CN108703949A - 一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法 - Google Patents

一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108703949A
CN108703949A CN201810577201.6A CN201810577201A CN108703949A CN 108703949 A CN108703949 A CN 108703949A CN 201810577201 A CN201810577201 A CN 201810577201A CN 108703949 A CN108703949 A CN 108703949A
Authority
CN
China
Prior art keywords
indigo red
preparation
smedds
indigo
delivery system
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810577201.6A
Other languages
English (en)
Inventor
张传辉
杨荣平
闫丹
王云红
周文杰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chongqing Academy of Chinese Materia Medica
Original Assignee
Chongqing Academy of Chinese Materia Medica
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chongqing Academy of Chinese Materia Medica filed Critical Chongqing Academy of Chinese Materia Medica
Priority to CN201810577201.6A priority Critical patent/CN108703949A/zh
Publication of CN108703949A publication Critical patent/CN108703949A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/44—Oils, fats or waxes according to two or more groups of A61K47/02-A61K47/42; Natural or modified natural oils, fats or waxes, e.g. castor oil, polyethoxylated castor oil, montan wax, lignite, shellac, rosin, beeswax or lanolin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明属于以特殊物理形状为特征的医药配制品技术领域，公开了一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法，取1944CS、EL、Trans P加入靛玉红原料药，37℃以2000r·min‑1涡旋混匀，初乳12000r·min‑1高速剪切5次，每次1.0min；于12000Psi下分别循环均质8次，放至室温室，取出，10000r/min离心10min，称取上层清乳即得。本发明采用SMEDDS技术对靛玉红进行增溶促渗研究，提高其口服生物利用度，解决靛玉红的制剂难点；采用Box‑Behnken效应面法对处方进行优化研究，以高压均质法对纳米级靛玉红液体自微乳制剂(L‑SMEDDS)进行了研究，与自微乳制剂粒径相比，显著降低。

Description

一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法
技术领域
本发明属于以特殊物理形状为特征的医药配制品技术领域，尤其涉及一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法。
背景技术
靛玉红已上市药物为靛玉红片，主要以药物原料药形式入药。但由于药物为脂溶性成分存在口服利用率低，起效缓慢的问题，很大程度的限制了该制剂的临床应用。目前，针对对靛玉红的研究主要集中在增加溶解度，提高溶出度，提高药物的渗透能力等领域，主要以提高靛玉红生物利用度，克服其制剂学难点为主，靛玉红增溶技术较少，偶见固体分散体，胶束，混悬剂等报道。自乳化释药系统是由药物、油相、表面活性剂和助表面活性剂组成的均一体系，经水溶液稀释后，温和条件下搅拌，即生成O/W型乳剂，具有增加药物溶解度、促进药物渗透吸收、提高其口服相对生物利用度等特点，是提高水难溶性和脂溶性药物溶解度的有效途径之一。
