CN111972331A - 一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法 - Google Patents

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喻达辉
陈健
翟子钦
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    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish

Abstract

本发明涉及海产品贝类育种技术领域，特别涉及合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，具体包括如下步骤：(1)基础群体的建立、(2)配子的获得、(3)构建壳宽型受体贝基础群体、(4)构建选育群体F2‑F4和(5)合浦珠母贝育珠受体贝新品种培育等步骤；该培育方法不需要通过转基因等复杂技术导入外源基因，在对生物和环境安全没有任何影响的前提下，通过专门化的选育，提供了一种珍珠贝型大、壳厚、抗逆性好的育珠受体贝，弥补现有技术不足。

Description

一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法
【技术领域】
本发明海产品贝类育种技术领域，特别涉及一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法。
【背景技术】
合浦珠母贝(Pinctada fucata)隶属于软体动物门，双壳纲、珍珠贝目、珍珠贝科、珍珠贝属，是培育海水珍珠的重要贝类，其培育出的海水珍珠产量占中国海水珍珠产量的95％以上，具有极高的经济价值。插核是培育珍珠的关键技术环节，把贝的双壳稍微打开，然后把珠核和小片插到贝体内特定位置，送到贝体内的外套膜细胞小片在珠核上不断的分泌珍珠囊从而形成珍珠。提供外套膜小片，是供体贝，称为小片贝或细胞贝，另一个珍珠贝接受小片(无核珍珠)及珠核(有核珍珠)，称为育珠贝。育珠贝的大小和存活率对珍珠的品质和产量起到非常重要的作用。目前珍珠养殖过程中，随着育珠贝的体型越来越小型化，插入的珠核也越来越小，不利于提高珍珠的品质；育珠贝在海上养殖过程中，会出现大量死亡现象，导致收获的珍珠减产，因此提高育珠贝个体的抗性，减少育珠贝的死亡率对珍珠产量起到非常重要的作用。育珠贝的遗传改良对提高珍珠品质，促进珍珠养殖业的发展具有非常重要的意义。
【发明内容】
有鉴于此，本发明提供一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，该培育方法不需要通过转基因等复杂技术导入外源基因，在对生物和环境安全没有任何影响的前提下，通过专门化的选育，提供了一种珍珠贝型大、壳厚、抗逆性好的育珠受体贝，弥补现有技术不足。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，该方法包括以下步骤：
(1)亲本的选择：在野生合浦珠母贝性成熟时期，贝龄1.5-2龄，从某一群体中，以壳宽指数为选育指标，按10％的选择强度选出体型端正、个体较大、贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，为待选亲贝；通过测量1000只待选亲贝的表型数据，计算其壳宽指数，选出壳宽指数较大的前200只贝作为亲本；
(2)配子的获得：解剖亲贝后用牙签挑取少量性腺，通过镜检选出性腺发育成熟的雌性个体和雌性个体，采集30个雄性与30个雌性的配子备用；
(3)构建选育群体F1：a.将步骤(2)中每个个体的卵子混合，得到的卵液进行活化，然后等分成30份，将经步骤(2)选出的精子在海水中放置5-10min，取处于跳跃状态的精子备用；b.将精子放置于活化成功的卵液中受精，使每个卵子周围有3-4个精子；c.30份卵子分别授精、孵化后的幼体再等量混合进行培育，得到成贝；按上述方法构建3个以上群体；
