CN108707563A - 复合发酵菌剂及鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了复合发酵菌剂和鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法，包括：1)将兼性厌氧的芽孢杆菌，耐氧性厌氧的乳杆菌，专性厌氧的双歧杆菌混合组成复合发酵菌剂；2)将玉米淀粉，酒石酸铵，磷酸氢二钠，葡萄糖，复合发酵菌剂和水混合，搅拌均匀，活化复合发酵菌剂；3)将鱼贝类、水产品加工下脚料粉碎成匀浆，去除杂质，计量加入发酵罐内；将已经活化的复合发酵菌剂按匀浆重量的0.2‑5％加入于发酵罐内，与匀浆混合均匀；将发酵罐密封，静置在常温下发酵10‑15天后得到发酵醪；4)将发酵醪用过滤器进过滤，得到的发酵液即为鱼蛋白氨基酸发酵液；5)在鱼蛋白氨基酸发酵液中加入铜、铁、锰、锌、硼、钼微量元素至少一种制得所需的鱼蛋白氨基酸水溶肥。

Description

复合发酵菌剂及鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法

技术领域

本发明涉及发酵菌剂及水溶肥生产工艺技术领域，具体涉及复合发酵菌剂以及用鱼类等水产品及加工下脚料为原料，利用生物酵解技术制备鱼蛋白氨基酸并制成水溶肥的方法。

背景技术

使用传统肥料造成肥料流失、水体富营养化、破坏土壤结构及土壤肥力下降的问题较为突出。施用有机肥能够提高土壤有机质含量，改善土壤结构，是发展绿色农业、有机农业重要组成。随着我国海洋渔业及水产品加工业的发展，一些数量庞大且低值的鱼类及水产品加工下脚料也逐渐成为重要的有机肥源。这些高蛋白的水产品原料可以被加工制备成鱼蛋白氨基酸水溶肥。

目前，利用鱼贝类等动物蛋白质作为原料制备氨基酸一般有两种方法：酸碱水解法和酵解法。酸碱水解法，采用盐酸、硫酸或者烧碱将原料蛋白进行水解处理，然后经过中和、浓缩等工艺得到氨基酸，但酸碱水解法会使一些重要氨基酸遭到破坏，并且生命活性物质如核苷酸、多肽等含量较低；酵解法，按照一定的工艺流程，在原料中加入氯化钠盐渍防腐，加入蛋白酶，并接入发酵菌种进行发酵，这种工艺较酸碱水解法更为安全，温和，更适合有机农业上的应用。但利用盐渍法手段防腐会使产品的含盐量偏高，不利于农作物生长。

CN 104557339A专利公开了一种鱼蛋白氨基酸水溶肥料的制备方法，其特征在于将水产品加工下脚料或深海低值鱼虾粉碎打成鱼浆，与水混合，加入酵母菌、乳酸杆菌和蛋白酶，在40-50℃的温度下，分别经过持续通气和间隔通气，发酵3-8天得到鱼蛋白氨基酸水溶肥。

上述专利虽然未采用盐渍防腐，但还是存在如下问题：1.蛋白酶分解蛋白质的适宜温度在55-65℃，而酵母菌、乳酸杆菌等菌种耐热温度在50℃以下。为解决这一矛盾，采用在酵解温度40-50℃下加大蛋白酶用量的方法。蛋白酶的用量甚至提高到了原料总重量的25％，这显然会导致产品成本的大幅提高。

2.采用的酵母菌为兼性好氧型，发酵方式为有氧发酵，发酵期间须要有空气通入并搅拌均匀以补充发酵菌生长所需的氧气。在通入空气并搅拌时，物料会因为与外界微生物接触而被污染，并且原料蛋白质、氨基酸及其它含氮物质在微生物的作用下容易被分解为氨、二甲胺、吲哚、硫化氢、组胺等小分子产物而腐败变质；同时这些小分子产物带有恶臭且易挥发，致使发酵过程容易污染环境。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种常温即可发酵，生产周期短，且采用生物防腐，含盐度低的鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法，该方法无需额外添加蛋白酶，并且富含有益微生物。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：复合发酵菌剂，其特征在于包括兼性厌氧的芽孢杆菌，耐氧性厌氧的乳杆菌和专性厌氧的双歧杆菌。

