CN108484926A - 一种稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法及应用 - Google Patents

一种稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种稀土铈‑量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法，包括步骤：(1)将三磷酸腺苷加入到三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液中，混匀之后，再加入羧基量子点和Ce(NO3)3溶液，在室温下缓慢搅动混匀，形成白色浑浊液；(2)将步骤(1)所得白色浑浊液以一定转速离心分离一定时间后，得到白色沉淀，用超纯水清洗三次，将白色沉淀重悬于1mL超纯水中，制成稀土铈‑量子点配位聚合物双发射荧光探针。制备得到的双发射荧光探针可用于过氧化氢和葡萄糖的灵敏检测。

Description

一种稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法 及应用
技术领域
本发明涉及荧光传感技术领域，具体涉及一种稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法及应用。
背景技术
过氧化氢(H2O2)作为一种重要的化学品和许多酶反应的副产物，一直在医学、药学、食品安全、环境分析及工业生产等领域发挥重要作用，因此，快速精确的定量检测H2O2具有重要意义。迄今为止，科学家们发展了许多检测H2O2的方法，比如电化学方法、荧光法、比色法以及色谱法等。其中，荧光方法由于样品体积小、操作方便、设计多样化等优点受到越来越多的关注。Chen等建立了基于以双链DNA为模板的铜簇和DNA嵌入剂SYBR Green I的H2O2荧光检测方法(Smart Composite Reagent Composed of Double-Stranded DNA-Templated Copper Nanoparticle and SYBR Green I for Hydrogen Peroxide RelatedBiosensing,Anal.Chem.2017,89,3988-3995)，Zhang等利用与金属卟啉组装的石墨烯量子点建立了H2O2荧光检测方法(Graphene Quantum Dots Assembled withMetalloporphyrins for“Turn on”Sensing of Hydrogen Peroxide and Glucose,Chem.Eur.J.2015,21,9343-9348)。其中，镧系配位聚合物(Ln-CPNs)由于具有如高量子产率、长荧光寿命、大的斯托克斯位移和线状发射光谱等的优异的光学性质，被广泛应用于生物分子检测。然而，构建Ln-CPNs的配体大部分是有机配体，其水溶性和生物相容性较差。作为重要的生物分子，核苷酸具有优良的生物相容性、易合成、成本低、结构可变且金属结合位点丰富。CN105949473中公开了一种稀土配位聚合物荧光探针的制备方法，利用三磷酸腺苷(ATP)分子作为桥联配体，与稀土Ce3+在Tris-HCl中进行自组装，生成ATP-Ce-Tris荧光探针，用于检测H2O2和葡萄糖。
然而，以上H2O2荧光检测方法往往采用单发射荧光信号，其精确性易受到外部环境、检测底物和光漂白等因素的影响。为了避免单一纳米荧光探针所带来的诸如灵敏度不够、检测限相对较高等的不足之处，多功能、复合型的比率型荧光探针受到越来越广泛的关注。Zhang等将发射不同波长的CdTe量子点组合在一起构建对TNT、Cu2+等有响应的比率荧光探针(Instant Visual Detection of Trinitrotoluene Particulates on VariousSurfaces by Ratiometric Fluorescence of Dual-Emission Quantum Dots Hybrid,J.Am.Chem.Soc.133,22,8424-8427；Efficient Ratiometric Fluorescence Probe Basedon Dual-Emission Quantum Dots Hybrid for On-Site Determination of CopperIons,Anal.Chem.85,13,6461-6468)。比率荧光法是以两个不同波长处荧光强度的比值作为响应信号以确定目标物含量的一种新型检测技术。其中，在荧光探针中引入某一个和探针一起受光激发、且发射不同波长光的参比，得到第二个独立的信号做参比(内标)，这样就可以设计内标型比率荧光探针。这种内标型比率荧光探针中的参比的荧光信号恒定，对被分析物的识别不敏感。响应基团和参比荧光基团可通过化学共价键、分子组装和共聚包埋等形式进入同一个体系中，因此设计机理简单灵活。比率荧光探针具有两个或多个荧光信号峰，通过相互参照可消除诸如探针浓度、温度等外界因素变化带来的干扰，从而克服单发射荧光探针检测准确性不高的问题。此外，比率荧光法因不受光源强度和仪器灵敏度的影响，比率荧光探针的灵敏度和选择性大大提高、检测限大大降低。