(4)构建选育群体F2：选择步骤(3)所得1.5-2龄的成贝，利用BLUP方法计算壳宽指数的育种值，选出壳宽指数育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体，通过旋转配对因式授精的方式构建群体，即A群体的30个母本分别与B群体中30个父本交配，B群体中30个母本分别与C群体中的30个父本交配，C群体的30个母本分别与A群体中30个父本交配，按(3)的方式授精、培育，获得F2代苗种；
(5)合浦珠母贝育珠受体贝新品种培育：重复步骤(4)，经过连续4代以上定向选育，培育出壳宽较为突出的育珠受体贝新品系。
发明中，进一步地，所述步骤(1)选取的亲本在阴干3-4h、流水刺激40-50h后，有90％以上的个体能够自然排放配子。
本发明中，进一步地，所述步骤(1)中的测量的表型数据包括壳高、壳长、壳宽和壳宽。
上述壳宽指数的计算公式为：壳宽指数＝(壳宽/(壳长+壳高+壳宽))*1000*100％；
壳宽指数为综合珍珠贝大小衡量珍珠贝壳凸度的一种计算方式，其值越大表明壳越凸。
本发明中，进一步地，所述步骤(4)在选育最优个体时，首先将F1代成贝群体按照育种值由大到小进行排列，每个群体中育种值排在前10％的个体作为优选个体，测量出优选个体的形态指标，计算出壳宽指数，接着并利用BLUP模型计算壳宽指数的育种值，按照由大到小的方式排列，在每个优选个体中选择育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体。
本发明中，进一步地，所述步骤(3)的活化方式为将卵液在新鲜的海水中放置20-35min，直至卵子的生发泡破裂，即可。
本发明中，进一步地，所述步骤(4)-(5)在成贝中选出最优的个体还包括以下步骤：在10000只成贝中，按10％的留选率优选出群体内部体型端正、个体大，贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，计算壳宽与壳长的比值，按照该比值由大到小的顺序进行排列，选出前10％的贝作为预选贝，接着在预选贝中通过步骤(3)-(4)所述的方式选择雌雄组合进行交配。
本申请还提供采用本申请培育得到的珠母贝育珠受体贝与小片贝配对进行珍珠培育的方法，具体包括以下步骤：
(一)取出小片贝中左右外套膜的下方游离部分，置于经海水湿润的玻璃板上，并使与贝壳相贴的一面向下；将外套膜一端固定，再用一个边缘圆滑的板片沿外套膜固定端到另一端的方向反复刮擦，最终使外套膜舒展、平直；用脱脂棉蘸取膨润土海水悬浊液反复擦拭外套膜，去除外套膜表面粘液；用刀具将外套膜横切，得到方形外套膜小片备用；
(二)将上述所得外套膜小片浸泡在处理液中，所述处理液由以下重量份的原料组成：蚌肉多糖5-10份、丙酸钙3-8份、软骨素6-12份、金霉素2-6份、牛磺酸5-9份、生理盐水80-120份；
(三)按常规方法将外套膜小片和珠核植入育珠受体贝内脏团内；
(四)利用喷雾器对受体贝植核部位进行喷雾；
(五)按常规方法进行养殖育珠。
优选的，所述处理液由以下重量份的原料组成：蚌肉多糖7份、丙酸钙6份、软骨素9份、金霉素4份、牛磺酸7份、生理盐水100份。
上述处理液中，软骨素具有良好的保水性，能保持体内水分，以水分为媒介，进行养分等的消化、吸收、搬运、新陈代谢等作用；且其对微量元素具有特殊亲和性，能够与蚌肉多糖起协同作用，而蚌肉多糖为从蚌肉中提取得到的产物，能够减少机体对外套膜小片的排异性，提高组织相容性；此外软骨素能够促进肉芽的形成，对于伤口的修复具有重要的作用；金霉素和丙酸钙抗菌谱广，主要起协同抗菌消炎的作用；牛磺酸主要是保护细胞组织免受氧化基与自由基的损伤，提高机体免疫，促进细胞增殖；生理盐水维持细胞生存必需的渗透压。
本发明至少具有以下有益效果：
