CN108434093B - 一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法 - Google Patents

一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法 Download PDF

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Abstract

一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法，它涉及一种可注射水凝胶的制备方法。本发明的目的是要解决现有伏立康唑制剂代谢快，需反复给药，增加患者机体痛苦和经济负担和现有伏立康唑缓释系统生物相容性差，长效控释效果欠佳的问题。方法：一、制备白色絮状多醛基葡聚糖；二、制备水溶性线型聚环糊精；三、首先制备环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液，然后将羧甲基壳聚糖溶解到上述PBS溶液中，得到伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶。本发明制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶在玻璃体腔内半衰期为30天～60天。本发明可获得一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶。

Description

一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法
技术领域
本发明涉及一种可注射水凝胶的制备方法。
背景技术
真菌性眼内炎是眼部真菌感染，近年来发病比例呈上升趋势，发病隐匿，早期确诊困难，病程长，易反复，常致视力丧失，眼球萎缩。据报道24％的外源性眼内炎和16％的内源性眼内炎以眼内容剜除或眼摘术告终，病情严重者可因败血症而死亡，因此提高真菌性眼内炎的治愈率和预后至关重要。
伏立康唑(Voriconazole，UK.109，496)，化学名：(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁醇，是第二代三唑类广谱抗真菌药物，由美国瑞星公司研制开发，2002年6月通过美国FDA批准上市，2005年8月在中国首次上市。与传统抗真菌药物相比，伏立康唑疗效确切。在美国和欧洲，均已推荐用于静脉或口服伏立康唑治疗(非中性粒细胞减少)成年人的侵袭性曲霉菌病和念珠菌病、由白色念珠菌引起的播散性感染、食管念珠菌病、以及其它抗真菌药物不能治愈或耐药的丝状真菌及镰刀菌引起的感染。近年来国内外眼科界学者对伏立康唑的研究与应用逐渐增多。对治疗真菌性眼内炎，已有不少玻璃体腔内注射的病例报道。
由于药物在玻璃体腔内半衰期短(2.5h)，一般注射8h后玻腔中药物就达不到有效浓度，玻腔中药物代谢快，需反复给药，多数疗效较为确切，但患者经济负担亦随之加重，并且由于反复玻璃体腔注射，有潜在眼内炎、玻璃体出血及视网膜脱离的风险，因此，有必要开发新剂型来弥补以上不足，同时发挥伏立康唑确切抗真菌作用的优势。
而药物控释的特点正是通过对药物医疗剂量的有效控制，能够降低药物的毒副作用，减少抗药性，提高药物的稳定性和有效利用率。还可以实现药物的靶向输送，减少服药次数，减轻患者的痛苦，并能节省人力、物力和财力等。
目前研究最多的药物控释负载用可生物降解性高分子材料是聚乳酸和壳聚糖等药物缓释体系，但是聚乳酸在降解过程中产生的酸性物质对机体易引起炎性反应，所以大部分情况下应用聚乳酸羟基乙酸及其他共聚物为药物缓释载体，而壳聚糖可以有效规避此问题，但其动物源及其水溶性问题也应加以考虑。
发明内容
本发明的目的是要解决现有伏立康唑制剂代谢快，需反复给药，增加患者机体痛苦和经济负担和现有伏立康唑缓释系统生物相容性差，长效控释效果欠佳的问题。而提供一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法。
一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法，具体是按以下步骤完成的：
一、制备白色絮状多醛基葡聚糖：
①、在温度为50℃～60℃下将葡聚糖溶解到蒸馏水中，得到葡聚糖溶液；将葡聚糖溶液冷却至20℃～25℃，再将高碘酸钠溶解到葡聚糖溶液中，再在温度为20℃～25℃下反应2h，再加入乙二醇，再在温度为20℃～25℃下反应2h，最后在室温下静置4h，得到橙色溶液；
步骤一①中所述的葡聚糖的质量与蒸馏水的体积比为(3g～6g):100mL；
步骤一①中所述的高碘酸钠的物质的量与蒸馏水的体积比为(18.52mmol～37.04mmol):100mL；
步骤一①中所述的乙二醇与高碘酸钠的摩尔比为(0.8～1.2):1；
②、将步骤一①中得到的橙色溶液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析，得到无色透明溶液；将无色透明溶液在温度为-4℃～0℃下冰冻12h～16h，再放入温度为-54℃～-50℃的冷冻干燥机中冷冻干燥120h～168h，得到白色絮状多醛基葡聚糖；
二、在温度为35℃～40℃下向质量分数为15％～20％的NaOH溶液中加入环糊精，再在温度为35℃～40℃下反应2h，再加入甲苯，再在温度为35℃～40℃下反应24h，再加入环氧氯丙烷，再在温度为35℃～40℃下反应12h，得到反应液；再将反应液的pH值调节至7，再使用丙酮进行萃取，再取上清液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析4天～5天，再在温度为-54℃～-50℃下冷冻干燥120h～168h，得到水溶性线型聚环糊精；
步骤二中所述的环糊精的质量与质量分数为15％～20％的NaOH溶液的体积比为(5.3g～7.5g):30mL；
步骤二中所述的甲苯与质量分数为15％～20％的NaOH溶液的体积比为2:(30～26.5)；
步骤二中所述的环氧氯丙烷与质量分数为15％～20％的NaOH溶液的体积比为6:(30～26.5)；
三、①、将伏立康唑和水溶性线型聚环糊精溶解到0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，使用超声波细胞粉碎机进行分散处理，得到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液；
步骤三①中所述的超声波细胞粉碎机的频率为20kHZ，分散处理时间为15min～30min；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中伏立康唑的浓度为1mg/mL～10mg/mL；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中水溶性线型聚环糊精的浓度为100mg/mL～1000mg/mL；
②、将羧甲基壳聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液；
步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为(2g～3g):100mL；
③、将步骤一②得到的白色絮状多醛基葡聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液；
步骤三③中所述的白色絮状多醛基葡聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为(2g～3g):100mL；
④、将含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液和含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液在温度为25℃～30℃下混合，得到伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶；
步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为(3～9):7。
本发明的原理及优点：