因此，发展绿色的双发射荧光Ln-CPNs配位聚合物合成方法，建立比率荧光法检测过氧化氢具有重要意义。
发明内容
本发明针对上述问题，提供了一种稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法，并且制备得到的双发射荧光探针可以应用于H2O2和葡萄糖的检测，与目前的单发射稀土铈荧光探针对H2O2和葡萄糖的检测相比更加灵敏，且检测限更加低。
本发明通过以下技术方案实现上述目的：
本发明提供了一种稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法，包括以下步骤：
(1)将三磷酸腺苷加入到三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液(Tris-HCl)中，混匀之后，再加入羧基量子点和Ce(NO3)3溶液，在室温下缓慢搅动混匀，形成白色浑浊液；
(2)将步骤(1)所得白色浑浊液以一定转速离心一定时间后，得到白色沉淀并用超纯水清洗三次，将清洗后的白色沉淀重悬于1mL超纯水中，制成稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针。
进一步优选的，步骤(1)中所述的三磷酸腺苷的浓度为30μL 10mM，所述三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液的浓度为300μL 50mM，pH为7.4，所述羧基量子点浓度为500μL40nM，所述Ce(NO3)3溶液浓度为200μL 4mM。
进一步优选的，步骤(2)中所述白色浑浊液离心时的转速需不低于16500rpm，时间不少于10min。
本发明还提供了一种上述制备方法制得的稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针应用于检测H2O2检测，包括以下步骤：
(1)取上述方法制得的稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针溶液20μL，将其与10μL 50mM pH 7.4的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液以及一系列不同浓度的过氧化氢溶液混合，并用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，之后震荡混匀溶液后于室温静置30min，测量其激发波长为310nm时的荧光光谱。
(2)随着过氧化氢浓度的增加，荧光探针中三价铈的荧光逐渐减弱，而量子点的荧光保持不变，据此确立溶液中三价铈的荧光强度与量子点的荧光强度之间的比值与过氧化氢浓度的对数的线性关系，得到溶液中过氧化氢的浓度，用于对过氧化氢的灵敏检测。
本发明制备的双发射荧光探针检测在1nM～30μM浓度范围的过氧化氢溶液时，检测限为0.1nM。
本发明还提供了一种上述制备方法制得的稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针应用于检测葡萄糖的检测，包括以下步骤：
(1)取上述方法制得的稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针溶液20μL，将其与10μL 50mM pH 7.4的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液、10μL 50mg/L的葡萄糖氧化酶和一系列不同浓度的葡萄糖溶液混合，并用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，之后震荡混匀溶液后于37℃水浴中孵育30min，测量其激发波长为310nm时的荧光光谱。
(2)随着葡萄糖浓度的增加，荧光探针中三价铈的荧光逐渐减弱，而量子点的荧光保持不变，据此确立三价铈的荧光强度与量子点的荧光强度之间的比值与葡萄糖浓度的对数的线性关系，得到溶液中葡萄糖的浓度，用于对葡萄糖的灵敏检测。
本发明制备的双发射荧光探针检测在0～40μM浓度范围内的葡萄糖溶液时，其检测限为4.5nM。