1.本发明的合浦珠母贝育珠受体贝培育方法不需要通过转基因等复杂技术导入外源基因，在对生物和环境安全没有任何影响的前提下，通过专门化的选育，提供了一种珍珠贝型大、壳厚、抗逆性好的育珠受体贝，弥补现有技术不足。
2.本发明的合浦珠母贝育珠受体贝通过确认精子与卵子的最佳获取时期、获取精卵、海水激活配子、受精孵化等操作，为育珠受体贝的培育提供了新的思路，且本方法由于确定了合理的获取卵子和精子的时间，不需要药物进行促熟，没有使用任何化学药品，育种过程无污染。
3.本申请还提供了珍珠的培育方法，采用本申请的小片贝和育珠贝配对，通过对外套膜小片进行特殊处理，提高小片细胞的活性，促进细胞的分泌，增强小片与组织、珠核的亲和力、降低受体贝在植核手术后的移植免疫排斥反应，促进伤口愈合，促进珍珠囊形成和珍珠质的分泌，培育出的有核珍珠光泽较亮，质感均匀自然，产量高，珍珠的光泽好。
【具体实施方式】
下面结合实施例和试验对本发明作进一步说明。
实施例1：
本实施例提供一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，该方法包括以下步骤：
(1)亲本的选择：在野生合浦珠母贝性成熟时期，从某一群体中，以壳宽指数为选育指标，按10％的选择强度选出体型端正、个体较大、贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，为待选亲贝；通过测量1000只待选亲贝的表型数据，计算其壳宽指数，选出壳宽指数较大的前200只贝作为亲本；选取的亲本在阴干3h、流水刺激40h后，有90％以上的个体能够自然排放配子；
上述测量的表型数据包括壳高、壳长、壳宽和壳宽；
上述壳宽指数的计算公式为：壳宽指数＝(壳宽/(壳长+壳高+壳宽))*1000*100％；
(2)配子的获得：解剖亲贝后用牙签挑取少量性腺，通过镜检选出性腺发育成熟的雌性个体和雌性个体，采集30个雄性与30个雌性的配子备用；
(3)构建壳宽型受体贝基础群体：a.将步骤(2)中每个个体的卵子混合，得到的卵液进行活化，活化方式为将卵液在新鲜的海水中放置20min，直至卵子的生发泡破裂，即可；然后再等分成30份，将经步骤(2)选出的精子在海水中放置5min，取处于跳跃状态的精子备用；b.将30个雄性个体的精子分别与30份卵子受精，使每个卵子周围有3个精子；c.30份卵子分别授精、孵化后的幼体再等量混合进行培育，得到成贝；按上述方法构建3个以上群体；
(4)构建选育群体F2：选择步骤(3)所得1.5龄的成贝，利用BLUP方法计算壳宽指数的育种值，选出壳宽指数育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体，通过旋转配对因式交配的方式构建群体，即A群体的30个母本分别与B群体中30个父本交配，B群体中30个母本分别与C群体中的30个父本交配，C群体的30个母本分别与A群体中30个父本交配，按(3)的方式授精、培育，获得F2代苗种；上述，在选育最优个体时，首先将F1代成贝群体按照育种值由大到小进行排列，每个群体中育种值排在前10％的个体作为优选个体，测量出优选个体的形态指标，计算出壳宽指数，接着并利用BLUP模型计算壳宽指数的育种值，按照由大到小的方式排列，在每个优选个体中选择育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体；
(5)合浦珠母贝育珠受体贝新品种培育：重复步骤(4)，经过连续4代以上定向选育，培育出壳宽较为突出的育珠受体贝新品系；
步骤(4)-(5)在成贝中选出最优的个体还包括以下步骤：在10000只成贝中，按10％的留选率优选出群体内部体型端正、个体大，贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，计算壳宽与壳长的比值，按照该比值由大到小的顺序进行排列，选出前10％的贝作为预选贝，接着在预选贝中通过步骤(3)-(4)所述的方式选择雌雄组合进行交配、授精。
实施例2：