综上所述：靛玉红虽然有明确的药理作用，但由于靛玉红为一双吲哚生物碱类药物，其水溶性差，口服生物利用度低，起效缓慢，服药量大患者顺应性差，极大地限制了其临床应用，给靛玉红药物的研发带来了巨大的问题，故而亟须开发对靛玉红类成分有增溶促渗作用的辅料及制剂，以制备服用剂量小的有效制剂，提高其口服相对利用度。对靛玉红进行进一步深入研究势在必行。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法。
本发明是这样实现的，一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂的制备方法，所述靛玉红固体自乳化给药系统制剂的制备方法包括以下步骤：
步骤一，取1944CS、EL、Trans P加入靛玉红原料药，37℃以2000r·min-1涡旋混匀，初乳12000r·min-1高速剪切5次，每次1.0min；
步骤二，于12000Psi下分别循环均质8次，放至室温室，取出，10000r/min离心10min，称取上层清乳即得。
进一步，所述1944CS：20％-35％；EL：52％-80％；Trans P：7％-20％。
本发明的另一目的在于提供一种由所述靛玉红固体自乳化给药系统制剂的制备方法制备的靛玉红固体自乳化给药系统制剂，所述靛玉红固体自乳化给药系统制剂由1944CS：20％-35％、EL：52％-80％和Trans P：7％-20％组成。
进一步，所述靛玉红固体自乳化给药系统制剂由1944CS 28.23g、EL 69.53g和Trans P 15.44g组成。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：本发明采用SMEDDS技术对靛玉红进行增溶促渗研究，提高其口服生物利用度，解决靛玉红的制剂难点；采用Box-Behnken效应面法对处方进行优化研究，以高压均质法对靛玉红液体自微乳制剂(L-SMEDDS)进行了研究，微乳形成的粒径为19.14nm，Zeta电位为-30.9mV。与项目前期研究普通自微乳制剂形成的粒径为40.56nm，Zeta电位为-21.6mV相比，粒径显著降低约为其1/2，电位显著降低约为其1.5倍，理论上膜通透性增强，更加适合药物吸收。低于《中国药典》2015年版四部通则9014项下纳米乳级，粒径极小。采用可工业化生产的喷雾干燥法进行了固体自微乳制剂(L-SMEDDS)，使靛玉红液体自微乳制剂L-SMEDDS固体化，增加靛玉红及自微乳的稳定性，而且可使靛玉红缓慢释放。以单剂量灌胃给药进行大鼠体内药代动力学实验，比较靛玉红L-SMEDDS、S-SMEDDS和原料药液在大鼠体内口服生物利用度情况及药代动力学特征，鼠灌胃靛玉红L-SMEDDS、S-SMEDDS、原料药灌胃液后AUC 0→48分别为202.969、248.654、114.4μg·h·L-1；AUC0→∞分别为211.295、265.535、134.109μg·h·L-1；Cmax分别为22.35、9.72、5.4μg·L-1；Tmax分别为2、8、15h，说明靛玉红SMEDDS显著地提高了靛玉红的生物利用度。结果相对生物利用度分别为靛玉红原料药灌胃液的1.58倍、1.98倍。
附图说明
图1是本发明实施例提供的靛玉红固体自乳化给药系统制剂的制备方法流程图。
图2是本发明实施例提供的对照品溶液(A)、供试品溶液(B)、缺靛玉红阴性溶液(C)HPLC色谱图。
图3是本发明实施例提供的靛玉红L-SMEDDS的粒径分布图。
图4是本发明实施例提供的靛玉红L-SMEDDS的Zeta电位分布图。
图5是本发明实施例提供的靛玉红L-SMEDDS的SEM扫描结果图。
图6是本发明实施例提供的对照品溶液(A)、供试品溶液(B)、缺靛玉红阴性溶液(C)HPLC色谱图。
图7是本发明实施例提供的靛玉红线性关系图。
图8是本发明实施例提供的靛玉红S-SMEDDS电镜扫描图。
图9是本发明实施例提供的靛玉红S-SMEDDS的粒径分布图。
图10是本发明实施例提供的靛玉红S-SMEDDS的Zeta电位分布图。
图11是本发明实施例提供的大鼠灌胃靛玉红L-SMEDDS、S-SMEDDS、原料药灌胃液的平均血药浓度-时间曲线示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明采用SMEDDS技术对靛玉红进行增溶促渗研究，提高其口服生物利用度，解决靛玉红的制剂难点；采用Box-Behnken效应面法对处方进行优化研究，以高压均质法对纳米级靛玉红液体自微乳制剂(L-SMEDDS)进行了研究，与自微乳制剂粒径相比，显著降低。下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。
本发明实施例提供的靛玉红固体自乳化给药系统制剂为1944CS：20％-35％；EL：52％-80％；Trans P：7％-20％。
本发明实施例提供的靛玉红固体自乳化给药系统制剂为1944CS 28.23g、EL69.53g、Trans P 15.44g。
如图1所示，本发明实施例提供的靛玉红固体自乳化给药系统制剂的制备方法包括以下步骤：
S101：取1944CS、EL、Trans P适量加入过量靛玉红原料药，37℃以2000r·min-1涡旋混匀，初乳12000r·min-1高速剪切5次，每次1.0min；
S102：于12000Psi下分别循环均质8次，放至室温室，取出，10000r/min离心10min，称取上层清乳即得。
