CN108498871A - 一种自体生物蛋白水凝胶的制备及其在眼科的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生物医学领域，尤其涉及一种自体生物蛋白水凝胶的制备及其在眼科的应用；包括以下步骤：A、血红蛋白的提取：从静脉血中离心得压积红细胞，将压积红细胞溶解、搅拌、离心得粗制血红蛋白溶液，粗制血红蛋白溶液萃取透析得精制血红蛋白溶液；B、自体生物蛋白水凝胶的制备：辐照交联法，诱导步骤A中制好的精制血红蛋白侧链氨基酸残基断裂，与临近的氨基酸残基链结合，形成自体生物蛋白水凝胶；本发明制备快速简单，生物相容性、无毒、无抗原性方面都有无可比拟的优势，除机械作用外还可能提供自体蛋白中的内源性营养因子或成为外源性营养因子、生长因子的载药缓释载体，在复杂的玻璃体视网膜手术中是一种很有前途的新型材料。

Description

一种自体生物蛋白水凝胶的制备及其在眼科的应用

技术领域

本发明涉及一种生物蛋白水凝胶，尤其涉及一种自体生物蛋白水凝胶的制备及其在眼科的应用。

背景技术

目前眼科生物材料包含：人工角膜的光学镜柱材料和支架材料、人工晶状体材料、人工玻璃体材料、人工眼球义眼台和义眼材料、人工泪道和泪液材料、角膜接触镜材料及眼科药物载体材料等。

应用于眼科的良好的生物材料应具备以下特性：无副产物，无单体释放，无变形，具有很高透光率。还要具有优良的物理机械性能，反复延伸性，易加工，耐候性(无双键存在，不易被紫外光和臭氧所分解)，柔软(不损伤眼内精细组织)低表面张力和低表面能，生物相容性极佳。

水凝胶，是一类能够吸收并保有大量水分的具有交联网络结构的聚合物，在聚合物网络结构中含有亲水基团或亲水的链段，它们在水环境中能够与水结合从而形成水凝胶结构，这种水凝胶结构使得亲水的小分子能够在其中进行扩散，水凝胶材料通常具有良好的生物相容性，因而其被广泛应用与生物、医学相关的领域，是一类很好的生物材料。排异反应：生物体对非己的物质会产生排斥性的抗体，这就是排异反应。人体机体内与排斥反应有关的抗原系统多达20种以上，其中能引起强而迅速排斥反应者称为主要组织兼容性抗原，其编码基因是一组紧密连锁的基因群，称为主要组织兼容性复合体。传统水凝胶、如聚透明质酸钠，实际上被机体识别为非己物质，会产生一系列的排异反应。产生睑结膜充血水肿、分泌物增加、疼痛和眼痒等症状；长时间排异反应会引起许多并发症，如炎症。而聚血红蛋白自体水凝胶的材料来源于患者自己的血液，除降低排异反应的可能性以外，还能保留一些自体血液中固有的组织营养或促生长活性物质，或作为外源性药物或生物活性因子的载体，促进伤口与创面的愈合。

玻璃体视网膜手术是现代眼科学中最为精细、技术含量最高的手术方式，是先天性白内障、孔源性视网膜脱离、增殖性糖尿病视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变、后段眼外伤等多种常见的致盲性眼底病变最有效或唯一的治疗手段，手术方法是在眼球上作三个穿刺口进入眼球内部，如图1所示，利用微创手术器械清除或修复眼底病灶，玻璃体视网膜手术的微创化和效果的优化近年来成为趋势，其适用的范围也日渐扩大，是整个眼科学领域的重大进展之一。

尽管玻璃体视网膜手术获得了很大的进步，对一些复杂玻璃体视网膜病变，玻璃体手术的预后仍然受限。需要进一步改良手术流程、改进手术预后。

儿童白内障摘除手术是治疗先天性白内障的唯一有效方式，由于儿童眼球壁薄而软，自闭性差，几乎均需要以10/0尼龙线手工缝合手术切口。术后数月要镇静甚至再次全麻下拆除缝线。

