CN108403646B - 阿苯达唑纳米微粉及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及阿苯达唑加工技术领域，是一种阿苯达唑纳米微粉及其制备方法，该阿苯达唑纳米微粉，联合球磨、高速剪切、高压均质和喷雾干燥技术制备阿苯达唑纳米微粉。本发明采用球磨、高速剪切、高压均质联合喷雾干燥技术制备阿苯达唑纳米微粉的工艺稳定可行，重复性好，所制备的阿苯达唑纳米微粉外观、流动性和水化后再分散性良好；并且，相比于阿苯达唑原料，本发明的阿苯达唑纳米微粉的溶解性和吸收性显著提高，即本发明的阿苯达唑纳米微粉更适于制成口服制剂，可以被胃肠道吸收，生物利用度更高，并且阿苯达唑纳米微粉具有更好的抗包虫药效，为阿苯达唑纳米微粒制剂的后期研究与发展奠定了一定的基础。

Description

阿苯达唑纳米微粉及其制备方法

技术领域

本发明涉及阿苯达唑加工技术领域，是一种阿苯达唑纳米微粉及其制备方法。

背景技术

包虫病是棘球绦虫的幼虫寄生于人体内所致的一种人兽共患寄生虫病。人体棘球蚴病发展缓慢，以慢性消耗为主，可使患者逐渐丧失劳动能力，生活质量显著降低并且该病的死亡率较高，是危害新疆地区和人民健康最严重的寄生虫病。

虽然现阶段治疗手段仍以外科手术为首选，但药物治疗不但可以降低复发率，还可以提高手术治愈率的临床效果不断得到了肯定。目前，用于治疗包虫病的药物主要有苯丙咪唑类，其代表药阿苯达唑是WHO推荐抗包虫病的一线药物。现己有阿苯达唑片剂和胶囊等剂型在临床使用，但这些剂型口服后肠道吸收差，生物利用度相对较低，病灶局部药物浓度不高，个体差异较大，在一定程度上影响了阿苯达唑的抗包虫的作用，因此亟待开发研制新的剂型以改善其溶解度，增强靶向性，提高生物利用度。

发明内容

本发明提供了一种阿苯达唑纳米微粉及其制备方法，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决现有阿苯达唑片剂剂型存在吸收性较差、生物利用度较低的问题。

本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种阿苯达唑纳米微粉，按下述方法得到：第一步，将阿苯达唑原料经过球磨后过筛得到阿苯达唑球磨原料；第二步，将阿苯达唑球磨原料与含有适量分散剂的水溶液混合后得到阿苯达唑原料混悬液；第三步，将阿苯达唑原料混悬液经过高速剪切后得到阿苯达唑初混悬液；第四步，将阿苯达唑初混悬液经过高压均质后得到阿苯达唑纳米混悬液；第五步，将阿苯达唑纳米混悬液中加入所需量的干燥保护剂，再经过干燥后得到阿苯达唑纳米微粉。

下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：

上述阿苯达唑原料与分散剂的质量比为1:2至4:1，所述分散剂为吐温80、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇1000天然维生素E琥珀酸酯、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、40聚氧乙烯氢化蓖麻油中的一种；干燥保护剂的加入量按100毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入5克至20克干燥保护剂，所述干燥保护剂为麦芽糊精、甘露醇、肌醇、山梨醇、木糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇、丙氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、乳糖、蔗糖、果糖、菊糖、海藻糖、麦芽糖、羟丙基-β-环糊精中的一种。

上述球磨时间为4h至12h，球磨温度为小于30℃，过筛为200目至300目；所述阿苯达唑原料混悬液中阿苯达唑的质量百分比为0.5％至2％；高速剪切的转速为3500r/min至24000r/min，剪切时间为5min至20min，剪切温度为0℃至60℃；高压均质的温度为0℃至60℃，高压均质的压力为10000Psi至30000Psi，高压均质循环次数为5次至35次；所述干燥为常压干燥、减压干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。

上述常压干燥温度为60℃至100℃，干燥时间为12h至72h；减压干燥温度为60℃至100℃，干燥时间为12h至72h；喷雾干燥的进风口温度为140℃至200℃，喷雾气流速度为2000ml/h至5000ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为0.5％至2.0％，进样速度为10ml/min至50ml/min；冷冻干燥的预冻温度为-18℃至-80℃，预冻时间为2h至6h，冷冻干燥的时间为24h至72h。

