CN108572149A - 一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法及系统 - Google Patents
一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法及系统 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法及系统,属于肿瘤检测技术领域。其中,该方法包括:基于获取到的用户实验组吸光值数据和用户对照组吸光值数据,分别绘制用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线;基于用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,分别计算用户实验组吸光值曲线和用户对照组数据吸光值曲线的酶动力学参数;基于用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数及用户对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到对应的酶动力学参数差;基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,计算硫氧还蛋白还原酶活性。该方法能够保证用户的硫氧还蛋白还原酶活性的准确性,实时的检测用户体内异常活跃的组织细胞增生情况。
Description
技术领域
本发明涉及肿瘤检测技术领域,特别涉及一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法及系统。
背景技术
近年来,肿瘤已成为全球范围内严重危害人类健康及生命的重大疾病之一。人们普遍认为癌症为不治之症,这主要源于癌症治愈率低、死亡率高并具有广泛的分布性。
迄今,世界各国投入了大量的人力、物力用于肿瘤的预防、诊断和治疗。肿瘤的高致死率主要由于肿瘤细胞具有转移和侵袭能力,约90%肿瘤病人的死亡源于肿瘤的转移,然而早期的治疗干预会提高治疗效果。由此看来,早期诊断和治疗对于提升肿瘤病人的生存率具有至关重要的意义。
硫氧还蛋白还原酶(TR)活性检测是针对人体异常增生活性水平进行评价的一项技术,目前国际国内临床尚无对人体通过血液进行异常增生评价的相关技术手段。此项技术临床意义在于,硫氧还蛋白还原酶可实时检测人体内的异常增生活跃程度,由于不可逆恶性增生是肿瘤的重要特征,在癌症的早期阶段该值就会明显升高,因此硫氧还蛋白还原酶检测可作为一种肿瘤早期预警技术。硫氧还蛋白还原酶活性检测的特异性、敏感性、广谱性都高于现有的肿瘤标志物。硫氧还蛋白还原酶活性检测既能对肿瘤早期发生进行预警提示,又能用于早期肿瘤的辅助诊断、各种肿瘤治疗方法疗效评价及肿瘤复发、转移的评估。
发明内容
本发明的目的是提供一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法及系统,通过质控数据,分别计算质控实验组数据和质控对照组数据的吸光值曲线,并分别进行数据曲线拟合获得第一的酶动力学参数和第二的酶动力学参数,并进而计算酶动力学参数差,将硫氧还蛋白还原酶活性以及酶动力学参数差代入质控标准方程,计算得到质控标准方程的第一参数、第二参数和第三参数。再获取用户实验组吸光值数据和用户对照组吸光值数据,并绘制用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,计算得到用户实验组吸光值曲线和用户对照组数据吸光值曲线的酶动力学参数差,基于酶动力学参数差以及质控标准方程计算得到硫氧还蛋白还原酶活性。通过上述计算方法能够准确的计算测量人血样体系中的硫氧还蛋白还原酶活性。
根据本发明实施例的一个方面:一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法,包括:基于获取到的用户实验组吸光值数据和用户对照组吸光值数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴分别形成用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线;基于用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算用户实验组吸光值曲线和用户对照组数据吸光值曲线的酶动力学参数;基于用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数及用户对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到对应的酶动力学参数差;基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,获得硫氧还蛋白还原酶活性。
进一步,基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,计算硫氧还蛋白还原酶活性的步骤之前,还包括:基于获取到的多种浓度多次测量的质控实验组数据和质控对照组数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴,分别形成质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线;基于质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到第一酶动力学参数和第二酶动力学参数;计算第一酶动力学参数和第二酶动力学参数之间的酶动力学参数差;基于每组浓度,计算多次测量得到的酶动力学参数差的平均值,得到每组浓度的平均酶动力学参数差;基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差,得到质控标准方程的参数。
