CN108604005B - 光片显微镜和用于样品的光学显微成像的方法 - Google Patents
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Abstract
介绍一种光片显微镜(10)，其包括：用于在中间图像腔(18)中产生光片的照明光学机构(12)；在两侧远心地构造的传输光学机构(14)，该传输光学机构用于使得在所述中间图像腔(18)中产生的光片成像到样品中，且用于使得用光片照明的样品区域作为中间图像成像到所述中间图像腔(18)中；和用于把在所述中间图像腔(18)中产生的中间图像成像到探测器(30)上的探测光学机构(16)。所述照明光学机构(12)、所述传输光学机构(14)和所述探测光学机构(16)的光学轴线(O1、O2、O3)在所述中间图像腔(18)中彼此相交。在所述传输光学机构(14)中设置了扫描部件(50)，利用该扫描部件可使得所述样品中的光片横向于所述传输光学机构(14)的光学轴线(O2)移动。
Description
本发明涉及一种光片显微镜，其包括用于在中间图像腔中产生光片的照明光学机构、在两侧远心地构造的传输光学机构和用于把在中间图像腔中产生的中间图像成像到探测器上的探测光学机构，该传输光学机构用于使得在中间图像面中产生的光片成像到样品中，且用于使得用光片照明的样品区域作为中间图像成像到中间图像腔中，其中，照明光学机构、传输光学机构和探测光学机构的光学轴线在中间图像腔中彼此相交。
传统的光片显微镜在样品侧具有两个分开的物镜，其中的一个物镜用于照明，另一个用于探测。通过照明物镜，把通常平行于光学轴线朝向的光片聚焦到样品中，该光片然后由探测物镜成像在探测器上，该探测物镜的光学轴线垂直于照明物镜的光学轴线。在有些应用中，由于缺少空间，无法借助配备有两个分开的物镜的这种光片显微镜将样品成像，针对于这些应用，在US 8 582 203 B2中提出了一种显微镜，其在样品侧利用一个唯一的物镜就足以应付了。就该显微镜而言，光片聚焦到样品中，使得该光片相对于物镜的光学轴线倾斜地布置。由于这种倾斜布置，这种显微镜也称为倾斜平面显微镜(OPM：“oblique planemicroscope”)。
由于由现有技术已知的倾斜平面显微镜只有一个唯一的面向样品的物镜，所以它能实现一种通路，用来基于荧光地、显微地将光片成像到样品中，所述样品的成像借助于传统的带有两个物镜的光片显微镜是无法实现的。作为主要的组件，它含有用于立体成像的所谓的传输光学机构。该传输光学机构是4f系统或在两侧远心的成像系统，该系统的放大率必须等于样品腔与中间图像腔之间的折射率比例，以便也保证孔径角的正确成像。如果满足了两侧远心的要求以及所谓的放大率匹配的要求，则似乎可以在样品腔和中间图像腔之间传输立体图像。相比之下，在传统的显微镜中，无法满足前述的两个要求中的任一个，只能对平面图像进行传输。
由Kumar等人的“Optics Express 19(2011)，13839-13847(其中的图1)”已知一种光片显微镜，其具有照明光学机构、上述类型的传输光学机构以及探测光学机构，它们的光学轴线在中间图像腔中汇聚。为了聚焦和采集立体图像，可以轴向地移动在传输光学机构中含有的物镜之一。替代地，也可以沿着传输光学机构的光学轴线移动样品。这种已知的布置方式的缺点因而是，要移动物镜或样品形式的比较大的质量，其会产生振动，并且只能实现小的立体图像率。
由US 8 619 237 B2已知倾斜平面显微镜的一种变型，其能实现借助于两个转向部件横向地扫描空间，这两个转向部件中的一个指配给照明光片，另一个指配给成像平面。两个转向部件构造在多边形反射镜上，进而在几何上相互耦接。对这些转向部件的布置因而不是远心的。它也只能实现使用半个系统孔眼用于成像。这引起了几何上的失真，限制了系统的光学效率。此外，多边形反射镜只能繁琐地并且昂贵地制造，其具有比较大的惯性矩，该惯性矩限制了系统的立体图像率。
在Bouchard等人的“Nature Photonics 9(2015)，113-119(其中的在补充部分中含有的图5)”中公开了上述系统的一种变型，在该变型中可以使用整个孔眼。然而为此需要两个必须同步的检流计系统。另外，这种变型的系统需要多个光学器件。
