CN108430996A - 埃博霉素类似物、合成方法、治疗方法及其药物缀合物 - Google Patents

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基里亚科斯·C·尼科拉乌
D·罗德斯
王艳平
S·托托科思普洛斯
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Abstract

在一方面，本公开提供式(I)的埃博霉素类似物，其中变量如本文所定义。另一方面，本公开还提供制备本文公开的化合物的方法。另一方面，本公开还提供本文公开的化合物的药物组合物和使用方法。另外，还提供了具有化合物的细胞靶向部分的药物缀合物。

Description

埃博霉素类似物、合成方法、治疗方法及其药物缀合物
本申请要求2015年10月16日提交的美国临时申请号62/242,702的优先权权益，该临时申请的全部内容以引用的方式并入本文。
背景
1.领域
本公开涉及医学、药理学、化学和肿瘤学的领域。特别地，公开了与埃博霉素的类似物有关的新化合物、组合物、治疗方法及合成方法。
2.相关领域
埃博霉素A和B(1，图1)的发现刺激了在化学、生物学和医学方面的紧锣密鼓的研究活动，最终完成了这些天然存在的分子及其类似物的大量全合成以及若干候选药物的开发(Altmann等人，2004；等人，1996；Nicolaou等人，1997a；Nicolaou等人，1997b；Meng等人，1997；Schinzer等人，1998；Sinha等人，1998、Mulzer等人，1998；May和Grieco，1999；White等人，1999；Sawada等人，2000；Bode和Carreira，2001；Martin和Thomas，2001；Taylor和Chen，2001；Valluri等人，2001；Ermolenko和Potier，2002；Keck等人，2008；Wang等人，2012)。诸如(2，伊沙匹隆，图1)的化合物已经获得FDA的批准，但毒性问题限制了化合物的有用性。调节化合物的活性的一种方式是使用化合物作为与细胞靶向部分缀合的有效负载，如抗体-药物缀合物(ADC)(3)。通过将细胞毒性化合物靶向到特定位置，这些缀合物减少施用单独的有效负载时会经历到的消极副作用。遗憾的是，目前有效的埃博霉素类似物缺乏可与这些复合物缀合的侧链。因此，需要引入合适的侧链，其允许与细胞靶向剂缀合而不会负面地有损生物活性，如细胞毒性和药代动力学。
概述
本公开提供下式的化合物：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，所述化合物被进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，所述化合物被进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R7是氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物被进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物被进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2是-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物被进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2是-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物被进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物被进一步定义为：
其中：
X1是-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
R2是杂芳基(C≤12)-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，原子2和3通过单键连结。在其它实施方案中，原子2和3通过双键连结。在一些实施方案中，R1是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。在一些实施方案中，R1是烷基(C≤8)，例如，R1是甲基。在一些实施方案中，R3是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。在一些实施方案中，R3是烷基(C≤8)，例如，R3是甲基。在一些实施方案中，R4是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。在一些实施方案中，R4是烷基(C≤8)，例如，R4是甲基。在一些实施方案中，R5是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。在一些实施方案中，R5是烷基(C≤8)，例如，R5是甲基。在一些实施方案中，R6是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。在一些实施方案中，R6是烷基(C≤8)，例如，R6是甲基。在一些实施方案中，R7是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。在一些实施方案中，R7是烷基(C≤8)，例如，R7是甲基。
在一些实施方案中，Y1是羟基。在一些实施方案中，Y2是羟基。在一些实施方案中，X3是O。在一些实施方案中，X4是O。在一些实施方案中，X2是O。在其它实施方案中，X2是NRb，其中Rb是氢、烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。在一些实施方案中，Rb是氢。
在一些实施方案中，X1是O。在其它实施方案中，X1是NRa，其中：Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式。在一些实施方案中，Ra是氢。在其它实施方案中，Ra是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。在一些实施方案中，Ra是烷基(C≤8)，例如，Ra是甲基或乙基。在其它实施方案中，Ra是取代的烷基(C≤8)，例如，Ra是2-羟乙基、2-氨基乙基或2-叠氮基乙基。在其它实施方案中，Ra是-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或取代的-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)。在一些实施方案中，Ra是-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)，例如，Ra是环丙基甲基。在一些实施方案中，R2是2-甲基噻唑基、2-(2-羟乙基)噻唑基、吡啶基、苯并噻唑基、2-(氨基甲基)-噻唑基、2-(2-氨基乙基)噻唑基、2-甲硫基噻唑基或(3-甲硫基)-吡唑基。在一些实施方案中，R2是-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或其取代形式；其中：Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式。在一些实施方案中，Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式。在一些实施方案中，R2的杂芳烃二基(C≤8)是吡唑基、3-三氟甲基吡唑基或3-甲硫基吡唑基。在一些实施方案中，Rd是烷基(C≤12)或取代的烷基(C≤12)。在一些实施方案中，Rd是取代的烷基(C≤12)，例如，Rd是2-氨基乙基。在一些实施方案中，Rd是具有经保护的胺基团的取代的烷基(C≤12)，例如，经保护的胺基团是叔丁氧羰基保护的胺基团或碳酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯保护的胺基团。在一些实施方案中，Rd是-CH2CH2NHBoc或-CH2CH2NHTeoc。在其它实施方案中，Rd是芳基(C≤12)或取代的芳基(C≤12)。在一些实施方案中，Rd是取代的芳基(C≤12)，例如，Rd是2-氨基苯基、4-氨基苯基、4-氨基-3-氟苯基、4-氨基-3-三氟甲基苯基、4-氨基-2-氟苯基或4-氨基-2-三氟甲基苯基。
在一些实施方案中，所述化合物被进一步定义为：
或其药学上可接受的盐。
在又一方面，本公开提供药物组合物，其包含：
(a)本公开的化合物；和
(b)药学上可接受的载体。
在一些实施方案中，药物组合物被配制成用于按以下方式施用：口服、脂肪内、动脉内、关节内、颅内、皮内、病灶内、肌内、鼻内、眼内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、直肠内、鞘内、气管内、瘤内、脐内、阴道内、静脉内、囊内、玻璃体内、经脂质体、局部、经粘膜、肠胃外、经直肠、结膜下、皮下、舌下、外用、经颊、经皮、经阴道、以乳油、以脂质组合物、经由导管、经由灌洗、经由连续输注、经由输注、经由吸入、经由注射、经由局部递送或经由局部灌注。在一些实施方案中，药物组合物被配制为单位剂量。
在又一方面，本公开提供治疗患者的疾病或病症的方法，其包括对有需要的患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或组合物。在一些实施方案中，所述疾病或病症是癌症。在一些实施方案中，所述癌症是癌、肉瘤、淋巴瘤、白血病、黑素瘤、间皮瘤、多发性骨髓瘤或精原细胞瘤。在一些实施方案中，所述癌症是膀胱、血液、骨、脑、乳腺、中枢神经系统、子宫颈、结肠、子宫内膜、食道、胆囊、胃肠道、生殖器、泌尿生殖道、头、肾、喉、肝、肺、肌肉组织、颈部、口腔或鼻腔粘膜、卵巢、胰腺、前列腺、皮肤、脾、小肠、大肠、胃、睾丸或甲状腺的癌症。在一些实施方案中，所述癌症是乳腺癌或卵巢癌。在一些实施方案中，所述乳腺癌是导管癌。在其它实施方案中，所述卵巢癌是卵巢腺癌。在一些实施方案中，所述方法进一步包括第二癌症疗法。在一些实施方案中，第二癌症疗法是手术、第二化学治疗剂、放射疗法或免疫疗法。在一些实施方案中，患者是哺乳动物，例如人。在一些实施方案中，所述方法包括施用所述化合物一次。在其它实施方案中，所述方法包括施用所述化合物两次或更多次。
在又一方面，本公开提供抗体药物缀合物，其包含：
(a)抗体；和
(b)本公开的化合物。
在一些实施方案中，抗体和化合物是通过接头连接的。在一些实施方案中，抗体包含与抗体缀合的两种或更多种化合物。在一些实施方案中，接头是能酶促降解的接头。
在又一方面，本公开提供制备下式的化合物的方法：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
包括使下式的化合物：
其中：X1、X2、X3、X4、Y1、Y2、R1、R3、R4、R5、R6和R7如上所定义；与下式的化合物：
其中：
R2如上所定义；且
R′和R″各自独立地为烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、芳基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式；
在碱的存在下反应。
在一些实施方案中，所述碱是强碱。在一些实施方案中，所述碱是有机锂(C≤12)试剂，例如，所述碱是正丁基锂。在其它实施方案中，所述碱是金属甲硅烷基酰胺(C≤24)。在一些实施方案中，所述碱是金属六烷基甲硅烷基酰胺(C6-24)，例如，所述碱是双(三甲基甲硅烷基)氨基钠。在一些实施方案中，所述方法包括以约1:1至约1.5:1的比率添加碱与式IX的化合物。在一些实施方案中，所述比率是约1.2:1至约1.3:1。在一些实施方案中，所述方法进一步包括使所述化合物在包括约-100℃至约-50℃的温度的条件下反应。在一些实施方案中，所述方法进一步包括允许反应升温到约-30℃至30℃的温度。在一些实施方案中，所述方法进一步包括使所述化合物反应约30分钟至约8小时的时间段。
在又一方面，本公开提供制备下式的化合物的方法：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
包括使下式的化合物：
其中：
X1、X2、X3、X4、Y1、Y2、R1、R3、R4、R5、R6和R7如上所定义；且
R′是卤代基；
与下式的化合物：
其中：
R2如上所定义；且
R″、R″′和R″″各自独立地为烷基(C≤12)或取代的烷基(C≤12)；
在过渡金属催化剂存在下反应。
在一些实施方案中，过渡金属催化剂包含钯络合物。在一些实施方案中，所述钯络合物是三(二亚苄基丙酮)-双钯。在一些实施方案中，过渡金属催化剂进一步包含三芳基氮族元素化合物(C≤24)。在一些实施方案中，过渡金属催化剂包含三芳基砷化合物。在一些实施方案中，过渡金属催化剂包含三苯基胂。在一些实施方案中，过渡金属催化剂进一步包含铜盐。在一些实施方案中，所述铜盐是铜(I)盐。在一些实施方案中，所述铜盐是CuI。
在一些实施方案中，所述方法包括以约1:1至约1:5的比率添加式X的化合物与式XII的化合物。在一些实施方案中，所述比率是约1:2.5。在一些实施方案中，所述方法包括以所述钯络合物与所述三芳基氮族元素(C≤24)与所述铜盐的比率为约1:1:1至约1:10:20添加过渡金属催化剂的组分。在一些实施方案中，所述比率是约1:2:4。在一些实施方案中，钯络合物与式X的化合物的比率是约0.01:1至约0.5:1。在一些实施方案中，所述比率是约0.05:1至约0.2:1。在一些实施方案中，所述比率是约0.1:1。
在再一方面，本公开提供制备下式的化合物的方法：
其中：
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
包括使下式的化合物：
其中：
X1、X2、X3、X4、Y1、Y2、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7如上所定义；
与O-(2,4-二硝基苯基)羟胺在Rh催化剂存在下反应。
在一些实施方案中，Rh催化剂是Rh(II)催化剂。在一些实施方案中，Rh催化剂是双[铑(α,α,α’,α’,-四甲基-1,3-苯二丙酸)]。在一些实施方案中，Rh催化剂以约0.25％至约5％的摩尔百分比存在。在一些实施方案中，所述摩尔百分比是约2％。在一些实施方案中，所述方法包括以约1:1至约1:5的比率添加式XIV的化合物与O-(2,4-二硝基苯基)羟胺。在一些实施方案中，所述比率是约1:1.5。
可以预期的是，本文所述的任何方法或组合物均可相对于本文所述的任何其它方法或组合物进行实施。例如，通过一种方法合成的化合物可用于根据不同的方法制备最终化合物。
在权利要求书和/或说明书中结合术语“包含(括)”使用词语“一个(种)”时可表示“一个(种)”，但其也与“一个(种)或多个(种)”、“至少一个(种)”和“一个(种)或多于一个(种)”的含义一致。词语“约”意指所述数字增减5％。
由以下详细描述将显而易见本公开的其它目的、特征及优点。然而应该理解的是，虽然详细描述和具体实施例指出了本公开的具体实施方案，但其仅是以说明的方式给出的，因为根据这种详细描述，属于本公开的实质和范围内的各种变化和修改对于本领域技术人员来说将是显而易见的。
附图简述
以下附图形成本说明书的一部分，并且被包括进来以进一步展示本发明的某些方面。通过结合详细描述参考这些附图中的一者或多者可以更好地理解本发明。
图1显示选定的天然及设计的埃博霉素(1-4)。
图2显示由乙烯基碘15和吡唑锡烷(B)合成埃博霉素B类似物(A)的一般策略。
图3显示设计及合成的埃博霉素B类似物5-14。
图4显示合成的12,13-氮丙啶埃博霉素B类似物(70-83)的结构。
图5显示12,13-氮丙啶埃博霉素类似物(I)及其经由关键性中间体28、29和II由埃博霉素B(1)合成的一般策略。
图6A-6G显示化合物8(图6A)、化合物9(图6B)、化合物10(图6C)、化合物11(图6D)、化合物12(图6E)、化合物13(图6F)或化合物14(图6G)的体外测试结果。
图7A-7G显示化合物8(图7A)、化合物9(图7B)、化合物10(图7C)、化合物11(图7D)、化合物12(图7E)、化合物13(图7F)或化合物14(图7G)的剂量响应曲线。
说明性实施方案的描述
本公开涉及包括12,13-氮丙啶埃博霉素类似物在内的埃博霉素的新类似物，其含有能够与细胞靶向部分缀合的柄。与埃博霉素类似物附接的细胞靶向部分允许将埃博霉素类似物靶向至特定的细胞，并因此将细胞毒活性集中于具体的细胞。
另外，本公开提供制备诸如12,13-氮丙啶埃博霉素类似物的埃博霉素的类似物的方法。在一些实施方案中，制备氮丙啶类似物的方法显示出反应性提高且合成步骤的总数减少。另外，还提供了将杂芳基基团与环外(extracyclic)双键连接的方法。
I.化合物及其制剂
A.化合物
本公开提供的化合物例如显示在上文的发明内容部分中以及下面的实施例和权利要求中。它们可采用实施例部分中概述的方法制成。可根据例如下面的实施例部分中描述的方法合成本文所述的埃博霉素类似物。可采用本领域技术人员所应用的有机化学的原理和技术对这些方法进行进一步的修改和优化。在以引用的方式并入本文的March’sAdvanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure(2007)中例如教导了这类原理和技术。
本文所述的埃博霉素类似物可含有一个或多个不对称取代的碳或氮原子，并且可以以光学活性或外消旋形式进行分离。因此，除非明确地指出具体的立体化学或异构形式，否则化学式的所有手性、非对映体、外消旋形式、差向异构形式和所有的几何异构形式都是所预期的。化合物可作为外消旋体和外消旋混合物、单一的对映体、非对映体混合物及单独的非对映体出现。在一些实施方案中，得到单一的非对映体。本公开的化合物的手性中心可具有S或R构型。
用于表示本文所述的埃博霉素类似物的化学式通常将仅显示可能的几种不同互变异构体中的一种。例如，已知许多类型的酮基团与相应的烯醇基团平衡存在。类似地，许多类型的亚胺基团与烯胺基团平衡存在。不管描述给定化合物的哪种互变异构体，也不管哪一种是最普遍的，给定化学式的所有互变异构体都是所预期的。
本文所述的埃博霉素类似物还可具有这样的优点，即无论是用于本文所述的适应症还是其它方面，相比于现有技术中已知的化合物，它们可能更有效，毒性更小，作用时间更长，效力更大，产生的副作用更少，更容易被吸收，和/或具有更好的药代动力学特征(例如，更高的口服生物利用度和/或更低的清除率)，和/或具有其它有用的药理学、物理学或化学性质。
此外，构成本文所述的埃博霉素类似物的原子旨在包括这类原子的所有同位素形式。如本文所用的同位素包括原子序数相同但质量数不同的那些原子。作为一般实例而非限制，氢的同位素包括氚和氘，且碳的同位素包括13C和14C。
本文所述的埃博霉素类似物也可以前药形式存在。因为已知前药可增强药物的许多有利的品质(例如，溶解度、生物利用度、制造等)，所以如果需要的话，可以前药形式递送本公开的一些方法中所用的化合物。因此，本发明涵盖本发明的化合物的前药以及递送前药的方法。可通过将化合物中存在的官能团改性来制备本文所述的埃博霉素类似物的前药，改性的方式使得改性物在常规操作中或者在体内被裂解为母体化合物。因此，前药包括例如本文所述的这样的化合物，其中羟基、氨基或羧基基团与当对受试者施用前药时分别裂解以形成羟基、氨基或羧酸的任何基团键合。
应当认识到，形成本文提供的化合物的任何盐形式的一部分的特定阴离子或阳离子并不是至关重要的，只要盐作为整体是药理学上可接受的即可。在以引用的方式并入本文的Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,and Use(2002)中提供了药学上可接受的盐的另外的实例以及它们的制备和使用方法。
有机化学领域的技术人员将理解的是，许多有机化合物可与它们在其中反应或它们从其中沉淀或结晶的溶剂形成复合物。这些复合物被称为“溶剂合物”。例如，与水的复合物被称为“水合物”。本文所述的埃博霉素类似物的溶剂合物属于本发明的范围内。有机化学领域的技术人员还将理解的是，许多有机化合物可以多于一种晶型存在。例如，晶型可随溶剂合物而各不相同。因此，本文所述的埃博霉素类似物的所有晶型都属于本发明的范围内。
B.制剂
在本公开的一些实施方案中，化合物包括在药物制剂中。用于制备微球和/或微胶囊的物质例如是可生物降解/可生物溶蚀的聚合物，如聚泌乳素(polygalactin)、聚-(氰基丙烯酸异丁酯)、聚(2-羟乙基-L-谷氨酰胺)和聚(乳酸)。当配制控释肠胃外制剂时可使用的生物相容性载体有碳水化合物(例如，葡聚糖)、蛋白质(例如，白蛋白)、脂蛋白或抗体。用于植入物的物质可以是不可生物降解的(例如，聚二甲基硅氧烷)或可生物降解的(例如，聚(己内酯)、聚(乳酸)、聚(乙醇酸)或聚(原酸酯)或其组合)。
口服使用的制剂包括在与无毒药学上可接受的赋形剂的混合物中含有活性成分(例如，本文所述的埃博霉素类似物)的片剂。这类制剂是技术人员已知的。赋形剂可以是例如惰性稀释剂或填充剂(例如，蔗糖、山梨糖醇、糖、甘露糖醇、微晶纤维素、包括马铃薯淀粉在内的淀粉、碳酸钙、氯化钠、乳糖、磷酸钙、硫酸钙或磷酸钠)；造粒剂和崩解剂(例如，包括微晶纤维素在内的纤维素衍生物、包括马铃薯淀粉在内的淀粉、交联羧甲基纤维素钠、海藻酸盐或海藻酸)；粘结剂(例如，蔗糖、葡萄糖、山梨糖醇、阿拉伯胶、海藻酸、海藻酸钠、明胶、淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、硅酸镁铝、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇)；以及润滑剂、助流剂和抗粘剂(例如，硬脂酸镁、硬脂酸锌、硬脂酸、二氧化硅、氢化植物油或滑石)。其它药学上可接受的赋形剂可以是着色剂、调味剂、增塑剂、保湿剂、缓冲剂等。
片剂可以是未包衣的，或者可通过已知技术将它们包衣(任选)以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，并因此提供较长时期的持续作用。可使包衣适于以预定的模式释放活性药物(例如，以便获得控释制剂)，或者可使其适于直到在通过胃之后才释放活性药物(肠溶包衣)。包衣可以是糖包衣、薄膜包衣(例如，基于羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、丙烯酸酯共聚物、聚乙二醇和/或聚乙烯吡咯烷酮)或肠溶包衣(例如，基于甲基丙烯酸共聚物、邻苯二甲酸乙酸纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、琥珀酸乙酸羟丙基甲基纤维素、聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯、虫胶和/或乙基纤维素)。此外，可以使用延时物质，举例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
II.癌症及其它过度增殖性疾病
虽然过度增殖性疾病可能与导致细胞开始失控繁殖的任何疾病有关，但原型实例是癌症。癌症的关键要素之一是细胞的正常凋亡周期被中断，并且因此中断细胞生长的药剂作为用于治疗这些疾病的治疗剂是重要的。在本公开中，本文所述的埃博霉素类似物可用于导致细胞计数减少，并且因此可潜在地用于治疗多种类型的癌细胞系。在一些方面，预期本文所述的埃博霉素类似物可用于治疗几乎任何恶性肿瘤。
可用本公开的化合物治疗的癌细胞包括但不限于来自膀胱、血液、骨、骨髓、脑、乳腺、结肠、食道、胃肠、牙龈、头、肾、肝、肺、鼻咽、颈部、卵巢、前列腺、皮肤、胃、胰腺、睾丸、舌、子宫颈或子宫的细胞。此外，癌症可具体地属于以下组织学类型，尽管其并不限于这些：恶性赘生物；癌；未分化癌；巨细胞和梭形细胞癌；小细胞癌；乳头状癌；鳞状细胞癌；淋巴上皮癌；基底细胞癌；毛母质癌；移行细胞癌；乳头状移行细胞癌；腺癌；恶性胃泌素瘤；胆管癌；肝细胞癌；肝细胞癌和胆管癌合并；小梁腺癌；腺样囊性癌；腺瘤性息肉中的腺癌；家族性结肠息肉腺癌；实体癌；恶性类癌肿瘤；细支气管-肺泡腺癌；乳头状腺癌；嫌色细胞癌；嗜酸细胞癌；嗜酸性腺癌；嗜碱细胞癌；透明细胞腺癌；颗粒细胞癌；滤泡性腺癌；乳头状和滤泡性腺癌；非包膜硬化性癌(nonencapsulating sclerosing carcinoma)；肾上腺皮质癌；子宫内膜样癌；皮肤附件癌；大汗腺腺癌；皮脂腺癌；耵聍腺癌；粘液表皮样癌；囊腺癌；乳头状囊腺癌；乳头状浆液性囊腺癌；粘液性囊腺癌；粘液腺癌；印戒细胞癌；浸润性导管癌；髓样癌；小叶癌；炎性癌；乳房佩吉特氏病；腺泡细胞癌；腺鳞癌；具有鳞状化生的腺癌；恶性胸腺瘤；恶性卵巢间质肿瘤；恶性卵泡膜细胞瘤；恶性粒层细胞瘤；恶性男性母细胞瘤；塞尔托利氏细胞癌；恶性莱迪希细胞瘤；恶性脂细胞瘤；恶性副神经节瘤；恶性乳房外副神经节瘤；嗜铬细胞瘤；皮肤丝球肉瘤(glomangiosarcoma)；恶性黑素瘤；无黑素性黑素瘤；浅表扩散性黑素瘤；巨大色素痣中的恶性黑素瘤；上皮样细胞黑素瘤；恶性蓝色痣；肉瘤；纤维肉瘤；恶性纤维组织细胞瘤；粘液肉瘤；脂肪肉瘤；平滑肌肉瘤；横纹肌肉瘤；胚胎性横纹肌肉瘤；肺泡横纹肌肉瘤；间质肉瘤；恶性混合瘤；苗勒混合瘤；肾母细胞瘤；肝母细胞瘤；癌肉瘤；恶性间叶瘤；恶性布伦纳瘤；恶性叶状肿瘤；滑膜肉瘤；恶性间皮瘤；无性细胞瘤；胚胎癌；恶性畸胎瘤；恶性卵巢甲状腺瘤；绒毛膜癌；恶性中肾瘤；血管肉瘤；恶性血管内皮瘤；卡波西氏肉瘤；恶性血管外皮细胞瘤；淋巴管肉瘤；成骨肉瘤；皮质旁成骨肉瘤；软骨肉瘤；恶性成软骨细胞瘤；间叶性软骨肉瘤；骨巨细胞瘤；尤因氏肉瘤；恶性牙源性肿瘤；成釉细胞牙肉瘤；恶性成釉细胞瘤；成釉细胞纤维肉瘤；恶性松果体瘤；脊索瘤；恶性胶质瘤；室管膜瘤；星形细胞瘤；原浆型星形细胞瘤；纤维性星形细胞瘤；星形母细胞瘤；胶质母细胞瘤；少突胶质细胞瘤；成少突神经胶质细胞瘤；原始神经外胚层；小脑肉瘤；成神经节细胞瘤；神经母细胞瘤；视网膜母细胞瘤；嗅神经源性肿瘤；恶性脑膜瘤；神经纤维肉瘤；恶性神经鞘瘤；恶性颗粒细胞瘤；恶性淋巴瘤；霍奇金病；副肉芽肿；小淋巴细胞性恶性淋巴瘤；大细胞弥漫性恶性淋巴瘤；滤泡性恶性淋巴瘤；蕈样真菌病；其它指定的非霍奇金淋巴瘤；恶性组织细胞增生症；多发性骨髓瘤；肥大细胞肉瘤；免疫增生性小肠疾病；白血病；淋巴性白血病；浆细胞白血病；红白血病；淋巴肉瘤细胞白血病；骨髓性白血病；嗜碱性粒细胞白血病；嗜酸性粒细胞白血病；单核细胞白血病；肥大细胞白血病；巨核细胞白血病；髓样肉瘤；和毛细胞白血病。在某些方面，肿瘤可包括骨肉瘤、血管肉瘤、横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤、尤因肉瘤、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤或白血病。
III.细胞靶向部分
在一些方面，本公开提供直接或通过接头与细胞靶向部分缀合的化合物。在一些实施方案中，化合物与细胞靶向部分缀合提高了化合物治疗疾病或病症的功效。根据实施方案的细胞靶向部分可以是例如抗体、生长因子、激素、肽、适体、诸如激素的小分子、显像剂或辅因子或细胞因子。比如，根据实施方案的细胞靶向部分可与诸如Hep3B细胞的肝癌细胞结合。已经证实，gp240抗原在各种黑素瘤中表达，但不在正常组织中表达。因此，在一些实施方案中，本公开的化合物可用在与针对由癌细胞表达但不在正常组织中表达的特异性抗原的抗体的缀合物中。
在某些另外的实施方案中，可设想癌细胞靶向部分与多种类型的癌细胞结合。例如，8H9单克隆抗体和由其衍生的单链抗体与在乳腺癌、肉瘤和神经母细胞瘤上表达的糖蛋白结合(Onda等人，2004)。另一个实例是2004/005647号美国专利公开和Winthrop等人(2003)中所述的细胞靶向剂，其与在多种癌症类型上表达的抗原MUC-1结合。因此将要理解的是，在某些实施方案中，根据实施方案的细胞靶向构建体可针对多种癌症或肿瘤类型进行靶向。
另外，某些细胞表面分子在肿瘤细胞中高度表达，包括激素受体，如人绒毛膜促性腺激素受体和促性腺激素释放激素受体(Nechushtan等人，1997)。因此，相应的激素可在癌症治疗中用作细胞特异性靶向部分。另外，可以使用的细胞靶向部分包括辅因子、糖、药物分子、显像剂或荧光染料。已知许多癌性细胞过表达叶酸受体，因此叶酸或其它叶酸衍生物可用作缀合物以引发本公开的缀合物与细胞之间的细胞特异性相互作用(Campbell等人，1991；Weitman等人，1992)。
由于在各种谱系的造血细胞中已经确认出大量的细胞表面受体，因此可将对这些受体特异性的配体或抗体用作细胞特异性靶向部分。IL-2也可用作嵌合蛋白中的细胞特异性靶向部分以靶向IL-2R+细胞。或者，诸如B7-1、B7-2和CD40的其它分子可用于特异性地靶向活化T细胞(The Leucocyte Antigen Facts Book，1993，Barclay等人(编著)，AcademicPress)。此外，B细胞表达CD19、CD40和IL-4受体，并且可通过诸如CD40配体、IL-4、IL-5、IL-6和CD28的结合这些受体的部分进行靶向。诸如T细胞和B细胞的免疫细胞的消除在淋巴样肿瘤的治疗中特别有用。
可用于靶向特定细胞亚群的其它细胞因子包括白介素(IL-1至IL-15)、粒细胞集落刺激因子、巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白血病抑制因子、肿瘤坏死因子、转化生长因子、表皮生长因子、胰岛素样生长因子和/或纤维母细胞生长因子(Thompson(编著)，1994，The Cytokine Handbook，Academic Press，San Diego)。在一些方面，靶向多肽是与Fn14受体结合的细胞因子，如TWEAK(参见例如Winkles，2008；Zhou等人，2011和Burkly等人，2007，上述文献以引用的方式并入本文)。
技术人员认识到，存在多种已知的细胞因子，包括血细胞生成素(四螺旋束)(如EPO(红细胞生成素)、IL-2(T细胞生长因子)、IL-3(多集落CSF)、IL-4(BCGF-1、BSF-1)、IL-5(BCGF-2)、IL-6IL-4(IFN-β2、BSF-2、BCDF)、IL-7、IL-8、IL-9、IL-11、IL-13(P600)、G-CSF、IL-15(T细胞生长因子)、GM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)、OSM(OM，制瘤素M)和LIF(白血病抑制因子))；干扰素(如IFN-γ、IFN-α和IFN-β)；免疫球蛋白超家族(如B7.1(CD80)和B7.2(B70、CD86))；TNF家族(如TNF-α(恶病质素)、TNF-β(淋巴毒素，LT、LT-α)、LT-β、CD40配体(CD40L)、Fas配体(FasL)、CD27配体(CD27L)、CD30配体(CD30L)和4-1BBL))；以及未指定特定家族的那些(如TGF-β、IL 1α、IL-1β、IL-1RA、IL-10(细胞因子合成抑制剂F)、IL-12(NK细胞刺激因子)、MIF、IL-16、IL-17(mCTLA-8)和/或IL-18(IGIF、干扰素-γ诱导因子))。此外，抗体的重链的Fc部分可用于靶向Fc受体表达细胞，如使用IgE抗体的Fc部分来靶向肥大细胞和嗜碱性粒细胞。
此外，在一些方面，细胞靶向部分可以是肽序列或环肽。比如在各自以引用的方式并入本文的6,232,287；6,528,481；7,452,964；7,671,010；7,781,565；8,507,445；和8,450,278号美国专利中提供了可根据实施方案使用的细胞和组织靶向肽的实例。
因此，在一些实施方案中，细胞靶向部分是抗体或亲合力多聚体(avimer)。可针对几乎任何细胞表面标志物产生抗体和亲合力多聚体，从而提供进行靶向的方法以将GrB递送至几乎任何所关注的细胞群体。下面详述产生可用作细胞靶向部分的抗体的方法。各自以引用的方式并入本文的2006/0234299和2006/0223114号美国专利公开中详述了产生与给定的细胞表面标志物结合的亲合力多聚体的方法。
另外，预期本文所述的化合物可与纳米颗粒或其它纳米材料缀合。纳米颗粒的一些非限制性实例包括金属纳米颗粒，如金或银纳米颗粒；或聚合物纳米颗粒，如聚-L-乳酸或聚(乙)二醇聚合物。可与本发明化合物缀合的纳米颗粒和纳米材料包括各自以引用的方式并入本文的2006/0034925、2006/0115537、2007/0148095、2012/0141550、2013/0138032和2014/0024610号美国专利公开以及2008/121949、2011/053435和2014/087413号PCT公开中描述的那些。
IV.疗法
A.药物制剂和施用途径
在考虑临床应用的情况下，将有必要以适合预期应用的形式制备药物组合物。在一些实施方案中，预期了具有本公开的化合物的这种制剂。一般地，这将需要制备基本上不含热原以及有可能对人或动物有害的其它杂质的组合物。
通常期望使用适当的盐和缓冲液以使递送载体稳定并允许被靶细胞吸收。当向患者体内引入重组细胞时也将使用缓冲液。本发明的水性组合物包含溶解或分散在药学上可接受的载体或水性介质中的有效量的细胞的载体。这类组合物也被称为接种物。短语“药学或药理学上可接受的”是指当对动物或人施用时不产生不利的过敏或其它不良反应的分子实体及组合物。如本文所用，“药学上可接受的载体”包括任何及所有的溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。这类介质和试剂用于药学活性物质的用途是本领域中众所周知的。除非任何常规的介质或试剂与本发明的载体或细胞不相容，否则其在治疗性组合物中的用途是可预期的。也可将补充的活性成分掺入到组合物当中。
本发明的活性组合物可包括传统的药物制剂。施用根据本发明的这些组合物将经由任何常用的途径进行，只要经由该途径可达到靶组织即可。这类途径包括口服、经鼻、经颊、经直肠、经阴道或外用途径。或者，可通过常位、皮内、皮下、肌内、瘤内、腹膜内或静脉内注射来进行施用。这类组合物通常将作为上文所述的药学上可接受的组合物来进行施用。
也可以肠胃外或腹膜内的方式施用活性化合物。可在与诸如羟丙基纤维素的表面活性剂适当混合的水中制备作为游离碱或药理学上可接受的盐的活性化合物的溶液。也可在甘油、液体聚乙二醇及其混合物和在油中制备分散液。在平常的储存和使用条件下，这些制剂含有防腐剂以防止微生物的生长。
适合注射用的药物形式包括无菌水溶液或分散液以及用于临时制备无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。在所有情况下，所述形式必须是无菌的，并且必须是达到存在易注射性程度的流体。其在制造和储存条件下必须是稳定的，并且必须进行保存以防止诸如细菌和真菌的微生物的污染作用。载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)、其合适的混合物及植物油的溶剂或分散介质。可例如通过使用诸如卵磷脂的包衣、在分散液的情况下通过维持所需的粒度以及通过使用表面活性剂来保持适当的流动性。可通过例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等的各种抗菌剂和抗真菌剂来实现防止微生物的作用。在许多情况下，优选的是包括等渗剂，例如糖或氯化钠。可通过在组合物中使用延迟吸收的试剂来实现可注射的组合物的持久吸收，例如使用单硬脂酸铝和明胶。
通过在适当的溶剂中以所需的量掺入活性化合物与上面列举的各种其它成分(根据需要)、接着进行过滤灭菌来制备无菌可注射的溶液。一般地，通常向含有基本分散介质和来自上面列举的所需其它成分的无菌媒介物当中掺入各种灭菌的活性成分来制备分散液。在用于制备无菌可注射的溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，这些技术由其先前无菌过滤的溶液产生活性成分加上任何另外所需成分的粉末。
如本文所用，“药学上可接受的载体”包括任何及所有的溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。这类介质和试剂用于药物活性物质的用途是本领域中众所周知的。除非任何常规的介质或试剂与活性成分不相容，否则其在治疗性组合物中的用途是可预期的。也可将补充的活性成分掺入到组合物当中。
对于口服施用，可将本文所述的埃博霉素类似物与赋形剂掺合，并以非摄入型漱口水和洁牙剂的形式使用。可在诸如硼酸钠溶液(多贝耳氏溶液)的适当溶剂中以所需的量掺入活性成分来制备漱口水。或者，可将活性成分掺入到含有硼酸钠、甘油和碳酸氢钾的防腐洗液当中。也可将活性成分分散在洁牙剂中，包括：凝胶、糊剂、粉末和浆液。可将活性成分以治疗有效量添加到可包括水、粘结剂、磨料、调味剂、发泡剂和保湿剂的糊状洁牙剂中。
可按中性或盐形式配制本公开的组合物。药学上可接受的盐包括酸加成盐(与蛋白质的游离氨基形成)，并且其是与无机酸(举例如盐酸或磷酸)或有机酸(如乙酸、草酸、酒石酸、扁桃酸等)形成的。与游离羧基形成的盐也可衍生自无机碱(举例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙或氢氧化铁)和有机碱(如异丙胺、三甲胺、组氨酸、普鲁卡因等)。
配制后，将按与剂量制剂相容的方式并且以诸如治疗有效的量施用溶液。很容易以多种剂型施用制剂，如可注射的溶液、药物释放胶囊等。对于以水溶液的肠胃外施用，如有必要的话应例如将溶液适当地缓冲，并且首先使液体稀释剂与足够的盐水或葡萄糖等渗。这些特定的水溶液特别适合静脉内、肌内、皮下和腹膜内施用。在这方面，根据本公开内容，可以使用的无菌水性介质将是本领域技术人员已知的。例如，可将一个剂量溶解在1ml等渗NaCl溶液中，并且要么添加到1000ml皮下灌注液中，要么在建议的输注部位进行注射(参见例如“Remington's Pharmaceutical Sciences”，第15版，第1035-1038和1570-1580页)。根据所治疗的受试者的病状，必然会发生一些剂量的变化。施用负责人在任何情况下都将确定对于个体受试者的适当剂量。此外，对于人类施用，制剂应满足FDA生物制品标准办公室要求的无菌性、热原性、一般安全性及纯度标准。
B.治疗方法
特别地，本文公开了可用于治疗受试者(例如，人受试者)中的微生物感染和癌症的组合物。优选以有效量对哺乳动物(例如，啮齿动物、人、非人灵长类动物、犬科动物、牛科动物、羊属动物、马科动物、猫科动物等)施用上述组合物，所述有效量即能够在被治疗的受试者中产生期望的结果(例如，导致癌性细胞的凋亡或杀灭细菌细胞)的量。可通过标准的药学程序来确定本发明的方法中使用的组合物的毒性和治疗功效。医学和兽医领域中众所周知的是，对于任何一种动物的剂量取决于许多因素，包括受试者的体型大小、体表面积、体重、年龄、要施用的特定组合物、施用的时间和途径、一般健康状况、感染或癌症的临床症状以及正同时施用的其它药物。通常以按通过确认血液学参数(全血计数-CBC)或癌细胞生长或增殖的减少测定为抑制细菌细胞生长或增殖、抑制生物膜生长或诱导癌性细胞死亡(例如，诱导癌细胞凋亡)的剂量施用如本文所述的组合物。在一些实施方案中，用于抑制细菌生长或诱导癌细胞凋亡的埃博霉素类似物的量经计算为约0.01mg至约10,000mg/天。在一些实施方案中，该量为约1mg至约1,000mg/天。在一些实施方案中，可基于特定患者的生物学因素来减少或增加这些剂量，如基于药物的代谢分解增加或减少或者由消化道吸收减少(如果是口服施用)。另外，埃博霉素类似物可能更有效，因此需要较小的剂量来达到类似的效果。这种剂量通常是一天施用一次，持续数周或直到已经实现足够的癌细胞减少。
本发明的治疗方法(其包括预防性治疗)一般来说包括对有需要的受试者(包括哺乳动物，特别是人)施用治疗有效量的本文所述的组合物。将适当地对罹患、具有、易患疾病、病症或其症状或者对疾病、病症或其症状有风险的受试者(特别是人)施行这种治疗。可通过受试者或医疗服务人员的诊断测试或意见(例如，基因检测、酶或蛋白质标志物、标志物(如本文所定义)、家族史等)确定出“有风险”的那些受试者。
在一个实施方案中，本发明提供监测治疗进展的方法。所述方法包括在罹患或易患与癌症(例如，白血病)相关的病症或其症状的受试者中确定血液学参数的变化水平和/或用细胞表面蛋白作为诊断标志物(其可包括例如但不限于CD34、CD38、CD90和CD117)或用诊断测量(例如，筛选、测定)进行癌症干细胞(CSC)分析的步骤，其中受试者已经被施用治疗量的如本文所述的组合物。可将在所述方法中确定的标志物水平与健康正常对照或其他患病的患者中的已知水平进行比较，以确立受试者的疾病状态。在优选的实施方案中，在比确定第一水平晚的时间点确定受试者中的标志物的第二水平，并将两个水平进行比较以监测疾病进程或治疗的功效。在某些优选的实施方案中，在根据本文所述的方法开始治疗之前确定受试者中标志物的治疗前水平；然后可将标志物的此治疗前水平与治疗开始后的受试者中标志物的水平进行比较以确定治疗的功效。
C.组合疗法
可设想本文所述的埃博霉素类似物与一种或多种癌症疗法或减轻患者所经历的一种或多种副作用的化合物组合使用。在癌症治疗领域中将治疗方式进行组合是常见的。以下是对可与本公开的疗法结合使用的疗法的一般性讨论。
为了采用本公开的方法和组合物治疗癌症，通常将使肿瘤细胞或受试者与化合物和至少一种其它疗法进行接触。这些疗法将以有效实现一种或多种疾病参数减少的组合量提供。此过程可涉及使细胞/受试者与两种药剂/疗法同时进行接触，例如使用包括两种药剂的单一组合物或药理学制剂，或者通过使细胞/受试者与两种不同的组合物或制剂同时进行接触，其中一种组合物包括所述化合物，且另一种包括其它药剂。
或者，本文所述的埃博霉素类似物先于或后于其它治疗的时间间隔可在数分钟至数周范围内。通常将要确保在每次递送的时间之间的很长一段时间不会过期，使得疗法将仍然能够对细胞/受试者施加有利的组合效果。在这类情况下，预期可在彼此约12-24小时内、彼此约6-12小时内或者以仅约1-2小时的延迟时间按两种方式接触细胞。然而在一些情况下，在各施用之间数天(2、3、4、5、6或7天)至数周(1、2、3、4、5、6、7或8周)失效的情况下，可取的是显著地延长治疗的时间段。
还可设想到期望不只一次施用化合物或其它疗法。可采用各种组合，其中本公开的化合物是“A”，且另一种疗法是“B”，如下所例示：
其它组合也是所预期的。以下是对可与本公开的化合物组合使用的癌症疗法的一般性讨论。
1.化学疗法
术语“化学疗法”是指使用药物治疗癌症。“化学治疗剂”用于意指在癌症治疗中施用的化合物或组合物。这些药剂或药物是根据它们在细胞内的活性模式进行分类的，例如它们是否以及在什么阶段影响细胞周期。或者，可基于药剂直接交联DNA、插入DNA或通过影响核酸合成来诱导染色体和有丝分裂畸变的能力而对其进行表征。大多数化学治疗剂属于以下类别：烷化剂、抗代谢物、抗肿瘤抗生素、有丝分裂抑制剂和亚硝基脲。
化学治疗剂的实例包括烷化剂，如噻替派和环磷酰胺；烷基磺酸酯，如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶，如苯佐替派(benzodopa)、卡波醌、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替派(uredopa)；乙撑亚胺和甲基蜜胺，包括六甲蜜胺、三亚乙基蜜胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基蜜胺；多聚乙酰(特别是布拉他辛和布拉他辛酮)；喜树碱(包括合成类似物拓扑替康)；苔藓抑素；卡利司他汀(callystatin)；CC-1065(包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；念珠藻素(特别是念珠藻素1和念珠藻素8)；多拉司他汀；倍癌霉素(duocarmycin)(包括合成类似物KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；水鬼蕉碱(pancratistatin)；甸枝珊瑚醇(sarcodictyin)；海绵素(spongistatin)；氮芥，如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺(cholophosphamide)、雌莫司汀、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、盐酸二氯甲基二乙胺氧化物、美法仑、新恩比兴、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲洛磷胺、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲，如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，如烯二炔抗生素(例如卡里奇霉素，特别是卡里奇霉素γ1和卡里奇霉素ω1；达内霉素，包括达内霉素A；尤西拉美辛(uncialamycin)及其衍生物；双膦酸盐，如氯膦酸盐；埃斯培拉霉素；以及新制癌菌素发色团和相关色蛋白烯二炔抗生素发色团、阿克拉霉素、放线菌素、安曲霉素(authrarnycin)、重氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素、卡柔比星(carabicin)、洋红霉素、嗜癌菌素、色霉素(chromomycinis)、更生霉素、道诺霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比星(包括吗啉代多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2-吡咯啉基多柔比星和去氧多柔比星)、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素(如丝裂霉素C)、麦考酚酸、诺加霉素(nogalarnycin)、橄揽霉素、培洛霉素、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑霉素、链佐星、杀结核菌素、乌苯美司、净司他汀或佐柔比星；抗代谢物，如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，如二甲叶酸、甲氨蝶呤、蝶罗呤、曲美沙特；嘌呤类似物，如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、二脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素，如卡鲁睾酮、丙酸屈他雄酮、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺药，如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，如亚叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；倍曲布西(bestrabucil)；比生群；依达曲沙；地磷酰胺(defofamine)；地美可辛；地吖醌；伊佛米新(elformithine)；依利醋铵(elliptinium acetate)；埃博霉素；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；洛尼代宁(lonidainine)；美登木素生物碱，如美登素和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫匹达醇(mopidanmol)；二胺硝吖啶(nitraerine)；喷司他汀；苯来美特；吡柔比星；洛索蒽醌；足叶草酸(podophyllinic acid)；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；PSK多糖复合物)；雷佐生；利索新；西佐喃；锗螺胺；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2’,2”-三氯三乙胺；单端孢霉烯(特别是T-2毒素、疣孢菌素A、杆孢菌素A和蛇形菌素)；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；加西托新(gacytosine)；阿糖胞苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替派；紫杉烷类，例如紫杉醇和多西他赛；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；甲氨蝶呤；铂配位络合物，如顺铂、奥沙利铂和卡铂；长春碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；诺安托(novantrone)；替尼泊苷；依达曲沙；道诺霉素；氨基蝶呤；希罗达；伊班膦酸盐；伊立替康(例如，CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄醇类物质，如视黄酸；卡培他滨；顺铂(CDDP)、卡铂、丙卡巴肼、二氯甲基二乙胺、环磷酰胺、喜树碱、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、亚硝基脲、更生霉素、道诺霉素、多柔比星、博来霉素、普卡霉素(plicomycin)、丝裂霉素、依托泊苷(VP16)、他莫昔芬、雷洛昔芬、雌激素受体结合剂、紫杉酚、紫杉醇、多西他赛、吉西他滨(gemcitabien)、诺维本、法呢基-蛋白质转移酶抑制剂、反式铂、5-氟尿嘧啶、长春新碱、长春碱和甲氨蝶呤以及上述任何物质的药学上可接受的盐、酸或衍生物。