本发明进一步的优选方案为：所述的兼性厌氧的芽孢杆菌取自枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌中的一种或多种；所述的耐氧性厌氧的乳杆菌取自嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌、干酪乳杆菌中的一种或多种；所述专性厌氧的双歧杆菌取自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌和长双歧杆菌中的一种或多种。

本发明进一步的优选方案为：所述的兼性厌氧的芽孢杆菌占50％-70％(重量比)，所述耐氧性厌氧的乳杆菌占20％-30％(重量比)，所述专性厌氧的双歧杆菌占10％-20％(重量比)。

本发明进一步的优选方案为：所述兼性厌氧的芽孢杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g，所述的耐氧性厌氧的乳杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g，所述的专性厌氧的双歧杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g。

本发明进一步的优选方案为：一种鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法：

1)将兼性厌氧的芽孢杆菌，耐氧性厌氧的乳杆菌，专性厌氧的双歧杆菌混合组成复合发酵菌剂；

2)将玉米淀粉，酒石酸铵，磷酸氢二钠，葡萄糖，所述的复合发酵菌剂和水混合，在25-35℃的温度下搅拌均匀，活化所述的复合发酵菌剂3-5小时；

3)将鱼贝类、水产品加工下脚料用粉碎机粉碎成匀浆，去除杂质后，计量加入发酵罐内；将已经活化的所述复合发酵菌剂按所述的匀浆重量的0.2-5％加入于发酵罐内，与所述的匀浆混合并搅拌均匀；将发酵罐密封以隔绝空气，静置在常温下发酵10-15天后得到发酵醪；

4)将步骤3)中得到的发酵醪用过滤器进行固液分离，得到发酵液与发酵渣，所述的发酵液即为鱼蛋白氨基酸发酵液；

5)在所述的鱼蛋白氨基酸发酵液中加入铜、铁、锰、锌、硼、钼微量元素至少一种制得所需的鱼蛋白氨基酸水溶肥。

本发明进一步的优选方案为：所述的兼性厌氧的芽孢杆菌取自枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌中的一种或多种；所述的耐氧性厌氧的乳杆菌取自嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌、干酪乳杆菌中的一种或多种；所述专性厌氧的双歧杆菌取自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌和长双歧杆菌中的一种或多种。

本发明进一步的优选方案为：所述的兼性厌氧的芽孢杆菌占50％-70％(重量比)，所述耐氧性厌氧的乳杆菌占20％-30％(重量比)，所述专性厌氧的双歧杆菌占10％-20％(重量比)。

本发明进一步的优选方案为：步骤2)中所述玉米淀粉占0--15％(重量比)，所述的酒石酸铵占0--5％(重量比)，所述的磷酸氢二钠占0--2％(重量比)，所述的葡萄糖占1--5％(重量比)，所述的复合发酵菌剂占0.3--3％(重量比)和所述的水占70-98.7％ (重量比)。

本发明进一步的优选方案为：步骤3)中所述的常温为为10-30℃。

本发明进一步的优选方案为：所述兼性厌氧的芽孢杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g，所述的耐氧性厌氧的乳杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g，所述的专性厌氧的双歧杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g。

与现有技术相比，本发明的优点是：复合发酵菌剂为兼性厌氧的芽孢杆菌，耐氧性厌氧的乳杆菌和专性厌氧的双歧杆菌混合组成。发酵时，芽孢杆菌能够迅速消耗环境中的游离氧，造成环境低氧，从而促进上述复合发酵菌剂中的乳杆菌、双歧杆菌等厌氧益生菌的生长。乳杆菌和双歧杆菌生长时产生的化学物质会间接抑制腐败菌生长；芽孢杆菌生长时会产生抑菌成分，且能够自身合成蛋白酶、脂肪酶等，能在常温下快速分解物料中的蛋白质、脂肪，无需额外添加蛋白酶等来帮助分解。