本发明制备的稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针检测过氧化氢及葡萄糖的的原理是：制得的双发射荧光探针与一系列不同浓度的过氧化氢溶液即待测溶液混合后，在310nm的激发波长条件下，其中的双发射荧光探针能够在369nm和525nm分别出现三价铈和量子点的荧光发射峰，而当体系中存在过氧化氢时，稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针中的三价铈被氧化为四价铈，使得三价铈在369nm处的荧光减弱，但量子点在525nm处的荧光不受影响，依然保持不变，利用三价铈与量子点荧光发射峰强度比值的变化，以实现对过氧化氢的检测。此外，基于葡萄糖氧化酶催化氧化葡萄糖产生过氧化氢，还可用于对葡萄糖的定量分析。
本发明中稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法快速、简便、绿色，制得的双发射荧光探针在同一激发波长下具有两个荧光发射峰，通过相互参照可消除诸如探针浓度、温度等外界因素变化带来的干扰，从而提高检测结果的准确度，与目前的单发射荧光探针ATP-Ce-Tris相比，基于稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针建立的比率荧光法对过氧化氢和葡萄糖检测的灵敏度更高，选择性更好，有效地降低了过氧化氢和葡萄糖检测的检测限。
附图说明
图1是Ce-QDs CPNs的SEM图。
图2是QDs、Ce(NO3)3和Ce-QDs CPNs的紫外可见吸收光谱图以及Ce-QDs CPNs的荧光光谱图。
图3是Ce-QDs CPNs和H2O2存在与否时的荧光光谱图。
图4是Ce-QDs CPNs与不同浓度H2O2反应后的荧光光谱图。
图5是I369/I525与lg[H2O2]的关系曲线图。
图6是Ce-QDs CPNs与不同浓度葡萄糖反应后的荧光光谱图。
图7是I364/I525与lg[glucose]的关系曲线图。
图8是Ce-QDs CPNs分别对(A)H2O2及(B)葡萄糖检测的选择性图。
具体实施方式
下面结合附图1-8，对本发明作进一步地说明。
实施例1
稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备
(1)将30μL 10mM的三磷酸腺苷(ATP)加入到300μL 50mM pH 7.4的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)缓冲溶液中，混匀之后，再加入500μL 40nM的羧基量子点(QDs)和200μL 4mM的Ce(NO3)3溶液，室温下缓慢搅动2min，形成白色浑浊液；
(2)将白色浑浊液在16500rpm转速下离心10min，得到白色沉淀，用超纯水清洗三次，将白色沉淀重悬于1mL超纯水中，制成稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针(以下简称Ce-QDs CPNs)。
实施例2
Ce-QDs CPNs的显微扫描
采用扫描电子显微镜(SEM)表征实施例1中制备得到的Ce-QDs CPNs的形貌，结果如图1所示。
从图1可见，本发明方法制备的的Ce-QDs CPNs是由10nm～30nm左右的球状粒子聚集而成。这主要是由于ATP分子中含有多配位能力的磷酸基团，将稀土Ce3+与羧基化量子点(QDs)在Tris-HCl缓冲溶液中通过配位作用生成了稀土配位聚合物。
实施例3
QDs、Ce(NO3)3、Ce-QDs CPNs的紫外光谱以及Ce-QDs CPNs的荧光光谱。
采用紫外可见分光光度计测量2nM QDs溶液、0.08mM Ce(NO3)3·6H2O溶液和0.08mM Ce-QDs CPNs溶液的紫外可见吸收光谱。采用荧光光谱仪测量Ce-QDs CPNs溶液在310nm激发波长下的荧光发射光谱。结果如图2所示。
从图2可得，由紫外可见吸收光谱可见，Ce(NO3)3·6H2O溶液的紫外特征吸收峰为252nm，QDs几乎没有紫外吸收峰，Ce-QDs CPNs在260nm处出现了强且宽的吸收峰。在310nm波长的激发波长下，Ce-QDs CPNs在369nm和525nm处分别出现了Ce(III)和QDs的荧光峰。采用光谱法对Ce3+、ATP和QDs在Tris-HCl缓冲溶液中的自组装行为进行表征。Ce-QDs CPNs在1710(νP-OH)、1480(νN7-C8)、1258(νasPO2)和1106cm-1(νsPO2)出现了ATP的特征吸收峰，与单独的ATP红外吸收峰(1709cm-1、1467cm-1、1249cm-1和1102cm-1)相比，峰位置稍微偏移，表明ATP在与Ce3+、QDs和Tris的自组装过程中与中心稀土离子发生了络合。此外，与Tris的红外光谱相比，Ce-QDs CPNs的红外光谱中3421cm-1(ν-OH)处的吸收峰变宽，表明Tris中的羟基在自组装过程中也起了作用。综合表明，通过Ce3+、ATP、QDs和Tris之间的配位作用，成功制备了具有双波长荧光发射特性的Ce-QDs CPNs稀土配位聚合物荧光探针。