由WO 2015/109 323 A2(其中的图10)已知一种带横向扫描的倾斜平面显微镜，其利用一个唯一的扫描部件就足以应付。然而，就该显微镜而言，借助于在传输光学机构中含有的二色性的分光器对照明光和探测光进行组合或分离。这种分光器具有缺点：它在传输光学机构中引起孔眼偏移，该孔眼偏移有可能如此之大，以至于传输光学机构无法再保证所需要的立体成像。为了减小孔眼偏移，也为了允许所需要的透射穿过分光器衬底，要把二色性的分光器设计得尽可能地薄。由于这种分光器通常是一种构造比较复杂的层式系统，所以在特别薄的设计情况下，存在产生应力的危险，在反射中人们将其视为成像的散光的像差。
本发明的目的是，提出一种光片显微镜以及一种用于使得样品光学显微地成像的方法，它们能以较小的技术代价实现有效的立体成像。
本发明通过独立权利要求的主题来实现所述目的。有利的改进在从属权利要求以及后续说明中给出。
本发明的光片显微镜包括用于在中间图像腔中产生光片的照明光学机构、在两侧远心地构造的传输光学机构和用于把在中间图像腔中产生的中间图像成像到探测器上的探测光学机构，该传输光学机构用于使得在中间图像腔中产生的光片成像到样品中，且用于使得用光片照明的样品区域作为中间图像成像到中间图像腔中。照明光学机构、传输光学机构和探测光学机构的光学轴线在中间图像腔中彼此相交。在传输光学机构中设置了扫描部件，利用该扫描部件可使得样品中的光片横向于传输光学机构的光学轴线移动。
本发明的传输光学机构是一种中间成像系统，该中间成像系统具有对于立体成像必需的特性，即：与样品腔和中间图像腔之间的折射率比例相等的放大率，以便保证孔径角的正确成像；和在两侧的也就是既在样本侧又在图像侧的远心，即独立于沿着光学轴线的位置的横向放大率。
传统的光片显微镜的中间成像光学机构并非两侧远心的，相比之下，使用两侧远心的传输光学机构和由此实现的远心的扫描布置还具有如下优点：在传输光学机构中不会引起失真。
本发明规定，在传输光学机构中优选设置一个唯一的扫描部件，该扫描部件能够使得样品中的光片横向于传输光学机构的光学轴线移动。本发明因而能够实现便于立体成像的横向扫描。对于传统的光片显微镜，为了采集立体图像，使得物镜或样品进而使得比较大的质量沿着光学轴线移动，特别是与所述光片显微镜相比，本发明的显微镜具有无振动地采集图像的优点。此外，能实现较高的立体图像率。
与已知的用两个扫描部件工作的显微镜不同，在本发明的传输光学机构中，为了横向扫描，只需要一个唯一的扫描部件，其形式例如为检流计反射镜或微机电反射镜，简写为MEMS-反射镜，由此无需繁琐的同步，并且可以实现远心的扫描过程，而没有额外代价。因此，相比于现有技术中的相仿的显微镜，根据本发明的光片显微镜利用较少数量的光学组件就足以应付了。这使得显微镜的技术实现更加简单且廉价。这在与使用比较昂贵的多边形反射镜的传统系统的比较中也尤其适用。
就本发明的光片显微镜而言，照明光学机构、传输光学机构和探测光学机构相互协调，从而它们的光学轴线在中间腔中汇聚，也就是说，彼此相交。由此在中间图像腔中产生的中间图像的区域内输入照明光。这能实现在传输光学机构的区域中省去二色性的部件，这些部件在已知的光片显微镜中用于照明光和探测光的组合或分离。由于一方面这种二色性的部件经常产生显著的孔眼偏移，另一方面传输光学机构对于这种孔眼偏移相当敏感，所以，根据本发明省去二色性的部件，这有利于在样品腔和中间图像腔之间精确地传输立体图像。这样就能例如省去针对二色性分光器的高度精确的更换方案，所述更换方案能使得分光器适应于相应的实验，且按照所需的精度只能繁琐地、昂贵地实现。此外，使用二色性分光器对于多波长成像来说也是一种折中。因此，这里例如经常会出现光谱信道串扰。相比之下，使用中性分光器和偏振分光器并不适合于荧光成像。
根据本发明，在中间图像的区域中，在照明光学机构、传输光学机构和探测光学机构的光学轴线的相交处，把照明光和发射光在几何上组合起来，通过这种组合，可以在传输光路中省去二色性的部件，由此可以避免前述的缺点。本发明因而规定，借助于照明光学机构在中间图像腔中产生光片。探测光学机构具有如下功能：使得在中间图像腔中产生的中间图像成像到探测器上。于是，照明光学机构和探测光学机构就其本身而言已经形成了一种显微镜单元，该显微镜单元的光路通过传输光学机构似乎只需再传输到样品中。换句话说，该显微镜单元已经可以理解为独立的仅仅与传输光学机构耦接的光片显微镜。有些系统利用分光器等工作，以便把各子系统首先组装成一个能完全工作的显微镜，相比于这些系统，本发明的布置方式因而对公差和调节不太敏感。这特别是因为，在前述子系统中往往会在像差方面出现差异，这种差异必须通过适当的预防措施予以消除或者只好予以忍受。