一、本发明选用可生物降解高分子材料羧甲基壳聚糖(抗菌性强)作为原材料之一。羧甲基壳聚糖是一种水溶性壳聚糖衍生物，有许多特性，如抗菌性强，是一种两性聚电解质，使羧甲基壳聚糖与同样生物相容性良好的白色絮状氧化葡聚糖通过席夫碱反应形成一种聚多糖水凝胶，而席夫碱本身就具有抑菌、杀菌、抗肿瘤、抗病毒的生物活性。但是伏立康唑微溶于水，为了保证其确切的疗效，本发明将伏立康唑通过物理作用装载于水溶性线型聚环糊精的小分子笼内，并同时在其生理溶液中完成白色絮状多醛基葡聚糖与羧甲基壳聚糖的席夫碱反应，形成聚多糖水凝胶的交联结构，负载有伏立康唑的水溶性线型聚环糊精分子链穿插于交联网络内，形成聚多糖水凝胶负载伏立康唑体系，通过多级控释机理控制伏立康唑在玻璃体内的缓释速率，因此有望解决现阶段存在的用于临床治疗真菌性眼内炎的剂型单一问题，开发更高效，长效药物控释，减轻患者痛苦和经济负担的新剂型；多级控释机理包括三层，白色絮状多醛基葡聚糖和羧甲基壳聚糖的交联结构会慢慢降解，那么穿插于其中的大的水溶性线型聚环糊精的长分子会被释放出来，机理是化学生物降解过程。第二层大的水溶性线型聚环糊精分子会扩散到玻璃体内，这是靠浓度梯度驱动，与此同时水溶性线型聚环糊精分子也会发生降解，更有利于药物释放，第三层伏立康唑会从小分子笼里面释放出来，机理也是靠浓度梯度驱动。当然在任何一步过程中小分子伏立康唑都有可能会被释放，但是大的可生物降解材料载体的降解会影响其扩散速率，这即为就是多级控释机理；
二、本发明通过制备水溶性线型聚环糊精，然后将伏立康唑装载于水溶性线型聚环糊精的分子笼中，解决了伏立康唑微溶于水，不能直接装载到交联结构中的问题；
三、本发明所选用的可生物降解高分子材料羧甲基壳聚糖(抗菌性强)和葡聚糖，均属于生物多糖，本身就具有良好的生物相容性和生物可降解性，改善了传统的聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸-乙醇酸、聚乳酸-聚乙二醇和聚羟基乙酸-聚乙二醇作为缓释材料的亲水性和降解性，提高了生物相容性；
四、本发明制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶，是长效伏立康唑缓释系统，可将本发明制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶在进行中央部玻璃体切除手术过程中同期注射入玻璃体基底部，原位凝胶化；相同伏立康唑负载浓度下，注射进玻璃体的体积越大，药物控释并生效时间越长；相同水凝胶体积下，伏立康唑负载浓度越高，药物控释并生效时间越长；相同药物控释生效时间下，伏立康唑的负载浓度越高，需注射入玻璃体的体积越小，对患者的机体损伤越小；
五、本发明提供了一种用于真菌性眼内炎治疗的新剂型(即伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶)，具有用药量极少，给药次数少，而且大大减少玻腔反复注射引起的不良反应，提高患者的顺从性，不但可避免伏立康唑玻腔注射后在眼内的半衰期短、需要反复进行玻璃体腔穿刺注药可能会造成的眼内出血、增生机化、视网膜脱离等并发症，而且具有药物利用度高，局部浓度高，药效持久，减少全身用药量及其并发症的优点，减少真菌性眼内炎患者的痛苦及经济负担；
六、本发明制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶在玻璃体腔内降解时间为30天～60天，注射20天～45天后伏立康唑还能达到有效浓度，可实现玻腔中伏立康唑的长效控释有效给药。。
本发明可获得一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶。
附图说明
图1为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的凝胶化的数码照片图；
图2为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的外观凝胶状态的数码照片图；
图3为实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的外观凝胶状态的数码照片图；
图4为实施例三制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的外观凝胶状态的数码照片图；
图5为红外光谱图，图中1为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的红外光谱曲线，2为实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的红外光谱曲线，3为实施例三制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的红外光谱曲线；
图6为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的SEM图；
图7为实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的SEM图；
图8为实施例三制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的SEM图；
图9为对比实施例制备的水凝胶的降解重量百分比随时间的变化图，图中1为对比实施例一制备的水凝胶的降解重量百分比随时间的变化曲线，2为对比实施例二制备的水凝胶的降解重量百分比随时间的变化曲线，3为对比实施例三制备的水凝胶的降解重量百分比随时间的变化曲线；
图10为实施例制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶中伏立康唑的释放百分比随时间的变化图，图中1为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶中伏立康唑的释放百分比随时间的变化曲线，2为实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶中伏立康唑的释放百分比随时间的变化曲线，3为实施例三制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶中伏立康唑的释放百分比随时间的变化曲线。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式是一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法具体是按以下步骤完成的：
一、制备白色絮状多醛基葡聚糖：
①、在温度为50℃～60℃下将葡聚糖溶解到蒸馏水中，得到葡聚糖溶液；将葡聚糖溶液冷却至20℃～25℃，再将高碘酸钠溶解到葡聚糖溶液中，再在温度为20℃～25℃下反应2h，再加入乙二醇，再在温度为20℃～25℃下反应2h，最后在室温下静置4h，得到橙色溶液；
步骤一①中所述的葡聚糖的质量与蒸馏水的体积比为(3g～6g):100mL；
步骤一①中所述的高碘酸钠的物质的量与蒸馏水的体积比为(18.52mmol～37.04mmol):100mL；
步骤一①中所述的乙二醇与高碘酸钠的摩尔比为(0.8～1.2):1；
②、将步骤一①中得到的橙色溶液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析，得到无色透明溶液；将无色透明溶液在温度为-4℃～0℃下冰冻12h～16h，再放入温度为-54℃～-50℃的冷冻干燥机中冷冻干燥120h～168h，得到白色絮状多醛基葡聚糖；
二、在温度为35℃～40℃下向质量分数为15％～20％的NaOH溶液中加入环糊精，再在温度为35℃～40℃下反应2h，再加入甲苯，再在温度为35℃～40℃下反应24h，再加入环氧氯丙烷，再在温度为35℃～40℃下反应12h，得到反应液；再将反应液的pH值调节至7，再使用丙酮进行萃取，再取上清液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析4天～5天，再在温度为-54℃～-50℃下冷冻干燥120h～168h，得到水溶性线型聚环糊精；
步骤二中所述的环糊精的质量与质量分数为15％～20％的NaOH溶液的体积比为(5.3g～7.5g):30mL；
步骤二中所述的甲苯与质量分数为15％～20％的NaOH溶液的体积比为2:(30～26.5)；
步骤二中所述的环氧氯丙烷与质量分数为15％～20％的NaOH溶液的体积比为6:(30～26.5)；