实施例4
Ce-QDs CPNs对过氧化氢传感机理探讨：
将实施例1中制备得到的Ce-QDs CPNs 20μL和10μL 50mM pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液混合，用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，在310nm的激发波长下测量其荧光光谱。将实施例1中制备得到的Ce-QDs CPNs 20μL，和10μL 50mM pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液以及10μM的H2O2混合，用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，将溶液震荡混匀后静置30min，在310nm的激发波长下测量其荧光光谱。测量结果如图3所示。
由图3可见，在310nm的激发波长下，Ce-QDs CPNs分别在369nm和525nm处出现了Ce(III)和QDs的双荧光发射峰。当向Ce-QDs CPNs溶液中加入10μM的H2O2时，Ce(III)在369nm处的荧光强度减弱，而QDs在525nm处的荧光保持不变。这是由于有荧光的Ce(III)被H2O2氧化为无荧光的Ce(IV)，使Ce-QDs CPNs的荧光减弱。此外，由于加入H2O2前后QDs的荧光强度始终保持不变，表明QDs参与配位过程而形成稳定的配位聚合物。此外，作为参比的QDs的引入，使得Ce(III)荧光可与QDs荧光相互参照进而消除诸如探针浓度、温度等外界因素变化带来的干扰，从而提高检测结果的准确度。
实施例5
Ce-QDs CPNs用于检测H2O2和葡萄糖
(1)检测H2O2：取实施例1中制备得到的Ce-QDs CPNs溶液20μL，和10μL 50mM pH7.4的Tris-HCl缓冲溶液以及一系列不同浓度(0、1nM、3nM、5nM、7nM、10nM、30nM、0.1μM、0.3μM、1μM、3μM、10μM、30μM)的H2O2溶液混合，用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，将溶液震荡混匀后静置30min，测量其激发波长为310nm时的荧光光谱。测量结果如图4所示。
从图4可得，随着H2O2浓度的增加，Ce-QDs CPNs荧光探针中的Ce(III)的荧光逐渐减弱，而QDs的荧光保持不变，Ce(III)的荧光强度与QDs的荧光强度的比值(I369/I525)随H2O2浓度的增加而逐渐减小。
取图4中得来的的各H2O2浓度对应的I369/I525与H2O2浓度的对数(lg[H2O2])作散点分布图，得出其线性关系，如图5所示。
从图5可得，Ce-QDs CPNs探针检测H2O2时，在1nM～30μM的浓度范围内的H2O2，其浓度对数(lg[H2O2])与I369/I525呈线性关系，且Ce-QDs CPNs探针检测H2O2的检测限为0.1nM，比CN105949473中的单发射荧光探针ATP-Ce-Tris对H2O2的检测限更低，可实现对H2O2的灵敏检测。
(2)检测葡萄糖：取实施例1中制备得到的Ce-QDs CPNs溶液20μL，和10μL 50mM pH7.4的Tris-HCl缓冲溶液、10μL 50mg/L的葡萄糖氧化酶及一系列不同浓度(0、0.1μM、0.5μM、1μM、2μM、5μM、10μM、20μM、40μM)的葡萄糖溶液混合，用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，将溶液震荡混匀后于37℃水浴中孵育30min，测量其激发波长为310nm时的荧光光谱。测量结果如图6所示。
从图6可得，随着葡萄糖浓度的增加，Ce-QDs CPNs荧光探针中的Ce(III)的荧光逐渐减弱，而QDs的荧光保持不变，Ce(III)的荧光强度与QDs的荧光强度的比值(I364/I525)随葡萄糖浓度的增加而逐渐减小。
将图6中不同浓度的葡萄糖(浓度范围在0-40μM)对应的I364/I525与该葡萄糖浓度的对数(lg[glucose])作散点分布图，如图7所示。