玻璃体视网膜手术是孔源性视网膜脱离、增殖性糖尿病视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变、后段眼外伤等多种常见的致盲性眼底病变最有效或唯一的治疗手段。玻璃体视网膜手术的微创和效果优化近年来成为趋势，也是整个眼科学领域的重大进展之一。但目前临床主流应用的20、23和25G手术切口仍然常常需要手工缝合，特别是在眼球壁薄而软的儿童、高度近视、再次手术病人，缝合更是必不可少。这些缝合：1.在术中降低了手术的效率，2.缝线走行径路上会有瘢痕形成，在角膜外伤伤口处的10/0尼龙线可以影响角膜透明度及术后视力；若采用7/0可吸收缝线缝合巩膜切口，切口缝线有较高比例的线结反应、不适感及眼表地形改变所导致干眼症的比率。3.缝线过紧将导致眼球变形、散光增加、术后视力恢复差；缝线过松则会伤口渗漏、眼内容物脱出、眼内感染、增殖；手术切口闭合不良可以引起低眼压、玻璃体嵌顿、结膜下硅油或增殖性玻璃体视网膜病变导致手术预后差甚至失败。4.对于许多外伤患者(伤情重、伤口大、合作差的儿童或成人等)，一期缝合、7-10日后的二期手术、甚至数月后伤口的拆线都需要全麻，需承担多次的麻醉风险和费用。

视网膜脱离是指视网膜神经上皮与其下的视网膜色素上皮之间的分离，最常见的类型为孔源性，即由视网膜的撕裂或萎缩裂孔形成后，眼球内的液体通过裂孔渗漏至视网膜下，导致了视网膜与色素上皮分离，从而导致视网膜神经细胞的营养和代谢的障碍，患眼的视力下降甚至丧失。目前的治疗方法有两种，其中巩膜外加压手术是通过在巩膜表面缝合一个外加压物，形成巩膜和脉络膜共同向内凹陷的嵴顶压封闭视网膜裂孔，从而使视网膜复位。但这一操作复杂，术中术后并发症多，如缝合外加压物时穿破眼球，眼球外的加压物造成的眼前段缺血、眼球运动障碍复视、加压物远期暴露、感染、蚀破眼球壁等等。近年来有人用脉络膜上腔加压术，即将透明质酸钠或交联透明质酸钠通过钝针头经巩膜下潜行一定距离注入裂孔附近的脉络膜上腔，使脉络膜向内凹陷形成一个圆顶形加压嵴顶压视网膜裂孔使其封闭、视网膜复位。这种术式在眼球外表面没有外加压物的缝合和存留，解决了上面提到的所有问题。但其使用的透明质酸钠在体内吸收代谢非常快，所形成的加压嵴在2天到2月就会消失，加压的时间往往不够。

部分严重的眼外伤，如眼球破裂伤口延伸至赤道部之后，或眼球贯穿伤(由于利器或高速物体造成的眼球前后贯通的两个伤口)，前部的伤口通常可以缝合，而后部伤口由于所处位置较深，暴露和缝合都极为困难，往往在离断对应肌肉尽量缝合后，仍只能旷置后部伤口等待组织自行瘢痕化修复，在这个过程中，术中翻转眼球及术后旷置伤口均导致眼球内容物的进一步外漏和伤道组织嵌顿、增殖，常常使这种眼球预后极差，甚至少数情况下可引起对侧眼的交感性眼炎，威胁双眼视力。

黄斑指视网膜中央对视觉成像最敏感关键的部位，黄斑裂孔对于视觉质量的影响极大。目前黄斑裂孔唯一的治疗方案为玻璃体视网膜手术，术中剥除玻璃体后界膜和视网膜内界膜，该方案对小的特发性黄斑裂孔效果良好，但对于>400μm的大裂孔或巨大裂孔、高度近视黄斑裂孔等往往效果不佳，对于这部分患者学者有采用内界膜翻转覆盖、填塞、自体血覆盖等方法，但上述各方法均只能从解剖上关闭裂孔，无法修复感光神经细胞缺损，反而操作过程可能对视网膜造成新的机械损伤；新近有人切割自体游离视网膜植片来填塞黄斑裂孔，但创伤很大，且植片存活率功能及预后存疑。

病理性高度近视的发展是眼球前后径的不断增加、后极部薄弱突出形成局部后巩膜葡萄肿的过程，在这个过程中，视网膜组织的拉伸滞后于巩膜的突出、视网膜的相对短缺，与其后支撑视网膜色素上皮及脉络膜层产生分离，从而产生近视牵拉性黄斑病变，包括玻璃体黄斑牵拉，高度近视黄斑劈裂及黄斑裂孔、视网膜脱离等等。这种情况的玻璃体视网膜手术由于无法充分解决高度近视视网膜相对短缺、缺乏支撑的始动因素，玻璃体手术效果欠佳，失败率、复发率高。目前有利用钛板、硅海绵、异体巩膜、羊膜等多种材料多种进行黄斑后垫压的手术尝试，但眼外的垫压操作困难，位置难以精准，且刚性材料的垫压产生眼球壁不规则的形变，患者视物变形、屈光参差的感觉常常仍明显甚至加重，视觉质量欠佳。