本实施例提供一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，该方法包括以下步骤：
(1)亲本的选择：在野生合浦珠母贝性成熟时期，从某一群体中，以壳宽指数为选育指标，按10％的选择强度选出体型端正、个体较大、贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，为待选亲贝；通过测量1000只待选亲贝的表型数据，计算其壳宽指数，选出壳宽指数较大的前200只贝作为亲本；选取的亲本在阴干3.5h、流水刺激45h后，有90％以上的个体能够自然排放配子；
上述测量的表型数据包括壳高、壳长、壳宽和壳宽；
上述壳宽指数的计算公式为：壳宽指数＝(壳宽/(壳长+壳高+壳宽))*1000*100％；
(2)配子的获得：解剖亲贝后用牙签挑取少量性腺，通过镜检选出性腺发育成熟的雌性个体和雌性个体，采集30个雄性与30个雌性的配子备用；
(3)构建壳宽型受体贝基础群体：a.将步骤(2)中每个个体的卵子混合，得到的卵液进行活化，活化方式为将卵液在新鲜的海水中放置28min，直至卵子的生发泡破裂，即可；然后再等分成30份，将经步骤(2)选出的精子在海水中放置7min，取处于跳跃状态的精子备用；b.将30个雄性个体的精子分别与30份卵子受精，使每个卵子周围有4个精子；c.30份卵子分别授精、孵化后的幼体再等量混合进行培育，得到成贝；按上述方法构建3个以上群体；
(4)构建选育群体F2：选择步骤(3)所得2龄的成贝，利用BLUP方法计算壳宽指数的育种值，选出壳宽指数育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体，通过旋转配对因式交配的方式构建群体，即A群体的30个母本分别与B群体中30个父本交配，B群体中30个母本分别与C群体中的30个父本交配，C群体的30个母本分别与A群体中30个父本交配，按(3)的方式授精、培育，获得F2代苗种；上述，在选育最优个体时，首先将F1代成贝群体按照育种值由大到小进行排列，每个群体中育种值排在前10％的个体作为优选个体，测量出优选个体的形态指标，计算出壳宽指数，接着并利用BLUP模型计算壳宽指数的育种值，按照由大到小的方式排列，在每个优选个体中选择育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体；
(5)合浦珠母贝育珠受体贝新品种培育：重复步骤(4)，经过连续4代以上定向选育，培育出壳宽较为突出的育珠受体贝新品系；
步骤(4)-(5)在成贝中选出最优的个体还包括以下步骤：在10000只成贝中，按10％的留选率优选出群体内部体型端正、个体大，贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，计算壳宽与壳长的比值，按照该比值由大到小的顺序进行排列，选出前10％的贝作为预选贝，接着在预选贝中通过步骤(3)-(4)所述的方式选择雌雄组合进行交配、授精。
实施例3：
本实施例提供一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，该方法包括以下步骤：
(1)亲本的选择：在野生合浦珠母贝性成熟时期，从某一群体中，以壳宽指数为选育指标，按10％的选择强度选出体型端正、个体较大、贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，为待选亲贝；通过测量1000只待选亲贝的表型数据，计算其壳宽指数，选出壳宽指数较大的前200只贝作为亲本；选取的亲本在阴干4h、流水刺激50h后，有90％以上的个体能够自然排放配子；
上述测量的表型数据包括壳高、壳长、壳宽和壳宽；
上述壳宽指数的计算公式为：壳宽指数＝(壳宽/(壳长+壳高+壳宽))*1000*100％；
(2)配子的获得：解剖亲贝后用牙签挑取少量性腺，通过镜检选出性腺发育成熟的雌性个体和雌性个体，采集30个雄性与30个雌性的配子备用；