另外，1.本发明制备鱼蛋白氨基酸水溶液的方法选用不同的发酵菌剂科学配比后组成复合发酵菌剂，在物料发酵时起到协同作用，常温即可发酵，生产周期短，且该方法成本低廉，能够简化生产工艺，且常温发酵有益菌得以大量保留；2.且所加入的这些菌种活性强、性能稳定，无需额外加入蛋白酶即可在常温下快速分解物料中的蛋白质和脂肪；3.发酵过程中无需通入空气搅拌使发酵菌生长，避免外界微生物污染发酵环境；4.复合发酵菌剂中的所有菌种在生长过程中都会产生抑菌成分，因此体系无需加入食盐来防腐。

附图说明

图1为鱼蛋白氨基酸水溶肥制备方法的流程图。

具体实施方式

以下用具体实施例对本发明作进一步详细描述。但所举实例不作为对本发明的限定。

实施例1：

1.取枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌60％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；嗜酸乳杆菌或植物乳杆菌20％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；两歧双歧杆菌或短双歧杆菌20％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)。将以上三种菌混合组成复合发酵菌剂；

2.取玉米淀粉10％(重量比)；酒石酸铵5％(重量比)；磷酸氢二钠1％(重量比)；葡萄糖5％(重量比)；复合发酵菌剂3％(重量比)；水76％(重量比)。将以上原料搅拌均匀，控制温度在30℃，活化复合发酵菌剂5小时。

3.将低值鱼类、水产品加工下脚料用粉碎机粉碎成匀浆，去除杂质后，计量加入发酵罐内；将已激活的复合发酵菌剂按匀浆总重量3％的量加入于发酵罐内，搅拌均匀；将发酵罐密封以隔绝空气，放置在常温下发酵10天，期间不予搅拌，以保持稳定的发酵环境。常温温度为10-30℃。发酵完成后得到发酵醪。

4.将步骤3中的发酵醪用过滤器过滤，得到发酵液与发酵渣，发酵液为棕黄色澄清液体，该发酵液即鱼蛋白氨基酸发酵液；.检测该鱼蛋白氨基酸发酵液的pH值为5.8，所含游离氨基酸含量为120.5g/L。

5.取发酵液10L，照中华人民共和国农业行业标准NY 1429-2010(微量元素液体型)，加入EDTA螯合铁(铁含量≥13％)750g，EDTA螯合锌(锌含量≥15％)250g，EDTA 螯合锰(锰含量13≥％)250g，EDTA螯合铜(铜含量≥15％)250g，搅拌使微量元素溶解于鱼蛋白氨基酸发酵液中即得到所需的鱼蛋白氨基酸水溶肥(微量元素液体型)。

实施例2

1.取枯草芽孢杆菌或巨大芽孢杆菌70％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；嗜酸乳杆菌或短乳杆菌15％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；两歧双歧杆菌或长双歧杆菌15％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)。将以上三种菌混合组成复合发酵菌剂。

2.取玉米淀粉15％(重量比)；酒石酸铵3％(重量比)；磷酸氢二钠0.5％(重量比)；葡萄糖5％(重量比)；复合发酵菌剂2.5％(重量比)；水74％(重量比)。将以上原料搅拌均匀，控制温度在32℃，活化复合发酵菌剂3小时。

3.将低值鱼类、水产品加工下脚料用粉碎机粉碎成匀浆，去除杂质后，计量加入发酵罐内；将已激活的复合发酵菌剂按匀浆总重量5％的量加入于发酵罐内，搅拌均匀；将酵罐密封以隔绝空气，放置在常温下发酵12天，期间不予搅拌，以保持稳定的发酵环境；常温温度为10-30℃。发酵完成后得到发酵醪。

4.将步骤3中得到的发酵醪用过滤器过滤得到发酵液与发酵渣，发酵液为棕黄色澄清液体，该发酵液即鱼蛋白氨基酸发酵液。检测该鱼蛋白氨基酸发酵液的pH值为5.5；所含游离氨基酸含量为112g/L。

5.取发酵液10L，照中华人民共和国农业行业标准NY 1429-2010(微量元素液体型)，加入氨基酸铜(铜含量≥21％)150g，氨基酸铁(铁≥17％)300g，氨基酸锰(锰≥22％)140g，氨基酸锌(锌≥22％)400g，搅拌使微量元素溶解于鱼蛋白氨基酸发酵液即得含氨基酸水溶肥料(微量元素液体型)。