进一步,基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,计算硫氧还蛋白还原酶活性的步骤包括:将所述酶动力学参数差、质控标准方程的参数代入质控标准方程,计算得到硫氧还蛋白还原酶活性。
进一步,所述基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差,得到质控标准方程的参数的方法为:以硫氧还蛋白还原酶活性为X轴,以平均酶动力学参数差为Y轴,根据每组浓度硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差所形成的点,与质控标准方程Y=AXn+BXn-1进行拟合,得到该质控标准方程的第一参数A、第二参数B和第三参数n。
进一步,所述多种浓度为至少5种浓度;所述多次测量为至少3次测量;所述酶动力学参数是吸光值曲线的斜率或面积。
根据本发明实施例的另一个方面,一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析系统,包括:用户制图模块:用于基于获取到的多种浓度多次测量的质控实验组数据和质控对照组数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴,分别形成质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线;用户酶参数计算模块:用于基于用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算用户实验组吸光值曲线和用户对照组数据吸光值曲线的酶动力学参数;用户差值计算模块:用于基于用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数及用户对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到对应的酶动力学参数差;活性计算模块:用于基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,获得硫氧还蛋白还原酶活性。
进一步,所述系统还包括:质控制图模块:用于基于获取到的多种浓度多次测量的质控实验组数据和质控对照组数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴,分别形成质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线;质控酶参数计算模块:用于基于质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到第一酶动力学参数和第二酶动力学参数;质控差值计算模块:用于计算第一酶动力学参数和第二酶动力学参数之间的酶动力学参数差;均值计算模块:用于基于每组浓度,计算多次测量得到的酶动力学参数差的平均值,得到每组浓度的平均酶动力学参数差;方程参数计算模块:用于基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差,得到质控标准方程的第一参数、第二参数和第三参数。
进一步,所述活性计算模块还用于:将所述酶动力学参数差、第一参数、第二参数和第三参数代入质控标准方程,计算得到硫氧还蛋白还原酶活性。
进一步,所述方程参数计算模块还用于:以硫氧还蛋白还原酶活性为X轴,以平均酶动力学参数差为Y轴,根据每组浓度硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差所形成的点,与Y=AXn+BXn-1进行拟合,得到质控标准方程的第一参数A、第二参数B和第三参数n。
进一步,所述多种浓度为至少5种浓度;所述多次测量为至少3次测量;所述酶动力学参数是吸光值曲线的斜率或面积。
本发明实施例通过获取多种浓度多次测量的质控质控实验组数据和质控对照组数据,得到质控实验组和质控对照组的吸光值曲线,并计算得到质控实验组和质控对照组的吸光值曲线的酶动力学参数差,结合已知的硫氧还蛋白还原酶活性计算得到质控标准方程。获取用户实验组数据和用户对照组数据,得到用户实验组和用户对照组的吸光值曲线,并计算得到用户实验组和用户对照组的吸光值曲线的酶动力学参数差,将酶动力学参数差代入质控标准方程得到用户的硫氧还蛋白还原酶活性。本申请的计算方法,能够通过检测得到的用户数据以及与用户数据一起检测得到的质控数据,精确的计算得到用户的硫氧还蛋白还原酶活性。
附图说明
图1是本发明第一实施例提供的一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法的流程图;
图2是本发明第二实施例提供的一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法的流程图;
图3是本发明第一实施例提供的一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析系统的模块关系示意图;
图4为实施例1基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差得到质控标准方程曲线;
图5为实施例1样本1用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线;
图6为实施例1样本2用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线;
图7为实施例2基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差得到质控标准方程曲线;