下面结合实验对本发明的应用原理作进一步的描述。
1、靛玉红液体自微乳制剂(L-SMEDDS)的研究
1.1建立了靛玉红含量测定高效液相色谱法，并测定了靛玉红在不同辅料中的溶解度，采用Box-Behnken效应面法，利用以高压匀质法制备靛玉红液体自微乳制剂(L-SMEDDS)。并对其进行增溶性能进行研究。
1.2实验试剂与试药
靛玉红原料药(杭州华东医药集团康润制药有限公司，批号：120101)；
靛玉红对照品对照品(中国食品药品检定研究院，批号：201720)；
1.3仪器
KQ-100E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；BT125D型电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司)；高效液相色谱仪(1200系列型，美国安捷伦公司)；高速匀浆机(JHBE-20A型，河南金鼐科技发展有限公司)；高压均质机(Nano DeBEE型，美国必宜公司)；Zen-3600型激光散射粒度仪，英国Malvern公司；Merlin扫描电子显微镜，德国Zeiss公司；
1.4靛玉红含量测定高效液相色谱法的建立
1.4.1色谱条件
色谱柱为：Sepax Bio-C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为：甲醇-水(75：25)，等度洗脱，体积流量1.0mL·min-1，柱温35℃，检测波长290nm。
1.4.2溶液的配制
对照品溶液的制备：取靛玉红对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每lmL各含0.15mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：精密移取紫微乳液适量，置于5mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
阴性供试品溶液的制备：精密移取缺靛玉红自微乳液适量，置于5mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
1.4.3专属性考察
取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液，按“1.4.1”项下色谱条件，进样10μL，色谱图见图2。由图可知，在该色谱条件下，空白溶液无干扰，方法专属性良好。
1.4.4线性关系考察
分别取靛玉红对照品适量，用乙酸乙酯配制成系列质量浓度的对照品溶液，靛玉红质量浓度：50.22、25.11、12.56、6.28、3.14、1.57μg·mL-1；精密吸取上述混合对照品溶液10μL，进样，按“1.4.1”项下色谱条件测定峰面积。以峰面积Y对进样浓度X进行线性回归，得回归方程，Y＝54.82X+0.91，r＝0.9998，线性关系良好。
1.4.5精密度实验
按照“1.4.1”项下色谱条件，精密吸取同一对照品溶液10μL，连续进样6次，记录峰面积，结果见表1。
表1精密度实验结果
结果：靛玉红峰面积RSD值为0.49％，仪器精密度良好。
1.4.6重复性实验
按照“1.4.2”项下方法取同一样品平行制备6份供试品溶液，按照“1.4.1”项下色谱条件，进样测定，并计算含量，结果见表2。
表2重复性实验结果
结果：靛玉红含量的RSD值为0.43％，供试品溶液制备方法重复性良好。
1.4.7稳定性实验
精密吸取“2.1.7”重复性实验项下供试品溶液10μL，按照“1.4.1”项下色谱条件分别于0、4、8、12、16、24h注入液相色谱仪，记录峰面积，结果见表3。
表3稳定性实验结果
结果：靛玉红含量RSD值为0.45％，供试品溶液在24h内稳定。
1.5靛玉红溶解度及油水表观系数研究
靛玉红属于生物药剂学分类系统(BCS)Ⅳ类药物，溶解度及渗透性均差，但对于具体溶解度和表观油水分布系数未进行测定，因而本发明对靛玉红的溶解度和表观油水分配系数进行测定，指导靛玉红的制剂研究。
1.5.1表观油水分配系数测定
油水分配系数LogP是表征药物脂溶性及极性的重要参数。logP数值反应药物亲油亲水性能，当logP<0以及logP>3时药物极不易被胃肠吸收；0<logP<3时药物可被胃肠吸收。本发明取靛玉红适量分别测定靛玉红在正辛醇-水、正辛醇-pH 1.2盐酸溶液、正辛醇-pH4.5磷酸缓冲液、正辛醇-pH 6.8磷酸缓冲液、正辛醇-pH 7.4磷酸缓冲液体系中的logPapp值。计算油/水分配系数的公式如下：
P＝(W1/V油)/(W2/V水)
式中P为油水分配系数，W1为分配后正辛醇中的药量，W2为分配后水相中的药量。结果见表4。
表4表观油水配布系数logP实验结果
如上表所示，logP均大于5，结果表明靛玉红的脂溶性很强，胃肠不易吸收，要想提高靛玉红的口服生物利用度，需改善其渗透性。提示靛玉红制剂切入点在于重点提高药物的溶解度及渗透性。
1.5.2靛玉红在不同油、乳化剂、助乳化剂中的溶解度
