CN108410985B

CN108410985B - Spin1促进非小细胞肺癌肿瘤的生长

Info

Publication number: CN108410985B
Application number: CN201810161985.4A
Authority: CN
Inventors: 冀全博; 宋琪; 徐亚梦; 徐小洁; 郑宇轩
Original assignee: Chinese PLA General Hospital
Current assignee: Chinese PLA General Hospital
Priority date: 2018-02-26
Filing date: 2018-02-26
Publication date: 2021-06-18
Anticipated expiration: 2038-02-26
Also published as: CN108410985A

Abstract

本发明公开了SPIN1促进非小细胞肺癌肿瘤的生长。本发明提供了SPIN1蛋白及用于促进其表达的物质在如下任一中的应用：制备用于促进非小细胞肺癌细胞迁移和/或增殖的产品；或者制备用于促进非小细胞肺癌肿瘤生长的产品。实验证明，SPIN1与非小细胞肺癌患者的整体生存率和预后密切相关。SPIN1能够明显促进非小细胞肺癌细胞系的迁移和增殖，并能够促进非小细胞肺癌肿瘤的生长。因此，SPIN1有可能成为治疗非小细胞肺癌患者预后的新的生物标志物和靶标。

Description

SPIN1促进非小细胞肺癌肿瘤的生长

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及SPIN1促进非小细胞肺癌肿瘤的生长，特别涉及SPIN1在制备用于促进非小细胞肺癌肿瘤的生长的产品(如非小细胞肺癌肿瘤发生/发展的细胞模型或动物模型)中的应用，以及能够抑制SPIN1表达的物质在制备用于抑制非小细胞肺癌肿瘤生长的产品中的应用。

背景技术

非小细胞肺癌是目前世界范围内最普遍的肺癌类型。研究表明，非小细胞肺癌患者一经诊断，其生存率仅为15％左右。虽然针对非小细胞肺癌治疗的放疗和化疗在过去的几十年中已经取得长足进展。然而，非小细胞肺癌患者的临床治疗效果却并未发生明显改善。因此，寻找更好的非小细胞肺癌临床治疗方案并理解其中的作用机制至关重要。

Spindlin 1(SPIN1)是SPIN/SSTY基因家族的成员之一，最早被报道在小鼠受精卵和胚胎发育过程中。SPIN1能够在小鼠卵母细胞成熟过程中调节减数分裂并形成核糖核蛋白复合物。体细胞中SPIN1过表达也会导致细胞周期阻滞。然而，SPIN1在人非小细胞肺癌中的发生发展和肿瘤形成中的作用目前仍不清楚。