从图7可得，Ce-QDs CPNs探针检测葡萄糖时，在0～40μM浓度范围内的葡萄糖，其呈线性关系，其浓度对数(lg[glucose])与I364/I525呈线性关系，且Ce-QDs CPNs探针检测葡萄糖时的检测限为4.5nM，比CN105949473中的单发射荧光探针ATP-Ce-Tris对葡萄糖的检测限降低了1个数量级，可实现对葡萄糖的灵敏检测。
实施例6
Ce-QDs CPNs对H2O2和葡萄糖检测的选择性
(1)Ce-QDs CPNs对H2O2检测的选择性：
选择性是评估传感器性能的一个重要指标，选择K+、Na+、Mg2+、Ca2+、NO3 -、Cl-、CO3 2-、SO4 2-、PO4 3-作为干扰离子，考察Ce-QDs CPNs纳米探针对H2O2检测的选择性。取实施例1中制备得到的Ce-QDs CPNs溶液20μL和10μL 50mM pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液混合，分别加入10μM的H2O2和1mM不同的干扰离子(K+、Na+、Mg2+、Ca2+、NO3 -、Cl-、CO3 2-、SO4 2-、PO4 3-)，用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，将溶液震荡混匀后静置30min，测量其激发波长为310nm时的荧光光谱。结果如图8A所示。
由图8A可见，10μM的H2O2可大大减弱Ce-QDs CPNs中Ce(III)的荧光，而1mM其他离子如K+、Na+、Mg2+、Ca2+、NO3 -、Cl-、CO3 2-、SO4 2-、PO4 3-等则不影响Ce-QDs CPNs的荧光。
(2)Ce-QDs CPNs对葡萄糖检测的选择性：
选择其他糖类物质如果糖(Fru)、蔗糖(Suc)、甘露糖(Man)、乳糖(Lac)和阳离子K+、Na+、Mg2+、Ca2+作为干扰研究Ce-QDs CPNs纳米探针对葡萄糖(Glu)检测的选择性。取实施例1中制备得到的Ce-QDs CPNs溶液20μL和10μL 50mM pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液以及10μL 50mg/L葡萄糖氧化酶溶液混合，分别加入10μM葡萄糖和1mM不同的干扰物质(Fru、Suc、Man、Lac、K+、Na+、Mg2+、Ca2+)，用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，将溶液震荡混匀后于37℃水浴中孵育30min，测量其激发波长为310nm时的荧光光谱。结果如图8B所示。
由图8B可见，10μM葡萄糖可大大减弱Ce-QDs CPNs中Ce(III)的荧光，而1mM的果糖(Fru)、蔗糖(Suc)、甘露糖(Man)、乳糖(Lac)等其他糖类物质和K+、Na+、Mg2+、Ca2+等阳离子均不影响Ce-QDs CPNs的荧光。
综上所述，本发明制备得到的Ce-QDs CPNs对H2O2和葡萄糖检测均具有更好的选择性。
实施例7
采用标准加入法检测牛百叶中H2O2以及人血清中葡萄糖的含量。结果表明，牛百叶中H2O2的回收率为98.8％～101.8％，相对标准偏差(RSD)小于2.1％；人血清中葡萄糖的回收率为98％～102％，RSD小于1.6％，优于单发射荧光探针ATP-Ce-Tris对血清中葡萄糖检测的RSD(3.1％)。因此，本发明方法对实际样品中H2O2和葡萄糖检测具有更好的可靠性和准确性。
实施例8
双发射探针的参比的前期选择
双发射探针的选择比率荧光法是以两个不同波长处荧光强度的比值作为响应信号以确定目标物含量的一种新型检测技术。其中，在荧光探针中引入某一个和探针一起受光激发、且发射不同波长光的参比，得到第二个独立的信号做参比(内标)，这样就可以设计内标型比率荧光探针。这种内标型比率荧光探针中的参比荧光信号恒定，对被分析物的识别不敏感。响应基团和参比的荧光基团可通过化学共价键、分子组装和共聚包埋等形式进入同一个体系中，因此设计机理简单灵活。
据此，在前期参比选择的过程中，我们对参比进行了筛选，主要限制条件如下：1)参比需与三价铈有相近的激发波长(约310nm)，2)参比的荧光发射峰与三价铈在约369nm处的发射峰不重叠，3)参比能够通过化学键合、分子自组装等作用引入到ATP-Ce-Tris中并保持其自身荧光，4)参比对H2O2不敏感。