分别将相同体积的不同油相、表面活性剂及助表面活性剂约2mL，分别置于5mL离心管中，加入过量的靛玉红原料药，涡旋分散，置于37℃，200r/min恒温振荡箱震荡24h达溶解平衡，取出，10000r/min离心10min，取上清液适量，加乙酸乙酯稀释，按照“2.1”项下建立的方法，精密吸取10μL，注入液相色谱仪，记录峰面积并计算靛玉红原料药在各种辅料中的溶解度，结果见表5。
表5靛玉红在不同油、乳化剂、助乳化剂中的溶解度
由表可知，靛玉红在1944CS、Labrasol、PEG-400中的溶解度最高，但在配伍过程中发现1944CS与Labrasol配伍有浑浊颗粒状析出；PEG-400与T-80、EL、Labrasol不能互溶，均产生分层，最终确定以1944CS为油相，EL为表面活性剂，Trans P为助表面活性剂作为靛玉红液体自微乳制剂(L-SMEDDS)处方。
1.6靛玉红液体自微乳制剂(L-SMEDDS)制备处方及范围确立
本发明曾在前期实验的基础上，确定了1944CS、EL、Trans P分别为油相、表面活性剂及助表面活性剂，通过确定三相的比例范围，靛玉红自微乳的载药量、自乳化时间、粒径为考察指标，以总评OD值为效应变量，采用三因素五水平的星点设计法优化得到靛玉红L-SMEDDS的最优处方为1944CS：EL：Trans P＝25：80：19.47(m:m:m)，处方范围为1944CS：20％-35％；EL：52％-80％；Trans P：7％-20％。具体操作工艺为称取1944CS25份、EL80份、Trans P19.47份，涡旋混匀，加入过量的靛玉红原料药，涡旋混匀，置(37±1)℃、200r/min振荡箱中振荡24h达溶解平衡，取出，10000r/min离心10min，称取上层清乳即得。研究为了获得粒径更小，更为稳定的微乳，在原有实验基础上，拟改变该处方的制备工艺采用高压匀法制备靛玉红L-SMEDDS。
1.7高压匀法制备靛玉红L-SMEDDS单因素考察
1.7.1靛玉红L-SMEDDS初步制备
1.7.1.1处方基质的选择
根据“1.5.2”、“1.6”结果，选择1944CS、EL、Trans P分别为油相、表面活性剂及助表面活性剂。
1.7.1.2温度的考察
由于1944CS、EL、Trans P在常温下呈固态，均为为液态，同时对制备是温度要求不高。综合考虑，本实验选择与人体体温一致，36～37℃作为制备温度，避免高温对辅料及药物稳定性产生影响。
1.7.1.3涡旋速度的考察
搅拌速度对靛玉红L-SMEDDS的粒径一级结构有较大的影响。本实验以靛玉红L-SMEDDS的形态为评价指标指标，考察不同搅拌速度对其影响，结果低搅拌速度(500r·min-1)所制备的制剂，不均一。以2000r·min-1搅拌速度时为时，制剂分布均一，拌速度选择2000r·min-1。
1.7.1.4均质压力考察
取1944CS、EL、Trans P适量加入过量靛玉红原料药，37℃以2000r·min-1涡旋混匀，初乳12000r·min-1高速剪切5次，每次1.0min，分别于14000Psi、12000Psi、10000Psi、8000Psi下循环均质6次，放至室温室，取出，10000r/min离心10min，称取上层清乳即得。分别考察均质压力对靛玉红L-SMEDDS粒径的影响，结果见表6。
表6均质压力对靛玉红L-SMEDDS粒径的影响
由实验可知：均质压力越大，靛玉红L-SMEDDS粒径越小，压力12000Psi与14000Psi相差不大，选择12000Psi为均质压力。
1.7.1.5均质循环次数的考察
取1944CS、EL、Trans P适量加入过量靛玉红原料药，37℃以2000r·min-1涡旋混匀，初乳12000r·min-1高速剪切5次，每次1.0min，于12000Psi下分别循环均质4、6、8、10、12次，放至室温室，取出，10000r/min离心10min，称取上层清乳即得。分别考察均质循环次数对靛玉红L-SMEDDS粒径的影响，结果见表7。
表7均质次数对对靛玉红L-SMEDDS粒径的影响
由实验可知：均质循环次数越多，靛玉红L-SMEDDS粒径越小，循环到8次时粒径减小不明显，故均质循环次数定为8次。
1.7.2靛玉红L-SMEDDS的制备
取1944CS、EL、Trans P适量加入过量靛玉红原料药，37℃以2000r·min-1涡旋混匀，初乳12000r·min-1高速剪切5次，每次1.0min，于12000Psi下分别循环均质8次，放至室温室，取出，10000r/min离心10min，称取上层清乳即得。
1.8Box-Behnken设计优化靛玉红L-SMEDDS处方
1.8.1处方优化设计
为进一步优化靛玉红L-SMEDDS处方，在单因素考察的基础上，选取1944CS(X1)、EL(X2)、Trans P(X3)为考察因素，以靛玉红L-SMEDDS微乳粒径Y粒径评分(＝Y最小粒径/Yi粒径*100)为响应值，采用Box-Behnken效应面法对处方进行优化研究，并对Dseign-Expert软件对实验结果进行响应面分析，因素水平见表8，实验结果见表9，方差分析见表10。
表8因素水平表
表9实验安排及结果
表10方差分析
1.8.2模型拟合