实施例3

1.取枯草芽孢杆菌或巨大芽胞杆菌65％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；嗜酸乳杆菌或干酪乳杆菌25％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；两歧双歧杆菌或长双歧杆菌10％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)。将以上三种菌混合组成复合发酵菌剂。

2.取玉米淀粉8％(重量比)；酒石酸铵2％(重量比)；磷酸氢二钠0.8％(重量比)；葡萄糖4％(重量比)；复合发酵菌剂1.2％(重量比)；水84％(重量比)。将以上原料搅拌均匀，控制温度在35℃，活化菌种3小时。

3.将低值鱼类、水产品加工下脚料用粉碎机粉碎成匀浆，去除杂质后计量加入发酵罐内；将已激活的复合菌剂按匀浆总重量5％的量加入于发酵罐内，搅拌均匀；将发酵罐密封以隔绝空气，放置在常温下发酵15天，期间不予搅拌，以保持稳定的发酵环境；常温温度为10-30℃。发酵完成后得到发酵醪。

4.将步骤3中的发酵醪用过滤器过滤，得到发酵液与发酵渣，该发酵液即鱼蛋白氨基酸发酵液。检测该鱼蛋白氨基酸发酵液的pH值为6；所含游离氨基酸含量为105g/L。

5.取发酵液10L，照中华人民共和国农业行业标准NY 1429-2010(微量元素液体型)，加入氨基酸铜(铜含量≥21％)120g，氨基酸铁(铁≥17％)450g，氨基酸锰(锰≥22％)100g，氨基酸锌(锌≥22％)360g，搅拌使微量元素溶解于鱼蛋白氨基酸发酵液即得含氨基酸水溶肥料(微量元素液体型)

实施例4

1.取枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌50％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；嗜酸乳杆菌或植物乳杆菌30％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；两歧双歧杆菌或短双歧杆菌20％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)。将以上三种菌混合组成复合发酵菌剂；

2.取磷酸氢二钠2％(重量比)；葡萄糖1％(重量比)；复合发酵菌剂0.3％(重量比)；水96.7％(重量比)。将以上原料搅拌均匀，控制温度在30℃活化复合发酵菌剂5小时。

3.将低值鱼类、水产品加工下脚料用粉碎机粉碎成匀浆，去除杂质后，计量加入发酵罐内；将已激活的复合发酵菌剂按匀浆总重量0.2％的量加入于发酵罐内，搅拌均匀；将发酵罐密封以隔绝空气，放置在常温下发酵15天期间不予搅拌，以保持稳定的发酵环境。常温温度为10-30℃。发酵完成后得到发酵醪。

4.将步骤3中的发酵醪用过滤器过滤，得到发酵液与发酵渣，发酵液为棕黄色澄清液体，该发酵液即鱼蛋白氨基酸发酵液；.检测该鱼蛋白氨基酸发酵液的pH值为5.6，游离氨基酸含量为100.1g/L。

5.取发酵液10L，照中华人民共和国农业行业标准NY 1429-2010(微量元素液体型)，加入EDTA螯合铁(铁含量≥13％)750g，EDTA螯合锌(锌含量≥15％)250g，EDTA 螯合锰(锰含量13≥％)250g，EDTA螯合铜(铜含量≥15％)250g，搅拌使微量元素溶解于鱼蛋白氨基酸发酵液中即得到所需的鱼蛋白氨基酸水溶肥(微量元素液体型)。

实施例5

1.取枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌55％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；嗜酸乳杆菌或植物乳杆菌25％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)；两歧双歧杆菌或短双歧杆菌20％(重量比，活菌含量≥100×108CFU/g)。将以上三种菌混合组成复合发酵菌剂；

2.取玉米淀粉10％(重量比)；酒石酸铵5％(重量比)；葡萄糖3％(重量比)；复合发酵菌剂3％(重量比)；水79％(重量比)。将以上原料搅拌均匀，控制温度在 25℃活化复合发酵菌剂4小时。

3.将低值鱼类、水产品加工下脚料用粉碎机粉碎成匀浆，去除杂质后，计量加入发酵罐内；将已激活的复合发酵菌剂按匀浆总重量3％的量加入于发酵罐内，搅拌均匀；将发酵罐密封以隔绝空气，放置在常温下发酵10天，期间不予搅拌，以保持稳定的发酵环境。常温温度为10-30℃。发酵完成后得到发酵醪。

