CN108728416A - 一种car-t细胞培养流程 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种CAR‑T细胞培养流程，涉及一种生物学技术领域。该发明由包含以下步骤：S10、操作前准备；S20、分离单个核细胞；S30、细胞培养；S40、CAR‑T细胞收集；S50、细胞运输与保存。本发明流程简单，方便生产，存储方便，适合广泛生产。

Description

一种CAR-T细胞培养流程
技术领域
本发明涉及一种生物学技术领域，特别是涉及一种CAR-T细胞培养流程。
背景技术
随着基因工程技术的发展和对T细胞识别认识的提高，肿瘤靶向受体——CAR应运而生，因此也有了将CAR转染至人的T细胞从而增强过继免疫治疗的抗原识别特异性和杀伤功能的技术。CAR的设计基础是将胞外配体识别区域——较为典型的是单链可变区域---scFv片段，与包括CD3ζ的胞内信号分子连接起来，再通过与抗原相互作用有效激活T细胞。基于TCR信号进行设计的CAR-T细胞，在难治性的B细胞恶性肿瘤治疗中已经勘称成功。但CAR-T细胞在治疗上皮源性恶性肿瘤的的安全性和有效性上均有待提高。所以一切基础都是如何培养CAR-T细胞。
发明内容
针对上述问题中存在的不足之处，本发明提供一种CAR-T细胞培养流程，使其流程简单，方便生产，存储方便，适合广泛生产。
为了解决上述问题，本发明提供一种CAR-T细胞培养流程，其中，包括以下步骤：
S10、操作前准备
S101、净化室、生物安全柜消毒完毕后，开启净化空调运行30min，生物安全柜运行稳定；从试剂间冰箱中取出细胞培养基，恢复室温；
S102、生物安全柜表面75％酒精消毒，外周血袋表面酒精消毒转入安全柜内。
S20、分离单个核细胞
S201、使用灭菌消毒的剪刀剪断血袋塑料管或者使用一次性注射器，把血袋内外周血转入50ml离心管中；
S202、用PBS缓冲液按1∶1稀释外周血，混匀；
S203、将稀释好的血样缓慢加入室温的15ml人淋巴细胞分离液的离心管中；
S204、按照2100r/min的转数，配平离心1200g，离心20min，慢升慢降；
S205、离心完成后，离心管出现明显分层由下至上：红细胞层，粒细胞层，Ficoll层，单个核细胞层和血浆层，吸取血浆层至距白膜层5mm左右处弃之，小心吸取红细胞层以上的所有液体至离心管中，PBS稀释，与细胞悬液体积比应大于1∶3，混匀；
S206、按照1600r/min的转数，离心600g，5min，PBS重悬细胞混匀，取少量细胞计数；
S207、按照1200r/min的转数，离心300g，5min，上清液送检无菌检测。
S30、细胞培养
S301、细胞培养条件：恒温37℃，CO2浓度5％，相对饱和湿度95％，细胞培养基PH值7.2-7.4；
S302、根据细胞计数调密度2x106/ml加入培养瓶中，混匀放入CO2培养箱培养2小时；
S303、取出培养瓶，轻摇，使沉降于底部的悬浮细胞浮起，培养瓶倾斜30度角，移液管吸取培养基转入离心管中，少些培养基洗培养瓶将悬浮细胞全部收集，混匀计数；
S304、根据细胞计数调整细胞浓度1.2x106/ml接种培养瓶中，加CD3/CD28磁珠，按细胞与磁珠比例为1∶3，加入IL-2 100U/ml，混匀放入CO2培养箱培养；
S305、次日细胞培养1天，调整细胞密度至0.6x106/ml，加入病毒混匀放入CO2培养箱培养；
S306、细胞培养3天，细胞计数补加培养基，IL-2100U/ml细胞密度调整至0.6x106/ml继续培养；
S307、细胞培养5天去磁珠，细胞混匀转离心管中，在磁力架上去除磁珠，细胞计数补加培养基，IL-2100U/ml细胞密度调整至0.6x106/ml继续培养；
S308、定期观察细胞生长情况，主要观察其形态的变化，数目及增值情况，细胞碎片及杂质情况，每2-3天加液培养；
S309、根据细胞状态和临床治疗需要，培养9天时细胞数量达到要求，各项检测合格。
S40、CAR-T细胞收集
S401、根据治疗方案，取出相应细胞悬液，剩余细胞补加培养基继续培养，供再次回输；