采用Design-Expert软件对实验结果进行分析，以评价指标Y综合评分对自变量进行模型拟合，以相关系数(R2)、置信度(P)为拟合模型评价，二项式拟合方程为：Y＝96.8+5.68X1+6.49X2+5.14X3+5.95X1X2－4.3X1X3－3.78X2X3－16.51X1 2－12.74X2 2－5.74X3 2。由拟合结果可知，模型相关性系数R2＝0.940，P值小于0.01，该模型拟合度较高，具有极显著性差异，回归方程能较好的拟合效应面，方差数据失拟项P＝0.5001，模型失拟性不显著，该回归方程二项式能较好的拟合效应面，可用显著的反应1944CS、EL、Trans P用量对靛玉红L-SMEDDS粒径的影响，可用于优化靛玉红L-SMEDDS的处方。
1.8.3效应面分析
从回归系数显著性检验结果可知，影响凝胶性能的的极显著因素：X1(P＝0.0027)、X2(P＝0.0013)、X3(P＝0.0045)、X1 2(P＝0.0001)、X2 2(P＝0.002)、X3 2(P＝0.0127)。通过Design-Expert 8软件绘制等高线/三维效应曲面图。优化得到靛玉红L-SMEDDS的最优处方为1944CS：EL：Trans P＝28.83：69.53：15.44(m:m:m)。
1.8.4处方验证
取1944CS 28.23g、EL 69.53g、Trans P 15.44g,加入靛玉红原料药100mg，37℃以2000r·min-1涡旋混匀，初乳12000r·min-1高速剪切5次，每次1.0min，于12000Psi下分别循环均质8次，放至室温室，取出，10000r/min离心10min，称取上层清乳即得，平行制备3份。分别测定靛玉红L-SMEDDS粒径，结果：粒径分别为19.11nm、19.28nm、19.18nm；制备的靛玉红L-SMEDDS属于纳米乳级别。
2靛玉红L-SMEDDS制剂学性质的考察
2.1外观
制备的靛玉红L-SMEDDS为深紫红色，澄清均一的液体，流动性好，无肉眼可见颗粒，蒸馏水稀释后呈鲜亮亮紫色透明溶液结果。
2..2靛玉红L-SMEDDS的粒度分布及Zeta电位的测定
取适量靛玉红L-SMEDDS，加适量蒸馏水稀释。采用Zen-3600型激光散射粒度仪测量靛玉红L-SMEDDS的粒径及，Zeta电位，结果见图3、图4。表明靛玉红L-SMEDDS的平均粒径为19.14nm(n＝3)，Zeta电位为-30.9mV。
2.3靛玉红L-SMEDDS形态学观察
用扫描电镜(SEM)观察靛玉红L-SMEDDS的表面形态。取靛玉红L-SMEDDS适量，用蒸馏水稀释，滴少量平铺于载玻片上，室温自然风干，表面镀金后观察其外观形态。见图5，由图可知：靛玉红L-SMEDDS呈类球型，表面圆整，粒径均一。
2.4载药量、乳化时间及溶解度的测定
取“1.8.4”项下制备的靛玉红L-SMEDDS，按“1.4”项下方法测定所制备的靛玉红L-SMEDDS的载药量，另取靛玉红L-SMEDDS1.0mL加入到37±1℃1000mL蒸馏水中，50r·min-1搅拌使其自乳化，以目测法记录乳化时间，结果见表11。
另取5份空白L-SMEDDS各1g，精密称定，分别以水、pH 1.2盐酸溶液、pH 4.5、pH6.8、pH 7.4磷酸缓冲液为分散介质，稀释5倍(v/m)，混匀，各取2mL加入过量的靛玉红原料药，涡旋混匀5min，10000r/min离心10min，取上层清乳，按“1.4”项下方法测定溶解度；水、pH 1.2盐酸溶液、pH 4.5、pH 6.8、pH 7.4磷酸缓冲液2mL加入过量的靛玉红原料药，涡旋混匀5min，10000r/min离心10min，取上清液，按“1.4”项下方法测定溶解度，取结果见表12。
表12靛玉红L-SMEDDS载药量及乳化时间测定结果
表13靛玉红L-SMEDDS在不同pH介质中的溶解度
表14靛玉红原料药在不同pH介质中的溶解度
结果测得靛玉红L-SMEDDS载药量及乳化时间分别为(557.38±1.07)μg/g、(2.52±0.46)min，L-SMEDDS在不同pH介质中最低的溶解度为7.89μg/mL，而原料药仅在pH 6.8磷酸缓冲液检出溶解度为0.081μg/mL，靛玉红L-SMEDDS相比靛玉红原料药的溶解度至少提高了97倍。
2.5靛玉红L-SMEDDS稳定性研究
取靛玉红L-SMEDDS适量，于25±5℃环境下避光密封贮存，分别在0、1、2、3月观察外观性状，并测定药物含量、乳化时间、粒径，结果见表15。
表15靛玉红L-SMEDDS稳定性考察结果
结果，靛玉红L-SMEDDS，外观性状、药物含量、乳化时间、粒径无明显变化，样品3个月内稳定。
二、靛玉红固体自微乳制剂(S-SMEDDS)的研究
本发明主要以靛玉红液体自微乳制剂L-SMEDDS微乳作为靛玉红固体自微乳制剂S-SMEDDS的囊心物，仅可使靛玉红液体自微乳制剂L-SMEDDS固体化，又可增加靛玉红及自微乳的稳定性，而且可使靛玉红缓慢释放。
1.靛玉红自微乳制剂(S-SMEDDS)含量测定方法学的建立
1.1色谱条件
色谱柱为：Sepax Bio-C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为：甲醇-水(75：25)，等度洗脱，体积流量1.0mL·min-1，柱温35℃，检测波长290nm。
1.2溶液的配置