(3)构建壳宽型受体贝基础群体：a.将步骤(2)中每个个体的卵子混合，得到的卵液进行活化，活化方式为将卵液在新鲜的海水中放置35min，直至卵子的生发泡破裂，即可；然后再等分成30份，将经步骤(2)选出的精子在海水中放置10min，取处于跳跃状态的精子备用；b.将30个雄性个体的精子分别与30份卵子受精，使每个卵子周围有4个精子；c.30份卵子分别授精、孵化后的幼体再等量混合进行培育，得到成贝；按上述方法构建3个以上群体；
(4)构建选育群体F2：选择步骤(3)所得2龄的成贝，利用BLUP方法计算壳宽指数的育种值，选出壳宽指数育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体，通过旋转配对因式交配的方式构建群体，即A群体的30个母本分别与B群体中30个父本交配，B群体中30个母本分别与C群体中的30个父本交配，C群体的30个母本分别与A群体中30个父本交配，按(3)的方式授精、培育，获得F2代苗种；上述，在选育最优个体时，首先将F1代成贝群体按照育种值由大到小进行排列，每个群体中育种值排在前10％的个体作为优选个体，测量出优选个体的形态指标，计算出壳宽指数，接着并利用BLUP模型计算壳宽指数的育种值，按照由大到小的方式排列，在每个优选个体中选择育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体；
(5)合浦珠母贝育珠受体贝新品种培育：重复步骤(4)，经过连续4代以上定向选育，培育出壳宽较为突出的育珠受体贝新品系；
步骤(4)-(5)在成贝中选出最优的个体还包括以下步骤：在10000只成贝中，按10％的留选率优选出群体内部体型端正、个体大，贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，计算壳宽与壳长的比值，按照该比值由大到小的顺序进行排列，选出前10％的贝作为预选贝，接着在预选贝中通过步骤(3)-(4)所述的方式选择雌雄组合进行交配、授精。
实施例4：
本实施例提供采用本申请实施例2培育得到的珠母贝育珠受体贝与小片贝配对进行珍珠培育的方法，具体包括以下步骤：
(一)取出小片贝中左右外套膜的下方游离部分，置于经海水湿润的玻璃板上，并使与贝壳相贴的一面向下；将外套膜一端固定，再用一个边缘圆滑的板片沿外套膜固定端到另一端的方向反复刮擦，最终使外套膜舒展、平直；用脱脂棉蘸取膨润土海水悬浊液反复擦拭外套膜，去除外套膜表面粘液；用刀具将外套膜横切，得到方形外套膜小片备用；
(二)将上述所得外套膜小片浸泡在处理液中，所述处理液由以下重量份的原料组成：蚌肉多糖7份、丙酸钙6份、软骨素9份、金霉素4份、牛磺酸7份、生理盐水100份；
(三)按常规方法将外套膜小片和珠核植入育珠受体贝内脏团内；
(四)利用喷雾器对受体贝植核部位进行喷雾；
(五)按常规方法进行养殖育珠。
对比例1
本实施例提供采用本申请实施例2培育得到的珠母贝育珠受体贝与小片贝配对进行珍珠培育的方法，具体包括以下步骤：
(一)取出小片贝中左右外套膜的下方游离部分，置于经海水湿润的玻璃板上，并使与贝壳相贴的一面向下；将外套膜一端固定，再用一个边缘圆滑的板片沿外套膜固定端到另一端的方向反复刮擦，最终使外套膜舒展、平直；用脱脂棉蘸取膨润土海水悬浊液反复擦拭外套膜，去除外套膜表面粘液；用刀具将外套膜横切，得到方形外套膜小片备用；
(二)将上述所得外套膜小片浸泡在处理液中，所述处理液由以下重量份的原料组成：海藻酸钠7份、丙酸钙6份、软骨素9份、金霉素4份、牛磺酸7份、生理盐水100份；
(三)按常规方法将外套膜小片和珠核植入育珠受体贝内脏团内；
(四)利用喷雾器对受体贝植核部位进行喷雾；
(五)按常规方法进行养殖育珠。
对比例2
本实施例提供采用本申请实施例2培育得到的珠母贝育珠受体贝与小片贝配对进行珍珠培育的方法，具体包括以下步骤：
