CN108728512A - 病毒活性快速检测方法 - Google Patents

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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
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Abstract

本发明公开了病毒活性快速检测方法，包括以下步骤：S1、病毒纯化，S2、制备宿主靶细胞的荧光分子印迹聚合物，S3、鸡胚培养，S4、观察病毒，S5、统计并记录。本发明利用丹磺酰多巴胺和多巴胺在宿主细胞表面进行聚合反应，使得荧光分子寄存在病毒上，病毒在繁殖时，则会繁殖成带有荧光分子的病毒，以便于人们观察带有荧光分子的病毒数目，进而判断病毒的活性，此操作简单，方便检测人员使用，其中此装置中的四个培养皿中病毒培养的宿主环境不同，因此人们可以判断病毒的活性与宿主环境的关系，方便研究人员再次研究病毒。

Description

病毒活性快速检测方法
技术领域
本发明涉及病毒活性检测技术领域，特别涉及病毒活性快速检测方法。
背景技术
病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA），必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。病毒是一种非细胞生命形态，它由一个核酸长链和蛋白质外壳构成，病毒没有自己的代谢机构，没有酶系统。因此病毒离开了宿主细胞，就成了没有任何生命活动、也不能独立自我繁殖的化学物质。一旦进入宿主细胞后，它就可以利用细胞中的物质和能量以及复制、转录和转译的能力，按照它自己的核酸所包含的遗传信息产生和它一样的新一代病毒。
病毒无时无刻的存在人们的生活中，因此人们需要对病毒生存的环境进行了解，才能保证自身的安全，了解病毒需要了解病毒的活性，但是传统的病毒活性检测，则是选择多组对照实验，进行观察病毒的繁殖速率，进而判断病毒的活性，因此不能够直观的观察病毒繁殖数量，进而不能够快速的判断此病毒的活性，也不方便检测人员进行快速的检测病毒活性，因此不方便研究人员进行病毒培养研究，鉴于此，我们提供病毒活性快速检测方法。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供病毒活性快速检测方法。
本发明中的病毒活性快速检测方法，包括以下步骤：
S1、病毒纯化：先把需要检测的病毒从待取物上取下，然后利用密度梯度离心法把病毒进行纯化，提取所需要的病毒；
S2、制备宿主靶细胞的荧光分子印迹聚合物：配制印迹溶液：多巴胺、丹磺酰多巴胺、宿主靶细胞和S1中纯化的病毒进行均匀混合；
S3、鸡胚培养：选用四个培养皿，其中四个培养皿内均放置孵化9-14天的鸡胚，然后把S2中制备的混合液等分四份，且每份放置在一个培养皿内，然后把此培养皿放置在培养箱内，培养3-5小时；
S4、观察病毒：把S3中培养后的病毒取出，分别放置在对应的玻璃观察板上；
S5、统计并记录，把S4中的四个玻璃观察板依次放置在显微镜下，进行观察带有荧光分子标记的病毒数目和没有带有荧光分子标记的病毒数目，并记录下数据。
上述方案中，所述S1中的密度梯度离心法为速率区带离心法和等密度区带法中的一种。
上述方案中，所述S3中四个培养皿的温度、湿度均相同，其中四个培养皿放置在相同的温度、湿度的培养箱内，且培养的时间均相同。
上述方案中，所述S3中鸡胚培养的部位为羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊，其中四个培养皿中的病毒分别放置在羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊内。
本发明的优点和有益效果在于：本发明利用丹磺酰多巴胺和多巴胺在宿主细胞表面进行聚合反应，使得荧光分子寄存在病毒上，病毒在繁殖时，则会繁殖成带有荧光分子的病毒，以便于人们观察带有荧光分子的病毒数目，进而判断病毒的活性，此操作简单，方便检测人员使用，其中此装置中的四个培养皿中病毒培养的宿主环境不同，因此人们可以判断病毒的活性与宿主环境有哪些关系，方便研究人员再次研究病毒。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。
实施例一
病毒活性快速检测方法，包括以下步骤：
S1、病毒纯化：先把需要检测的病毒从待取物上取下，然后利用密度梯度离心法把病毒进行纯化，提取所需要的病毒，密度梯度离心法为速率区带离心法和等密度区带法中的一种；
S2、制备宿主靶细胞的荧光分子印迹聚合物：配制印迹溶液：多巴胺、丹磺酰多巴胺、宿主靶细胞和S1中纯化的病毒进行均匀混合；
S3、鸡胚培养：选用四个培养皿，其中四个培养皿内均放置孵化9天的鸡胚，然后把S2中制备的混合液等分四份，且每份放置在一个培养皿内，然后把此培养皿放置在培养箱内，培养3小时，鸡胚培养的部位为羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊，其中四个培养皿中的病毒分别放置在羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊内，四个培养皿的温度、湿度均相同，其中四个培养皿放置在相同的温度、湿度的培养箱内，且培养的时间均相同；