图8为实施例2样本1用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了,下面结合具体实施方式并参照附图,对本发明进一步详细说明。应该理解,这些描述只是示例性的,而并非要限制本发明的范围。此外,在以下说明中,省略了对公知结构和技术的描述,以避免不必要地混淆本发明的概念。
本发明的目的是根据质控数据,计算质控实验组和质控对照组的吸光值曲线的平均酶动力学参数差,并根据已知的质控数据的硫氧还蛋白还原酶活性,拟合出质控标准方程。再将根据用户数据计算得到的用户实验组和用户对照组的吸光值曲线的酶动力学参数差,代入质控标准方程,得到用户的硫氧还蛋白还原酶活性。这样利用相同环境下检测得到的用户数据和质控数据,计算的得到的用户的硫氧还蛋白还原酶活性,能够保证用户的硫氧还蛋白还原酶活性的准确性,实时的检测用户体内组织细胞的异常活跃增生情况。
请参阅图1,图1是本发明第一实施例提供的一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法的流程图。如图1所示本发明第一实施例可以包括以下步骤S101至步骤S104:
步骤S101:基于获取到的用户实验组吸光值数据和用户对照组吸光值数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴分别绘制用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。
具体的,获取在相同检测环境(相同温度、相同湿度、相同光照等)下,检测得到的用户实验组数据和用户对照组数据。其中用户实验组数据和用户对照组数据为检测过程中,任意时刻所对应的吸光度的读值。其中,用户实验组数据和用户对照组数据为对可能出现病变的待检测的用户血样进行检测的数据。从用户实验组数据和用户对照组数据中,获取用户实验组任意时刻的吸光度的读值以及用户对照组任意时刻的吸光度的读值,分别绘制吸光值曲线。以实验检测开始的时间坐标轴的零点,以实验时间点为横轴,以吸光度的读值为纵轴,分别绘制用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。
步骤S102:基于用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算用户实验组吸光值曲线和用户对照组数据吸光值曲线的酶动力学参数。
具体的,根据绘制得到的用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,计算吸光值曲线的酶动力学参数。优选地,酶动力学参数可以为曲线的斜率、曲线的面积。基于吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,对所述吸光值曲线拟合,得到吸光值曲线的斜率或面积。
步骤S103:基于用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数及用户对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到对应的酶动力学参数差。
具体的,用户对照组吸光值曲线的酶动力学参数减去用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数,得到酶动力学参数差。优选的,用户对照组吸光值曲线的斜率减去用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数斜率,得到斜率差;用户对照组吸光值曲线的面积减去用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数面积,得到面积差。
步骤S104:基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,计算硫氧还蛋白还原酶活性。
具体的,质控标准方程为Y=AXn+BXn-1,其中X为硫氧还蛋白还原酶活性,Y为酶动力学参数差,A为第一参数,B为第二参数,n为第三参数,(n=1/2/3…,n的选择基于质控标准曲线相关系数最大原则)其中已知A、B、n、Y,并将酶动力学参数差Y、第一参数A、第二参数B和第三参数n代入到质控标准方程Y=AXn+BXn-1中,求解得到X硫氧还蛋白还原酶活性。
请参阅图2,图2是本发明第二实施例提供的一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法的流程图。如图2所示本发明第二实施例可以包括以下步骤S201至步骤S206:
步骤S201:基于获取到的多种浓度多次测量的质控实验组数据和质控对照组数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴,分别绘制质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线。
具体的,获取与用户实验组和用户对照组相同时间,相同实验环境(相同温度、相同湿度、相同光照等)下,检测得到的质控实验组数据和质控对照组数据。其中获取的为多种浓度,并且每种浓度又经过多次测量得到的质控实验组数据和质控对照组数据。优选地,选择5种浓度的质控样本,并且将每种浓度的质控样本分成3份,在相同时间、相同环境(相同温度、相同湿度、相同光照等)下得到的15组质控实验组数据和质控对照组数据。其中质控实验组数据和质控对照组数据为检测过程中,任意时刻所对应的吸光度的读值以及不同浓度的质控样本的硫氧还蛋白还原酶活性。其中,质控实验组数据和质控对照组数据为对标准浓度的硫氧还蛋白还原酶纯蛋白进行检测的数据。