发明内容

本发明的目的是提供SPIN1蛋白及其相关生物材料的新用途。

第一方面，本发明要求保护如下(1)-(3)所示物质中的任一种在如下(a)-(c)至少一种中的应用：

(1)SPIN1蛋白；

(2)编码SPIN1蛋白的核酸分子；

(3)含有所述核酸分子的表达盒、重组载体或转基因细胞；

(a)促进肺癌细胞迁移，或者制备用于促进肺癌细胞迁移的产品；

(b)促进肺癌细胞增殖，或者制备用于促进肺癌细胞增殖的产品；

(c)促进肺癌肿瘤生长，或者制备用于促进肺癌肿瘤生长的产品。

第二方面，本发明要求保护能够促进如下(1)或(2)表达和/或活性提高的物质在如下(a)-(c)至少一种中的应用：

(1)SPIN1蛋白；

(2)编码SPIN1蛋白的核酸分子；

在上述第一方面和第二方面所述的应用中，所述用于促进肺癌细胞迁移的产品均可为迁移能力增强的肺癌细胞模型，或者是用于制备迁移能力增强的肺癌细胞模型的物质。

在上述第一方面和第二方面所述的应用中，所述用于促进肺癌细胞增殖的产品均可为增殖能力增强的肺癌细胞模型，或者是用于制备增殖能力增强的肺癌细胞模型的物质。

在上述第一方面和第二方面所述的应用中，所述用于促进肺癌肿瘤生长的产品均可为肺癌肿瘤生长能力增强的动物模型，或者是用于制备肺癌肿瘤生长能力增强的动物模型的物质。

第三方面，本发明要求保护能够抑制如下(1)或(2)表达和/或活性降低的物质在如下(a’)-(c’)至少一种中的应用：

(1)SPIN1蛋白；

(2)编码SPIN1蛋白的核酸分子；

(a’)抑制肺癌细胞迁移，或者制备用于抑制肺癌细胞迁移的产品；

(b’)抑制肺癌细胞增殖，或者制备用于抑制肺癌细胞增殖的产品；

(c’)抑制肺癌肿瘤生长，或者制备用于抑制肺癌肿瘤生长的产品。

在所述应用中，所述产品可为药品或保健品等。

第四方面，本发明要求保护如下(1)-(2)所示物质中的任一种在作为用于治疗和/或预防肺癌的靶标中的应用：

(1)SPIN1蛋白；

(2)编码SPIN1蛋白的核酸分子。

在上述第一、第二、第三和第四方面所述的应用中，所述SPIN1蛋白具体可为人源SPIN1蛋白。

进一步地，所述SPIN1蛋白具体可为如下任一：

(A1)氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质；

(A2)将SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

(A3)与(A1)-(A2)中任一所限定的氨基酸序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同源性且具有相同功能的蛋白质；

(A4)在(A1)-(A3)中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。

相应的，所述编码SPIN1蛋白的核酸分子具体可为如下任一所述的DNA分子：

(a1)SEQ ID No.2所示的DNA分子；

(a2)在严格条件下与(a1)限定的DNA分子杂交且编码所述SPIN1蛋白的DNA分子；

(a3)与(a1)-(a2)中任一限定的DNA序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同源性且编码所述SPIN1蛋白的DNA分子。

上述严格条件可为用6×SSC，0.5％SDS的溶液，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。

相应的，在本发明中，所述“含有所述核酸分子的重组载体”具体为pcDNA3-FLAG-SPIN1(即将pcDNA3-FLAG载体的酶切位点KpnI和XhoI之间的小片段替换为SEQ ID No.2所示DNA片段后的重组质粒)。

在上述第一、第二、第三和第四方面所述的应用中，所述肺癌具体为非小细胞肺癌。

进一步地，在上述第一、第二、第三和第四方面所述的应用中，所述肺癌细胞具体为非小细胞肺癌细胞系A549。所述肺癌肿瘤具体为由非小细胞肺癌细胞系A549所致的肿瘤。

实验证明，SPIN1与非小细胞肺癌患者的整体生存率和预后密切相关。SPIN1能够明显促进非小细胞肺癌细胞系的迁移和增殖，并能够促进非小细胞肺癌肿瘤的生长。因此，SPIN1有可能成为治疗非小细胞肺癌患者预后的新的生物标志物和靶标。

附图说明

图1为SPIN1过表达能够显著促进非小细胞肺肺癌的迁移。

图2为SPIN1能够显著促进非小细胞肺癌的克隆形成能力。

图3为SPIN1在动物体内促进骨肉瘤的生长。A为活体成像结果；B为活体成像荧光强度统计。

图4为SPIN1在非小细胞肺癌中的表达较癌旁组织表达量升高。A为组织病理学检测结果；B为SPIN1评分结果。

图5为非小细胞肺癌患者中的SPIN1与临床的相关性。A为高水平表达的SPIN1患者相对于低表达SPIN1的患者具有较差的整体存活率(p＝0.006)；B为高水平表达的SPIN1患者相对于低表达SPIN1的患者具有较差的无病生存期(P＝0.011)。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中所涉及的SPIN1蛋白为人源SPIN1蛋白，其氨基酸序列具体为SEQ IDNo.1，对应的基因序列具体为SEQ ID No.2。

