CN108578399B - 氨基酸酯化合物在制备抗cvb3病毒药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种氨基酸酯化合物在制备抗CVB3病毒药物中的应用,属于抗病毒药物技术领域。本发明通过大量的生物学实验验证,发现氨基酸酯化合物(甘氨酸乙酯、L‑亮氨酸甲酯、L‑丙氨酸甲酯、L‑丙氨酸叔丁酯、β‑丙氨酸乙酯、D‑亮氨酸甲酯、甘氨酸叔丁酯、β‑丙氨叔丁酯、L‑亮氨酸叔丁酯)能够抑制CVB3病毒在细胞内的复制增殖,并能强烈抑制CVB3病毒引起的细胞病变效应,提高感染细胞的存活率,其可用于制备抗CVB3病毒药物或治疗由CVB3病毒感染所引起的疾病的药物。本发明发现了氨基酸酯化合物新的制药用途,为开发抗CVB3病毒药物提供了新的方向。
Description
技术领域
本发明涉及抗病毒药物技术领域,具体涉及氨基酸酯化合物在制备抗CVB3病毒药物中的应用。
背景技术
柯萨奇病毒(Coxsaekievirus,CV)是小核糖核酸病毒(Picornaviridae)肠道病毒属(Enterovirus)成员,其感染可引起多种疾病,如手足口病、无菌性脑膜炎、脑炎、心肌炎、流行性肌炎痛、疱疹性咽峡炎等。已报道的CV共有29个血清型,根据其对乳鼠的致病特点及对细胞敏感性的不同,可将其分为A和B两组,即CVA(CVA1-22,24)和CVB(CVB1-6)。以CVBs的感染最为常见,其中CVB3是CVB六个血清型中致病性最强的一型,是病毒性心肌炎最主要的致病原因。据美国疾病预防控制中心(CDC)统计数据发现,CVB(1-6型)每年可导致约500万人患肠道系统疾病,其中10%-20%是由CVB3引起的急性心肌炎。近年来CVB3引起手足口病的趋势也在上升,在我国也有很多CVB3引发疾病流行的报道。目前对于柯萨奇病毒感染无特效药物,临床尚无有针对性的治疗手段。
氨基酸酯是一类具有生物活性的有机化合物。氨基酸酯可用做羧基的活化和保护基团、药物或药物中间体、食品添加剂等,广泛应用于化工、医药、食品等诸多领域(Schu J,et.al.Bull Austral Math Soc,1991,43,153)。例如:氨基酸酯取代聚膦腈引入药物控释领域,该类聚合物的水解产物(磷酸盐、氨、以及氨基酸和醇)对哺乳动物细胞的增殖无不利影响,且可以通过引入不同种类、性质和数目的氨基酸酯取代基制得物理性质和降解性能大不相同、甚至完全相反的聚合物(Allcock H R,et.al.Chemistry and Application ofPolyphosphazenes,2003,Chapter 1);与用作生物医药及组织工程的传统材料相比,氨基酸酯取代聚膦腈最具有潜在的生物医用价值(Lakshmi St Katti D S,et.al.AdvancedDrug Delivery Reviews,2003,55,467-482);在前期研究中,我们设计合成了氨基酸酯高喜树碱A环10位引入氨基酸酯基以期增强其水溶性和抗肿瘤活性,体外抗肿瘤活性研究表明多个化合物优于阳性对照药,部分化合物在浓度100μg/mL时的抑制率甚至达到了100%(You L,et.al.Chinese Chemical Letters,2008,19,811-813)。然而氨基酸酯对于CVB3病毒的抑制活性到目前却未见报道。
发明内容
本发明的目的在于开发新的特异有效的抗CVB3药物,提供氨基酸酯化合物在制备抗柯萨奇病毒B3型(CVB3)药物中的应用。
本发明通过大量的生物学实验验证,发现氨基酸酯化合物能够抑制CVB3病毒在细胞内的复制增殖,并能强烈抑制CVB3病毒引起的细胞病变效应,提高感染细胞的存活率。由此表明氨基酸酯化合物可以用于制备抗CVB3病毒感染的特异治疗药物。基于该发现,本发明提供了氨基酸酯化合物的如下制药用途:
一种氨基酸酯化合物在制备抗CVB3病毒药物中的应用,所述的抗CVB3病毒包括抑制CVB3的复制增殖。
一种氨基酸酯化合物在制备治疗由CVB3病毒感染所引起的疾病的药物中的应用,所述的疾病包括与CVB3病毒感染有关的手足口病、无菌性脑膜炎、脑炎、心肌炎、流行性肌炎痛、疱疹性咽峡炎等。
所述氨基酸酯化合物包括甘氨酸乙酯(1)、L-亮氨酸甲酯(2)、L-丙氨酸甲酯(3)、L-丙氨酸叔丁酯(4)、β-丙氨酸乙酯(5)、D-亮氨酸甲酯(6)、甘氨酸叔丁酯(7)、β-丙氨叔丁酯(8)、L-亮氨酸叔丁酯(9),这些化合物的化学结构式如下所示:
一种抗CVB3病毒药物,包括上述氨基酸酯化合物中的一种,或两种、多种的组合;进一步地,还包括这些氨基酸酯化合物药剂学可接受的辅料和载体。
一种治疗由CVB3病毒感染所引起的疾病的药物,包括上述氨基酸酯化合物中的一种,或两种、多种的组合;进一步地,还包括这些氨基酸酯化合物药剂学可接受的辅料和载体。
上述抗CVB3病毒药物或治疗由CVB3病毒感染所引起的疾病的药物的剂型包括颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、注射剂、分散剂。
本发明具有以下优点和有益效果:
(1)氨基酸酯化合物的抗CVB3病毒活性未见报道,对其抗CVB3病毒活性的开发具有一定的导向作用。
(2)从结构相似的化合物中寻找抗CVB3药物,易于通过构效关系研究寻找到其作用靶点,为进一步药物开发提供一定的借鉴意义。
附图说明
图1是不同氨基酸酯化合物对于CVB3作用的Hep-2细胞存活率影响的结果图。
图2是甘氨酸乙酯(1)、L-亮氨酸甲酯(2)、β-丙氨酸乙酯(5)对于CVB3引起的Hep-2细胞CPE的抑制效应图。
图3是β-丙氨酸乙酯(5)对于CVB3子代病毒产量抑制作用的结果图。
具体实施方式
以下实施例用于进一步说明本发明的内容,但不应理解为对本发明的限制,在不背离本发明精神和实质的情况下,对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换均属于本发明的范围。若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1氨基酸酯化合物抗CVB3活性分析
所测试氨基酸酯化合物包括甘氨酸乙酯(1)、L-亮氨酸甲酯(2)、L-丙氨酸甲酯(3)、L-丙氨酸叔丁酯(4)、β-丙氨酸乙酯(5)、D-亮氨酸甲酯(6)、甘氨酸叔丁酯(7)、β-丙氨酸叔丁酯(8)、L-亮氨酸叔丁酯(9)。
(1)化合物对于宿主Hep-2细胞的毒性
将Hep-2细胞铺板96孔板,在37℃、5%CO2培养箱培养长满单层后,弃去细胞培养液,分别加含不同浓度测试化合物(利巴韦林作为阳性对照药物)的细胞维持液继续培养,48h后显微镜目测并分别记录其细胞毒性,MTT法测定细胞存活率。MTT法具体步骤为:每孔加入MTT 30μL(5mg·mL-1),孵育3-4h后去掉上清液,加入50μL的DMSO溶解沉淀。用酶标仪在490nm处读取所对应的吸光度(OD490值)。
用SPSS 11.5软件计算药物对于细胞的半数中毒浓度(Median cyctoxicconcentration,CC50)。
细胞存活率=(药物组平均OD490值/细胞对照组平均OD490值)×100%。
(2)化合物对于CVB3的抑制活性
将Hep-2细胞铺板96孔板,在37℃、5%CO2培养箱培养长满单层后,弃去培养液,100TCID50的CVB3病毒液感染细胞1.5h,加入不同浓度的测试化合物(利巴韦林作为阳性对照药物)孵育细胞。待继续培养约48h,病毒对照孔出现90%左右的CPE病变时,显微镜下观察细胞病变效应(CPE)。CPE的观察记录方法:无细胞病变记做-,25%以下细胞病变记做+,25%-50%细胞病变记做++,50%-75%细胞病变记做+++,75%以上细胞病变记为++++。
