CN108514598B - 一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物及制备与应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物及制备与应用。所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，包含如下按质量份计的组分：丹参15～25份；穿山龙20～80份；黄芪20～40份；白芍15～30份；天山雪莲3～10份；杜仲10～30份；骨碎补10～30份；川续断10～30份；熟地10～30份；炙甘草5～15份。本发明提供的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物对类风湿关节炎具有改善症状、骨保护及抗炎的作用，且无明显肝肾毒性，疗效确切、稳定、不良反应少。

Description

一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物及制备与应用

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物及制备与应用。

背景技术

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种常见的自身免疫性疾病，其病理特征表现为关节滑膜炎症及滑膜组织增生，进而导致关节软骨和骨的损伤与破坏。类风湿关节炎的自然病程中，5～10年致残率为60％，病程30年的致残率为90％。关节滑膜的炎症增生导致的骨破坏是类风湿关节炎的核心病理环节，所以如何有效阻断骨破坏、降低致残率，是类风湿关节炎治疗中亟待克服的难点。

西医治疗方案虽然可以在短期内较为有效的控制病情，但是仍无法完全有效的长期稳定病情，尤其是无法有效阻止影像学进展(骨破坏进程)。DMARD如甲氨蝶呤是RA的一线治疗药物。早期、足量、联合使用DMARD药物是改善RA预后的关键，但是40％的患者对早期诱导缓解方案不应答，且DMARD因其胃肠道症状、骨髓抑制、肝毒性、肾毒性、感染、肿瘤及自主神经病变等副作用及耐受性差而在临床的长期应用中受到极大的限制，乃至患者的抵触。虽然新型DMARD如生物制剂不断取得进展，但是由于单靶点作用，仍然存在短期疗效迅速、长期疗效不稳定、患者病情易反复，及安全性不完全明确的问题，并且国内生物制剂昂贵的治疗价格给患者个人和社会带来了沉重的经济负担。更重要的是，生物制剂在内的DMARD即使治疗及时有效也无法有效阻断或抑制RA患者的关节骨质破坏病理进程，导致影像学改变在治疗情况下仍持续进展。因此，如何破解RA治疗面临的难点和西医方案的困惑是中医药研究的一个最佳切入点(Heimans L,Akdemir G,Boer KV,et al.Two-year results ofdisease activity score(DAS)-remission-steered treatment strategies aiming atdrug-free remission in early arthritis patients(the IMPROVED-study).ArthritisRes Ther,2016,18:23.)。

发明内容

为了克服现有技术的不足和缺点，本发明的首要目的在于提供一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物。

本发明的另一目的在于提供上述预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的制备方法。

本发明的再一目的在于提供上述预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，包含如下按质量份计的组分：

所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，优选包含如下按质量份计的组分：

所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的制备方法，包含如下步骤：

将预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的各组分分别粉碎、过筛、混合，得到预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物；

所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物在制备预防和/或治疗类风湿关节炎产品中的应用；

所述的预防和治疗类风湿关节炎产品含有治疗有效量的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，余量为药学可接受的载剂或其它可配伍的药物；

所述的载剂优选为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、吸附载体、表面活性剂和润滑剂中的至少一种；

所述的其它可配伍的药物，是指其它天然药物、化学药品或生物药物；

一种预防和/或治疗类风湿关节炎的药物，包含上述预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物；

所述的药物还包括甲氨蝶呤；

本发明的原理：

君药：丹参、穿山龙。丹参活血祛瘀，去滞生新；穿山龙活血通络，祛风除湿。

臣药：黄芪、川续断、杜仲、骨碎补。黄芪助君药以扶正，加强补气活血之力，与穿山龙同用则强化扶正之效；杜仲、骨碎补、川续断三药皆入肝肾经，均可补肝肾、强筋骨，与君药和黄芪合用可达事半功倍之效。

佐药：白芍、天山雪莲。白芍佐黄芪，养血柔肝、制黄芪之燥；天山雪莲与君药同用，可助祛除风湿毒邪、止痛。二者一柔一刚，一阴一阳，以助全方性味之平和。

使药：熟地、炙甘草。熟地为白芍使，养血柔肝、制方中温燥药物之毒性，熟地为川断使，可加强补益肝肾之效；甘草调和诸药。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