2.放射疗法
放射疗法也称为辐射疗法，是用电离辐射治疗癌症及其它疾病。电离辐射沉积出损伤或破坏被治疗区域的细胞的能量，其方式是通过损害其遗传物质，使这些细胞无法继续生长。虽然辐射对癌细胞和正常细胞均有损害，但后者能够自我修复并正常地发挥作用。
根据本发明采用的辐射疗法可包括但不限于使用γ射线、X射线和/或对肿瘤细胞定向递送放射性同位素。也可考虑其它形式的DNA损伤因素，如微波和UV照射。最有可能的是，所有这些因素对DNA、对DNA的前体、对DNA的复制和修复以及对染色体的组装和维护造成广泛的损害。X射线的剂量范围从对于长时间段(3至4周)的50至200伦琴的日剂量到2000至6000伦琴的单剂量不等。放射性同位素的剂量范围差别很大，且取决于同位素的半衰期、发出的辐射的强度和类型以及肿瘤细胞的吸收量。
放射疗法可包括使用放射性标记的抗体将辐射的剂量直接递送至癌症部位(放射免疫疗法)。抗体是高度特异性的蛋白质，其由身体响应于抗原(被免疫系统识别为是外来的物质)的存在而产生。一些肿瘤细胞含有引发肿瘤特异性抗体产生的特异性抗原。可在实验室中制出大量的这些抗体，并将它们附着于放射性物质(被称为放射性标记的过程)。一旦抗体被注入体内，则其会主动地搜寻癌细胞，通过辐射的细胞杀伤(细胞毒性)作用破坏这些癌细胞。这种方法可将辐射对健康细胞损害的风险降至最低。
适形放射疗法使用与常规放射疗法治疗相同的放射治疗机，即一种线性加速器，但在x射线束的路径中放置金属块来改变其形状以匹配癌症的形状。这确保了给予肿瘤较高的辐射剂量。健康的周围细胞及附近的结构接受的辐射剂量较低，因此降低了副作用的可能性。已经开发出称为多叶准直器的装置，并且可使用其替代金属块。多叶准直器由固定到线性加速器上的多个金属片组成。可以调节每一层，使得可以将放射治疗束成形到治疗区域而不需要金属块。放射治疗机的精确定位对于适形放射疗法治疗是非常重要的，并且可以在每次治疗开始时使用专门的扫描机检查身体内部器官的位置。
高分辨率强度调制放射疗法也使用多叶准直器。在这种治疗期间，在给予治疗的同时移动多叶准直器的层。这种方法可能实现甚至更为精确的治疗束的成形，并允许放射疗法的剂量在整个治疗区域上不变。
虽然研究已表明适形放射疗法和强度调制放射疗法可减少放射疗法治疗的副作用，但有可能的是，如此精确地成形治疗区域会阻止破坏刚好在治疗区域外的微观癌细胞。这意味着采用这些专门的放射疗法技术，在将来出现癌症复发的风险可能较高。
科学家们也在寻找提高辐射疗法的有效性的方法。正在研究两种类型的研究性药物对经受辐射的细胞的作用。放射敏化剂使肿瘤细胞更有可能受到损害，而放射保护剂保护正常组织免受辐射的影响。也正在研究使用热量的热疗使组织对辐射敏感的有效性。
3.免疫疗法
在癌症治疗的背景下，免疫治疗一般地依靠使用免疫效应细胞和分子来靶向和破坏癌细胞。曲妥珠单抗(HerceptinTM)就是这样的一个实例。免疫效应物可以是例如对肿瘤细胞表面上的一些标志物具有特异性的抗体。单独的抗体可充当治疗的效应物，或者其可募集其它细胞以实际地影响细胞杀伤。也可使抗体与药物或毒素(化学治疗剂、放射性核素、蓖麻毒素A链、霍乱毒素、百日咳毒素等)缀合并仅充当靶向剂。或者，效应物可以是携带与肿瘤细胞靶标直接或间接相互作用的表面分子的淋巴细胞。各种效应细胞包括细胞毒性T细胞和NK细胞。治疗方式(即，直接细胞毒活性和抑制或减少ErbB2)的组合将在治疗ErbB2过度表达的癌症中提供治疗有益效果。
在免疫疗法的一方面，肿瘤细胞必须带有一些易于靶向的标志物，即大多数其它细胞上不存在的。存在有许多肿瘤标志物，并且这些中的任一者都可适合在本发明的背景下靶向。常见的肿瘤标志物包括癌胚抗原、前列腺特异性抗原、泌尿系肿瘤相关抗原、胚胎抗原、酪氨酸酶(p97)、gp68、TAG-72、HMFG、唾液酸化路易斯抗原、MucA、MucB、PLAP、雌激素受体、层粘连蛋白受体、erb B和p155。免疫疗法的替代方面是将抗癌作用与免疫刺激作用相结合。还存在免疫刺激分子，包括：细胞因子，如IL-2、IL-4、IL-12、GM-CSF、γ-IFN；趋化因子，如MIP-1、MCP-1、IL-8；和生长因子，如FLT3配体。已经表明，组合免疫刺激分子，无论是作为蛋白质还是采用基因递送与肿瘤抑制剂相组合，都会增强抗肿瘤作用(Ju等人，2000)。此外，针对任何这些化合物的抗体可用于靶向本文讨论的抗癌剂。
目前处于研究阶段或使用阶段的免疫疗法的实例有免疫佐剂，例如牛分枝杆菌、恶性疟原虫、二硝基氯苯和芳族化合物(美国专利5,801,005和5,739,169；Hui和Hashimoto，1998；Christodoulides等人，1998)，细胞因子疗法，例如干扰素α、β和γ；IL-1、GM-CSF和TNF(Bukowski等人，1998；Davidson等人，1998；Hellstrand等人，1998)，基因疗法，例如TNF、IL-1、IL-2、p53(Qin等人，1998；Austin-Ward和Villaseca，1998；美国专利5,830,880和5,846,945)，以及单克隆抗体，例如抗神经节苷脂GM2、抗HER-2、抗p185(Pietras等人，1998；Hanibuchi等人，1998；美国专利5,824,311)。可预期的是，一种或多种抗癌疗法可与本文所述的基因沉默疗法一起使用。
在主动免疫疗法中，通常与不同的细菌佐剂一起施用抗原肽、多肽或蛋白质或者自体或同种异体肿瘤细胞组合物或“疫苗”(Ravindranath和Morton，1991；Morton等人，1992；Mitchell等人，1990；Mitchell等人，1993)。
在过继性免疫疗法中，将患者的循环淋巴细胞或肿瘤浸润的淋巴细胞在体外分离，通过诸如IL-2的淋巴因子活化，或者用肿瘤坏死的基因转导，并重新施用(Rosenberg等人，1988；1989)。
4.手术
患有癌症的人中有大约60％将经受某种类型的手术，包括预防性、诊断性或分期性、治愈性和姑息性手术。治愈性手术是可与其它疗法结合使用的癌症治疗，如结合本发明的治疗、化学疗法、放射疗法、激素疗法、基因疗法、免疫疗法和/或替代疗法。
治愈性手术包括其中物理移除、切除和/或破坏全部或部分癌性组织的切除术。肿瘤切除术是指物理移除至少部分的肿瘤。除了肿瘤切除术以外，通过手术治疗还包括激光手术、冷冻手术、电手术和显微镜控制的手术(莫氏手术)。可进一步预期的是，本发明可与移除浅表癌、前期癌或正常组织的附带量结合使用。
切除部分或全部癌性细胞、组织或肿瘤后，可在体内形成腔体。可通过灌注、直接注射或区域局部施加另外的抗癌疗法来完成治疗。可重复进行这种治疗，例如，每1、2、3、4、5、6或7天或者每1、2、3、4和5周或者每1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月进行。这些治疗同样可具有不同的剂量。
在一些特定的实施方案中，在移除肿瘤之后，据信用本公开的化合物进行辅助治疗对减少肿瘤复发特别有效。另外，本公开的化合物也可用于新辅助疗法设置中。
5.其它药剂
可预期的是，其它药剂可与本发明一起使用。这些另外的药剂包括免疫调节剂、影响细胞表面受体和GAP连接的上调的药剂、细胞抑制剂和分化剂、细胞粘附的抑制剂、提高过度增殖细胞对凋亡诱导剂的敏感性的药剂或其它生物学药剂。免疫调节剂包括肿瘤坏死因子；干扰素α、β和γ；IL-2及其它细胞因子；F42K及其它细胞因子类似物；或MIP-1、MIP-1β、MCP-1、RANTES及其它趋化因子。可进一步预期的是，细胞表面受体或其配体如Fas/Fas配体、DR4或DR5/TRAIL(Apo-2配体)的上调将通过对过度增殖细胞建立自分泌或旁分泌作用而加强本发明的凋亡诱导能力。通过提高GAP连接的数量来增加细胞间信号传导将增加对邻近的过度增殖细胞群的抗过度增殖作用。在其它实施方案中，细胞抑制剂或分化剂可与本发明组合使用以提高治疗的抗过度增殖功效。预期细胞粘附的抑制剂会提高本发明的功效。细胞粘附抑制剂的实例有粘着斑激酶(FAK)抑制剂和洛伐他汀。可进一步预期的是，提高过度增殖细胞对凋亡的敏感性的其它药剂如抗体c225可与本发明组合使用以提高治疗功效。
在引进细胞毒性化学治疗药物后，在癌症的治疗方面已经取得了许多进展。然而，化学疗法的后果之一是形成/获得了抗药性表型和形成了多重抗药性。抗药性的形成仍然是治疗这类肿瘤的主要障碍，并且因此，对诸如基因疗法的替代方法的需求是显而易见的。
与化学疗法、辐射疗法或生物疗法结合使用的另一种形式的疗法包括热疗，其程序是使患者的组织暴露于高温(高达106℉)。局部、区域性或全身热疗的应用中可能涉及外部或内部加热装置。局部热疗涉及对诸如肿瘤的小区域施加热量。可用来自身体外部的装置的靶向肿瘤的高频波在外部产生热量。内部热量可涉及无菌探针，包括细的加热丝或装有温水的空心管、植入式微波天线或射频电极。
患者的器官或肢体受热进行区域性治疗，这是使用诸如磁体的产生高能量的装置完成的。或者，可将患者的一些血液取出来并加热，之后再灌注到将进行内部加热的区域当中。在癌症已全身扩散的情况下也可实施全身加热。温水毯、热蜡、感应线圈和热处理室可用于此目的。
技术人员可参考“Remington's Pharmaceutical Sciences”第15版的第33章，特别是第624-652页。根据所治疗的受试者的病状，必然会发生一些剂量的变化。施用负责人在任何情况下都将确定对于个体受试者的适当剂量。此外，对于人类施用，制剂应满足FDA生物制品标准办公室要求的无菌性、热原性、一般安全性及纯度标准。
还应指出的是，任何前述疗法本身可证明在治疗癌症中是有用的。
V.合成方法
在一些方面，可采用如本申请中所述的有机化学方法来合成本发明的化合物。可采用本领域技术人员所应用的有机化学原理和技术对这些方法进行进一步的修改和优化。在例如以引用的方式并入本文的March’s Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure(2007)中教导了这类原理和技术。
A.工艺放大
可采用本领域技术人员所应用的工艺化学原理和技术进一步修改和优化本文所述的合成方法，以用于分批或连续的制备、中试或大规模生产。在例如以引用的方式并入本文的Practical Process Research&Development(2000)中教导了这类原理和技术。本文所述的合成方法可用于生产制备规模量的本文所述的埃博霉素类似物。
B.化学定义
当在化学基团的背景下使用时：“氢”意指-H；“羟基”意指-OH；“氧代”意指＝O；“羰基”意指-C(＝O)-；“羧基”意指-C(＝O)OH(也写成-COOH或-CO2H)；“卤代基”独立地意指-F、-Cl、-Br或-I；“氨基”意指-NH2；“羟氨基”意指-NHOH；“硝基”意指-NO2；亚氨基意指＝NH；“氰基”意指-CN；“异氰酸酯”意指-N＝C＝O；“叠氮基”意指-N3；“肼”意指-NHNH2；在单价背景下的“磷酸酯”意指-OP(O)(OH)2或其去质子化形式；在二价背景下的“磷酸酯”意指-OP(O)(OH)O-或其去质子化形式；“巯基”意指-SH；且“硫代”意指＝S；“羟基磺酰基”意指-SO3H，“磺酰基”意指-S(O)2-；且“亚磺酰基”意指-S(O)-。
在化学式的背景下，符号“-”意指单键，“＝”意指双键，且“≡”意指三键。符号“”表示任选的键，其如果存在的话是单键或双键。符号表示单键或双键。因此，例如，式包括 并且要理解的是，没有一个这种环原子形成多于一个双键的一部分。此外，要注意的是，当连接一个或两个立构原子时，共价键符号“-”不指示任何优选的立体化学。相反，其涵盖所有的立体异构体以及它们的混合物。穿过键垂直画出的符号(例如，对于甲基的)指示基团的附接点。要注意的是，对于较大的基团，通常仅以这种方式标示附接点，以便帮助读者明确地识别附接点。符号意指其中与楔形的粗端附接的基团“出离页面”的单键。符号意指其中与楔形的粗端附接的基团“进入页面”的单键。符号意指其中双键周围的几何形式(例如，E或者Z)未定义的单键。因此这两种选项以及它们的组合都是所预期的。本申请中所示的结构的原子上的任何未定义的原子价都隐含地表示与该原子键合的氢原子。碳原子上的粗点指示与该碳附接的氢的定向出离纸面。
当基团“R”被描述为环系上的“悬空基团”时，例如在下式中：
则R可替代与任何环原子附接的任何氢原子，包括所描述的、暗指的或明确定义的氢，只要形成稳定的结构即可。当基团“R”被描述为稠环系上的“悬空基团”时，例如在下式中：
则R可替代与任一稠环的任何环原子附接的任何氢，除非另有规定。可替代的氢包括所描述的氢(例如，与上式中的氮附接的氢)、暗指的氢(例如，上式中未显示但理解为存在的氢)、明确定义的氢以及其存在取决于环原子的特质的任选的氢(例如，当X等于-CH-时与基团X附接的氢)，只要形成稳定的结构即可。在所描述的实例中，R可位于稠环系的5元或6元环上。在上式中，括在括号里紧跟基团“R”的下标字母“y”表示数值变量。除另有规定外，此变量可以是0、1、2或大于2的任何整数，仅受环或环系的可替代氢原子的最大数目的限制。
对于下面的基团和类别，以下括号里的下标进一步定义基团/类别如下：“(Cn)”定义基团/类别中的碳原子的确切数目(n)。“(C≤n)”定义可在基团/类别中的碳原子的最大数目(n)，对于所讨论的基团而言，最小数目尽可能小，例如，要理解的是，基团“烯基(C≤8)”或类别“烯烃(C≤8)”中的碳原子的最小数目为两个。例如，“烷氧基(C≤10)”表示具有1至10个碳原子的那些烷氧基基团。(Cn-n′)定义基团中的碳原子的最小数目(n)和最大数目(n′)两者。类似地，“烷基(C2-10)”表示具有2至10个碳原子的那些烷基基团。
如本文所用的术语“饱和”意指除了下面指出的情况之外，如此修饰的化合物或基团没有碳-碳双键并且没有碳-碳三键。在饱和基团的取代形式的情况下，可存在一个或多个碳氧双键或碳氮双键。并且当存在这种键时，则不排除可作为酮-烯醇互变异构或亚胺/烯胺互变异构的一部分存在的碳-碳双键。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“脂族”表示如此修饰的化合物/基团是无环或环状的，但非芳族烃化合物或基团。在脂族化合物/基团中，碳原子可呈直链、支链或非芳族环(脂环族)连结在一起。脂族化合物/基团可以是饱和的，即通过单键连结(烷烃/烷基)，或者是不饱和的，具有一个或多个双键(烯烃/烯基)或具有一个或多个三键(炔烃/炔基)。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烷基”是指具有作为附接点的碳原子、直链或支链无环结构且没有除了碳和氢以外的原子的单价饱和脂族基团。基团-CH3(Me)、-CH2CH3(Et)、-CH2CH2CH3(n-Pr或丙基)、-CH(CH3)2(i-Pr、iPr或异丙基)、-CH2CH2CH2CH3(n-Bu)、-CH(CH3)CH2CH3(仲丁基)、-CH2CH(CH3)2(异丁基)、-C(CH3)3(叔丁基、t-丁基、t-Bu或tBu)和-CH2C(CH3)3(新戊基)是烷基基团的非限制性实例。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烷二基”是指具有作为附接点的一个或两个饱和碳原子、直链或支链无环结构、没有碳-碳双键或三键并且没有除了碳和氢以外的原子的二价饱和脂族基团。基团-CH2-(亚甲基)、-CH2CH2-、-CH2C(CH3)2CH2-和-CH2CH2CH2-是烷二基基团的非限制性实例。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“亚烷基”是指二价基团＝CRR′，其中R和R′独立地为氢或烷基。亚烷基基团的非限制性实例包括：＝CH2、＝CH(CH2CH3)和＝C(CH3)2。“烷烃”是指化合物H-R，其中R是如上所定义的术语烷基。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。以下基团是取代的烷基基团的非限制性实例：-CH2OH、-CH2Cl、-CF3、-CH2CN、-CH2C(O)OH、-CH2C(O)OCH3、-CH2C(O)NH2、-CH2C(O)CH3、-CH2OCH3、-CH2OC(O)CH3、-CH2NH2、-CH2N(CH3)2和-CH2CH2Cl。术语“卤代烷基”是取代的烷基的子组，其中一个或多个氢原子已经被卤代基基团取代，并且没有除了碳、氢和卤素以外的其它原子存在。基团-CH2Cl是卤代烷基的非限制性实例。术语“氟代烷基”是取代的烷基的子组，其中一个或多个氢已经被氟代基团取代，并且没有除了碳、氢和氟以外的其它原子存在。基团-CH2F、-CF3和-CH2CF3是氟代烷基基团的非限制性实例。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“环烷基”是指具有作为附接点的碳原子、环或环状结构、没有碳-碳双键或三键且没有除了碳和氢以外的原子的单价饱和脂族基团，所述碳原子形成一个或多个非芳族环结构的一部分。环烷基基团的非限制性实例包括：-CH(CH2)2(环丙基)、环丁基、环戊基或环己基。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“环烷二基”是指具有作为附接点的一个或两个碳原子、环或环状结构、没有碳-碳双键或三键且没有除了碳和氢以外的原子的二价饱和脂族基团，所述碳原子形成一个或多个非芳族环结构的一部分。是环烷二基基团的非限制性实例。“环烷烃”是指化合物H-R，其中R是如上所定义的术语环烷基。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。以下基团是取代的环烷基基团的非限制性实例：-C(OH)(CH2)2、
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烯基”是指具有作为附接点的碳原子、直链或支链无环结构、至少一个非芳族碳-碳双键、没有碳-碳三键且没有除了碳和氢以外的原子的单价不饱和脂族基团。烯基基团的非限制性实例包括：-CH＝CH2(乙烯基)、-CH＝CHCH3、-CH＝CHCH2CH3、-CH2CH＝CH2(烯丙基)、-CH2CH＝CHCH3和-CH＝CHCH＝CH2。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烯烃二基”是指具有作为附接点的两个碳原子、直链或支链环、环状或无环结构、至少一个非芳族碳-碳双键、没有碳-碳三键且没有除了碳和氢以外的原子的二价不饱和脂族基团。基团-CH＝CH-、-CH＝C(CH3)CH2-和-CH＝CHCH2-是烯烃二基基团的非限制性实例。要注意的是，虽然烯烃二基基团是脂族的，但一旦在两端被连接，则不排除此基团形成芳族结构的一部分。术语“烯烃”是指具有式H-R的化合物，其中R是如上所定义的术语烯基。“末端烯烃”是指具有仅一个碳-碳双键的烯烃，其中该键在分子的一端形成乙烯基基团。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。基团-CH＝CHF、-CH＝CHCl和-CH＝CHBr是取代的烯基基团的非限制性实例。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“炔基”是指具有作为附接点的碳原子、直链或支链无环结构、至少一个碳-碳三键且没有除了碳和氢以外的原子的单价不饱和脂族基团。如本文所用，术语炔基不排除存在一个或多个非芳族碳-碳双键。基团-C≡CH、-C≡CCH3和-CH2C≡CCH3是炔基基团的非限制性实例。“炔烃”是指化合物H-R，其中R是炔基。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“芳基”是指具有作为附接点的芳族碳原子的单价不饱和芳族基团，所述碳原子形成一个或多个六元芳族环结构的一部分，其中环原子全是碳，且其中基团的组成没有除了碳和氢以外的原子。如果存在多于一个的环，则环可以是稠合的或不稠合的。如本文所用，该术语不排除存在与第一芳族环或存在的任何另外的芳族环附接的一个或多个烷基或芳烷基基团(碳数目限制允许的话)。芳基基团的非限制性实例包括苯基(Ph)、甲基苯基、(二甲基)苯基、-C6H4CH2CH3(乙基苯基)、萘基和衍生自联苯的单价基团。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“芳烃二基”是指具有作为附接点的两个芳族碳原子的二价芳族基团，所述碳原子形成一个或多个六元芳族环结构的一部分，其中环原子全是碳，且其中单价基团的组成没有除了碳和氢以外的原子。如本文所用，该术语不排除存在与第一芳族环或存在的任何另外的芳族环附接的一个或多个烷基、芳基或芳烷基基团(碳数目限制允许的话)。如果存在多于一个的环，则环可以是稠合的或不稠合的。不稠合的环可经由以下中的一者或多者进行附接：共价键、烷二基或烯二基基团(碳数目限制允许的话)。芳烃二基基团的非限制性实例包括：
“芳烃”是指化合物H-R，其中R是如上所定义的术语芳基。苯和甲苯是芳烃的非限制性实例。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“芳烷基”是指单价基团-烷二基-芳基，其中术语烷二基和芳基各自以与上文提供的定义一致的方式使用。芳烷基的非限制性实例有：苯基甲基(苄基，Bn)和2-苯基-乙基。当术语芳烷基与“取代的”修饰词一起使用时，来自烷二基和/或芳基基团的一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。取代的芳烷基的非限制性实例有：(3-氯苯基)-甲基和2-氯-2-苯基-乙-1-基。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“杂芳基”是指具有作为附接点的芳族碳原子或氮原子的单价芳族基团，所述碳原子或氮原子形成一个或多个芳族环结构的一部分，其中环原子中的至少一个是氮、氧或硫，且其中杂芳基基团的组成没有除了碳、氢、芳族氮、芳族氧和芳族硫以外的原子。如果存在多于一个的环，则环可以是稠合的或不稠合的。如本文所用，该术语不排除存在与芳族环或芳族环系附接的一个或多个烷基、芳基和/或芳烷基基团(碳数目限制允许的话)。杂芳基基团的非限制性实例包括呋喃基、咪唑基、吲哚基、吲唑基、异噁唑基、甲基吡啶基、噁唑基、苯基吡啶基、吡啶基、吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、三嗪基、四唑基、噻唑基、噻吩基和三唑基。如本文所使用的术语，术语杂芳基包括嘧啶碱和碱类似物。术语“N-杂芳基”是指具有作为附接点的氮原子的杂芳基基团。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“杂芳烃二基”是指具有作为两个附接点的两个芳族碳原子、两个芳族氮原子或一个芳族碳原子和一个芳族氮原子的二价芳族基团，所述原子形成一个或多个芳族环结构的一部分，其中环原子中的至少一个是氮、氧或硫，且其中二价基团的组成没有除了碳、氢、芳族氮、芳族氧和芳族硫以外的原子。如果存在多于一个的环，则环可以是稠合的或不稠合的。不稠合的环可经由以下中的一者或多者进行附接：共价键、烷二基或烯烃二基基团(碳数目限制允许的话)。如本文所用，该术语不排除存在与芳族环或芳族环系附接的一个或多个烷基、芳基、芳烷基和/或杂芳烷基基团(碳数目限制允许的话)。杂芳烃二基基团的非限制性实例包括：
“杂芳烃”是指化合物H-R，其中R是杂芳基。吡啶和喹啉是杂芳烃的非限制性实例。当这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“杂芳烷基”是指单价基团-烷二基-杂芳基，其中术语烷二基和杂芳基各自以与上文提供的定义一致的方式使用。杂芳烷基的非限制性实例有：N-吡唑基甲基或喹啉基甲基。当术语杂芳烷基与“取代的”修饰词一起使用时，来自烷二基和/或杂芳基基团的一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。取代的芳烷基的非限制性实例有：(3-硝基嘧啶基)-甲基和4-氯-2-喹啉基-乙-1-基。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“酰基”是指基团-C(O)R，其中R是氢、如上所定义的术语烷基、环烷基、芳基、芳烷基或杂芳基。基团-CHO、-C(O)CH3(乙酰基，Ac)、-C(O)CH2CH3、-C(O)CH2CH2CH3、-C(O)CH(CH3)2、-C(O)CH(CH2)2、-C(O)C6H5、-C(O)C6H4CH3、-C(O)CH2C6H5、-C(O)(咪唑基)是酰基基团的非限制性实例。“硫代酰基”以类似的方式定义，不同的是基团-C(O)R的氧原子已经被硫原子替代，-C(S)R。术语“醛”对应于如上所定义的烷烃，其中氢原子中的至少一个已经被-CHO基团替代。“酸酐”是式ROR′的基团，其中R和R′是如上所定义的酰基基团。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子(包括直接附接羰基或硫代羰基基团的氢原子，如果有的话)已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。基团-C(O)CH2CF3、-CO2H(羧基)、-CO2CH3(甲基羧基)、-CO2CH2CH3、-C(O)NH2(氨甲酰基)和-CON(CH3)2是取代的酰基基团的非限制性实例。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烷基氨基”是指基团-NHR，其中R是如上所定义的术语烷基。烷基氨基基团的非限制性实例包括：-NHCH3和-NHCH2CH3。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“二烷基氨基”是指基团-NRR′，其中R和R′可各自独立地为相同或不同的烷基基团，或者R和R′可合起来表示烷二基。二烷基氨基基团的非限制性实例包括：-N(CH3)2、-N(CH3)(CH2CH3)和N-吡咯烷基。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烷氧基氨基”、“环烷基氨基”、“烯基氨基”、“环烯基氨基”、“炔基氨基”、“芳基氨基”、“芳烷基氨基”、“杂芳基氨基”、“杂环烷基氨基”和“烷基磺酰基氨基”是指定义为-NHR的基团，其中R分别是烷氧基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂环烷基和烷基磺酰基。芳基氨基基团的非限制性实例有-NHC6H5。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“酰氨基”(酰基氨基)是指基团-NHR，其中R是如上所定义的术语酰基。酰氨基基团的非限制性实例有-NHC(O)CH3。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烷基亚氨基”是指二价基团＝NR，其中R是如上所定义的术语烷基。术语“烷基氨基二基”是指二价基团-NH-烷二基-、-NH-烷二基-NH-或-烷二基-NH-烷二基-。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。基团-NHC(O)OCH3和-NHC(O)NHCH3是取代的酰氨基基团的非限制性实例。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烷氧基”是指基团-OR，其中R是如上所定义的术语烷基。非限制性实例包括：-OCH3(甲氧基)、-OCH2CH3(乙氧基)、-OCH2CH2CH3、-OCH(CH3)2(异丙氧基)和-OC(CH3)3(叔丁氧基)。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“环烷氧基”、“烯基氧基”、“炔基氧基”、“芳氧基”、“芳烷氧基”、“杂芳氧基”、“杂环烷氧基”和“酰氧基”是指定义为-OR的基团，其中R分别是环烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂环烷基和酰基。术语“烷氧基二基”是指二价基团-O-烷二基-、-O-烷二基-O-或-烷二基-O-烷二基-。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烷硫基”和“酰硫基”是指基团-SR，其中R分别是烷基和酰基。术语“烷硫基二基”是指二价基团-S-烷二基-、-S-烷二基-S-或-烷二基-S-烷二基-。术语“醇”对应于如上所定义的烷烃，其中氢原子中的至少一个已经被羟基基团替代。术语“醚”对应于如上所定义的烷烃或环烷烃，其中氢原子中的至少一个已经被烷氧基或环烷氧基基团替代。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。
在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“烷基甲硅烷基”分别是指基团-SiR3，其中每个R是如上所定义的术语烷基。术语“烯基甲硅烷基”、“炔基甲硅烷基”、“芳基甲硅烷基”、“芳烷基甲硅烷基”、“杂芳基甲硅烷基”和“杂环烷基甲硅烷基”以类似的方式定义。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。
术语“膦”和“磷烷”在本文中同义地使用。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，这些术语是指式PR3的化合物，其中每个R独立地为氢、如上所定义的术语烷基、环烷基、烯基、芳基或芳烷基。非限制性实例包括PMe3、PPh3和PCy3(三环己基膦)。术语“三烷基膦”和“三烷基磷烷”也是同义的。这类基团是膦的子组，其中每个R是烷基基团。在没有“取代的”修饰词情况下使用时，术语“二膦”是指式R2-P-L-P-R2的化合物，其中每个R独立地为氢、烷基、环烷基、烯基、芳基或芳烷基，且其中L是烷二基、环烷二基、烯二基或芳烃二基。当任何这些术语与“取代的”修饰词一起使用时，与碳原子附接的一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH2、-NO2、-N3、-CO2H、-CO2CH3、-CN、-SH、-OCH3、-SCH3、-OCH2CH3、-C(O)CH3、-NHCH3、-NHCH2CH3、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)CH3、-NHC(O)CH3、-S(O)2OH或-S(O)2NH2替代。
如上面所指出的那样，在一些方面，细胞靶向部分是抗体。如本文所用，术语“抗体”旨在包括对指定的蛋白质或肽或其片段有特异反应性的免疫球蛋白及其片段。合适的抗体包括但不限于人抗体、灵长类化抗体、去免疫化抗体、嵌合抗体、双特异性抗体、人源化抗体、缀合抗体(即，与其它蛋白质、放射性标记、细胞毒素缀合或融合的抗体)、小模块免疫药物(“SMIPTM”)、单链抗体、骆驼样(cameloid)抗体、抗体样分子(例如，抗运载蛋白(anticalin))和抗体片段。如本文所用，术语“抗体”还包括完整单克隆抗体、多克隆抗体、单结构域抗体(例如，鲨鱼单结构域抗体(例如，IgNAR或其片段))、由至少两种完整抗体形成的多特异性抗体(例如，双特异性抗体)和抗体片段，只要它们表现出所需的生物学活性即可。用于本文的抗体多肽可以是任何类型的(例如，IgG、IgM、IgA、IgD和IgE)。一般地，IgG和/或IgM是优选的，因为它们是生理情况下最常见的抗体，并且因为它们最容易在实验室环境中制出。如本文所用，术语抗体还涵盖抗体片段，如完整抗体的一部分，举例如抗体的抗原结合区或可变区。抗体片段的实例包括Fab、Fab’、F(ab’)2、Fc和Fv片段；三链抗体；四链抗体；线性抗体；单链抗体分子；和由抗体片段形成的多特异性抗体。术语“抗体片段”还包括通过与特异性抗原结合以形成复合物而起抗体作用的任何合成或基因工程蛋白质。例如，抗体片段包括分离的片段、由重链和轻链的可变区组成的“Fv”片段、其中轻链和重链可变区通过肽接头附接的重组单链多肽分子(“ScFv蛋白”)和由模拟高变区的氨基酸残基组成的最小识别单位。氧附接抗体是具有化学官能团的抗体，使得抗体与接头或化合物之间的附接是经由氧原子连结的。类似地，氮附接抗体是具有化学官能团的抗体，使得抗体与接头或化合物之间的附接是经由氮原子连结的。
本申请背景下的“碱”是具有可接受质子的孤对电子的化合物。碱的非限制性实例可包括三乙胺、金属氢氧化物、金属醇盐、金属氢化物或金属烷烃。烷基锂或有机锂是式烷基(C≤12)-Li的化合物。含氮碱有烷基胺、二烷基氨基、三烷基胺、含氮杂环烷烃或杂芳烃，其中碱可接受质子以形成带正电荷的物质。例如但不限于，含氮碱可以是4,4-二甲基吡啶、吡啶、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯、二异丙基乙胺或三乙胺。金属醇盐是烷氧基基团，其中作为连接的点的氧原子具有额外的电子，并且因此具有负电荷，该负电荷被金属离子带电平衡。例如，金属醇盐可以是叔丁醇钠或甲醇钾。如本文所用，术语“强碱”表示具有大于20的pKa的碱。
本申请背景下的“金属”是过渡金属或者I或II族金属。其也可以是13族元素，如但不限于硼和铝。
本申请背景下的“接头”是可用于将一个或多个分子与本公开的化合物连结的二价化学基团。接头也可以是氨基酸链，其中羧基和氨基末端用作接头的附接点。在一些实施方案中，接头在每个末端含有反应性官能团，如羧基、酰胺、胺、羟基、巯基、醛或酮，其用于将一个或多个分子与本公开的化合物连结。在一些非限制性实例中，-CH2CH2CH2CH2-、-C(O)CH2CH2CH2-、-OCH2CH2NH-、-NHCH2CH2NH-和-(OCH2CH2)n-是接头，其中n介于1-1000之间。
“胺保护基团”是本领域中充分理解的。胺保护基团是在对分子的一些其它部分改性的反应期间防止胺基团反应的基团，并且可以很容易地除去以产生所需的胺。胺保护基团至少可见于以引用的方式并入本文的Greene和Wuts，1999中。氨基保护基团的一些非限制性实例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、α-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基等；磺酰基基团，如苯磺酰基、对甲苯磺酰基等；烷氧基-或芳氧基羰基(其与经保护的胺形成氨基甲酸酯)，如苄氧羰基(Cbz)、对氯苄氧羰基、对甲氧基苄氧羰基、对硝基苄氧羰基、2-硝基苄氧羰基、对溴苄氧羰基、3,4-二甲氧基苄氧羰基、3,5-二甲氧基苄氧羰基、2,4-二甲氧基苄氧羰基、4-甲氧基苄氧羰基、2-硝基-4,5-二甲氧基苄氧羰基、3,4,5-三甲氧基苄氧羰基、1-(对联苯基)-1-甲基乙氧羰基、α,α--二甲基-3,5-二甲氧基苄氧羰基、二苯甲基氧羰基、叔丁氧羰基(Boc)、二异丙基甲氧羰基、异丙氧羰基、乙氧羰基、甲氧羰基、烯丙氧羰基(Alloc)、2,2,2-三氯乙氧羰基、2-三甲基甲硅烷基乙氧羰基(Teoc)、苯氧羰基、4-硝基苯氧羰基、芴基-9-甲氧羰基(Fmoc)、环戊氧羰基、金刚烷氧羰基、环己氧羰基、苯硫基羰基等；芳烷基基团，如苄基、三苯基甲基、苄氧基甲基等；和甲硅烷基基团，如三甲基甲硅烷基等。另外，“胺保护基团”可以是二价保护基团，使得伯胺上的两个氢原子都被单一的保护基团替代。在这种情况下，胺保护基团可以是邻苯二甲酰亚胺(phth)或其取代的衍生物，其中术语“取代的”如上所定义。在一些实施方案中，卤化的邻苯二甲酰亚胺衍生物可以是四氯邻苯二甲酰亚胺(TCphth)。当在本文中使用时，“经保护的氨基基团”是式PGMANH-或PGDAN-的基团，其中PGMA是单价胺保护基团，其也可以被描述为“被单价保护的氨基基团”，且PGDA是如上所述的二价胺保护基团，其也可以被描述为“被二价保护的氨基基团”。
“羟基保护基团”是本领域中充分理解的。羟基保护基团是在对分子的一些其它部分改性的反应期间防止羟基基团反应的基团，并且可以很容易地除去以产生所需的羟基。羟基保护基团至少可见于以引用的方式并入本文的Greene和Wuts，1999中。羟基保护基团的一些非限制性实例包括酰基基团，如甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、α-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基等；磺酰基基团，如苯磺酰基、对甲苯磺酰基等；酰氧基基团，如苄氧羰基(Cbz)、对氯苄氧羰基、对甲氧基苄氧羰基、对硝基苄氧羰基、2-硝基苄氧羰基、对溴苄氧羰基、3,4-二甲氧基苄氧羰基、3,5-二甲氧基苄氧羰基、2,4-二甲氧基苄氧羰基、4-甲氧基苄氧羰基、2-硝基-4,5-二甲氧基苄氧羰基、3,4,5-三甲氧基苄氧羰基、1-(对联苯基)-1-甲基乙氧羰基、α,α-二甲基-3,5-二甲氧基苄氧羰基、二苯甲基氧羰基、叔丁氧羰基(Boc)、二异丙基甲氧羰基、异丙氧羰基、乙氧羰基、甲氧羰基、烯丙氧羰基(Alloc)、2,2,2-三氯乙氧羰基、2-三甲基甲硅烷基乙氧羰基(Teoc)、苯氧羰基、4-硝基苯氧羰基、芴基-9-甲氧羰基(Fmoc)、环戊氧羰基、金刚烷氧羰基、环己氧羰基、苯硫基羰基等；芳烷基基团，如苄基、三苯基甲基、苄氧基甲基等；和甲硅烷基基团，如三甲基甲硅烷基等。当在本文中使用时，经保护的羟基基团是式PGHO-的基团，其中PGH是如上所述的羟基保护基团。
“硫醇保护基团”是本领域中充分理解的。硫醇保护基团是在对分子的一些其它部分改性的反应期间防止巯基基团反应的基团，并且可以很容易地除去以产生所需的巯基基团。硫醇保护基团至少可见于以引用的方式并入本文的Greene和Wuts，1999中。硫醇保护基团的一些非限制性实例包括酰基基团，如甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、α-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基等；磺酰基基团，如苯磺酰基、对甲苯磺酰基等；酰氧基基团，如苄氧羰基(Cbz)、对氯苄氧羰基、对甲氧基苄氧羰基、对硝基苄氧羰基、2-硝基苄氧羰基、对溴苄氧羰基、3,4-二甲氧基苄氧羰基、3,5-二甲氧基苄氧羰基、2,4-二甲氧基苄氧羰基、4-甲氧基苄氧羰基、2-硝基-4,5-二甲氧基苄氧羰基、3,4,5-三甲氧基苄氧羰基、1-(对联苯基)-1-甲基乙氧羰基、α,α-二甲基-3,5-二甲氧基苄氧羰基、二苯甲基氧羰基、叔丁氧羰基(Boc)、二异丙基甲氧羰基、异丙氧羰基、乙氧羰基、甲氧羰基、烯丙氧羰基(Alloc)、2,2,2-三氯乙氧羰基、2-三甲基甲硅烷基乙氧羰基(Teoc)、苯氧羰基、4-硝基苯氧羰基、芴基-9-甲氧羰基(Fmoc)、环戊氧羰基、金刚烷氧羰基、环己氧羰基、苯硫基羰基等；芳烷基基团，如苄基、三苯基甲基、苄氧基甲基等；和甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基基团等。当在本文中使用时，经保护的硫醇基团是式PGTS-的基团，其中PGT是如上所述的硫醇保护基团。
“立体异构体”或“光学异构体”是给定化合物的异构体，其中相同的原子与相同的其它原子键合，但其中这些原子在三维中的构型不同。“对映体”是给定化合物的像左手和右手一样彼此为镜像的立体异构体。“非对映体”是给定化合物的不是对映体的立体异构体。手性分子含有手性中心，也称为立体中心或立构中心，其是带有基团的分子中的任意点，但不一定是原子，使得任何两个基团换位产生立体异构体。在有机化合物中，手性中心通常是碳、磷或硫原子，但其它原子也可能是有机和无机化合物中的立体中心。分子可具有多个立体中心，从而使其有许多立体异构体。在立体异构归因于四面体立构中心(例如，四面体碳)的化合物中，假想可能的立体异构体的总数不会超过2n，其中n是四面体立体中心的数目。具有对称性的分子常常具有比最大可能数目少的立体异构体。对映体的50:50混合物被称为外消旋混合物。或者，对映体的混合物可以是对映体富集的，使得一种对映体以大于50％的量存在。通常，可采用本领域中已知的技术来拆分或分离对映体和/或非对映体。可预期的是，对于立体化学尚未定义的任何立体中心或手性轴，该立体中心或手性轴可以其R形式、S形式或作为R和S形式的混合物存在，包括外消旋和非外消旋混合物。如本文所用，短语“基本上不含其它立体异构体”意指组合物含有≤15％、更优选≤10％、甚至更优选≤5％或最优选≤1％的别的立体异构体。
VI.实施例
包括以下实施例以说明本发明的优选实施方案。本领域技术人员应该认识到，在随后的实施例中公开的技术表示发明人发现在本发明的实践中发挥作用良好的技术，并且因此可以被认为构成其实践的优选方式。然而，本领域技术人员根据本公开内容应该认识到，可对所公开的具体实施方案进行许多改动且仍然获得相似或类似的结果而不偏离本发明的实质和范围。
实施例1-埃博霉素及类似物的合成
合成.用于引入氨基基团的逆合成分析示于图2。方案1总结了由容易得到的结构单元3-(甲硫基)-1H-吡唑(16a)(Schank等人，1994)和可商购获得的3-(三氟甲基)-1H-吡唑(16b)合成Teoc-保护的和Boc-保护的氨基乙基吡唑类似物5和6。因此，16a在碱性条件(NaH)下用N-boc溴化物17a(通过标准方法由相应的可商购获得的溴胺制备)烷基化(Shoji等人，2007)产生吡唑衍生物18a(74％产率)，通过锂化(nBuLi)接着添加nBuSnCl将其区域选择性地甲锡烷基化(stannylated)(38％产率)。后者与乙烯基碘15进行钯催化偶联(Nicolaou等人，1900；Nicolaou等人，2000和Pratt，2008)(Pd2(dba)3、AsPh3、CuI)以74％产率得到埃博霉素类似物5。使用N-boc保护的溴化物17a和乙烯基碘15对三氟甲基吡唑16b进行类似处理(Nicolaou等人，1900；Nicolaou等人，2000和Pratt，2008)，经由中间体18b(67％产率)和19b(42％产率)得到埃博霉素类似物6[最后步骤(19b+15→6)的产率65％]。
方案1.类似物5-7的合成。试剂和条件：a)NaH、3-(甲硫基)-1H-吡唑(16a)或3-(三氟甲基)-1H-吡唑(16b)(1.2当量)、17a或17b(1.0当量)、THF，0→60℃，12h(对于18a为74％，对于18b为67％，对于18c为96％)；b)nBuLi(3.0当量)、nBu3SnCl(1.1当量)、THF，-78℃，30分钟(对于19a为38％，对于19b为42％，对于19c为54％)；c)Pd2(dba)3(0.1当量)、AsPh3(0.2当量)、CuI(0.4当量)、15(1.0当量)、DMF，25℃(对于5为74％，对于6为65％，对于7为77％)。缩写：dba＝二亚苄基丙酮。
由可商购获得的三氟甲基吡唑16b和N-Teoc保护的溴化物17b(WO 2012/003498A1)以类似的方式[最后步骤(19c+15→7)的产率42％]经由中间体18c(96％产率)和19c(54％产率)制备类似物7。值得注意的是，17a-b、18a-c、19a-c且特别是5、6和7在其1H和13C NMR谱中表现出信号分裂，显然是由于围绕其庞大保护基团(分别为Boc和Teoc)的旋转受阻。
为了得到游离氨基埃博霉素，在各种条件下从类似物5-7中移除Boc(布朗斯特和路易斯酸)或Teoc(氟化物)基团的若干尝试都遭受失败。反应混合物的TLC和LCMS分析显示了快速分解的游离胺的释放。得出的结论是，如此安置的伯氨基基团的强碱性及亲核性质是这些瞬时检测到的化合物的不稳定性的原因，设计并合成了苯胺型类似物(即8-14，图3)。发明人推断，此部分的较弱碱性特性将消除其可能在分子内或分子间施加的对分子的破坏作用，但仍具有足够的反应性以形成用于缀合目的的酰胺键。此外，苯胺相当耐受预期的斯蒂尔偶联(Stille coupling)条件，使得将没有必要进行最终的脱保护步骤(Izgu和Hoye，2012)。
方案2.5-溴吡唑22a和22b的合成。试剂和条件：a)DHP(xs)、TFA(0.1当量)，100℃，12h(对于20a和20b是定量的)；b)nBuLi(1.3当量)、Br2(1.3当量)、THF，-78℃，1.5h(对于21a为84％，对于21b为78％)；c)Me3SO2OH(5.0当量)、MeOH，0℃→25℃，1h(对于22a为95％，对于22b为91％)。缩写：DHP＝3,4-二氢-2H-吡喃；TFA＝三氟乙酸。
方案3.类似物8-10的合成。试剂和条件：(a)方法1.NaH(1.5当量)、22c或22d(1.1当量)、THF，0→25℃(对于23a为79％，对于23c为74％)。方法2.K2CO3(1.2当量)、22c(1.01当量)、DMF，25→80℃，12h[对于23b为20％(对于非所需的N区域异构体为60％)]。(b)SnCl2(3.0当量)、浓HCl、iPrOH，70℃(对于24a为75％，对于24b为76％，对于24c为70％)；(c)nBu3SnSnnBu3(3.0当量)、Pd(PPh3)4(0.1当量)、PhMe，110℃，12h(对于25a为80％，对于25b为66％，对于25c为78％)；(d)Pd2(dba)3(0.1当量)、AsPh3(0.2当量)、CuI(0.4当量)、15(1.0当量)、DMF，25℃(对于8为84％，对于9为84％，对于10为75％)。
方案2描述分别由可商购获得的吡唑16b和16c合成溴吡唑22a和22b。因此，在TFA存在下用3,4-二氢-2H-吡喃保护16b或16c以定量产率产生四氢吡喃衍生物20a或20b。这些中间体经由其锂化衍生物(nBuLi；Br2)区域选择性地进行溴化，得到溴吡唑21a(84％产率)和21b(78％产率)。后者的酸(MeSO2OH)介导的脱保护分别顺利地产生所需的吡唑结构单元22a(95％产率)和22b(91％产率)。
方案3总结了由溴吡唑22a和22b合成埃博霉素类似物8-10。22a或22b与可商购获得的1-氟-4-硝基苯(22c)在NaH存在下反应，导致通过亲核芳族取代形成N-芳基溴吡唑衍生物23a(79％产率)或23b(20％产率)。在HCl存在下用SnCl2最佳地实现将23a和23b内的硝基基团还原成相应的苯胺(24a，75％产率；24b，76％产率)(Xing和Ogata，1982以及Bellamy和Ou，1984)。后者使用nBu3SnSnnBu3进行后续的钯催化[Pd(PPh3)4]甲锡烷基化，分别得到锡烷25a(80％产率)和25b(66％产率)。由溴吡唑22a和可商购获得的1-氟-4-硝基苯(22d)开始的类似顺序的反应以与方案3中所示类似的产率产生所需的氨基锡烷25c。锡烷25a、25b和25c与乙烯基碘15进行钯催化偶联[Pd2(dba)3、AsPh3、CuI]，分别得到目标埃博霉素类似物8(84％产率)、9(84％产率)和10(75％产率)，如方案3中所示。
如方案4中所示，采用与上面针对埃博霉素8-10所述(方案3)类似的反应并以类似的产率分别由溴吡唑22a和可商购获得的硝基芳基氟22e-22h合成埃博霉素类似物11-14。
方案4.类似物11-14的合成。试剂和条件：(a)方法1.NaH(1.5当量)、22e或22g(1.1当量)、THF，0→25℃(对于23d为80％，对于23f为68％)方法2.K2CO3(1.2当量)、22f或22h(1.01当量)、DMF，25→80℃，12h(对于23e为58％，对于23g为89％)；e)SnCl2(3.0当量)、浓HCl、iPrOH，70℃(对于24d为63％，对于24e为72％，对于24f为57％，对于24g为85％)；f)nBu3SnSnnBu3(3.0当量)、Pd(PPh3)4(0.1当量)、PhMe，110℃，12h(对于25d为55％，对于25e为70％，对于25f为52％，对于25g为69％)；g)Pd2(dba)3(0.1当量)、AsPh3(0.2当量)、CuI(0.4当量)、15(1.0当量)、DMF，25℃(对于11为68％，对于12为63％，对于13为60％，对于14为91％)。
在一些方面，埃博霉素化合物被转化成氮丙啶类似物。采用Kürti-Falck氮丙啶化反应，如方案5中所示将埃博霉素B的环氧化物转化成氮丙啶类似物。首先，使埃博霉素B经受环外双键的氧化裂解，得到甲基酮。保护羟基基团后，将环氧化物还原成相应的双键。然后使双键经受Kürti-Falck氮丙啶化反应条件，得到相应的氮丙啶。