4.将步骤3中的发酵醪用过滤器过滤，得到发酵液与发酵渣，发酵液为棕黄色澄清液体，该发酵液即鱼蛋白氨基酸发酵液；.检测该鱼蛋白氨基酸发酵液的pH值为5.7，游离氨基酸含量为118.2g/L。

5.取发酵液10L，照中华人民共和国农业行业标准NY 1429-2010(微量元素液体型)，加入EDTA螯合铁(铁含量≥13％)750g，EDTA螯合锌(锌含量≥15％)250g，EDTA 螯合锰(锰含量13≥％)250g，EDTA螯合铜(铜含量≥15％)250g，搅拌使微量元素溶解于鱼蛋白氨基酸发酵液中即得到所需的鱼蛋白氨基酸水溶肥(微量元素液体型)。

上述实施例中的低值鱼贝类包括低值鱼类和低值贝类，低值鱼类包括鲐鱼、沙丁鱼、鳀鱼等；低值贝类包括蚬、珍珠贝、扇贝、文蛤等。水产品加工下脚料包括鱼类、贝类、甲壳类、硬骨鱼类或海藻类加工后残余的废料。粉碎机可以采用现有技术中普遍采用的机器设备，此不赘述。

按上述实施例配比制成的复合发酵菌剂制备鱼蛋白氨基酸发酵液时，因为菌种多样且各菌种活性较强，可产生大量抑菌物质和蛋白酶、脂肪酶等，发酵温度只需常温即可，该常温为10-30℃，无需额外加入蛋白酶，无需通入空气且制备周期短，简化了工艺同时也降低了成本。复合发酵菌剂中的芽孢杆菌是一种兼性厌氧菌，在有氧的环境下进行有氧呼吸大量繁殖，在无氧的环境下进行无氧呼吸一般不繁殖，生命力强，在发酵体系中能迅速消耗环境中的游离氧，造成环境低氧，从而促进上述复合发酵菌剂中的乳杆菌、双歧杆菌等厌氧益生菌的生长，产生乳酸、丙酸、乙酸等有机酸类，降低肠道pH值，间接抑制其它腐败菌生长。减少其代谢产物中的氨、硫化氢、蚓跺及粪臭素等有害物质的生成；芽孢杆菌生长过程中产生的伊枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、杆菌肽等多肽类活性物质和生物表面活性素等，对致病菌有明显的抑制作用，因此无需额外添加大量食盐来防腐；芽孢杆菌自身能够合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等，在环境中能大量分解有机质，将其分解为小分子有机酸、氨基酸等，因此无需额外添加蛋白酶来帮助有机质分解。

本发明方法制备的鱼蛋白氨基酸水溶肥由于采用常温发酵，有益菌种能得以大量保留。产品施用农田时，所含的微生物能在植物根系周围快速定植并优势生长，有效调节根系微生态环境，防治作物多种真菌病害，提高作物抗病、防病、防虫能力。如其分泌大量高活性几丁质酶可以快速清除致病菌，加快根瘤菌和根系的生长发育，促进作物根系发达。另外，产品所富含的有益微生物自身产生的多种酶可促使土壤中的有机质分解成腐殖质，增加土壤养分，刺激作物生长。这些有益微生物还可产生大量细胞分裂素，能增强农作物细胞活力，加快作物新陈代谢，增花增果，提升口感，并对作物因重茬和其它病害引起的根系小、根瘤少、植株矮小、枯黄、花叶、落叶、落花等生理病害有极强的预防效果。因此氨基酸水溶肥同时也是一款优秀的微生物活体肥料。

