CN108522378B - 雌性阿拉斯加扇贝与雄性虾夷扇贝杂交一代商品苗种的培育方法 - Google Patents
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Abstract
一种雌性阿拉斯加扇贝与雄性虾夷扇贝杂交一代商品苗种的培育方法。其特征是在首先分别建立多个雌性阿拉斯加扇贝和雄性虾夷扇贝的半同胞杂交群体及各自的自繁群体；选择最优的杂交群体，其相应的亲本自繁群体分别成为可用于商业杂交的雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体与雄性虾夷扇贝种贝生产群体；扇贝达到性成熟以后，用雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体的卵子与雄性虾夷扇贝种贝生产群体的精子生产杂交一代商品苗种。所获的杂交一代商品苗种同时具有两种扇贝的优点，生长快、适应性广、抗逆性强，适合在我国北方海域养殖，产量比虾夷扇贝提高20%以上，成活率提高10%左右，未来有望得到广泛的推广。
Description
技术领域
本发明属于贝类育种技术，尤其是涉及一种利用雌性阿拉斯加扇贝与雄性虾夷扇贝生产杂交一代商品苗种的培育方法。
背景技术
阿拉斯加扇贝（Patinopecten caurinus）是原产于太平洋东北部的阿拉斯加到加利福尼亚海域的一种冷水性大型扇贝，其杂合度高、遗传多样性丰富，温度适应范围较窄，最大壳长可达到25cm，壳宽较大、闭壳肌肥大、出肉率高、味道鲜美，因此阿拉斯加扇贝加工产品在欧美深受欢迎，是世界上公认的优良养殖种类之一。
虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)原产于日本、俄罗斯和朝鲜等海域，自1982年由辽宁海洋水产研究所引进中国以来，已在山东、辽宁等地大范围的人工养殖，其个体大、贝柱肉肥、肉质细腻、味道鲜美、营养丰富，有很高的市场价值。但其生长速度缓慢，生长周期长，且由于累代近亲繁育，导致病害频发、种质退化、高死亡率等问题凸显，给养殖产业带来重大损失，严重制约了我国扇贝养殖业的健康、可持续发展。为了解决上述问题，对虾夷扇贝进行种质的遗传改良势在必行。
研究发现，阿拉斯加扇贝和虾夷扇贝同属于Patinopecten属，染色体数相同，且两种扇贝在个体大小、生长和温度适应性等方面性状互补，因此有可能将阿拉斯加扇贝与虾夷扇贝进行种间杂交，其中杂交育种是最有效的方法之一，以培育出一种个体大、生长快、抗逆性强的杂交扇贝。
发明内容
本发明的目的是提供一种雌性阿拉斯加扇贝与雄性虾夷扇贝杂交一代商品苗种的培育方法，以解决现有阿拉斯加扇贝育苗和养殖中遇到的问题。
本发明基于以下构思：1）阿拉斯加扇贝和虾夷扇贝都属于Patinopecten属，染色体数相同，因此有可能在两种扇贝间成功进行种间杂交；2）两种扇贝在个体大小、生长和温度适应性等方面性状互补，因此如果将两种扇贝进行种间杂交，就有可能培育出一种集合了两种扇贝优良基因的个体大、生长快、温度适应范围广、抗逆性强的杂交扇贝；3)通过种间杂交，利用阿拉斯加扇贝的优良种质资源来改良虾夷扇贝的种质，即通过分别建立雌性阿拉斯加扇贝和雄性虾夷扇贝配套系的方法培育高配合力的雌性阿拉斯加扇贝与雄性虾夷扇贝杂交配套系，直接利用杂交子一代的杂种优势。
本发明的技术方案：
雌性阿拉斯加扇贝生产群体的建立：分别选取发育成熟的雌雄阿拉斯加扇贝各25只及雄性虾夷扇贝25只，用常规的阴干加温度刺激的方法使每只雌性阿拉斯加扇贝在单独的容器中产卵并加入10-6几丁聚糖处理20分钟，获得10只以上阿拉斯加扇贝的卵子，将25只雄性虾夷扇贝或阿拉斯加扇贝分别合在一起产精。将每只产卵阿拉斯加扇贝的卵子分成两份，分别用阿拉斯加扇贝的精子或虾夷扇贝的精子受精，建立10个以上雌性阿拉斯加扇贝×雄性虾夷扇贝杂交群体及相应的10个以上阿拉斯加扇贝自交群体。将所有的群体在同样条件下养殖，根据收获时生长和存活等性状的总体表现选择最优的杂交群体，所对应的阿拉斯加扇贝自交群体成为可用于商业杂交的雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体。