三、①、将伏立康唑和水溶性线型聚环糊精溶解到0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，使用超声波细胞粉碎机进行分散处理，得到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液；
步骤三①中所述的超声波细胞粉碎机的频率为20kHZ，分散处理时间为15min～30min；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中伏立康唑的浓度为1mg/mL～10mg/mL；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中水溶性线型聚环糊精的浓度为100mg/mL～1000mg/mL；
②、将羧甲基壳聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液；
步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为(2g～3g):100mL；
③、将步骤一②得到的白色絮状多醛基葡聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液；
步骤三③中所述的白色絮状多醛基葡聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为(2g～3g):100mL；
④、将含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液和含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液在温度为25℃～30℃下混合，得到伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶；
步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为(3～9):7。
本实施方式的原理及优点：
一、本实施方式选用可生物降解高分子材料羧甲基壳聚糖(抗菌性强)作为原材料之一。羧甲基壳聚糖是一种水溶性壳聚糖衍生物，有许多特性，如抗菌性强，是一种两性聚电解质，使羧甲基壳聚糖与同样生物相容性良好的白色絮状氧化葡聚糖通过席夫碱反应形成一种聚多糖水凝胶，而席夫碱本身就具有抑菌、杀菌、抗肿瘤、抗病毒的生物活性。但是伏立康唑微溶于水，为了保证其确切的疗效，本实施方式将伏立康唑通过物理作用装载于水溶性线型聚环糊精的小分子笼内，并同时在其生理溶液中完成白色絮状多醛基葡聚糖与羧甲基壳聚糖的席夫碱反应，形成聚多糖水凝胶的交联结构，负载有伏立康唑的水溶性线型聚环糊精分子链穿插于交联网络内，形成聚多糖水凝胶负载伏立康唑体系，通过多级控释机理控制伏立康唑在玻璃体内的缓释速率，因此有望解决现阶段存在的用于临床治疗真菌性眼内炎的剂型单一问题，开发更高效，长效药物控释，减轻患者痛苦和经济负担的新剂型；多级控释机理包括三层，白色絮状多醛基葡聚糖和羧甲基壳聚糖的交联结构会慢慢降解，那么穿插于其中的大的水溶性线型聚环糊精的长分子会被释放出来，机理是化学生物降解过程。第二层大的水溶性线型聚环糊精分子会扩散到玻璃体内，这是靠浓度梯度驱动，与此同时水溶性线型聚环糊精分子也会发生降解，更有利于药物释放，第三层伏立康唑会从小分子笼里面释放出来，机理也是靠浓度梯度驱动。当然在任何一步过程中小分子伏立康唑都有可能会被释放，但是大的可生物降解材料载体的降解会影响其扩散速率，这即为就是多级控释机理；
二、本实施方式通过制备水溶性线型聚环糊精，然后将伏立康唑装载于水溶性线型聚环糊精的分子笼中，解决了伏立康唑微溶于水，不能直接装载到交联结构中的问题；
三、本实施方式所选用的可生物降解高分子材料羧甲基壳聚糖(抗菌性强)和葡聚糖，均属于生物多糖，本身就具有良好的生物相容性和生物可降解性，改善了传统的聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸-乙醇酸、聚乳酸-聚乙二醇和聚羟基乙酸-聚乙二醇作为缓释材料的亲水性和降解性，提高了生物相容性；
四、本实施方式制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶，是长效伏立康唑缓释系统，可将本发明制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶在进行中央部玻璃体切除手术过程中同期注射入玻璃体基底部，原位凝胶化；相同伏立康唑负载浓度下，注射进玻璃体的体积越大，药物控释并生效时间越长；相同水凝胶体积下，伏立康唑负载浓度越高，药物控释并生效时间越长；相同药物控释生效时间下，伏立康唑的负载浓度越高，需注射入玻璃体的体积越小，对患者的机体损伤越小；
五、本实施方式提供了一种用于真菌性眼内炎治疗的新剂型(即伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶)，具有用药量极少，给药次数少，而且大大减少玻腔反复注射引起的不良反应，提高患者的顺从性，不但可避免伏立康唑玻腔注射后在眼内的半衰期短、需要反复进行玻璃体腔穿刺注药可能会造成的眼内出血、增生机化、视网膜脱离等并发症，而且具有药物利用度高，局部浓度高，药效持久，减少全身用药量及其并发症的优点，减少真菌性眼内炎患者的痛苦及经济负担；
六、本实施方式制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶在玻璃体腔内降解时间为30天～60天，注射20天～45天后伏立康唑还能达到有效浓度可实现玻腔中伏立康唑的长效控释有效给药。。
本实施方式可获得一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同点是：步骤一①中所述的葡聚糖的分子量为40000。其它步骤与具体实施方式一相同。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二之一不同点是：步骤一②中所述的透析袋为美国进口透析袋MD44，截留分子量8000～14000。其它步骤与具体实施方式一或二相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同点是：步骤一②中使用去离子水进行透析的次数为10次～12次，每次透析的时间为3h～4h。其它步骤与具体实施方式一至三相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同点是：步骤二中所述的环糊精为β-环糊精或β-环糊精衍生物。其它步骤与具体实施方式一至四相同。
具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一不同点是：所述的β-环糊精衍生物为2-羟丙基-β-环糊精。其它步骤与具体实施方式一至五相同。
具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一至六之一不同点是：步骤二中将反应液的pH值调节至7是使用质量分数为31％～36％的盐酸调节的。其它步骤与具体实施方式一至六相同。
具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一至七之一不同点是：步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的取代度80％，脱乙酰度90％。其它步骤与具体实施方式一至七相同。
具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式一至八之一不同点是：步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为(3～6):7。其它步骤与具体实施方式一至八相同。
具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式一至九之一不同点是：步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为(6～9):7。其它步骤与具体实施方式一至九相同。
采用以下实施例验证本发明的有益效果：
实施例一：一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法具体是按以下步骤完成的：
一、制备白色絮状多醛基葡聚糖：