(1)本发明提供的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物对类风湿关节炎具有改善症状、骨保护及抗炎的作用，且无明显肝肾毒性。

(2)本发明提供的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物疗效确切、稳定、不良反应少。

附图说明

图1是效果实施例造模及用药实验流程图。

图2是治疗过程中实验大鼠体重变化结果分析图。

图3是实验大鼠后足踝关节肿胀度变化图。

图4是实验第45天预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物不同剂量干预对CIA大鼠后足踝关节肿胀度影响的结果分析图。

图5是脾脏指数(SI)与胸腺指数(TI)结果分析图；其中，A：大鼠脾指数；B：大鼠胸腺指数。

图6是各组间大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平结果分析图。

图7是各组间大鼠血清白介素1β(IL-1β)水平结果分析图。

图8是小动物活体成像仪检测大鼠后足踝关节的X光图。

图9是HE染色对大鼠膝关节、后足踝关节进行组织病理学观察的结果分析图。

图10是各组各组血清谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(S-Cr)水平表达差异结果分析图；其中，A：血清谷丙转氨酶水平；B：血清肌酐水平。

图11是中西医结合治疗组和西药联合组对CCP影响(间接指标)的结果分析图；其中，A：西药联合组；B：中西医结合治疗组。

图12是中西医结合治疗组和西药联合组对双手X线分期影响的结果分析图；其中，A：西药联合组；B：中西医结合治疗组。

图13是中西医结合治疗组和西药联合组对骨密度影响的结果分析图；其中，A、C：西药联合组；B、D：中西医结合治疗组。

图14是中西医结合治疗组3例患者X线结果分析图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，包含如下按质量份计的组分：

所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的制备方法，包含如下步骤：

将预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的各组分分别粉碎、过筛、混合，得到预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物。

实施例2

一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，包含如下按质量份计的组分：

所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的制备方法，包含如下步骤：

将预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的各组分分别粉碎、过筛、混合，得到预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物。

实施例3

一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，包含如下按质量份计的组分：

所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的制备方法，包含如下步骤：

将预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的各组分分别粉碎、过筛、混合，得到预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物。

对比实施例

一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，包含如下按质量份计的组分：

所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的制备方法，包含如下步骤：

将预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的各组分分别粉碎、过筛、混合，得到预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物。

效果实施例1预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物对类风湿关节炎模型CIA大鼠骨破坏及血清细胞因子表达的影响

70只SPF级Wistar大鼠购买于南方医科大学实验动物中心，体重180～220g(动物合格证号：4400200009869)。实验在广东省中医药科学院动物中心进行，符合动物伦理与福利原则(伦理编号：2016019)。大鼠被随机分为7组，分别为正常组，CIA模型组，甲氨蝶呤(MTX)组，预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物低、中、高剂量组，联合用药组，每组10只，雌雄各半。除正常组外，其余各组用牛二型胶原蛋白诱导构建类风湿关节炎大鼠模型，具体造模方法为：牛二型胶原蛋白(Lot:20021,Chondrex,SIGMA，America)与不完全弗氏佐剂(Lot:F5506,SIGMA，America)按照体积比1:1混合乳化，用匀浆机(IKA

Germany)匀浆30min，在第一天用体积分数为10％的水合氯醛将大鼠麻醉后，在大鼠尾部皮下、爪部皮下多点注射100ug/只；第八天加强免疫一次，得到II型胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型，造模共计14天。造模后(第15天)，预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物低、中、高剂量组给予预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物溶液(取183g实施例1制得的组合物用3000mL离子水煎煮60min，去渣离心，水提液经过旋转蒸发剩余得到150mL，得到预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物溶液；其中，临床等效剂量为16.8g/kg，再根据临床等效剂量稀释成相应的使用剂量)干预，其中，低剂量(8.4g/kg)为临床等效剂量的1/2，中剂量(16.8g/kg)等于临床等效剂量，高剂量(33.6g/kg)为临床等效剂量的2倍，每天灌胃；甲氨蝶呤(MTX)组给予MTX干预，给药剂量为1.2mg/kg/周，通过腹腔注射给药；联合用药组给予预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物中剂量+MTX干预，正常组和CIA模型组大鼠每天给予生理盐水灌胃；给药周期为30天。实验第45天，同正常组、CIA模型组(每组10只)比较，观察后足踝关节肿胀度、大鼠后肢X线影像学改变、关节病理切片、血清炎症细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)表达水平以及血清谷丙转氨酶ALT、肌酐S-Cr表达情况(图1)。

