CN108530332A - 一种类胡萝卜素的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种类胡萝卜素的提取方法，包括以下步骤：(1)将植物破碎；(2)向步骤(1)获得的物料中加入抗坏血酸的甲醇溶液；(3)加入氢氧化钾水溶液，在温度为65‑70℃加热30‑35min，冷至室温；(4)加入乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，离心；在波长为620‑750nm的光源下，吸取上清液，向分离上清液后的物料中加入乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，离心；在波长为620‑750nm的光源下，再次吸取上清液；(5)合并上清液，在氮气环境下干燥，得到类胡萝卜素。本发明的方法可极大程度上减少提取过程中的氧化分解，使提取的胡萝卜素产量高和纯度高。

Description

一种类胡萝卜素的提取方法
技术领域
本发明涉及植物代谢产物提取技术领域，具体涉及到一种类胡萝卜素的提取方法。
背景技术
类胡萝卜素是一类天然有机色素，已被发现有600余种。在植物中，类胡萝卜素的主要作用是吸收捕获光能用于光合作用并保护叶绿素避免受到伤害[1]。有研究表明，类胡萝卜素可以有效消除植物生长过程中体内产生的活性氧[2]。在人体中，类胡萝卜素也具有抑制肿瘤、减缓氧化、改善视力状况等作用[3,4]。
玉米黄质和叶黄素是类胡萝卜素合成途径中的重要中间产物，大量存在于玉米种子胚乳中。在人体内，玉米黄质和叶黄素主要分布在肝，肾等器官中。在眼球中，玉米黄质是中央黄斑的重要组成部分，叶黄素则大量分布于外周视网膜上。大量研究表明玉米黄质和叶黄素在延缓黄斑病变[5]、降低心血管疾病发病率[6]、降低白内障发病可能性[7,8,9]等诸多方面有着积极作用。
随着人们健康意识的增强，对类胡萝卜素生产的要求也不算增加。因此类胡萝卜素相关的探索有着广阔的研究意义与市场前景。在类胡萝卜素提取过程中，解决类胡萝卜素见光易分解及易被氧化为提取类胡萝卜素主要难题。
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发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种减少提取过程中的氧化分解，提高类胡萝卜素产量与纯度的类胡萝卜素的提取方法。
本发明的技术方案概述如下：
一种类胡萝卜素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将植物破碎；
(2)按质量比为1：5-10的比例，向步骤(1)获得的物料中加入浓度为6-12mg/100ml的抗坏血酸的甲醇溶液；
(3)加入步骤(2)获得的物料1-1.5倍体积的质量浓度为50％-70％的氢氧化钾水溶液，在温度为65-70℃加热30-35min，冷至室温；
(4)加入步骤(3)获得的物料1-1.2倍体积的体积比为1：0.8-1.2的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2700g-3000g条件下，离心8-15分钟；在波长为620-750nm的光源下，吸取上清液，向分离上清液后的物料中加入相当于步骤(3)获得的物料0.8-1倍体积的体积比为1：0.8-1.2的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2700g-3000g条件下，离心8-15分钟；在波长为620-750nm的光源下，再次吸取上清液；
(5)合并上清液，在氮气环境下干燥，得到类胡萝卜素。
植物优选玉米或烟草，还可以选用其它的富含类胡萝卜素的植物的提取。
抗坏血酸的甲醇溶液的浓度为8mg/100ml。
氢氧化钾水溶液的质量浓度为60％。
步骤(3)所述温度为65℃。
步骤(3)所述加热的时间为30min。
根据权利要求1所述的方法，其特征是乙醚石油醚混合溶剂的乙醚和石油醚的体积比为1：1。
本发明的优点：
本发明的方法可极大程度上减少提取过程中的氧化分解，使提取的胡萝卜素产量高和纯度高。
附图说明
图1为以烟草叶片组织为材料提取类胡萝卜素，A：抗坏血酸含量；B：加热温度；C：加热时间。
图2为以玉米叶片组织为材料提取类胡萝卜素，A：抗坏血酸含量；B：加热温度；C：加热时间。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
本发明用烟草叶和玉米叶为例说明本发明的方法的效果，但并不仅限于这两种植物叶，其它富含类胡萝卜素的植物叶都可以采用本发明的方法获得类胡萝卜素，因此，其它富含类胡萝卜素的植物叶采用本发明的方法进行提取也属于本发明的保护范围。
实施例1