方案5.由埃博霉素B(1)合成12,13-氮丙啶埃博霉素B甲基酮29和30。试剂和条件：(a)O3；Me2S、CH2Cl2，-78℃，5分钟，94％；(b)TESOTf(3.0当量)、2,6-二甲基吡啶(4.0当量)、CH2Cl2，-78℃，15分钟，99％；(c)WCl6(2.0当量)、nBuLi(4.0当量)、THF，-78→25℃，40分钟；27，-20→0℃，2h，86％；(d)Rh2(esp)2(2摩尔％)、DPH(1.5当量)、CF3CH2OH，25℃，30分钟，90％；(e)31(5.0当量)、K2CO3(4.0当量)、DMF，65℃，12h，90％。缩写：DMF＝二甲基甲酰胺；DPH＝O-(2,4-二硝基苯基)羟胺；TBS＝叔丁基二甲基甲硅烷基；TES＝三乙基甲硅烷基；TFA＝三氟乙酸。THF＝四氢呋喃。
为了将甲基酮类似物(29)改性，如方案6和方案7中所概述的那样制备膦酸酯偶联配偶体。
方案6.膦酸酯36(A)、41(B)、44(B)和52(C)的合成。试剂和条件。A：a)NaSMe(3.0当量)、EtOH，25℃，3h，95％；b)tBuLi(1.2当量)；DMF(2.0当量)、Et2O，-78℃，20分钟；然后NaBH4(1.9当量)、MeOH，25℃，15分钟，总计75％；c)PPh3(1.05当量)、NBS(1.0当量)、THF，-78℃，5分钟，78％；d)P(OEt)3，120℃，2h，92％。B：a)nBuLi(1.2当量)；DMF(2.0当量)、Et2O，-78℃，20分钟；然后NaBH4(1.9当量)、MeOH，25℃，15分钟，总计66％；b)TBSCl(1.3当量)、咪唑(2.0当量)、CH2Cl2，25℃，12h，96％；c)tBuLi(1.2当量)；DMF(2.0当量)、Et2O，-78℃，20分钟；然后NaBH4(1.9当量)、MeOH，25℃，15分钟，总计78％；d)CBr4(1.7当量)、PPh3(1.7当量)、2,6-二甲基吡啶(0.4当量)、MeCN，0→25℃，45分钟，93％；e)P(OEt)3，160℃，3h，80％；f)TASF(2.5当量)、H2O(10当量)、DMF，0→25℃，12h，79％；g)Ts2O(1.5当量)、NEt3(2.0当量)、DMAP(0.1当量)，-20℃，30分钟；然后NaN3(3.0当量)、DMF，-20℃，15分钟，总计80％；h)5％Pd/C(10％w/w)、H2(1atm)、EtOAc，25℃，12h；然后Boc2O(4.0当量)、THF，25℃，4h，总计91％。C：a)nBuLi(1.0当量)；环氧乙烷(1.0当量)、BF3·OEt2(1.0当量)、Et2O，-78℃，40分钟，57％；b)TBSCl(1.2当量)、咪唑(1.5当量)、DMF，25℃，1h，99％；c)tBuLi(1.2当量)；DMF(2.0当量)、Et2O，-78℃，5分钟；然后NaBH4(1.9当量)、MeOH，25℃，15分钟，总计82％；d)PPh3(1.05当量)、NBS(1.0当量)、CH2Cl2，-78℃，25分钟，97％；e)P(OEt)3，160℃，2h，99％；f)HF·py(5.0当量)、THF，0℃，5h，99％；g)Ts2O(1.5当量)、NEt3(2.0当量)、DMAP(0.1当量)、CH2Cl2，0℃，40分钟；然后NaN3(3.0当量)、DMF，65℃，2h，总计78％；j)PPh3(3.0当量)、THF/H2O(9:1)，60℃，2h；然后Boc2O(3.0当量)、NEt3(3.0当量)、DMAP(0.2当量)、MeCN，25℃，4h，总计95％。缩写：Boc＝叔丁氧羰基；DMAP＝4-二甲基氨基吡啶；NBS＝N-溴代琥珀酰亚胺；TASF＝二氟三甲基硅酸三(二甲基氨基)锍；Ts＝4-甲苯磺酰基。
方案8.膦酸酯58(A)、59(A)、64(B)、67(C)和69(D)的合成。试剂和条件。A：a)50(2.0当量)、二甲苯，130℃，12h，68％；b)LiBH4(10当量)、Et2O，0→25℃，3h，82％；(c)PPh3(1.05当量)、NBS(1.0当量)、CH2Cl2，-78℃，10分钟，85％；(d)P(OEt)3，120℃，2h，99％；(e)TMSCl(5.0当量)、CH2Cl2，72h；然后(COCl)2(2.5当量)、DMF(催化)、CH2Cl2，0℃，4h；然后CF3CH2OH(4.0当量)、NEt3(6.0当量)、DMAP(0.02当量)、CH2Cl2，25℃，12h，总计86％。B：a)Boc2O(1.2当量)、NEt3(2.0当量)、DMAP(0.1当量)、THF，60℃，3h，88％；b)LiBH4(3.0当量)、Et2O，0→25℃，4h，94％；c)PPh3(1.05当量)、NBS(1.0当量)、CH2Cl2，-78℃，15分钟，78％；d)P(OEt)3，120℃，3h，87％。C：a)PPh3(1.05当量)、NBS(1.0当量)、CH2Cl2，-78℃，10分钟，57％；b)P(OEt)3，120℃，2h，85％。D：a)P(OEt)3，120℃，2h，60％。缩写：TMS＝三甲基甲硅烷基。
然后如方案9和方案10中所示将膦酸酯与甲基酮埃博霉素类似物(30)偶联。然后使这些化合物经受脱保护，得到相应的埃博霉素类似物。在一些情况下，使埃博霉素类似物进一步反应以将氮丙啶基团改性，从而引入新的官能团，如78向80的转化。
方案9.由叔氮丙啶30合成12,13-氮丙啶埃博霉素B类似物3-7、9、13和14。试剂和条件。a)49(12当量)、NaHMDS(9.7当量)；30(1.0当量)、THF，-78→0℃，2.5h，50％。b)HF·py(165当量)、THF，0→25℃，4h，90％。c)69(28当量)、nBuLi(22当量)；30(1.0当量)、THF，-78→25℃，2h，94％。d)HF·py(170当量)、THF，0→25℃，5h，93％。e)67(13当量)、nBuLi(10当量)；30(1.0当量)、THF，-78→10℃，1.5h，65％。f)HF·py(150当量)、THF，0→25℃，9h，81％。g)44(8.3当量)、NaHMDS(6.8当量)；30(1.0当量)、THF，-78℃，2.5h，68％。h)HF·py(265当量)、THF，0→25℃，5h；然后TFA(224当量)、CH2Cl2，0℃，2.5h，总计48％。i)52(12当量)、NaHMDS(9.7当量)；30(1.0当量)、THF，-78→0℃，2.5h，45％。j)HF·py(178当量)、THF，0→25℃，5h；然后TFA(100当量)、CH2Cl2，0→25℃，3h，总计71％。k)36(15当量)、nBuLi(12当量)；30(1.0当量)、THF，-78→0℃，3h，60％。l)HF·py(120当量)、THF，0→25℃，1h，79％。m)59(16当量)、nBuLi(13当量)；30(1.0当量)、THF，-78→25℃，3h，70％(E:Z＝1:1)。n)HF·py(428当量)、THF，0→25℃，5h，82％。o)64(14当量)、NaHMDS(14当量)；30(1.0当量)、THF，-78→0℃，4h，69％。p)HF·py(215当量)、THF，0→25℃，5h；然后TFA(144当量)、CH2Cl2，0→25℃，6h，总计80％。缩写：HMDS＝六甲基二硅氮烷。
方案10.合成12,13-氮丙啶埃博霉素B类似物1和2(由埃博霉素D(50)(A))、类似物8和10(由甲基酮19(B))、类似物12(由甲基酮19(C))以及类似物11(由类似物9(D))。试剂和条件。A：a)Rh2(esp)2(5摩尔％)、DPH(1.1当量)、CF3CH2OH，25℃，4h，70％；b)61(6.0当量)、K2CO3(6.0当量)、DMF，70℃，15h，93％。B：a)26(9.6当量)、nBuLi(7.7当量)；19(1.0当量)、THF，-78→25℃，1.5h，59％。b)HF·py(220当量)、THF，0→25℃，1h，93％。c)62(6.0当量)、K2CO3(5.0当量)、DMF，75℃，12h，32％。d)HF·py(500当量)、THF，0℃，1h；然后TFA(90当量)、CH2Cl2，0→25℃，1h，总计65％。C：a)63(6.0当量)、K2CO3(5.0当量)、DMF，75℃，16h，92％。b)a)26(13当量)、nBuLi(10当量)；19a(1.0当量)、THF，-78→10℃，1.5h，65％。c)HF·py(175当量)、THF，0→25℃，3.5h，92％。D：a)Ts2O(5.0当量)、NEt3(4.0当量)、DMAP(0.7当量)、CH2Cl2，0→25℃，45分钟；然后NaN3(4.0当量)、DMF，25℃，17h，总计40％。
另外的氮丙啶化合物
方案11.由经保护的吡唑20a和98合成吡唑103和104。试剂和条件：a)nBuLi(1.2当量)；DMF(1.3当量)、THF，-78℃，20分钟；然后NaBH4(2.0当量)、MeOH，25℃，15分钟(对于99总计93％，对于100总计90％)；b)NaH(1.5当量)、BnBr(1.2当量)、DMF，0→25℃，1h(对于101为94％，对于102为92％)；c)MeSO2OH(5.0当量)、MeOH，25℃，30分钟(对于103为99％，对于104为99％)。
方案12.膦酸酯132-137的合成。试剂和条件：a)K2CO3(1.5当量)、105或106或107(1.1当量)、DMF，0→25℃，3h(对于108为72％，对于109为65％，对于110为68％，对于111为78％，对于112为82％，对于113为89％)；b)Pd/C(30％w/w)、H2(1atm)、AcOH，25℃，12h(对于114为95％，对于115为92％，对于116为97％，对于117为88％，对于118为83％，对于119为85％)；c)PPh3(1.05当量)、NBS(1.0当量)、CH2Cl2，-78℃，20分钟(对于120为64％，对于121为68％，对于122为73％，对于123为78％，对于124为83％，对于125为60％)；d)P(OEt)3，160℃，3h(对于126为90％，对于127为85％，对于128为88％，对于129为82％，对于130为80％，对于131为75％)；e)Boc2O(3.0当量)、NEt3(3.0当量)、DMAP(0.2当量)、THF，60℃，4h(对于132为87％，对于133为73％，对于134为70％，对于135为77％，对于136为82％，对于137为76％)。
方案13.由叔氮丙啶30合成12,13-氮丙啶埃博霉素B类似物89-96。试剂和条件。a)136(12当量)、NaHMDS(9.7当量)；20(1.0当量)、THF，-78→0℃，2.5h；50％；b)HF·py(165当量)、THF，0→25℃，4h；然后TFA(100当量)、CH2Cl2，0→25℃，3h，总计71％；c)64a(28当量)、NaHMDS(22当量)；20(1.0当量)、THF，-78→25℃，2h，94％；d)HF·py(170当量)、THF，0→25℃，5h；然后TFA(100当量)、CH2Cl2，0→25℃，3h，总计68％；e)41(13当量)、NaHMDS(10当量)；20(1.0当量)、THF，-78→10℃，1.5h，65％；f)HF·py(150当量)、THF，0→25℃，9h，80％；g)137(8.3当量)、NaHMDS(6.8当量)；20(1.0当量)、THF，-78℃，2.5h，68％；h)HF·py(265当量)、THF，0→25℃，5h；然后TFA(224当量)、CH2Cl2，0℃，2.5h，总计48％；i)132(12当量)、NaHMDS(9.7当量)；20(1.0当量)、THF，-78→0℃，2.5h，45％。j)HF·py(178当量)、THF，0→25℃，5h；然后TFA(100当量)、CH2Cl2，0→25℃，3h，总计71％；k)135(15当量)、NaHMDS(12当量)；20(1.0当量)、THF，-78→0℃，3h，60％；l)HF·py(120当量)、THF，0→25℃，1h；然后TFA(224当量)、CH2Cl2，0℃，2.5h，总计79％；m)134(16当量)、NaHMDS(13当量)；20(1.0当量)、THF，-78→25℃，3h，70％。n)HF·py(428当量)、THF，0→25℃，5h；然后TFA(250当量)、CH2Cl2，0℃，2.5h，总计82％；o)133(14当量)、NaHMDS(14当量)；20(1.0当量)、THF，-78→0℃，4h，69％。p)HF·py(215当量)、THF，0→25℃，5h；然后TFA(144当量)、CH2Cl2，0→25℃，6h，总计80％。缩写：HMDS＝六甲基二硅氮烷。
实施例2-一般方法和材料
除另指出外，所有反应均用无水条件下的干燥溶剂在氩气氛下进行。通过使可商购获得的预干燥无氧制剂通过活性氧化铝柱得到无水乙腈(MeCN)、二甲基甲酰胺(DMF)、亚甲基氯(DCM)、四氢呋喃(THF)、二氯甲烷、二乙醚和甲苯。除另有说明外，产率是指色谱和光谱(1H NMR)上均一的材料。除另有说明外，试剂购买的是最高商业品质的，并且不经进一步纯化即使用。使用UV光为可视化试剂并且磷钼酸的乙醇性溶液、硫酸铈的水溶液或高锰酸钾的碱性水溶液为展开剂，通过在S-2 0.25mm E.Merck硅胶板(60F-254)上实施的薄层色谱法(TLC)监测反应。E.Merck硅胶(60，粒度0.040-0.063mm)用于快速柱色谱法。在BrukerDRX-600仪器上记录NMR光谱，并使用残余未氘化溶剂(CDCl3：δH＝7.26ppm、δC＝77.16ppm；C6D6:δH＝7.16ppm、δC＝128.06ppm)作为内标进行校准。以下缩写用于表示多重性：s＝单重峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，qd＝四重双重峰，dd＝双重双重峰，ddd＝双重双重双重峰，dq＝双重四重峰，br＝宽峰。在Perkin-Elmer 100FT-IR光谱仪上记录红外(IR)光谱。采用MALDI(基质辅助激光解吸电离)或ESI(电喷雾电离)，在Agilent ESI-TOF(飞行时间)质谱仪上记录高分辨率质谱(HRMS)。在POLARTRONIC M100偏光计上记录589nm下的旋光度，并以10-1(deg cm2g-1)为单位报告。使用带有含乙腈中的5％水(等度)的Luna C18柱(50mm×4.6mm，5μm)的Shimadzu LC-10AT，通过分析性HPLC评估纯度。所有最终化合物的纯度≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
实施例3-化合物表征
合成18a-18c的一般方法。
(2-(3-(甲硫基)-1H-吡唑-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯18a：在0℃下分小份向3-(甲硫基)-1H-吡唑16a(1.0g，8.8mmol，1.2当量)在THF(88mL)中的搅拌溶液中添加NaH(在矿物油中60％，352mg，8.8mmol，1.2当量)。15分钟后，滴加(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯17a(1.64g，7.3mmol，1.0当量)在THF(14.6mL)中的溶液，并且在反应混合物升温至室温后，将其回流12h。在冷却回到25℃后，将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(25mL)猝灭并分离各相。将水层用亚甲基氯(3×15mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在亚甲基氯中30％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈白色无定形固体的纯18a(1.39g，5.4mmol，74％)。18a：Rf＝0.62(硅胶，在亚甲基氯中50％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3347,3114,2977,2928,1694,1501,1452,1391,1365,1270,1248,1164,1083,1048,984,964,923,857,750,667cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.32(d,J＝2.1Hz,1H),6.16(d,J＝2.1Hz,1H),4.92(br s,1H),4.16(m,2H),3.52(m,2H),2.47(s,3H),1.41(s,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝155.8,147.4,131.4,105.8,79.6,51.6,40.7,28.3,16.4ppm；HRMS(ESI)C11H19N3O2S[M+H]+的计算值258.1271，实测值258.1272。
(2-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯18b：根据上面针对18a的制备所述的一般程序，由(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯17a(695mg，3.1mmol，1.0当量)和3-(三氟甲基)-1H-吡唑16b(500mg，3.7mmol，1.2当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的18b(1.39g，5.4mmol，67％)。18b：Rf＝0.47(硅胶，在己烷中50％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3344,2981,2933,1693,1512,1493,1455,1385,1367,1341,1321,1240,1163,1124,1053,1008,988,967,930,911,856,768,738,703cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.43(br s,1H),6.49(br s,1H),4.91(br s,1H),4.28(m,2H),3.55(m,2H),1.40(s,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝155.9,142.4(q,J＝38.2Hz),138.8,118.5(q,J＝268.5Hz),104.3,79.8,52.1,40.5,28.2ppm；HRMS(ESI)C11H16F3N3O2[M+H]+的计算值280.1267，实测值280.1267。
(2-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)乙基)氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯18c：根据上面针对18a的制备所述的一般程序，由(2-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)乙基)氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯17b(335mg，1.3mmol，1.0当量)和3-(三氟甲基)-1H-吡唑16b(200mg，1.5mmol，1.2当量)进行制备，得到呈无色油状物的18c(402mg，1.44mmol，96％)。18c：Rf＝0.30(硅胶，在己烷中40％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3337,2978,2939,1687,1501,1474,1457,1388,1358,1333,1311,1262,1180,1120,1045,1013,988,964,960,940,915,874,772,710cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.53(br s,1H),6.62(br s,1H),5.10(brs,1H),4.34(m,2H),4.13(m,2H),3.69(m,2H),0.95(m,2H),0.02(s,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝156.8,139.1,132.1(q,J＝39.0Hz),117.5(q,J＝269.2Hz),107.8,63.4,50.6,40.6,17.8,-1.4ppm；HRMS(ESI)C12H20F3N3O2Si[M+H]+的计算值324.1350，实测值324.1355。
合成19a-19c的一般方法。
(2-(3-(甲硫基)-5-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯19a：在-78℃下将正丁基锂(2.5M己烷，6.1mL，15.3mmol，3.0当量)滴加到18a(1.31g，5.1mmol，1.0当量)在THF(51mL)中的搅拌溶液中。搅拌10分钟后，滴加三丁基氯化锡(1.5mL，5.6mmol，1.1当量)，并在-78℃下再继续搅拌30分钟。然后将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(20mL)猝灭，并使之升温至25℃。将两相分离，将水层用乙酸乙酯(3×15mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中40％乙酸乙酯)纯化油状残余物，得到呈无色油状物的19a(1.06g，1.9mmol，38％)。19a：Rf＝0.37(硅胶，在己烷中40％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3361,2956,2925,2871,2853,1713,1503,1456,1391,1376,1364,1300,1265,1247,1168,1118,1071,1047,1026,983,960,864,775,758,670cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.16(s,1H),5.17(br s,1H),4.07(m,2H),3.60(m,2H),2.49(s,3H),1.56-1.46(m,6H),1.42(s,9H),1.35-1.29(m,6H),1.16-1.05(m,6H),0.87(t,J＝7.4Hz,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝155.8,147.0,144.9,114.3,79.3,53.4,40.9,28.9,28.4,27.1,16.4,13.6,10.4ppm；HRMS(ESI)C23H45N3O2SSn[M+H]+的计算值548.2327，实测值548.2331。
(2-(5-(三丁基甲锡烷基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯19b：根据上面针对19a的制备所述的一般程序由氨基甲酸酯18b(1.67g，6.0mmol，1.0当量)进行制备，得到呈无色油状物的19b(1.43g，2.5mmol，42％)。19b：Rf＝0.42(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3354,2958,2928,2873,2855,1714,1504,1456,1392,1365,1356,1268,1249,1210,1160,1125,1073,1040,999,974,962,865,804,779,758,746,736,722,692,669cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.49(s,1H),4.97(br s,1H),4.16(m,2H),3.65(m,2H),1.57-1.46(m,6H),1.43(s,9H),1.36-1.30(m,6H),1.21-1.10(m,6H),0.88(t,J＝7.3Hz,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝155.7,145.5,142.5(q,J＝37.2Hz),119.1(q,J＝268.9Hz),112.8,79.6,53.9,40.6,28.8,28.3,27.1,13.6,10.5ppm；HRMS(ESI)C23H42F3N3O2Sn[M+H]+的计算值570.2324，实测值570.2324。
(2-(5-(三丁基甲锡烷基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)乙基)氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯19c：根据上面针对19a的制备所述的一般程序由氨基甲酸酯18c(110mg，0.31mmol，1.0当量)进行制备，得到呈无色油状物的19c(102mg，0.17mmol，54％)。19c：Rf＝0.62(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3330,2956,2928,2873,2855,1720,1516,1464,1416,1377,1356,1250,1211,1162,1128,1063,1042,975,946,860,838,805,774,748,694,665cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.49(s,1H),5.11(br s,1H),4.16-4.11(m,2H),3.73-3.69(m,2H),1.54-1.48(m,6H),1.38-1.29(m,6H),1.22-1.06(m,6H),0.99-0.94(m,2H),0.88(t,J＝7.3Hz,9H),0.03(s,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝156.7,145.6,122.7(q,J＝39.0Hz),112.8(q,J＝269.2Hz),99.6,63.3,53.7,40.8,28.9,27.2,17.7,13.6,10.5,-1.5ppm；HRMS(ESI)C24H46F3N3O2SiSn[M+H]+的计算值614.2406，实测值614.2401。
合成21a和21b的一般方法。
5-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑21a：在-78℃下将正丁基锂(2.5M己烷，32.1mL，80.3mmol，1.3当量)滴加到20a(9.4g，61.8mmol，1.0当量)在THF(172mL)中的搅拌溶液中。搅拌15分钟后，将溴(4.1mL，80.3mmol.1.3当量)小心地滴加到反应混合物中。添加速率足够慢，以便在下一滴之前使溴完全脱色。经1.5h使之升温至-30℃后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(50mL)猝灭，并使之升温至25℃。将两相分离，将水层用乙酸乙酯(3×25mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中10％乙酸乙酯)纯化粗材料，得到呈白色无定形固体的21a(12.0g，51.9mmol，84％)。21a：Rf＝0.29(硅胶，在己烷中10％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3120,2944,2857,1499,1440,1391,1342,1310,1245,1204,1180,1085,1041,977,953,911,877,822,755cm–1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.57(d,J＝1.8Hz,1H),6.33(d,J＝1.8Hz,1H),5.45(dd,J＝10.0,2.6Hz,1H),4.09-4.04(m,1H),3.72-3.66(m,1H),2.50-2.41(m,1H),2.15-2.10(m,1H),1.96-1.90(m,1H),1.76-1.67(m,2H),1.63-1.57(m,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝141.0,113.5,109.3,84.7,68.1,29.5,25.0,22.8ppm；HRMS(ESI)C8H11-BrN2O[M+H]+的计算值231.0127，实测值231.0129。
5-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑21b：根据上面针对21a的制备所述的一般程序由吡唑20b(2.50g，11.4mmol，1.0当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的溴化吡唑21b(2.66g，8.9mmol，78％)。21b：Rf＝0.67(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3151,2968,2949,2926,2869,1468,1447,1421,1386,1353,1319,1287,1223,1204,1171,1120,1080,1060,1043,997,969,940,911,880,847,823,794,742,719,649cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.61(s,1H),5.51(dd,J＝9.6,2.8Hz,1H),4.08-4.03(m,1H),3.73-3.66(m,1H),2.50-2.40(m,1H),2.18-2.11(m,1H),1.98-1.91(m,1H),1.77-1.59(m,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝143.1(q,J＝39.1Hz),117.5(q,J＝270.0Hz),114.8,107.7(q,J＝2.1Hz),85.4,68.0,29.1,24.8,22.3ppm；HRMS(ESI)C9H10BrF3N2O[M+Na]+的计算值320.9821，实测值320.9817。
合成22a和22b的一般方法。
5-溴-1H-吡唑22a：在25℃下向21a(6.24g，27.0mmol，1.0当量)在甲醇(450mL)中的搅拌溶液中添加甲磺酸(8.8mL，135mmol，5.0当量)，并将反应混合物搅拌1h。将所得反应混合物通过添加固体碳酸氢钠(22g，0.262mol，20当量)中和，过滤并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)纯化残余物，得到呈白色固体的22a(3.77g，25.7mmol，95％)。22a：Rf＝0.20(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3143,3034,2966,2904,2858,2774,2628,1544,1475,1388,1342,1241,1182,1082,1047,996,957,919,870,815,755,655,607cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝12.20(br s,1H),7.59(d,J＝2.4Hz,1H),6.37(d,J＝2.4Hz,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl-3)δ＝131.1,125.7,108.0ppm；HRMS(ESI)C3H3BrN2[M+H]+的计算值146.9552，实测值146.9556。
5-溴-3-(三氟甲基)-1H-吡唑22b：根据上面针对22a的制备所述的一般程序由吡唑21b(2.22g，3.34mmol，1.0当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的脱保护的吡唑22b(1.46g，3.0mmol，91％)。22b：Rf＝0.63(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3119,3016,2970,2934,2898,2818,2771,1542,1494,1456,1377,1362,1319,1301,1283,1232,1175,1137,1071,1032,990,982,844,803,746,723,621cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝12.12(br s,1H),6.63(s,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl-3)δ＝141.97(q,J＝37.6Hz),117.2,116.9(q,J＝269.0Hz),107.3(q,J＝2.3Hz)ppm；HRMS(ESI)C4H2BrF3N2[M-H]-的计算值212.9281，实测值212.9289。
合成23a、23c、23d、23f的一般方法。
3-溴-1-(4-硝基苯基)-1H-吡唑23a：在0℃下将氢化钠(在矿物油中60％w/w，41mg，1.02mmol，1.5当量)小心地分批添加到22a(100mg，0.68mmol，1.0当量)在THF(6.8mL)中的搅拌溶液中。20分钟后，滴加1-氟-4-硝基苯22c(0.08mL，0.75mmol，1.1当量)，并使反应混合物在60℃下回流。在如通过TLC指示起始材料消耗后，将反应混合物冷却到25℃，用饱和氯化铵水溶液(1.2mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)纯化得到的粗残余物，得到呈白色固体的N-芳基吡唑23a(144mg，0.54mmol，79％)。23a：Rf＝0.30(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3144,1595,1516,1407,1359,1335,1200,1176,1112,1042,955,937,852,749,732,684cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝8.33(d,J＝9.2Hz,2H),7.93(d,J＝2.6Hz,1H),7.84(d,J＝9.2Hz,2H),6.58(d,J＝2.6Hz,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝145.9,143.7,130.7,129.0,125.6,118.6,112.6ppm；HRMS(ESI)C9H6BrN3O2[M+H]+的计算值267.9716，实测值267.9711。
3-溴-1-(2-硝基苯基)-1H-吡唑23c：根据上面针对23a的制备所述的一般程序由吡唑22a(100mg，0.68mmol，1.0当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的N-芳基吡唑23c(134mg，0.50mmol，74％)。23c：Rf＝0.15(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3216,2877,1682,1608,1532,1513,1466,1416,1364,1303,1185,1104,1045,955,941,852,777,746,705cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.92(dd,J＝8.1 1.4Hz,1H),7.69(ddd,J＝8.0,7.5,1.5Hz,1H),7.59(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.59(d,J＝2.5Hz,1H),7.55(ddd,J＝8.1,7.5,1.4Hz,1H),6.51(d,J＝2.5Hz,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝133.5,133.1,132.4,129.5,129.3,127.1,125.4,111.4ppm；HRMS(ESI)C9H6BrN3O2[M+H]+的计算值267.9716，实测值267.9704。
3-溴-1-(4-硝基-3-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑23d：根据上面针对23a的制备所述的一般程序由吡唑22a(300mg，2.04mmol，1.0当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的N-芳基吡唑23d(548mg，1.63mmol，80％)。23d：Rf＝0.41(硅胶，在己烷中25％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3135,3094,2925,2869,1596,1538,1514,1458,1433,1397,1345,1296,1274,1238,1176,1143,1072,1042,952,904,885,859,841,756,723,660,613cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝8.17(d,J＝2.2Hz,1H),8.07(d,J＝8.9Hz,1H),7.98(dd,J＝8.9,2.2Hz,1H),7.94(d,J＝2.6Hz,1H),6.61(d,J＝2.6Hz,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝145.5,142.0,131.4,129.0,127.5,125.8(q,J＝34.7Hz),121.3,118.9(q,J＝274.0Hz),117.7(q,J＝5.8Hz),113.2ppm；HRMS(ESI)C10H5BrF3N3O2[M+H]+的计算值335.9590，实测值335.9581。
3-溴-1-(4-硝基-2-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑23f：根据上面针对23a的制备所述的一般程序由吡唑22a(450mg，3.06mmol，1.0当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的N-芳基吡唑23f(699mg，2.08mmol，68％)。23f：Rf＝0.53(硅胶，在己烷中25％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3129,3094,2924,2855,1624,1594,1536,1511,1442,1407,1346,1313,1287,1173,1139,1116,1075,1048,1031,954,942,916,886,848,790,752,735,720,668,653,625cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.51(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.87(d,J＝8.8Hz,1H),7.71(d,J＝2.3Hz,1H),6.57(d,J＝2.6Hz,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝146.9,142.6,133.9(q,J＝3.3Hz),130.5,130.1,127.9,125.4(q,J＝33.4Hz),123.5(q,J＝5.5Hz),119.2(q,J＝274.3Hz),111.9ppm；HRMS(ESI)C10H5BrF3N3O2[M+H]+的计算值335.9590，实测值335.9583。
合成23b、23e、23g的一般方法。
3-溴-1-(4-硝基苯基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑23b：在25℃下向22b(5.0g，23.3mmol，1.0当量)和无水碳酸钾(3.9g，27.9mmol，1.2当量)在DMF(116mL)中的搅拌悬浮液中添加1-氟-4-硝基苯(2.5mL，23.5mmol，1.01当量)，并将反应混合物加热到80℃持续12h。冷却到25℃后，将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(20mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×15mL)萃取，并将合并的有机层用水(2×15mL)和盐水(15mL)反洗，用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。用慢梯度进行快速柱色谱法(硅胶，在己烷中8％至20％乙酸乙酯)分离非所需的区域异构体，得到呈白色无定形固体的23b(1.57g，4.66mmol，20％)。23b：Rf＝0.61(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3149,2923,2853,1598,1527,1502,1454,1347,1288,1216,1180,1141,1112,1076,986,963,854,812,757,689cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝8.37(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(d,J＝9.0Hz,2H),6.93(s,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝148.1,143.1,134.3(q,J＝40.4Hz),128.6,125.9,124.9,116.1(q,J＝270.0Hz),113.3(q,J＝2.6Hz)ppm；HRMS(ESI)C10H5BrF3N3O2[M+H]+的计算值335.9590，实测值335.9588。
3-溴-1-(3-氟-4-硝基苯基)-1H-吡唑23e：根据上面针对23b的制备所述的一般程序由吡唑22a(120mg，0.82mmol，1.0当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的N-芳基吡唑23e(141mg，0.49mmol，58％)。23e：Rf＝0.29(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3124,3087,2923,2873,1618,1597,1532,1512,1489,1443,1410,1350,1308,1279,1255,1218,1173,1110,1055,1041,969,954,881,831,751,700,656,629cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.98(dd,J＝9.0,5.3Hz,1Hz),7.57(d,J＝2.3Hz,1H),7.35(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.22(dt,J＝6.7,2.5Hz,1H),6.53(d,J＝2.3Hz,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝163.5(d,J＝258.9Hz),140.4(d,J＝2.9Hz),135.1(d,J＝11.1Hz),132.5,130.2,127.9(d,J＝9.9Hz),116.0(d,J＝23.1Hz),114.6(d,J＝25.9Hz),111.9ppm；HRMS(ESI)C9H5BrFN3O2[M+H]+的计算值285.9622，实测值285.9627。
3-溴-1-(2-氟-4-硝基苯基)-1H-吡唑23g：根据上面针对23b的制备所述的一般程序由吡唑22a(120mg，0.82mmol，1.0当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的N-芳基吡唑23g(215mg，0.75mmol，89％)。23g：Rf＝0.63(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3175,3136,3090,2945,1609,1512,1406,1340,1228,1133,1030,953,915,893,836,810,768,739cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝8.28-8.25(m,1H),8.20-8.17(m,2H),8.10(t,J＝2.6Hz,1H),6.61(d,J＝2.6Hz,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝150.7(d,J＝252.9Hz),145.8(d,J＝7.7Hz),133.3(14.6Hz),132.5(d,J＝8.5Hz),130.8(d,J＝1.3Hz),123.8,120.8(d,J＝3.3Hz),113.4(d,J＝26.1Hz),112.5(d,J＝2.5Hz)ppm；HRMS(ESI)C9H5BrFN3O2[M+H]+的计算值285.9622，实测值285.9636。
合成24a-24g的一般方法。
4-(3-溴-1H-吡唑-1-基)苯胺24a：在0℃和搅拌下将浓盐酸在异丙醇中的溶液(15:100HCl/iPrOH，0.74mL)小心地添加到含有二氯化锡(364mg，1.9mmol，3.0当量)和23a(171mg，0.64mmol，1.0当量)的烧瓶中。然后将反应混合物加热到70℃，直到通过TLC判断起始材料被消耗。用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)中和后，将两相分离，将水层用乙酸乙酯(3×4mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中40％乙酸乙酯)纯化，得到呈淡黄色无定形固体的24a(114mg，0.48mmol，75％)。24a：Rf＝0.47(硅胶，在己烷中50％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3420,3353,3223,3143,2923,1624,1521,1416,1366,1286,1176,1127,1044,957,942,827,751cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.65(d,J＝2.4Hz,1H),7.38(d,J＝8.9Hz,2H),6.71(d,J＝8.9Hz,2H),6.41(d,J＝2.4Hz,1H),3.76(br s,2H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝145.8,131.9,128.8,127.1,121.2,115.5,109.9ppm；HRMS(ESI)C9H8BrN3[M+H]+的计算值237.9974，实测值237.9983。
4-(3-溴-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)苯胺24b：根据上面针对24a的制备所述的一般程序由吡唑23b(342mg，1.02mmol，1.0当量)进行制备，得到呈淡黄色无定形固体的N-芳基吡唑24b(238mg，0.78mmol，76％)。24b：Rf＝0.61(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3149,2923,2853,1598,1527,1502,1454,1347,1288,1216,1180,1141,1112,1076,986,963,854,812,757,689cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝8.37(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(d,J＝9.0Hz,2H),6.93(s,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝148.1,143.1,134.3(q,J＝40.4Hz),128.6,125.9,124.9,116.1(q,J＝270.0Hz),113.3(q,J＝2.6Hz)ppm；HRMS(ESI)C10H5BrF3N3O2[M+H]+的计算值335.9590，实测值335.9588。
