CN108467862A - 一种微生物脱镉吸附剂的制备方法及其在粉料食品脱镉中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种微生物脱镉吸附剂的制备方法及其在粉料食品脱镉中的应用,所述微生物脱镉吸附剂的制备方法包括以下步骤:将植物乳杆菌菌液离心后加水稀释,形成植物乳杆菌悬浮液;将聚乙烯醇和海藻酸钠溶解于蒸馏水中,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌后形成混合溶液;将混合溶液加入CaCl2溶液中,使之发生交联反应而形成微生物小球,将微生物小球从CaCl2溶液中分离出来,得到微生物脱镉吸附剂。本发明提供的微生物脱镉吸附剂,在应用于镉超标粉料食品的脱镉处理时,利用微生物本身的产酸能力和化学结构以及硅藻土良好的吸附性能吸附原料中的重金属镉,不仅能显著降低镉超标粉料食品中的镉含量,而且易于分离。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域,特别涉及一种微生物脱镉吸附剂的制备方法及其在粉料食品脱镉中的应用。
背景技术
对于重金属超标食品而言,例如重金属镉超标的大米、玉米、大豆等食品,需要对食品进行脱镉处理,以削减其中的镉含量至达到食用标准,下面以镉超标大米为例进行说明。
目前用于镉超标大米中镉削减的方法主要有精加工、深加工、水浸法、酸洗法和微生物吸附法,其中,精加工对镉的削减率过低,深加工在实施时的时间及能源消耗过大、成本高,水浸法存在对镉的削减率不高、耗时较长的缺点,酸洗法则会对大米的营养成分和感官品质有较大的影响;而微生物吸附法是利用微生物在发酵过程中产酸,降低大米的pH值,使大米中的重金属镉游离出来,并吸附水中的重金属离子,从而达到去除重金属离子的目的,其相对于上述四种方法,具有高效、无二次污染的特点。但是,微生物吸附法在实际应用过程中,存在与原料分离困难的问题,尤其是在应用于粉料食品(例如大米粉、薏米粉等)的脱镉处理时,微生物吸附剂与原料难以彻底分离。
发明内容
本发明的主要目的是提出一种微生物脱镉吸附剂的制备方法及其在粉料食品脱镉中的应用,旨在解决微生物脱镉吸附剂与粉质原料分离困难的问题。
为实现上述目的,本发明提出一种微生物脱镉吸附剂的制备方法,包括以下步骤:
将植物乳杆菌菌液离心后加水稀释,形成植物乳杆菌悬浮液;
将聚乙烯醇和海藻酸钠溶解于蒸馏水中,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌后形成混合溶液;
将混合溶液加入CaCl2溶液中,使之发生交联反应而形成微生物小球,将微生物小球从CaCl2溶液中分离出来,得到微生物脱镉吸附剂。
优选地,将植物乳杆菌菌液离心后加水稀释,形成植物乳杆菌悬浮液的步骤,具体包括:
将培养至对数期的植物乳杆菌菌液于4000~6000r/min转速下离心8~12min,移除上层清液后,取菌落沉淀用无菌水稀释,得到植物乳杆菌悬浮液。
优选地,将聚乙烯醇和海藻酸钠溶解于蒸馏水中,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌后形成混合溶液的步骤中:
所述混合溶液中,聚乙烯醇、海藻酸钠、植物乳杆菌悬浮液和硅藻土的浓度对应为1.5~2.5%、2.5~3.5%、9~11%和0.8~1.2%。
优选地,将聚乙烯醇和海藻酸钠溶解于蒸馏水中,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌后形成混合溶液的步骤,具体包括:
将聚乙烯醇和海藻酸钠通过加热溶解于蒸馏水中,于120~122℃灭菌27~33min后冷却至36.5~37.5℃,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌形成混合溶液。
优选地,将混合溶液加入CaCl2溶液中,使之发生交联反应而形成微生物小球,将微生物小球从CaCl2溶液中分离出来,得到微生物脱镉吸附剂的步骤,具体包括:
吸取混合溶液后逐滴滴入温度为3.5~4.5℃的CaCl2溶液中,于3.5~4.5℃保温交联22~26h,然后分离出CaCl2溶液中形成的微生物小球,用无菌水清洗后得到微生物脱镉吸附剂,其中,所述CaCl2溶液的质量浓度为3.5~4.5%。
本发明还提出如上所述的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用,包括以下步骤:
将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,经震荡处理后去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆;
对米浆进行离心处理后收集沉淀物,沉淀物经过清洗、烘干后得到脱镉粉料;
其中,所述微生物脱镉吸附剂为如上所述的微生物脱镉吸附剂。
优选地,将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,经震荡处理后去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆的步骤,具体包括:
将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,于36.5~37.5℃、110~130r/min条件下恒温震荡42~54h,然后通过过滤去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆。
优选地,将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,经震荡处理后去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆的步骤中:
所述微生物脱镉吸附剂的质量为所述镉超标原粉料的质量的0.5~0.7倍,所述蒸馏水的质量为所述镉超标原粉料质量的4~6倍。
优选地,将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,经震荡处理后去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆的步骤中:
所述镉超标原粉料包括镉超标大米粉、镉超标薏米粉、镉超标玉米粉、镉超标大豆粉中的至少一种。
优选地,对米浆进行离心处理后收集沉淀物,沉淀物经过清洗、烘干后得到脱镉粉料的步骤,具体包括:
将米浆以4000r/min转速离心8~12min后,收集沉淀物,用蒸馏水清洗后,再于38~42℃温度下烘干,得到脱镉粉料。
本发明提供的技术方案中,通过将硅藻土和微生物共固定化在海藻酸钠载体上,制备成呈小球状的微生物脱镉吸附剂,在应用于镉超标粉料食品的脱镉处理时,利用微生物在发酵过程中产酸,降低原料的pH值,使其中的重金属镉游离出来,并利用微生物本身的化学结构以及硅藻土良好的吸附性能来吸附原料中的重金属镉,不仅能显著降低镉超标粉料食品中的镉含量,而且易于分离。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅为本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明提供的微生物脱镉吸附剂的制备方法的一实施例的流程示意图;
图2为图1的步骤S30中形成微生物小球的试验结果图;
图3为本发明提供的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用的一实施例的流程示意图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明提出一种微生物脱镉吸附剂的制备方法,图1为本发明提供的微生物脱镉吸附剂的制备方法的一实施例。请参阅图1,所述微生物脱镉吸附剂的制备方法包括以下步骤:
步骤S10、将植物乳杆菌菌液离心后加水稀释,形成植物乳杆菌悬浮液;
在本实施例中,步骤S10具体包括:将培养至对数期的植物乳杆菌菌液于4000~6000r/min转速下离心8~12min,移除上层清液后,取菌落沉淀用无菌水稀释至OD620(620nm处的吸光度值)为1.5,得到植物乳杆菌悬浮液。其中,所述植物乳杆菌菌液可通过使用本领域常规的培养基培养植物乳杆菌至对数期获得,而培养至对数期的植物乳杆菌菌液,其中的植物乳杆菌的活性最强、产酸能力最好且活菌的数量也最多,在用于吸附重金属镉时的吸附性能较强。
步骤S20、将聚乙烯醇和海藻酸钠溶解于蒸馏水中,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌后形成混合溶液;
其中,所述混合溶液中,聚乙烯醇、海藻酸钠、植物乳杆菌悬浮液和硅藻土的浓度对应为1.5~2.5%、2.5~3.5%、9~11%和0.8~1.2%。
在本实施例中,步骤S20具体包括:将聚乙烯醇和海藻酸钠通过加热溶解于一定量的蒸馏水中,于120~122℃灭菌27~33min后冷却至36.5~37.5℃,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌形成混合溶液。
步骤S30、将混合溶液加入CaCl2溶液中,使之发生交联反应而形成微生物小球,将微生物小球从CaCl2溶液中分离出来,得到微生物脱镉吸附剂。
在本实施例中,步骤S30具体包括:吸取混合溶液后逐滴滴入温度为3.5~4.5℃的CaCl2溶液中,于3.5~4.5℃保温交联22~26h,然后分离出CaCl2溶液中形成的微生物小球,用无菌水清洗后得到微生物脱镉吸附剂,其中,所述CaCl2溶液的质量浓度为3.5~4.5%。具体实施时,可以使用注射器等吸取所述混合溶液,然后逐滴滴入所述CaCl2溶液中,然后在3.5~4.5℃恒温条件下交联22~26h,使所述植物乳杆菌、硅藻土、聚乙烯醇和海藻酸钠在CaCl2溶液包围的环境下,交联形成微生物小球(其中海藻酸钠和硅藻土作为载体,聚乙烯醇作为交联强化剂,植物乳杆菌包埋于载体中形成微生物小球),待交联反应完成后,从CaCl2溶液中分离出微生物小球,然后用无菌水清洗三遍,即得到所述微生物脱镉吸附剂。