本方法制得的氨基酸水溶肥中的氨基酸含量较高，氨基酸可以被作物直接用来合成蛋白质、核酸及个别内源激素。植物吸收本发明中的氨基酸，代谢功能增强，叶色浓绿，茎杆粗壮，提升了植物的光合作用并提早开花和坐果，有效促进作物可溶性固形物累积，改善植物品质，提高了商品等级。而且本发明采用复合发酵菌剂常温酵解鱼蛋白，可生成种类丰富的鱼蛋白氨基酸、及其他天然有机质，并富含鱼类含有的维生素、生物刺激素及氮、磷、钾、硼、锌、铁、镁等元素，营养丰富全面；且本发明生产出来的鱼蛋白氨基酸水溶肥含有天然生物刺激素、微生物活菌和各种天然活性物质，可有效地维护植物细胞的稳定，促使植物叶片厚实，表面细胞排列紧密，增强植物生理机能和抗病抗逆能力，病菌和害虫不易侵入，减少农药使用量；将上述鱼蛋白氨基酸水溶肥施入土壤后，土壤中的有益微生物以鱼蛋白氨基酸等有机物质为载体迅速繁殖，促使土壤中的有机质分解成腐殖质，增加土壤养分，刺激作物生长。本有益效果的具体实施例见下：

应用案例1：

试验田设在辽宁省东港市新城区华正生态农业有限公司园区一栋草莓温室。

试验田条件：温室东西长130m，南北宽10.5m，实栽面积2亩。土地棕壤土，肥力中等；种植品种为日本红颜；大垄双行，单株栽植，行距85cm，株距17cm，亩植9500 株；定植前亩施普通商品有机肥500kg、磷酸二铵25kg、硫酸钾15kg；2016年9月1 日定植，10月5日扣棚膜、地膜开始升温管理。其他管理措施通常进行。

对照(CK)区为相同建设标准、相同生产面积、相同土壤条件、相同管理人员的后栋温室。除粪肥管理外，其他管理措施与试验棚相同。

试验处理：

试验棚在2016年12月10日、12月30日、2017年1月18日、2月6日、2月20 日、3月7日、3月25日分期冲施用本发明实施例1产品一次，每次亩施10L，随滴灌施用，共7次；2016年11月20日至2017年4月末，每15天左右亩喷施40ml本发明实施例1产品，共12次。

对照棚与试验棚同时施用以色列的海法(Haifa)化学工业公司“魔力丰”冲施肥和叶面肥，追肥投入与试验棚相仿。

实验结果：

本发明实施例1产品对草莓生育期影响：试验棚与对照棚的草莓相比，草莓株态稳健不徒长，叶色深绿有亮光，叶片变厚，叶梗和花梗较粗，根系明显发达，肉眼能看出明显差别。

本发明实施例1产品对草莓生育期影响调查表(表一)：

本发明实施例1产品对草莓长势及果品品质影响：草莓硬度是影响草莓保鲜运输和货架寿命的重要条件，施用本发明实施例1产品对草莓长势及果品品质影响的草莓硬度明显好于对照，耐运储，货架寿命延长。

本发明实施例1产品对草莓长势及果品品质影响调查表(表二)

发明实施例1产品对草莓产量及效益作用：本发明实施例1产品在本次试验中肥效显著。自进入1月中旬后，试验与对照棚一般都是隔一天采摘销售一次，每次试验棚比对照棚都多采摘10-15公斤，并且小果、畸形果明显减少。

试验棚总产量4640公斤，总销售收入83500元，分别比对照棚增产720公斤、13000元；折亩产2900公斤、亩收入52200元，分别比对照亩增产450公斤、增收8100元，增产率18.4％。

本发明实施例1产品对草莓产量及效益作用(表三)

施用本发明实施例1产品的草莓平均单果重36克，比对照多3克，果个均匀，畸形果少，商品率高于对照2％以上，并且果面色泽亮红，芳香味浓，甜度增加，可溶性固形物含量比对照(11.1％)提高0.9％、口感爽口。

应用案例2：

试验田设在隶属云南省楚雄彝族自治州元谋县黄瓜园镇。

试验田条件：试验区实栽面积10亩。肥力中等；种植品种为粉硬大果，无限生长型，株行距为(60-65cm×50cm)定植2000—2200株/亩。对照(CK)区为相同条件。

试验处理：

试验设置两个处理：每个处理5亩，随机安排，小区总面积10亩。

处理1：试验田在普通滴灌肥基础上加入本发明实施例2产品：先将普通滴灌肥充分溶解，再将本发明实施例2产品以每亩用量8-10L加入普通滴灌肥溶液，随水滴灌根部，分别在花期1次、初果期、果实膨大期至收获期每隔10-15天1次，全生育期共6次。处理2(CK)：对照田施用普通滴灌肥再加当地常用水溶肥，其他施肥措施同处理1。