分别从每种浓度每次测量的质控实验组数据和质控对照组数据中,获取质控实验组任意时刻的吸光度的读值以及质控对照组任意时刻的吸光度的读值,并分别绘制吸光值曲线。以实验检测开始的时间坐标轴的零点,以实验时间点为横轴,以吸光度的读值为纵轴,分别绘制用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。优选的,基于5种浓度的质控样本,每种浓度测量3次得到的15组质控实验组数据和质控对照组数据,分别以实验检测开始的时间坐标轴的零点,以实验时间点为横轴,以吸光度的读值为纵轴绘制用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。
步骤S202,基于质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到第一的酶动力学参数和第二的酶动力学参数。
具体的,根据绘制的质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,计算吸光值曲线的酶动力学参数,得到第一的酶动力学参数和第二的酶动力学参数。优选地,酶动力学参数为斜率或面积,基于吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,对所述吸光值曲线求拟合,得到第一斜率或第一面积和第二斜率或第二面积。
优选地,基于5种浓度的质控样本,每种浓度测量3次得到的15组质控实验组数据和质控对照组数据,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,计算质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的斜率或面积。具体的,分别计算15组质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的第一斜率或第一面积和第二斜率或面积。
步骤S203:计算第一的酶动力学参数和第二的酶动力学参数之间的酶动力学参数差。
具体的,质控对照组吸光值曲线的酶动力学参数减去质控实验组吸光值曲线的酶动力学参数,得到第一的酶动力学参数和第二的酶动力学参数之间的酶动力学参数差。优选的,基于5种浓度的质控样本,每种浓度测量3次得到的15组质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的第一斜率或第一面积和第二斜率或第二面积,分别计算15组数据的斜率差或面积差。
步骤S204:基于每组浓度,计算多次测量得到的酶动力学参数差的平均值,得到每组浓度的平均酶动力学参数差。
具体的,根据每种浓度多次测量的质控实验组数据和质控对照组数据得到的酶动力学参数差,分别计算出每种浓度的平均酶动力学参数差。优选地,基于5种浓度的质控样本,每种浓度测量3次得到的15组数据的酶动力学参数差,计算得到5种浓度每种浓度的平均酶动力学参数差。
步骤S205:基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差,得到质控标准方程的第一参数、第二参数和第三参数。
具体的,已知的硫氧还蛋白还原酶活性X和平均酶动力学参数差Y拟合质控标准方程Y=AXn+BXn-1,其中X为硫氧还蛋白还原酶活性,Y为平均酶动力学参数差,A为第一参数,B为第二参数,n为第三参数。计算得到第一参数A、第二参数B和第三参数n。优选的,以(0,0)为坐标原点,以硫氧还蛋白还原酶活性为X轴,以平均酶动力学参数差为Y轴,已知第一浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差、第二浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差、第三浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差、第四浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差、第五浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差。根据每组浓度硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差所形成的点,与Y=AXn+BXn-1进行拟合,得到质控标准方程的第一参数A、第二参数B和第三参数n。
在质控标准方程拟合过程中,线性或非线性拟合方程的选择是基于拟合相关系数最大原则,即在n=1,2,3…时,分别计算此时拟合方程的曲线相关系数R2,选择R2最大的拟合方程为质控标准方程。
请参阅图3,图3是本发明第一实施例提供的一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析系统的模块关系示意图。
用户制图模块10获取在相同检测环境(相同温度、相同湿度、相同光照等)下,检测得到的用户实验组数据和用户对照组数据。其中用户实验组数据和用户对照组数据为检测过程中,任意时刻所对应的吸光度的读值。其中,用户实验组数据和用户对照组数据为对可能出现病变的待检测的用户血样进行检测的数据。从用户实验组数据和用户对照组数据中,获取用户实验组任意时刻的吸光度的读值以及用户对照组任意时刻的吸光度的读值,分别绘制吸光值曲线。以实验检测开始的时间坐标轴的零点,以实验时间点为横轴,以吸光度的读值为纵轴,分别绘制用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,用户制图模块10将绘制的用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线发送给用户酶参数计算模块20。
用户酶参数计算模块20根据绘制得到的用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,计算吸光值曲线的酶动力学参数。优选地,酶动力学参数可以为曲线的斜率、曲线的面积。基于吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,对所述吸光值曲线拟合,得到吸光值曲线的斜率或面积。并将用户实验组吸光值曲线和用户对照组数据吸光值曲线的酶动力学参数发送给用户差值计算模块30。