结果如图2～10所示。其中，治疗过程中实验大鼠体重变化如图2所示，各组间比较无统计学差异(p＜0.05)。

如图3所示，相对于正常组，CIA大鼠在造模后一周内开始出现关节肿胀，在第25天达到高峰。治疗1个月后(实验第45天)，CIA模型组与MTX组关节肿胀度相对于正常组有统计学差异(p＜0.05)。而且，等效剂量的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物组相对于MTX组表现出更明显的下降趋势。联合用药组的关节肿胀度变化接近于预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物组，与正常组对比无统计学差异(p＞0.05)。

如图4所示，在实验第45天，预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物不同剂量干预对CIA大鼠后足踝关节肿胀度影响的结果分析图。从图中可知，相对于CIA模型组，16.8g/kg剂量的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物组足肿胀度显著降低(p＜0.01)，33.6g/kg剂量的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物组次之(p＜0.05)，故，16.8g/kg剂量为该方临床等效剂量。

图5是脾脏指数(SI)与胸腺指数(TI)结果分析图，从图中可以看出，各组间比较无统计学差异(p＞0.05)。

图6是各组间大鼠血清TNF-α水平结果分析图，从图中可以看出，相对于正常组，CIA模型组血清TNF-α水平显著升高(p＜0.05)。用药治疗后，预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物组与MTX组大鼠血清TNF-α表达均显著减少(p＜0.05)，联合用药组血清TNF-α表达水平减少更显著(p＜0.01)。

图7是各组间大鼠血清IL-1β水平比较结果分析图，从图中可以看出，相对于正常组，CIA模型组血清IL-1β水平显著升高(p＜0.05)。用药治疗后，MTX组大鼠血清IL-1β表达显著减少(p＜0.01)，而联合用药组下调血清IL-1β表达水平非常显著(p＜0.001)。

图8是小动物活体成像仪检测大鼠后足踝关节的X光图，从图中可以看出，相对于正常组，CIA模型组后足踝关节软组织肿胀，后足踝关节局部虫蚀样改变(见白色圈中所示)。相对于模型组，预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物组大鼠后足踝关节受累有所改善。

图9是HE染色对大鼠膝关节、后足踝关节进行组织病理学观察的结果分析图，从图中可以看出，相对于正常组，CIA模型组关节滑膜细胞增生(见箭头①)、局部炎症细胞浸润(见箭头②)、关节结构破坏和关节间隙变窄(见箭头③)和血管翳形成(见箭头④)。相对于模型组，预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物组大鼠爪关节结构较完整，局部炎症细胞浸润减少，滑膜细胞增生较少，其中，预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物组中剂量组改善更为明显。

图10是各组各组血清ALT、S-Cr水平表达差异结果分析图，从图中可以看出，各组各组血清ALT、S-Cr水平表达差异无统计学意义(P＞0.05)，说明预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物对大鼠肝肾功能无明显影响。

综上所述，预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物可明显减轻CIA大鼠关节肿胀度(P＜0.05)，降低关节炎评分；X线显示改善骨破坏，病理切片显示有良好的抑制滑膜组织增殖、减少炎症细胞浸润、延缓骨与软骨破坏的效果；与CIA模型组比较，预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物可显著降低CIA大鼠血清中炎症细胞因子TNF-α(P＜0.05)和IL-1β(P＜0.05)表达水平；用药后谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(S-Cr)无明显异常。预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物对类风湿关节炎动物模型CIA大鼠具有改善症状、骨保护及抗炎的作用，且无肝肾毒性。

实施例2和实施例3制得的组合物效果同实施例1。

效果实施例2预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物改善骨破坏情况

将60例类风湿关节炎病人随机分为中西医结合治疗组(预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物联合甲氨蝶呤)与西药联合组(来氟米特联合甲氨蝶呤)，每组各30例，进行6个月疗效评价，其中，中西医结合治疗组：MTX，10mg，每周一次；预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物加味，每日一剂(183g实施例1制得的组合物)，分两次温服。西药联合组：MTX，10mg，每周一次；LEF，10mg，早晚各一次口服。