雄性虾夷扇贝生产群体的建立：分别选取发育成熟的雌雄虾夷扇贝各25只及雌性阿拉斯加扇贝25只，用常规的阴干加温度刺激的方法使每只雄性虾夷扇贝在单独的容器中产精，获得10只虾夷扇贝的精子。将25只雌性阿拉斯加扇贝合在一起产卵并加入10-6几丁聚糖处理20分钟，混合后分成10份，分别用10只虾夷扇贝的精子受精，建立10个雌性阿拉斯加扇贝×雄性虾夷扇贝杂交群体；将25只雌性虾夷扇贝合在一起产卵，混合后分成10份，分别用10只虾夷扇贝的精子受精，建立10个相应的虾夷扇贝自交群体；将所有的群体在同样条件下养殖，根据收获时生长和存活等性状的总体表现选择最优的杂交群体，所对应的虾夷扇贝自交群体成为可用于商业杂交的雄性虾夷扇贝种贝生产群体。
将雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体中的雌性阿拉斯加扇贝催产后获得卵子，然后用雄性虾夷扇贝种贝生产群体中的雄性虾夷扇贝的精子受精，即可获得生长优势显著的杂交一代扇贝苗种。同时，将雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体和雄性虾夷扇贝种贝生产群体分别自繁，获得可用于下一年生产杂交一代的雌雄种贝生产群体
本发明获得的杂交一代商品苗种同时具有两种扇贝的优良特点，生长快、适应性广、抗逆性强，适合如大连长海和山东长岛等我北方海域养殖，产量比现有虾夷扇贝提高20%以上，成活率提高10%左右。
具体实施方式
实施例1
本发明的具体操作步骤如下：
1）雌性阿拉斯加扇贝生产群体的建立：分别选取阿拉斯加扇贝雌雄各50只及雄性虾夷扇贝50只，在2月初纳入育苗室内，将两种扇贝的雌雄分开培育，蓄养密度为10只/m3，每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的硅藻和扁藻等单胞藻类，每次投喂15L/m3，每天换水二分之一，每六天倒一次池，用空气压缩机连续充气。入池后每天升温0.5℃，至8℃恒温培育数天，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟。分别挑选优良的性腺发育成熟的阿拉斯加扇贝雌雄各25只及雄性虾夷扇贝25只，阴干刺激1h，然后将单只雌性阿拉斯加扇贝置于预先加入12℃海水的25L塑料桶中，分别获得至少10只阿拉斯加扇贝的卵子，产卵后加入10-6几丁聚糖放置20分钟后在显微镜下检查有无精子污染，若有极体释放说明已经受精则弃掉，若无极体释放则收集；将25只雄性阿拉斯加扇贝或虾夷扇贝分别合在一起产精。将每只产卵阿拉斯加扇贝的卵子分成两份，分别加入虾夷扇贝的精子或阿拉斯加扇贝的精子，精子用量以镜检每个卵子周围有4-5只精子为宜，若不够可继续添加。分别建立10个雌性阿拉斯加扇贝×雄性虾夷扇贝杂交群体及相应的阿拉斯加扇贝自交群体。将受精卵置于100L白色塑料桶中孵化，按照常规阿拉斯加扇贝培育方法进行幼虫培育、苗种中间培育和海上养成。根据收获时杂交群体的生长和存活等性状的总体表现选择最优的杂交群体，所对应的阿拉斯加扇贝自交群体成为可用于商业杂交的雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体。
雄性虾夷扇贝生产群体的建立：分别选取虾夷扇贝雌雄各50只及雌性阿拉斯加扇贝50只，在2月初纳入育苗室内，将两种扇贝的雌雄分开培育，蓄养密度为10只/m3，每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的硅藻和扁藻等单胞藻类，每次投喂15L/m3，每天换水二分之一，每六天倒一次池，用空气压缩机连续充气。入池后每天升温0.5℃，至8℃恒温培育数天，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟。分别挑选优良的性腺发育成熟的虾夷扇贝雌雄各25只及雌性阿拉斯加扇贝25只，阴干刺激1h，然后将单只雄性虾夷扇贝置于预先加入12℃海水的25L塑料桶中，分别获得10只虾夷扇贝的精子。将25只雌性虾夷扇贝或阿拉斯加扇贝分别合在一起产卵，产卵后加入10-6几丁聚糖放置20分钟后，在显微镜下检查有无精子污染，若有极体释放说明已经受精则弃掉，若无极体释放则收集。将每种扇贝的卵子分成10份，分别加入10只虾夷扇贝的精子，精子用量以镜检每个卵子周围有4-5只精子为宜，若不够可继续添加。分别建立10个雌性阿拉斯加扇贝×雄性虾夷扇贝杂交群体及10个相应的虾夷扇贝自交群体。将受精卵置于100L白色塑料桶中孵化，按照常规虾夷扇贝培育方法进行幼虫培育、苗种中间培育和海上养成。根据收获时生长和存活等性状的总体表现选择最优的杂交群体，所对应的虾夷扇贝自交群体成为可用于商业杂交的雄性虾夷扇贝种贝生产群体。