用户差值计算模块30用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数及用户对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到对应的酶动力学参数差。优选的,用户对照组吸光值曲线的斜率减去用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数斜率,得到斜率差;用户对照组吸光值曲线的面积减去用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数面积,得到面积差。并将上述酶动力学参数差发送给活性计算模块40。
活性计算模块40根据质控标准方程为Y=AXn+BXn-1,其中X为硫氧还蛋白还原酶活性,Y为酶动力学参数差,A为第一参数,B为第二参数,n为第三参数,(N=1/2/3…,n的选择基于质控标准曲线相关系数最大原则)其中已知A、B、n、Y,并将酶动力学参数差Y、第一参数A、第二参数B和第三参数n代入到质控标准方程Y=AXn+BXn-1中,求解得到X硫氧还蛋白还原酶活性。
质控制图模块50获取与用户实验组和用户对照组相同时间,相同实验环境(相同温度、相同湿度、相同光照等)下,检测得到的质控实验组数据和质控对照组数据。其中获取的为多种浓度,并且每种浓度有经过多次测量得到的质控实验组数据和质控对照组数据。优选地,选择5种浓度的质控样本,并且将每种浓度的质控样本分成3份,在相同时间、相同环境(相同温度、相同湿度、相同光照等)下得到的15组质控实验组数据和质控对照组数据。其中质控实验组数据和质控对照组数据为检测过程中,任意时刻所对应的吸光度的读值以及不同浓度的质控样本的硫氧还蛋白还原酶活性。其中,质控实验组数据和质控对照组数据为对标准浓度的硫氧还蛋白还原酶纯蛋白进行检测的数据。
分别从每种浓度每次测量的质控实验组数据和质控对照组数据中,获取质控实验组任意时刻的吸光度的读值以及质控对照组任意时刻的吸光度的读值,并分别绘制吸光值曲线。以实验检测开始的时间坐标轴的零点,以实验时间点为横轴,以吸光度的读值为纵轴,分别绘制用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。优选的,基于5种浓度的质控样本,每种浓度测量3次得到的15组质控实验组数据和质控对照组数据,分别以实验检测开始的时间坐标轴的零点,以实验时间点为横轴,以吸光度的读值为纵轴绘制用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。并将绘制的质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线发送给质控酶参数计算模块60。
质控酶参数计算模块60根据绘制的质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,计算吸光值曲线的酶动力学参数,得到第一的酶动力学参数和第二的酶动力学参数。优选地,酶动力学参数为斜率或面积,基于吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,对所述吸光值曲线求拟合,得到第一斜率或第一面积和第二斜率或第二面积。
优选地,基于5种浓度的质控样本,每种浓度测量3次得到的15组质控实验组数据和质控对照组数据,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,计算质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的斜率或面积。具体的,分别计算15组质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的第一斜率或第一面积和第二斜率或面积。并将第一的酶动力学参数和第二的酶动力学参数发送给质控差值计算模块70。
质控差值计算模块70根据质控对照组吸光值曲线的酶动力学参数减去质控实验组吸光值曲线的酶动力学参数,得到第一的酶动力学参数和第二的酶动力学参数之间的酶动力学参数差。优选的,基于5种浓度的质控样本,每种浓度测量3次得到的15组质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的第一斜率或第一面积和第二斜率或第二面积,分别计算15组数据的面积差或斜率差。并将上述酶动力学参数差发送给均值计算模块80。
均值计算模块80根据每种浓度多次测量的质控实验组数据和质控对照组数据得到的酶动力学参数差,分别计算出每种浓度的平均酶动力学参数差。优选地,基于5种浓度的质控样本,每种浓度测量3次得到的15组数据的酶动力学参数差,计算得到5种浓度每种浓度的平均酶动力学参数差。并将每种浓度的平均酶动力学参数差发送给方程参数计算模块90。
方程参数计算模块90已知的硫氧还蛋白还原酶活性X和平均酶动力学参数差Y拟合质控标准方程Y=AXn+BXn-1,其中X为硫氧还蛋白还原酶活性,Y为平均酶动力学参数差,A为第一参数,B为第二参数,n为第三参数。计算得到第一参数A、第二参数B和第三参数n。优选的,以(0,0)为坐标原点,以硫氧还蛋白还原酶活性为X轴,以平均酶动力学参数差为Y轴,已知第一浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差、第二浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差、第三浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差、第四浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差、第五浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差。根据每组浓度硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差所形成的点,与Y=AXn+BXn-1进行拟合,得到质控标准方程的第一参数A、第二参数B和第三参数n。
