CN108693295A - 猪毛蒿精油的鉴定方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种猪毛蒿精油的鉴定方法，所述猪毛蒿精油的鉴定方法包括：吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各0.2‑3μL，分别点于同一薄层色谱板上；以环己烷‑二氯甲烷‑乙酸乙酯体积比130:70:7为展开剂，对所述薄层色谱板展开，取出展开后的所述薄层色谱板并晾干；对晾干后的所述薄层色谱板喷以10％硫酸乙醇溶液，并加热至斑点显色清晰；将显色后的所述薄层色谱板置光下检视，所述供试品溶液的色谱与所述对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点时，判定所述供试品溶液含有猪毛蒿精油。由于，供试品与猪毛蒿精油标准对照品的处理方法完全相同，且在同一薄层色谱板中展开显色，可见本发明中猪毛蒿精油的鉴定方法具有操作简单、准确率高等优点。

Description

猪毛蒿精油的鉴定方法
技术领域
本发明涉及中药技术领域，尤其涉及猪毛蒿精油的鉴定方法。
背景技术
猪毛蒿，又名滨蒿、北茵陈、西茵陈，一年或二年生草本，喜生于砂地、河岸及盐碱地。分布于东北、华北、西北及台湾、湖北、广西、云南等地。猪毛蒿高约30～60cm，主根单一，狭纺锤形，半木质化；基生叶有长柄，较窄，叶片宽卵形，长2.5～7cm，裂片稍卵状，疏离；茎生叶线形，老时无毛，叶脉丝状。8～9月开花，头状花序直径约1～1.5mm，无梗或有短梗，偏侧生成短穗，总苞片有宽膜质边缘。外层雌花5～15朵，以10～12朵为常见，中部两性花3～9朵。
猪毛蒿精油为猪毛蒿花期地上部分经水蒸气蒸馏提取的挥发油。猪毛嵩精油的性状为浅黄色至棕黄色澄清液体；有特异香气，味微辛。存放日久，色渐变深。本品在乙醇、丙酮、三氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯中易溶，在水中几乎不溶。
对于猪毛嵩精的鉴别，现有技术中都是人工通过观察其性状从而对其进行鉴别认定，鉴定方法较为主观，准确性较低。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种猪毛蒿精油的鉴定方法，该鉴定方法通过薄层色谱法的显色比对，能够对猪毛蒿精油进行客观鉴定，提高猪毛蒿精油鉴定结果的准确性。
为实现本发明的目的，本发明提供的猪毛蒿精油的鉴定方法包括如下步骤：
吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各0.2-3μL，分别点于同一薄层色谱板上；
以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯体积比130:70:7为展开剂，对所述薄层色谱板展开，取出展开后的所述薄层色谱板并晾干；
对晾干后的所述薄层色谱板喷以10％硫酸乙醇溶液，并加热至斑点显色清晰；
将显色后的所述薄层色谱板置光下检视，所述供试品溶液的色谱与所述对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点时，判定所述供试品溶液含有猪毛蒿精油。
优选地，所述供试品溶液为取猪毛蒿精油的供试品0.05-0.5g加乙酸乙酯 0.5-5mL溶解后得到。
优选地，所述供试品溶液为取猪毛蒿精油的供试品0.07-0.25g加乙酸乙酯 0.7-2.5mL溶解后得到。
优选地，所述供试品溶液为取猪毛蒿精油的供试品0.1g加乙酸乙酯1mL 溶解后得到。
优选地，所述对照品溶液包括猪毛蒿精油对照品溶液和丁香酚对照品溶液中的至少一个，其中，将猪毛蒿精油对照品0.05-0.5g溶解于乙酸乙酯 0.5-5mL中得到所述猪毛蒿精油对照品溶液，将丁香酚5-20μL溶解于乙酸乙酯1-4mL中得到所述丁香酚对照品溶液。
优选地，所述猪毛蒿精油对照品溶液为将猪毛蒿精油对照品0.07-0.25g 溶解于乙酸乙酯0.7-2.5mL中得到，所述丁香酚对照品溶液为将丁香酚5-10 μL溶解于乙酸乙酯1-2mL中得到。
优选地，所述猪毛蒿精油对照品溶液为将猪毛蒿精油对照品0.1g溶解于乙酸乙酯1mL中得到，所述丁香酚对照品溶液为将丁香酚5μL溶解于乙酸乙酯1mL中得到。
优选地，所述吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各0.2-3μL，分别点于同一薄层色谱板上的步骤包括：
吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各0.5-2μL，分别点于同一薄层色谱板上。
优选地，所述吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各0.5-2μL，分别点于同一薄层色谱板上的步骤包括：
吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各1μL，分别点于同一薄层色谱板上。
优选地，所述供试品溶液制备完成后1-4天内进行薄层色谱鉴定，鉴定结果有效。