传输光学机构经过优选构造，使得样品中的光片相对于传输光学机构的光学轴线倾斜地布置。本发明的光片显微镜因而形成了一种高效的倾斜平面显微镜。
出于上述原因，传输光学机构在一种优选的设计中无分光器。特别地，它没有用于输入照明光的二色性的分光器。
优选地，扫描部件在传输光学机构内部设置在真正的孔眼图像的位置，也就是设置在傅里叶平面中。作为在两侧远心的系统，传输光学机构只有一个唯一的孔眼。
传输光学机构优选含有第一物镜，该第一物镜形成光片显微镜的唯一的面向样品的物镜。
在一种有利的设计中，传输光学机构还含有第一镜筒透镜系统、第一目镜透镜系统、第二目镜透镜系统、第二镜筒透镜系统和面向中间图像腔的第二物镜，它们按照所述顺序从样品开始布置。这种设计能够实现传输系统的特别紧凑的结构。
扫描部件优选设置在第一目镜系统与第二目镜系统之间。
在一种特别优选的设计中，传输光学机构含有图像旋转单元，利用该图像旋转单元可改变样品中的光片相对于传输光学机构的光学轴线的倾斜的方位角。这种图像旋转单元能实现简单地且灵活地调节样品中的光片。该图像旋转单元可以例如通过阿贝-柯尼-旋转器来实现，该旋转器优选设置在传输光学机构的光路中。
此外，传输光学机构可以设计成矫正光学系统，该矫正光学系统允许适应于不同折射率的样品。这可以例如通过使用带矫正调节的物镜(比如由US8730583B2已知)来进行，这些物镜也允许机动地调节矫正部件。特别有利的是，使用带矫正调节的物镜，这些物镜不仅矫正由折射率失调引起的孔径像差，而且同时经过设计，从而焦距在采用矫正调节时发生改变，致使对于全部样品侧的折射率来说都保持满足适用于传输光学机构的放大条件。
为了满足放大调整的上述要求，需要把相应的放大部件例如无焦点系统装入到传输光学机构中，该系统设置在传输光学机构的无限光路的一部分中。
照明光学机构优选含有望远镜系统和面向中间图像的照明物镜。
作为光源，优选使用激光光源。但该光源也可以是发光二极管或灯。在使用激光光源时，在照明光学机构的光路中无需激发滤光器。而若使用带有宽广的发射光谱的光源，就会需要这种滤光器。
照明光学机构优选含有用于产生光片的变形的光学系统。该变形的光学系统可以由柱面透镜单独地实现，或者与置于其后面的照明物镜组合地实现。
在一种替代的实施方式中，照明光学机构含有用于在中间图像腔中产生光片的另一扫描部件，其形式例如为检流计反射镜或MEMS-反射镜。在该实施方式中，通过照射到扫描部件上的照明光束的扫描运动，顺序地构造光片。光片产生的这种方式例如提供了如下可行性：通过光源与扫描部件之间的相应的同步，实现了光片的建构。
照明光学机构优选地含有调节装置，用于使得光片相对于探测器的探测平面定向。该光片因而可以特别简单地调节。
前述调节装置优选包括设置在与图像面共轭的平面上的第一调节部件和设置在与孔眼面共轭的平面上的第二调节部件。由此可以相互独立地调节光片的位置和角度。
在一种优选的设计中，设置了至少一个用于光路的转折的转向部件。这种转向部件可以例如设置在传输光学机构中，以便将传输光学机构设计得尽可能紧凑。
探测光学机构优选具有面向中间图像腔的探测物镜，且具有镜筒透镜系统，它们使得探测到的荧光成像到探测器例如照相机传感器上。在探测物镜与镜筒透镜系统之间的无限光路上，可以设置发射滤光器，其要么位置固定地安装，要么安装在更换装置上。但这种设计只能示范性地理解。因此，探测光学机构也可以设计成无镜筒透镜系统的有限成像系统。
为了使得在传输光学机构中含有的扫描部件与借助探测器进行的图像采集同步，可以设置控制单元。该控制单元经过优选构造，从而它也控制光源，并且使得该光源与图像采集和扫描部件同步。在一种实施方式中，借助于在照明光学机构中含有的另一扫描部件产生光片，在该实施方式中，控制单元优选还经过构造，从而它也使得所述扫描部件与余下的系统组件同步。
优选地，本发明的光片显微镜经过设计，从而探测光学机构的主要光束传播经过传输光学机构。由此可以实现高的光效率。
在选择探测光学机构的数值孔径时，可以选择探测物镜的孔眼的对称的照明，进而选择在照相机传感器上的对称的点扩散函数(简写为PSF)。替代地，也可以使得探测光学机构的孔径最大化，这导致在探测器上的非对称的PSF，但造成了光学机构的较高的光效率。