2-(3-溴-1H-吡唑-1-基)苯胺24c：根据上面针对24a的制备所述的一般程序由吡唑23c(121mg，0.45mmol，1.0当量)进行制备，得到呈橙色无定形固体的N-芳基吡唑24c(75mg，0.32mmol，70％)。24c：Rf＝0.51(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3452,3359,3143,1619,1511,1462,1420,1363,1339,1282,1180,1159,1044,957,942,749,673cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.59(d,J＝2.4Hz,1H),7.19-7.12(m,2H),6.84-6.76(m,2H),6.46(d,J＝2.4Hz,1H),4.55(br s,2H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝141.2,132.1,129.2,127.3,126.2,124.3,118.3,117.5,109.7ppm；HRMS(ESI)C9H8BrN3[M+H]+的计算值237.9974，实测值237.9963。
4-(3-溴-1H-吡唑-1-基)-2-(三氟甲基)苯胺24d：根据上面针对24a的制备所述的一般程序由吡唑23d(227mg，0.68mmol，1.0当量)进行制备，得到呈淡黄色无定形固体的N-芳基吡唑24d(132mg，0.43mmol，63％)。24d：Rf＝0.36(硅胶，在己烷中25％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3504,3408,3245,3148,2924,1637,1590,1516,1465,1454,1414,1370,1347,1313,1297,1263,1232,1172,1142,1107,1075,1043,961,951,898,859,822,750,686,646,614cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.67(m,2H),7.55(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),6.79(d,J＝8.7Hz,1H),6.45(d,J＝2.3Hz,1H),4.27(br s,2H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝143.6,130.9,128.8,127.8,124.6,121.7(q,J＝272.6Hz),118.3(q,J＝5.5Hz),118.1,113.8(q,J＝31.0Hz),110.4ppm；HRMS(ESI)C10H7BrF3N3[M+H]+的计算值305.9848，实测值305.9850。
4-(3-溴-1H-吡唑-1-基)-2-氟苯胺24e：根据上面针对24a的制备所述的一般程序由吡唑23e(380mg，1.3mmol，1.0当量)进行制备，得到呈浅棕色油状物的N-芳基吡唑24e(240mg，0.94mmol，72％)。24e：Rf＝0.29(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3451,3357,3219,3144,2923,2852,1601,1515,1499,1441,1421,1364,1344,1294,1274,1205,1165,1141,1040,971,954,875,860,812,784,756,681,625cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.60(d,J＝2.5Hz,1H),6.94-6.91(m,2H),6.83-6.80(m,1H),6.48(d,J＝2.5Hz,1H),4.21(br s,2H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝154.6(d,J＝237.7Hz),137.3(d,J＝2.4Hz),132.0,127.8,125.9(d,J＝9.1Hz),118.2(d,J＝8.0Hz),115.9(d,J＝22.0Hz),111.0(d,J＝25.3Hz),110.1ppm；HRMS(ESI)C9H7BrFN3[M+H]+的计算值255.9880，实测值255.9870。
4-(3-溴-1H-吡唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯胺24f：根据上面针对24a的制备所述的一般程序由吡唑23f(340mg，1.0mmol，1.0当量)进行制备，得到淡橙色无定形固体的N-芳基吡唑24f(179mg，0.59mmol，57％)。24f：Rf＝0.19(硅胶，在己烷中25％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3478,3349,3230,3147,3030,1632,1527,1457,1424,1367,1336,1269,1169,1128,1078,1046,1032,958,944,905,872,830,758,681,647cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.45(d,J＝1.6Hz,1H),7.24(s,1H),6.97(d,J＝2.5Hz,1H),6.82(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),6.41(d,J＝2.4Hz,1H),4.06(br s,2H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝147.5,134.3(q,J＝1.8Hz),130.8,128.4,127.4,127.2(q,J＝31.3Hz),120.2(q,J＝273.6Hz),117.6,112.2(q,J＝5.2Hz),109.4ppm；HRMS(ESI)C10H7BrF3N3[M+H]+的计算值305.9848，实测值305.9854。
4-(3-溴-1H-吡唑-1-基)-3-氟苯胺24g：根据上面针对24a的制备所述的一般程序由吡唑23g(420mg，1.47mmol，1.0当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的N-芳基吡唑24g(320mg，1.25mmol，85％)。24g：Rf＝0.24(硅胶，在己烷中33％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3468,3354,3227,3146,2924,1633,1590,1527,1461,1423,1370,1327,1256,1171,1134,1038,955,937,840,813,754cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.67(t,J＝2.4Hz,1H),7.50-7.47(m,1H),6.46(m,2H),6.43(d,J＝2.4Hz,1H),3.90(br s,2H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝154.0(d,J＝247.6Hz),147.4(d,J＝10.8Hz),132.9(d,J＝7.3Hz),127.3,126.2(d,J＝1.8Hz),119.2(d,J＝11.0Hz),111.1(d,J＝2.8Hz),109.8,102.4(d,J＝23.5Hz)ppm；HRMS(ESI)C9H7BrFN3[M+H]+的计算值255.9980，实测值255.9980。
合成25a-25g的一般方法。
4-(3-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑-1-基)苯胺25a：在搅拌下向含有在小心脱气的(冷冻-泵-解冻技术)甲苯(5mL)中的24a(120mg，0.50mmol，1.0当量)和四(三苯基膦)钯(58mg，0.05mmol，0.1当量)的密封管中添加六丁基二锡(0.76mL，1.5mmol，3.0当量)。将反应混合物加热到110℃并搅拌12h。将反应混合物冷却到25℃，然后通过硅藻土过滤并真空浓缩。快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5％至25％乙酸乙酯)得到呈浅棕色油状物的锡烷25a(180mg，0.40mmol，80％)。25a：Rf＝0.24(硅胶，在己烷中25％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3463,3343,2955,2923,2870,2852,1625,1520,1479,1463,1417,1376,1342,1283,1216,1170,1125,1072,1030,956,874,865,827,751,692,669,625cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.83(d,J＝1.9Hz,1H),7.46(d,J＝8.6Hz,2H),6.72(d,J＝8.6Hz,2H),6.46(d,J＝1.9Hz,1H),1.62-1.55(m,6H),1.38-1.32(m,6H),1.17-1.05(m,6H),0.89(t,J＝7.4Hz,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝153.4,144.9,133.0,126.6,121.3,115.6,115.2,29.3,27.4,13.9,10.1ppm；HRMS(ESI)C21H35N3Sn[M+H]+的计算值450.1929，实测值450.1926。
4-(3-(三丁基甲锡烷基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)苯胺25b：根据上面针对25a的制备所述的一般程序由吡唑24b(177mg，0.58mmol，1.0当量)进行制备，得到呈浅棕色油状物的锡烷25b(192mg，0.36mmol，66％)。25b：Rf＝0.29(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3474,3379,3219,2957,2924,2872,2853,1627,1519,1463,1417,1376,1350,1278,1195,1164,1130,1097,1066,1016,986,960,875,830,746,696,668,645cm–1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.23(d,J＝8.4Hz,2H),6.75(m,3H),1.60-1.55(m,6H),1.39-1.30(m,6H),1.18-1.06(m,6H),0.88(t,J＝7.4Hz,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝152.8,132.4(q,J＝38.4Hz),131.1,127.1,125.3,118.3(q,J＝269.0Hz),116.4,115.3,29.2,27.4,13.8,10.2ppm；HRMS(ESI)C22H34F3N3Sn[M+H]+的计算值518.1803，实测值518.1815。
2-(3-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑-1-基)苯胺25c：根据上面针对25a的制备所述的一般程序由吡唑24c(182mg，0.76mmol，1.0当量)进行制备，得到呈淡橙色油状物的锡烷25c(276mg，0.60mmol，78％)。25c：Rf＝0.36(硅胶，在己烷中10％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3463,3337,2956,2925,2870,2852,1617,1589,1509,1462,1376,1340,1293,1159,1072,1019,959,875,744,695,671cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝7.42(d,J＝2.3Hz,1H),6.95-6.91(m,2H),6.54(ddd,J＝7.9,7.3,1,4Hz,1H),6.48(d,J＝2.3Hz,1H),6.40(ddd,J＝7.9,1.4,0.3Hz,1H),4.75(br s,2H),1.74-1.68(m,6H),1.44-1.37(m,6H),1.22-1.19(m,6H),0.91(t,J＝7.3Hz,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝132.8,131.2,128.9,128.5,128.4,126.0,123.4,119.5,104.3,29.9,27.0,14.3,13.8ppm；HRMS(ESI)C21H35N3Sn[M+H]+的计算值450.1929，实测值450.1926。
4-(3-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑-1-基)-2-(三氟甲基)苯胺25d：根据上面针对25a的制备所述的一般程序由吡唑24d(450mg，1.47mmol，1.0当量)进行制备，得到呈浅棕色油状物的锡烷25d(415mg，0.80mmol，55％)。25d：Rf＝0.36(硅胶，在己烷中25％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3509,3402,2957,2925,2872,2853,1638,1517,1464,1418,1356,1299,1260,1212,1142,1113,1032,962,901,877,825,751,686cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.85(d,J＝2.3Hz,1H),7.75(d,J＝2.6Hz,1H),7.61(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),6.80(d,J＝8.7Hz,1H),6.48(d,J＝2.3Hz,1H),4.19(br s,2H),1.65-1.56(m,6H),1.39-1.31(m,6H),1.13-1.09(m,6H),0.88(t,J＝7.3Hz,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝154.3,142.8(q,J＝1.7Hz),132.1,126.5,124.7,121.9(q,J＝270.9Hz),118.3(q,J＝5.5Hz),118.0,115.7,113.9(q,J＝30.9Hz),29.2,27.4,13.9,10.1ppm；HRMS(ESI)C22H34F3N3Sn[M+H]+的计算值518.1803，实测值518.1781。
2-氟-4-(3-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑-1-基)苯胺25e：根据上面针对25a的制备所述的一般程序由吡唑24e(1.13g，4.4mmol，1.0当量)进行制备，得到呈浅棕色油状物的锡烷25e(1.44g，3.10mmol，70％)。25e：Rf＝0.32(硅胶，在己烷中10％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3453,3334,2956,2926,2852,1600,1518,1486,1463,1376,1346,1293,1271,1197,1139,1073,1030,971,875,808,756,693cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝7.22(d,J＝2.3Hz,1H),6.67(dd,J＝9.2,2.9Hz,1H),6.60(ddd,J＝8.8,2.9,0.9Hz,1H),6.41(d,J＝2.3Hz,1H),6.11(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),4.64(br s,2H),1.72-1.66(m,6H),1.44-1.36(m,6H),1.21-1.17(m,6H),0.91(t,J＝7.4Hz,9H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝154.5(d,J＝235.4Hz),153.7,137.6(d,J＝2.3Hz),134.1(d,J＝19.7Hz),129.5,117.9(d,J＝8.1Hz),114.8,114.2(d,J＝21.9Hz),110.2(d,J＝25.3Hz),29.6,27.7,14.0,10.4ppm；HRMS(ESI)C21H34FN3Sn[M+H]+的计算值468.1835，实测值468.1816。
4-(3-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯胺25f：根据上面针对25a的制备所述的一般程序由吡唑24f(600mg，1.96mmol，1.0当量)进行制备，得到呈浅棕色油状物的锡烷25f(520mg，1.0mmol，52％)。25f：Rf＝0.29(硅胶，在己烷中25％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3322,3208,2957,2924,2872,2853,1633,1523,1457,1376,1349,1334,1267,1219,1173,1131,1073,1046,1019,958,905,873,829,758,647cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl-3)δ＝7.62(dm,J＝2.3Hz,1H),7.23(d,J＝8.5Hz,1H),6.96(d,J＝2.7Hz,1H),6.81(dd,J＝8.5,2.7Hz,1H),6.45(d,J＝2.3Hz,1H),4.01(br s,2H),1.59-1.53(m,6H),1.36-1.29(m,6H),1.11-1.08(m,6H),0.86(t,J＝7.3Hz,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝153.2,146.9,131.8,130.6,127.1(q,J＝31.0Hz),120.4(q,J＝274.0Hz),117.7,114.4,112.4(q,J＝5.2Hz),29.2,27.4,13.8,10.1ppm；HRMS(ESI)C22H34F3N3Sn[M+H]+的计算值518.1803，实测值518.1801。
3-氟-4-(3-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑-1-基)苯胺25g：根据上面针对25a的制备所述的一般程序由吡唑24g(591mg，2.3mmol，1.0当量)进行制备，得到呈淡橙色油状物的锡烷25g(735mg，1.59mmol，69％)。25g：Rf＝0.19(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3362,3210,2956,2925,2853,1635,1589,1525,1462,1325,1295,1247,1170,1130,1073,1020,964,838,811,755,693,666,624cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝7.90(dd,J＝5.3,2.3Hz,1H),7.79(t,J＝8.6Hz,1H),6.58(d,J＝2.3Hz,1H),5.91-5.86(m,2H),2.57(br s,2H),1.77-1.71(m,6H),1.46-1.39(m,6H),1.26-1.23(m,6H),0.92(t,J＝7.4Hz,9H)ppm；13CNMR(151MHz,CDCl3)δ＝154.0(d,J＝246.8Hz),153.1,146.5(d,J＝9.2Hz),130.3(d,J＝6.0Hz),126.2(d,J＝1.6Hz),114.9,111.2(d,J＝2.8Hz),102.6(d,J＝23.7Hz),29.2,27.4,13.9,10.1ppm；HRMS(ESI)C21H34FN3Sn[M+H]+的计算值468.1835，实测值468.1815。
合成埃博霉素5-14的一般方法。
埃博霉素5：在25℃下将乙烯基碘15(20mg，0.037mmol，1.0当量)和锡烷19a(49mg，0.09mmol，2.5当量)在脱气DMF(0.42mL)中的溶液添加到三(二亚苄基丙酮)双钯(3.6mg，0.004mmol，0.1当量)、碘化亚铜(3.0mg，0.016mmol，0.4当量)和三苯基胂(2.4mg，0.008mmol，0.2当量)在脱气DMF(0.12mL)中的搅拌悬浮液中。如通过TLC指示起始材料消耗(15至30分钟)后，将反应混合物用乙酸乙酯(1mL)稀释并通过硅藻土过滤。然后将滤液用H2O(2×2mL)和盐水(3mL)洗涤。然后将有机层用无水硫酸镁干燥并真空浓缩，得到油状残余物，通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5％至50％乙酸乙酯)和随后的制备型TLC(硅胶，在己烷中50％乙酸乙酯)将其纯化，得到呈白色无定形固体的5(19mg，0.029mmol，77％)。5：Rf＝0.44(硅胶，在己烷中70％乙酸乙酯)；[α]D 25＝+21.1(在CHCl3中c＝1.0)；FT-IR(纯)νmax3394,2974,2932,1686,1519,1452,1367,1250,1167,1056,1007,973,910,857,777,730,669cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3，旋转异构体峰见于方括号中)δ＝[6.39,6.33](br s,1H),6.10(br s,1H),5.43(d,J＝8.5Hz,1H),[4.86,4.71](m,1H),4.23(dd,J＝10.1,2.3Hz,1H),4.21-4.13(m,2H),4.10-3.98(m,1H),3.84-3.64(m,2H),3.57-3.43(m,2H),3.26-3.17(m,2H),2.79-2.77(m,1H),2.56-2.51(m,1H),2.49(s,3H),2.29-1.88(m,4H),1.83(s,3H),1.77-1.70(m,2H),1.59-1.45(m,2H),1.39(s,3H),1.35(s,3H),1.31-1.28(m,5H),1.24(s,3H),1.15(d,J＝6.9Hz,3H),1.05-0.97(m,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3，旋转异构体峰见于方括号中)δ＝220.4,170.2,156.4,[146.6,146.3],[140.6,140.4],117.0,113.9,[106.5,105.9],[80.5,79.9],78.5,76.6,[71.8,71.2],[62.1,61.7],[54.6,54.0],[49.2,48.2],[42.3,42.0],[39.8,39.6],36.2,[33.3,32.7],32.0,[31.1,30.7],29.7,[28.3,28.0],[22.8,22.7],[22.5,22.4],[22.0,21.8],19.5,17.5,[16.7,16.5],16.0,15.1,14.1,[13.2,13.0]ppm；HRMS(ESI)C34H55N3O8S[M+H]+的计算值666.3782，实测值666.3787；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
埃博霉素6：根据上面针对5的制备所述的一般程序由乙烯基碘15(20mg，0.037mmol，1.0当量)和锡烷19b(51mg，0.09mmol，2.5当量)进行制备，得到呈白色无定形固体的6(16.5mg，0.024mmol，65％)。6：Rf＝0.30(硅胶，在己烷中50％乙酸乙酯)；[α]D 25＝+11.0(在CHCl3中c＝1.0)；FT-IR(纯)νmax 3384,2967,2932,1684,1482,1392,1367,1251,1232,1167,1129,1059,1007,975,942,916,857,759,735cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3，旋转异构体峰见于方括号中)δ＝[6.44,6.38](br s,1H),6.43(s,1H),5.44(dd,J＝9.4,1.8Hz,1H),4.84-4.77(m,1H),[4.53,4.31-4.08](m,4H),3.26-3.20(m,1H),2.80-2.77(m,1H),2.57-2.50(m,1H),2.30-2.01(m,3H),1.96-1.89(m,1H),[1.85,1.83](s,3H),1.80-1.70(m,3H),1.67-1.42(br m,6H),1.39(s,3H),1.36-1.32(m,5H),1.29(s,3H),1.25(s,3H),1.16(d,J＝6.8Hz,3H),1.06-0.98(m,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3，旋转异构体峰见于方括号中)δ＝220.3,170.2,156.4,[142.1,141.9],140.4(q,J＝29.5Hz),118.2(q,J＝268.5Hz),116.2,[104.5,104.2],[80.8,80.2],78.3,76.4,73.5,[71.8,71.1],[62.1,61.8],[54.5,54.1],[49.9,49.0],[42.1,42.0],[39.6,39.5],36.3,33.3,32.7,[32.0,31.9],31.1,30.7,29.7,[28.3,27.9],[22.8,22.7],[22.4,22.0],[17.3,16.7],16.1,15.1,[13.2,13.1]ppm；HRMS(ESI)C34H52F3N3O8[M+H]+的计算值688.3779，实测值666.3782；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
埃博霉素7：根据上面针对5的制备所述的一般程序由乙烯基碘15(20mg，0.037mmol，1.0当量)和锡烷19c(55mg，0.09mmol，2.5当量)进行制备，得到呈无色油状物的7(20mg，0.027mmol，74％)。7：Rf＝0.35(硅胶，在己烷中50％乙酸乙酯)；[α]D 25＝+26.3(在CHCl3中c＝1.0)；FT-IR(纯)νmax 3381,2967,2930,1680,1475,1422,1367,1243,1232,1169,1135,1050,1015,987,942,912,857,760,730cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3，旋转异构体峰见于方括号中)δ＝[6.47,6.41](br s,1H),[6.44,6.38](br s,1H),5.43(d,J＝7.1Hz,1H),[4.99,4.91](br s,1H),4.28-4.15(m,4H),4.12-3.78(m,2H),3.70-3.52(m,2H),3.35-3.19(m,1H),2.78(m,1H),2.70-2.41(m,2H),2.34-1.91(m 4H),[1.88,1.84](s,3H),1.80-1.63(m,4H),1.61-1.39(m,6H),1.37(s,3H),1.35-1.32(m,2H),1.30(s,3H),1.25-1.06(m,3H),1.01-0.91(m,6H),[0.02,0.00](s,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3，旋转异构体峰见于方括号中)δ＝220.3,170.1,157.3,[142.1,141.9],140.4(q,J＝29.1Hz),118.6(q,J＝269.2Hz),116.2,112.7,[104.5,104.1],78.4,76.3,[73.9,73.1],[71.9,71.3],[64.1,63.7],[62.3,62.2],[61.9,61.6],[53.8,54.5],[49.8,49.0],[42.3,41.8],[40.2,39.5],[36.5.36.1],[32.5,31.9],[31.0,30.8],29.7,27.8,26.9,[22.5,22.4],22.1,[17.8,17.6],17.5,[16.8,16.7],15.4,[13.6,13.2],[-1.5,-1.7]ppm；HRMS(ESI)C34H52F3N3O8[M+H]+的计算值732.3867，实测值732.3838；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
埃博霉素8：根据上面针对5的制备所述的一般程序由乙烯基碘15(10mg，0.019mmol，1.0当量)和锡烷25a(22mg，0.048mmol，2.5当量)进行制备，得到呈白色泡沫状物的8(9mg，0.016mmol，84％)。8：Rf＝0.29(硅胶，在己烷中70％乙酸乙酯)；[α]D 25＝+17.0(在CHCl3中c＝0.2)；FT-IR(纯)νmax 3361,2925,2853,1733,1687,1523,1464,1378,1262,1146,1060,978,881,834,758cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.74(d,J＝2.4Hz,1H),7.43(d,J＝8.8Hz,2H),6.73(d,J＝8.8Hz,2H),6.60,(s,1H),6.46(d,J＝2.4Hz,1H),5.46(dd,J＝7.3,2.9Hz,1H),4.20(dd,J＝10.2,3.1Hz,1H),3.79(t,J＝4.3Hz,1H),3.33-3.28(m,1H),2.82(dd,J＝7.3,4.9Hz,1H),2.54(dd,J＝14.2,10.2Hz,1H),2.38(dd,J＝14.2,3.1Hz,1H),2.11(d,J＝1.0Hz,3H),2.09-2.06(m,1H),1.98-1.91(m,1H),1.74-1.66(m,2H),1.64-1.36(m,6H),1.35(s,3H),1.28(s,3H),1.15(d,J＝6.8Hz,3H),1.07(s,3H),0.99(d,J＝7.0Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.8,170.6,149.5,145.3,136.4,132.1,127.4,120.9,118.3,115.4,107.4,74.2,73.2,61.6,61.3,52.8,43.0,39.1,36.5,32.1,31.9,29.7,23.0,22.9,22.7,21.4,17.3,16.0,14.3,13.9ppm；HRMS(ESI)C32H45N3O6[M+H]+的计算值568.3381，实测值568.3368；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
埃博霉素9：根据上面针对5的制备所述的一般程序由乙烯基碘15(10mg，0.019mmol，1.0当量)和锡烷25b(22mg，0.048mmol，2.5当量)进行制备，得到呈白色泡沫状物的9(9mg，0.016mmol，84％)。9：Rf＝0.34(硅胶，在己烷中70％乙酸乙酯)；[α]D 25＝+22.4(在CHCl3中c＝1.0)；FT-IR(纯)νmax 3340,2925,2843,1732,1690,1527,1445,1378,1250,1137,1040,962,880,825,758cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.21(d,J＝8.5Hz,2H),6.78(s,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,2H),6.55(s,1H),5.46(dd,J＝6.5,3.4Hz,1H),4.14(dd,J＝9.7,3.2Hz,1H),3.88(br s,2H),3.79(m,2H),3.28(qd,J＝6.8,6.8Hz,1H),2.81(t,J＝6.2Hz,1H),2.54(dd,J＝14.3,10.2Hz,1H),2.49(br s,1H),2.41(dd,J＝14.3,3.2Hz,1H),2.08(s,3H),2.07-2.04(m,2H),1.98-1.93(m,1H),1.71-1.67(m,2H),1.53-1.37(m,6H),1.33(s,3H),1.28(s,3H),1.16(d,J＝6.9Hz,3H),1.08(s,3H),0.99(d,J＝6.9Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.6,170.5,148.2,147.4,137.8,132.8(q,J＝38.9Hz),129.8,126.9,117.4,117.0(q,J＝269.3Hz),114.7,108.3,76.5,74.6,73.5,61.2,61.1,52.6,43.4,38.9,36.5,31.9,31.7,30.7,22.9,22.8,20.9,20.8,17.2,15.7,14.1ppm；HRMS(ESI)C39H58F3N3O6[M+H]+的计算值636.3255，实测值636.3164；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
埃博霉素10：根据上面针对5的制备所述的一般程序由乙烯基碘15(15mg，0.028mmol，1.0当量)和锡烷25c(36mg，0.07mmol，2.5当量)进行制备，得到呈白色泡沫状物的10(12mg，0.021mmol，75％)。10：Rf＝0.32(硅胶，在己烷中50％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-43.3(在CHCl3中c＝0.2)；FT-IR(纯)νmax 3456,3351,2958,2926,2856,1732,1687,1619,1514,1462,1380,1288,1251,1147,1053,1009,978,953,911,886,751,673cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.69(d,J＝2.4Hz,1H),7.18-7.14(m,2H),6.83(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),6.77(dt,J＝7.6,1.2Hz,1H),6.59(s,1H),6.49(d,2.4Hz,1H),5.48(dd,J＝6.8,3.6Hz,1H),4.11(dd,J＝10.0,3.5Hz,1H),3.85(br s,1H),3.79(t,J＝4.3Hz,1H),3.29(qd,J＝6.9,6.9Hz,1H),2.82(dd,J＝6.8,5.6Hz,1H),2.55(dd,J＝14.4,9.9Hz,1H),2.42(dd,J＝14.4,3.3Hz,1H),2.10(d,J＝1.1Hz,3H),1.99-1.94(m,1H),1.71-1.58(m,6H),1.47-1.38(m,5H),1.34(s,3H),1.28(s,3H),1.16(d,J＝6.9Hz,3H),1.08(s,3H),1.00(d,J＝7.0Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.9,170.8,149.9,136.3,130.7,128.7,126.4,124.1,118.7,118.4,117.5,107.3,74.8,73.8,61.4,61.3,52.6,43.7,39.1,36.7,32.0,31.9,30.9,29.9,28.0,27.0,21.2,21.0,17.4,15.9,14.3,13.8ppm；HRMS(ESI)C32H45N3O6[M+H]+的计算值568.3381，实测值568.3369；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
埃博霉素11：根据上面针对5的制备所述的一般程序由乙烯基碘15(20mg，0.037mmol，1.0当量)和锡烷25d(48mg，0.09mmol，2.5当量)进行制备，得到呈白色泡沫状物的11(16mg，0.025mmol，68％)。11：Rf＝0.49(硅胶，在己烷中70％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-43.3(在CHCl3中c＝3.0)；FT-IR(纯)νmax 3491,3389,3259,2963,2929,2878,1731,1688,1641,1587,1521,1453,1381,1333,1315,1300,1263,1143,1111,1062,1049,1008,977,911,859,825,757,734,686cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.77(d,J＝2.5Hz,1H),7.71(d,J＝2.5Hz,1H),7.56(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.81(d,J＝8.8Hz,1H),6.59(s,1H),6.48(d,J＝2.5Hz,1H),5.45(dd,J＝7.4,3.1Hz,1H),4.19(dd,J＝10.2,3.2Hz,1H),3.78(t,J＝4.3Hz,1H),3.34-3.29(m,1H),2.82(dd,J＝7.3,5.0Hz,1H),2.54(dd,J＝14.2,10.2Hz,1H),2.38(dd,J＝14.2,3.3Hz,1H),2.10(d,J＝1.1Hz,3H),2.09-2.06(m,1H),1.97-1.91(m,1H),1.74-1.69(m,2H),1.51-1.37(m,5H),1.36(s,3H),1.34-1.32(m,1H),1.28(s,3H),1.16(d,J＝6.9Hz,3H),1.08(s,3H),1.00(d,J＝7.0Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.9,170.7,150.1,143.3,137.2,131.2,127.5,124.4,121.2(q,J＝272.6Hz),118.1,118.08(q,J＝5.5Hz),113.8(q,J＝30.9Hz),108.0,74.4,73.4,61.7,60.6,52.9,43.3,39.2,36.6,32.2,32.1,30.9,23.0,22.8,21.3,20.4,17.3,16.0,14.3,14.0ppm；HRMS(ESI)C33H44F3N3O6[M+H]+的计算值636.3255，实测值636.3242；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
埃博霉素12：根据上面针对5的制备所述的一般程序由乙烯基碘15(18mg，0.034mmol，1.0当量)和锡烷25e(39mg，0.085mmol，2.5当量)进行制备，得到呈白色泡沫状物的12(12mg，0.020mmol，63％)。12：Rf＝0.55(硅胶，在己烷中70％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-10.0在CHCl3中c＝0.2)；FT-IR(纯)νmax 3456,3374,2924,2853,1733,1685,1632,1518,1464,1380,1258,1188,1145,1044,977,879,814,769,652cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.70(s,1H),6.95(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.92-6.82(m,2H),6.58(s,1H),6.50(s,1H),5.47(dd,J＝6.5,3.5Hz,1H),4.12(dd,J＝9.7,3.2Hz,1H),3.78(t.J＝4.2Hz,1H),3.29(qd,J＝6.9,6.9Hz,1H),2.82(t,J＝6.2Hz,1H),2.55(dd,J＝14.4,9.9Hz,1H),2.41(dd,J＝14.4,3.3Hz,1H),2.09(s,3H),2.08-2.04(m,2H),2.00-1.94(m,1H),1.73-1.67(m,2H),1.54-1.37(m,6H),1.35(s,3H),1.28(s,3H),1.16(d,J＝6.9Hz,3H),1.07(s,3H),0.99(d,J＝7.0Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.8,170.4,154.5(d,J＝237.9Hz),150.2,136.9,136.7,130.5,126.3,118.5,118.3(d,J＝8.7Hz),115.2(d,J＝22.3Hz),110.7(d,J＝25.4Hz),107.7,74.8,73.8,61.4,61.3,52.6,43.7,39.1,36.7,32.0,31.8,30.8,29.8,23.1,23.0,21.3,21.0,17.4,15.9,14.3ppm；HRMS(ESI)C32H44FN3O6[M+H]+的计算值586.3314，实测值586.3313；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
埃博霉素13：根据上面针对5的制备所述的一般程序由乙烯基碘15(26mg，0.048mmol，1.0当量)和锡烷25f(63mg，0.12mmol，2.5当量)进行制备，得到呈白色泡沫状物的13(18mg，0.028mmol，60％)。13：Rf＝0.41(硅胶，在己烷中70％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-54.2(在CHCl3中c＝1.0)；FT-IR(纯)νmax 3496,3384,3265,2963,2928,2882,1740,1685,1642,1590,1521,1438,1365,1354,1322,1292,1263,1136,1110,1076,1048,1010,972,905,868,832,755,734,690cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.54(m,1H),7.25(m,1H),6.99(d,J＝2.6Hz,1H),6.84(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),6.58(s,1H),6.44(d,J＝2.6Hz,1H),5.46(dd,J＝7.1,3.0Hz,1H),4.15(m,1H),4.03(br s,2H),3.86(br s,1H),3.78(dd,J＝7.4,3.8Hz,1H),3.27(qd,J＝6.5,6.5Hz,1H),2.83(dd,J＝6.9,5.3Hz,1H),2.53(dd,J＝14.2,10.0Hz,1H),2.52(br s,1H),2.38(dd,J＝14.2,3.2Hz,1H),2.14-2.10(m,1H),2.08(s,3H),1.97-1.92(m,1H),1.74-1.68(m,2H),1.51-1.38(m,6H),1.31(s,3H),1.28(s,3H),1.15(d,J＝6.9Hz,3H),1.07(s,3H),1.00(d,J＝6.9Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.7,170.6,149.7,147.0,136.7,132.7,130.4,128.9,126.8(q,J＝30.4Hz),120.2(q,J＝272.9Hz),118.4,117.6,112.3(q,J＝30.9Hz),106.6,77.5,74.3,73.3,61.5,61.2,52.7,43.2,39.0,36.6,32.1,32.0,22.9,22.7,21.0,20.5,17.1,15.7,13.9ppm；HRMS(ESI)C33H44F3N3O6[M+H]+的计算值636.3255，实测值636.3268；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
埃博霉素14：根据上面针对5的制备所述的一般程序由乙烯基碘15(15mg，0.028mmol，1.0当量)和锡烷25g(33mg，0.07mmol，2.5当量)进行制备，得到呈白色泡沫状物的14(15mg，0.026mmol，91％)。14：Rf＝0.44(硅胶，在己烷中70％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-65.0(在CHCl3中c＝0.2)；FT-IR(纯)νmax 3443,3362,3237,2958,2925,1730,1688,1635,1590,1528,1460,1382,1327,1258,1171,1046,965,915,887,841,815,762,734cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.78(t,J＝2.3Hz,1H),7.53-7.50(m,1H),6.60(s,1H),6.52-6.47(m,3H),5.46(dd,J＝7.2,3.1Hz,1H),4.17(d,J＝9.4Hz,1H),3.88(br s,2H),3.79(t,J＝4.2Hz,1H),3.29(qd,J＝6.8,6.8Hz,1H),2.82(dd,J＝7.0,5.4Hz,1H),2.58-2.55(br s,1H),2.54(dd,J＝14.1,10.1Hz,1H),2.39(dd,J＝14.2,3.2Hz,1H),2.10(s,3H),2.09-2.07(m,1H),1.97-1.92(m,1H),1.74-1.65(m,3H),1.53-1.49(m,1H),1.46-1.38(m,4H),1.35(s,3H),1.28(s,3H),1.16(d,J＝6.9Hz,3H),1.08(s,3H),1.00(d,J＝7.0Hz,3H)ppm；13CNMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.8,170.7,154.3(d,J＝247.6Hz),149.5,147.0(d,J＝10.5Hz),136.8,131.4(d,J＝7.7Hz),125.9(d,J＝1.4Hz),119.7(d,J＝10.4Hz),118.5,111.1(d,J＝2.2Hz),107.3,102.6(d,J＝23.2Hz),74.5,73.5,61.6,61.3,52.9,43.4,39.2,36.7,32.2,32.1,30.9,23.0,22.8,21.3,20.6,17.3,15.9,14.0ppm；HRMS(ESI)C32H44FN3O6[M+H]+的计算值586.3287，实测值586.3289；纯度：≥95％(UV检测，λ＝254nm)。