①、在温度为50℃下将葡聚糖溶解到蒸馏水中，得到葡聚糖溶液；将葡聚糖溶液冷却至25℃，再将高碘酸钠溶解到葡聚糖溶液中，再在温度为25℃下反应2h，再加入乙二醇，再在温度为25℃下反应2h，最后在室温下静置4h，得到橙色溶液；
步骤一①中所述的葡聚糖的分子量为40000；
步骤一①中所述的葡聚糖的质量与蒸馏水的体积比为3g:100mL；
步骤一①中所述的高碘酸钠的物质的量与蒸馏水的体积比为18.52mmol：100mL；
步骤一①中所述的乙二醇与高碘酸钠的摩尔比为1:1；
②、将步骤一①中得到的橙色溶液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析，得到无色透明溶液；将无色透明溶液在温度为-4℃下冷冻12h，再放入温度为-54℃的冷冻干燥机中冷冻干燥168h，得到白色絮状多醛基葡聚糖；
步骤一②中使用去离子水进行透析的次数为12次，每次透析的时间为4h；
二、在温度为35℃下向质量分数为15％的NaOH溶液中加入环糊精，再在温度为35℃下反应2h，再加入甲苯，再在温度为35℃下反应24h，再加入环氧氯丙烷，再在温度为35℃下反应12h，得到反应液；使用质量分数为31％的盐酸将反应液的pH值调节至7，再使用丙酮进行萃取，再取上清液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析5天，再在温度为-54℃下冷冻干燥168h，得到水溶性线型聚环糊精；
步骤二中所述的环糊精为β-环糊精；
步骤二中所述的环糊精的质量与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为5.3g:30mL；
步骤二中所述的甲苯与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为2:30；
步骤二中所述的环氧氯丙烷与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为6:30；
三、①、将伏立康唑和水溶性线型聚环糊精溶解到0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，使用超声波细胞粉碎机进行分散处理，得到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液；
步骤三①中所述的超声波细胞粉碎机的频率为20kHZ，分散处理时间为20min；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中伏立康唑的浓度为1mg/mL；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中水溶性线型聚环糊精的浓度为100mg/mL；
②、将羧甲基壳聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液；
步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
③、将步骤一②得到的白色絮状氧化葡聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液；
步骤三③中所述的白色絮状多醛基葡聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
④、将含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液和含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液在温度为25℃下混合，得到伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶；
步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为3:7。
图1为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的凝胶化的数码照片图；
从图1可知，实施例一成功制备了负载伏立康唑的羧甲基壳聚糖和多醛基葡聚糖的可注射水凝胶。
图2为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的外观凝胶状态的数码照片图；
从图2可知，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为3:7时可成功制备伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶。
图3为实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的外观凝胶状态的数码照片图；
从图3可知，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为6:7时可成功制备伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶。
图4为实施例三制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的外观凝胶状态的数码照片图；
从图4可知，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为9:7时可成功制备伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶。
图5为红外光谱图，图中1为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的红外光谱曲线，2为实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的红外光谱曲线，3为实施例三制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的红外光谱曲线；
从图5可知，当在1650cm-1和850cm-1附近有红外吸收峰，属于-C＝N-的特征吸收峰，说明体系中的多醛基葡聚糖和羧甲基壳聚糖上面的醛基和氨基发生了席夫碱反应，从而形成了交联结构的水凝胶。
图6为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的SEM图；
从图6可知，实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶为多孔结构，孔径在150nm～200nm范围内，由此可见，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为3:7时制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶结构致密，孔径较均一。
图7为实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的SEM图；
从图7可知，实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶为多孔结构，孔径在100nm～150nm范围内，由此可见，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为6:7时制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶结构致密，孔径均一。
图8为实施例三制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的SEM图。
从图8可知，实施例三制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶孔径在150nm～200nm范围内，由此可见，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为9:7时制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶结构致密，孔径较均一。
实施例二：一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法具体是按以下步骤完成的：
一、制备白色絮状多醛基葡聚糖：