在另一实施方式中，探测光学机构含有缩放系统，从而该探测光学机构可以独立于探测物镜进行放大率改变。例如，可以把上述镜筒透镜系统设计成缩放系统。但也可行的是，在探测光学机构的无限的光路中为无焦点的放大系统设置更换系统。为了所述目的，也可以考虑用于镜筒透镜系统的更换系统。
在探测光学机构的无限的光路中，可以接入比如由传统的显微镜已知的操纵系统，在那里，通常在垂直照明光路中接入。这些操纵系统能实现直接在成像面上操纵，而受操纵的光借助于传输光学机构成像到样品中。这种操纵系统的例子比如是扫描系统，如数字微镜器件，简写为DMD。
本发明的光片显微镜可以有选择地实现为独立的系统，或者实现为用于传统的显微镜例如立式显微镜、倒式显微镜或固定台式显微镜的模块。如果光片显微镜实现为用于传统显微镜的模块，则传输光学机构的一个或多个部分可以例如是面向样品的物镜、镜筒透镜系统和/或显微镜的目镜透镜系统。
下面借助实施例参照附图介绍本发明。其中：
图1作为第一实施例示出了光片显微镜的示意性的结构；
图2作为第二实施例示出了光片显微镜的一个变型的实施方式；
图3作为第三实施例示出了光片显微镜的另一变型的实施方式。
图1以示意图示出光片显微镜10的结构，该光片显微镜按照倾斜平面显微镜的方式用于立体成像。
光片显微镜10包括照明光学机构12、传输光学机构14和探测光学机构16，它们的光学轴线O1、O2或O3在图1中用18标出的中间图像腔内汇聚，也就是说，在那里彼此相交。照明光学机构12用于把由光源20供应给它的照明光22聚焦到中间图像腔18中，从而在那里产生按照光片方式的照明光分布。在中间图像腔18中产生的该光片于是通过传输光学机构14成像到图1中未示出的样品内，从而样品的一个区域利用光片被照明，并且受到激励而发出荧光射束。从样品发出的荧光射束又进入到传输光学机构14中，该传输光学机构于是把利用光片照明的样品区域作为中间图像成像到中间图像腔18中。被照明的样品区域的在中间图像腔18中产生的中间图像最终通过探测光学机构16成像到探测器30的探测面28上。
照明光学机构12在由光源20发出的照明光22的传播方向上相继地含有柱面透镜32、第一调节部件34、目镜透镜系统36、第二调节部件38、镜筒透镜部件40以及面向中间图像腔18的照明物镜42。柱面透镜32和照明物镜42在根据图1的实施例中是变形的光学系统的一部分，该系统具有如下功能：从由光源20发出的照明光22在中间图像腔18中产生所希望形式的光片。在此，柱面透镜32使得照明光22聚焦到照明物镜42的孔眼的、由目镜透镜系统36和镜筒透镜系统40产生的图像中。在根据图1的实施例中，镜筒透镜系统40和目镜透镜系统36因而形成带有真实的中间图像的伽利略-望远镜。但要指出，变形系统的在根据图1的实施方式中选用的实现方式应当纯示范性地理解。因而例如特别是对于较小的数值孔径来说也可行的是，在放弃照明物镜42的情况下，单独使用柱面透镜32，以便形成光片。
在照明光学机构12中含有的两个调节部件34和38形成一种调节装置，该调节装置能实现相对于探测器30的探测面28调节光片，确切地说，相对于探测面28的在中间图像腔18中由探测光学机构16产生的图像进行调节，光片与所述图像重叠。在此，调节部件38设置在与照明物镜42的图像平面共轭的平面中。因此，通过调节部件38的倾斜来改变照明光22从照明物镜42中射出的角度。调节部件34设置在与照明物镜42的孔眼平面共轭的平面中。因此，通过调节部件34可以调节从照明物镜42射出的照明光22的位置。两个调节部件34和38因而允许相互独立地调节光片的位置和角度。
为了产生光片，照明光学机构12可以含有在图1中未明确示出的其它部件，例如场光圈和/孔径光圈。场光圈在此具有如下功能：把光片限制在其传播方向上。相比之下，孔径光圈用于限制光片聚焦的张角。
按照从样本观察的顺序，传输光学机构14含有面向未示出的样品的物镜44、镜筒透镜系统46、目镜透镜系统48、扫描部件50、目镜透镜系统52、镜筒透镜系统54、转向部件26、无焦点系统58以及中间成像物镜56。在此，物镜44形成光片显微镜10的唯一的面向样品的物镜。
传输光学机构14被设计成在两侧远心的光学系统。在传输光学机构14中含有的无焦点系统58用于使得对于所希望的立体图像传输来说必需的放大适配于在样品腔与中间图像腔18之间的折射率比例。