图11是中西医结合治疗组和西药联合组对CCP影响(间接指标)的结果分析图。从图中可以看出，中西医结合治疗组与西药联合组在入组前的CCP滴度基线相当，P>0.05；治疗后，中西医结合治疗组与西药联合组CCP滴度情况无差异性，P>0.05；从整体上看，两组患者的CCP抗体滴度经过治疗后有所改善，高滴度所占比例均有所下降，提示病情好转；最新研究指出[Cheng TT,et al.Arthritis Res Ther.2018Jan 30；20(1):16.]，CCP的滴度高低与患者骨质疏松情况相关，故可提示两组患者经治疗后，CCP滴度降低，骨质疏松、骨量减少情况可能也随之好转。

图12是中西医结合治疗组和西药联合组对双手X线分期影响的结果分析图。从图中可以看出，中西医结合治疗组与西药联合组在入组前的X线分期基线相当，P>0.05；治疗后，中西医结合治疗组与西药联合组的X线分期情况无差异性，P>0.05；单个患者数据分析，所有患者的治疗前与治疗后的X线分期无明显改变，而中西医结合治疗组、西药联合组分别有1名患者治疗后的X线描述中提及出现了骨质疏松情况，但是分期仍处于Ⅰ期。

图13是中西医结合治疗组和西药联合组对骨密度影响的结果分析图。从图中可以看出，中西医结合治疗组与西药联合组在入组前的腰椎、左髋部骨质疏松情况基线相当，P>0.05；治疗后，中西医结合治疗组与西药联合组在入组前的腰椎、左髋部骨质疏松情况分期情况无差异性，P>0.05；从整体上看，两组患者的经治疗后腰椎骨质疏松的比例有所下降，但左髋部骨质疏松比例均有所上升，提示全身各部位骨质变化程度不均衡可能。

图14是中西医结合治疗组3例患者X线结果分析图。从图中可以看出，经过治疗后复查骨密度较前有好转，阶段性结果提示中西医结合治疗组治疗RA，有骨保护作用。而对比实施例并未发现具有骨保护疗效。

综上所述，在改善症状、减轻炎症方面，基于预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的中西医结合方案与阳性对照组(难治性RA经典方案)效果相当，优势在于：疗效更为稳定，不良反应更少，且具有潜在的骨保护作用。

实施例2和实施例3制得的组合物效果同实施例1。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，其特征在于由如下按质量份计的组分组成：

丹参 15～25份；

穿山龙 20～80份；

黄芪 20～40份；

白芍 15～30份；

天山雪莲 3～10份；

杜仲 10～30份；

骨碎补 10～30份；

川续断 10～30份；

熟地 10～30份；

炙甘草 5～15份。

2.根据权利要求1所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，其特征在于由如下按质量份计的组分组成：

丹参 20份；

穿山龙 30份；

黄芪 30份；

白芍 20份；

天山雪莲 3份；

杜仲 20份；

骨碎补 20份；

川续断 15份；

熟地 15份；

炙甘草 10份。

3.权利要求1或2所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的制备方法，其特征在于包含如下步骤：

将预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物的各组分分别粉碎、过筛、混合，得到预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物。

4.权利要求1或2所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物在制备预防和/或治疗类风湿关节炎药品中的应用。

5.根据权利要求4所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物在制备预防和/或治疗类风湿关节炎药品中的应用，其特征在于：

所述的预防和/或治疗类风湿关节炎药品含有治疗有效量的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物，余量为药学可接受的载剂和/或甲氨蝶呤。

6.根据权利要求5所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物在制备预防和/或治疗类风湿关节炎药品中的应用，其特征在于：

所述的载剂为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂和润滑剂中的至少一种。

7.一种预防和/或治疗类风湿关节炎的药物，其特征在于包含权利要求1或2所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的组合物。

8.根据权利要求7所述的预防和/或治疗类风湿关节炎的药物，其特征在于：

所述的药物还包括甲氨蝶呤。

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