一种类胡萝卜素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将新鲜烟草叶片破碎，分装；
(2)按质量比为1：8的比例，向步骤(1)获得的物料中加入浓度为2mg/100ml,4mg/100ml,6mg/100ml,8mg/100ml,10mg/100ml，12mg/100ml的抗坏血酸的甲醇溶液；
(3)加入步骤(2)获得的物料1.3倍体积的质量浓度为60％的氢氧化钾水溶液，在温度为65℃加热30min，冷至室温；
(4)加入步骤(3)获得的物料1.1倍体积的体积比为1：1的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2800g条件下，离心10分钟；在波长为700nm的光源下，吸取上清液，向分离上清液后的物料中加入相当于步骤(3)获得的物料0.9倍体积的体积比为1：1的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2800g条件下，离心10分钟；在波长为700nm的光源下，再次吸取上清液；
(5)合并上清液，在氮气环境下干燥，得到类胡萝卜素。
(6)将类胡萝卜素用丙酮溶解，取1ml测量其吸光值，计算总类胡萝卜素含量。结果见图1A。
实施例2
一种类胡萝卜素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将新鲜烟草叶破碎；
(2)按质量比为1：5的比例，向步骤(1)获得的物料中加入浓度为10mg/100ml的抗坏血酸的甲醇溶液；
(3)将步骤(2)获得的物料分装，并加入分装后的物料的1倍体积的质量浓度70％的氢氧化钾水溶液，分别在温度为50℃，55℃，60℃，65℃，70℃的条件下加热34min，冷至室温；
(4)加入步骤(3)获得的物料1倍体积的体积比为1：1.2的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2700g条件下，离心15分钟；在波长为620nm的光源下，吸取上清液，向分离上清液后的物料中加入相当于步骤(3)获得的物料0.8倍体积的体积比为1：1.2的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2700g条件下，离心15分钟；在波长为620nm的光源下，再次吸取上清液；
(5)合并上清液，在氮气环境下干燥，得到类胡萝卜素。
(6)将类胡萝卜素用丙酮溶解，取1ml测量其吸光值，计算总类胡萝卜素含量。结果见图1B。
实施例3
一种类胡萝卜素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将新鲜烟草叶片破碎；
(2)按质量比为1：10的比例，向步骤(1)获得的物料中加入浓度为7mg/100ml的抗坏血酸的甲醇溶液；
(3)将步骤(2)获得的物料分装，并加入分装后的物料的1.5倍体积的质量浓度50％的氢氧化钾水溶液，在70℃的条件下分别加热20min,25min,30min,35min，冷至室温；
(4)加入步骤(3)获得的物料1.2倍体积的体积比为1：0.8的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在3000g条件下，离心8分钟；在波长为750nm的光源下，吸取上清液，向分离上清液后的物料中加入相当于步骤(3)获得的物料1倍体积的体积比为1：0.8的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在3000g条件下，离心8分钟；在波长为750nm的光源下，再次吸取上清液；
(5)合并上清液，在氮气环境下干燥，得到类胡萝卜素。
(6)将类胡萝卜素用丙酮溶解，取1ml测量其吸光值，计算总类胡萝卜素含量。结果见图1C。
实施例4
一种类胡萝卜素的提取方法，包括以下步骤：
(2)将玉米叶片破碎，分装；
(2)按质量比为1：8的比例，向步骤(1)获得的物料中加入浓度为2mg/100ml,4mg/100ml,6mg/100ml,8mg/100ml,10mg/100ml,12mg/100ml的抗坏血酸的甲醇溶液；
(3)加入步骤(2)获得的物料1.3倍体积的质量浓度为60％的氢氧化钾水溶液，在温度为65℃加热30min，冷至室温；
(4)加入步骤(3)获得的物料1.1倍体积的体积比为1：1的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2800g条件下，离心10分钟；在波长为700nm的光源下，吸取上清液，向分离上清液后的物料中加入相当于步骤(3)获得的物料0.9倍体积的体积比为1：1的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2800g条件下，离心10分钟；在波长为700nm的光源下，再次吸取上清液；