在质控标准方程拟合过程中,线性或非线性拟合方程的选择是基于拟合相关系数最大原则,即在n=1,2,3…时,分别计算此时拟合方程的曲线相关系数R2,选择R2最大的拟合方程为质控标准方程。
实施例1
(1)质控计算(线性相关)
质控酶动力学参数差△A及平均酶动力学参数差△A(av)的计算
图4为实施例1基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差得到质控标准方程曲线。
基于拟合相关系数最大原则,选择n=1时,相关系数R2=0.9994为最大,因此优选n=1。
拟合得到质控方程:Y=5.55*X–4.03,其中A=5.55,B=-4.03,n=1。
(2)样本计算
样本1(4U/mL):
图5为实施例1样本1用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。
样本2(10U/mL):
图6为实施例1样本2用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。
样本编号 | Y(样本△A) | X:TR活性(U/mL) | 误差百分比 |
样本1(4U/mL) | 19.394 | 4.22 | <20% |
样本2(10U/mL) | 52.990 | 10.27 | <20% |
以上结果符合TR检测试剂盒国家医疗器械注册产品标准的相关要求:YZB/国(Q/CVH 001-2011)中4.2-4.6项中的规定。
实施例2
(1)质控计算(非线性相关)
质控酶动力学参数差△A及平均酶动力学参数差△A(av)的计算
图7为实施例2基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差得到质控标准方程曲线。
基于拟合相关系数最大原则,选择n=2时,相关系数R2=0.9998为最大,因此优选n=2。
拟合得到质控方程:Y=0.1668*X2+0.3252X+0.1851(因影响极小,忽略不计),其中A=0.1668,B=0.3252,n=2
(2)样本计算
样本1(8U/mL):
图8为实施例2样本1用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线。
样本编号 | Y(样本△A) | X:TR活性(U/mL) | 误差百分比 |
样本1(8U/mL) | 13.336 | 7.96 | <20% |
以上结果符合TR检测试剂盒国家医疗器械注册产品标准的相关要求:YZB/国(Q/CVH 001-2011)中4.2-4.6项中的规定。
本分析方法是针对人血样复杂体系,采用特异性TR抑制剂以充分减扣个体血样不同背景基础上的应用;其中质控/用户实验组是抑制剂组,质控/用户对照组是未加抑制剂组,本计算方法充分满足了TR人血样检测技术要求,所涉及的方法可以实现国家规定区分性检测正常人血样活性水平(TR小于4U/mL)和肿瘤高相关血样活性水平(TR大于12U/mL)的检测要求。
本发明实施例通过获取多种浓度多次测量的质控实验组数据和质控对照组数据,得到质控实验组和质控对照组的吸光值曲线,并计算得到质控实验组和质控对照组的吸光值曲线的平均酶动力学参数差,结合已知的硫氧还蛋白还原酶活性计算得到质控标准方程。获取用户实验组数据和用户对照组数据,得到用户实验组和用户对照组的吸光值曲线,并计算得到用户实验组和用户对照组的吸光值曲线的酶动力学参数差,将酶动力学参数差代入质控标准方程得到用户的硫氧还蛋白还原酶活性。能够保证用户的硫氧还蛋白还原酶活性的准确性,实时的检测用户体内组织细胞的异常活跃增生情况。
应当理解的是,本发明的上述具体实施方式仅仅用于示例性说明或解释本发明的原理,而不构成对本发明的限制。因此,在不偏离本发明的精神和范围的情况下所做的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。此外,本发明所附权利要求旨在涵盖落入所附权利要求范围和边界、或者这种范围和边界的等同形式内的全部变化和修改例。
Claims (10)
1.一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析方法,其特征在于,包括:
基于获取到的用户实验组吸光值数据和用户对照组吸光值数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴分别形成用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线;
基于用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算用户实验组吸光值曲线和用户对照组数据吸光值曲线的酶动力学参数;
基于用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数及用户对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到对应的酶动力学参数差;
基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,获得硫氧还蛋白还原酶活性。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,计算硫氧还蛋白还原酶活性的步骤之前,还包括:
基于获取到的多种浓度多次测量的质控实验组数据和质控对照组数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴,分别形成质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线;
基于质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到第一酶动力学参数和第二酶动力学参数;
计算第一酶动力学参数和第二酶动力学参数之间的酶动力学参数差;
基于每组浓度,计算多次测量得到的酶动力学参数差的平均值,得到每组浓度的平均酶动力学参数差;
基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差,得到质控标准方程的参数。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,计算硫氧还蛋白还原酶活性的步骤包括:
将所述酶动力学参数差、质控标准方程的代入质控标准方程,计算得到硫氧还蛋白还原酶活性。
4.根据权利要求2所述的方法,其中,所述基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差,得到质控标准方程的参数的方法为:
以硫氧还蛋白还原酶活性为X轴,以平均酶动力学参数差为Y轴,根据每组浓度硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差所形成的点,与质控标准方程Y=AXn+BXn-1进行拟合,得到该质控标准方程的第一参数A、第二参数B和第三参数n。
5.根据权利要求2-4中任一项所述的方法,其中,
所述多种浓度为至少5种浓度;
所述多次测量为至少3次测量;
所述酶动力学参数是吸光值曲线的斜率或面积。
6.一种硫氧还蛋白还原酶活性的分析系统,其特征在于,包括:
用户制图模块(10),基于获取到的用户实验组吸光值数据和用户对照组吸光值数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴分别形成用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线;
用户酶参数计算模块(20),用于基于用户实验组吸光值曲线和用户对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算用户实验组吸光值曲线和用户对照组数据吸光值曲线的酶动力学参数;
用户差值计算模块(30),用于基于用户实验组吸光值曲线的酶动力学参数及用户对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到对应的酶动力学参数差;
活性计算模块(40),用于基于所述酶动力学参数差和质控标准方程,获得硫氧还蛋白还原酶活性。
7.根据权利要求6所述的系统,其中,所述系统还包括:
质控制图模块(50),用于基于获取到的多种浓度多次测量的质控实验组数据和质控对照组数据,以实验开始时间为零点,吸光值为纵轴,实验时间为横轴,分别形成质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线;
质控酶参数计算模块(60),用于基于质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线,以实验开始时间为下限,实验结束时间为上限,分别计算质控实验组吸光值曲线和质控对照组吸光值曲线的酶动力学参数,得到第一酶动力学参数和第二酶动力学参数;
质控差值计算模块(70),用于计算第一酶动力学参数和第二酶动力学参数之间的酶动力学参数差;
均值计算模块(80),用于基于每组浓度,计算多次测量得到的酶动力学参数差的平均值,得到每组浓度的平均酶动力学参数差;
方程参数计算模块(90),用于基于每组浓度的硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差,得到质控标准方程的第一参数、第二参数和第三参数。
8.根据权利要求7所述的系统,其中,所述活性计算模块(40)还用于:
将所述酶动力学参数差、第一参数、第二参数和第三参数代入质控标准方程,计算得到硫氧还蛋白还原酶活性。
9.根据权利要求7所述的系统,其中,所述方程参数计算模块(90)还用于:
以硫氧还蛋白还原酶活性为X轴,以平均酶动力学参数差为Y轴,根据每组浓度硫氧还蛋白还原酶活性和平均酶动力学参数差所形成的点,与Y=AXn+BXn-1进行拟合,得到质控标准方程的第一参数A、第二参数B和第三参数n。
10.根据权利要求7所述的系统,其中,
所述多种浓度为至少5种浓度;
所述多次测量为至少3次测量;
所述酶动力学参数是吸光值曲线的斜率或面积。
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CN102695805B (zh) * | 2009-11-03 | 2014-05-14 | 凯熙医药(武汉)股份有限公司 | 用于测定样品中硫氧还蛋白还原酶活性的方法和试剂盒及应用 |
CN104974744A (zh) * | 2014-04-08 | 2015-10-14 | 深圳市汉康科技有限公司 | 一种硫氧还蛋白还原酶荧光探针及其制备方法和用途 |
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CN104974744A (zh) * | 2014-04-08 | 2015-10-14 | 深圳市汉康科技有限公司 | 一种硫氧还蛋白还原酶荧光探针及其制备方法和用途 |
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