需要说明的是,所述混合溶液逐滴滴入所述CaCl2溶液中进行交联反应时,每一滴对应形成一颗微生物小球,如图2所示,因此,交联反应形成的微生物小球的尺寸大小可以通过控制滴入的液滴的大小来调节,在本实施例具体实施时,采用体积为1mL的注射器来吸取所述混合溶液,并逐滴滴入所述CaCl2溶液中,以精确控制所形成的微生物小球的尺寸大小。当然,在其他实施例中,也可以采用不同体积规格的注射器来吸取所述混合溶液,以对应获得不同尺寸大小的微生物小球。
本发明提供的技术方案中,通过将硅藻土和微生物共固定化在海藻酸钠载体上,制备成呈小球状的微生物脱镉吸附剂,在应用于镉超标粉料食品的脱镉处理时,利用微生物在发酵过程中产酸,降低原料的pH值,使其中的重金属镉游离出来,并利用其本身的化学结构以及硅藻土良好的吸附性能来吸附原料中的重金属镉,不仅能显著降低镉超标粉料食品中的镉含量,而且易于与原粉料之间进行分离。
本发明进一步提出如上述的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用,图3为本发明提供的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用的一实施例。请参阅图3,所述微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用包括以下步骤:
步骤S40、将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,经震荡处理后去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆;
其中,步骤S40中的所述微生物脱镉吸附剂为通过上述步骤S10至步骤S30制备的微生物脱镉吸附剂。本发明提供的微生物脱镉吸附剂适用于对镉超标的粉料食品进行脱镉处理,具有易于与镉超标粉料食品分离的特点。在本方案中,所述镉超标原粉料为由镉超标农作物(例如大米、玉米、薏米、大豆等)粉碎而成的粉料,具体地,在本实施例中,所述镉超标原粉料包括镉超标大米粉、镉超标薏米粉、镉超标玉米粉、镉超标大豆粉中的至少一种。
在本实施例中,步骤S40具体包括:将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,于36.5~37.5℃、110~130r/min条件下恒温震荡42~54h,然后通过过滤去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆。以镉超标大米粉作为原粉料为例,先选取镉超标大米粉作为原料备用,然后向其中加入上述实施例制备的微生物脱镉吸附剂,再加入蒸馏水,混合后恒温震荡42~54h,使重金属镉从镉超标大米粉中脱除至形成的溶液中,然后通过微生物脱镉吸附剂的吸附作用对溶液中的重金属镉进行吸附,再通过过滤等常规分离方式将微生物脱镉吸附剂从溶液中去除掉,即得到脱除重金属镉的米浆。需要说明的是,所述恒温震荡可以通过气浴震荡、水浴震荡等多种方式实现,只需要在震荡过程中保持36.5~37.5℃恒温即可。
其中,所述微生物脱镉吸附剂的质量为所述镉超标原粉料的质量的0.5~0.7倍,所述蒸馏水的质量为所述镉超标原粉料质量的4~6倍。
步骤S50、对米浆进行离心处理后收集沉淀物,沉淀物经过清洗、烘干后得到脱镉粉料。
在本实施例中,步骤S50具体包括:将脱除掉重金属镉的米浆以4000r/min转速离心8~12min后,收集沉淀物,将沉淀物用蒸馏水清洗1至2遍后,再于38~42℃温度下烘干,得到脱镉粉料。
本发明提供的粉料脱镉的方法,具有操作简单、成本低的优点,且所述微生物脱镉吸附剂对粉料中的重金属镉进行吸附后,易于与粉料分离。
以下结合具体实施例和附图对本发明提供的微生物吸附剂的制备方法作进一步详细说明,应当理解,以下实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例1
(1)将培养至对数期的植物乳杆菌菌液于4000r/min离心12min,移除上清液后,取菌落沉淀加入无菌水稀释至OD620为1.5,得到植物乳杆菌悬浮液;
(2)取2g聚乙烯醇、3g海藻酸钠通过加热溶解于84g蒸馏水中,于121℃灭菌30min,冷却至37.5℃,再加入10g步骤(1)制备的植物乳杆菌悬浮液和1g硅藻土,搅拌均匀后形成混合溶液;
(3)用1mL注射器吸取所述混合溶液,并逐滴滴入4℃、浓度为4%的CaCl2溶液中,于4℃交联24h而形成微生物小球,通过过滤从CaCl2溶液中分离出微生物小球,用无菌水清洗三遍,制得微生物脱镉吸附剂。
实施例2
(1)将培养至对数期的植物乳杆菌菌液于5000r/min离心10min,移除上清液后,取菌落沉淀加入无菌水稀释至OD620为1.5,得到植物乳杆菌悬浮液;
(2)取1.5g聚乙烯醇、2.5g海藻酸钠通过加热溶解于83.8g蒸馏水中,于120℃灭菌33min,冷却至36.5℃,再加入11g步骤(1)制备的植物乳杆菌悬浮液和1.2g硅藻土,搅拌均匀后形成混合溶液;