本发明实施例提出的一种猪毛蒿精油的鉴定方法，该猪毛蒿精油的鉴定方法包括，将猪毛蒿精油供试品溶液和对照品溶液分别取样于同一薄层色谱板上，并将薄层色谱板放置在存有展开剂的容器中展开，取出薄层色谱板晾干，喷上显示剂，加热至斑点显色清晰，光下检视，比较供试品溶液的色谱和对照品溶液的色谱中相对应的位置上的荧光斑点是否显示相同颜色，当显示颜色相同时，可得出该供试品中含有猪毛蒿精油的鉴定结果。通过薄层色谱法，将供试品中的分离开的显色成分与标准的猪毛蒿精油比对。由于，供试品与猪毛蒿精油标准对照品的处理方法完全相同，且在同一薄层色谱板中展开显色，所以根据比对结果可以明确得出该供试品是否为猪毛蒿精油，可见本发明中猪毛蒿精油的鉴定方法具有操作简单、准确率高等优点。
附图说明
图1(a)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第一实施例的色谱图
图1(b)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第一实施例的另一色谱图；
图2(a)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第六实施例的色谱图；
图2(b)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第六实施例的另一色谱图
图3(a)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第七实施例的第一色谱图；
图3(b)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第七实施例的第二色谱图；
图4(a)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第七实施例的第三色谱图；
图4(b)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第七实施例的第四色谱图；
图5(a)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第七实施例的第五色谱图；
图5(b)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第七实施例的第六色谱图；
图6(a)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第七实施例的第七色谱图；
图6(b)是本发明猪毛蒿精油的鉴定方法第七实施例的第八色谱图。
本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。
具体实施方式
应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明试验方法及参数：
1、试验材料猪毛蒿精油：批号为20110801、20131114、20140701、 20140702、20140703、20141104、20141105、20150101、20150102、20150103，由佛山德众药业有限公司提供。
2、试验仪器与试剂
Merck硅胶G预制板(德国默克公司生产，批号HX242369)；硅胶G 薄层板(青岛海洋化工厂分厂生产，批号：20120622)；硅胶(200目，青岛海洋化工有限公司分厂制造，批号：20130616)。YOKO-ZS薄层色谱成像仪 (武汉药科新技术开发有限公司生产)。
环己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚(60～90℃)、苯、丙酮、乙醇、硫酸均为分析纯、猪毛蒿精油工作对照提取物。
丁香酚对照品(批号110725-200610)，购自中国药品生物制品检定所。
供试品：供试品为上述10批猪毛蒿精油。
实施例一
供试品溶液的制备：取供试品约0.1g，加乙酸乙酯1mL使溶解，作为供试品溶液。
丁香酚对照品溶液的制备：取丁香酚对照品，加乙酸乙酯制成每1mL含 5μL丁香酚对照品的溶液，作为丁香酚对照品溶液。
猪毛蒿精油对照品溶液的制备：取猪毛蒿精油工作对照提取物约0.1g，加乙酸乙酯1mL使溶解，作为猪毛蒿精油对照品溶液。
薄层板：Merck硅胶G预制板，其中，薄层色谱板还可以是普通硅胶GF254 预制板或者是普通CMC-Na硅胶G板。
点样：供试品溶液、丁香酚对照品溶液及猪毛蒿精油对照品溶液分别点样1μL。
展开剂：环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(体积比130:70:7)；展距：8cm；
展开方式：上行展开
显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点显色清晰。
检视：日光及紫外光(365nm)下检视，其中，日光和紫外光可以为天然光，也可以为发光设备制得的日光和紫外光。
色谱识别：供试品色谱中，在与猪毛蒿精油对照品溶液色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的主斑点；在与丁香酚对照品溶液色谱相应的位置上，紫外光(365nm)下显相同颜色的荧光斑点。