下述实施例中，生存分析采用Kaplan Meier法，生存曲线的差异用对数秩检验进行评估。采用Cox回归模型进行单因素和多因素分析。定量资料采用单因素方差分析合并进行检验评估。采用GraphPad Prism 6软件通过Pearsonχ²进行相关性分析。统计计算采用SPSS 17.0软件进行。所有体外实验均重复三次以上。数据以均值±标准差(SD)表示。p<0.05被认为具有统计学意义。

实施例1、SPIN1促进非小细胞肺癌细胞的迁移和增殖

一、SPIN1过表达非小细胞肺癌细胞系的制备

1、SPIN1过表达载体pcDNA3-FLAG-SPIN1的构建

按常规PCR方法，以SEQ ID No.2所示的目的基因SPIN1为模板，采用引物上游5’-GGTACCATGAAGACCCCATTCGGAAAGACA-3’，下游5’-CTCGAGCTAGGATGTTTTCACCAAATCGTA-3’进行PCR扩增，KpnI和XhoI双酶切PCR产物和相应载体pcDNA3-FLAG(Invitrogen公司产品，货号为20011)，按正确相位将目的片断插入载体。经转化、筛选，得到阳性克隆酶切鉴定，分析各种重组蛋白的表达，所有重组质粒送北京博迈德生物技术有限公司测序。将测序后表明将pcDNA3-FLAG载体的酶切位点KpnI和XhoI之间的小片段替换为SEQ ID No.2所示DNA片段后的重组质粒命名为pcDNA3-FLAG-SPIN1。

2、SPIN1过表达非小细胞肺癌细胞系的制备

向A549细胞(American Type Culture Collection，

CRL8303^TM)中转入重组载体pcDNA3-FLAG-SPIN1后经压系得到稳定转染细胞系稳定克隆非小细胞肺癌A549细胞系。

二、划痕实验

供试细胞：步骤一制备的SPIN1过表达非小细胞肺癌细胞系；以及作为对照的A549细胞中转入pcDNA3-FLAG空载体的空载对照细胞。

先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.5-1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。其次在孔中加入约5×10⁵个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。然后用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。放入37℃5％CO₂培养箱，培养。按0，6，12，24小时取样，拍照。

三、克隆形成实验

取对数生长期的各组细胞，分别用0.25％胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10％胎牛血清的DMEM培养液中备用。将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞以每皿100个细胞的梯度密度分别接种含10mL 37℃预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。置37℃5％CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。经常观察，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4％多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率＝(克隆数/接种细胞数)×100％。

四、结果

1、SPIN1能够促进非小细胞肺癌的迁移

本发明采用划痕实验针对SPIN1对非小细胞肺癌细胞系的迁移能够影响进行研究。研究表明，SPIN1过表达能够显著促进非小细胞肺肺癌的迁移(图1)。

2、SPIN1能够促进非小细胞肺癌的增殖

本发明进一步采用克隆形成实验，对SPIN1调节非小细胞肺癌的能力进行研究。实验数据表明，SPIN1能够显著促进非小细胞肺癌的克隆形成能力(图2)。这与上述实验结果保持一致，显示SPIN1在非小细胞肺癌进展过程中发挥重要作用。

实施例2、SPIN1促进非小细胞肺癌肿瘤的生长

动物研究是按照中国人民解放军总医院机构动物护理和使用委员会批准的规程进行。动物实验前，构建荧光素酶标记的A549细胞。具体步骤为：通过通用的阳离子脂质体法将荧光素酶(Luc)基因慢病毒载体转染入病毒包装细胞293T。72h后收集病毒上清，并感染A549细胞，经压系得到待荧光素酶标记的稳定克隆非小细胞肺癌A549细胞系。将大约1.3×10⁷个带荧光素酶标记A549细胞注射到6周龄BALB/c裸鼠。针对肿瘤生长模型，将PCDH空载体(System Biosciences公司产品，货号为CD500B1)和PCDH-SPIN1(将载体的酶切位点BamHI和XhoI之间的小片段替换为SEQ ID No.2所示目的基因SPIN1后的重组质粒)注入BALB/c雌性小鼠的尾静脉。动物的影像在28天使用IVIS200成像系统。小鼠的肺进行测量并用4％多聚甲醛固定以进一步研究。