环氧甲基酮26：在-78℃下向埃博霉素B(1)(122mg，0.240mmol，1.0当量)在二氯甲烷(5mL)中的搅拌溶液中鼓入新鲜产生的臭氧气泡。在溶液的颜色变成浅蓝色后，将反应混合物用二甲基二硫醚(0.18mL，2.45mmol，10当量)猝灭，使之升温至25℃并搅拌1h。真空除去溶剂，并通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中40→70％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无定形固体的纯环氧甲基酮26(93.0mg，0.225mmol，94％)。26：Rf＝0.26(硅胶，在己烷中60％乙酸乙酯)；[α]D 25＝+12.7(c＝0.60，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 3473,2960,2937,2879,1746,1723,1689,1465,1423,1368,1284,1250,1180,1145,1076,1010,980,957,916,733,672cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝5.31(dd,J＝10.2,1.8Hz,1H),4.31(ddd,J＝10.8,4.8,3.0Hz,1H),4.10(d,J＝4.8Hz,1H),3.70(ddd,J＝3.6,3.6,3.6Hz,1H),3.25(qd,J＝6.6,5.4Hz,1H),2.82(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),2.57(br s,1H),2.54(dd,J＝14.4,10.8Hz,1H),2.34(ddd,J＝15.0,3.0,1.8Hz,1H),2.28(s,3H),2.27(dd,J＝15.0,3.0Hz,1H),1.79-1.72(m,2H),1.69-1.63(m,1H),1.49-1.43(m,1H),1.44-1.37(m,1H),1.42(s,3H),1.36-1.25(m,2H),1.29(s,3H),1.20(d,J＝6.6Hz,3H),1.09(s,3H),0.99(d,J＝7.2Hz,3H)ppm；13CNMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.6,205.0,170.7,76.8,74.5,71.7,62.5,62.2,53.4,42.7,40.0,37.4,32.9,31.3,29.0,26.4,23.3,22.6,22.5,18.0,17.3,14.4ppm；HRMS(ESI)C22H36O7Na[M+Na]+的计算值435.2353，实测值435.2351。
甲硅烷基醚27：在-78℃下向环氧化物26(150mg，0.364mmol，1.0当量)在二氯甲烷(5mL)中的搅拌溶液中添加2,6-二甲基吡啶(0.126mL，1.09mmol，3.0当量)，接着添加三氟甲磺酸三乙基甲硅烷基酯(0.197mL，0.873mmol，2.4当量)。5分钟后，将反应混合物用水(10mL)猝灭，并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用二氯甲烷(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→15％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无定形固体的纯甲硅烷基醚27(231mg，0.360mmol，99％)。27：Rf＝0.37(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；[α]D 25-14.0(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax2955,2913,2877,1749,1734,1696,1459,1414,1381,1308,1240,1196,1157,1106,1080,1064,1040,1010,985,916,859,836,783,737,676cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝5.01(dd,J＝10.2,1.8Hz,1H),4.04(dd,J＝10.2,2.4Hz,1H),3.91(d,J＝9.0Hz,1H),3.04(dq,J＝9.6,6.6Hz,1H),2.94(dd,J＝16.2,2.4Hz,1H),2.86(dd,J＝10.2,4.2Hz,1H),2.77(dd,J＝16.2,4.2Hz,1H),2.37(dd,J＝16.2,2.4Hz,1H),2.24(s,3H),1.76-1.68(m,2H),1.63-1.58(m,1H),1.55-1.45(m,2H),1.42-1.38(m,1H),1.30(s,3H),1.27-1.23(m,1H),1.25(s,3H),1.17(s,3H),1.10(d,J＝6.6Hz,3H),1.07-1.04(m,1H),1.00(t,J＝7.8Hz,9H),0.99(d,J＝7.2Hz,3H),0.98-0.95(m,1H),0.93(t,J＝7.8Hz,9H),0.67(q,J＝7.8Hz,6H),0.61(q,J＝7.8Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝215.2,203.4,171.8,80.3,76.5,76.3,62.5,62.2,53.5,48.6,39.4.36.8,32.1,31.1,30.3,26.0,24.9,24.7,23.7,22.6,19.7,17.8,7.3,7.1,5.7,5.4ppm；HRMS(ESI)C34H64O7Si2Na[M+Na]+的计算值663.4083，实测值663.4057。
烯烃甲基酮28：在-78℃下向六氯化钨(496mg，1.25mmol，2.0当量)在四氢呋喃(7mL)中的搅拌悬浮液中小心地添加正丁基锂(1.6M己烷，1.56mL，2.50mmol，4.0当量)。使反应混合物升温至25℃，搅拌40分钟，然后冷却到-20℃。然后滴加甲硅烷基醚27(401mg，0.626mmol，1.0当量)在四氢呋喃(4mL)中的溶液，并经2h使反应混合物缓慢升温至0℃。然后将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭并升温至25℃。将两相分离，将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中2.5→30％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯烯烃28(335mg，0.536mmol，86％)。28：Rf＝0.21(硅胶，在己烷中10％乙醚)；[α]D 25＝-18.2(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2953,2912,2877,1747,1731,1696,1459,1414,1381,1365,1307,1275,1263,1240,1198,1159,1110,1062,1042,1018,984,859,835,783,744,674cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝5.16(dd,J＝7.8,7.8Hz,1H),4.84(dd,J＝10.2,1.8Hz,1H),4.04(dd,J＝10.2,1.8Hz,1H),3.91(dd,J＝9.0Hz,1H),3.01(dq,J＝9.6,6.6Hz,1H),2.91(dd,J＝16.2,1.8Hz,1H),2.76(dd,J＝16.2,10.8Hz,1H),2.53(ddd,J＝15.0,10.2,10.2Hz,1H),2.41(dd,J＝14.4,10.8Hz,1H),2.24(dd,J＝14.4,7.2Hz,1H),2.19(s,3H),1.76-1.66(m,2H),1.69(s,3H),1.57-1.49(m,2H),1.22(s,3H),1.14(s,3H),1.10-1.00(m,2H),1.09(d,J＝6.6Hz,3H),0.98(t,J＝7.8Hz,9H),0.97(d,J＝6.6Hz,3H),0.88(t,J＝7.8Hz,9H),0.65(q,J＝7.8Hz,6H),0.55(q,J＝7.8Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝215.2,204.4,171.9,142.4,117.7,80.1,79.8,76.6,53.6,48.2,39.3,37.6,32.3,31.4,28.6,27.5,26.3,25.1,23.7,23.2,19.2,17.7,7.4,7.0,5.8,5.4ppm；HRMS(ESI)C34H64O6Si2Na[M+Na]+的计算值647.4134，实测值647.4134。
氮丙啶甲基酮29：在25℃下向烯烃28(320mg，0.512mmol，1.0当量)在三氟乙醇(3mL)中的搅拌溶液中添加O-(2,4-二硝基苯基)羟胺(153mg，0.768mmol，1.5当量)，接着添加双[铑(α,α,α’,α’,-四甲基-1,3-苯二丙酸)](7.8mg，0.0102mmol，0.02当量)。将反应混合物搅拌30分钟，用二氯甲烷(40mL)稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液(3×15mL)和盐水(20mL)洗涤。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在二氯甲烷中2.5→5％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈淡黄色油状物的纯氮丙啶29(290mg，0.462mmol，90％)。29：Rf＝0.29(硅胶，在乙酸乙酯中5％甲醇)；[α]D 25＝-14.5(c＝0.64，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2953,2918,2877,1747,1732,1696,1460,1414,1382,1307,1240,1199,1157,1107,1067,1043,1018,985,858,835,783,736,675cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝4.90(dd,J＝9.0,1.8Hz,1H),4.18(d,J＝9.6Hz,1H),4.07(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),2.88(dq,J＝10.2,6.6Hz,1H),2.76-2.68(m,2H),1.94(d,J＝16.2Hz,1H),1.83-1.78(m,1H),1.76-1.65(m,2H),1.72(s,3H),1.60-1.53(m,1H),1.51-1.45(m,1H),1.41-1.35(m,3H),1.26-1.19(m,1H),1.19(d,J＝6.6Hz,3H),1.15(s,3H),1.09-1.04(m,24H),0.79-0.71(m,12H),0.67(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝213.9,202.3,171.7,80.8,78.2,76.7,53.1,48.3,42.4,39.4,39.3,36.9,33.7,31.43,31.37,25.7,25.4,25.2,25.0,22.8,20.0,17.7,7.5,7.3,6.0,5.8ppm；HRMS(ESI)C34H66NO6Si2[M+H]+的计算值640.4423，实测值640.4442。
叔氮丙啶30：在25℃下向氮丙啶29(105mg，0.164mmol，1.0当量)在二甲基甲酰胺(0.8mL)中的搅拌溶液中添加(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(196mg，0.820mmol，5.0当量)，接着添加碳酸钾(91mg，0.656mmol，4.0当量)。将反应混合物加热到75℃，搅拌12h，然后使之冷却到25℃。添加水(1.5mL)，并用乙酸乙酯(3×3mL)萃取猝灭的反应混合物。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中10→40％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈淡黄色油状物的纯N-烷基化氮丙啶30(118mg，0.148mmol，90％)。30：Rf＝0.31(硅胶，在己烷中30％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-6.9(c＝0.26，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2953,2931,2877,1748,1734,1697,1462,1414,1382,1361,1307,1250,1196,1158,1109,1079,1042,1008,985,835,780,737,667cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝4.94(dd,J＝9.0,1.8Hz,1H),4.19(d,J＝9.6Hz,1H),4.05(dd,J＝7.8,4.8Hz,1H),3.84(ddd,J＝9.6,6.6,6.6Hz,1H),3.77(ddd,J＝10.2,5.4,5.4Hz,1H),2.85(dq,J＝9.6,6.6Hz,1H),2.75-2.71(m,2H),2.42(ddd,J＝12.6,6.6,6.6Hz,1H),2.19(d,J＝16.2Hz,1H),1.86-1.76(m,2H),1.83(s,3H),1.72-1.59(m,3H),1.48-1.36(m,2H),1.25-1.10(m,3H),1.21(d,J＝7.2Hz,3H),1.16(s,3H),1.11-1.06(m,18H),1.04(m,J＝6.6Hz,3H),1.00(s,9H),0.83-0.77(m,6H),0.72(q,J＝7.8Hz,6H),0.68(s,3H),0.10(s,6H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝213.9,202.5,171.9,80.8,78.1,76.8,64.3,54.6,53.1,50.7,48.3,42.8,39.4,36.9,35.9,31.7,31.6,26.2(3C),25.5,25.1,25.0,23.0,20.0,18.5,17.8,15.5,7.4,7.3,6.0,5.8,-5.12,-5.13ppm；HRMS(ESI)C42H84NO7Si3[M+H]+的计算值798.5550，实测值798.5541。
甲硫基噻唑33：如先前所述(Nicolaou等人，1998)由可商购获得的2,4-二溴噻唑(32)制备甲硫基噻唑33。物理和光谱数据与报道的那些物理和光谱数据(Nicolaou等人，1998)一致。
羟甲基噻唑34：在-78℃下向甲硫基噻唑33(1.48g，7.04mmol，1.0当量)在二乙醚(20mL)中的搅拌溶液中小心地添加叔丁基锂(1.4M戊烷，6.0mL，8.40mmol，1.2当量)。5分钟后，添加二甲基甲酰胺(1.03mL，14.1mmol，2.0当量)并继续搅拌20分钟。然后将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭，并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中20→50％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯噻唑34(0.850g，5.27mmol，75％)。34：Rf＝0.26(硅胶，在己烷中50％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3334,3118,2924,2860,1529,1407,1314,1261,1213,1135,1037,966,944,849,752,725cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.05(s,1H),4.71(s,2H),2.69(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝167.5,156.5,114.0,61.2,17.0ppm；HRMS(ESI)C5H8NOS2[M+H]+的计算值162.0042，实测值162.0048。
溴甲基噻唑35：在-78℃下向羟甲基噻唑34(642mg，3.98mmol，1.0当量)在二氯甲烷(6mL)中的搅拌溶液中添加三苯基膦(1.10g，4.18mmol，1.05当量)，接着添加N-溴代琥珀酰亚胺(708mg，3.98mmol，1.0当量)。5分钟后，将反应混合物用水(5mL)猝灭并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中1→5％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯溴甲基噻唑35(0.696g，3.10mmol，78％)。35：Rf＝0.27(硅胶，在己烷中10％乙醚)；FT-IR(纯)νmax 3103,2924,2850,1511,1411,1314,1214,1147,1108,1055,1037,966,882,746,701,672cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.16(s,1H),4.51(s,2H),2.69(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝167.7,152.3,117.0,27.1,16.9ppm；HRMS(ESI)C5H7NS2Br[M+H]+的计算值223.9198，实测值223.9201。
膦酸酯36：在25℃下将亚磷酸三乙酯(5mL，29.2mmol，6.4当量)添加到含有溴甲基噻唑35(1.02g，4.55mmol，1.0当量)的烧瓶中。将搅拌的反应混合物加热到160℃持续2h，然后在稳定的N2(g)流下移除过量的亚磷酸三乙酯。使残余物冷却到25℃并通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中70→100％乙酸乙酯)纯化，得到呈无色油状物的纯膦酸酯36(1.18g，4.19mmol，92％)。36：Rf＝0.20(硅胶，乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3463,3108,2982,2929,1646,1515 1478,1411,1393,1368,1314,1248,1163,1097,1023,966,947,867,842,808,781,716,660cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.08(d,J＝3.6Hz,1H),4.08(dq,J＝8.4,7.2Hz,4H),3.32(d,J＝21.0Hz,2H),2.65(s,3H),1.28(t,J＝7.2Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝166.1,146.8(d,J＝8.1Hz),115.6(d,J＝8.0Hz),62.4(d,J＝6.5Hz),29.5(d,J＝140Hz),16.9,16.5(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C9H17NO3PS2[M+H]+的计算值282.0382，实测值282.0378。
羟甲基噻唑37：如先前所述(Nicolaou等人，1998)由可商购获得的2,4-二溴噻唑(32)制备羟甲基噻唑37。物理和光谱数据与报道的那些物理和光谱数据(Nicolaou等人，1998)一致。
甲硅烷基醚噻唑38：如先前所述(Nicolaou等人，1998)由羟甲基噻唑37制备甲硅烷基醚噻唑38。物理和光谱数据与报道的那些物理和光谱数据(Nicolaou等人，1998)一致。
羟甲基噻唑39：根据上面针对34的制备所述的程序由甲硅烷基醚噻唑38(2.42g，7.85mmol，1.0当量)进行制备，得到呈无色油状物的羟甲基噻唑39(1.59g，6.13mmol，78％)。物理和光谱数据与报道的那些物理和光谱数据(Lee等人，2001)一致。
溴甲基噻唑40：在25℃下向羟甲基噻唑39(1.41g，5.43mmol，1.0当量)在乙腈(45mL)中的搅拌溶液中依序添加三苯基膦(2.42g，9.23mmol，1.7当量)、2,6-二甲基吡啶(0.25mL，2.17mmol，0.4当量)和四溴化碳(3.06g，9.23mmol，1.7当量)。将反应混合物搅拌2h，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)猝灭，并用二乙醚(3×15mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→10％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯溴甲基噻唑40(1.60g，4.96mmol，91％)。40：Rf＝0.31(硅胶，在己烷中10％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3106,2954,2929,2885,2857,1519,1492,1471,1463,1426,1390,1355,1255,1197,1145,1111,1006,964,939,836,778,706,684,662cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.23(s,1H),4.95(s,2H),4.55(s,2H),0.95(s,9H)0.13(s,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝174.6,151.9,117.4,63.3,27.4,25.9,18.4,-5.3ppm；HRMS(ESI)C11H20BrNOSSi[M+H]+的计算值322.0291，实测值322.0285。
膦酸酯41：在25℃下将亚磷酸三乙酯(2.2mL，12.8mmol，20当量)添加到含有溴甲基噻唑40(202mg，0.63mmol，1.0当量)的烧瓶中。将搅拌的反应混合物加热到160℃持续3h，然后在稳定的N2(g)流下移除过量的亚磷酸三乙酯。使残余物冷却到25℃，并通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中50→100％乙酸乙酯)纯化，得到呈无色油状物的纯膦酸酯41(192mg，0.51mmol，80％)。41：Rf＝0.28(硅胶，乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3476,3107,2955,2930,2903,2858,1519,1472,1463,1444,1392,1361,1321,1253,1198,1164,1099,1055,1027,959,837,779,722,708,674,658cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.17(d,J＝3.5Hz,1H),4.94(s,2H),4.11-4.06(m,4H),3.34(d,J＝21.0Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H),0.95(s,9H)0.12(s,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝173.2,146.1(d,J＝8.3Hz)116.1(d,J＝6.4Hz),63.2,62.4(d,J＝6.6Hz),29.0(d,J＝141.0Hz),25.9,18.4,16.5(d,J＝6.0Hz),-5.3ppm；HRMS(ESI)C15H30NO4PSSi[M+H]+的计算值380.1475，实测值380.1475。
膦酸酯42：在0℃下向膦酸酯41(56mg，0.15mmol，1.0当量)在二甲基甲酰胺(1mL)中的搅拌溶液中添加二氟三甲基硅酸三(二甲基氨基)锍(204mg，0.75mmol，5.0当量)，接着添加水(0.03mL，1.5mmol，10当量)。使反应混合物缓慢升温至25℃，并继续搅拌10h。添加水(3mL)和乙酸乙酯(3mL)并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×2mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(在二氯甲烷中5％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯膦酸酯42(31mg，0.12mmol，79％)。42：Rf＝0.33(硅胶，在二氯甲烷中5％甲醇)；FT-IR(纯)νmax 3319,2983,2909,1520,1477,1443,1393,1346,1325,1231,1163,1139,1097,1050,1022,957,874,845,809,784,723,670cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.14(d,J＝3.2Hz,1H),4.81(s,2H),4.08-4.04(m,4H),3.32(d,J＝21.0Hz,2H),1.25(t,J＝7.1Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝172.5,146.0(d,J＝8.2Hz)116.4(d,J＝6.8Hz),62.5(d,J＝6.6Hz),61.9,28.9(d,J＝141.5Hz),16.5(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C9H16NO4PS[M+H]+的计算值266.0610，实测值266.0601。
叠氮化物43：在25℃下向膦酸酯42(687mg，2.59mmol，1.0当量)在二氯甲烷(10.4mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(0.72mL，5.18mmol，2.0当量)和4-(二甲基氨基)吡啶(32mg，0.26mmol，0.1当量)。冷却到-20℃后，一次性添加对甲苯磺酸酐(1.27g，3.89mmol，1.5当量)。继续搅拌30分钟，然后将反应混合物用水(5mL)猝灭并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用二氯甲烷(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。然后将粗残余物再悬浮于二甲基甲酰胺(5mL)中，并在搅拌下冷却到-20℃。添加叠氮化钠(505mg，7.77mmol，3.0当量)，并继续再搅拌15分钟。然后将反应混合物用水(5mL)猝灭，使之升温至25℃，并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(在二氯甲烷中5％甲醇)纯化，得到呈无色油状物的纯叠氮化物43(643mg，2.22mmol，86％)。43：Rf＝0.44(硅胶，在二氯甲烷中5％甲醇)；FT-IR(纯)νmax3470,3111,2983,2930,2100,1517,1443,1393,1327,1250,1162,1098,1053,1026,965,874,810,783,724cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.25(d,J＝3.5Hz,1H),4.63(s,2H),4.12-4.07(m,4H),3.37(d,J＝21.0Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝164.3,147.4(d,J＝8.1Hz)117.6(d,J＝7.5Hz),62.4(d,J＝6.6Hz),51.4,29.1(d,J＝141.1Hz),16.5(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C9H15N4O3PS[M+H]+的计算值291.0675，实测值291.0675。
膦酸酯44：在25℃下向叠氮化物43(200mg，0.69mmol，1.0当量)在乙酸乙酯(4mL)中的搅拌溶液中添加5％碳载钯(50mg，25％w/w)，并将烧瓶用氢气囊封盖。继续搅拌12h。然后移除氢气囊，并将反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。然后在25℃下将粗残余物再悬浮于四氢呋喃(5mL)中，并在搅拌下依序添加三乙胺(0.26mL，1.80mmol，2.6当量)、4-(二甲基氨基)吡啶(9mg，0.07mmol，0.1当量)和二碳酸二叔丁酯(332mg，1.52mmol，2.2当量)。将反应混合物加热到60℃持续2.5h，使之冷却到25℃，然后用饱和氯化铵水溶液(3mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(50→100％乙酸乙酯)纯化，得到呈无色油状物的纯膦酸酯44(293mg，0.63mmol，91％)。44：Rf＝0.27(硅胶，乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3459,3109,2980,2934,1793,1753,1699,1519,1479,1458,1422,1393,1367,1341,1254,1228,1129,1054,1026,965,890,853,783cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.15(d,J＝3.5Hz,1H),5.04(s,2H),4.10-4.05(m,4H),3.34(d,J＝21.0Hz,2H),1.48(s,18H)1.26(t,J＝7.1Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝167.8,151.9,146.2(d,J＝7.7Hz),116.3(d,J＝7.2Hz),83.4,62.3(d,J＝6.6Hz),47.8,29.0(d,J＝140.9Hz),28.1,16.5(d,J＝6.1Hz)ppm；HRMS(ESI)C19H33N2O7PS[M+Na]+的计算值487.1638，实测值487.1620。
羟乙基噻唑45：在-78℃下向2,4-二溴噻唑32(10.2g，42.0mmol，1.0当量)在二乙醚(250mL)中的搅拌溶液中小心地添加正丁基锂(2.5M己烷，16.8mL，42.0mmol，1.0当量)。将反应混合物搅拌20分钟，然后添加环氧乙烷的溶液(2.5M四氢呋喃，16.8mL，42.0mmol，1.0当量)，接着滴加三氟化硼二乙基醚合物(5.18mL，42.0mmol，1.0当量)在二乙醚(30mL)中的溶液。20分钟后，将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(50mL)猝灭并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×80mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中30→60％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯噻唑45(5.42g，26.0mmol，62％)。45：Rf＝0.24(硅胶，在己烷中50％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3350,3122,2881,1480,1421,1330,1257,1210,1135,1085,1052,938,887,857,832,733cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.12(s,1H),4.02(td,J＝6.0,6.0Hz,2H),3.22(t,J＝6.0Hz,2H),2.67(t,J＝6.0Hz,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝169.7,124.6,116.5,61.3,36.2ppm；HRMS(ESI)C5H7NOSBr[M+H]+的计算值207.9426，实测值207.9421。
甲硅烷基醚46：在25℃下向羟乙基噻唑45(5.38g，25.9mmol，1.0当量)在二甲基甲酰胺(25mL)中的搅拌溶液中添加叔丁基二甲基甲硅烷基氯(4.68g，31.0mmol，1.2当量)，接着添加咪唑(2.64g，38.9mmol，1.5当量)。1h后，将反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，然后用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤。将两相分离，并将有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中2→8％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯甲硅烷基醚46(8.25g，25.6mmol，99％)。46：Rf＝0.24(硅胶，在己烷中5％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3125,2954,2928,2856,1481,1471,1437,1388,1361,1331,1254,1147,1099,1050,1006,939,914,884,831,810,776,728cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.09(s,1H),3.93(t,J＝6.0Hz,2H),3.19(t,J＝6.0Hz,2H),0.87(s,9H),0.02(s,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝169.6,124.1,116.7,61.9,37.2,26.0,18.4,-5.3ppm；HRMS(ESI)C11H21NOSiSBr[M+H]+的计算值322.0291，实测值322.0281。
羟甲基噻唑47：在-78℃下向甲硅烷基醚46(2.45g，7.60mmol，1.0当量)在二乙醚(75mL)中的搅拌溶液中小心地添加叔丁基锂(1.7M戊烷，5.40mL，9.12mmol，1.2当量)。1分钟后，滴加二甲基甲酰胺(1.17mL，15.2mmol，2.0当量)。5分钟后，将反应混合物用甲醇(30mL)猝灭。然后添加硼氢化钠(1.44g，38.0mmol，5.0当量)，并使反应混合物升温至0℃。5分钟后，将反应混合物用水(60mL)猝灭并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中30→60％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯噻唑47(1.70g，6.23mmol，82％)。47：Rf＝0.32(硅胶，在己烷中60％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3301,2954,2928,2857,1530,1471,1387,1361,1254,1156,1096,969,937,913,834,810,774,660cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.05(s,1H),4.73(d,J＝6.0Hz,2H),3.94(t,J＝6.0Hz,2H),3.18(t,J＝6.6Hz,2H),3.09(t,J＝6.0Hz,1H),0.87(s,9H),0.02(s,6H)ppm；13CNMR(151MHz,CDCl3)δ＝169.0,155.6,114.7,62.2,60.9,37.0,26.0,18.4,-5.3ppm；HRMS(ESI)C12H24NO2SiS[M+H]+的计算值296.1111，实测值296.1102。
溴甲基噻唑48：在-78℃下向羟甲基噻唑47(2.45g，8.96mmol，1.0当量)在二氯甲烷(30mL)中的搅拌溶液中添加三苯基膦(2.47g，9.41mmol，1.05当量)，接着添加N-溴代琥珀酰亚胺(1.59g，8.96mmol，1.0当量)。5分钟后，将反应混合物用水(50mL)猝灭并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中2→8％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯溴甲基噻唑48(2.93g，8.71mmol，97％)。48：Rf＝0.19(硅胶，在己烷中5％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 2954,2928,2883,2856,1517,1471,1424,1387,1361,1333,1254,1214,1161,1095,1053,1006,977,937,915,834,810,775,731,679,659cm–1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.16(s,1H),4.55(s,2H),3.95(t,J＝6.0Hz,2H),3.19(t,J＝6.0Hz,2H),0.87(s,9H),0.02(s,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝169.2,151.4,117.8,77.4,62.1,37.1,27.4,26.0,18.4,-5.3ppm；HRMS(ESI)C12H23NOSiSBr[M+H]+的计算值336.0448，实测值336.0441。
膦酸酯49：在25℃下将亚磷酸三乙酯(5.0mL，29.2mmol，3.5当量)添加到含有溴甲基噻唑48(2.83g，8.41mmol，1.0当量)的烧瓶中。将搅拌的反应混合物加热到160℃持续2h，然后在稳定的N2(g)流下移除过量的亚磷酸三乙酯。使残余物冷却到25℃，并通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中50→100％乙酸乙酯)纯化，得到呈无色油状物的纯膦酸酯49(3.29g，8.36mmol，99％)。49：Rf＝0.35(硅胶，乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3468,2955,2929,2857,1652,1519,1472,1444,1391,1361,1323,1252,1162,1097,1054,1026,964,917,836,811,777,723,662cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.09(d,J＝3.6Hz,1H),4.08(dq,J＝8.4,7.2Hz,4H),3.93(t,J＝6.0Hz,2H),3.36(d,J＝21.0Hz,2H),3.17(t,J＝6.0Hz,2H),1.28(t,J＝7.2Hz,6H),0.88(s,9H),0.02(s,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝167.6,145.7(d,J＝8.0Hz),116.2(d,J＝7.1Hz),62.4(d,J＝6.5Hz),62.3,37.1,29.5(d,J＝140.1Hz),26.0,18.4,16.6(d,J＝6.0Hz),-5.3ppm；HRMS(ESI)C16H32NO4SiPSNa[M+Na]+的计算值416.1451，实测值416.1441。
膦酸酯50：在0℃下向膦酸酯49(2.75g，6.99mmol，1.0当量)在四氢呋喃(20mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.90mL，34.9mmol)。1h后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)猝灭，并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在二氯甲烷中0→10％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯醇50(1.94g，6.95mmol，99％)。50：Rf＝0.20(硅胶，在二氯甲烷中5％甲醇)；FT-IR(纯)νmax 3389,2982,2909,1653,1519,1477,1443,1393,1368,1324,1226,1162,1126,1098,1048,1017,963,874,842,808,784,722,668cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.07(d,J＝3.6Hz,1H),4.07(dq,J＝7.8,6.6Hz,4H),3.96(td,J＝6.0,6.0Hz,2H),3.66(t,J＝6.0Hz,1H),3.33(d,J＝21.0Hz,2H),3.16(t,J＝6.0Hz,2H),1.27(t,J＝7.2Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝168.3,146.1(d,J＝8.6Hz),115.8(d,J＝8.0Hz),62.4(d,J＝6.6Hz),61.3,35.7,29.5(d,J＝140.4Hz),16.5(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C10H18NO4PSNa[M+Na]+的计算值302.0586，实测值302.0577。
叠氮化物51：在25℃下向膦酸酯50(1.37g，4.91mmol，1.0当量)在二氯甲烷(10mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(2.05mL，14.7mmol，3.0当量)和4-(二甲基氨基)吡啶(60mg，0.49mmol，0.1当量)。冷却到-20℃后，一次性添加对甲苯磺酸酐(3.20g，9.81mmol，2.0当量)。30分钟后，将反应混合物用水(10mL)猝灭并升温至25℃。将两相分离，并将水层用二氯甲烷(3×10mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。然后在25℃下将粗残余物再悬浮于二甲基甲酰胺(5mL)中，并在搅拌下添加叠氮化钠(957mg，14.7mmol，3.0当量)。将反应混合物加热到65℃持续2h，然后使之冷却到25℃。然后将反应混合物用水(20mL)猝灭，并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在二氯甲烷中0→4％甲醇)纯化，得到呈无色油状物的纯叠氮化物51(1.16g，3.81mmol，78％)。51：Rf＝0.38(硅胶，在二氯甲烷中5％甲醇)；FT-IR(纯)νmax 3464,3111,2983,2931,2098,1647,1519,1477,1445,1394,1323,1250,1163,1124,1098,1053,1025,965,873,846,828,783,725,663cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.14(d,J＝3.6Hz,1H),4.09(dq,J＝7.8,7.2Hz,4H),3.71(t,J＝6.6Hz,2H),3.37(d,J＝21.0Hz,2H),3.23(t,J＝6.6Hz,2H),1.29(t,J＝7.2Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝165.9,146.7(d,J＝8.1Hz),116.5(d,J＝7.2Hz),62.4(d,J＝6.0Hz),50.7,33.1,29.6(d,J＝140.3Hz),16.6(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C10H17N4O3PSNa[M+Na]+的计算值327.0651，实测值327.0661。
膦酸酯52：在25℃下向叠氮化物51(1.06g，3.48mmol，1.0当量)在四氢呋喃/水(9:1，15mL)中的搅拌溶液中添加三苯基膦(2.74g，10.5mmol，3.0当量)。将反应混合物加热到65℃持续1.5h，然后使之冷却到25℃。然后依序添加水(6mL)、碳酸氢钠(0.882g，10.5mmol，3.0当量)和二碳酸二叔丁酯(1.52g，6.96mmol，2.0当量)，并继续搅拌2.5h。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在二氯甲烷中0→7.5％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的膦酸酯52(1.65g，3.44mmol，99％)。52：Rf＝0.37(硅胶，在二氯甲烷中5％甲醇)；FT-IR(纯)νmax 3471,2980,2933,1791,1748,1697,1519,1478,1444,1393,1367,1353,1254,1220,1166,1126,1054,1026,962,892,854,806,779,722cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.10(d,J＝3.6Hz,1H),4.08(dq,J＝7.8,7.2Hz,4H),3.96-3.94(m,2H),3.35(d,J＝21.0Hz,2H),3.25-3.23(m,2H),1.49(s,18H),1.28(t,J＝7.2Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝166.7,152.3,146.5(d,J＝7.8Hz),116.1(d,J＝7.2Hz),82.8,62.4(d,J＝6.0Hz),46.1,32.9,29.5(d,J＝140.0Hz),28.2,16.6(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C20H35N2O7PSNa[M+Na]+的计算值501.1795，实测值501.1803。
吡唑酯55：在25℃下向悉尼酮53(Hammick和Voaden，1961；Masuda和Okutani，1974)(3.09g，21.1mmol，1.0当量)在二甲苯(10mL)中的搅拌悬浮液中添加丙炔酸甲酯(3.55g，42.3mmol，2.0当量)。将反应混合物加热到130℃持续12h，然后使之冷却到25℃并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→30％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的的纯吡唑酯55(2.44g，13.1mmol，62％)及呈无色油状物的其区域异构体55a(0.943g，5.06mmol，24％)。55：Rf＝0.26(硅胶，在己烷中40％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3137,2996,2951,1718,1503,1458,1441,1397,1366,1320,1290,1217,1126,1076,1044,1010,977,946,808,776,721cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.77(s,1H),3.92(s,3H),3.90(s,3H),2.43(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝162.6,142.7,138.8,111.2,52.2,37.5,18.6ppm；HRMS(ESI)C7H11N2O2S[M+H]+的计算值187.0536，实测值187.0531。55a：Rf＝0.37(硅胶，在己烷中40％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 2996,2949,1713,1519,1435,1405,1389,1365,1314,1275,1221,1169,1108,1045,983,945,871,805,777,728cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.93(s,1H),3.97(s,3H),3.85(s,3H),2.48(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝163.0,141.9,139.8,116.4,51.5,37.4,18.8ppm；HRMS(ESI)C7H11N2O2S[M+H]+的计算值187.0536，实测值187.0529。