关于显色方式的说明：由于丁香酚斑点在日光下颜色较浅，但在紫外光灯(365nm)下有黄色强荧光，易于观察，故最终采用置紫外光灯(365nm) 下检视丁香酚的方式。
试验色谱图如图1所示，，其中，图(a)为日光下检视，图(b)为紫外光365nm下检视，图1中1-10分别对应上述10批猪毛蒿精油，11为猪毛蒿精油对照品溶液，12为丁香酚对照品溶液。由图1可知，试验采用的10种不同批号的猪毛蒿精油的色谱与对照品溶液的色谱的相应位置上显示相同颜色的斑点，且RF值较佳。因此，采用本实施例中的薄层色谱法鉴定猪毛蒿精油的方法客观可行。
实施例二
供试品溶液的制备：取供试品约0.05g，加乙酸乙酯1mL使溶解，作为供试品溶液。
丁香酚对照品溶液的制备：取丁香酚对照品，加乙酸乙酯制成每1mL含 5μL丁香酚对照品的溶液，作为丁香酚对照品溶液。
猪毛蒿精油对照品溶液的制备：取猪毛蒿精油工作对照提取物约0.05g，加乙酸乙酯1mL使溶解，作为猪毛蒿精油对照品溶液。
薄层板：Merck硅胶G预制板，其中，薄层色谱板还可以是普通硅胶GF254 预制板或者是普通CMC-Na硅胶G板。
点样：供试品溶液、丁香酚对照品溶液及猪毛蒿精油对照品溶液分别点样1μL。
展开剂：环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(体积比130:70:7)；展距：8cm；
展开方式：上行展开
显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点显色清晰。
检视：日光及紫外光(365nm)下检视，其中，日光和紫外光可以为天然光，也可以为发光设备制得的日光和紫外光。
色谱识别：供试品色谱中，在与猪毛蒿精油对照品溶液色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的主斑点；在与丁香酚对照品溶液色谱相应的位置上，紫外光(365nm)下显相同颜色的荧光斑点。
关于显色方式的说明：由于丁香酚斑点在日光下颜色较浅，但在紫外光灯(365nm)下有黄色强荧光，易于观察，故最终采用置紫外光灯(365nm) 下检视丁香酚的方式。
实施例三
供试品溶液的制备：取供试品约0.07g，加乙酸乙酯0.5mL使溶解，作为供试品溶液。
丁香酚对照品溶液的制备：取丁香酚对照品，加乙酸乙酯制成每1mL含 5μL丁香酚对照品的溶液，作为丁香酚对照品溶液。
猪毛蒿精油对照品溶液的制备：取猪毛蒿精油工作对照提取物约0.07g，加乙酸乙酯0.5mL使溶解，作为猪毛蒿精油对照品溶液。
薄层板：Merck硅胶G预制板，其中，薄层色谱板还可以是普通硅胶GF254 预制板或者是普通CMC-Na硅胶G板。
点样：供试品溶液、丁香酚对照品溶液及猪毛蒿精油对照品溶液分别点样1μL。
展开剂：环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(体积比130:70:7)；展距：8cm；
展开方式：上行展开
显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点显色清晰。
检视：日光及紫外光(365nm)下检视，其中，日光和紫外光可以为天然光，也可以为发光设备制得的日光和紫外光。
色谱识别：供试品色谱中，在与猪毛蒿精油对照品溶液色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的主斑点；在与丁香酚对照品溶液色谱相应的位置上，紫外光(365nm)下显相同颜色的荧光斑点。
关于显色方式的说明：由于丁香酚斑点在日光下颜色较浅，但在紫外光灯(365nm)下有黄色强荧光，易于观察，故最终采用置紫外光灯(365nm) 下检视丁香酚的方式。
实施例四
供试品溶液的制备：取供试品约0.25g，加乙酸乙酯2.5mL使溶解，作为供试品溶液。
丁香酚对照品溶液的制备：取丁香酚对照品，加乙酸乙酯制成每1mL含5μL丁香酚对照品的溶液，作为丁香酚对照品溶液。
猪毛蒿精油对照品溶液的制备：取猪毛蒿精油工作对照提取物约0.25g，加乙酸乙酯2.5mL使溶解，作为猪毛蒿精油对照品溶液。
薄层板：Merck硅胶G预制板，其中，薄层色谱板还可以是普通硅胶GF254 预制板或者是普通CMC-Na硅胶G板。
点样：供试品溶液、丁香酚对照品溶液及猪毛蒿精油对照品溶液分别点样1μL。
展开剂：环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(体积比130:70:7)；展距：8cm；
展开方式：上行展开
显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点显色清晰。
检视：日光及紫外光(365nm)下检视，其中，日光和紫外光可以为天然光，也可以为发光设备制得的日光和紫外光。
色谱识别：供试品色谱中，在与猪毛蒿精油对照品溶液色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的主斑点；在与丁香酚对照品溶液色谱相应的位置上，紫外光(365nm)下显相同颜色的荧光斑点。