①、在温度为50℃下将葡聚糖溶解到蒸馏水中，得到葡聚糖溶液；将葡聚糖溶液冷却至25℃，再将高碘酸钠溶解到葡聚糖溶液中，再在温度为25℃下反应2h，再加入乙二醇，再在温度为25℃下反应2h，最后在室温下静置4h，得到橙色溶液；
步骤一①中所述的葡聚糖的分子量为40000；
步骤一①中所述的葡聚糖的质量与蒸馏水的体积比为3g:100mL；
步骤一①中所述的高碘酸钠的物质的量与蒸馏水的体积比为18.52mmol：100mL；
步骤一①中所述的乙二醇与高碘酸钠的摩尔比为1:1；
②、将步骤一①中得到的橙色溶液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析，得到无色透明溶液；将无色透明溶液在温度为-4℃下冷冻12h，再放入温度为-54℃的冷冻干燥机中冷冻干燥168h，得到白色絮状多醛基葡聚糖；
步骤一②中使用去离子水进行透析的次数为12次，每次透析的时间为4h；
二、在温度为35℃下向质量分数为15％的NaOH溶液中加入环糊精，再在温度为35℃下反应2h，再加入甲苯，再在温度为35℃下反应24h，再加入环氧氯丙烷，再在温度为35℃下反应12h，得到反应液；使用质量分数为31％的盐酸将反应液的pH值调节至7，再使用丙酮进行萃取，再取上清液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析5天，再在温度为-54℃下冷冻干燥168h，得到水溶性线型聚环糊精；
步骤二中所述的环糊精为β-环糊精；
步骤二中所述的环糊精的质量与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为5.3g:30mL；
步骤二中所述的甲苯与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为2:30；
步骤二中所述的环氧氯丙烷与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为6:30；
三、①、将伏立康唑和水溶性线型聚环糊精溶解到0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，使用超声波细胞粉碎机进行分散处理，得到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液；
步骤三①中所述的超声波细胞粉碎机的频率为20kHZ，分散处理时间为20min；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中伏立康唑的浓度为1mg/mL；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中水溶性线型聚环糊精的浓度为100mg/mL；
②、将羧甲基壳聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液；
步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
③、将步骤一②得到的白色絮状氧化葡聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液；
步骤三③中所述的白色絮状多醛基葡聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
④、将含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液和含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液在温度为25℃下混合，得到伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶；
步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为6:7。
实施例三：一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法具体是按以下步骤完成的：
一、制备白色絮状多醛基葡聚糖：
①、在温度为50℃下将葡聚糖溶解到蒸馏水中，得到葡聚糖溶液；将葡聚糖溶液冷却至25℃，再将高碘酸钠溶解到葡聚糖溶液中，再在温度为25℃下反应2h，再加入乙二醇，再在温度为25℃下反应2h，最后在室温下静置4h，得到橙色溶液；
步骤一①中所述的葡聚糖的分子量为40000；
步骤一①中所述的葡聚糖的质量与蒸馏水的体积比为3g:100mL；
步骤一①中所述的高碘酸钠的物质的量与蒸馏水的体积比为18.52mmol：100mL；
步骤一①中所述的乙二醇与高碘酸钠的摩尔比为1:1；
②、将步骤一①中得到的橙色溶液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析，得到无色透明溶液；将无色透明溶液在温度为-4℃下冷冻12h，再放入温度为-54℃的冷冻干燥机中冷冻干燥168h，得到白色絮状多醛基葡聚糖；
步骤一②中使用去离子水进行透析的次数为12次，每次透析的时间为4h；
二、在温度为35℃下向质量分数为15％的NaOH溶液中加入环糊精，再在温度为35℃下反应2h，再加入甲苯，再在温度为35℃下反应24h，再加入环氧氯丙烷，再在温度为35℃下反应12h，得到反应液；使用质量分数为31％的盐酸将反应液的pH值调节至7，再使用丙酮进行萃取，再取上清液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析5天，再在温度为-54℃下冷冻干燥168h，得到水溶性线型聚环糊精；
步骤二中所述的环糊精为β-环糊精；
步骤二中所述的环糊精的质量与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为5.3g:30mL；
步骤二中所述的甲苯与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为2:30；
步骤二中所述的环氧氯丙烷与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为6:30；
三、①、将伏立康唑和水溶性线型聚环糊精溶解到0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，使用超声波细胞粉碎机进行分散处理，得到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液；
步骤三①中所述的超声波细胞粉碎机的频率为20kHZ，分散处理时间为20min；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中伏立康唑的浓度为1mg/mL；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中水溶性线型聚环糊精的浓度为100mg/mL；
②、将羧甲基壳聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液；
步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
③、将步骤一②得到的白色絮状氧化葡聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液；
步骤三③中所述的白色絮状多醛基葡聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
④、将含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液和含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液在温度为25℃下混合，得到伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶；
步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为9:7。
对比实施例一：一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法具体是按以下步骤完成的：
一、制备白色絮状多醛基葡聚糖：