S402、细胞悬液转入离心管中，300g离心5min；
S403、除去上清培养液，加PBS缓冲液稀释混匀，300g离心5min，弃上清，PBS缓冲液300g/min离心5min；
S404、细胞装袋，离心完成后取上清，做无菌检测，20ml生理盐水重悬细胞，100μm细胞滤网过滤，取少量细胞悬液进行细胞数量，细胞活率，革兰氏检测，内毒素检测。细胞过滤完成，转入100ml盐水袋中，加5％注射用人血白蛋白，贴上标签，并填写相关记录。
S50、细胞运输与保存
优选的，所述S203的具体方法为：用10ml移液管吸取血样，伸至分离液液面上方0.5cm处，血样自然滑落铺至分离液面上，然后轻轻加入血样，注意不要冲破液面。
优选的，所述S50中，细胞运输保存温度保持在4度左右，运输人员在运输过程中避免距离震荡，并在规定时间内送到。
优选的，所述S304中，加磁珠之前，磁珠用培养基洗涤3次，去除保存液。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
本发明的流程简单，生产环境宽泛，存储方便，适合广泛生产。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合实例对本发明作进一步详细说明，但所举实例不作为对本发明的限定。
本发明的实施例提供一种CAR-T细胞培养流程，其中，包括以下步骤：
S10、操作前准备
S101、净化室、生物安全柜消毒完毕后，开启净化空调运行30min，生物安全柜运行稳定；从试剂间冰箱中取出细胞培养基，恢复室温；
S102、生物安全柜表面75％酒精消毒，外周血袋表面酒精消毒转入安全柜内。
S20、分离单个核细胞(PBMC)
S201、使用灭菌消毒的剪刀剪断血袋塑料管或者使用一次性注射器，把血袋内外周血转入50ml离心管中；
S202、用PBS缓冲液(磷酸缓冲盐溶液)按1∶1稀释外周血，混匀；
S203、将稀释好的血样缓慢加入室温的15ml人淋巴细胞分离液的离心管中；
S204、按照2100r/min的转数，配平离心1200g，离心20min，慢升慢降；
S205、离心完成后，离心管出现明显分层由下至上：红细胞层，粒细胞层，Ficoll层，单个核细胞层和血浆层，吸取血浆层至距白膜层5mm左右处弃之，小心吸取红细胞层以上的所有液体至离心管中，PBS稀释，与细胞悬液体积比应大于1∶3，混匀；
S206、按照1600r/min的转数，离心600g，5min，PBS重悬细胞混匀，取少量细胞计数；
S207、按照1200r/min的转数，离心300g，5min，上清液送检无菌检测。
S30、细胞培养
S301、细胞培养条件：恒温37℃，CO2浓度5％，相对饱和湿度95％，细胞培养基PH值7.2-7.4；
S302、根据细胞计数调密度2x106/ml加入培养瓶中，混匀放入C02培养箱培养2小时；
S303、取出培养瓶，轻摇，使沉降于底部的悬浮细胞浮起，培养瓶倾斜30度角，移液管吸取培养基转入离心管中，少些培养基洗培养瓶将悬浮细胞全部收集，混匀计数；
S304、根据细胞计数调整细胞浓度1.2x106/ml接种培养瓶中，加CD3/CD28磁珠，按细胞与磁珠比例为1∶3，加入IL-2(白细胞介素-2)100U/ml，混匀放入CO2培养箱培养；
S305、次日细胞培养1天，调整细胞密度至0.6x106/ml，加入病毒混匀放入CO2培养箱培养；
S306、细胞培养3天，细胞计数补加培养基，IL-2100U/ml细胞密度调整至0.6x106/ml继续培养；
S307、细胞培养5天去磁珠，细胞混匀转离心管中，在磁力架上去除磁珠，细胞计数补加培养基，IL-2100U/ml细胞密度调整至0.6x106/ml继续培养；
S308、定期观察细胞生长情况，主要观察其形态的变化，数目及增值情况，细胞碎片及杂质情况，每2-3天加液培养；
S309、根据细胞状态和临床治疗需要，培养9天时细胞数量达到要求，各项检测合格。
S40、CAR-T细胞收集
