雨透光的玻璃房内、并含为盐浓度为0.6%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩，但叶片青绿，恢复供水5d后仍可存活的单株。秧龄35d后移至0.6%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但可以在盐碱地正常生产的单株；进行后期成苗干旱胁迫：在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择植株正常存活；抽穗时，选择育性为雄性不育，株型粳型，籽粒长型，柱头外露率高，花时早、植株耐倒伏、综合性状优良的光身两系不育单株，割蔸再生，冬季移至三亚短日照低温下自交结实加代，混合收获不育株系的自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0%NaCl浓度的水溶液，如步骤2进行催芽，进行耐盐性鉴定。将正常发芽的种子播至玻璃房的0.6%盐碱土壤，重复步骤3的苗期干旱胁迫，并采用早季低温、高海拔以及人工气候箱等鉴定技术，对入选的两系不育株系的不育性进行鉴定，生长孕穗期重复步骤3的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择育性稳定、耐盐、耐旱的光身粳型亲籼两系不育单株；割蔸再生。以水稻光温敏核不育系272S为对照，选择育性明显优于对照，临界温度低的低温敏粳型亲籼不育株系；
5)重复步骤(1)中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、植株粳型、籽粒长粒籼型，花时早、育性稳定，综合性状优良的光身粳型亲籼光温敏核不育系“耐珍s”。
耐盐、耐旱、抗倒的光身恢复系的选育
1）以生产推广应用的恢复系明恢2155-E、耐旱陆稻恢复系旱恢3号-D以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质sst -C为亲本，作杂交组合FE/FD//FC；种植F1CDE并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择叶片无茸毛（光身、即含sst耐盐基因），且结实率>85%的F2单株，每株取2穗混合脱粒获得F3，置于1.0%NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长(约2-5mm)，胚根为一粒谷长（约4-10mm），符合发芽标准的种子F3代。
3）将F3代种子直播于防雨透光的玻璃房内并含为盐浓度为0.6%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩，但叶片青绿，恢复供水5d后仍可存活的单株。秧龄35d后移至0.6%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但可以在耐盐地正常生产的单株；进行后期成苗干旱胁迫：在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择植株能正常存活；抽穗时，选择结实率高于85%，光身、花粉量大、综合性状优良的单株，收获自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0%NaCl浓度的水溶液，如步骤2进行催芽，进行耐盐性鉴定。将正常发芽的种子播至玻璃房0.6%的盐碱土壤，重复步骤3的苗期干旱胁迫，孕穗期重复步骤3的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择性状整齐、综合性状好的株系；
5)重复步骤(2) 中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、花粉量大、综合性状优良的光身籼型恢复系多耐2155。
耐盐、耐旱光身两系杂交水稻新组合的选育：
在获得具有上述所述的特性的不育系珍s等和恢复系多耐2155等的基础上，通过配组，杂种后代在保证产量的前提下，筛选出一种光身、耐盐、耐旱、抗倒伏两系杂交水稻新组合，经步骤(2) 中的3）、4）的耐盐、耐旱筛选，最终获得高产，耐盐、耐旱、抗倒伏的光身两系杂交水稻新组合耐两优2155。
优点：耐两优2155为高产，耐盐、耐旱、抗倒伏的光身两系早季杂交水稻新组合。该组合全生育期120d左右，熟期早、株型协调，抗性好，具有耐盐、耐旱、抗倒伏、植株矮壮，适应性广等特性，可在沿海盐碱滩涂种植。该组合的推广应用对我省盐碱地的水稻生产具有重要的应用价值。
实施例3：
(1) 耐盐、耐旱、抗倒伏的光身粳型亲籼光温敏核不育系系选育：
1）以粳型亲籼光温敏核不育系银s（A）、耐旱陆稻品种永旱1号（B）以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质sst（含耐盐sst，记为品种C）为亲本，作杂交组合FA/FB，FA/FC，分别以FAB、FAC表示；种植FAB、FAC，并做杂交FAB/FAC，获得复交一代F1ABC表示；种植F1ABC并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择株型偏粳、粒型偏籼、叶片无茸毛（光身、即含sst耐盐基因），且结实率>85%的F2单株，每株取2穗混合脱粒获得F3，置于1.0%NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长(约2-5mm)，胚根为一粒谷长（约4-10mm），符合发芽标准的种子F3代。