实验结果：

本发明实施例2产品对西红柿长势及果品品质影响：试验田与对照田的西红柿相比，西红柿株态稳健不徒长，叶色深绿有亮光，叶片变厚，叶梗和花梗较粗，根系明显发达。

本发明实施例2产品对西红柿长势及果品品质影响调查表(表一)

施用本发明实施例2产品的西红柿平均单果重265克，比对照多13克，果个均匀，畸形果少，裂果少，商品率高于对照，并且果面色泽亮红，口感酸甜。硬度明显好于对照，耐运储，货架寿命延长。

本发明实施例2产品对西红柿产量及效益作用：

本发明实施例2产品对西红柿产量及效益作用(表二)

本发明实施例2产品在本次试验中肥效显著。试验田总产量64000公斤，总销售收入115200元，分别比对照棚增产45000公斤、25950元；折亩产12800公斤、亩收入 23040元，分别比对照亩增产900公斤、增收5190元，增产率13.4％，增收29％。

应用案例3：

试验田设在浙江省宁波市象山“红美人”种植基地

试验田条件：地势平坦，肥力均匀，钢架大棚种植，种植面积100亩，选取基地内 10亩棚区。种植品种：高端柑橘品种“红美人”。对照(CK)区为相同条件。

试验处理：

试验设置两个处理：

处理1：试验田每亩施用普通底肥约2吨左右作为冬肥穴施。2月底每亩用本发明实施例3产品10L稀释200倍液冲施。5月中下旬、7月初、11月下旬分别用本发明实施例3产品以每亩10L量加普通大量元素水溶肥(20+20+20)5kg稀释200-250倍液冲施。此后每隔半月至20施一次。

处理2：对照田除了未使用本发明实施例3产品外，其余施肥方法同试验田。

验调查内容与方法：

在试验田与对照田中各均匀布置5处重复取样及田间生育性状观察点，每处选取5株柑橘，进行观察比较。

实验结果：

本发明实施例3产品对“红美人”柑橘长势及果品品质影响：试验田施用本发明实施例3产品，“红美人”柑橘叶片颜色深绿，叶片厚且有光泽，生长整齐，新稍粗壮，坐果率高，果形好，果实转色均匀、色泽一致、果实光亮；最高糖度达20度，平均糖度达17度。

对照田未施本发明实施例3产品，“红美人”柑橘叶色浅、叶片薄，新稍不整齐，果实形状、色泽、光泽，果实品种特有风味、糖度等商品指标均弱于试验田。

本发明实施例3产品对“红美人”柑橘长势及果品品质影响调查表(表一)

本发明实施例3产品对“红美人”柑橘产量及效益作用：施用本发明实施例3产品的处理比CK产值明显提高，增收22.3％以上。

本发明实施例3产品对“红美人”柑橘产量及效益作用(表二)：

分析讨论：

本发明实施例1产品、例2产品、例3产品增产效果突出的原因，主要有以下几方面：

本发明采用复合发酵菌剂常温酵解鱼蛋白，可生成种类丰富的鱼蛋白氨基酸、及其他天然有机质，并富含鱼类含有的维生素、生物刺激素及氮、磷、钾、硼、锌、铁、镁等元素，营养丰富全面。

氨基酸可以被作物直接用来合成蛋白质、核酸及个别内源激素。植物吸收本发明实施例产品中的氨基酸，代谢功能增强，叶色浓绿，茎杆粗壮，提升了植物的光合作用并提早开花和坐果,有效促进作物可溶性固形物累积，改善植物品质，提高了商品等级。

本发明实施例产品含有天然生物刺激素、微生物活菌和各种天然活性物质，可有效地维护植物细胞的稳定，促使植物叶片厚实，表面细胞排列紧密，增强植物生理机能和抗病抗逆能力，病菌和害虫不易侵入，减少农药使用量。