羟甲基吡唑56：在-78℃下向吡唑酯55(2.44g，13.1mmol，1.0当量)在二氯甲烷(36mL)中的搅拌溶液中滴加二异丁基氢化铝(1.0M二氯甲烷，40.0mL，40.0mmol，3.0当量)。10分钟后，将反应混合物用HCl的水溶液(2.0M，30mL)猝灭，使之升温至25℃，并再搅拌2h。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中50→100％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯吡唑56(1.70g，10.7mmol，82％)。56：Rf＝0.22(硅胶，乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3327,2925,2869,1508,1423,1318,1379,1279,1216,1147,1057,1020,1001,976,771cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.25(s,1H),4.62(d,J＝6.0Hz,2H),3.83(s,3H),2.40(s,3H),2.27(t,J＝6.0Hz,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝151.7,137.5,107.1,59.2,36.5,18.8ppm；HRMS(ESI)C6H11N2OS[M+H]+的计算值159.0587，实测值159.0581。
溴甲基吡唑57：在-78℃下向羟甲基吡唑56(1.70g，10.7mmol，1.0当量)在二氯甲烷(20mL)中的搅拌溶液中添加三苯基膦(2.96g，11.3mmol，1.05当量)，接着添加N-溴代琥珀酰亚胺(1.90g，10.7mmol，1.0当量)。5分钟后，将反应混合物用水(20mL)猝灭并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→20％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯溴甲基吡唑57(2.03g，9.06mmol，85％)。57：Rf＝0.30(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3122,2924,1503,1425,1317,1285,1213,1159,1111,1082,1043,1007,974,801,767,711cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.30(s,1H),4.43(s,2H),3.84(s,3H),2.41(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝148.4,138.1,108.4,36.7,25.3,18.7ppm；HRMS(ESI)C6H10N2SBr[M+H]+的计算值220.9743，实测值220.9749。
膦酸酯58：在25℃下将亚磷酸三乙酯(4mL，23.3mmol，2.6当量)添加到含有溴甲基吡唑57(2.03g，9.06mmol，1.0当量)的烧瓶中。然后将搅拌的反应混合物加热到160℃持续2h，然后在稳定的N2(g)流下移除过量的亚磷酸三乙酯。使残余物冷却到25℃，并通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中50→90％乙酸乙酯)纯化，得到呈无色油状物的纯膦酸酯58(2.49g，8.97mmol，99％)。58：Rf＝0.43(硅胶，丙酮)；FT-IR(纯)νmax 3471,2982,2927,1505,1441,1425,1392,1368,1253,1163,1097,1054,1025,963,848,815,757,727,696cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.27(d,J＝1.8Hz,1H),4.08(dq,J＝7.2,7.2Hz,4H),3.81(s,3H),3.15(d,J＝20.4Hz,2H),2.39(s,3H),1.28(t,J＝7.2Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝142.6(d,J＝7.1Hz),137.4(d,J＝2.3Hz),108.7(d,J＝3.3Hz),62.3(d,J＝6.3Hz),36.5,26.9(d,J＝141.0Hz),18.7,16.6(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C10H20N2O3PS[M+H]+的计算值279.0927，实测值279.0930。
膦酸三氟乙酯59：向含有膦酸酯58(2.49g，8.97mmol，1.0当量)的烧瓶中添加三甲基甲硅烷基氯(5.75mL，45.3mmol，5.1当量)，并将反应混合物在80℃下搅拌72h。然后使反应混合物冷却到25℃，并真空移除三甲基甲硅烷基氯。将残余物再悬浮于二氯甲烷(30mL)中，并在搅拌下将溶液冷却到0℃。然后滴加草酰氯(3.05g，24.0mmol，2.5当量)在二氯甲烷(5mL)中的溶液。使反应混合物升温至25℃并搅拌4h。然后真空移除溶剂，并将残余物再悬浮于二氯甲烷(30mL)中。在搅拌下将溶液冷却到0℃，并依序添加三乙胺(7.58mL，54.4mmol，6.0当量)、三氟乙醇(2.72mL，36.2mmol，4.0当量)和4-(二甲基氨基)吡啶(22.1mg，0.181mmol，0.02当量)。使反应混合物缓慢升温至25℃并搅拌12h。然后将反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，并用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤。将两相分离，并将有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中20→60％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯膦酸三氟乙酯59(3.00g，7.77mmol，87％)。59：Rf＝0.17(硅胶，在己烷中50％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 2971,1504,1422,1291,1260,1168,1103,1070,1007,963,879,845,780,704cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.21(d,J＝1.8Hz,1H),4.42-4.31(m,4H),3.81(d,J＝1.2Hz,3H),3.33(d,J＝21.0Hz,2H),2.39(s,3H)ppm；13CNMR(151MHz,CDCl3)δ＝140.3(d,J＝8.1Hz),138.2(d,J＝2.1Hz),122.7(qd,J＝275.9,8.0Hz),108.6(d,J＝5.3Hz),62.5(qd,J＝37.7,6.0Hz),36.6,26.8(d,J＝143.3Hz),18.6ppm；HRMS(ESI)C10H14N2O3PS[M+H]+的计算值387.0361，实测值387.0346。
噻唑氨基甲酸酯61：在25℃下向氨基噻唑酯60(500mg，2.90mmol，1.0当量)在四氢呋喃(9.7mL)中的搅拌溶液中依序添加三乙胺(0.53mL，3.77mmol，1.3当量)、4-(二甲基氨基)吡啶(35mg，0.29mmol，0.1当量)和二碳酸二叔丁酯(696mg，3.19mmol，1.1当量)。将反应混合物加热到60℃持续1h，然后使之冷却到25℃，并用饱和氯化铵水溶液(5mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(在己烷中25％乙酸乙酯)纯化，得到呈白色固体的纯噻唑氨基甲酸酯61(569mg，2.10mmol，72％)。61：Rf＝0.24(硅胶，在己烷中25％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3168,3068,2980,2935,1713,1553,1478,1455,1393,1368,1331,1294,1235,1207,1154,1098,1071,1021,957,915,875,802,734,682cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝8.67(br s,1H),7.77(s,1H),4.35(q,J＝7.2Hz,2H),1.52(s,9H),1.36(t,J＝7.2Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝161.5,159.8,152.3,142.1,121.7,83.3,61.4,28.3,14.5ppm；HRMS(ESI)C11H16N2O4S[M+Na]+的计算值295.0723，实测值295.0712。
羟甲基噻唑62：在25℃下向噻唑氨基甲酸酯61(1.14g，4.19mmol，1.0当量)在二乙醚(14mL)中的搅拌溶液中添加硼氢化锂(2.0M四氢呋喃，10.5mL，21.0mmol，5.0当量)。1h后，将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(10mL)缓慢猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×8mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(在己烷中70％乙酸乙酯)纯化，得到呈无色油状物的纯醇62(907mg，3.94mmol，94％)。62：Rf＝0.57(硅胶，在己烷中70％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3320,3185,3064,2979,2934,1718,1557,1478,1455,1394,1369,1330,1294,1245,1157,1076,1033,965,915,868,792,732,685cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.74(s,1H),4.57(s,2H),1.57(s,9H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝161.6,152.6,151.0,109.2,83.1,60.1,28.3ppm；HRMS(ESI)C9H14N2O3S[M+Na]+的计算值253.0617，实测值253.0616。
溴甲基噻唑63：在-78℃下向羟甲基噻唑62(115mg，0.50mmol，1.0当量)在二氯甲烷(5mL)中的搅拌溶液中添加三苯基膦(135mg，0.51mmol，1.05当量)，接着添加N-溴代琥珀酰亚胺(89mg，0.50mmol，1.0当量)。15分钟后，将反应混合物用水(2.5mL)猝灭，并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯溴甲基噻唑63(104mg，0.35mmol，71％)。63：Rf＝0.31(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3164,3056,2978,2933,2803,1713,1553,1478,1454,1432,1393,1368,1332,1289,1243,1215,1151,1068,1033,977,910,865,791,763,701,655cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝10.08(br s,1H),6.88(s,1H),4.54(s,2H),1.56(s,9H)ppm；13CNMR(151MHz,CDCl3)δ＝161.4,152.6,146.8,111.6,83.2,28.4,27.8ppm；HRMS(ESI)C9H13BrN2O2S[M+H]+的计算值292.9954，实测值292.9950。
膦酸酯64：在25℃下将亚磷酸三乙酯(2.4mL，14.2mmol，20当量)添加到含有溴甲基噻唑63(208mg，0.71mmol，1.0当量)的烧瓶中。将搅拌的反应混合物加热到160℃持续3h，然后在稳定的N2(g)流下移除过量的亚磷酸三乙酯。使残余物冷却到25℃并再悬浮于四氢呋喃(2.4mL)中。向搅拌溶液中依序添加三乙胺(0.26mL，1.85mmol，2.6当量)、4-(二甲基氨基)吡啶(9mg，0.07mmol，0.1当量)和二碳酸二叔丁酯(340mg，1.56mmol，2.2当量)。将反应混合物加热到60℃持续3.5h，使之冷却到25℃，并用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(在己烷中65％乙酸乙酯)纯化，得到呈无色油状物的纯膦酸酯64(256mg，0.57mmol，80％)。64：Rf＝0.28(硅胶，在己烷中65％乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax3475,3109,2981,2934,1776,1725,1526,1490,1458,1395,1370,1345,1326,1248,1156,1120,1054,1027,966,948,846,802,777cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.03(d,J＝3.6Hz,1H),4.10-4.05(m,4H),3.28(d,J＝21.0Hz,2H),1.52(s,18H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝158.0,149.8,142.8(d,J＝8.3Hz),114.5(d,J＝7.7Hz),84.7,62.4(d,J＝6.2Hz),29.3(d,J＝140.7Hz),27.9,16.5(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C18H31N2O7PS[M+Na]+的计算值473.1482，实测值473.1471。
溴甲基苯并噻唑66：在-78℃下向羟甲基苯并噻唑65(1.00g，6.05mmol，1.0当量)在二氯甲烷/四氢呋喃(1:1，40mL)中的搅拌溶液中添加三苯基膦(1.59g，6.05mmol，1.0当量)，接着添加N-溴代琥珀酰亚胺(1.08g，6.05mmol，1.0当量)。5分钟后，将反应混合物用水(20mL)猝灭，并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中2→8％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈白色结晶固体的纯溴甲基苯并噻唑66(0.780g，3.42mmol，57％)。66：Rf＝0.48(硅胶，在己烷中10％乙酸乙酯)；m.p.45-46℃；FT-IR(纯)νmax 3059,3028,1594,1557,1505,1456,1430,1313,1278,1242,1190,1157,1125,1090,1061,1013,938,901,851,756,727,706cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝7.8Hz,1H),7.51(ddd,J＝7.8,7.8,1.2Hz,1H),7.43(ddd,J＝7.8,7.8,1.2Hz,1H),4.82(s,2H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝166.2,152.8,136.2,126.5,125.9,123.5,121.8,27.1ppm；HRMS(ESI)C8H7NS2Br[M+H]+的计算值227.9477，实测值227.9466。
膦酸酯67：在25℃下将亚磷酸三乙酯(2.0mL，11.7mmol，3.4当量)添加到含有溴甲基苯并噻唑66(775mg，3.40mmol，1.0当量)的烧瓶中。将搅拌的反应混合物加热到160℃持续2h，然后在稳定的N2(g)流下移除过量的亚磷酸三乙酯。使残余物冷却到25℃，并通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中60→90％乙酸乙酯)纯化，得到呈无色油状物的纯膦酸酯67(820mg，2.87mmol，84％)。67：Rf＝0.32(硅胶，乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3470,3060,2982,2907,1639,1593,1539,1511,1475,1456,1436,1392,1368,1313,1244,1195,1162,1093,1045,1015,963,891,842,761,731,708,677cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.80(d,J＝7.8Hz,1H),7.86(d,J＝7.8Hz,1H),7.47(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),7.38(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),4.19-4.13(m,4H),3.73(d,J＝21.6Hz,2H),1.32(t,J＝7.2Hz,6H)ppm；13CNMR(151MHz,CDCl3)δ＝161.2(d,J＝9.3Hz),153.1(d,J＝2.4Hz),136.1,126.3,125.3,123.1,121.7,63.0(d,J＝6.6Hz),33.3(d,J＝139Hz),16.5(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C12H16NO3PSNa[M+Na]+的计算值308.0481，实测值308.0482。
膦酸酯69：在25℃下将亚磷酸三乙酯(1.5mL，8.75mmol，3.7当量)添加到含有溴甲基吡啶68(410mg，2.38mmol，1.0当量)的烧瓶中。将搅拌的反应混合物加热到160℃持续2.5h，然后在稳定的N2(g)流下移除亚磷酸三乙酯。将残余物冷却到25℃，并通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中50→80％乙酸乙酯)纯化，得到呈无色油状物的纯膦酸酯69(355mg，2.87mmol，65％)。69：Rf＝0.33(硅胶，乙酸乙酯)；FT-IR(纯)νmax 3467,2983,2931,2908,1588,1570,1474,1435,1392,1368,1238,1199,1162,1097,1048,1018,957,839,809,748,704cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝8.54(dd,J＝4.8,1.8Hz,1H),7.64(ddd,J＝7.8,7.8,1.8Hz,1H),7.39(ddd,J＝7.8,2.4,1.2Hz,1H),7.19-7.16(m,1H),4.08(dq,J＝7.8,7.2Hz,4H),3.42(d,J＝22.2Hz,2H),1.27(t,J＝7.2Hz,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝152.9(d,J＝8.3Hz),149.7(d,J＝2.5Hz),136.7(d,J＝2.6Hz),124.5(d,J＝5.0Hz),122.0(d,J＝3.3Hz),62.4(d,J＝6.5Hz),36.9(d,J＝134.6Hz),16.5(d,J＝6.0Hz)ppm；HRMS(ESI)C10H17NO3P[M+H]+的计算值230.0941，实测值230.0948。
埃博霉素70：在25℃下向埃博霉素D(84)(50mg，0.10mmol，1.0当量)在三氟乙醇(1.1mL)中的搅拌溶液中依序添加O-(2,4-二硝基苯基)羟胺(23mg，0.12mmol，1.1当量)和Rh2(esp)2(4mg，5摩尔％)。4h后，将反应混合物用乙酸乙酯(5mL)稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×3mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。快速柱色谱法(硅胶，在二氯甲烷中4→11％甲醇)得到呈白色固体的纯埃博霉素70(36mg，0.071mmol，70％产率)。70：Rf＝0.24(硅胶，在二氯甲烷中7％甲醇)；[α]D 25＝-35.5(在CHCl3中c＝0.6)；FT-IR(纯)νmax 3294,2958,2930,2876,1730,1687,1598,1557,1503,1452,1383,1292,1256,1179,1148,1042,1009,980,915,882,834,731,669,648cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.98(s,1H),6.63(s,1H),5.54(dd,J＝3.9,3.9Hz,1H),4.15(ddd,J＝10.5,3.5,3.5Hz,1H),3.80(dd,J＝5.3,4.2Hz,1H),3.35(dq,J＝6.5,6.5Hz,1H),2.71(s,3H),2.52(dd,J＝12.8,10.6Hz,1H),2.42(dd,J＝12.9,3.5Hz,1H),2.07(s,3H),2.06(s,1H),1.96-1.76(m,4H),1.52-1.42(m,5H),1.39(s,3H),1.29-1.25(m,3H),1.24(s,3H),1.13(d,J＝6.9Hz,3H),1.04(s,3H),0.97(d,J＝6.9Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.8,171.1,165.1,152.3,136.7,119.2,116.0,76.4,75.8,74.9,52.6,44.5,39.1,38.5,35.4,31.4,30.4,29.9,29.4,25.5,22.3,22.2,19.5,19.3,17.6,16.3,14.7ppm；HRMS(ESI)C27H42N2O5S[M+H]+的计算值507.2887，实测值507.2903。
埃博霉素71：在25℃下向埃博霉素70(15mg，0.030mmol，1.0当量)在二甲基甲酰胺(0.8mL)中的搅拌悬浮液中添加K2CO3(21mg，0.156mmol，6.0当量)和2-溴乙醇(10μL，0.156mmol，6.0当量)。将反应混合物加热到70℃持续15h，然后使之冷却到25℃。将反应混合物用乙酸乙酯(2.5mL)稀释，并用水(2.5mL)洗涤。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×1mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2mL)反洗，用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。快速柱色谱法(硅胶，在二氯甲烷中12％甲醇)得到呈白色固体的纯埃博霉素71(15mg，0.028mmol，93％产率)。71：Rf＝0.19(硅胶，在二氯甲烷中7％甲醇)；[α]D 25＝-42.3(c＝1.0,CHCl3)；FT-IR(纯)νmax 3369,2929,1730,1685,1465,1374,1263,1152,1053,1009,980,882cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.97(s,1H),6.60(s,1H),5.54(dd,J＝3.9,3.9Hz,1H),4.00(dd,J＝10.5,3.5Hz,1H),3.81(dd,J＝5.3,4.2Hz,1H),3.78-3.70(m,2H),3.28(dq,J＝6.5,6.5Hz,1H),2.81-2.79(m,1H),2.71(s,3H),2.52(dd,J＝12.8,10.6Hz,1H),2.43(dd,J＝12.9,3.5Hz,1H),2.21-2.18(m,1H),2.11(s,3H),2.09-2.00(m,2H),1.75-1.67(m,2H),1.57-1.50(m,5H),1.36(s,3H),1.34-1.25(m,3H),1.24(s,3H),1.15(d,J＝6.9Hz,3H),1.06(s,3H),0.97(d,J＝6.9Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.2,171.4,165.1,152.4,136.0,119.1,116.4,76.6,75.9,63.5,61.8,52.2,45.6,45.1,39.4,38.9,34.3,30.4,29.9,27.7,25.5,24.8,22.4,19.4,18.9,17.8,16.1,15.2ppm；HRMS(ESI)C29H46N2O6S[M+Na]+的计算值573.2974，实测值573.2982。
经保护的埃博霉素72a：在-78℃下向膦酸酯49(200mg，0.508mmol，12当量)在四氢呋喃(0.8mL)中的搅拌溶液中小心地添加双(三甲基甲硅烷基)氨基钠(1.0M四氢呋喃，0.41mL，0.41mmol，9.7当量)。在相同温度下搅拌25分钟后，添加叔氮丙啶30(33.6mg，0.042mmol，1.0当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至0℃，再搅拌2h，然后用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→15％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯经保护的埃博霉素72a(21.8mg，0.021mmol，50％)。72a：Rf＝0.36(硅胶，在己烷中15％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-2.9(c＝0.63，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax2954,2931,2877,2858,1743,1697,1502,1462,1414,1381,1361,1304,1252,1198,1158,1103,1007,984,940,916,836,812,778,735,678,662cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.78(s,1H),6.60(s,1H),5.48(dd,J＝8.4,3.0Hz,1H),4.23(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),4.18(d,J＝9.0Hz,1H),3.86-3.78(m,2H),3.77(t,J＝6.0Hz,2H),3.06-2.99(m,1H),3.02(t,J＝6.0Hz,2H),2.77-2.70(m,2H),2.60(dd,J＝16.2,3.0Hz,1H),2.45(ddd,J＝12.0,6.0,6.0Hz,1H),2.36(s,3H),2.30(ddd,J＝15.0Hz,1H),2.06(ddd,J＝15.6,9.0,9.0Hz,1H),1.90-1.81(m,2H),1.76-1.71(m,1H),1.66-1.58(m,1H),1.52-1.48(m,2H),1.28(dd,J＝9.6,3.0Hz,1H),1.24-1.20(m,1H),1.20(d,J＝6.6Hz,3H),1.18(s,3H),1.16(s,3H),1.13(d,J＝7.2Hz,3H),1.09(t,J＝7.8Hz,9H),1.06(t,J＝7.8Hz,9H),1.00(s,9H),0.94(s,9H),0.86(s,3H),0.85-0.77(m,6H),0.74-0.70(m,6H),0.096(s,3H),0.094(s,3H),0.02(s,6H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝214.5,170.7,166.6,153.3,138.3,121.1,117.1,80.1,79.7,75.9,64.3,62.3,54.9,53.4,50.2,48.1,43.3,40.2,37.4,37.2,36.4,35.4,32.4,26.2,26.0,25.5,23.6,23.2,20.2,18.5,18.4,17.6,15.6,14.8,7.43,7.37,6.0,5.8,-5.1,-5.4ppm；HRMS(ESI)C54H105N2O7Si4S[M+H]+的计算值1037.6714，实测值1037.6720。
埃博霉素72：在0℃下向经保护的埃博霉素72a(6.9mg，0.007mmol，1.0当量)在四氢呋喃(1.5mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.03mL，1.16mmol，165当量)。使反应混合物升温至25℃并再搅拌4h。然后将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在乙酸乙酯中0→30％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素72(3.5mg，0.006mmol，90％)。72：Rf＝0.35(硅胶，在乙酸乙酯中30％甲醇)；[α]D 25＝-20.0(c＝0.35，10:1CH2Cl2/甲醇)；FT-IR(纯)νmax 3362,2931,2877,1726,1687,1561,1505,1466,1425,1383,1334,1266,1148,1054,1008,981,938,883,735,675cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.08(s,1H),6.56(s,1H),5.41(dd,J＝6.0,3.6Hz,1H),4.09(dd,J＝10.2,2.4Hz,1H),3.97(t,J＝6.0Hz,2H),3.71(dd,J＝4.8,4.8Hz,1H),3.69-3.62(m,2H),3.29-3.25(m,1H),3.20-3.18(t,J＝6.0Hz,2H),2.66(ddd,J＝12.0,4.8,4.8Hz,1H),2.59(ddd,J＝12.0,4.8,4.8Hz,1H),2.49(dd,J＝13.8,10.2Hz,1H),2.37(dd,J＝13.8,2.4Hz,1H),2.08(s,3H),2.00-1.94(m,1H),1.91(ddd,J＝7.2,7.2,7.2Hz,1H),1.68-1.64(m,1H),1.67-1.35(m,6H),1.35(s,3H),1.30-1.22(m,1H),1.26(s,3H),1.17(s,3H),1.13(d,J＝6.6Hz,3H),1.03(s,3H),0.96(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.6,171.4,168.1,152.7,137.2,119.2,116.6,77.9,75.9,75.0,62.4,61.5,55.3,52.7,48.1,44.8,43.4,39.5,36.0,35.5,34.7,31.8,29.5,21.8,21.4,19.9,17.6,16.5,15.9,14.5ppm；HRMS(ESI)C30H48N2O7SNa[M+H]+的计算值603.3074，实测值603.3081。
经保护的埃博霉素73a：在-78℃下向膦酸酯69(317mg，1.38mmol，28当量)在四氢呋喃(1mL)中的搅拌溶液中小心地添加正丁基锂(2.5M己烷，0.44mL，1.11mmol，22当量)。在相同温度下搅拌30分钟后，添加叔氮丙啶30(40.0mg，0.050mmol，1.0当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至25℃，再搅拌1.5h，然后用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中10→40％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯经保护的埃博霉素73a(41mg，0.047mmol，94％)。73a：Rf＝0.23(硅胶，在己烷中30％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-4.5(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2953,2935,2877,1743,1696,1655,1586,1561,1464,1430,1381,1304,1250,1198,1158,1108,1069,1018,1007,985,835,777,739,676cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝8.51(d,J＝5.0Hz,1H),7.02(ddd,J＝7.2,7.2,1.8Hz,1H),6.89(d,J＝7.8Hz,1H),6.75(s,1H),6.53(dd,J＝7.2,5.4Hz,1H),5.48(dd,J＝8.4,3.0Hz,1H),4.22(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),4.18(d,J＝9.0Hz,1H),3.86-3.78(m,2H),3.04(dq,J＝9.0,6.6Hz,1H),2.77-2.71(m,2H),2.59(dd,J＝16.2,3.0Hz,1H),2.48-2.43(m,1H),2.45(s,3H),2.31(ddd,J＝15.0,3.0,3.0Hz,1H),2.07(ddd,J＝15.0,9.0,9.0Hz,1H),1.90-1.81(m,2H),1.76-1.71(m,1H),1.66-1.59(m,1H),1.52-1.48(m,2H),1.29(dd,J＝9.6,3.6Hz,1H),1.25-1.21(m,1H),1.20(d,J＝7.2Hz,3H),1.18(s,3H),1.16(s,3H),1.13(d,J＝6.6Hz,3H),1.09(t,J＝7.8Hz,9H),1.06(t,J＝7.8Hz,9H),0.99(s,9H),0.84(s,3H),0.83-0.78(m,6H),0.73-0.69(m,6H),0.09(s,3H),0.08(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝214.5,170.7,157.0,149.4,142.5,135.6,126.6,124.7,121.0,80.2,79.8,75.9,64.3,54.9,53.4,50.3,48.1,43.3,40.2,37.4,36.4,35.4,32.3,26.2(3C),25.4,23.6,23.2,20.2,18.5,17.6,15.6,14.7,7.43,7.37,6.0,5.8,-5.1ppm；HRMS(ESI)C48H89N2O6Si3[M+H]+的计算值873.6023，实测值873.6044。
埃博霉素73：在0℃下向经保护的埃博霉素73a(39.0mg，0.045mmol，1.0当量)在四氢呋喃(2.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.20mL，7.70mmol，170当量)。使反应混合物升温至25℃并再搅拌5h。然后将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在乙酸乙酯中5→40％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素73(22mg，0.042mmol，93％)。73：Rf＝0.40(硅胶，在乙酸乙酯中30％甲醇)；[α]D 25＝-34.4(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax3340,2959,2927,2875,1731,1686,1589,1562,1469,1434,1383,1334,1261,1150,1049,1010,982,885,800,771,745,704cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝8.54(d,J＝4.8Hz,1H),7.70(ddd,J＝7.8,7.8,1.8Hz,1H),7.28(d,J＝7.8Hz,1H),7.15(ddd,J＝7.8,4.8,1.2Hz,1H),6.60(s,1H),5.40(dd,J＝7.2,3.0Hz,1H),4.22(dd,J＝11.2,2.4Hz,1H),3.65(t,J＝4.8Hz,1H),3.62-3.55(m,2H),3.21(qd,J＝6.6,5.2Hz,1H),2.70-2.66(m,1H),2.62-2.59(m,1H),2.48(dd,J＝13.2,10.2Hz,1H),2.34(dd,J＝13.8,2.4Hz,1H),2.08(s,3H),2.01-1.96(m,1H),1.95-1.90(m,1H),1.73-1.67(m,1H),1.54-1.43(m,4H),1.41-1.34(m,3H),1.37(s,3H),1.17(s,3H),1.11(d,J＝6.6Hz,3H),1.03(s,3H),0.95(d,J＝7.2Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CD2Cl2)δ＝220.8,171.3,156.2,149.4,141.4,136.8,125.0,124.4,121.8,77.7,74.8,73.6,62.2,60.6,55.0,48.9,44.2,43.7,39.8,35.6,35.2,32.2,30.1,21.4,20.8,19.6,17.3,16.5,15.8,13.6ppm；HRMS(ESI)C30H46N2O6Na[M+Na]+的计算值553.3248，实测值553.3255。
经保护的埃博霉素74a：在-78℃下向膦酸酯67(150mg，0.533mmol，13当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的搅拌溶液中小心地添加正丁基锂(2.5M己烷，0.17mL，0.425mmol，10当量)。在相同温度下搅拌20分钟后，添加叔氮丙啶30(28.7mg，0.041mmol，1.0当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至10℃，再搅拌1h，然后用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→30％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯的经保护的埃博霉素74a(22mg，0.027mmol，65％)。74a：Rf＝0.30(硅胶，在己烷中15％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-4.8(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2952,2876,1745,1696,1643,1460,1434,1414,1381,1306,1283,1248,1198,1157,1107,1008,985,835cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝7.99(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.91(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.48(ddd,J＝7.8,6.6,1.2Hz,1H),7.38(ddd,J＝7.8,6.6,1.2Hz,1H),6.80(s,1H),5.22(dd,J＝7.8,3.6Hz,1H),4.15(dd,J＝7.8,3.6Hz,1H),3.88(d,J＝8.4Hz,1H),3.71-3.65(m,2H),3.05(dq,J＝8.4,6.6Hz,1H),2.72-2.62(m,3H),2.39(ddd,J＝13.2,6.6,6.6Hz,1H),2.29(s,3H),2.16(ddd,J＝15.0,3.0,3.0Hz,1H),1.78(ddd,J＝15.0,9.0,9.0Hz,1H),1.66-1.58(m,4H),1.48-1.43(m,2H),1.31(dd,J＝10.2,3.0Hz,1H),1.28-1.24(m,1H),1.19(s,3H),1.16(s,3H),1.12(s,3H),1.09(d,J＝7.2Hz,3H),0.99(t,J＝8.4Hz,9H),0.98(d,J＝6.6Hz,3H),0.94(t,J＝7.8Hz,9H),0.86(s,9H),0.69-0.62(m,12H),0.03(s,3H),0.02(s,3H)ppm；13C NMR(150MHz,CD2Cl2)δ＝215.8,171.2,164.7,153.9,146.9,135.4,126.5,125.3,123.3,121.7,120.5,80.1,79.0,75.8,64.1,54.8,49.9,48.2,43.7,40.6,37.1,36.1,34.9,32.2,26.1,25.3,24.1,22.6,20.0,18.6,17.7,15.52,15.50,7.3,7.1,5.8,5.6,-5.23,-5.25ppm；HRMS(ESI)C50H89N2O6Si3S[M+H]+的计算值929.5744，实测值929.5768。
埃博霉素74：在0℃下向经保护的埃博霉素74a(22.0mg，0.024mmol，1.0当量)在四氢呋喃(2.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.10mL，3.85mmol，150当量)。使反应混合物升温至25℃并再搅拌9h。然后将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在乙酸乙酯中5→20％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素74(11.3mg，0.019mmol，81％)。74：Rf＝0.39(硅胶，在乙酸乙酯中20％甲醇)；[α]D 25＝-15.7(c＝1.13，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax3366,2927,2855,1735,1688,1647,1467,1434,1380,1261,1148,1052,1010,980,937,876,761,730,709cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝7.99(dd,J＝7.8,1.2Hz,1H),7.91(dd,J＝7.8,1.2Hz,1H),7.49(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),7.39(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),6.88(s,1H),5.56(dd,J＝3.6,3.6Hz,1H),4.05(dd,J＝10.2,2.4Hz,1H),3.75(dd,J＝6.0,3.6Hz,1H),3.71-3.61(m,2H),3.31(dq,J＝7.2,7.2Hz,1H),2.70(ddd,J＝13.2,7.2,4.2Hz,1H),2.58-2.53(m,2H),2.45(dd,J＝13.8,1.8Hz,1H),2.32(s,3H),2.06(ddd,J＝15.0,6.0,6.0Hz,1H),1.86(ddd,J＝15.6,7.8,3.6Hz,1H),1.70-1.64(m,1H),1.60-1.48(m,2H),1.47-1.38(m,2H),1.37(s,3H),1.38-1.28(m,2H),1.27-1.25(m,1H),1.15(s,3H),1.13(d,J＝7.2Hz,3H),1.04(s,3H),0.97(d,J＝7.2Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CD2Cl2)δ＝220.5,171.4,164.8,153.8,144.8,153.3,126.6,125.4,123.2,121.8,119.2,77.1,76.4,75.4,62.5,55.5,52.6,47.7,45.2,43.2,39.4,35.3,34.3,31.5,30.1,29.1,21.8,19.5,17.7,16.9,16.5,14.8ppm；HRMS(ESI)C32H47N2O6S[M+H]+的计算值587.3149，实测值587.3153。
经保护的埃博霉素75a：在-78℃下向膦酸酯44(97mg，0.209mmol，8.3当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的搅拌溶液中小心地添加双(三甲基甲硅烷基)氨基钠(1.0M四氢呋喃，0.17mL，0.17mmol，6.8当量)。在相同温度下搅拌35分钟后，添加叔氮丙啶30(20mg，0.025mmol，1.0当量)在四氢呋喃(0.4mL)中的溶液。将反应混合物在相同温度下再搅拌2h，用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭，并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→20％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯的经保护的埃博霉素75a(18.8mg，0.017mmol，68％)。75a：Rf＝0.24(硅胶，在己烷中15％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-4.4(c＝0.84，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2954,2933,2877,1796,1742,1697,1460,1418,1380,1367,1343,1303,1251,1230,1124,1008,985,836cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝6.68(s,1H),6.54(s,1H),5.44(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),5.08(s,2H),4.23(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),4.19(d,J＝8.4Hz,1H),3.87-3.79(m,2H),3.04(dq,J＝8.4,6.6Hz,1H),2.78-2.70(m,2H),2.59(dd,J＝16.2,3.0Hz,1H),2.47(ddd,J＝12.6,6.6,6.6Hz,1H),2.33(s,3H),2.27(ddd,J＝14.4,3.0,3.0Hz,1H),2.04(ddd,J＝15.0,9.0,9.0Hz,1H),1.90-1.80(m,2H),1.76-1.71(m,1H),1.66-1.59(m,1H),1.52-1.48(m,2H),1.37(s,18H),1.26(dd,J＝15.6,9.0Hz,1H),1.22-1.17(m,1H),1.20(d,J＝7.2Hz,3H),1.19(s,3H),1.16(s,3H),1.14(d,J＝6.6Hz,3H),1.09(t,J＝7.8Hz,9H),1.06(t,J＝7.8Hz,9H),1.00(s,9H),0.85-0.78(m,6H),0.74-0.70(m,6H),0.101(s,3H),0.097(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝214.4,170.7,167.1,153.4,152.4,138.7,120.7,117.4,82.4,80.2,79.6,75.9,64.3,54.9,53.4,50.2,48.1,47.8,43.3,40.1,37.4,36.4,35.4,32.3,27.9,26.2,25.5,23.6,23.3,20.2,18.5,17.6,15.6,14.7,7.43,7.37,6.0,5.8,-5.1ppm；HRMS(ESI)C57H106N3O10Si3S[M+H]+的计算值1108.6901，实测值1108.6892。