所有玻璃体视网膜手术的基本步骤均包括清除眼内凝胶样的玻璃体，代之以眼内填充物。眼内填充物目前包括平衡盐溶液、硅油及气体(空气或膨胀气体)，均有各自的局限性。平衡盐并发症较少，但缺乏对眼内组织的支撑作用；气体填充时间短，迅速失去支撑作用，且填充期内视力干扰明显；硅油支撑时间长，但可产生继发性青光眼、乳化等并发症，且需再次手术取出。

在严重开放性眼外伤、眼内炎及严重增殖性玻璃体视网膜病变视网膜切开后，都会有大面积的视网膜色素上皮(RPE)细胞的裸露，继发RPE细胞往玻璃体腔的迁移、变性和增殖，最后导致术后的增殖性玻璃体视网膜病变，这是玻璃体手术失败的主要原因。

发明内容

本发明的目的在于提供一种自体生物蛋白水凝胶的制备及其在眼科的应用，解决了自体生物蛋白水凝胶的制备以及玻璃体手术的预后受限的问题。

本发明是这样实现的，一种自体生物蛋白水凝胶的制备方法，该方法包括以下步骤：

A、血红蛋白的提取：从静脉血中离心得压积红细胞，再将压积红细胞溶解、搅拌、离心得粗制血红蛋白溶液，粗制血红蛋白溶液萃取透析得精制血红蛋白溶液；

B、自体生物蛋白水凝胶的制备：辐照交联法，诱导步骤A中制好的精制血红蛋白侧链氨基酸残基断裂，与临近的氨基酸残基链结合，形成自体生物蛋白水凝胶。

本发明的进一步技术方案是：所述步骤A为：将加入了抗凝剂静脉血离心去除血浆、白细胞、血小板，离心后得到压积红细胞，用低渗溶液溶解压积红细胞，得溶血溶液，通入惰性气体，在溶血溶液中加入pH值为7.0～7.5的维生素C溶液，充分搅拌1小时，转速为4000r/min-6000r/min下离心10～30分钟后得到粗制血红蛋白溶液，粗制血红蛋白溶液震荡摇匀后进行萃取，取下层血红蛋白溶液进行透析，将血红蛋白溶液装入透析袋中，进行透析并得到精制血红蛋白溶液。

本发明的进一步技术方案是：所述步骤B中的辐照交联法的步骤为：在γ射线(60Co)的作用下，诱导步骤A中制得的精制血红蛋白侧链氨基酸残基断裂，与临近的氨基酸残基链结合，形成自体生物蛋白水凝胶。

本发明的进一步技术方案是：所述受伤玻璃体视网膜包括角巩膜外伤以及玻璃体手术切口。

本发明的进一步技术方案是：所述玻璃体视网膜疾病为视网膜脱落。

本发明的进一步技术方案是：所述玻璃体视网膜疾病为伤口在眼球后

部位置深，暴露和缝合都极为困难。

本发明的进一步技术方案是：所述玻璃体视网膜疾病为难治性黄斑裂孔。

本发明的进一步技术方案是：所述玻璃体视网膜疾病为高度近视性黄斑病变。

本发明的进一步技术方案是：自体蛋白水凝胶作为玻璃体替代物的应用。

本发明的进一步技术方案是：自体生物蛋白水凝胶在裸露的视网膜色素上皮细胞的应用。

本发明的有益效果是：本发明使用自体生物蛋白作为水凝胶制剂，制备快速简单，生物相容性、无毒、无抗原性方面都有着无可比拟的优势，除机械作用外还可能提供自体蛋白中的内源性营养因子或成为外源性营养因子、生长因子的载药缓释载体，在复杂的玻璃体视网膜手术中是一种很有前途的新型材料。