采用活体成像对SPIN1调节肺癌的能力进行研究，结果发现，相对于对照组，SPIN1组小鼠的肺部病灶活体成像信号较强(图3)。这些数据表明，SPIN1是调节非小细胞肺癌的重要调控因子。

实施例3、非小细胞肺癌患者中的SPIN1与临床的相关性

一、病人及标本

本项研究是由中国人民解放军总医院的机构审查委员会批准(北京，中国)和并在患者知情同意下进行。85例非小细胞肺癌和癌旁组织在病理和影像学标准进行研究的基础上进行了评价。临床信息来自患者就诊记录。总的生存时间被定义为从手术到死亡的时间。患者的随访资料每月更新。标本分为两部分：一部分在液氮中立即冻结，保存在-80℃直到进行RNA提取，另一部分则用于组织病理学评估。表1列出研究人口的SPIN1的临床和人口统计学特征。

表1 SPIN1表达以及与临床指标之间的关系

注：*P<0.05,**P<0.01。

二、组织病理学评估

苏木素伊红染色(H&E)：组织固定于4％多聚甲醛48小时后用EDTA脱钙缓冲(20％EDTA，pH 7.4)。组织进行石蜡包埋、切片、H&E染色。具体步骤：苏木素染色5min后流水冲洗1-3s，1％盐酸乙醇1-3s后流水冲洗10-30s，蒸馏水冲洗1-2s，0.5％伊红液进行染色1-3min后，置于蒸馏水中进行冲洗1-2s，脱水后进行封片，显微镜下观察检测。

三、免疫组织化学染色

(1)72℃烤片机上把之前固定好的切片进行烘烤10min。

(2)烤好的切片冷却至室温，逐次在二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、乙醇100％、乙醇95％、乙醇85％、乙醇75％，蒸馏水、3％的H₂O₂中处理5min，进行脱蜡。

(3)标本浸泡于修复液中，微波炉内至刚沸，暂停5min，再开微波炉至刚沸，再停5min，累计3-4次，全长30min，冷却至室温。

(4)3％过氧化氢处理数min去处内源过氧化氢酶。37℃封闭30min，备用。

(5)封闭：羊抗封闭工作液，37℃封闭30min。

(6)抗体反应：SPIN1抗体(1:50稀释)，37℃孵育2-3h，二抗和三抗均反应10min，

(7)DAB显色：将显色用(A，B，C)各一滴滴至1mL PBS中，混匀均匀涂在组织上。室温放置10-15min。

(8)染核：苏木精染核1-2min，然后水洗反蓝。

(9)分化：将染核后的组织切片水洗3min，3次，放于分化液分化约1min。然水洗终止分化。

(10)封片，镜检：分化好的切片进行脱水后用中性树胶进行封片、镜检。

采用目前广泛接受的德国半定量评分系统进行评级，并对染色强度和面积范围进行考量：0，无染色；1，弱染色；2，中度染色；3，强染色；染色百分率分别为0(＜5％)、1(5％-25％)、2(25％-50％)、3(51％-75％)和4(>75％)。这两个分数相乘为最后的评分结果。为更好的进行检测，我们定义0分为阴性，1-12为阳性。

四、qRT-PCR

(1)总RNA提取：将组织用1×PBS清洗一次，再添加1ml Trizol，混合均匀，在室温下裂解5min。按照每ml Trizol液添加0.2ml三氯甲烷，然后剧烈振荡50次，静置2-3min，12000rpm离心15min。取上层清澈透明液体至新的EP管中，并添加等体积异丙醇，放置-80℃中15min，置于4℃离心机中高速离心15min；用75％乙醇洗涤RNA白色沉淀物，4℃高速离心5min；并添加无水乙醇1ml，4℃高速离心2min；至RNA自然干燥；最后，溶解RNA沉淀，采用100μl DEPC水溶解。