对照品溶液的制备：靛玉红对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每l mL各含0.13mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：精密称取靛玉红自微乳制剂(S-SMEDDS)0.6g，加乙酸乙酯定容至250mL棕色量瓶中，定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
阴性供试品溶液的制备：精密移取缺靛玉红自微乳制剂(S-SMEDDS)适量，按上述供试品制备方法制备，即得。
1.3方法专属性考察
取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液，按“1.1”项下色谱条件，进样10μL，色谱图见图6。由图可知，在该色谱条件下，空白溶液无干扰，方法专属性良好。
1.4线性关系考察
精密吸取靛玉红对照品储备液加乙酸乙酯，配制成浓度为2.65、6.62、13.24、19.86、26.48、39.72、52.96μg·mL-1系列浓度对照品溶液，精密吸取上述混合对照品溶液10μL，进样，按“1.1”项下色谱条件测定峰面积。分别精密吸取续滤液10μL，注入高效液相色谱仪，记录峰面积以峰面积Y对进样浓度X进行线性回归，得回归方程，Y＝55.0389X+0.0677，r＝0.9998。靛玉红在2.648～52.96μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系，如图7所示。
1.5精密度实验
按照“1.1”项下色谱条件，精密吸取浓度为2.648、19.86、39.72μg·mL-1同一对照品溶液10μL，连续进样6次，记录峰面积，结果见表16。
表16精密度实验结果
结果：高、中、低浓度对照品溶液精密度RSD分别为0.11％、0.17％、0.71％，仪器精密度良好。
1.6重复性实验
按照“1.2”项下方法，平行制备6份供试品，精密吸取供试品溶液10μL，测定峰面积并计算含量，结果表17。
表17重复性实验结果
结果：靛玉红含量的RSD值为0.35％，法重复性良好。
1.7稳定性实验
精密吸取“1.6”重复性实验项下供试品溶液10μL，按照“1.1”项下色谱条件分别于0、4、8、12、16、24h注入液相色谱仪，记录峰面积计算含量，结果见表18。
表18制剂中靛玉红稳定性实验结果
结果：供试品溶液24h内稳定。
1.8回收率实验
精取靛玉红微囊0.3g，精密称定精密加入靛玉红对照品溶液适量，平行制备6份按照“1.2”项下方法制备供试品，进样测定，计算靛玉红平均回收率99.6％(RSD为1.38％)，回收率符合要求。
2.载药量和包封率的测定方法
供试品溶液的制备：精密称取靛玉红自微乳制剂(S-SMEDDS)0.6g，加乙酸乙酯定容至250mL棕色量瓶中，定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定峰面积并计算含量，并按下式计算载药量及包封率。
载药量＝制剂中含药量/微球总质量
包封率＝制剂中测得含药量/微囊中加入的总药量×100％
3.靛玉红S-SMEDDS单因素考察
3.1制备方法
取处方量的明胶-阿拉伯胶、PEG6000加入适量蒸馏水，70℃，溶解30min，加入靛玉红L-SMEDDS，10000r·min-1高速均质5min，制备初乳；保持进风温度170℃，出风温度40～50℃，对初乳进行喷雾干燥，制备靛玉红S-SMEDDS。
3.2制剂成型影响因素的考察
3.2.1明胶-阿拉伯胶浓度考察
分别考察明胶-阿拉伯胶(比例1:1)浓度为1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％，观察制剂的形态，并测定载药量和包封率，结果见表19。
表19明胶-阿拉伯胶的浓度
实验结果表明明胶-阿拉伯胶浓度越大，溶液粘度增大，制剂圆整度越差，载药量越小，硬度越强，包封率则无明显变化。并且当海藻酸钠浓度增大到3％时，几乎无法成为制剂。因而，综合制备的难易程度、圆整度、硬度、载药量、包封率等因素，确定明胶-阿拉伯胶(比例1:1)浓度2.0％。
3.2.2明胶-阿拉伯胶溶液与靛玉红L-SMEDDS体积比考察
分别考察明胶-阿拉伯胶溶液与靛玉红L-SMEDDS的体积比为0.2，0.5，0.8，1.0，观察制剂的形态，并测定载药量和包封率，结果见表20。
表20明胶-阿拉伯胶溶液与靛玉红L-SMEDDS的体积比考察结果
实验结果表明，与靛玉红L-SMEDDS的体积比为0.5时，随着明胶-阿拉伯胶溶液海藻酸钠体积增大，包封率和载药量呈现先增大后减小的趋势。综合制剂的形态及载药量、包封率的结果，确定明胶-阿拉伯胶溶液与靛玉红L-SMEDDS的体积比为0.5。
3.2.3增塑剂PEG6000用量的考察
分别考PEG6000为1.0％、1.5％、2.0％、3.0％，观察制剂的形态，并测定载药量和包封率，结果见表21。
表21不同浓度PEG6000用量考察
结果：确定PEG6000用量为1.5％。
3.2.4高速均质时间的考察
以10000rmin分别均质5min、10min、15min，考察均质时间对初乳外观形状的影响。结果见表22。
表22高速均质时间考察
结果：随时间的增加高速均质过程中会产生大量的热量，可能一定程度影响初乳的稳定性，故选择均质时间为5min.