附图说明

图1是玻璃体视网膜手术示意图；

图2是自体生物蛋白水凝胶无缝线闭合玻璃体手术切口示意图；

图3是巩膜外加压手术示意图；

图4是眼球后部伤口的注射封堵手术示意图；

图5是难治性黄斑裂孔手术示意图；

图6是高度近视性黄斑病变手术示意图；

图7是自体蛋白水凝胶作为玻璃体替代物应用的示意图；

图8是自体生物蛋白水凝胶在裸露的视网膜色素上皮细胞的应用示意图。

是本发明提供的脉络膜上腔加压示意图。

附图标记：1、自体生物蛋白水凝胶粘合手术切口；31、聚血红蛋白水凝胶填塞；32、眼球后部开放伤口；41、聚血红蛋白水凝胶粘附视网膜关闭黄斑裂孔；51、内路；52、外路；53、聚血红蛋白水凝胶黄斑垫压；54、全氟萘烷填充压平；61、聚血红蛋白水凝胶玻璃体腔填充；71、视网膜缺损；72、聚血红蛋白水凝胶覆盖。

具体实施方式

实施例一：一种自体生物蛋白水凝胶的制备方法，该方法包括以下步骤：A、血红蛋白的提取：从静脉血中离心得压积红细胞，再将红细胞溶解、搅拌、离心得粗制血红蛋白溶液，粗制血红蛋白溶液萃取透析得精制血红蛋白溶液；B、自体生物蛋白水凝胶的制备：辐照交联法，诱导步骤A中制好的精制血红蛋白侧链氨基酸残基断裂，与临近的氨基酸残基链结合，形成自体生物蛋白水凝胶；辐照交联方式得到的自体生物蛋白水凝胶为聚血红蛋白水凝胶；所述聚血红蛋白水凝胶为自体生物蛋白水凝胶中的一种。

所述步骤A为：将加入了抗凝剂静脉血离心去除血浆、白细胞、血小板，低速离心后得到压积红细胞，用低渗溶液溶解压积红细胞，得溶血溶液，通入惰性气体，在溶血溶液中加入pH值为7.0～7.5的维生素C溶液，充分搅拌1小时，转速为4000r/min-6000r/min下离心10～30分钟后得到粗制血红蛋白溶液，粗制血红蛋白溶液震荡摇匀后低温条件下进行萃取，取下层血红蛋白溶液进行透析，将血红蛋白溶液装入透析袋中，进行透析并得到精制血红蛋白溶液。

所述步骤B中的辐照交联法的步骤为：在γ射线(60Co)的作用下，诱导步骤A中制得的精制血红蛋白侧链氨基酸残基断裂，与临近的氨基酸残基链结合，形成自体生物蛋白水凝胶，即聚血红蛋白水凝胶；。

固化后进行反复洗脱，洗脱的目的是从聚合物中去除未反应的单体的残留单体、残留交联剂和残留引发剂等。

色谱测定：

色谱条件载气(N₂)流速：15mL/min；流速：60mL/min；流速：400mL/min；汽化室温度：200℃；检测器温度：200℃；柱温：120℃(15min)180℃(20min)；升温速率：30℃/min。

样品：精密称取水凝胶1.0031g于10ml容量瓶中，加三氯甲烷定容至刻度，对照：精密称取对照品0.9956g于10ml容量瓶中，加三氯甲烷于刻度。

分别精密量取1μl，直接进样按照中国药典2005年版二部附录ⅧP第二法，照重复性项下方法分别测定样品对照品溶液的峰面积；按外标法以峰面积计算。测得样品的峰面积为11 387，单体残留为0.0001％，对照品的峰面积为143440，单体残留为0.002％。

生物降解性：

将木瓜蛋白酶按1g/L的比例溶于pH＝7.4的100毫升磷酸缓冲液中，称取10克的水凝胶，置于聚四氟乙烯板上，60℃烘箱干燥至恒重，放入酶-缓冲溶液，在(37±0.5)℃培养箱中降解，每周更换新鲜溶液。4周后，取出样品，用去离子水清洗3次并浸泡过夜，置聚四氟乙烯板上，60℃烘箱干燥至恒重，记录降解前样重W0和降解后样重Wt，重量保持率为Wt/W0。