杂交一代商品苗种的培育：从选择的雌性阿拉斯加扇贝生产群体和雄性虾夷扇贝生产群体中分别选择优良的雌性阿拉斯加扇贝和雄性虾夷扇贝个体，雌雄比例为3:1，在2月份纳入育苗室促熟。亲贝成熟后按照常规的催产方法分别产卵产精，阿拉斯加扇贝大量产卵后加入少量虾夷扇贝的精子并搅拌，使每个卵子周围有4-5个精子为宜，正常孵化后按照常规的虾夷扇贝幼虫培育和苗种中间培育方法培养，即获得杂交一代商品苗种。
用于杂交的种贝生产群体的繁育：按照雌雄比例3:1从雌性阿拉斯加扇贝生产群体中选择雌雄个体200只以上，按照常规的阿拉斯加扇贝育苗、保苗和养成方法，即可获得下一年可用于杂交的雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体。用同样的方法获得下一年可用于杂交的雄性虾夷扇贝种贝生产群体。
本发明在第一年阿拉斯加扇贝产卵后加入的适当浓度几丁聚糖的营养处理，以提高受精率和孵化率。
实施例2
2016年2月底取成熟的雌性阿拉斯加扇贝5只和雄性虾夷扇贝5只，经升温阴干刺激后分别获得阿拉斯加扇贝卵子和虾夷扇贝精子，阿拉斯加扇贝卵子加入10-6几丁聚糖处理20分钟后用虾夷扇贝的精子授精，获得3个雌性阿拉斯加扇贝×雄性虾夷扇贝杂交子一代家系。
至2016年12月17日测量，最优杂交家系的平均壳高42.0±1.6毫米，壳长40.1±1.7毫米，壳宽9.0±0.6毫米，体重6.52±0.90克，养成期成活率为95.8%；同期的虾夷扇贝对照组平均壳高为38.0±2.7毫米，壳长36.3±2.6毫米，壳宽为7.9±0.8毫米，体重为4.64±1.03毫米，养成期成活率为88.6%。 杂交家系的壳高比虾夷扇贝提高约10.53%，壳长提高约10.47%，壳宽提高约13.92%，体重提高约40.52%，成活率提高约8.13%。
由此可见，利用雌性阿拉斯加扇贝与雄性虾夷扇贝进行种间杂交培育的杂交后代生长率和存活率均有显著提高，证明该杂交品种具有显著的育种价值，有望得到广泛的推广。
Claims (2)
1.一种雌性阿拉斯加扇贝与雄性虾夷扇贝杂交一代商品苗种的培育方法，其特征是第一年分别选取发育成熟的雌雄阿拉斯加扇贝和雄性虾夷扇贝各25只，用常规的阴干加温度刺激的方法使每只雌性阿拉斯加扇贝在单独的容器中产卵，并加入10-6几丁聚糖处理20分钟，获得10只以上阿拉斯加扇贝的卵子，将25只雄性虾夷扇贝和25只雄性阿拉斯加扇贝分别合在一起产精；将每只产卵阿拉斯加扇贝的卵子分成两份，分别用阿拉斯加扇贝的精子和虾夷扇贝的精子受精，建立10只以上雌性阿拉斯加扇贝×雄性虾夷扇贝杂交群体及相应的10只以上阿拉斯加扇贝自交群体；将所有的群体在同样条件下养殖，根据收获时生长和存活性状的总体表现选择最优的杂交群体，所对应的阿拉斯加扇贝自交群体成为用于商业杂交的雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体；第一年也同时分别选取发育成熟的雌雄虾夷扇贝各25只及雌性阿拉斯加扇贝25只，用常规的阴干加温度刺激的方法使每只雄性虾夷 扇贝在单独的容器中产精，获得10只虾夷扇贝的精子；将25只雌性阿拉斯加扇贝合在一起产卵并加入10-6几丁聚糖处理20分钟，混合后分成10份，分别用10只虾夷扇贝的精子受精， 建立10个雌性阿拉斯加扇贝×雄性虾夷扇贝杂交群体；将25只雌性虾夷扇贝合在一起产卵，混合后分成10份，分别用10只虾夷扇贝的精子受精，建立10个相应的虾夷扇贝自交群体；将所有的群体在同样条件下养殖，根据收获时生长和存活性状的总体表现选择最优的杂交群体，所对应的虾夷扇贝自交群体成为用于商业杂交的雄性虾夷扇贝种贝生产群体；扇贝达到性成熟后将雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体中的雌性阿拉斯加扇贝催产后获得卵子，然后用雄性虾夷扇贝种贝生产群体中的雄性虾夷扇贝的精子受精，即获得生长优势显著的杂交一代扇贝商品苗种；同时，将雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体和雄性虾夷扇贝种贝生产群体分别自繁，获得用于下一年生产杂交一代的雌雄种贝生产群体。