本发明实施例产品施入土壤后,土壤中的有益微生物以鱼蛋白氨基酸等有机物质为载体迅速繁殖，促使土壤中的有机质分解成腐殖质，增加土壤养分，刺激作物生长。

结论：试验结果表明，应用本发明实施例产品，植物叶片增厚，叶片表面有光泽，植株长势稳健旺盛，不徒长、不早衰，果个均匀，畸形果少，颜色艳丽，口感佳，果实品质明显提高，产量显著增加，并且施用方便、对土壤和环境无污染，可望在农业生产中推广应用。

以上对本发明所提供的复合发酵菌剂及用复合发酵菌剂制得的鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明及核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (10)

1.复合发酵菌剂，其特征在于包括兼性厌氧的芽孢杆菌，耐氧性厌氧的乳杆菌和专性厌氧的双歧杆菌。

2.根据权利要求1所述的复合发酵菌剂，其特征在于所述的兼性厌氧的芽孢杆菌取自枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌中的一种或多种；所述的耐氧性厌氧的乳杆菌取自嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌、干酪乳杆菌中的一种或多种；所述专性厌氧的双歧杆菌取自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌和长双歧杆菌中的一种或多种。

3.根据权利要求1或2所述的复合发酵菌剂，其特征在于所述的兼性厌氧的芽孢杆菌占50％-70％(重量比)，所述耐氧性厌氧的乳杆菌占20％-30％(重量比)，所述专性厌氧的双歧杆菌占10％-20％(重量比)。

4.根据权利要求1或2所述的复合发酵菌剂，其特征在于所述兼性厌氧的芽孢杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g，所述的耐氧性厌氧的乳杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g，所述的专性厌氧的双歧杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g。

5.一种鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法：

1)将兼性厌氧的芽孢杆菌，耐氧性厌氧的乳杆菌，专性厌氧的双歧杆菌混合组成复合发酵菌剂；

2)将玉米淀粉，酒石酸铵，磷酸氢二钠，葡萄糖，所述的复合发酵菌剂和水混合，在25-35℃的温度下搅拌均匀，活化所述的复合发酵菌剂3-5小时；

3)将鱼贝类、水产品加工下脚料用粉碎机粉碎成匀浆，去除杂质后，计量加入发酵罐内；将已经活化的所述复合发酵菌剂按所述的匀浆重量的0.2-5％加入于发酵罐内，与所述的匀浆混合并搅拌均匀；将发酵罐密封以隔绝空气，静置在常温下发酵10-15天后得到发酵醪；

4)将步骤3)中得到的发酵醪用过滤器进行固液分离，得到发酵液与发酵渣，所述的发酵液即为鱼蛋白氨基酸发酵液；

5)在所述的鱼蛋白氨基酸发酵液中加入铜、铁、锰、锌、硼、钼微量元素至少一种制得所需的鱼蛋白氨基酸水溶肥。

6.根据权利要求5所述的一种鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法，其特征在于所述的兼性厌氧的芽孢杆菌取自枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌中的一种或多种；所述的耐氧性厌氧的乳杆菌取自嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌、干酪乳杆菌中的一种或多种；所述专性厌氧的双歧杆菌取自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌和长双歧杆菌中的一种或多种。

7.根据权利要求5所述的一种鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法，其特征在于所述的兼性厌氧的芽孢杆菌占50％-70％(重量比)，所述耐氧性厌氧的乳杆菌占20％-30％(重量比)，所述专性厌氧的双歧杆菌占10％-20％(重量比)。

8.根据权利要求5所述的一种鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法，其特征在于步骤2)中所述玉米淀粉占0--15％(重量比)，所述的酒石酸铵占0--5％(重量比)，所述的磷酸氢二钠占0--2％(重量比)，所述的葡萄糖占1--5％(重量比)，所述的复合发酵菌剂占0.3--3％(重量比)和所述的水占70-98.7％(重量比)。

9.根据权利要求5所述的一种鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法，其特征在于步骤3)中所述的常温为为10-30℃。

10.根据权利要求5所述的一种鱼蛋白氨基酸水溶肥的制备方法，其特征在于所述兼性厌氧的芽孢杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g，所述的耐氧性厌氧的乳杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g，所述的专性厌氧的双歧杆菌中所含活菌含量≥100×108CFU/g。