结论：36℃条件下，加入木瓜蛋白酶后，6天可降解。

吸水性检测：

将制得的水凝胶置于盛有去离子水的称量瓶中，充分溶胀，用滤纸吸干表面水分，称量得Wn值。放入烘箱60℃干燥至恒重，称量得W0值。

吸水率(％)＝100×(Wn－W0)/W0。

经计算：水凝胶吸水率只有自身重量的0.3至13.3倍。

生物相容性测试：参照GB/T16886。

方法：

1、迟发型超敏反应：

在豚鼠脊柱两侧皮内由头到尾分别注射A液、B液水凝胶浸提液或生理盐水或2-巯基苯并噻唑)、C液(A液与B液等体积混合稳定性乳化剂)，并进行局部诱导及激发。

2、急性全身性毒性实验：

由小鼠尾静脉分别注射生理盐水与水凝胶浸提液。

3、体外细胞毒性实验：

分别以水凝胶浸提液、细胞培养液及含苯酚的细胞培养液培养MRC-5细胞。

4、皮内反应：

在兔脊柱皮内分别注射水凝胶生理盐水浸提液、生理盐水及芝麻油。

结论：迟发型超敏反应分级为0-1级；体外细胞毒性均为0级或1级；皮内反应为极轻微；急性全身毒性实验结果为正常无症状。

实施例二：如图2所示，一种自体生物蛋白水凝胶在治疗受伤玻璃体视网膜中的应用，所述受伤玻璃体视网膜包括角巩膜外伤以及玻璃体手术切口。

利用自体生物蛋白水凝胶伤口贴膜无缝线闭合玻璃体手术切口，减少缝线线结反应及瘢痕，改善术后视力；并且对于部分外伤后无眼内组织嵌顿的中小型伤口可以避免缝合手术，或辅助缝合手术使切口更加水密，减小瘢痕和散光；儿童白内障手术后切口可以无需缝合和全麻下的二次拆线。

在这一实施方案中，自体生物蛋白水凝胶伤口贴膜可以为预成型单面/双面粘型，大小可以自由裁剪，单面贴膜粘面朝向巩膜/角膜伤口，双面贴膜可同时粘合巩膜和结膜伤口。

实施例三：如图3所示，一种自体生物蛋白水凝胶在治疗玻璃体视网膜疾病中的应用，所述玻璃体视网膜疾病为视网膜脱落，视网膜脱落的治疗通过巩膜外加压手术。

本发明使用自体生物蛋白水凝胶进行脉络膜上腔的注射，通过调整自体生物蛋白水凝胶的化学组成来实现脉络膜上腔加压材料存留时间的个性化控制，在该实施方案中，来源于患者自身外周静脉血的血红蛋白自体生物蛋白水凝胶材料通过钝针头经巩膜下注入裂孔附近的脉络膜上腔，使脉络膜向内凹陷形成一个圆顶形加压嵴顶压裂孔形成裂孔封闭和视网膜复位。

实施例四：如图4所示，一种自体生物蛋白水凝胶在治疗玻璃体视网膜疾病中的应用，所述玻璃体视网膜疾病为伤口在眼球后部位置深，暴露和缝合都极为困难。

本发明使用自体生物蛋白水凝胶进行眼球后部伤口的注射封堵，在该实施方案中，自体生物蛋白水凝胶通过钝针头循眼球弧度经巩膜外注入后部裂伤口周围并自由弥散，在一定时间的静置后自组装成形并可吸水膨胀形成一个创口贴样膜，维持破裂眼球的外形和眼内压，防止眼球内容物进一步脱出、嵌顿，为二期手术修复眼内结构创造条件。

实施例五：如图5所示，一种自体生物蛋白水凝胶在治疗玻璃体视网膜疾病中的应用，所述玻璃体视网膜疾病为难治性黄斑裂孔。

本发明利用自体生物蛋白水凝胶不同理化特性的组合，在吸水膨胀过程中可以产生向心性的均匀轻柔的牵拉力，从而缩小、关闭难治性黄斑孔，避免上述手术方式的缺点，同时以最接近生理的方式修复黄斑区神经上皮的缺损。在该实施方案中，来源于患者自身外周静脉血的血红蛋白自体生物蛋白水凝胶材料经过特殊的组装处理，在玻璃体手术气液交换后通过钝针头滴入后极部，自组装成形后覆盖黄斑孔，并通过自身理化特性产生切线方向的向心性收缩力，缩小、关闭黄斑裂孔。在一些病例中该自体生物蛋白水凝胶膜可以装载缓释神经营养因子，进一步改善黄斑裂孔的功能预后。

实施例六：如图6所示，一种自体生物蛋白水凝胶在治疗玻璃体视网膜疾病中的应用，所述玻璃体视网膜疾病为高度近视性黄斑病变。

利用自体生物蛋白水凝胶装载缓释神经营养因子BDNF等，对高度近视牵拉性黄斑病变行经黄斑孔内路或光纤引导下的外路黄斑区后巩膜葡萄肿垫压，并在水凝胶自组装成型的时间窗内利用全氟萘烷将注入的后垫压凝胶塑形为符合眼球生理弧度的形状。这样黄斑下垫压的自体生物蛋白水凝胶凝胶以最符合生理状态的弧度支撑视网膜，缓解牵引，其装载的神经营养因子可进一步改善黄斑区功能预后。