埃博霉素75：在0℃下向经保护的埃博霉素75a(32mg，0.029mmol，1.0当量)在四氢呋喃(2.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.20mL，7.70mmol，265当量)。使反应混合物升温至25℃并再搅拌5h。然后将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将粗材料再悬浮于二氯甲烷(2.0mL)中并冷却到0℃。添加三氟乙酸(0.50mL，6.50mmol，224当量)，将反应混合物搅拌2.5h，然后使之升温至25℃。真空移除溶剂，并将所得残余物再溶于乙酸乙酯(15mL)中。在搅拌下添加饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)。10分钟后，将两相分离，并将有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在丙酮中0→20％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素75(10.6mg，0.014mmol，48％)。75：Rf＝0.18(硅胶，在丙酮中10％甲醇)；[α]D 25＝-0.9(c＝0.47,CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 3386,2922,2851,1676,1557,1463,1396,1261,1201,1180,1132,1033,832,800,721,672cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝7.09(s,1H),6.55(s,1H),5.42(dd,J＝5.4Hz,1H),4.10-4.08(m,1H),3.73(dd,J＝4.8,4.8Hz,1H),3.68-3.60(m,2H),3.30-3.26(m,1H),2.61(t,J＝4.8Hz,1H),2.50(dd,J＝13.8,10.2Hz,1H),2.38(dd,J＝13.8,2.4Hz,1H),2.09(s,3H),1.96-1.87(m,2H),1.70-1.65(m,1H),1.56-1.49(m,1H),1.46-1.26(m,6H),1.35(m,3H),1.15(s,3H),1.12(d,J＝7.2Hz,3H),1.03(s,3H),0.96(d,J＝7.2Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CD2Cl2)δ＝220.7,174.2,171.3,152.8,137.5,119.4,116.6,77.9,75.4,74.4,62.4,55.2,53.8,53.0,48.4,44.3,43.6,39.6,35.5,35.0,32.1,29.8,21.7,20.7,20.3,17.5,16.4,15.9,14.1ppm；HRMS(ESI)C29H47N3O6SNa[M+Na]+的计算值588.3078，实测值588.3087。
经保护的埃博霉素76a：在-78℃下向膦酸酯52(330mg，0.690mmol，12当量)在四氢呋喃(1.0mL)中的搅拌溶液中小心地添加双(三甲基甲硅烷基)氨基钠(1.0M四氢呋喃，0.41mL，0.41mmol，9.7当量)。在相同温度下搅拌25分钟后，添加叔氮丙啶30(45.0mg，0.056mmol，1.0当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至0℃，再搅拌2h，然后用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→20％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯的经保护的埃博霉素76a(28.2mg，0.025mmol，45％)。76a：Rf＝0.30(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-4.0(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax2954,2935,2877,1794,1744,1697,1500,1459,1390,1367,1353,1306,1278,1251,1220,1158,1118,1040,1008,984,858,835,779,738,668cm–1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ＝6.71(s,1H),6.53(s,1H),5.43(dd,J＝8.4,3.0Hz,1H),4.20(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),4.18(d,J＝8.4Hz,1H),4.08(t,J＝7.2Hz,2H),3.86-3.79(m,2H),3.28-3.20(m,2H),3.03(dq,J＝9.0,7.2Hz,1H),2.78-2.70(m,2H),2.61(dd,J＝16.2,3.0Hz,1H),2.46(ddd,J＝13.2,6.6,6.6Hz,1H),2.34(s,3H),2.29(ddd,J＝15.0,3.0,3.0Hz,1H),2.04(ddd,J＝15.6,9.0,9.0Hz,1H),1.91-1.81(m,2H),1.75-1.71(m,1H),1.67-1.59(m,1H),1.52-1.48(m,2H),1.39(s,18H),1.26(dd,J＝10.2,3.6Hz,1H),1.22-1.8(m,1H),1.20(d,J＝7.2Hz,3H),1.19(s,3H),1.16(s,3H),1.13(d,J＝6.6Hz,3H),1.09(t,J＝7.8Hz,9H),1.06(t,J＝7.8Hz,9H),0.99(s,9H),0.87(s,3H),0.85-0.77(m,6H),0.74-0.70(m,6H),0.097(s,3H),0.093(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝214.4,170.7,165.9,153.8,152.6,138.6,120.8,117.0,81.8,80.2,79.6,75.9,64.3,54.9,53.4,50.2,48.1,46.1,43.3,40.1,37.3,36.4,35.4,32.9,32.3,28.0,26.2,25.5,23.6,23.3,20.1,15.5,17.6,15.6,14.8,7.43,7.37,6.0,5.8,-5.1ppm；HRMS(ESI)C58H108N3O10Si3S[M+H]+的计算值1122.7058，实测值1122.7033。
埃博霉素76：在0℃下向经保护的埃博霉素76a(14.9mg，0.013mmol，1.0当量)在四氢呋喃(2.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.06mL，2.31mmol，178当量)。使反应混合物升温至25℃并再搅拌5h。然后将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将粗材料再悬浮于二氯甲烷(1.0mL)中并冷却到0℃。添加三氟乙酸(0.10mL，1.30mmol，100当量)，将反应混合物搅拌3h，然后使之升温至25℃。真空移除溶剂，并将所得残余物再溶于乙酸乙酯(15mL)中。在搅拌下添加饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)。10分钟后，将两相分离，并将有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在丙酮中40％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素76(5.5mg，0.010mmol，71％)。76：Rf＝0.39(硅胶，在丙酮中40％甲醇)；[α]D 25＝-27.2(c＝0.50，10:1CH2Cl2/MeOH)；FT-IR(纯)νmax 3360,2925,2855,1727,1686,1559,1505,1464,1425,1382,1336,1265,1147,1053,1008,980,937,883,826,733,701,669cm–1；1H NMR(600MHz,CDCl3)δ＝7.05(s,1H),6.56(s,1H),5.43(dd,J＝4.8,4.8Hz,1H),4.09(dd,J＝10.2,2.4Hz,1H),3.73(t,J＝4.8Hz,1H),3.68-3.60(m,2H),3.28(dq,J＝6.6,6.6Hz,1H),3.09(s,4H),2.61(t,J＝5.4Hz,2H),2.50(dd,J＝13.8,10.2Hz,1H),2.38(dd,J＝13.8,2.4Hz,1H),2.10(s,3H),1.96-1.86(m,2H),1.70-1.65(m,1H),1.54-1.24(m,9H),1.35(s,3H),1.26(s,2H),1.15(s,3H),1.12(d,J＝6.6Hz,3H),1.03(s,3H),0.96(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CDCl3)δ＝220.7,171.3,168.4,152.7,137.5,119.3,116.5,78.0,75.4,74.4,62.4,55.3,53.0,48.3,44.3,43.5,42.0,39.6,37.5,35.5,35.1,32.1,29.8,21.7,20.7,20.3,17.5,16.4,15.9,14.1ppm；HRMS(ESI)C30H49N3O6SNa[M+Na]+的计算值602.3234，实测值602.3217。
经保护的埃博霉素77a：在-78℃下向膦酸酯36(190mg，0.675mmol，9.6当量)在四氢呋喃(1.0mL)中的搅拌溶液中小心地添加正丁基锂(2.5M己烷，0.22mL，0.550mmol，7.7当量)。在相同温度下搅拌30分钟后，添加氮丙啶甲基酮29(45mg，0.070mmol，1.0当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至25℃，再搅拌1h，然后用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中30→100％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯的经保护的埃博霉素77a(32mg，0.042mmol，59％)。77a：Rf＝0.34(硅胶，在己烷中70％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-13.3(c＝0.36，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax2953,2928,2876,1742,1696,1459,1416,1345,1304,1240,1197,1157,1068,1035,1019,985,915,862,838,783,737,676cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝6.63(s,1H),6.43(s,1H),5.39(dd,J＝8.4,3.0Hz,1H),4.26(dd,J＝9.0,3.6Hz,1H),4.15(d,J＝8.4Hz,1H),3.06(dq,J＝8.4,7.2Hz,1H),2.72(dd,J＝16.2,8.4Hz,1H),2.60(dd,J＝16.2,3.6Hz,1H),2.22(s,3H),2.20(s,3H),2.11-2.06(m,1H),1.89-1.84(m,2H),1.79-1.70(m,2H),1.61-1.55(m,2H),1.49-1.36(m,2H),1.24-1.18(m,1H),1.18(d,J＝7.2Hz,3H),1.17(s,3H),1.13(d,J＝7.2Hz,3H),1.08(t,J＝7.8Hz,9H),1.07(t,J＝7.8Hz,9H),1.05(s,3H),0.85(s,3H),0.81-0.77(m,6H),0.75-0.71(m,6H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝214.4,170.7,165.3,153.6,138.8,120.1,116.4,80.2,79.3,75.9,53.5,47.9,41.7,40.0,39.4,37.2,35.2,34.0,31.9,25.8,25.1,23.3,23.1,20.0,17.5,15.9,14.9,7.4,7.3,6.0,5.8ppm；HRMS(ESI)C39H71N2O5Si2S2[M+H]+的计算值767.4337，实测值767.4358。
埃博霉素77：在0℃下向经保护的埃博霉素77a(13.0mg，0.017mmol，1.0当量)在四氢呋喃(1.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.10mL，3.85mmol，220当量)。使反应混合物升温至25℃并搅拌1h。然后将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在乙酸乙酯中5→15％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素77(8.5mg，0.016mmol，93％)。77：Rf＝0.29(硅胶，在乙酸乙酯中15％甲醇)；[α]D 25＝-28.8(c＝0.85，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax3292,2956,2930,2875,1730,1687,1456,1422,1384,1334,1293,1263,1174,1145,1037,1009,980,881,735,668cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝7.04(s,1H),6.54(s,1H),5.55(dd,J＝4.2,4.2Hz,1H),4.08(ddd,J＝14.4,3.6,3.6Hz,1H),3.78(dd,J＝6.6,3.6Hz,1H),3.33(dq,J＝6.6,6.6Hz,1H),2.71(s,3H),2.54(dd,J＝12.6,10.8Hz,1H),2.43(dd,J＝12.6,4.2Hz,1H),2.14(s,3H),2.00(s,1H),1.96(ddd,J＝15.0,4.2,4.2Hz,1H),1.85(dd,J＝9.0,4.8Hz,1H),1.78-1.71(m,2H),1.58-1.49(m,2H),1.45-1.34(m,3H),1.40(s,3H),1.24-1.20(m,1H),1.22(s,3H),1.10(d,J＝7.2Hz,3H),1.01(s,3H),0.95(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CD2Cl2)δ＝220.6,171.2,165.7,153.5,137.2,118.3,116.3,76.3,76.2,75.6,60.6,52.6,44.9,38.7,38.4,35.2,31.1,30.3,28.8,25.7,22.6,22.4,18.9,17.6,16.9,16.3,14.9ppm；HRMS(ESI)C27H42N2O5S2Na[M+Na]+的计算值561.2427，实测值561.2409。
经保护的埃博霉素78a：在-78℃下向膦酸酯36(115mg，0.409mmol，15当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的搅拌溶液中小心地添加正丁基锂(1.6M己烷，0.20mL，0.327mmol，12当量)。在相同温度下搅拌45分钟后，添加叔氮丙啶30(21.6mg，0.027mmol，1.0当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至0℃并再搅拌2h。然后将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭并使之升温至25℃。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→15％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯的经保护的埃博霉素78a(15.0mg，0.016mmol，60％)。78a：Rf＝0.30(硅胶，在己烷中15％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-3.0(c＝1.15，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2953,2931,2877,1741,1697,1463,1421,1381,1304,1249,1198,1157,1110,1076,1037,1019,985,836,779,738,674,663cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝6.7(s,1H),6.4(s,1H),5.45(dd,J＝8.4,3.6Hz,1H),4.24(dd,J＝8.4,3.6Hz,1H),4.17(d,J＝9.0Hz,1H),3.87-3.79(m,2H),3.03(dq,J＝9.0,7.2Hz,1H),2.75(ddd,J＝12.0,6.0,6.0Hz,1H),2.72(dd,J＝15.6,8.4Hz,1H),2.59(dd,J＝16.2,3.0Hz,1H),2.46(ddd,J＝12.0,6.0,6.0Hz,1H),2.30(s,3H),2.28-2.27(m,1H),2.20(s,3H),2.09-2.03(m,1H),1.90-1.81(m,2H),1.75-1.70(m,1H),1.66-1.59(m,1H),1.53-1.46(m,2H),1.27(dd,J＝9.6,3.0Hz,1H),1.24-1.20(m,1H),1.19(d,J＝6.6Hz,3H),1.18(s,3H),1.16(s,3H),1.13(d,J＝7.0Hz,3H),1.10-1.05(m,18H),0.99(s,9H),0.87(s,3H),0.84-0.77(m,6H),0.73-0.69(m,6H),0.094(s,3H),0.091(s,3H)ppm；13C NMR(150MHz,C6D6)δ＝214.5,170.7,165.3,153.7,138.9,120.5,116.5,80.1,79.6,75.9,64.3,54.9,53.4,50.1,48.1,43.3,40.2,37.4,36.4,35.4,32.4,26.2,25.5,23.6,23.1,20.1,18.5,17.6,15.9,15.6,14.7,7.42,7.36,5.95,5.80,-5.12ppm；HRMS(ESI)C47H89N2O6Si3S2[M+H]+的计算值925.5464，实测值925.5454。
埃博霉素78：在0℃下向经保护的埃博霉素78a(30.0mg，0.032mmol，1.0当量)在四氢呋喃(1.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.10mL，3.85mmol，120当量)。使反应混合物升温至25℃并搅拌1h。然后将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在乙酸乙酯中5→20％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素78(15.0mg，0.026mmol，79％)。78：Rf＝0.41(硅胶，在乙酸乙酯中20％甲醇)；[α]D 25＝-16.3(c＝0.64，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax3373,2927,1729,1685,1654,1559,1460,1452,1424,1259,1149,1037,981,881,802,735,700cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝6.71(s,1H),6.47(s,1H),5.55(dd,J＝4.2Hz,1H),4.12(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),3.92-3.89(m,1H),3.68-3.62(m,2H),3.34(ddd,J＝13.8,6.6,6.6Hz,1H),2.56-2.52(m,1H),2.37-2.31(m,2H),2.43-2.20(m,1H),2.18(s,3H),2.05(s,3H),1.86-1.83(m,1H),1.66(ddd,J＝15.6,4.8,4.8Hz,1H),1.63-1.59(m,1H),1.52-1.43(m,2H),1.41-1.34(m,2H),1.22(ddd,J＝13.8,6.6,6.6Hz,1H),1.17(s,3H),1.10(d,J＝7.0Hz,3H),1.09-1.06(m,1H),1.04(d,J＝7.0Hz,3H),1.00-0.98(m,1H),0.94(s,3H),0.76(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝219.5,170.9,165.7,153.6,136.5,118.6,116.3,76.8,75.7,63.8,62.4,55.7,52.1,47.0,45.7,42.3,39.0,35.2,34.0,30.8,28.7,25.4,22.4,21.8,18.6,16.2,15.99,15.98,15.3ppm；HRMS(ESI)C29H47N2O6S2[M+H]+的计算值583.2870，实测值583.2861。
经保护的埃博霉素79a：在25℃下向经保护的埃博霉素79a(20.0mg，0.026mmol，1.0当量)在二甲基甲酰胺(0.3mL)中的搅拌溶液中添加N-(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(62)(35.0mg，0.157mmol，6.0当量)，接着添加碳酸钾(18.0mg，0.130mmol，5.0当量)。将反应混合物加热到75℃并搅拌12h。然后使反应混合物冷却到25℃，用水(5mL)猝灭，并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在乙酸乙酯中10→40％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯的经保护的埃博霉素79a(7.5mg，0.008mmol，32％)，连同回收的79a(7.0mg，0.009mmol，35％)。79a：Rf＝0.34(硅胶，在己烷中40％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-5.1(c＝0.75，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 3373,2955,2934,2876,1741,1697,1500,1458,1424,1383,1365,1248,1159,1111,1069,1036,1019,985,863,837,782,739,677cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝6.64(s,1H),6.47(s,1H),5.37(dd,J＝8.4,3.6Hz,1H),5.02(br s,1H),4.24(dd,J＝9.0,3.6Hz,1H),4.15(d,J＝9.0Hz,1H),3.31(dddd,J＝12.6,6.6,6.6,6.6Hz,1H),3.21(dddd,J＝12.6,6.0,6.0,6.0,Hz,1H),3.00(ddd,J＝14.4,6.6,6.6Hz,1H),2.68(dd,J＝16.2,8.4Hz,1H),2.57(dd,J＝16.2,3.6Hz,1H),2.44-2.40(m,1H),2.27(s,3H),2.21(s,3H).2.11-2.07(m,2H),1.97-1.92(m,1H),1.87-1.83(m,1H),1.70-1.63(m,2H),1.57-1.51(m,1H),1.47(s,9H),1.44-1.38(m,1H),1.36-1.29(m,1H),1.18(d,J＝6.6Hz,3H),1.17(s,3H),1.17-1.15(m,1H),1.12(d,J＝6.6Hz,3H),1.073(t,J＝8.4Hz,9H),1.070(t,J＝8.4Hz,9H),1.03-1.00(m,1H),0.97(s,3H),0.87(s,3H),6.54(m,6H),0.74-0.70(m,6H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝214.5,170.6,165.4,155.9,153.6,138.7,120.7,116.6,80.1,79.4,78.5,75.8,53.4,51.7,49.6,48.0,44.0,41.5,40.3,37.3,36.1,34.9,32.3,28.5,25.4,23.6,22.9,20.2,17.6,15.9,15.4,14.7,7.4,7.3,6.0,5.8ppm；HRMS(ESI)C46H84N3O7S2Si2[M+H]+的计算值910.5284，实测值910.5293。
埃博霉素79：在0℃下向经保护的埃博霉素79a(6.0mg，0.007mmol，1.0当量)在四氢呋喃(1.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.10mL，3.85mmol，500当量)。2h后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)猝灭，并使之升温至25℃。将两相分离，将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将粗材料再悬浮于二氯甲烷(1.0mL)中并冷却到0℃。添加三氟乙酸(0.05mL，0.65mmol，90当量)，将反应混合物搅拌1，然后使之升温至25℃。真空移除溶剂，并将所得残余物再溶于乙酸乙酯(15mL)中。在搅拌下添加饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)。10分钟后，将两相分离，并将有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在丙酮中10→30％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素79(2.5mg，0.004mmol，65％)。79：Rf＝0.30(硅胶，在丙酮中30％甲醇)；[α]D 25＝-10.8(c＝0.25，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 3366,2929,1729,1686,1565,1421,1370,1338,1252,1149,1037,1008,981,881,715cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝7.02(s,1H),6.49(s,1H),5.41(dd,J＝5.4,5.4Hz,1H),4.09(dd,J＝9.6,3.0Hz,1H),3.74(dd,J＝4.8,4.8Hz,1H),3.41(s,1H),3.27(ddd,J＝12.0,6.6,6.6Hz,1H),2.84-2.75(m,2H),2.70(s,3H),2.54-2.38(m,5H),2.11(s,3H),1.95-1.93(m,1H),1.90-1.85(m,2H),1.83-1.82(m,1H),1.71-1.65(m,1H),1.60-1.36(m,4H),1.35(s,3H),1.30-1.22(m,2H),1.28(s,3H),1.11(d,J＝6.6Hz,3H),1.05(s,3H),0.96(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CD2Cl2)δ＝206.7,171.4,165.9,153.3,138.0,119.0,116.4,78.6,75.4,74.6,70.4,53.0,50.8,48.4,44.3,43.1,39.6,35.6,32.3,30.2,28.2,21.9,20.9,20.6,17.6,16.9,16.1,15.6,14.0ppm；HRMS(ESI)C29H48N3O5S2[M+H]+的计算值604.2849，实测值604.2854。
埃博霉素80：在0℃下向埃博霉素78(12.8mg，0.022mmol，1.0当量)在二氯甲烷(1mL)中的搅拌溶液中添加对甲苯磺酸酐(35.8mg，0.11mmol，5.0当量)，接着添加三乙胺(12.3μL，0.088mmol，4.0当量)和4-(二甲基氨基)吡啶(2mg，0.016mmol，0.7当量)。30分钟后使反应混合物升温至25℃，并再搅拌15分钟。将反应混合物用甲醇(0.5mL)和水(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过硅胶过滤得到的残余物，并用乙酸乙酯洗涤。将滤液真空浓缩。在25℃下将粗甲苯磺酸酯再悬浮于二甲基甲酰胺(0.5mL)中，添加叠氮化钠(5.7mg，0.088mmol，4.0当量)，并将反应混合物搅拌17h。然后将反应混合物用水(5mL)猝灭，并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在乙酸乙酯中50→90％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无定形固体的纯埃博霉素80(5.3mg，0.009mmol，40％)。80：Rf＝0.35(硅胶，乙酸乙酯)；[α]D 25＝-34.2(c＝0.55，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 3432,2929,2101,1731,1687,1554,1423,1384,1263,1148,1036,1009,979,881,735cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝7.03(s,1H),6.48(s,1H),5.38(dd,J＝7.8,3.6Hz,1H),4.12-4.09(m,1H),3.95(br s,1H),3.74(ddd,J＝4.8,4.8,4.8Hz,1H),3.44-3.37(m,2H),3.26(qd,J＝6.6,4.8Hz,1H),2.70(s,3H),2.67(ddd,J＝12.6,6.0,6.0Hz,1H),2.59(ddd,J＝12.6,6.6,6.6Hz,1H),2.49-2.45(m,2H),2.39(dd,J＝15.0,3.0Hz,1H),2.13(s,3H),2.01(ddd,J＝15.0,4.2,4.2Hz,1H),1.82(ddd,J＝16.2,7.8,7.8Hz,1H),1.71-1.65(m,1H),1.51-1.41(m,4H),1.35(s,3H),1.30-1.28(m,1H),1.26-1.22(m,1H),1.16(s,3H),1.12(d,J＝7.2Hz,3H),1.05(s,3H),0.97(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CD2Cl2)δ＝220.7,171.2,166.0,153.1,138.3,119.3,116.5,78.8,74.5,74.2,53.1,52.3,51.9,49.0,43.9,43.8,39.7,35.9,35.8,32.7,30.7,22.0,21.3,20.3,17.5,16.9,16.1,15.4,13.6ppm；HRMS(ESI)C29H46N5O5S2[M+H]+的计算值608.2935，实测值608.2933。
环丙基甲基氮丙啶29a：在25℃下向氮丙啶甲基酮29(40.0mg，0.063mmol，1.0当量)在二甲基甲酰胺(0.4mL)中的搅拌溶液中添加(溴甲基)环丙烷(50.6mg，0.375mmol，6.0当量)，接着添加碳酸钾(43.0mg，0.312mmol，5.0当量)。将反应混合物加热到75℃并搅拌16h。然后使反应混合物冷却到25℃并用水(10mL)猝灭。将混合物用乙酸乙酯(3×5mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中10→40％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈淡黄色油状物的纯环丙基甲基氮丙啶29a(40.0mg，0.058mmol，92％)。29a：Rf＝0.23(硅胶，在己烷中30％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-6.5(c＝1.00,CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2952,2918,2877,1747,1732,1696,1460,1414,1381,1308,1284,1239,1197,1158,1109,1070,1042,1010,984,941,862,835,783,725,676cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝4.93(dd,J＝9.0,3.6Hz,1H),4.19(d,J＝9.6Hz,1H),4.06(dd,J＝7.8,4.8Hz,1H),2.85(dq,J＝9.6,6.6Hz,1H),2.72-2.71(m,2H),2.60(dd,J＝12.0,5.4Hz,1H),2.11(ddd,J＝15.6,3.0,3.0Hz,1H),1.98(dd,J＝12.0,7.2Hz,1H),1.85-1.76(m,2H),1.77(s,3H),1.73-1.56(m,3H),1.48-1.35(m,2H),1.26-1.22(m,1H),1.21(d,J＝6.6Hz,3H),1.16(s,3H),1.10(t,J＝7.8Hz,9H),1.08(t,J＝7.8Hz,9H),1.04(d,J＝6.6Hz,3H),1.03(s,3H),0.99-0.92(m,2H),0.86-0.77(m,6H),0.74-0.70(m,6H),0.68(s,3H),0.45-0.42(m,2H),0.22-0.16(m,2H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝213.9,202.5,171.8,80.8,78.2,76.7,56.7,53.1,50.1,48.3,43.2,39.4,36.9,36.0,31.6,25.3,25.1,24.9,23.0,20.1,17.8,15.3,12.0,7.5,7.3,6.0,5.8,3.6,3.4ppm；HRMS(ESI)C38H72NO6Si2[M+H]+的计算值694.4893，实测值694.4895。
经保护的埃博霉素81a：在-78℃下向膦酸酯36(150mg，0.533mmol，13当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的搅拌溶液中小心地添加正丁基锂(2.5M己烷，0.17mL，0.425mmol，10当量)。在相同温度下搅拌20分钟后，添加环丙基甲基氮丙啶29a(28.7mg，0.041mmol，1.0当量)在四氢呋喃(0.5mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至10℃，再搅拌1h，并用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→30％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯的经保护的埃博霉素81a(22.1mg，0.027mmol，65％)。81a：Rf＝0.22(硅胶，在己烷中20％乙酸乙酯)；[α]D 25＝+4.2(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2953,2926,2876,1741,1696,1461,1423,1380,1240,1180,1158,1110,1069,1036,1017,985,915,863,836,782,738,674cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝6.66(s,1H),6.42(s,1H),5.47(dd,J＝7.8,3.6Hz,1H),4.28(dd,J＝8.4,3.6Hz,1H),4.16(d,J＝9.0Hz,1H),3.03(dq,J＝8.4,6.6Hz,1H),2.71(dd,J＝16.2,8.4Hz,1H),2.62-2.58(m,2H),2.31-2.27(m,1H),2.30(s,3H),2.20(s,3H),2.10(ddd,J＝15.0,9.0,9.0Hz,1H),1.99(dd,J＝12.0,7.2Hz,1H),1.90-1.82(m,2H),1.74-1.68(m,1H),1.66-1.59(m,1H),1.54-1.47(m,2H),1.24-1.18(m,1H),1.19(d,J＝6.6Hz,3H),1.18(s,3H),1.16-1.13(m,1H),1.14(d,J＝6.6Hz,3H),1.10(s,3H),1.08(t,J＝7.8Hz,9H),1.06(t,J＝7.8Hz,9H),1.00-0.96(m,1H),0.90(s,3H),0.83-0.76(m,6H),0.73-0.69(m,6H),0.45-0.38(m,2H),0.23-0.15(m,2H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝214.6,170.7,165.2,153.7,138.8,120.6,116.5,79.7,75.7,56.9,53.5,49.5,47.9,43.5,40.4,37.5,36.6,35.2,32.4,30.2,25.5,23.6,22.7,20.1,17.6,15.9,15.4,14.6,12.0,7.43,7.36,5.9,5.8,3.6,3.4ppm；HRMS(ESI)C43H77N2O5Si2S2[M+H]+的计算值821.4807，实测值821.4789。
埃博霉素81：在0℃下向经保护的埃博霉素81a(18.0mg，0.022mmol，1.0当量)在四氢呋喃(2.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.20mL，3.85mmol，175当量)。使反应混合物升温至25℃，搅拌3.5h，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在乙酸乙酯中1→5％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素81(12.0mg，0.020mmol，92％)。81：Rf＝0.39(硅胶，在乙酸乙酯中5％甲醇)；[α]D 25＝-31.2(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 3375,2957,2924,2853,1729,1687,1555,1464,1424,1378,1251,1148,1036,1009,981,939,882,832,734cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝7.01(s,1H),6.48(s,1H),5.44(dd,J＝4.8,4.8Hz,1H),4.09(dd,J＝10.2,3.0Hz,1H),3.73(dd,J＝4.8,4.8Hz,1H),3.32(dq,J＝6.6,6.6Hz,1H),2.70(s,3H),2.48(dd,J＝13.8,4.2Hz,1H),2.41-2.37(m,1H),2.40(dd,J＝13.8,3.0Hz,1H),2.30-2.26(m,1H),2.12(s,3H),1.92-1.90(m,2H),1.76-1.66(m,2H),1.56-1.38(m,4H),1.37(s,3H),1.33-1.27(m,2H),1.24-1.22(m,1H),1.13(s,3H),1.11(d,J＝7.2Hz,3H),1.04(s,3H),0.96(d,J＝7.2Hz,3H)0.53-0.45(m,2H),0.20-0.16(m,1H),0.11-0.08(m,1H)ppm；13C NMR(151MHz,CD2Cl2)δ＝220.8,171.6,165.8,153.3,137.9,118.9,116.3,78.1,75.5,57.9,52.9,48.2,44.5,43.2,39.6,35.5,35.2,32.0,30.3,23.0,22.0,21.3,20.4,17.7,16.9,16.3,15.7,14.1,11.5,4.2,4.0ppm；HRMS(ESI)C31H49N2O5S2[M+H]+的计算值593.3077，实测值593.3063。
经保护的埃博霉素82a：在-78℃下向膦酸酯59(350mg，0.906mmol，16当量)在四氢呋喃(1.0mL)中的搅拌溶液中小心地添加正丁基锂(2.5M己烷，0.29mL，0.725mmol，13当量)。在相同温度下搅拌45分钟后，添加甲基酮30(45.0mg，0.056mmol，1.0当量)在四氢呋喃(0.6mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至25℃，再搅拌2h，并用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中10→60％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的经保护的埃博霉素82a(36.5mg，0.040mmol，70％，E:Z＝1:1)。82a：Rf＝0.32(硅胶，在己烷中30％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-5.3(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2952,2929,2876,2857,1740,1696,1461,1415,1380,1280,1251,1200,1181,1158,1102,1040,1018,1006,984,940,916,834,812,778,733,677cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝6.80(s,1H),6.78(d,J＝5.4Hz,1H),6.37(s,1H),6.30(s,1H),6.28(s,1H),5.49(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),4.24(ddd,J＝16.8,8.4,1.8Hz,2H),4.18(dd,J＝8.4,3.0Hz,2H),3.90-3.78(m,4H),3.46(s,3H),3.42(s,3H),3.10-3.02(m,2H),2.85-2.81(m,1H),2.76-2.68(m,3H),2.62-2.55(m,3H),2.47-2.43(m,2H),3.29(ddd,J＝15.0,4.2,4.2Hz,1H),2.26(s,3H),2.20-2.15(m,1H),2.10-2.03(m,1H),1.90-1.85(m,4H),1.89(s,3H),1.82(s,3H),1.78-1.71(m,3H),1.76(s,3H),1.66-1.47(m,7H),1.21-1.13(m,28H),1.10-1.03(m,36H),0.99(s,9H),0.98(s,9H),0.93(s,3H),0.85(s,3H),0.83-0.78(m,6H),0.77-0.70(m,18H),0.090(s,3H),0.088(s,3H),0.082(s,3H),0.074(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝214.5,170.7,148.8,148.4,138.5,137.3,136.0,135.9,119.7,119.0,110.2,110.1,80.4,80.1,79.5,76.0,75.8,74.0,64.4,64.3,55.3,54.9,53.5,53.4,50.6,50.2,48.2,48.1,43.4,43.2,40.2,40.1,37.4,37.3,36.6,36.4,36.2,36.1,35.6,35.4,32.3,26.2,25.5,25.4,23.8,23.5,23.2,23.1,20.3,20.1,19.1,18.5,18.4,17.7,17.6,15.7,15.6,14.9,7.4,7.3,7.2,6.0,5.9,5.8,-5.1ppm(1H和13C NMR被记录为混合物)；HRMS(ESI)C48H92N3O6Si3S[M+H]+的计算值922.6009，实测值922.6010。
埃博霉素82：在0℃下向经保护的埃博霉素82a(8.0mg，0.009mmol，1.0当量)在四氢呋喃(1.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.10mL，3.85mmol，428当量)。使反应混合物升温至25℃，搅拌5h，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在乙酸乙酯中5→20％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素82(4.1mg，0.007mmol，81％)。82：Rf＝0.28(硅胶，在乙酸乙酯中20％甲醇)；[α]D 25＝-20.0(c＝0.10，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 3367,2922,2852,1727,1687,1555,1462,1378,1334,1274,1261,1148,1057,980,885,802,764,749,671cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝6.40(s,1H),6.33(s,1H),6.31(dd,J＝8.4,4.2Hz,1H),6.21(s,1H),6.15(s,1H),5.43(dd,J＝4.8,4.8Hz,1H),4.05-4.02(m,2H),3.85(s,3H),3.84(s,3H),3.77-3.73(m,2H),3.68-3.60(m,4H),3.31-3.26(m,1H),3.24-3.20(m,1H),2.76-2.73(m,1H),2.65-2.61(m,1H),2.59-2.55(m,1H),2.53-2.46(m,3H),2.44-2.37(m,3H),2.41(s,6H),2.06-2.02(m,1H),1.94-1.92(m,1H),1.90-1.82(m,2H),1.87(s,3H),1.70-1.64(m,2H),1.56-1.42(m,8H),1.37-1.30(m,5H),1.34(s,3H),1.33(s,3H),1.14(s,6H),1.20(d,J＝7.2Hz,6H),1.07(s,3H),1.03(s,3H),0.97(d,J＝7.2Hz,3H),0.96(d,J＝7.2Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CD2Cl2)δ＝220.7,171.3,148.4,147.9,137.8,137.0,135.8,119.0,118.1,109.6,109.3,77.8,75.9,75.0,74.8,73.9,73.8,62.4,62.2,60.6,55.3,54.7,52.8,52.7,49.4,48.2,44.8,44.6,43.4,39.7,39.5,36.9,36.8,36.0,35.8,35.5,34.7,32.9,31.8,31.1,29.5,21.9,21.8,21.4,20.2,19.9,19.4,19.1,19.0,17.6,17.3,16.5,16.3,15.7,14.5,13.2ppm(1H和13C NMR被记录为混合物)；HRMS(ESI)C30H49N3O6SNa[M+Na]+的计算值602.3234，实测值602.3235。