3）将F3代种子直播于防雨透光的玻璃房内、并含为盐浓度为0.6%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩，但叶片青绿，恢复供水5d后仍可存活的单株。秧龄35d后移至0.6%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但可以在盐碱地正常生产的单株；进行后期成苗干旱胁迫：在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择植株正常存活；抽穗时，选择育性为雄性不育，株型粳型，籽粒长型，柱头外露率高，花时早、植株耐倒伏、综合性状优良的光身两系不育单株，割蔸再生，冬季移至三亚短日照低温下自交结实加代，混合收获不育株系的自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0%NaCl浓度的水溶液，如步骤2进行催芽，进行耐盐性鉴定。将正常发芽的种子播至玻璃房的0.6%盐碱土壤，重复步骤3的苗期干旱胁迫，并采用早季低温、高海拔以及人工气候箱等鉴定技术，对入选的两系不育株系的不育性进行鉴定，生长孕穗期重复步骤3的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择育性稳定、耐盐、耐旱的光身粳型亲籼两系不育单株；割蔸再生。以水稻光温敏核不育系272S为对照，选择育性明显优于对照，临界温度低的低温敏粳型亲籼不育株系；
5)重复步骤(1)中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、植株粳型、籽粒长粒籼型，花时早、育性稳定，综合性状优良的光身粳型亲籼光温敏核不育系“耐银s”。
耐盐、耐旱、抗倒的光身恢复系的选育：
1）以生产推广应用的常规优质品种粤禾丝苗-E、耐旱陆稻恢复系旱恢3号-D以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质sst -C为亲本，作杂交组合FE/FD//FC；种植F1CDE并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择叶片无茸毛（光身、即含sst耐盐基因），且结实率>85%的F2单株，每株取2穗混合脱粒获得F3，置于1.0%NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长(约2-5mm)，胚根为一粒谷长（约4-10mm），符合发芽标准的种子F3代。
3）将F3代种子直播于防雨透光的玻璃房内并含为盐浓度为0.6%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩，但叶片青绿，恢复供水5d后仍可存活的单株。秧龄35d后移至0.6%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但可以在耐盐地正常生产的单株；进行后期成苗干旱胁迫：在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择植株能正常存活；抽穗时，选择结实率高于85%，光身、花粉量大、综合性状优良的单株，收获自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0%NaCl浓度的水溶液，如步骤2进行催芽，进行耐盐性鉴定。将正常发芽的种子播至玻璃房0.6%的盐碱土壤，重复步骤3的苗期干旱胁迫，孕穗期重复步骤3的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择性状整齐、综合性状好的株系；
5)重复步骤(2)中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、花粉量大、综合性状优良的光身籼型恢复系“多耐丝苗”。
耐盐、耐旱光身两系杂交水稻新组合的选育：
在获得具有上述所述的特性的不育系“耐银s”等和恢复系“多耐丝苗”等的基础上，通过配组，杂种后代在保证产量的前提下，筛选出一种光身、耐盐、耐旱、抗倒伏两系杂交水稻新组合，经步骤(2)中的3）、4）的耐盐、耐旱筛选，最终获得高产，耐盐、耐旱、抗倒伏的光身两系杂交水稻新组合“银耐两优丝苗”。
优点：“银耐两优丝苗”为高产，耐盐、耐旱、抗倒伏的光身优质两系早季杂交稻新组合。该组合全生育期125d左右，熟期早、株型矮壮协调，后期转色好，稻米品质优，具有耐盐、耐旱、抗倒伏、适应性广等特性，可在华南沿海盐碱滩涂早季种植。该组合的推广应用对我省盐碱地的优质水稻生产具有重要的应用价值，应该前景广阔。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (3)

1.一种光身耐盐耐旱抗倒两系杂交水稻组合的选育方法，其特征在于：以水稻耐盐突变体sst，记为品种A，即保持原来农艺性状的基础上，伴随SST基因的隐性突变为sst耐盐基因，导致叶片茸毛消失（光身）的连锁性状，且结实率60%为父本，分别与粳型亲籼光温敏核不育系、耐旱品种及恢复系杂交、回交，采用系谱法选择、进而分别选育出相应的含有sst耐盐基因、耐旱、抗倒、光身的粳型亲籼光温敏核不育系和耐盐、耐旱恢复系；采用上述育成的粳型光温敏核不育系与恢复系大量测交，最终育成高产、耐盐、抗旱、抭倒伏的光身两系杂交稻组合。