①、在温度为50℃下将葡聚糖溶解到蒸馏水中，得到葡聚糖溶液；将葡聚糖溶液冷却至25℃，再将高碘酸钠溶解到葡聚糖溶液中，再在温度为25℃下反应2h，再加入乙二醇，再在温度为25℃下反应2h，最后在室温下静置4h，得到橙色溶液；
步骤一①中所述的葡聚糖的分子量为40000；
步骤一①中所述的葡聚糖的质量与蒸馏水的体积比为3g:100mL；
步骤一①中所述的高碘酸钠的物质的量与蒸馏水的体积比为18.52mmol：100mL；
步骤一①中所述的乙二醇与高碘酸钠的摩尔比为1:1；
②、将步骤一①中得到的橙色溶液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析，得到无色透明溶液；将无色透明溶液在温度为-4℃下冷冻12h，再放入温度为-54℃的冷冻干燥机中冷冻干燥168h，得到白色絮状多醛基葡聚糖；
步骤一②中使用去离子水进行透析的次数为12次，每次透析的时间为4h；
二、在温度为35℃下向质量分数为15％的NaOH溶液中加入环糊精，再在温度为35℃下反应2h，再加入甲苯，再在温度为35℃下反应24h，再加入环氧氯丙烷，再在温度为35℃下反应12h，得到反应液；使用质量分数为31％的盐酸将反应液的pH值调节至7，再使用丙酮进行萃取，再取上清液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析5天，再在温度为-54℃下冷冻干燥168h，得到水溶性线型聚环糊精；
步骤二中所述的环糊精为β-环糊精；
步骤二中所述的环糊精的质量与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为5.3g:30mL；
步骤二中所述的甲苯与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为2:30；
步骤二中所述的环氧氯丙烷与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为6:30；
三、①、将水溶性线型聚环糊精溶解到0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，使用超声波细胞粉碎机进行分散处理，得到含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液；
步骤三①中所述的超声波细胞粉碎机的频率为20kHZ，分散处理时间为20min；
步骤三①中所述的含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中水溶性线型聚环糊精的浓度为100mg/mL；
②、将羧甲基壳聚糖溶解到含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液；
步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的质量与含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
③、将步骤一②得到的白色絮状氧化葡聚糖溶解到含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液；
步骤三③中所述的白色絮状多醛基葡聚糖的质量与含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
④、将含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液和含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液在温度为25℃下混合，得到水凝胶；
步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为3:7。
对比实施例二：一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法具体是按以下步骤完成的：
一、制备白色絮状多醛基葡聚糖：
①、在温度为50℃下将葡聚糖溶解到蒸馏水中，得到葡聚糖溶液；将葡聚糖溶液冷却至25℃，再将高碘酸钠溶解到葡聚糖溶液中，再在温度为25℃下反应2h，再加入乙二醇，再在温度为25℃下反应2h，最后在室温下静置4h，得到橙色溶液；
步骤一①中所述的葡聚糖的分子量为40000；
步骤一①中所述的葡聚糖的质量与蒸馏水的体积比为3g:100mL；
步骤一①中所述的高碘酸钠的物质的量与蒸馏水的体积比为18.52mmol：100mL；
步骤一①中所述的乙二醇与高碘酸钠的摩尔比为1:1；
②、将步骤一①中得到的橙色溶液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析，得到无色透明溶液；将无色透明溶液在温度为-4℃下冷冻12h，再放入温度为-54℃的冷冻干燥机中冷冻干燥168h，得到白色絮状多醛基葡聚糖；
步骤一②中使用去离子水进行透析的次数为12次，每次透析的时间为4h；
二、在温度为35℃下向质量分数为15％的NaOH溶液中加入环糊精，再在温度为35℃下反应2h，再加入甲苯，再在温度为35℃下反应24h，再加入环氧氯丙烷，再在温度为35℃下反应12h，得到反应液；使用质量分数为31％的盐酸将反应液的pH值调节至7，再使用丙酮进行萃取，再取上清液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析5天，再在温度为-54℃下冷冻干燥168h，得到水溶性线型聚环糊精；
步骤二中所述的环糊精为β-环糊精；
步骤二中所述的环糊精的质量与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为5.3g:30mL；
步骤二中所述的甲苯与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为2:30；
步骤二中所述的环氧氯丙烷与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为6:30；
三、①、将水溶性线型聚环糊精溶解到0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，使用超声波细胞粉碎机进行分散处理，得到含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液；
步骤三①中所述的超声波细胞粉碎机的频率为20kHZ，分散处理时间为20min；
步骤三①中所述的含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中水溶性线型聚环糊精的浓度为100mg/mL；
②、将羧甲基壳聚糖溶解到含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液；
步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的质量与含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
③、将步骤一②得到的白色絮状氧化葡聚糖溶解到含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液；
步骤三③中所述的白色絮状多醛基葡聚糖的质量与含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
④、将含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液和含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液在温度为25℃下混合，得到水凝胶；
步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为6:7。
对比实施例三：一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法具体是按以下步骤完成的：
一、制备白色絮状多醛基葡聚糖：
①、在温度为50℃下将葡聚糖溶解到蒸馏水中，得到葡聚糖溶液；将葡聚糖溶液冷却至25℃，再将高碘酸钠溶解到葡聚糖溶液中，再在温度为25℃下反应2h，再加入乙二醇，再在温度为25℃下反应2h，最后在室温下静置4h，得到橙色溶液；
步骤一①中所述的葡聚糖的分子量为40000；
步骤一①中所述的葡聚糖的质量与蒸馏水的体积比为3g:100mL；