(一)取出小片贝中左右外套膜的下方游离部分，置于经海水湿润的玻璃板上，并使与贝壳相贴的一面向下；将外套膜一端固定，再用一个边缘圆滑的板片沿外套膜固定端到另一端的方向反复刮擦，最终使外套膜舒展、平直；用脱脂棉蘸取膨润土海水悬浊液反复擦拭外套膜，去除外套膜表面粘液；用刀具将外套膜横切，得到方形外套膜小片备用；
(二)按常规方法将外套膜小片和珠核植入育珠受体贝内脏团内；
(三)利用喷雾器对受体贝植核部位进行喷雾；
(四)按常规方法进行养殖育珠。
对比例3
本实施例提供采用从野生合浦珠母贝的任一群体中获取的性腺发育肥满、体内无寄生虫、壳内侧珍珠层无瑕疵的的育珠受体贝与小片贝配对进行珍珠培育的方法，具体包括以下步骤：
(一)取出小片贝中左右外套膜的下方游离部分，置于经海水湿润的玻璃板上，并使与贝壳相贴的一面向下；将外套膜一端固定，再用一个边缘圆滑的板片沿外套膜固定端到另一端的方向反复刮擦，最终使外套膜舒展、平直；用脱脂棉蘸取膨润土海水悬浊液反复擦拭外套膜，去除外套膜表面粘液；用刀具将外套膜横切，得到方形外套膜小片备用；
(二)将上述所得外套膜小片浸泡在处理液中，所述处理液由以下重量份的原料组成：蚌肉多糖7份、丙酸钙6份、软骨素9份、金霉素4份、牛磺酸7份、生理盐水100份；
(三)按常规方法将外套膜小片和珠核植入育珠受体贝内脏团内；
(四)利用喷雾器对受体贝植核部位进行喷雾；
(五)按常规方法进行养殖育珠。
对比例4
本实施例提供采用野生合浦珠母贝中选取的性腺发育肥满、内壳壳色颜色靓丽、光泽度较好、内壳珍珠层无瑕疵的小片贝与珠母贝育珠受体贝配对进行珍珠培育的方法，具体包括以下步骤：
(一)取出小片贝中左右外套膜的下方游离部分，置于经海水湿润的玻璃板上，并使与贝壳相贴的一面向下；将外套膜一端固定，再用一个边缘圆滑的板片沿外套膜固定端到另一端的方向反复刮擦，最终使外套膜舒展、平直；用脱脂棉蘸取膨润土海水悬浊液反复擦拭外套膜，去除外套膜表面粘液；用刀具将外套膜横切，得到方形外套膜小片备用；
(二)将上述所得外套膜小片浸泡在处理液中，所述处理液由以下重量份的原料组成：蚌肉多糖7份、丙酸钙6份、软骨素9份、金霉素4份、牛磺酸7份、生理盐水100份；
(三)按常规方法将外套膜小片和珠核植入育珠受体贝内脏团内；
(四)利用喷雾器对受体贝植核部位进行喷雾；
(五)按常规方法进行养殖育珠。
其中，实施例4、对比例1-4的小片贝为采用野生合浦珠母贝中选取的性腺发育肥满、内壳壳色颜色靓丽、光泽度较好、内壳珍珠层无瑕疵的小片贝。
效果验证
一、对实施例1-3所述的育珠受体贝的各代的性状遗传参数进行统计如下：
(1)F1代与原品种育珠受体贝比较，其壳长、壳高、壳宽和体质量等4个性状分别提高5.01mm，5.11mm，1.46mm和2.13g；
(2)F2代与F1代比较，其壳长、壳高、壳宽和体质量等4个性状分别提高4.56mm，4.67mm，1.29mm和1.92g；
F3代较F2代比较，其壳长、壳高、壳宽和体质量等4个性状分别提高4.31mm，4.26mm，1.13mm和1.68g；
F4代较F3代比较，其壳长、壳高、壳宽和体质量等4个性状分别提高4.10mm，3.98mm，0.92mm和1.52g；
F5代较F4代比较，其壳长、壳高、壳宽和体质量等4个性状分别提高3.26mm，3.09mm，0.59mm和1.11g。
二、统计本申请育珠受体贝和原品种育珠受体贝繁殖群体的受精率、孵化率、变态率等指标，如表1所示：
表1两种育珠受体贝受精率、孵化率、变态率对比表
Figure BDA0002658958520000101
Figure BDA0002658958520000111
根据表1结果可知，使用本发明方法培育的育珠受体贝，其受精率、孵化率和变态率显著优于原品种育珠受体贝。
三、申请人比较实施例4和对比例1-4所培育得到的珍珠的进行指标对比，评价指标包括：优质珍珠数(指直径大于7.3mm、光滑、光泽强、无缺损、珍珠层厚0.4mm以上的珍珠)、测量计算珍珠层厚度、优质珠率。
珍珠层厚度＝(珍珠直径-珠核直径)/2；
优质珠率＝优质珠数量/收珠数量；