例如被设计成检流计反射镜或MEMS反射镜的扫描部件50能实现横向地即横向于物镜44的光学轴线利用光片来扫描样品。为此，扫描部件50在两个目镜透镜系统48和52之间设置在一个位置，在该位置，借助于目镜透镜系统48和52产生传输光学机构14的孔眼的真正的图像。
探测光学机构16含有面向中间图像腔18的探测样本60以及含有镜筒透镜系统62。通过探测物镜60和镜筒透镜系统62，利用光片照明的样品区域的由传输光学机构14在中间图像腔中产生的中间图像被成像到探测器30的探测面28上。
光片显微镜10还具有控制单元64，该控制单元控制光源20、探测器30和扫描部件50。特别地，控制单元64负责使得光源20、探测器30和扫描部件50相互同步地工作。于是，控制单元64例如确保扫描部件50的倾斜、进而光片的横向扫描运动与探测器30的图像采集同步。光源20也可以借助于控制单元64同步地工作，其方式比如为，在扫描部件50的复位运动期间和/或在探测器30的读取期间切断照明光。这些被同步的控制过程当然仅仅应示范性地予以理解。
由于在根据图1的光片显微镜10中照明光学机构12、传输光学机构14和探测光学机构16相向地朝向，使得它们的光学轴线O1、O2或O3在中间图像腔18内汇聚，所以，在中间图像的区域中似乎通过几何组合使得由光源20产生的照明光22输入到传输光学机构14中，这能实现省去在传输光学机构14的区域中的二色性的分光部件。由此能够可靠地避免孔眼偏移，孔眼偏移会削弱传输光学机构14的成像性能。
在图2中，作为第二实施例示出了图1中所示的光片显微镜10的一个变型。该变型仅仅在于，代替在第一实施例中用于产生光片的柱面透镜32，在照明光学机构12中设置了另一扫描部件24。该扫描部件24例如是检流计反射镜或MEMS反射镜，它在照明光学机构12中设置在一个位置，在第一实施例中调节部件34位于该位置。扫描部件24引起照明光的扫描运动，通过这种扫描运动顺序地构造所希望的光片。在此，控制单元64又负责使得扫描部件24的工作与其它系统组件同步，特别是与在传输光学机构14中含有的扫描部件50和探测器30同步。
图3作为第三实施例示出了光片显微镜10的另一变型。于是，第三实施例在传输光学机构14中在物镜44与扫描部件50之间含有图像旋转单元66，该图像旋转单元例如设计成阿贝-柯尼-旋转器。图像旋转单元66用于根据意愿来改变成像到样品中的光片的倾斜方位角，所述倾斜在光片显微镜10内部通过光学设备的所选的造型来确定。图像旋转单元66也可以通过控制单元64与其它系统组件同步地控制。
不言而喻，图3中所示的图像旋转单元66也可应用在根据图2的第二实施例中。
附图标记清单
10 光片显微镜
12 照明光学机构
14 传输光学机构
16 探测光学机构
18 中间图像腔
20 光源
22 照明光
24 扫描部件
26 转向部件
28 探测面
30 探测器
32 柱面透镜
34 调节部件
36 目镜透镜系统
38 调节部件
40 镜筒透镜系统
42 照明物镜
44 面向样品的物镜
46 镜筒透镜系统
48 目镜透镜系统
50 扫描部件
52 目镜透镜系统
54 镜筒透镜系统
56 中间成像物镜
58 无焦点系统
60 探测物镜
62 镜筒透镜系统
64 控制单元
66 图像旋转单元
O1 照明光学机构的光学轴线
O2 传输光学机构的光学轴线
O3 探测光学机构的光学轴线
Claims (14)
1.一种光片显微镜(10)，包括：
-用于在中间图像腔(18)中产生光片的照明光学机构(12)；
-在两侧远心地构造的传输光学机构(14)，该传输光学机构用于使得在所述中间图像腔(18)中产生的光片成像到样品中，且用于使得用所述光片照明的样品区域作为中间图像成像到所述中间图像腔(18)中；和
-用于把在所述中间图像腔(18)中产生的中间图像成像到探测器(30)上的探测光学机构(16)，
-其中，所述照明光学机构(12)、所述传输光学机构(14)和所述探测光学机构(16)的光学轴线(O1、O2、O3)在所述中间图像腔(18)中彼此相交，
-其特征在于，所述传输光学机构(14)经过构造，使得所述样品中的光片相对于所述传输光学机构(14)的光学轴线(O2)倾斜地布置，和
-设置在所述传输光学机构(14)中的扫描部件(50)，利用该扫描部件可使得所述样品中的光片横向于所述传输光学机构(14)的光学轴线(O2)移动。