(3)用1mL注射器吸取所述混合溶液,并逐滴滴入3.5℃、浓度为3.5%的CaCl2溶液中,于3.5℃交联26h而形成微生物小球,通过过滤从CaCl2溶液中分离出微生物小球,用无菌水清洗三遍,制得微生物脱镉吸附剂。
实施例3
(1)将培养至对数期的植物乳杆菌菌液于6000r/min离心8min,移除上清液后,取菌落沉淀加入无菌水稀释至OD620为1.5,得到植物乳杆菌悬浮液;
(2)取2.5g聚乙烯醇、3.5g海藻酸钠通过加热溶解于84.2g蒸馏水中,于122℃灭菌27min,冷却至37.5℃,再加入9g步骤(1)制备的植物乳杆菌悬浮液和0.8g硅藻土,搅拌均匀后形成混合溶液;
(3)用1mL注射器吸取所述混合溶液,并逐滴滴入4.5℃、浓度为4.5%的CaCl2溶液中,于4.5℃交联22h而形成微生物小球,通过过滤从CaCl2溶液中分离出微生物小球,用无菌水清洗三遍,制得微生物脱镉吸附剂。
实施例4
(1)将培养至对数期的植物乳杆菌菌液于5000r/min离心10min,移除上清液后,取菌落沉淀加入无菌水稀释至OD620为1.5,得到植物乳杆菌悬浮液;
(2)取2g聚乙烯醇、3g海藻酸钠通过加热溶解于84g蒸馏水中,于121℃灭菌30min,冷却至37℃,再加入10g步骤(1)制备的植物乳杆菌悬浮液和1g硅藻土,搅拌均匀后形成混合溶液;
(3)用1mL注射器吸取所述混合溶液,并逐滴滴入4℃、浓度为4%的CaCl2溶液中,于4℃交联24h而形成微生物小球,通过过滤从CaCl2溶液中分离出微生物小球,用无菌水清洗三遍,制得微生物脱镉吸附剂。
以上述实施例4制备的微生物脱镉吸附剂、镉超标大米粉为例,以下结合具体应用实施例和附图对本发明提供的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用作进一步详细说明,应当理解,以下实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
应用实施例1
以100g镉超标大米粉为原料,加入上述实施例4制备的微生物脱镉吸附剂,再加入蒸馏水,混合后于37℃、120r/min进行恒温震荡,然后通过过滤去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆;将米浆于4000r/min离心10min,收集沉淀物,将沉淀物用蒸馏水清洗2遍,再于40℃温度下烘干,得到脱镉大米粉。其中,微生物脱镉吸附剂相对于镉超标大米粉的用量(百分比)、镉超标大米粉质量与蒸馏水质量的料液比、恒温震荡的时间如表1所示,以及,大米粉中重金属镉的削减率如表1所示。
表1不同应用实施例中的实施参数以及大米粉中镉的削减率
应用实施例2
以100g镉超标大米粉为原料,加入实施例4制备的微生物脱镉吸附剂,再加入蒸馏水,混合后于36.5℃、130r/min进行恒温震荡,然后通过过滤去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆;将米浆于3000r/min离心12min,收集沉淀物,将沉淀物用蒸馏水清洗2遍,再于42℃温度下烘干,得到脱镉大米粉。其中,微生物脱镉吸附剂相对于镉超标大米粉的用量、镉超标大米粉质量与蒸馏水质量的料液比、恒温震荡的时间如表1所示,以及,大米粉中重金属镉的削减率如表1所示。
应用实施例3
以100g镉超标大米粉为原料,加入实施例4制备的微生物脱镉吸附剂,再加入蒸馏水,混合后于37.5℃、110r/min进行恒温震荡,然后通过过滤去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆;将米浆于5000r/min离心8min,收集沉淀物,将沉淀物用蒸馏水清洗2遍,再于38℃温度下烘干,得到脱镉大米粉。其中,微生物脱镉吸附剂相对于镉超标大米粉的用量、镉超标大米粉质量与蒸馏水质量的料液比、恒温震荡的时间如表1所示,以及,大米粉中重金属镉的削减率如表1所示。
应用实施例4~10
步骤同应用实施例1,不同之处在于,其中微生物脱镉吸附剂相对于镉超标大米粉的用量、镉超标大米粉质量与蒸馏水质量的料液比、恒温震荡的时间如表1所示,以及,大米粉中重金属镉的削减率如表1所示。
由表1中大米粉中重金属镉的削减率结果可知,使用本发明实施例提供的微生物脱镉吸附剂对镉超标大米粉进行脱镉处理,其中大米粉中重金属镉的削减率均高于80%,且最高可达88.5%。
综上所述,本发明提供的技术方案,通过将硅藻土和微生物共固定化在海藻酸钠载体上,用聚乙烯醇强化交联,制备成呈小球状的微生物脱镉吸附剂,在应用于镉超标粉料食品的脱镉处理时,利用微生物在发酵过程中产酸,降低原料的pH值,使其中的重金属镉游离出来,并利用其本身的化学结构以及硅藻土良好的吸附性能来吸附原料中的重金属镉,不仅能显著降低镉超标粉料食品中的镉含量,操作简单、成本低,而且易于与原粉料之间进行分离。
以上仅为本发明的优选实施例,并非因此限制本发明的专利范围,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之类,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (10)