(2)反转录：总RNA 2μg，加入1μl 50μM的随机引物，72℃进行解链，5min后自然冷却到室温。然后加入dNTP、逆转录酶M-MLV、RNA酶抑制剂逆转录缓冲液，加水至最终体系体积，置于42℃恒温中，反应1h，95℃恒温环境，5min灭活处理，最终得到反转录完成的cDNA。

(3)RT-qPCR：PCR反应液(20μl体系)按下列组分配制：10μl SYBR Green Mix(2×)、2μl cDNA、0.4μl上下游引物(10μM)，余下用去离子水相应补齐；将样品加入到Real-time PCR专用PCR管中后，设置ABI Prism SDS 7000的PCR反应条件为：95℃5min，95℃30s,60℃30s,40cycles。完成Real-time PCR后对其熔解解曲线进行分析并结合琼脂糖分析PCR产物是否特异。按2^-ΔΔCt公式基因表达值进行数据计算分析。β-actin作为内参。

用于检测SPIN1的引物：

SPIN1-F：5’-GTTCTGGACCAGGTGCCTGTAAA-3’；

SPIN1-R：5’-CTGTCTCAAACATATGTTCCACTG-3’。

用于检测内参β-actin的引物：

β-actin-F：5’-ATCACCATTGGCAATGAGCG-3’；

β-actin-R：5’-TTGAAGGTAGTTTCGTGGAT-3’。

五、结果

1、非小细胞肺癌患者中的SPIN1表达测定

为探究SPIN1在非小细胞肺癌中的作用，本发明采用组织病理学检测评估了85例患者非小细胞肺癌组织及癌旁组织中的SPIN1表达情况。本发明发现，SPIN1在非小细胞肺癌中的免疫组化评分结果较癌旁组织升高。(p＝6.1×10^-7)(图4)。为进一步探讨SPIN1的临床意义，本发明研究SPIN1的水平与临床病理特征之间的关系。结果表明：SPIN1表达水平与肿瘤大小、组织学分级、胸膜浸润以及转移密切相关(表1)。

2、非小细胞肺癌患者中的SPIN1与临床的相关性

本发明进一步采用Kaplan Meier生存分析，对SPIN1与非小细胞肺癌患者的临床预后进行研究。数据表明，高水平表达的SPIN1患者相对于低表达SPIN1的患者具有较差的整体存活率(p＝0.006)和无病生存期(P＝0.011)(图5)。这些结果表明SPIN1在非小细胞肺癌患者的预后和转移发挥重要作用。