2.如权利要求1 所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述传输光学机构(14)无分光器。
3.如权利要求1所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述扫描部件(50)在所述传输光学机构(14)的内部设置在真正的孔眼图像的位置。
4.如权利要求1所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述传输光学机构(14)含有第一物镜(44)，该第一物镜形成所述光片显微镜(10)的唯一的面向样品的物镜。
5.如权利要求4所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述传输光学机构(14)还含有第一镜筒透镜系统(46)、第一目镜透镜系统(48)、第二目镜透镜系统(52)、第二镜筒透镜系统(54)和面向所述中间图像腔(18)的中间成像物镜(56)，它们按照所述顺序从所述样品开始布置。
6.如权利要求5所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述扫描部件(50)设置在所述第一目镜透镜系统(48)与所述第二目镜透镜系统(52)之间。
7.如权利要求1所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述传输光学机构(14)含有图像旋转单元(66)，利用该图像旋转单元可改变所述样品中的光片相对于所述传输光学机构(14)的光学轴线(O2)的倾斜度。
8.如权利要求1所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述照明光学机构(12)含有望远镜系统(36、40)和面向所述中间图像腔(18)的照明物镜(42)。
9.如权利要求1所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述照明光学机构(12)含有用于在所述中间图像腔(18)中产生所述光片的变形的光学系统(32、42)。
10.如权利要求1所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述照明光学机构(12)含有用于在所述中间图像腔(18)中产生所述光片的另一扫描部件(24)。
11.如权利要求1所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述照明光学机构(12)含有调节装置(34、38)，用于使得所述光片相对于所述探测器(30)的探测面(28)定向。
12.如权利要求11所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述调节装置包括设置在与图像面共轭的平面上的第一调节部件(38)和设置在与孔眼面共轭的平面上的第二调节部件(34)。
13.如权利要求1所述的光片显微镜(10)，其特征在于，所述传输光学机构设计成矫正光学系统，该矫正光学系统能实现适应于不同折射率的样品。
14.一种用于使得样品光学显微地成像的方法，包括如下步骤：
-借助照明光学机构(12)在中间图像腔(18)中产生光片；
-借助在两侧远心地构造的传输光学机构(14)，使得在所述中间图像腔(18)中产生的光片成像到所述样品中，且使得用所述光片照明的样品区域作为中间图像成像到所述中间图像腔(18)中；和
-借助探测光学机构(16)，把在所述中间图像腔(18)中产生的中间图像成像到探测器(30)上，
-其中，所述照明光学机构(12)、所述传输光学机构(14)和所述探测光学机构(16)的光学轴线(O1、O2、O3)在所述中间图像腔(18)中彼此相交，
-其特征在于，
通过相应地构造的所述传输光学机构(14)，使得所述样品中的光片相对于所述传输光学机构(14)的光学轴线(O2)倾斜地布置，
借助设置在所述传输光学机构(14)中的扫描部件(50)，使得所述光片在所述样品中横向于所述传输光学机构(14)的光学轴线(O2)移动。
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