1.一种微生物脱镉吸附剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将植物乳杆菌菌液离心后加水稀释,形成植物乳杆菌悬浮液;
将聚乙烯醇和海藻酸钠溶解于蒸馏水中,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌后形成混合溶液;
将混合溶液加入CaCl2溶液中,使之发生交联反应而形成微生物小球,将微生物小球从CaCl2溶液中分离出来,得到微生物脱镉吸附剂。
2.如权利要求1所述的微生物脱镉吸附剂的制备方法,其特征在于,将植物乳杆菌菌液离心后加水稀释,形成植物乳杆菌悬浮液的步骤,具体包括:
将培养至对数期的植物乳杆菌菌液于4000~6000r/min转速下离心8~12min,移除上清液后,取菌落沉淀用无菌水稀释,得到植物乳杆菌悬浮液。
3.如权利要求1所述的微生物脱镉吸附剂的制备方法,其特征在于,将聚乙烯醇和海藻酸钠溶解于蒸馏水中,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌后形成混合溶液的步骤中:
所述混合溶液中,聚乙烯醇、海藻酸钠、植物乳杆菌悬浮液和硅藻土的浓度对应为1.5~2.5%、2.5~3.5%、9~11%和0.8~1.2%。
4.如权利要求3所述的微生物脱镉吸附剂的制备方法,其特征在于,将聚乙烯醇和海藻酸钠溶解于蒸馏水中,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌后形成混合溶液的步骤,具体包括:
将聚乙烯醇和海藻酸钠通过加热溶解于蒸馏水中,于120~122℃灭菌27~33min后冷却至36.5~37.5℃,然后加入植物乳杆菌悬浮液和硅藻土,搅拌形成混合溶液。
5.如权利要求1所述的微生物脱镉吸附剂的制备方法,其特征在于,将混合溶液加入CaCl2溶液中,使之发生交联反应而形成微生物小球,将微生物小球从CaCl2溶液中分离出来,得到微生物脱镉吸附剂的步骤,具体包括:
吸取混合溶液后逐滴滴入温度为3.5~4.5℃的CaCl2溶液中,于3.5~4.5℃保温交联22~26h,然后分离出CaCl2溶液中形成的微生物小球,用无菌水清洗后得到微生物脱镉吸附剂,其中,所述CaCl2溶液的质量浓度为3.5~4.5%。
6.如权利要求1至5任意一项所述的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,经震荡处理后去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆;
对米浆进行离心处理后收集沉淀物,沉淀物经过清洗、烘干后得到脱镉粉料。
7.如权利要求6所述的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用,其特征在于,将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,经震荡处理后去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆的步骤,具体包括:
将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,于36.5~37.5℃、110~130r/min条件下恒温震荡42~54h,然后通过过滤去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆。
8.如权利要求6所述的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用,其特征在于,将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,经震荡处理后去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆的步骤中:
所述微生物脱镉吸附剂的质量为所述镉超标原粉料质量的0.5~0.7倍,所述蒸馏水的质量为所述镉超标原粉料质量的4~6倍。
9.如权利要求6所述的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用,其特征在于,将镉超标原粉料、微生物脱镉吸附剂和蒸馏水混合,经震荡处理后去除其中的微生物脱镉吸附剂,得到米浆的步骤中:
所述镉超标原粉料包括镉超标大米粉、镉超标薏米粉、镉超标玉米粉、镉超标大豆粉中的至少一种。
10.如权利要求6所述的微生物脱镉吸附剂在粉料食品脱镉中的应用,其特征在于,对米浆进行离心处理后收集沉淀物,沉淀物经过清洗、烘干后得到脱镉粉料的步骤,具体包括:
将米浆以4000r/min转速离心8~12min后,收集沉淀物,用蒸馏水清洗后,再于38~42℃温度下烘干,得到脱镉粉料。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109382075A (zh) * | 2018-11-27 | 2019-02-26 | 武汉轻工大学 | 一种复合微生物菌吸附剂及其制备方法以及污水处理方法 |
CN111099751A (zh) * | 2019-04-03 | 2020-05-05 | 深圳市清研环境科技有限公司 | 耐重金属的菌剂、使用方法及菌剂制备方法 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101037682A (zh) * | 2006-03-16 | 2007-09-19 | 中国科学院生态环境研究中心 | 镉的固定化细菌生物吸附剂及其制备方法 |
CN104489489A (zh) * | 2015-01-12 | 2015-04-08 | 湖南农业大学 | 一种利用乳杆菌和酵母菌混合发酵消减大米中重金属镉的方法 |
CN104585563A (zh) * | 2015-01-12 | 2015-05-06 | 湖南农业大学 | 一种利用复配乳酸菌发酵脱除大米中重金属镉的方法 |
CN104957448A (zh) * | 2015-07-29 | 2015-10-07 | 湖南农业大学 | 一种酸溶联用发酵脱除大米中镉的方法 |
CN104982807A (zh) * | 2015-06-15 | 2015-10-21 | 金健米业股份有限公司 | 一种利用发酵工艺消减大米中重金属镉的方法 |
CN106492762A (zh) * | 2016-11-04 | 2017-03-15 | 河南工程学院 | 一种用于处理含镉离子废水的生物吸附剂 |
CN107410869A (zh) * | 2017-08-21 | 2017-12-01 | 湖南农业大学 | 利用罗伊氏乳杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌混合发酵消减大米粉中重金属镉的方法 |
-
2018
- 2018-03-30 CN CN201810282318.1A patent/CN108467862A/zh active Pending
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101037682A (zh) * | 2006-03-16 | 2007-09-19 | 中国科学院生态环境研究中心 | 镉的固定化细菌生物吸附剂及其制备方法 |
CN104489489A (zh) * | 2015-01-12 | 2015-04-08 | 湖南农业大学 | 一种利用乳杆菌和酵母菌混合发酵消减大米中重金属镉的方法 |
CN104585563A (zh) * | 2015-01-12 | 2015-05-06 | 湖南农业大学 | 一种利用复配乳酸菌发酵脱除大米中重金属镉的方法 |
CN104982807A (zh) * | 2015-06-15 | 2015-10-21 | 金健米业股份有限公司 | 一种利用发酵工艺消减大米中重金属镉的方法 |
CN104957448A (zh) * | 2015-07-29 | 2015-10-07 | 湖南农业大学 | 一种酸溶联用发酵脱除大米中镉的方法 |
CN106492762A (zh) * | 2016-11-04 | 2017-03-15 | 河南工程学院 | 一种用于处理含镉离子废水的生物吸附剂 |
CN107410869A (zh) * | 2017-08-21 | 2017-12-01 | 湖南农业大学 | 利用罗伊氏乳杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌混合发酵消减大米粉中重金属镉的方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
傅亚平等: "乳酸菌发酵技术脱除大米粉中镉的工艺优化", 《农业工程学报》 * |
刘也嘉等: "大米乳酸菌发酵降镉工艺优化", 《农业工程学报》 * |
李斌等主编: "《食品酶学与酶工程》", 30 September 2017, 中国农业大学出版社 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109382075A (zh) * | 2018-11-27 | 2019-02-26 | 武汉轻工大学 | 一种复合微生物菌吸附剂及其制备方法以及污水处理方法 |
CN109382075B (zh) * | 2018-11-27 | 2021-08-27 | 武汉轻工大学 | 一种复合微生物菌吸附剂及其制备方法以及污水处理方法 |
CN111099751A (zh) * | 2019-04-03 | 2020-05-05 | 深圳市清研环境科技有限公司 | 耐重金属的菌剂、使用方法及菌剂制备方法 |
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