S401、根据治疗方案，取出相应细胞悬液，剩余细胞补加培养基继续培养，供再次回输；
S402、细胞悬液转入离心管中，300g离心5min；
S403、除去上清培养液，加PBS缓冲液稀释混匀，300g离心5min，弃上清，PBS缓冲液300g/min离心5min；
S404、细胞装袋，离心完成后取上清，做无菌检测，20ml生理盐水重悬细胞，100μm细胞滤网过滤，取少量细胞悬液进行细胞数量，细胞活率，革兰氏检测，内毒素检测。细胞过滤完成，转入100ml盐水袋中，加5％注射用人血白蛋白，贴上标签，并填写相关记录。
S50、细胞运输与保存
在S203中的具体方法为：用10ml移液管吸取血样，伸至分离液液面上方0.5cm处，血样自然滑落铺至分离液面上，然后轻轻加入血样，注意不要冲破液面。
在S50中，细胞运输保存温度保持在4度左右，运输人员在运输过程中避免距离震荡，并在规定时间内送到。
在S304中，加磁珠之前，磁珠用培养基洗涤3次，去除保存液。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (4)

1.一种CAR-T细胞培养流程，其特征在于，包括以下步骤：
S10、操作前准备
S101、净化室、生物安全柜消毒完毕后，开启净化空调运行30min，生物安全柜运行稳定；从试剂间冰箱中取出细胞培养基，恢复室温；
S102、生物安全柜表面75％酒精消毒，外周血袋表面酒精消毒转入安全柜内。
S20、分离单个核细胞
S201、使用灭菌消毒的剪刀剪断血袋塑料管或者使用一次性注射器，把血袋内外周血转入50ml离心管中；
S202、用PBS缓冲液按1∶1稀释外周血，混匀；
S203、将稀释好的血样缓慢加入室温的15ml人淋巴细胞分离液的离心管中；
S204、按照2100r/min的转数，配平离心1200g，离心20min，慢升慢降；
S205、离心完成后，离心管出现明显分层由下至上：红细胞层，粒细胞层，Ficoll层，单个核细胞层和血浆层，吸取血浆层至距白膜层5mm左右处弃之，小心吸取红细胞层以上的所有液体至离心管中，PBS稀释，与细胞悬液体积比应大于1∶3，混匀；
S206、按照1600r/min的转数，离心600g，5min，PBS重悬细胞混匀，取少量细胞计数；
S207、按照1200r/min的转数，离心300g，5min，上清液送检无菌检测。
S30、细胞培养
S301、细胞培养条件：恒温37℃，CO2浓度5％，相对饱和湿度95％，细胞培养基PH值7.2-7.4；
S302、根据细胞计数调密度2x106/ml加入培养瓶中，混匀放入CO2培养箱培养2小时；
S303、取出培养瓶，轻摇，使沉降于底部的悬浮细胞浮起，培养瓶倾斜30度角，移液管吸取培养基转入离心管中，少些培养基洗培养瓶将悬浮细胞全部收集，混匀计数；
S304、根据细胞计数调整细胞浓度1.2x106/ml接种培养瓶中，加CD3/CD28磁珠，按细胞与磁珠比例为1∶3，加入IL-2 100U/ml，混匀放入CO2培养箱培养；
S305、次日细胞培养1天，调整细胞密度至0.6x106/ml，加入病毒混匀放入CO2培养箱培养；
S306、细胞培养3天，细胞计数补加培养基，IL-2100U/ml细胞密度调整至0.6x106/ml继续培养；
S307、细胞培养5天去磁珠，细胞混匀转离心管中，在磁力架上去除磁珠，细胞计数补加培养基，IL-2100U/ml细胞密度调整至0.6x106/ml继续培养；
S308、定期观察细胞生长情况，主要观察其形态的变化，数目及增值情况，细胞碎片及杂质情况，每2-3天加液培养；
S309、根据细胞状态和临床治疗需要，培养9天时细胞数量达到要求，各项检测合格。
S40、CAR-T细胞收集
S401、根据治疗方案，取出相应细胞悬液，剩余细胞补加培养基继续培养，供再次回输；
S402、细胞悬液转入离心管中，300g离心5min；
S403、除去上清培养液，加PBS缓冲液稀释混匀，300g离心5min，弃上清，PBS缓冲液300g/min离心5min；