2.根据权利要求1所述的一种光身耐盐耐旱抗倒两系杂交水稻组合的选育方法，其特征在于：具体包括以下方法：
(1) 耐盐、耐旱、抗倒伏的光身粳型亲籼光温敏核不育系选育：
1）以粳型亲籼两系不育系-A、耐旱陆稻品种-B以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质-C为亲本，作杂交组合FA/FB，FA/FC，分别以FAB、FAC表示；种植FAB、FAC，并做杂交FAB/FAC，获得复交一代F1ABC表示；种植F1ABC并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择株型偏粳、粒型偏籼、叶片无茸毛光身即含sst耐盐基因、且结实率>85%的F2单株，每株取1-2穗混合脱粒获得F3，置于1.0wt.%NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0 wt.%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长2-5mm，胚根为一粒谷长4-10mm，符合发芽标准的种子F3代；
3）将F3代种子播于防雨透光的玻璃房内、并含为盐质量浓度为0.6 wt.%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩但叶片青绿，恢复供水5d后仍存活的单株；秧龄35d后移至盐含量为0.6wt.%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但在盐碱地正常生产的单株；进行后期成苗干旱胁迫：在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择正常存活植株；抽穗时，选择育性为雄性不育，株型粳型，籽粒长型，柱头外露率高，花时早、植株耐倒伏、综合性状优良的光身两系不育单株，割蔸再生，冬季移至三亚短日照、低温下自交结实加代，混合收获不育株系的自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0wt.%NaCl浓度的水溶液，如步骤2）方法进行催芽，进行耐盐性鉴定；将正常发芽的种子播至玻璃房的盐浓度为0.6 wt.%盐碱土壤，重复步骤3）的苗期干旱胁迫，并采用早季低温、高海拔以及人工气候箱鉴定技术，对入选的两系不育株系的不育性进行鉴定，生长孕穗期重复步骤3）的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择育性稳定、耐盐、耐旱的光身粳型亲籼两系不育单株；割蔸再生；以生产上应用的低温敏两系核不育系为对照，选择育性优于对照，临界温度低的低温敏粳型亲籼不育株系；
5)重复步骤(1)中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、植株粳型、籽粒长粒籼型，花时早、育性稳定，综合性状优良的光身粳型亲籼光温敏核不育系；
(2) 耐盐、耐旱、抗倒的光身恢复系的选育：
1）以生产推广应用的恢复系-E、耐旱陆稻恢复系-D以及含有耐盐基因sst的光身水稻种质-C为亲本，作杂交组合FE/FD//FC；种植F1CDE并收获F2种子；
2）种植F2种子，从中选择叶片无茸毛光身、即含sst耐盐基因，且结实率>85%的F2单株，每株取1-2穗混合脱粒获得F3，置于1.0wt.%NaCl浓度的水溶液，在室温下浸种48h后，将种子采用浸于含1.0%NaCl的湿毛巾包裹，放入38℃植物培养箱进行催芽破胸12h后，温度降至35℃催芽48h，从中挑选出胚芽长至半粒谷长2-5mm，胚根为一粒谷长4-10mm，符合发芽标准的种子F3代；
3）将F3代种子直播于防雨透光的玻璃房内并含为盐浓度为0.6 wt.%的土壤中，进行苗期干旱胁迫，幼苗生长10d后停止供水，停止供水7d，观察水稻叶片光身、萎缩但叶片青绿、恢复供水5d后仍存活的单株；秧龄35d后移至盐浓度为0.6 wt.%盐碱地种植，生产中期不做耐旱管理，但在耐盐地正常生产的单株；在孕穗期时，停水10d后，恢复供水，选择能正常存活植株；抽穗时，选择结实率高于85%，光身、花粉量大、综合性状优良的单株，收获自交种子F4；
4）将F4代种子置于1.0 wt.%NaCl浓度的水溶液，按步骤2）方法进行催芽，进行耐盐性鉴定；将正常发芽的种子播至玻璃房盐浓度为0.6 wt.%的盐碱土壤，重复步骤3）的苗期干旱胁迫，孕穗期重复步骤3）的后期成苗干旱胁迫，存活株抽穗时选择性状整齐、综合性状好的株系；
5)重复步骤(2)中的3）、4）；最终获得植株形态为耐盐、耐旱、花粉量大、综合性状优良的光身籼型恢复系；
(3)耐盐、耐旱光身两系杂交水稻组合的选育：
在获得具有上述所述的特性的不育系和恢复系的基础上，通过大量测交配组，杂种后代在保证产量的前提下，筛选出一种光身、耐盐、耐旱、抗倒伏两系杂交水稻组合，经步骤(2)中的3）、4）的耐盐、耐旱筛选，最终获得高产、耐盐、耐旱、抗倒伏的光身两系杂交水稻组合。
3.根据权利要求1所述的一种光身耐盐耐旱抗倒两系杂交水稻组合的选育方法，其特征在于：粳型亲籼光温敏核不育系-A为不育系品42s、珍s和银s中的一种；耐旱陆稻品种-B为永旱1号或旱恢3号；光身水稻种质-C为水稻耐盐突变体sst；恢复系-E为明恢2155、闽恢3301或粤禾丝苗；耐旱陆稻恢复系-D为旱恢3号。
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