以上指标均取平均值，记录数据如表2所示。
表2不同组别育珠效果对比
Figure BDA0002658958520000112
采用本申请实施例4的育珠方法所得到的珍珠各指标均优于其他组别。
上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。

Claims (6)

1.一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)亲本的选择：在野生合浦珠母贝性成熟时期，从某一群体中，以壳宽指数为选育指标，按10％的选择强度选出体型端正、个体较大、贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，为待选亲贝；通过测量1000只待选亲贝的表型数据，计算其壳宽指数，选出壳宽指数较大的前200只贝作为亲本；
(2)配子的获得：解剖亲贝后用牙签挑取少量性腺，通过镜检选出性腺发育成熟的雌性个体和雌性个体，采集30个雄性与30个雌性的配子备用；
(3)构建壳宽型受体贝基础群体：a.将步骤(2)中每个个体的卵子混合，得到的卵液进行活化，然后再等分成30份，将经步骤(2)选出的精子在海水中放置5-10min，取处于跳跃状态的精子备用；b.将30个雄性个体的精子分别与30份卵子受精，使每个卵子周围有3-4个精子；c.30份卵子分别授精、孵化后的幼体再等量混合进行培育，得到成贝；按上述方法构建3个以上群体；
(4)构建选育群体F2：选择步骤(3)所得1.5-2龄的成贝，利用BLUP方法计算壳宽指数的育种值，选出壳宽指数育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体，通过旋转配对因式交配的方式构建群体，获得F2代苗种；
(5)合浦珠母贝育珠受体贝新品种培育：重复步骤(4)，经过连续4代以上定向选育，培育出壳宽突出的育珠受体贝新品系。
2.根据权利要求1所述的一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，其特征在于，所述步骤(1)选取的亲本在阴干3-4h、流水刺激40-50h后，有90％以上的个体能够自然排放配子。
3.根据权利要求1所述的一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，其特征在于，所述步骤(1)中的测量的表型数据包括壳高、壳长、壳宽和壳宽。
4.根据权利要求1所述的一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，其特征在于，所述步骤(4)在选育最优个体时，首先将F1代成贝群体按照育种值由大到小进行排列，每个群体中育种值排在前10％的个体作为优选个体，测量出优选个体的形态指标，计算出壳宽指数，接着并利用BLUP模型计算壳宽指数的育种值，按照由大到小的方式排列，在每个优选个体中选择育种值最优30个雄性个体和30个雌性个体。
5.根据权利要求1所述的一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，其特征在于，所述步骤(3)的活化方式为将卵液在新鲜的海水中放置20-35min，直至卵子的生发泡破裂，即可。
6.根据权利要求1所述的一种合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，其特征在于，所述步骤(4)-(5)在成贝中选出最优的个体还包括以下步骤：在10000只成贝中，按10％的留选率优选出群体内部体型端正、个体大，贝壳厚实且无寄生虫的1000只贝，计算壳宽与壳长的比值，按照该比值由大到小的顺序进行排列，选出前10％的贝作为预选贝，接着在预选贝中通过步骤(3)-(4)所述的方式选择雌雄组合进行交配、授精。
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