步骤一①中所述的高碘酸钠的物质的量与蒸馏水的体积比为18.52mmol：100mL；
步骤一①中所述的乙二醇与高碘酸钠的摩尔比为1:1；
②、将步骤一①中得到的橙色溶液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析，得到无色透明溶液；将无色透明溶液在温度为-4℃下冷冻12h，再放入温度为-54℃的冷冻干燥机中冷冻干燥168h，得到白色絮状多醛基葡聚糖；
步骤一②中使用去离子水进行透析的次数为12次，每次透析的时间为4h；
二、在温度为35℃下向质量分数为15％的NaOH溶液中加入环糊精，再在温度为35℃下反应2h，再加入甲苯，再在温度为35℃下反应24h，再加入环氧氯丙烷，再在温度为35℃下反应12h，得到反应液；使用质量分数为31％的盐酸将反应液的pH值调节至7，再使用丙酮进行萃取，再取上清液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析5天，再在温度为-54℃下冷冻干燥168h，得到水溶性线型聚环糊精；
步骤二中所述的环糊精为β-环糊精；
步骤二中所述的环糊精的质量与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为5.3g:30mL；
步骤二中所述的甲苯与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为2:30；
步骤二中所述的环氧氯丙烷与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为6:30；
三、①、将水溶性线型聚环糊精溶解到0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，使用超声波细胞粉碎机进行分散处理，得到含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液；
步骤三①中所述的超声波细胞粉碎机的频率为20kHZ，分散处理时间为20min；
步骤三①中所述的含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中水溶性线型聚环糊精的浓度为100mg/mL；
②、将羧甲基壳聚糖溶解到含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液；
步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的质量与含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
③、将步骤一②得到的白色絮状氧化葡聚糖溶解到含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液；
步骤三③中所述的白色絮状多醛基葡聚糖的质量与含有水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
④、将含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液和含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液在温度为25℃下混合，得到水凝胶；
步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为3:7。
水凝胶的降解研究：
将1mL对比实施例一制备的水凝胶浸泡在50mL 0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，以预定的时间间隔取出水凝胶，用滤纸将水凝胶的表面擦干，然后称重，再将称重后的水凝胶浸泡在原0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，按此循环，计算出对比实施例一制备的水凝胶降解的重量百分比，如图9中曲线1所示；
将1mL对比实施例二制备的水凝胶浸泡在50mL 0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，以预定的时间间隔取出水凝胶，用滤纸将水凝胶的表面擦干，然后称重，再将称重后的水凝胶浸泡在原0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，按此循环，计算出对比实施例一制备的水凝胶降解的重量百分比，如图9中曲线2所示；
将1mL对比实施例三制备的水凝胶浸泡在50mL 0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，以预定的时间间隔取出水凝胶，用滤纸将水凝胶的表面擦干，然后称重，再将称重后的水凝胶浸泡在原0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，按此循环，计算出对比实施例一制备的水凝胶降解的重量百分比，如图9中曲线3所示；
图9为对比实施例制备的水凝胶的降解重量百分比随时间的变化图，图中1为对比实施例一制备的水凝胶的降解重量百分比随时间的变化曲线，2为对比实施例二制备的水凝胶的降解重量百分比随时间的变化曲线，3为对比实施例三制备的水凝胶的降解重量百分比随时间的变化曲线；
从图9可知，不同溶液体积配比制备的水凝胶随着时间的延长，其降解速率逐渐放缓，在降解时间达到10天时，对比实施例一制备的水凝胶的降解率为52wt％，对比实施例二制备的水凝胶的降解率为35wt％，对比实施例三制备的水凝胶的降解率为43wt％，所以当含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为6:7时降解速率最慢，当降解时间达到20天时，降解率为70％，所以通过优化醛基和氨基的比例进一提高水凝胶的交联度，从而使得水凝胶的降解时间延长至30天致60天，是完全可行的。结合图10的曲线可知，通过适当提高聚环糊精的浓度，从而提高伏立康唑的装载量，使得药物释放与水凝胶的降解过程相匹配，如果药物装载量足够，那么即使到水凝胶几近降解完全的状态下，所释放出的伏立康唑的药物浓度也高于已报道的大部分致真菌性眼内炎病原体的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration，MIC90)，至少可以做到在降解时间为20天，降解率为70％的情况下，所释放出的伏立康唑的有效药物浓度是可以实现的，所以本发明所制备的装载伏立康唑的可注射水凝胶降解时间可以达到30天～60天，注射20天～45天后伏立康唑还能达到有效浓度，而且可实现良好的玻腔中伏立康唑的长效控释有效给药，从而成为长效控释药物可注射水凝胶新剂型。
伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶中伏立康唑的释放研究：
将1mL实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶浸泡在50mL0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，在37℃下经摇床摇摆，以预定的时间间隔取出4mL含有伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的PBS溶液，再补充4mL 0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液，通过测量取出的4mL含有伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的PBS溶液的荧光光谱，并与空白试验(0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液)作对比，测定PBS溶液中释放的伏立康唑的量，如图10中曲线1所示；