埃博霉素83a：在-78℃下向膦酸酯64(118mg，0.263mmol，14当量)在四氢呋喃(1.0mL)中的搅拌溶液中小心地添加双(三甲基甲硅烷基)氨基钠(1.0M四氢呋喃，0.26mL，0.263mmol，14当量)。在相同温度下搅拌30分钟后，添加甲基酮30(15.0mg，0.019mmol，1.0当量)在四氢呋喃(1.0mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至0℃，再搅拌3.5h，并用饱和氯化铵水溶液(10mL)猝灭。将两相分离，并将水层用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在己烷中5→20％乙酸乙酯)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的经保护的埃博霉素83a(14.2mg，0.013mmol，69％)。83a：Rf＝0.20(硅胶，在己烷中10％乙酸乙酯)；[α]D 25＝-7.5(c＝1.00，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 2954,2933,2877,2858,1780,1728,1696,1505,1460,1413,1370,1334,1283,1249,1158,1120,1041,1007,984,836,806,779,738cm–1；1H NMR(600MHz,C6D6)δ＝6.57(s,1H),6.33(s,1H),5.43(dd,J＝8.6,2.8Hz,1H),4.22(dd,J＝9.2,2.6Hz,1H),4.18(d,J＝9.0Hz,1H),3.87-3.79(m,2H),3.01(dq,J＝7.2,7.2Hz,1H),2.73(ddd,J＝12.0,5.9,5.9Hz,1H),2.68(dd,J＝16.1,9.3Hz,1H),2.56(dd,J＝16.1,2.9Hz,1H),2.44(ddd,J＝12.0,6.0,6.0Hz,1H),2.34(s,3H),2.26-2.24(m,1H),2.08-2.02(m,1H),1.87-1.80(m,2H),1.75-1.69(m,1H),1.64-1.57(m,1H),1.51-1.48(m,1H),1.37(s,18H),1.34-1.21(m,3H),1.19(d,J＝6.9Hz,3H),1.18(s,3H),1.15(s,3H),1.13(d,J＝6.9Hz,3H),1.10-1.05(m,18H),0.99(s,9H),0.85(s,3H),0.83-0.77(m,6H),0.74-0.70(m,6H),0.100(s,3H),0.097(s,3H)ppm；13C NMR(151MHz,C6D6)δ＝214.6,170.7,157.8,150.0,149.2,138.3,121.0,114.4,84.2,80.2,79.7,75.9,64.3,55.0,53.5,50.3,48.2,43.4,40.2,37.5,36.4,35.4,32.4,27.7,26.2,25.5,23.7,23.3,20.2,18.6,17.7,15.7,14.6,7.5,7.4,6.0,5.9,-5.1,ppm；HRMS(ESI)C56H103N3O10Si3S[M+H]+的计算值1094.6745，实测值1094.6742。
埃博霉素83：在0℃下向经保护的埃博霉素83a(10.0mg，0.009mmol，1.0当量)在四氢呋喃(2.0mL)中的搅拌溶液中添加氟化氢-吡啶复合物(70％HF，0.05mL，1.94mmol，215当量)。使反应混合物升温至25℃并再搅拌5h。然后将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)猝灭并将两相分离。将水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将粗材料再悬浮于二氯甲烷(1.0mL)中并冷却到0℃。添加三氟乙酸(0.10mL，1.30mmol，144当量)，将反应混合物搅拌6h，然后使之升温至25℃。真空移除溶剂，并将所得残余物再溶于乙酸乙酯(15mL)中。在搅拌下添加饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)。10分钟后，将两相分离，并将有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过快速柱色谱法(硅胶，在二氯甲烷中10％甲醇)纯化得到的残余物，得到呈无色油状物的纯埃博霉素83(4.0mg，0.007mmol，80％)。83：Rf＝0.13(硅胶，在二氯甲烷中10％甲醇)；[α]D 25＝-16.7(c＝0.15，CH2Cl2)；FT-IR(纯)νmax 3332,2926,2856,1727,1686,1529,1464,1378,1346,1262,1148,1054,1009,982,885,875,799,735,689cm–1；1H NMR(600MHz,CD2Cl2)δ＝6.40(s,1H),6.32(s,1H),5.37(dd,J＝5.2,5.2Hz,1H),5.12(br s,2H),4.07(dd,J＝10.1,2.0Hz,1H),3.73-3.70(m,4H),3.26(dq,J＝7.2,7.2Hz,1H),2.74-2.64(m,2H),2.47(dd,J＝13.9,10.2Hz,1H),2.35(dd,J＝13.9,2.3Hz,1H),2.06(s,3H),2.03-1.98(m,3H),1.72-1.66(m,1H),1.55-1.41(m,5H),1.34(s,3H),1.32-1.27(m,3H),1.21(s,3H),1.11(d,J＝6.9Hz,3H),1.03(s,3H),0.96(d,J＝6.9Hz,3H)ppm；13C NMR(151MHz,CD2Cl2)δ＝220.7,171.3,167.0,148.8,136.6,119.7,107.6,78.0,75.3,74.4,61.7,54.8,53.1,44.3,39.6,35.6,34.2,32.3,31.5,30.1,27.6,23.1,21.7,20.6,17.5,16.7,15.7,14.3ppm；HRMS(ESI)C28H45N3O6S[M+Na]+的计算值574.2921，实测值574.2899。
实施例4-生物学活性
生物学评价.将合成的埃博霉素类似物提交给NCI进行针对NCI-60人癌细胞系组的测试(Shoemaker，2006)。N-Boc(5和6)及N-Teoc(7)保护的类似物在超出初始的一个剂量测试(10μM)以外未表现出显著的活性，并且因此未进行进一步筛选。然而，使已通过了初始的一个剂量测试的化合物8-14经受一式两份的五个剂量筛选，其显示出针对许多肿瘤细胞系的强效活性，如表1中所突显的那样。类似物11和12在本研究中表现出最强的活性，如表1中所示。
表1.选定的NCI-60细胞毒性数据[8-12、14的(GI50，nM)a]b
aGI50＝抑制生长50％的浓度；b参见图7的完全的NCI-60结果；c小于(<)指示实际的GI50在筛选的灵敏度阈值以下；NA＝结果不可获得；e“-”指示GI50>100nM。
为了获得对合成埃博霉素类似物(5-14)的生物学特性的进一步认识，我们研究了它们诱导微管蛋白聚合及针对人乳房(MCF-7)和卵巢(OVCAR-8)癌细胞的生长抑制的能力。为了比较的目的，平行测试了埃博霉素A(epoA)、B(epoB)、C(epoC)及D(epoD)、伊沙匹隆(Ixab)和紫杉醇(PTX)。如表2中所示，类似物5-7在所有三项测定中都没有显示出显著的活性，而所有其它的合成化合物(8-14)表现出与天然存在的埃博霉素、Ixab和PTX相当或更高的效力。类似物11和12在本研究中被证明同样是有高效力的，表现出比所有测试的标准埃博霉素(epoA-D、Ixab)和PTX更强的效力(参见表2)。
结构-活性关系.合成类似物(5-14，图3)的生物学评价结果是一致的，并且对先前在埃博霉素类别内建立的结构-活性关系提供了进一步的支持(Nicolaou等人，2006；Altmann等人，2000；Nicolaou等人，2000；Nicolaou等人，2003和Alhamadsheh等人，2008)。在通过H-键合(与β-微管蛋白中的组氨酸残基的质子化形式)充当H-受体的侧链的特定位置处的碱性N-原子的关键性质(Carlomagno等人，2003；Nettles等人，2004；Heinz等人，2005和Reese等人，2007)以及侧链结合袋的空间容忍性在本系列化合物中是明显的。因此，三种类似物出现活性的损失，所述三种类似物在与其吡唑部分的必需N-原子附接的侧链上配有庞大的保护基团(即5-7，图3)。除了针对某些细胞系(例如MCF-7和OVCAR-8，表2，以及NCI-60人肿瘤细胞系组，表1)显示出较低效力的13以外，所有其它的类似物(即8-14，图3)均表现出强活性。化合物9对比8的显著效力损失(参见表2)可能归因于CF3基团的吸电子效应，其削弱了参与这些分子与它们的微管蛋白结合位点对接的吡唑N-原子的H-键接受能力。如在表1和2中所看到的那样，化合物11和12证明是最有效力的。在苯胺部分的邻位含有F-残基，这些类似物享有众所周知的以氟为生物活性增强元素的有益效果(Manallack2007和Silverman 2004)，同时允许关键N-原子与β-微管蛋白组氨酸之间有H-键，这与相当低效力的类似物13相反，后者可能受困于附近的三氟甲基基团所产生的空间相互作用。
表2.细胞毒性和微管蛋白组装测定。
a在这些实验中，每个100μL反应混合物含有1.0mg/mL(10μM)微管蛋白、0.4M谷氨酸一钠(取自用HCl调节至pH 6.6的2.0M储备溶液、0.5mM MgCl2、2％(v/v)二甲基亚砜和不同的化合物浓度。在室温下(约22℃)温育30分钟。以14,000rpm在室温下将反应混合物在Eppendorf离心机中离心10分钟。采用劳里测定法(Lowry assay)，在50μL上清液中测定蛋白质，参见Lin等人，1996；bEC50＝产生为对照的50％的未结合蛋白质上清液的药物浓度；c采用标准NCI测定法评价细胞生长，用磺酰罗丹明B测量参数；GI50＝在37℃下96h后减少细胞生长50％的化合物浓度；SD＝标准偏差，SD为0指示在所有三次测定中获得相同的值；d人乳腺癌细胞系；e卵巢癌细胞系。
表3：类似物70-83的细胞毒性和微管蛋白结合测定。
1测定如Lin等人，1996中所述。在这些实验中，每个100μL反应混合物含有1.0mg/mL(10μM)微管蛋白、0.4M谷氨酸一钠(取自用HCl调节至pH 6.6的2.0M储备溶液、0.5mMMgCl2、2％(v/v)二甲基亚砜和不同的化合物浓度。在室温下(约22℃)温育30分钟。以14,000rpm在室温下将反应混合物在Eppendorf离心机中离心10分钟。采用劳里测定法，在50μL上清液中测定蛋白质。2采用标准NCI测定法评价细胞生长，蛋白质用磺酰罗丹明B测量参数。IC50是在37℃下96h后减少细胞生长50％的化合物浓度。NCI/ADR-RES细胞系是过表达导致多重抗药性的P-糖蛋白的OVCAR-8的等基因克隆。3SD为0指示在所有三次测定中获得相同的值。4数据不可得。
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根据本公开内容，在无需过度实验的情况下可制备及实施本文公开和请求保护的所有组合物和/或方法。虽然已经按照优选的实施方案对本发明的组合物和方法进行了描述，但对于本领域技术人员而言显而易见的是，在不偏离本发明的构思、实质和范围的情况下，可以对本文描述的组合物和/或方法以及步骤或步骤的顺序进行变动。更具体地，显然可以用化学及生理学上相关的某些药剂替代本文所述的药剂，而同时获得相同或相似的结果。对于本领域技术人员而言显而易见的所有这类相似的替代和修改被视为属于由所附权利要求限定的本发明的实质、范围和构思以内。
V.参考文献
以下参考文献在一定程度上对本文陈述的内容提供示例程序性补充或其它细节补充，它们具体地以引用的方式并入本文：
Alhamadsheh et al.，Chem.Eur.J.，14：570-581，2008.
Altmann et al.，Bioorg.Med.Chem.Lett.，10：2765-2768，2000.
Altmann.et al.，“The Epothilones：An Outstanding Family of Anti-TumorAgents.”In Progess in the Chemistry of Organic Natural Products，Eds.Kinghorn，Falk，and Kobayashi，Springer，New York，2004.
Anderson，N.G.，Practical Process Research&Development-A Guide ForOrganic Chemists，2nd ed.，Academic Press，New York，2012.
Austin-Ward and Villaseca，Rev.Med.Chil.，126(7)：838-45，1998.
Barclay et al.(eds.)，The Leucocyte Antigen Facts Book，1993，AcademicPress.
Bellamy and Ou，Tet.Lett.，25：839-842，1984.
Bode and Carreira，J.Am.Chem.Soc.，123：3611-3612，2001.
Bukowski et al.，Clin.Cancer Res.，4(10)：2337-47，1998.
Burkly et al.：TWEAKing tissue remodeling by a multifunctionalcytokine：role of TWEAK/Fn 14 pathway in health and disease.Cytokine 40：1-16(2007).
Campbell et al.，Cancer Res.，51(19)：5329-5338 1991.
Carlomagno et al.，Angew.Chem.Int.Ed.，42，2511-2515，2003.
Christodoulides et al.，Microbiology，144(Pt 11)：3027-37，1998.
Davidson et al.，J.Immunother.，21(5)：389-98，1998.
Ermolenko and Potier，Tet.Lett.，43：2895-2898，2002.
Hammick and Voaden，J.Chem.Soc.，3303，1961.
Hanibuchi et al.，Int.J.Cancer，78(4)：480-485，1998.
Heinz et al.，Angew.Chem.Int.Ed.，44：1298-1301，2005.
Hellstrand et al.，Acta Oncol.，37(4)：347-353，1998.
et al.，Angew.Chem.Int.Ed.，35：1567-1569，2004.
Hui and Hashimoto，Infect.Immun.，66(11)：5329-36，1998.
Izgu and Hoye，Tet.Lett.，53，4938-4941，2012.
Ju et al.，Gene Ther.，7(19)：1672-1679，2000.
Keck，et al.，J.Org.Chem.，73：9675-9691，2008.
Lee，et al.，J.Am.Chem.Soc.，123：5249，2001.
Lin.et al.，Cancer Chemother.Pharmacol.，38：136-140，1996.
Manallack，Perspect.Med.Chem.，1，25-38，2007.
March’s Advanced Organic Chemistry：Reactions，Mechanisms，andStructure，2007.
Martin and Thomas，Tet.Lett.，42：8378-8377，2001.
Masuda and Okutani，Tetrahedron，30：409，1974.
May and Grieco，Chem.Commun.，1597-1598，1998.
Mitchell et al.，Ann.NY Acad.Sci.，690：153-166，1993.
Mitchell et al.，J.Clin.Oncol.，8(5)：856-869，1990.
Meng，et al.，J.Am.Chem.Soc.，119：10073-10092，1997.
Morton et al.，Arch.Surg.，127：392-399，1992.
Mulzer，et al.，Tet.Lett.，39：8633-8636，1998.
Nechushtan et al.，1997
Nettles et al.，Science，305：866-869，2004.
Nicolaou et al.，Angew.Chem.Int.Ed.，42：3515-3520，2003.
Nicolaou et al.，Bioorg.Med.Chem.，7：665-697，1990.
Nicolaou et al.，Chem.Biol.，7：593-599，2000.
Nicolaou et al.，Chem.Eur，J.，6：2783-2800，2000.
Nicolaou et al.，ChemMedChem.，1：41-44，2006.
Nicolaou，et al.，J.Am.Chem.Soc.，119：7960-7973，1997a.
Nicolaou，et al.，J.Am.Chem.Soc.，119：7974-7991，1997b.
Nicolaou，et al.，Angew.Chem.Int.Ed.，37：84，1998.
Onda et al.，Cancer Res.，64：1419-1424，2004.
PCT Publication No.2008/121949
PCT Publication No.2011/053435
PCT Publication No.2014/087413
Pietras et al.，Oncogene，17(17)：2235-49，1998.
Pratt，PhD Dissertation，The Scripps Research Institute，2008.
Qin et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95(24)：14411-14416，1998.
Ravindranath and Morton，Intern.Rev.Immunol.，7：303-329，1991.
Reese et al.，Angew.Chem.Int.Ed.，46：1864-1868，2007.
Remington’s Pharmaceutical Sciences，15th Ed.，1035-1038 and 1570-1580，1990.
Remington’s Pharmaceutical Sciences，15th Ed.，3：624-652，1990.
Rosenberg et al.，Ann.Surg.210(4)：474-548，1989.
Rosenberg et al.，N.Engl.J.Med.，319：1676，1988.
Sawada，et al.，J.Am.Chem.Soc.，122：10521-10532，2000.
Schank et al.，Tetrahedron，50：3721-3742，1994.
Schinzer，et al.，Synlett，861-863，1998.
Shoemaker，Nat.Rev.Cancer，6：813-823，2006.
Shoji et al.，J.Am.Chem.Soc.，129：1456-1464，2007.
Silverman，The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action，2ndEd.；Elsevier Academic Press：Burlington，Massachusetts，2004；pp.62-64.
Sinha，et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95：14603-14608，1998.
Taylor and Chen，Org.Lett.，3：2221-2224，2001.
Thompson(ed.)，1994，The Cytokinc Handbook，Academic Press，San Diego.
U.S.Patent 5,739,169
U.S.Patent 5,801,005
U.S.Patent 5,824,311
U.S.Patent 5,830,880
U.S.Patent 5,846,945
U.S.Patent No.6,232,287
U.S.Patent No.6,528,481
U.S.Patent No.7,452,964
U.S.Patent No.7,671,010
U.S.Patent No.7,781,565
U.S.Patent No.8,450,278
U.S.Patent No.8,507,445
U.S.Patent Publication No.2004/005647
U.S.Patent Publications No.2006/0034925
U.S.Patent Publications No.2006/0115537
U.S.Patent Publications No.2006/0223114
U.S.Patent Publications No.2006/0234299
U.S.Patent Publications No.2007/0148095
U.S.Patent Publications No.2012/0141550
U.S.Patent Publications No.2013/0138032
U.S.Patent Publications No.2014/0024610
Valluri，et al.，Org.Lett.，3：3607-3609，2001.
Wang，et al.，Org.Lett.，14：6354-6357，2012.
Weitman et al.，Cancer Res.，52(12)：3396-3401，1992b.
Weitman et al.，Cancer Res.，52(23)：6708-6711，1992a.
White，et al.，J.Org.Chem.，64：684-685，1999.
Winkles JA：The TWEAK-Fn14 cytokine-receptor axis：discovery，biologyand therapeutic targeting.Nat Rev Drug Discov 7：411-425(2008).
Winthrop et al.，Clin.Cancer Res.，9：3845s-3853s，2003.
WO 2012/003498A1
Xing and Ogata，J.Org.Chem.，47，3577-3581，1982.
Zhou et al.，Mol Cancer Ther.10(7)：1276-88，2011.

Claims (114)

1.一种下式的化合物：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
2.如权利要求1所述的化合物，其进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
3.如权利要求1所述的化合物，其进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R7是氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
4.如权利要求1或权利要求3所述的化合物，其进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的化合物，其进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2是-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2是-O-或-NRb-；其中
Rb是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的化合物，其进一步定义为：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，其进一步定义为：
其中：
X1是-O-或-NRa-；其中
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为R2不是2-甲基-噻唑基、2-羟甲基-噻唑基、N-2-甲基-3-甲硫基吡唑基或2-甲硫基-噻唑基；
或其药学上可接受的盐。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中原子2和3通过单键连结。
10.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中原子2和3通过双键连结。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物，其中R1是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。
12.如权利要求11所述的化合物，其中R1是烷基(C≤8)。
13.如权利要求12所述的化合物，其中R1是甲基。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的化合物，其中R3是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。
15.如权利要求14所述的化合物，其中R3是烷基(C≤8)。
16.如权利要求15所述的化合物，其中R3是甲基。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的化合物，其中R4是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。
18.如权利要求17所述的化合物，其中R4是烷基(C≤8)。
19.如权利要求18所述的化合物，其中R4是甲基。
20.根据权利要求1-20中任一项所述的化合物，其中R5是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。
21.如权利要求20所述的化合物，其中R5是烷基(C≤8)。
22.如权利要求21所述的化合物，其中R5是甲基。
23.根据权利要求1-22中任一项所述的化合物，其中R6是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。
24.如权利要求23所述的化合物，其中R6是烷基(C≤8)。
25.如权利要求24所述的化合物，其中R6是甲基。
26.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物，其中R7是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。
27.如权利要求26所述的化合物，其中R7是烷基(C≤8)。
28.如权利要求27所述的化合物，其中R7是甲基。
29.根据权利要求1-28中任一项所述的化合物，其中Y1是羟基。
30.根据权利要求1-29中任一项所述的化合物，其中Y2是羟基。
31.根据权利要求1-30中任一项所述的化合物，其中X3是O。
32.根据权利要求1-31中任一项所述的化合物，其中X4是O。
33.根据权利要求1-32中任一项所述的化合物，其中X2是O。
34.根据权利要求1-32中任一项所述的化合物，其中X2是NRb，其中Rb是氢、烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。
35.如权利要求34所述的化合物，其中Rb是氢。
36.根据权利要求1-35中任一项所述的化合物，其中X1是O。
37.根据权利要求1-35中任一项所述的化合物，其中X1是NRa，其中：
Ra是氢或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式。
38.如权利要求37所述的化合物，其中Ra是氢。
39.如权利要求37所述的化合物，其中Ra是烷基(C≤8)或取代的烷基(C≤8)。
40.如权利要求39所述的化合物，其中Ra是烷基(C≤8)。
41.如权利要求40所述的化合物，其中Ra是甲基或乙基。
42.如权利要求39所述的化合物，其中Ra是取代的烷基(C≤8)。
43.如权利要求42所述的化合物，其中Ra是2-羟乙基、2-氨基乙基或2-叠氮基乙基。
44.如权利要求37所述的化合物，其中Ra是-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或取代的-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)。
45.如权利要求44所述的化合物，其中Ra是-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)。
46.如权利要求45所述的化合物，其中Ra是环丙基甲基。
47.根据权利要求1-46中任一项所述的化合物，其中R2是2-甲基噻唑基、2-(2-羟乙基)噻唑基、吡啶基、苯并噻唑基、2-(氨基甲基)-噻唑基、2-(2-氨基乙基)噻唑基、2-甲硫基噻唑基或(3-甲硫基)-吡唑基。
48.根据权利要求1-46中任一项所述的化合物，其中R2是-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或其取代形式；其中：Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式。
49.如权利要求48所述的化合物，其中R2的所述杂芳烃二基(C≤8)是吡唑基、3-三氟甲基吡唑基或3-甲硫基吡唑基。
50.如权利要求48或权利要求49所述的化合物，其中Rd是烷基(C≤12)或取代的烷基(C≤12)。
51.如权利要求50所述的化合物，其中Rd是取代的烷基(C≤12)。
52.如权利要求51所述的化合物，其中Rd是2-氨基乙基。
53.如权利要求51所述的化合物，其中Rd是具有经保护的胺基团的取代的烷基(C≤12)。
54.如权利要求53所述的化合物，其中所述经保护的胺基团是叔丁氧羰基保护的胺基团或碳酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯保护的胺基团。
55.如权利要求54所述的化合物，其中Rd是-CH2CH2NHBoc或-CH2CH2NHTeoc。
56.如权利要求48或权利要求49所述的化合物，其中Rd是芳基(C≤12)或取代的芳基(C≤12)。
57.如权利要求56所述的化合物，其中Rd是取代的芳基(C≤12)。
58.如权利要求57所述的化合物，其中Rd是2-氨基苯基、4-氨基苯基、4-氨基-3-氟苯基、4-氨基-3-三氟甲基苯基、4-氨基-2-氟苯基或4-氨基-2-三氟甲基苯基。
59.根据权利要求1-58中任一项所述的化合物，其中所述化合物被进一步定义为：
或其药学上可接受的盐。
60.一种药物组合物，其包含：
(a)根据权利要求1-59中任一项所述的化合物；和
(b)药学上可接受的载体。
61.如权利要求60所述的药物组合物，其中所述药物组合物被配制成用于按以下方式施用：口服、脂肪内、动脉内、关节内、颅内、皮内、病灶内、肌内、鼻内、眼内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、直肠内、鞘内、气管内、瘤内、脐内、阴道内、静脉内、囊内、玻璃体内、经脂质体、局部、经粘膜、肠胃外、经直肠、结膜下、皮下、舌下、外用、经颊、经皮、经阴道、以乳油、以脂质组合物、经由导管、经由灌洗、经由连续输注、经由输注、经由吸入、经由注射、经由局部递送或经由局部灌注。
62.如权利要求60或权利要求61所述的药物组合物，其中所述药物组合物被配制为单位剂量。
63.一种治疗患者的疾病或病症的方法，其包括对有需要的患者施用治疗有效量的根据权利要求1-62中任一项所述的化合物或组合物。
64.如权利要求63所述的方法，其中所述疾病或病症是癌症。
65.如权利要求64所述的方法，其中所述癌症是癌、肉瘤、淋巴瘤、白血病、黑素瘤、间皮瘤、多发性骨髓瘤或精原细胞瘤。
66.如权利要求64所述的方法，其中所述癌症是膀胱、血液、骨、脑、乳腺、中枢神经系统、子宫颈、结肠、子宫内膜、食道、胆囊、胃肠道、生殖器、泌尿生殖道、头、肾、喉、肝、肺、肌肉组织、颈部、口腔或鼻腔粘膜、卵巢、胰腺、前列腺、皮肤、脾、小肠、大肠、胃、睾丸或甲状腺的癌症。
67.根据权利要求64-66中任一项所述的方法，其中所述癌症是乳腺癌或卵巢癌。
68.如权利要求67所述的方法，其中所述乳腺癌是导管癌。
69.如权利要求67所述的方法，其中所述卵巢癌是卵巢腺癌。
70.根据权利要求63-69中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括第二癌症疗法。
71.如权利要求70所述的方法，其中所述第二癌症疗法是手术、第二化学治疗剂、放射疗法或免疫疗法。
72.根据权利要求63-71中任一项所述的方法，其中所述患者是哺乳动物。
73.如权利要求72所述的方法，其中所述患者是人。
74.根据权利要求63-73中任一项所述的方法，其中所述方法包括施用所述化合物一次。
75.根据权利要求63-73中任一项所述的方法，其中所述方法包括施用所述化合物两次或更多次。
76.一种抗体药物缀合物，其包含：
(a)抗体；和
(b)根据权利要求1-59中任一项所述的化合物。
77.如权利要求76所述的抗体药物缀合物，其中所述抗体和所述化合物是通过接头连接的。
78.如权利要求76所述的抗体药物缀合物，其中所述抗体包含与所述抗体缀合的两种或更多种化合物。
79.如权利要求77所述的抗体药物缀合物，其中所述接头是能酶促降解的接头。
80.一种制备下式的化合物的方法：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
所述方法包括使下式的化合物：
其中：X1、X2、X3、X4、Y1、Y2、R1、R3、R4、R5、R6和R7如上所定义；与下式的化合物：
其中：
R2如上所定义；且
R′和R″各自独立地为烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、芳基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式；
在碱的存在下反应。
81.如权利要求80所述的方法，其中所述碱是强碱。
82.如权利要求81所述的方法，其中所述碱是有机锂(C≤12)试剂。
83.如权利要求82所述的方法，其中所述碱是正丁基锂。
84.如权利要求81所述的方法，其中所述碱是金属甲硅烷基酰胺(C≤24)。
85.如权利要求84所述的方法，其中所述碱是金属六烷基甲硅烷基酰胺(C6-24)。
86.如权利要求85所述的方法，其中所述碱是双(三甲基甲硅烷基)氨基钠。
87.根据权利要求80-86中任一项所述的方法，其中所述方法包括以约1:1至约1.5:1的比率添加所述碱与式IX的化合物。
88.如权利要求87所述的方法，其中所述比率是约1.2:1至约1.3:1。
89.根据权利要求80-88中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括使所述化合物在包括约-100℃至约-50℃的温度的条件下反应。
90.如权利要求89所述的方法，其中所述方法进一步包括允许反应升温到约-30℃至30℃的温度。
91.根据权利要求80-90中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括使所述化合物反应约30分钟至约8小时的时间段。
92.一种制备下式的化合物的方法：
其中：
X1不存在、为-O-或-NRa-；其中
Ra是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
条件为当X1不存在时，其所附接的原子是双键的一部分；且条件为当其所附接的原子是双键的一部分时，则X1不存在；
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
所述方法包括使下式的化合物：
其中：
X1、X2、X3、X4、Y1、Y2、R1、R3、R4、R5、R6和R7如上所定义；且
R′是卤代基；
与下式的化合物：
其中：
R2如上所定义；且
R″、R″′和R″″各自独立地为烷基(C≤12)或取代的烷基(C≤12)；
在过渡金属催化剂存在下反应。
93.如权利要求92所述的方法，其中所述过渡金属催化剂包含钯络合物。
94.如权利要求93所述的方法，其中所述钯络合物是三(二亚苄基丙酮)-双钯。
95.根据权利要求92-94中任一项所述的方法，其中所述过渡金属催化剂进一步包含三芳基氮族元素化合物(C≤24)。
96.如权利要求95所述的方法，其中所述过渡金属催化剂包含三芳基砷化合物。
97.如权利要求96所述的方法，其中所述过渡金属催化剂包含三苯基胂。
98.根据权利要求92-97中任一项所述的方法，其中所述过渡金属催化剂进一步包含铜盐。
99.如权利要求98所述的方法，其中所述铜盐是铜(I)盐。
100.如权利要求99所述的方法，其中所述铜盐是CuI。
101.根据权利要求92-100中任一项所述的方法，其中所述方法包括以约1:1至约1:5的比率添加式X的化合物与式XII的化合物。
102.如权利要求101所述的方法，其中所述比率是约1:2.5。
103.根据权利要求92-102中任一项所述的方法，其中所述方法包括以所述钯络合物与所述三芳基氮族元素(C≤24)与所述铜盐的比率为约1:1:1至约1:10:20添加所述过渡金属催化剂的组分。
104.如权利要求103所述的方法，其中所述比率是约1:2:4。
105.根据权利要求92-104中任一项所述的方法，其中所述钯络合物与式X的化合物的比率是约0.01:1至约0.5:1。
106.如权利要求105所述的方法，其中所述比率是约0.05:1至约0.2:1。
107.如权利要求106所述的方法，其中所述比率是约0.1:1。
108.一种制备下式的化合物的方法：
其中：
X2、X3和X4各自独立地为-O-或-NRb-；其中
Rb是氢、单价胺保护基团或烷基(C≤8)、环烷基(C≤8)、-烷二基(C≤6)-环烷基(C≤8)、芳烷基(C≤8)或这些基团中的任一者的取代形式；
Y1和Y2各自独立地为氨基、羟基或烷氧基(C≤8)、芳烷氧基(C≤8)、酰氧基(C≤8)、烷基氨基(C≤8)、二烷基氨基(C≤8)、酰氨基(C≤8)或这些基团中的任一种的取代形式或-ORc，其中：
Rc是羟基保护基团；
R1、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢或烷基(C≤12)、环烷基(C≤12)、烯基(C≤12)、炔基(C≤12)、芳基(C≤12)或这些基团中的任一种的取代形式；且
R2是杂芳基(C≤12)、-杂芳烃二基(C≤8)-Rd或这些基团中的任一者的取代形式；其中：
Rd是烷基(C≤12)、芳基(C≤12)、芳烷基(C≤12)、杂芳基(C≤12)、杂芳烷基(C≤12)或这些基团中的任一者的取代形式；
所述方法包括使下式的化合物：
其中：
X1、X2、X3、X4、Y1、Y2、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7如上所定义；
与O-(2,4-二硝基苯基)羟胺在Rh催化剂存在下反应。
109.如权利要求108所述的方法，其中所述Rh催化剂是Rh(II)催化剂。
110.如权利要求109所述的方法，其中所述Rh催化剂是双[铑(α,α,α’,α’,-四甲基-1,3-苯二丙酸)]。
111.根据权利要求108-110中任一项所述的方法，其中所述Rh催化剂以约0.25％至约5％的摩尔百分比存在。
112.如权利要求111所述的方法，其中所述摩尔百分比是约2％。
113.根据权利要求108-112中任一项所述的方法，其中所述方法包括以约1:1至约1:5的比率添加式XIV的化合物与所述O-(2,4-二硝基苯基)羟胺。
114.如权利要求113所述的方法，其中所述比率是约1:1.5。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2022004627A (es) * 2019-10-18 2022-05-26 Fmc Corp Metodos para la preparacion del acido 5-bromo-2-(3-cloropiridin-2- il)-2h-pirazol-3-carboxilico.
MX2022004630A (es) * 2019-10-18 2022-06-08 Fmc Corp Metodos para la preparacion del acido 5-bromo-2-(3-cloropiridin-2- il)-2h-pirazol-3-carboxilico.
BR112022007294A2 (pt) * 2019-10-18 2022-07-05 Fmc Corp Métodos para a preparação de ácido 5-bromo-2-(3-cloro-piridin-2-il)-2h-pirazol-3-carboxílico

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1340053A (zh) * 1999-02-11 2002-03-13 舍林股份公司 依泊昔酮衍生物、其制备方法及药物用途
TW200907341A (en) * 2007-06-29 2009-02-16 Bayer Schering Pharma Ag Methods, kits, and compounds for determining responsiveness to treatment of a pathological disorder by epothilones
CN101495482A (zh) * 2006-05-25 2009-07-29 百时美施贵宝公司 氮杂环丙基-埃坡霉素化合物
CN101519404A (zh) * 2008-02-29 2009-09-02 唐莉 15环噻酮衍生物及其制备方法与应用
CN101553227A (zh) * 2006-12-08 2009-10-07 拜耳先灵医药股份有限公司 埃博霉素在治疗骨质疏松症和相关疾病中的应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6441186B1 (en) 1996-12-13 2002-08-27 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6380394B1 (en) * 1996-12-13 2002-04-30 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6380395B1 (en) 1998-04-21 2002-04-30 Bristol-Myers Squibb Company 12, 13-cyclopropane epothilone derivatives
US7125893B1 (en) * 1999-04-30 2006-10-24 Schering Ag 6-alkenyl-, 6-alkinyl- and 6-epoxy-epothilone derivatives, process for their production, and their use in pharmaceutical preparations
WO2007062288A2 (en) 2005-11-22 2007-05-31 The Scripps Research Institute Chemical synthesis of a highly potent epothilone
AR062448A1 (es) 2006-05-25 2008-11-12 Endocyte Inc Conjugados de analogos de aziridinil-epotilona y composiciones farmaceuticas que comprenden los mismos
US20150314007A1 (en) * 2012-12-21 2015-11-05 Glykos Finland Oy Linker-payload molecule conjugates
US20140323533A1 (en) * 2013-04-29 2014-10-30 Bristol-Myers Squibb Company Combination of anti-ctla4 antibody with tubulin modulating agents for the treatment of proliferative diseases

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1340053A (zh) * 1999-02-11 2002-03-13 舍林股份公司 依泊昔酮衍生物、其制备方法及药物用途
CN101495482A (zh) * 2006-05-25 2009-07-29 百时美施贵宝公司 氮杂环丙基-埃坡霉素化合物
CN101553227A (zh) * 2006-12-08 2009-10-07 拜耳先灵医药股份有限公司 埃博霉素在治疗骨质疏松症和相关疾病中的应用
TW200907341A (en) * 2007-06-29 2009-02-16 Bayer Schering Pharma Ag Methods, kits, and compounds for determining responsiveness to treatment of a pathological disorder by epothilones
CN101519404A (zh) * 2008-02-29 2009-09-02 唐莉 15环噻酮衍生物及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
K . C . NICOLAOU ET AL.: "Designed Epothilones: Combinatorial Synthesis, Tubulin Assembly Properties, and Cytotoxic Action against Taxol-Resistant Tumor Cells", 《ANGEW.CHEM.INT. ED.ENGL.》 *
K. C. NICOLAOU ET AL.: "Molecular Design and Chemical Synthesis of a Highly Potent Epothilone", 《CHEMMEDCHEM》 *

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WO2019036537A1 (en) ANALOGUES AND DIMER OF TRIOXACARCIN AS POWERFUL ANTICANCER AGENTS

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Application publication date: 20180821

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