<110> 中国人民解放军总医院

<120> SPIN1促进非小细胞肺癌肿瘤的生长

<130> GNCLN180412

<160> 2

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 262

<212> PRT

<213> 人（Homo sapiens）

<400> 1

Met Lys Thr Pro Phe Gly Lys Thr Pro Gly Gln Arg Ser Arg Ala Asp

1 5 10 15

Ala Gly His Ala Gly Val Ser Ala Asn Met Met Lys Lys Arg Thr Ser

20 25 30

His Lys Lys His Arg Ser Ser Val Gly Pro Ser Lys Pro Val Ser Gln

35 40 45

Pro Arg Arg Asn Ile Val Gly Cys Arg Ile Gln His Gly Trp Lys Glu

50 55 60

Gly Asn Gly Pro Val Thr Gln Trp Lys Gly Thr Val Leu Asp Gln Val

65 70 75 80

Pro Val Asn Pro Ser Leu Tyr Leu Ile Lys Tyr Asp Gly Phe Asp Cys

85 90 95

Val Tyr Gly Leu Glu Leu Asn Lys Asp Glu Arg Val Ser Ala Leu Glu

100 105 110

Val Leu Pro Asp Arg Val Ala Thr Ser Arg Ile Ser Asp Ala His Leu

115 120 125

Ala Asp Thr Met Ile Gly Lys Ala Val Glu His Met Phe Glu Thr Glu

130 135 140

Asp Gly Ser Lys Asp Glu Trp Arg Gly Met Val Leu Ala Arg Ala Pro

145 150 155 160

Val Met Asn Thr Trp Phe Tyr Ile Thr Tyr Glu Lys Asp Pro Val Leu

165 170 175

Tyr Met Tyr Gln Leu Leu Asp Asp Tyr Lys Glu Gly Asp Leu Arg Ile

180 185 190

Met Pro Asp Ser Asn Asp Ser Pro Pro Ala Glu Arg Glu Pro Gly Glu

195 200 205

Val Val Asp Ser Leu Val Gly Lys Gln Val Glu Tyr Ala Lys Glu Asp

210 215 220

Gly Ser Lys Arg Thr Gly Met Val Ile His Gln Val Glu Ala Lys Pro

225 230 235 240

Ser Val Tyr Phe Ile Lys Phe Asp Asp Asp Phe His Ile Tyr Val Tyr

245 250 255

Asp Leu Val Lys Thr Ser

260

<210> 2

<211> 789

<212> DNA

<213> 人（Homo sapiens）

<400> 2

atgaagaccc cattcggaaa gacacctggc cagcggtcca gagctgatgc aggccatgct 60

ggagtatctg ccaacatgat gaagaagagg acatcccaca aaaaacatcg gagcagtgtg 120

ggtccgagca aacctgtttc ccagccccgg cggaacatcg taggctgcag gattcagcat 180

gggtggaaag aggggaatgg ccctgttacc cagtggaaag gaaccgttct ggaccaggtg 240

cctgtaaatc cttctttgta tcttataaaa tacgatggat ttgactgtgt ttatggacta 300

gaacttaata aagatgaaag agtttctgcg cttgaagtcc tccctgatag agttgcgaca 360

tctcgaatca gcgatgcaca cttggcagac acaatgattg gcaaagcagt ggaacatatg 420

tttgagacag aggatggttc taaagatgag tggaggggaa tggtcttagc acgtgcacct 480

gtcatgaaca catggtttta cattacctat gagaaagacc ctgtcttgta catgtaccaa 540

ctcttagatg attacaaaga aggcgacctt cgcattatgc ctgattccaa tgattcacct 600

ccagcagaaa gggaaccagg agaagttgtg gacagcctgg taggcaaaca agtggaatat 660

gccaaagaag atggctcgaa aaggactggc atggtcattc atcaagtaga agccaagccc 720

tccgtctatt tcatcaagtt tgatgatgat ttccatattt atgtctacga tttggtgaaa 780

acatcctag 789

Claims

1.如下(1)-(3)所示物质中的任一种在如下(a)-(c)至少一种中的应用：

(1)SPIN1蛋白；

(2)编码SPIN1蛋白的核酸分子；

(3)含有所述核酸分子的表达盒、重组载体或转基因细胞；

(c)促进肺癌肿瘤生长，或者制备用于促进肺癌肿瘤生长的产品；

所述肺癌为非小细胞肺癌。

2.能够促进如下(1)或(2)表达和/或活性提高的物质在如下(a)-(c)至少一种中的应用：

(1)SPIN1蛋白；

(2)编码SPIN1蛋白的核酸分子；

所述肺癌为非小细胞肺癌。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述用于促进肺癌细胞迁移的产品为迁移能力增强的肺癌细胞模型，或者是用于制备迁移能力增强的肺癌细胞模型的物质。

4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述用于促进肺癌细胞增殖的产品为增殖能力增强的肺癌细胞模型，或者是用于制备增殖能力增强的肺癌细胞模型的物质。

5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述用于促进肺癌肿瘤生长的产品为肺癌肿瘤生长能力增强的动物模型，或者是用于制备肺癌肿瘤生长能力增强的动物模型的物质。

6.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述SPIN1蛋白为人源SPIN1蛋白。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述SPIN1蛋白为氨基酸序列为SEQ IDNo.1的蛋白质。

8.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述编码SPIN1蛋白的核酸分子为SEQID No.2所示的DNA分子。