S4、观察病毒：把S3中培养后的病毒取出，分别放置在对应的玻璃观察板上；
S5、统计并记录，把S4中的四个玻璃观察板依次放置在显微镜下，进行观察带有荧光分子标记的病毒数目和没有带有荧光分子标记的病毒数目，并记录下数据。
实施例二
病毒活性快速检测方法，包括以下步骤：
S1、病毒纯化：先把需要检测的病毒从待取物上取下，然后利用密度梯度离心法把病毒进行纯化，提取所需要的病毒，密度梯度离心法为速率区带离心法和等密度区带法中的一种；
S2、制备宿主靶细胞的荧光分子印迹聚合物：配制印迹溶液：多巴胺、丹磺酰多巴胺、宿主靶细胞和S1中纯化的病毒进行均匀混合；
S3、鸡胚培养：选用四个培养皿，其中四个培养皿内均放置孵化10天的鸡胚，然后把S2中制备的混合液等分四份，且每份放置在一个培养皿内，然后把此培养皿放置在培养箱内，培养4小时，鸡胚培养的部位为羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊，其中四个培养皿中的病毒分别放置在羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊内，四个培养皿的温度、湿度均相同，其中四个培养皿放置在相同的温度、湿度的培养箱内，且培养的时间均相同；
S4、观察病毒：把S3中培养后的病毒取出，分别放置在对应的玻璃观察板上；
S5、统计并记录，把S4中的四个玻璃观察板依次放置在显微镜下，进行观察带有荧光分子标记的病毒数目和没有带有荧光分子标记的病毒数目，并记录下数据。
实施例三
病毒活性快速检测方法，包括以下步骤：
S1、病毒纯化：先把需要检测的病毒从待取物上取下，然后利用密度梯度离心法把病毒进行纯化，提取所需要的病毒，密度梯度离心法为速率区带离心法和等密度区带法中的一种；
S2、制备宿主靶细胞的荧光分子印迹聚合物：配制印迹溶液：多巴胺、丹磺酰多巴胺、宿主靶细胞和S1中纯化的病毒进行均匀混合；
S3、鸡胚培养：选用四个培养皿，其中四个培养皿内均放置孵化14天的鸡胚，然后把S2中制备的混合液等分四份，且每份放置在一个培养皿内，然后把此培养皿放置在培养箱内，培养5小时，鸡胚培养的部位为羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊，其中四个培养皿中的病毒分别放置在羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊内，四个培养皿的温度、湿度均相同，其中四个培养皿放置在相同的温度、湿度的培养箱内，且培养的时间均相同；
S4、观察病毒：把S3中培养后的病毒取出，分别放置在对应的玻璃观察板上；
S5、统计并记录，把S4中的四个玻璃观察板依次放置在显微镜下，进行观察带有荧光分子标记的病毒数目和没有带有荧光分子标记的病毒数目，并记录下数据。
本发明利用丹磺酰多巴胺和多巴胺在宿主细胞表面进行聚合反应，使得荧光分子寄存在病毒上，病毒在繁殖时，则会繁殖成带有荧光分子的病毒，以便于人们观察带有荧光分子的病毒数目，进而判断病毒的活性，此操作简单，方便检测人员使用，其中此装置中的四个培养皿中病毒培养的宿主环境不同，因此人们可以判断病毒的活性与宿主环境有哪些关系，方便研究人员再次研究病毒。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.病毒活性快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、病毒纯化：先把需要检测的病毒从待取物上取下，然后利用密度梯度离心法把病毒进行纯化，提取所需要的病毒；
S2、制备宿主靶细胞的荧光分子印迹聚合物：配制印迹溶液：多巴胺、丹磺酰多巴胺、宿主靶细胞和S1中纯化的病毒进行均匀混合；
S3、鸡胚培养：选用四个培养皿，其中四个培养皿内均放置孵化9-14天的鸡胚，然后把S2中制备的混合液等分四份，且每份放置在一个培养皿内，然后把此培养皿放置在培养箱内，培养3-5小时；
S4、观察病毒：把S3中培养后的病毒取出，分别放置在对应的玻璃观察板上；
S5、统计并记录，把S4中的四个玻璃观察板依次放置在显微镜下，进行观察带有荧光分子标记的病毒数目和没有带有荧光分子标记的病毒数目，并记录下数据。
2.根据权利要求1所述的病毒活性快速检测方法，其特征在于，所述S1中的密度梯度离心法为速率区带离心法和等密度区带法中的一种。
3.根据权利要求1所述的病毒活性快速检测方法，其特征在于，所述S3中四个培养皿的温度、湿度均相同，其中四个培养皿放置在相同的温度、湿度的培养箱内，且培养的时间均相同。
4.根据权利要求1所述的病毒活性快速检测方法，其特征在于，所述S3中鸡胚培养的部位为羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊，其中四个培养皿中的病毒分别放置在羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊内。
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