CPE观察完毕后,利用MTT方法检测化合物对CVB3的抑制率。MTT方法具体步骤为:每孔加入MTT 30μL(5mg·mL-1),孵育3-4h后去掉上清液,加入50μL的DMSO溶解沉淀。用酶标仪在490nm处读取所对应的吸光度(OD490值)。
用SPSS 11.5软件计算药物的半数有效浓度(Concentration for 50%ofmaximal effect,EC50)。
利用如下公式计算药物对CVB3的抑制率。
(3)化合物的治疗指数(SI)
SI=CC50/EC50,治疗指数越高,说明抗病毒潜力越大。
结合细胞病变效应分析和MTT测定细胞存活率检测方法,对抗CVB3活性进行评估,结果见表1、图1和2。
氨基酸酯化合物的细胞毒性及抗CVB3活性测试结果见表1。浓度依赖的氨基酸酯化合物对于CVB3作用的Hep-2细胞存活率的影响如图1所示。
表1
结果表明这些氨基酸酯化合物对CVB3均有一定的抑制活性,其中化合物1(甘氨酸乙酯)、2(L-亮氨酸甲酯)、5(β-丙氨酸乙酯)具有较高的治疗指数,其抑制活性和阳性对照化合物利巴韦林基本相当。
化合物1(甘氨酸乙酯)、2(L-亮氨酸甲酯)、5(β-丙氨酸乙酯)抑制CVB3引起的Hep-2细胞CPE效应如图2所示。CVB3感染的Hep-2细胞变圆,从细胞板壁脱离,而50μg/mL化合物1(甘氨酸乙酯)、2(L-亮氨酸甲酯)、5(β-丙氨酸乙酯)处理则可以很好的保护CVB3引起的细胞病变效应,表现出优良的抗CVB3活性。
实施例2化合物5(β-丙氨酸乙酯)对于CVB3子代病毒产量的抑制
对数生长期的Hep-2细胞铺板96孔板,长满单层后100TCID50 CVB3感染细胞,37℃孵育1.5h后移去病毒液,PBS洗涤三次,加入含50μg/mL的化合物5(β-丙氨酸乙酯)的细胞维持液。分别于12h和36h收集细胞和上清培养液,-20℃和37℃三次冻融裂解后,TCID50方法测定CVB3病毒滴度。
结果如图3所示,病毒感染12h,可以检测到明显的子代病毒滴度,感染36h后,子代病毒滴度呈现大幅增长。而50μg/mL的5号化合物处理的Hep-2细胞相对于病毒对照组,12h时呈现出一定的抑制作用,直到36h病毒滴度无明显增加,表现出强烈的抑制效应,相对于病毒对照组下降约2.68log。
通过上述实施例可知,氨基酸酯化合物有较强的抗CVB3活性,可以强烈抑制CVB3病毒引起的Hep-2细胞病变效应,大幅降低子代病毒产量。其中甘氨酸乙酯、L-亮氨酸甲酯、β-丙氨酸乙酯具有较高的治疗指数,有潜力制备临床上有效对抗CVB3感染的药物。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种氨基酸酯化合物在制备抗CVB3病毒药物中的应用,其特征在于:所述的氨基酸酯化合物为甘氨酸乙酯、L-亮氨酸甲酯、L-丙氨酸甲酯、L-丙氨酸叔丁酯、β-丙氨酸乙酯、D-亮氨酸甲酯、甘氨酸叔丁酯、β-丙氨叔丁酯、L-亮氨酸叔丁酯。
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Low-Dose Nω-Nitro-L-Arginine Methyl Ester Treatment Improves Survival Rate and Decreases Myocardial Injury in a Murine Model of Viral Myocarditis Induced by Coxsackievirus B3;Shuji Mikami等;《Circulation Research》;19971001;第81卷(第4期);504-511 * |
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