CN108728330A - 一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒 - Google Patents

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沈永华
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    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
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    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
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Abstract

本发明公开了一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒，包括盒体，盒体内固定设有衬垫，衬垫上固定设有容器孔，容器孔内固定设有EP管。本发明提供的基因编辑试剂盒使得对哺乳动物基因进行基因编辑变得更加容易与高效。用户只需要根据目的基因设计合成SgRNA序列，经简单克隆后即可获得表达Cas9酶与SgRNA的载体，能够对目的基因进行定点基因编辑。

Description

一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒。
背景技术
基因编辑(Gene Editing)技术是利用核酸酶与RNA核酸序列对生物体基因组进行剪切的技术，包括第一代的ZFN锌指酶技术，第二代的TALEN技术，以及第三代的CRISPR Cas技术。目前第三代的CRISPR Cas技术已经成为基因编辑的主流技术。
CRISPR Cas是细菌(Bacteria)与古细菌(archaea)中免疫系统的重要组成部分，主要包含具有DNA酶活性的Cas9蛋白，以及CrRNA与TracrRNA，能够结合并剪切外源噬菌体的DNA。利用经序列优化过的Cas9酶以及改造过SgRNA(兼具CrRNA与TracrRNA功能)，可以对哺乳细胞或受精卵的基因组进行定点的基因敲除或基因敲入(基因敲入时需提供供体)。与以往的利用同源重组(homologous recombination)的方法对哺乳动物基因组进行修饰相比，CRISPR Cas技术更加快速与高效，因此在基因功能研究、疾病模型构建、疾病基因治疗、生物遗传育种等诸多方面具有重要的应用价值。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供一种基于CRISPR Cas技术的高效可靠、使用简便的哺乳动物细胞基因编辑载体构建试剂盒。
为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：
本发明一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒，包括盒体，所述盒体内固定设有衬垫，所述衬垫上固定设有容器孔，所述容器孔内固定设有EP管。
作为本发明的一种优选技术方案,所述盒体的两侧均固定设有把手。
作为本发明的一种优选技术方案,所述容器孔固定设置有三个，且所述容器孔均匀排列在所述衬垫上。
作为本发明的一种优选技术方案,三个所述EP管内分别固定装有PHMG-SgRNA线性化质粒、PHMG-SgRNA测序引物和PHMG-SgRNA-Tet的参照质粒。
本发明所达到的有益效果是：本发明提供的基因编辑试剂盒使得对哺乳动物基因进行基因编辑变得更加容易与高效。用户只需要根据目的基因设计合成SgRNA序列，经简单克隆后即可获得表达Cas9酶与SgRNA的载体，能够对目的基因进行定点基因编辑。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：
图1是本发明的主观结构示意图；
图中：1、盒体；2、衬垫；3、容器孔；4、EP管；5、把手。
具体实施方式
以下结合附图对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
如图1所示,本发明提供一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒，包括盒体1，盒体1内固定设有衬垫2，衬垫2上固定设有容器孔3，容器孔3内固定设有EP管4。
进一步，盒体1的两侧均固定设有把手5，方便通过把手提携试剂盒，方便携带，同时便于在搬运过程中保持EP管的平衡，方便使用。
容器孔3固定设置有三个，且容器孔3均匀排列在衬垫2上，方便EP管4的取放，便于使用。
三个EP管4内分别固定装有PHMG-SgRNA线性化质粒、PHMG-SgRNA测序引物和PHMG-SgRNA-Tet1的参照质粒，方便进行基因编辑，便于使用。
本发明提供的基因编辑试剂盒使得对哺乳动物基因进行基因编辑变得更加容易与高效。用户只需要根据目的基因设计合成SgRNA序列，经简单克隆后即可获得表达Cas9酶与SgRNA的载体，能够对目的基因进行定点基因编辑。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒，包括盒体(1)，其特征在于，所述盒体(1)内固定设有衬垫(2)，所述衬垫(2)上固定设有容器孔(3)，所述容器孔(3)内固定设有EP管(4)。
2.根据权利要求1所述的一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒，其特征在于，所述盒体(1)的两侧均固定设有把手(5)。
3.根据权利要求1所述的一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒，其特征在于，所述容器孔(3)固定设置有三个，且所述容器孔(3)均匀排列在所述衬垫(2)上。
4.根据权利要求1所述的一种用于哺乳动物细胞基因编辑载体构建的试剂盒，其特征在于，三个所述EP管(4)内分别固定装有PHMG-SgRNA线性化质粒、PHMG-SgRNA测序引物和PHMG-SgRNA-Tet1的参照质粒。
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