将1mL实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶浸泡在50mL0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，在37℃下经摇床摇摆，以预定的时间间隔取出4mL含有伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的PBS溶液，再补充4mL 0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液，通过测量取出的4mL含有伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的PBS溶液的荧光光谱，并与空白试验(0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液)作对比，测定PBS溶液中释放的伏立康唑的量，如图10中曲线2所示；
将1mL实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶浸泡在50mL0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，在37℃下经摇床摇摆，以预定的时间间隔取出4mL含有伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的PBS溶液，再补充4mL 0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液，通过测量取出的4mL含有伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的PBS溶液的荧光光谱，并与空白试验(0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液)作对比，测定PBS溶液中释放的伏立康唑的量，如图10中曲线3所示；
图10为实施例制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶中伏立康唑的释放百分比随时间的变化图，图中1为实施例一制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶中伏立康唑的释放百分比随时间的变化曲线，2为实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶中伏立康唑的释放百分比随时间的变化曲线，3为实施例三制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶中伏立康唑的释放百分比随时间的变化曲线；
从图10可知，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比不同，药物缓释过程也不同，当缓释时间达到188小时时，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为6:7制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶药物释放最低大约为69wt％，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为9:7制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的药物释放率89wt％，含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液与含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液的体积比为3:7制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的药物释放率97wt％，因此，实施例二制备的伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的药物释放过程最长效。因此，本发明可以通过提高体系中聚环糊精的浓度，增加水凝胶中所负载的伏立康唑的总量，从而使得即使水凝胶的药物释放率较高的情况下，在水凝胶的最后降解完全阶段所释放的伏立康唑的药物浓度也高于已报道的大部分致真菌性眼内炎病原体的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration，MIC90)，从而起到长效抑菌效果。

Claims (1)

1.一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于一种伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶的制备方法具体是按以下步骤完成的：
一、制备白色絮状多醛基葡聚糖：
①、在温度为50℃下将葡聚糖溶解到蒸馏水中，得到葡聚糖溶液；将葡聚糖溶液冷却至25℃，再将高碘酸钠溶解到葡聚糖溶液中，再在温度为25℃下反应2h，再加入乙二醇，再在温度为25℃下反应2h，最后在室温下静置4h，得到橙色溶液；
步骤一①中所述的葡聚糖的分子量为40000；
步骤一①中所述的葡聚糖的质量与蒸馏水的体积比为3g:100mL；
步骤一①中所述的高碘酸钠的物质的量与蒸馏水的体积比为18.52mmol:100mL；
步骤一①中所述的乙二醇与高碘酸钠的摩尔比为1:1；
②、将步骤一①中得到的橙色溶液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析，得到无色透明溶液；将无色透明溶液在温度为-4℃下冷冻12h，再放入温度为-54℃的冷冻干燥机中冷冻干燥168h，得到白色絮状多醛基葡聚糖；
步骤一②中使用去离子水进行透析的次数为12次，每次透析的时间为4h；
二、在温度为35℃下向质量分数为15％的NaOH溶液中加入环糊精，再在温度为35℃下反应2h，再加入甲苯，再在温度为35℃下反应24h，再加入环氧氯丙烷，再在温度为35℃下反应12h，得到反应液；使用质量分数为31％的盐酸将反应液的pH值调节至7，再使用丙酮进行萃取，再取上清液放入透析袋中，再使用去离子水进行透析5天，再在温度为-54℃下冷冻干燥168h，得到水溶性线型聚环糊精；
步骤二中所述的环糊精为β-环糊精；
步骤二中所述的环糊精的质量与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为5.3g:30mL；
步骤二中所述的甲苯与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为2:30；
步骤二中所述的环氧氯丙烷与质量分数为15％的NaOH溶液的体积比为6:30；
三、①、将伏立康唑和水溶性线型聚环糊精溶解到0.01mol/L pH值为7.4的PBS溶液中，使用超声波细胞粉碎机进行分散处理，得到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液；
步骤三①中所述的超声波细胞粉碎机的频率为20kHz，分散处理时间为20min；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中伏立康唑的浓度为1mg/mL；
步骤三①中所述的环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中水溶性线型聚环糊精的浓度为100mg/mL；
②、将羧甲基壳聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液；
步骤三②中所述的羧甲基壳聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
③、将步骤一②得到的白色絮状氧化葡聚糖溶解到环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液中，得到含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液；
步骤三③中所述的白色絮状多醛基葡聚糖的质量与环糊精分子笼中装载伏立康唑的水溶性线型聚环糊精的PBS溶液的体积比为2g:100mL；
④、将含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液和含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液在温度为25℃下混合，得到伏立康唑眼内药物控释的可注射水凝胶；
步骤三④中所述的含有白色絮状多醛基葡聚糖的PBS溶液与含有羧甲基壳聚糖的PBS溶液的体积比为(3～9):7。
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