(5)合并上清液，在氮气环境下干燥，得到类胡萝卜素。
(6)将类胡萝卜素用丙酮溶解，取1ml测量其吸光值，计算总类胡萝卜素含量。结果见图2A。
实施例5
一种类胡萝卜素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将玉米叶破碎；
(2)按质量比为1：5的比例，向步骤(1)获得的物料中加入浓度为10mg/100ml的抗坏血酸的甲醇溶液；
(3)将步骤(2)获得的物料分装，并加入分装后的物料的1倍体积的质量浓度70％的氢氧化钾水溶液，分别在温度为50℃，55℃，60℃，65℃，70℃的条件下加热34min，冷至室温；
(4)加入步骤(3)获得的物料1倍体积的体积比为1：1.2的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2700g条件下，离心15分钟；在波长为620nm的光源下，吸取上清液，向分离上清液后的物料中加入相当于步骤(3)获得的物料0.8倍体积的体积比为1：1.2的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2700g条件下，离心15分钟；在波长为620nm的光源下，再次吸取上清液；
(5)合并上清液，在氮气环境下干燥，得到类胡萝卜素。
(6)将类胡萝卜素用丙酮溶解，取1ml测量其吸光值，计算总类胡萝卜素含量。结果见图2B。
实施例6
一种类胡萝卜素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将玉米叶片破碎；
(2)按质量比为1：10的比例，向步骤(1)获得的物料中加入浓度为7mg/100ml的抗坏血酸的甲醇溶液；
(3)将步骤(2)获得的物料分装，并加入分装后的物料的1.5倍体积的质量浓度50％的氢氧化钾水溶液，在70℃的条件下分别加热20min,25min,30min,35min，冷至室温；
(4)加入步骤(3)获得的物料1.2倍体积的体积比为1：0.8的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在3000g条件下，离心8分钟；在波长为750nm的光源下，吸取上清液，向分离上清液后的物料中加入相当于步骤(3)获得的物料1倍体积的体积比为1：0.8的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在3000g条件下，离心8分钟；在波长为750nm的光源下，再次吸取上清液；
(5)合并上清液，在氮气环境下干燥，得到类胡萝卜素。
(6)将类胡萝卜素用丙酮溶解，取1ml测量其吸光值，计算总类胡萝卜素含量。结果见图2C。

Claims (7)

1.一种类胡萝卜素的提取方法，其特征是包括以下步骤：
(1)将植物破碎；
(2)按质量比为1：5-10的比例，向步骤(1)获得的物料中加入浓度为6-12mg/100ml的抗坏血酸的甲醇溶液；
(3)加入步骤(2)获得的物料1-1.5倍体积的质量浓度为50％-70％的氢氧化钾水溶液，在温度为65-70℃加热30-35min，冷至室温；
(4)加入步骤(3)获得的物料1-1.2倍体积的体积比为1：0.8-1.2的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2700g-3000g条件下，离心8-15分钟；在波长为620-750nm的光源下，吸取上清液，向分离上清液后的物料中加入相当于步骤(3)获得的物料0.8-1倍体积的体积比为1：0.8-1.2的乙醚石油醚混合溶剂，混匀后，在2700g-3000g条件下，离心8-15分钟；在波长为620-750nm的光源下，再次吸取上清液；
(5)合并上清液，在氮气环境下干燥，得到类胡萝卜素。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述植物为玉米或烟草。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述抗坏血酸的甲醇溶液的浓度为8mg/100ml。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述氢氧化钾水溶液的质量浓度为60％。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(3)所述温度为65℃。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(3)所述加热的时间为30min。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征是乙醚石油醚混合溶剂的乙醚和石油醚的体积比为1：1。
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