实施例七：如图7所示，一种自体蛋白水凝胶作为玻璃体替代物的应用。

水凝胶较目前的所有眼内填充物更接近玻璃体的理化形状，既往有学者试用水凝胶进行眼内填充，但因眼内反应大未能进入临床应用。自体蛋白水凝胶可以很好的解决生物相容性的问题，因此自体蛋白水凝胶可作为玻璃体替代物应用在玻璃体视网膜手术中。

实施例八：如图8所示，一种自体生物蛋白水凝胶在裸露的视网膜色素上皮细胞的应用。自体生物蛋白水凝胶在玻璃体手术中对裸露的视网膜色素上皮细胞形成物理阻隔，自体生物蛋白水凝胶膜上还可装载抑制增殖的因子。

利用自体生物蛋白水凝胶经玻璃体手术切口滴入裸露的视网膜色素上皮细胞表面并自组装成膜，对裸露的视网膜色素上皮细胞形成物理阻隔，从而避免视网膜色素上皮细胞的移行和增殖，减少增殖性玻璃体视网膜病变的发生。自体生物蛋白水凝胶膜上还可装载的抑制增殖的因子，进一步改善视网膜大面积缺损的玻璃体视网膜手术预后。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种自体生物蛋白水凝胶的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

A、血红蛋白的提取：从静脉血中离心得压积红细胞，再将压积红细胞溶解、搅拌、离心得粗制血红蛋白溶液，粗制血红蛋白溶液萃取透析得精制血红蛋白溶液；

B、自体生物蛋白水凝胶的制备：辐照交联法，诱导步骤A中制好的精制血红蛋白侧链氨基酸残基断裂，与临近的氨基酸残基链结合，形成自体生物蛋白水凝胶。

2.根据权利要求1中所述的一种自体生物蛋白水凝胶的制备方法，其特征在于，所述步骤A为：将加入了抗凝剂静脉血离心去除血浆、白细胞、血小板，离心后得到压积红细胞，用低渗溶液溶解压积红细胞，得溶血溶液，通入惰性气体，在溶血溶液中加入pH值为7.0～7.5的维生素C溶液，充分搅拌1小时，转速为4000r/min-6000r/min下离心10～30分钟后得到粗制血红蛋白溶液，粗制血红蛋白溶液震荡摇匀后进行萃取，取下层血红蛋白溶液进行透析，将血红蛋白溶液装入透析袋中，进行透析并得到精制血红蛋白溶液。

3.根据权利要求1所述的一种自体生物蛋白水凝胶的制备方法，其特征在于，所述步骤B中的辐照交联法的步骤为：在γ射线(60Co)的作用下，诱导步骤A中制得的精制血红蛋白侧链氨基酸残基断裂，与临近的氨基酸残基链结合，形成自体生物蛋白水凝胶。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的一种自体生物蛋白水凝胶在治疗受伤玻璃体视网膜中的应用，其特征在于，所述受伤玻璃体视网膜包括角巩膜外伤以及玻璃体手术切口。

5.根据权利要求1-3中任意一项所述的一种自体生物蛋白水凝胶在治疗玻璃体视网膜疾病中的应用，其特征在于，所述玻璃体视网膜疾病为视网膜脱落。

6.根据权利要求1-3中任意一项所述的一种自体生物蛋白水凝胶在治疗玻璃体视网膜疾病中的应用，其特征在于，所述玻璃体视网膜疾病为伤口在眼球后部位置深，暴露和缝合都极为困难。

7.根据权利要求1-3中任意一项所述的一种自体生物蛋白水凝胶在治疗玻璃体视网膜疾病中的应用，其特征在于，所述玻璃体视网膜疾病为难治性黄斑裂孔。

8.根据权利要求1-3中任意一项所述的一种自体生物蛋白水凝胶在治疗玻璃体视网膜疾病中的应用，其特征在于，所述玻璃体视网膜疾病为高度近视性黄斑病变。

9.根据权利要求1-3中任意一项所述的一种自体蛋白水凝胶作为玻璃体替代物的应用。

10.根据权利要求1-3中任意一项所述的一种自体生物蛋白水凝胶在裸露的视网膜色素上皮细胞的应用。