关于显色方式的说明：由于丁香酚斑点在日光下颜色较浅，但在紫外光灯(365nm)下有黄色强荧光，易于观察，故最终采用置紫外光灯(365nm) 下检视丁香酚的方式。
实施例五
供试品溶液的制备：取供试品约0.5g，加乙酸乙酯5mL使溶解，作为供试品溶液。
丁香酚对照品溶液的制备：取丁香酚对照品，加乙酸乙酯制成每1mL含 5μL丁香酚对照品的溶液，作为丁香酚对照品溶液。
猪毛蒿精油对照品溶液的制备：取猪毛蒿精油工作对照提取物约0.5g，加乙酸乙酯5mL使溶解，作为猪毛蒿精油对照品溶液。
薄层板：Merck硅胶G预制板，其中，薄层色谱板还可以是普通硅胶GF254 预制板或者是普通CMC-Na硅胶G板。
点样：供试品溶液、丁香酚对照品溶液及猪毛蒿精油对照品溶液分别点样1μL。
展开剂：环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(体积比130:70:7)；展距：8cm；
展开方式：上行展开
显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点显色清晰。
检视：日光及紫外光(365nm)下检视，其中，日光和紫外光可以为天然光，也可以为发光设备制得的日光和紫外光。
色谱识别：供试品色谱中，在与猪毛蒿精油对照品溶液色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的主斑点；在与丁香酚对照品溶液色谱相应的位置上，紫外光(365nm)下显相同颜色的荧光斑点。
关于显色方式的说明：由于丁香酚斑点在日光下颜色较浅，但在紫外光灯(365nm)下有黄色强荧光，易于观察，故最终采用置紫外光灯(365nm) 下检视丁香酚的方式。
实施例六
供试品溶液的制备：取供试品约0.1g，加乙酸乙酯1mL使溶解，作为供试品溶液。
丁香酚对照品溶液的制备：取丁香酚对照品，加乙酸乙酯制成每1mL含 5μL丁香酚对照品的溶液，作为丁香酚对照品溶液。
猪毛蒿精油对照品溶液的制备：取猪毛蒿精油工作对照提取物约0.1g，加乙酸乙酯1mL使溶解，作为猪毛蒿精油对照品溶液。
薄层板：Merck硅胶G预制板，其中，薄层色谱板还可以是普通硅胶GF254 预制板或者是普通CMC-Na硅胶G板。
点样：供试品溶液分别点样0.2、0.5、1、2、3μL，丁香酚对照品溶液及猪毛蒿精油对照品溶液分别点样1μL。
展开剂：环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(体积比130:70:7)；展距：8cm；
展开方式：上行展开
显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点显色清晰。
检视：日光及紫外光(365nm)下检视，其中，日光和紫外光可以为天然光，也可以为发光设备制得的日光和紫外光。
色谱识别：供试品色谱中，在与猪毛蒿精油对照品溶液色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的主斑点；在与丁香酚对照品溶液色谱相应的位置上，紫外光(365nm)下显相同颜色的荧光斑点。
关于显色方式的说明：由于丁香酚斑点在日光下颜色较浅，但在紫外光灯(365nm)下有黄色强荧光，易于观察，故最终采用置紫外光灯(365nm) 下检视丁香酚的方式。
图2所示为本实施例的色谱图，其中，图(a)为日光下检视，图(b) 为紫外光365nm下检视，1-5分别对应点样量为0.2、0.5、1、2、3μL的供试品溶液。由图2可知，当供试品溶液点样量小于1μL时，色谱图中的荧光斑点显示不清晰，供试品溶液点样量大于或等于1μL时，色谱图中的荧光斑点显示较为清晰。导致上述现象的原因通常是由于用于薄层色谱分离的物质含量较低。然而，薄层色谱分析时，点样量过高导致溶液中物质难以分离，荧光斑点过大，相互影响色谱显示。综上可得，在本发明的猪毛蒿精油的鉴定方法中最佳点样量1μL。
实施例七
供试品溶液溶液制备后的第1天、第2天、第3天、第4天各取1μL点样，另取猪毛蒿精油对照品溶液以及丁香酚对照品各取1μL点样
供试品溶液的制备：取供试品约0.1g，加乙酸乙酯1mL使溶解，作为供试品溶液。
丁香酚对照品溶液的制备：取丁香酚对照品，加乙酸乙酯制成每1mL含 5μL丁香酚对照品的溶液，作为丁香酚对照品溶液。
猪毛蒿精油对照品溶液的制备：取猪毛蒿精油工作对照提取物约0.1g，加乙酸乙酯1mL使溶解，作为猪毛蒿精油对照品溶液。
薄层板：Merck硅胶G预制板，其中，薄层色谱板还可以是普通硅胶GF254 预制板或者是普通CMC-Na硅胶G板。
点样：供试品溶液分别点样0.2、0.5、1、2、3μL，丁香酚对照品溶液及猪毛蒿精油对照品溶液分别点样1μL。
点样：供试品溶液与对照品溶液分别点样1μL，其中，供试品溶液制备后第1天、第2天、第3天、第4天进行点样操作。
展开剂：环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(体积比130:70:7)；展距：8cm；
展开方式：上行展开