3.2.5高速均质速率及时间的考察
分别以5000r·min-1、10000r·min-1、15000r·min-1速率分别均质5min，考察均质速率对初乳外观形状的影响。结果见表23。
表23高速均质速率考察
结果：高速均质过程中会产生大量的热量，故选择均质速率为10000r·min-1。
3.2.6进风主干燥温度考察
保持出风温度40～50℃，分别考察进风温度为130、150、170、190℃，对制备的靛玉红S-SMEDDS的影响，观察制剂的形态，并测定载药量和包封率，结果见表24。
表24进风温度考察考察结果
实验结果表明，当温度达到170℃至190℃时，样品粒度圆整，硬度较好，包封率载药量均较高。
3.3靛玉红S-SMEDDS的制备工艺的确定
根据“3.2制剂成型影响因素的考察”项下考察结果，确定靛玉红S-SMEDDS的制备工艺为：明胶-阿拉伯胶(比例1:1)浓度2.0％，明胶-阿拉伯胶溶液与靛玉红L-SMEDDS的体积比为0.5，PEG6000用量为1.5％，处方药物及辅料10000r·min-1高速均质5min，制备初乳；保持进风温度170℃，出风温度40～50℃，对初乳进行喷雾干燥，制备靛玉红S-SMEDDS。
4.靛玉红S-SMEDDS的制备及理化性质表征
4.1制备
按“3.3”项下确定处方比例及工艺，制备，即得，备用。
4.4.2靛玉红S-SMEDDS外观性状
外观呈紫红色微球，硬度适中。
4.4.3靛玉红自乳化微囊电镜扫描图
将干燥后的靛玉红S-SMEDDS进行电镜扫描，结果见图8。
4.2靛玉红L-SMEDDS的粒度分布及Zeta电位的测定
取适量靛玉红S-SMEDDS，加适量蒸馏水稀释。采用Zen-3600型激光散射粒度仪测量靛玉红L-SMEDDS的粒径及，Zeta电位，结果见图9、图10。表明靛玉红S-SMEDDS的平均粒径为20.24nm)，Zeta电位为-31.3mV。
5.靛玉红S-SMEDDS的制备及理化性质表征
本发明已经完成靛玉红L-SMEDDS优化制备、S-SMEDDS优化制备，结果表明靛玉红溶解度和溶出度均有明显提升。本发明旨在考察靛玉红SMEDDS的体内生物利用度情况。以单剂量灌胃给药进行大鼠体内药代动力学实验，比较研究靛玉红L-SMEDDS、S-SMEDDS和原料药液在大鼠体内口服生物利用度情况及药代动力学特征。
5.1实验方法
取健康的SD大鼠(200±20g)18只，雌雄各半，实验前禁食12h(自由饮水)，随机分成三组：(1)以4mg/只的剂量给大鼠灌服靛玉红L-SMEDDS；(1)以4mg/只的剂量给大鼠灌服靛玉红S-SMEDDS；(2)以4mg/只的等剂量灌服靛玉红原料药灌胃液。分别于给药后0.5，l，2，3，4，8，12，14，15，16，18，24，48h断尾取血0.5mL于干燥的肝素化塑料离心管中，涡旋混匀，制备成全血样品，放于-20℃冰箱内冻存，按照“1.1”项下方法测定。
5.2药代动力学实验结果
大鼠单剂量灌胃给予靛玉红SMEDDS及靛玉红原料药灌胃液后，体内平均血药浓度-时间曲线，用DAS 2.0药动学软件以统计矩方法计算药代动力学参数，结果见表25。
如图11所示，大鼠灌胃靛玉红L-SMEDDS、S-SMEDDS、原料药灌胃液后AUC 0→48分别为202.969、248.654、114.4μg·h·L-1；AUC 0→∞分别为211.295、265.535、134.109μg·h·L-1；Cmax分别为22.35、9.72、5.4μg·L-1；Tmax分别为2、8、15h，说明靛玉红SMEDDS显著地提高了靛玉红的生物利用度。
5.3相对生物利用度的计算
等给药量，靛玉红SMEDDS的相对生物利用度：
上式中，F表示相对生物利用度，AUC为药-时曲线下面积。
经计算靛玉红L-SMEDDS、S-SMEDDS的F分别为157.55％、197.99％，即相对生物利用度分别为靛玉红原料药灌胃液的1.58倍、1.98倍。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂的制备方法，其特征在于，所述靛玉红固体自乳化给药系统制剂的制备方法包括以下步骤：
步骤一，取1944CS、EL、TransP加入靛玉红原料药，37℃以2000r·min-1涡旋混匀，初乳12000r·min-1高速剪切5次，每次1.0min；
步骤二，于12000Psi下分别循环均质8次，放至室温室，取出，10000r/min离心10min，称取上层清乳即得。
2.如权利要求1所述的靛玉红固体自乳化给药系统制剂的制备方法，其特征在于，所述1944CS：20％-35％；EL：52％-80％；TransP：7％-20％。
3.一种由权利要求1所述靛玉红固体自乳化给药系统制剂的制备方法制备的靛玉红固体自乳化给药系统制剂，其特征在于，所述靛玉红固体自乳化给药系统制剂由1944CS：20％-35％、EL：52％-80％和TransP：7％-20％组成。
4.如权利要求3所述的靛玉红固体自乳化给药系统制剂，其特征在于，所述靛玉红固体自乳化给药系统制剂由1944CS28.23g、EL69.53g和TransP15.44g组成。
CN201810577201.6A 2018-06-07 2018-06-07 一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法 Pending CN108703949A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810577201.6A CN108703949A (zh) 2018-06-07 2018-06-07 一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810577201.6A CN108703949A (zh) 2018-06-07 2018-06-07 一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108703949A true CN108703949A (zh) 2018-10-26

Family

ID=63871345

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810577201.6A Pending CN108703949A (zh) 2018-06-07 2018-06-07 一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108703949A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114668744A (zh) * 2022-03-23 2022-06-28 成都大学 一种靛玉红固体脂质纳米粒及其制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1903228A (zh) * 2006-07-03 2007-01-31 李颖 灵芝孢子油自乳化制剂及其制备方法