S404、细胞装袋，离心完成后取上清，做无菌检测，20ml生理盐水重悬细胞，100μm细胞滤网过滤，取少量细胞悬液进行细胞数量，细胞活率，革兰氏检测，内毒素检测。细胞过滤完成，转入100ml盐水袋中，加5％注射用人血白蛋白，贴上标签，并填写相关记录。
S50、细胞运输与保存。
2.如权利要求1所述的一种CAR-T细胞培养流程，其特征在于，所述S203的具体方法为：用10ml移液管吸取血样，伸至分离液液面上方0.5cm处，血样自然滑落铺至分离液面上，然后轻轻加入血样，注意不要冲破液面。
3.如权利要求1所述的一种CAR-T细胞培养流程，其特征在于，所述S50中，细胞运输保存温度保持在4度左右，运输人员在运输过程中避免距离震荡，并在规定时间内送到。
4.如权利要求1所述的一种CAR-T细胞培养流程，其特征在于，所述S304中，加磁珠之前，磁珠用培养基洗涤3次，去除保存液。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110452881A (zh) * 2019-07-25 2019-11-15 福建谷科生物科技有限公司 以cd4为靶点的抗体及car-t细胞的制备和应用
CN113186161A (zh) * 2021-03-24 2021-07-30 南京医科大学 快速分离超高纯度人体血液中性粒细胞的方法
WO2023280008A1 (zh) * 2021-07-06 2023-01-12 深圳赛桥生物创新技术有限公司 细胞离心装置及细胞离心、清洗与培养方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105861531A (zh) * 2016-04-21 2016-08-17 汪治宇 一种嵌合抗原受体t细胞及其制备方法
CN106317228A (zh) * 2016-09-28 2017-01-11 李华顺 一种嵌合抗原受体分子及其应用
CN106399255A (zh) * 2016-04-13 2017-02-15 李华顺 Pd-1 car-t细胞及其制备方法和应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106399255A (zh) * 2016-04-13 2017-02-15 李华顺 Pd-1 car-t细胞及其制备方法和应用
CN105861531A (zh) * 2016-04-21 2016-08-17 汪治宇 一种嵌合抗原受体t细胞及其制备方法
CN106317228A (zh) * 2016-09-28 2017-01-11 李华顺 一种嵌合抗原受体分子及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BRUCE L. LEVINE等: "Global Manufacturing of CAR T Cell Therapy", 《MOLECULAR THERAPY: METHODS & CLINICAL DEVELOPMENT》 *
HILDE ALMÅSBAK等: "CAR T Cell Therapy: A Game Changer in Cancer Treatment", 《JOURNAL OF IMMUNOLOGY RESEARCH》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110452881A (zh) * 2019-07-25 2019-11-15 福建谷科生物科技有限公司 以cd4为靶点的抗体及car-t细胞的制备和应用
CN113186161A (zh) * 2021-03-24 2021-07-30 南京医科大学 快速分离超高纯度人体血液中性粒细胞的方法
WO2023280008A1 (zh) * 2021-07-06 2023-01-12 深圳赛桥生物创新技术有限公司 细胞离心装置及细胞离心、清洗与培养方法

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