参比需要在约310nM激发波长下发射出与三价铈发射峰(约369nM)不重叠的荧光峰，查阅各商家提供的荧光染料相关信息后，未发现同时具备适合以上条件的激发和发射的荧光染料。量子点具有激发光谱宽而连续、发射光谱窄而对称且可调控、颜色粒径亦可调、光化学稳定性好、荧光寿命长等优越的荧光特性，是一种理想的荧光探针，在医学成像、生物染色、光学检测等领域的应用越来越广泛。按合成材料的不同，可将量子点分为半导体量子点、碳量子点和生物量子点等。我们合成了具有良好荧光特性的石墨烯量子点，但是，在激发波长为310nm时，石墨烯量子点在450nm处的荧光与三价铈在369nm处的荧光有部分重叠，因此石墨烯量子点不宜作为本发明的参比。我们还合成了荧光碳点，但是，在激发波长为310nm时,碳点的荧光与三价铈的荧光也发生部分重叠，因此碳点也不宜作为本发明的参比。我们研究发现，525nm的CdSe/ZnS羧基量子点，在310nm激发波长下在525nm处发射荧光，与三价铈在369nm处的荧光几乎没有重叠，而且，羧基基团的存在还可使羧基量子点通过配位作用进入ATP-Ce-Tris中，制成具有量子点和三价铈双发射性质的荧光探针，从而实现参比的稳定引入。从Ce-QDs CPNs对H2O2的检测结果可见，参比对H2O2不敏感，参比的荧光信号保持稳定不变。因此，525nm羧基量子点的合理筛选，为本发明成功制备比率荧光探针Ce-QDs CPNs以及对目标物灵敏检测奠定了基础。

Claims (5)

1.一种稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将三磷酸腺苷加入到三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液中，混匀之后，再加入羧基量子点和Ce(NO3)3溶液，在室温下缓慢搅动混匀，形成白色浑浊液；
(2)将步骤(1)所得白色浑浊液以一定转速离心分离一定时间后，得到白色沉淀，用超纯水清洗三次，将白色沉淀重悬于1mL超纯水中，制成稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针。
2.如权利要求1所述的一种稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的三磷酸腺苷的浓度为30μL 10mM，所述三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液的浓度为300μL 50mM，pH为7.4，所述羧基量子点浓度为500μL 40nM，所述Ce(NO3)3溶液浓度为200μL 4mM。
3.如权利要求1所述的一种稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的离心分离的转速需不低于16500rpm，时间不少于10min。
4.权利要求1中制备得到的双发射荧光探针应用于H2O2的检测，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取上述方法制得的稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针溶液20μL，将其与10μL 50mM pH 7.4的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液以及一系列不同浓度的过氧化氢溶液混合，并用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，之后震荡混匀溶液后于室温静置30min，测量其激发波长为310nm时的荧光光谱。
(2)随着过氧化氢浓度的增加，荧光探针中三价铈的荧光逐渐减弱，而量子点的荧光保持不变，据此确立溶液中三价铈的荧光强度与量子点的荧光强度之间的比值与过氧化氢浓度的对数的线性关系，得到溶液中过氧化氢的浓度，用于对过氧化氢的灵敏检测。
5.权利要求1中制备得到的双发射荧光探针应用于葡萄糖的检测，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取上述方法制得的稀土铈-量子点配位聚合物双发射荧光探针溶液20μL，将其与10μL 50mM pH 7.4的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液、10μL 50mg/L的葡萄糖氧化酶和一系列不同浓度的葡萄糖溶液混合，并用超纯水将混合溶液的总体积稀释为200μL，之后震荡混匀溶液后于37℃水浴中孵育30min，测量其激发波长为310nm时的荧光光谱。
(2)随着葡萄糖浓度的增加，荧光探针中三价铈的荧光逐渐减弱，而量子点的荧光保持不变，据此确立三价铈的荧光强度与量子点的荧光强度之间的比值与葡萄糖浓度的对数的线性关系，得到溶液中葡萄糖的浓度，用于对葡萄糖的灵敏检测。
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