CN102228433A (zh) * 2011-06-29 2011-11-02 上海中医药大学 过饱和自微乳制剂及其制备方法和应用
CN104055733A (zh) * 2014-06-12 2014-09-24 重庆市中药研究院 一种靛玉红自微乳化制剂及其制备方法
CN105616557A (zh) * 2016-02-17 2016-06-01 广州欧化药业有限公司 牡丹籽油自乳化软胶囊及其制备降血脂保健品或药物的应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1903228A (zh) * 2006-07-03 2007-01-31 李颖 灵芝孢子油自乳化制剂及其制备方法
CN102228433A (zh) * 2011-06-29 2011-11-02 上海中医药大学 过饱和自微乳制剂及其制备方法和应用
CN104055733A (zh) * 2014-06-12 2014-09-24 重庆市中药研究院 一种靛玉红自微乳化制剂及其制备方法
CN105616557A (zh) * 2016-02-17 2016-06-01 广州欧化药业有限公司 牡丹籽油自乳化软胶囊及其制备降血脂保健品或药物的应用

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHEN ET AL.: ""Improved oral bioavailability of poorly water-soluble indirubin by a supersaturatable self-microemulsifying drug delivery system"", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF NANOMEDICINE》 *
HESHMATI ET AL.: ""Enhancement of Oral Bioavailability of E804 by Self-Nanoemulsifying Drug Delivery System (SNEDDS) in Rats"", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES》 *
刘楠等: ""靛玉红自乳化释药系统的制备"", 《中成药》 *
张双庆等: "《毒代动力学》", 30 September 2014, 电子科技大学出版社 *
罗杰英等: "《现代物理药剂学理论与实践》", 30 April 2005, 上海科学技术文献出版社 *
雷俊等: ""靛玉红自乳化释药系统的体外评价"", 《中成药》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114668744A (zh) * 2022-03-23 2022-06-28 成都大学 一种靛玉红固体脂质纳米粒及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Buya et al. Self-nano-emulsifying drug-delivery systems: From the development to the current applications and challenges in oral drug delivery
Tagami et al. 3D printing of gummy drug formulations composed of gelatin and an HPMC-based hydrogel for pediatric use
CN101084880B (zh) 维生素e酯类衍生物固体分散体及其制备方法
CN105884719A (zh) 紫杉烷类前药的制备和应用
CN104055733B (zh) 一种靛玉红自微乳化制剂及其制备方法
CN102210653B (zh) 牛蒡苷元的微乳制剂
Caggiano et al. Development of an in vitro release assay for low-density cannabidiol nanoparticles prepared by flash nanoprecipitation
CN109568297A (zh) 一种二氢杨梅素固体脂质纳米粒及制备方法
CN104582689A (zh) 生物相关性组合物
CN108703949A (zh) 一种靛玉红固体自乳化给药系统制剂及制备方法
CN108578356A (zh) 一种蒿甲醚口服微乳原位凝胶剂及其制备方法
Xu et al. Preparation and characterization of ion-sensitive brimonidine tartrate in situ gel for ocular delivery
Chuchuen et al. Label-free measurements of tenofovir diffusion coefficients in a microbicide gel using Raman spectroscopy
CN103027981B (zh) 用于治疗冠心病的葛兰心宁软胶囊的固体脂质纳米粒及其制备方法和用途
CN105997925B (zh) 丹参酮ⅱa软胶囊及其制备方法
CN104856954B (zh) 一种绿原酸微乳及其制备工艺和应用
CN102258475A (zh) 黄豆苷元固体脂质纳米粒及其制备方法
CN111148513A (zh) 一种包含地佐辛类似物酯的缓释混悬液及其制备方法
CN103675152B (zh) 一种硝酸甘油微乳喷雾剂的含量测定方法及应用
CN109260153A (zh) 一种蒿甲醚微乳剂及其制备方法
CN106924177A (zh) 一种外用丹皮酚纳米缓释温度敏感型原位凝胶及其制备方法
CN101239039A (zh) 自微乳化给药系统公共处方体系的建立及评价方法
CN106075467B (zh) Psa-tpgs偶联物及其应用
CN109464394A (zh) 一种蒿甲醚自微乳剂及其制备方法
Xu et al. Development and evaluation of rhubarb free anthraquinones loaded self-nanoemulsifying tablets

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20181026

RJ01 Rejection of invention patent application after publication