2.一种雌性阿拉斯加扇贝与雄性虾夷扇贝杂交一代商品苗种的培育方法，其特征在于：
雌性阿拉斯加扇贝生产群体的建立：分别选取阿拉斯加扇贝雌雄和雄性虾夷扇贝各50只，在2月初纳入育苗室内，将两种扇贝的雌雄分开培育，蓄养密度为10只/m3，每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的硅藻和扁藻，每次投喂15L/m3，每天换水二分之一，每六天倒一次池，用空气压缩机连续充气；入池后每天升温0.5℃，至8℃恒温培育数天，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟；分别挑选优良的性腺发育成熟的阿拉斯加扇贝雌雄各25只及雄性虾夷扇贝25只，阴干刺激1h，然后将单只雌性阿拉斯加扇贝置于预先加入12℃海水的25L塑料桶中，分别获得至少10只阿拉斯加扇贝的卵子，产卵后加入10-6几丁聚糖放置20分钟后在显微镜下检查有无精子污染，若有极体释放说明已经受精则弃掉，若无极体释放则收集；将25只雄性阿拉斯加扇贝和25只雄性虾夷扇贝分别合在一起产精；将每只产卵阿拉斯加扇贝的卵子分成两份，分别加入虾夷扇贝的精子和阿拉斯加扇贝的精子，精子用量以镜检每个卵子周围有4-5只精子为宜，若不够则继续添加；分别建立10 个雌性阿拉斯加扇贝×雄性虾夷扇贝杂交群体及相应的阿拉斯加扇贝自交群体；将受精卵置于100L白色塑料桶中孵化，按常规虾夷扇贝培育方法进行幼虫培育、苗种中间培育和海上养成；根据收获时杂交群体的生长和存活性状的总体表现选择最优的杂交群体，所对应的阿拉斯加扇贝自交群体成为用于商业杂交的雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体；
雄性虾夷扇贝生产群体的建立：分别选取虾夷扇贝雌雄各50只及雌性阿拉斯加扇贝50只，在2月初纳入育苗室内，将两种扇贝的雌雄分开培育，蓄养密度为10只/m3，每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的硅藻和扁藻，每次投喂15L/m3，每天换水二分之一，每六天倒一次池，用空气压缩机连续充气；入池后每天升温0.5℃，至8℃恒温培育数天，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟；分别挑选优良的性腺发育成熟的虾夷扇贝雌雄各25只及雌性阿拉斯加扇贝25只，阴干刺激1h，然后将单只雄性虾夷扇贝置于预先加入12℃海水的25L塑料桶中，分别获得10只虾夷扇贝的精子；将25只雌性虾夷扇贝和25只雌性阿拉斯加扇贝分别合在一起产卵，产卵后加入10-6几丁聚糖放置20分钟后，在显微镜下检查有无精子污染，若有极体释放说明已经受精则弃掉，若无极体释放则收集；将每种扇贝的卵子分成10份，分别加入10只虾夷扇贝的精子，精子用量以镜检每个卵子周围有4-5只精子为宜，若不够则继续添加；分别建立10个雌性阿拉斯加扇贝×雄性虾夷扇贝杂交群体及10个相应的虾夷扇贝自交群体；将受精卵置于100L白色塑料桶中孵化，按照常规虾夷扇贝培育方法 进行幼虫培育、苗种中间培育和海上养成；雄性虾夷扇贝生产群体的建立：根据收获时生长和存活性状的总体表现选择最优的杂交群体，所对应的虾夷扇贝自交群体成为用于商业杂交的雄性虾夷扇贝种贝生产群体；
杂交一代商品苗种的培育：从上述选择的雌性阿拉斯加扇贝生产群体和雄性虾夷扇贝生产群体中分别选择优良的雌性阿拉斯加扇贝和雄性虾夷扇贝个体，雌雄比例为3:1，在2月份纳入育苗室促熟；亲贝成熟后按照常规的催产方法分别产卵产精，阿拉斯加扇贝大量产卵后加入少量虾夷扇贝的精子并搅拌，使每个卵子周围有4-5个精子为宜，正常孵化后按照常规的虾夷扇贝幼虫培育和苗种中间培育方法培养，即获得杂交一代商品苗种；
用于杂交的种贝生产群体的繁育：按照雌雄比例3:1从雌性阿拉斯加扇贝生产群体中选择雌雄个体200只以上，按照常规的阿拉斯加扇贝育苗、保苗和养成方法，即可获得下一年可用于杂交的雌性阿拉斯加扇贝种贝生产群体；用同样的方法获得下一年可用于杂交的雄性虾夷扇贝种贝生产群体。
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