显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点显色清晰。
检视：日光及紫外光(365nm)下检视，其中，日光和紫外光可以为天然光，也可以为发光设备制得的日光和紫外光。
色谱识别：供试品色谱中，在与猪毛蒿精油对照品溶液色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的主斑点；在与丁香酚对照品溶液色谱相应的位置上，紫外光(365nm)下显相同颜色的荧光斑点。
关于显色方式的说明：由于丁香酚斑点在日光下颜色较浅，但在紫外光灯(365nm)下有黄色强荧光，易于观察，故最终采用置紫外光灯(365nm) 下检视丁香酚的方式。
图3、图4、图5和图6分别为供试品溶液制备后第1天、第2天、第3 天和第4天的色谱图，其中，图(a)为日光下检视，图(b)为紫外光365nm 下检视。图3、图4、图5和图6中1-3分别对应表示上述样品中批号为 20110801、20131114以及20140701的猪毛蒿精油，4为猪毛蒿精油对照品溶液，5为丁香酚对照品溶液。由图3、图4、图5和图6可得，在供试品溶液制备后4天内进行色谱鉴定均可显示清晰荧光斑点，因此，供试品溶液在制备后4天内物化特性稳定，即供试品溶液制备完成后1-4天内进行薄层色谱鉴定，鉴定结果有效。

Claims (10)

1.一种猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述猪毛蒿精油的鉴定方法包括以下步骤：
吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各0.2-3μL，分别点于同一薄层色谱板上；
以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯体积比130:70:7为展开剂，对所述薄层色谱板展开，取出展开后的所述薄层色谱板并晾干；
对晾干后的所述薄层色谱板喷以10％硫酸乙醇溶液，并加热至斑点显色清晰；
将显色后的所述薄层色谱板置光下检视，所述供试品溶液的色谱与所述对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点时，判定所述供试品溶液含有猪毛蒿精油。
2.如权利要求1所述的猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述供试品溶液为取猪毛蒿精油的供试品0.05-0.5g加乙酸乙酯0.5-5mL溶解后得到。
3.如权利要求2所述的猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述供试品溶液为取猪毛蒿精油的供试品0.07-0.25g加乙酸乙酯0.7-2.5mL溶解后得到。
4.如权利要求3所述的猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述供试品溶液为取猪毛蒿精油的供试品0.1g加乙酸乙酯1mL溶解后得到。
5.如权利要求1所述的猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述对照品溶液包括猪毛蒿精油对照品溶液和丁香酚对照品溶液中的至少一个，其中，将猪毛蒿精油对照品0.05-0.5g溶解于乙酸乙酯0.5-5mL中得到所述猪毛蒿精油对照品溶液，将丁香酚5-20μL溶解于乙酸乙酯1-4mL中得到所述丁香酚对照品溶液。
6.如权利要求5所述的猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述猪毛蒿精油对照品溶液为将猪毛蒿精油对照品0.07-0.25g溶解于乙酸乙酯0.7-2.5mL中得到，所述丁香酚对照品溶液为将丁香酚5-10μL溶解于乙酸乙酯1-2mL中得到。
7.如权利要求6所述的猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述猪毛蒿精油对照品溶液为将猪毛蒿精油对照品0.1g溶解于乙酸乙酯1mL中得到，所述丁香酚对照品溶液为将丁香酚5μL溶解于乙酸乙酯1mL中得到。
8.如权利要求1所述的猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各0.2-3μL，分别点于同一薄层色谱板上的步骤包括：
吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各0.5-2μL，分别点于同一薄层色谱板上。
9.如权利要求8所述的猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各0.5-2μL，分别点于同一薄层色谱板上的步骤包括：
吸取猪毛蒿精油的供试品溶液和对照品溶液各1μL，分别点于同一薄层色谱板上。
10.如权利要求1所述的猪毛蒿精油的鉴定方法，其特征在于，所述供试品溶液制备完成后1-4天内进行薄层色谱鉴定，鉴定结果有效。
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