上述分散剂为吐温80或泊洛沙姆407，阿苯达唑球磨原料与吐温80的质量比为2:1，阿苯达唑球磨原料与泊洛沙姆407的质量比为1:1；所述干燥保护剂为羟丙基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精的加入量按100毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入10克羟丙基-β-环糊精。

上述球磨时间为5h，球磨温度为20℃，过筛为200目；所述阿苯达唑原料混悬液中阿苯达唑的质量百分比为2％；高速剪切的转速为24000r/min，剪切时间为10min，剪切温度为20℃；高压均质的温度为20℃，高压均质的压力和循环次数为15000Psi 5次和25000Psi15次。

上述常压干燥温度为80℃，干燥时间为48h；减压干燥温度为80℃，干燥时间为48h；喷雾干燥的进风口温度为180℃，喷雾气流速度为5000ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为2.0％，进样速度为20ml/min；冷冻干燥的预冻温度为-47℃，预冻时间为4h，冷冻干燥的时间为32h。

本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种阿苯达唑纳米微粉的制备方法，按下述步骤进行：第一步，将阿苯达唑原料经过球磨后过筛得到阿苯达唑球磨原料；第二步，将阿苯达唑球磨原料与含有适量分散剂的水溶液混合后得到阿苯达唑原料混悬液；第三步，将阿苯达唑原料混悬液经过高速剪切后得到阿苯达唑初混悬液；第四步，将阿苯达唑初混悬液经过高压均质后得到阿苯达唑纳米混悬液；第五步，将阿苯达唑纳米混悬液中加入所需量的干燥保护剂，再经过干燥后得到阿苯达唑纳米微粉。

下面是对上述发明技术方案之二的进一步优化或/和改进：

上述阿苯达唑原料与分散剂的质量比为1:2至4:1，所述分散剂为吐温80、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇1000天然维生素E琥珀酸酯、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、40聚氧乙烯氢化蓖麻油中的一种；干燥保护剂的加入量按100毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入5克至20克干燥保护剂，所述干燥保护剂为麦芽糊精、甘露醇、肌醇、山梨醇、木糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇、丙氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、乳糖、蔗糖、果糖、菊糖、海藻糖、麦芽糖、羟丙基-β-环糊精中的一种。

上述球磨时间为4h至12h，球磨温度为小于30℃，过筛为200目至300目；所述阿苯达唑原料混悬液中阿苯达唑的质量百分比为0.5％至2％；高速剪切的转速为3500r/min至24000r/min，剪切时间为5min至20min，剪切温度为0℃至60℃；高压均质的温度为0℃至60℃，高压均质的压力为10000Psi至30000Psi，高压均质循环次数为5次至35次；所述干燥为常压干燥、减压干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。

上述常压干燥温度为60℃至100℃，干燥时间为12h至72h；减压干燥温度为60℃至100℃，干燥时间为12h至72h；喷雾干燥的进风口温度为140℃至200℃，喷雾气流速度为2000ml/h至5000ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为0.5％至2.0％，进样速度为10ml/min至50ml/min；冷冻干燥的预冻温度为-18℃至-80℃，预冻时间为2h至6h，冷冻干燥的时间为24h至72h。

上述分散剂为吐温80或泊洛沙姆407，阿苯达唑球磨原料与吐温80的质量比为2:1，阿苯达唑球磨原料与泊洛沙姆407的质量比为1:1；所述干燥保护剂为羟丙基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精的加入量按100毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入10克羟丙基-β-环糊精。

上述球磨时间为5h，球磨温度为20℃，过筛为200目；所述阿苯达唑原料混悬液中阿苯达唑的质量百分比为2％；高速剪切的转速为24000r/min，剪切时间为10min，剪切温度为20℃；高压均质的温度为20℃，高压均质的压力和循环次数为15000Psi 5次和25000Psi15次。

上述常压干燥温度为80℃，干燥时间为48h；减压干燥温度为80℃，干燥时间为48h；喷雾干燥的进风口温度为180℃，喷雾气流速度为5000ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为2.0％，进样速度为20ml/min；冷冻干燥的预冻温度为-47℃，预冻时间为4h，冷冻干燥的时间为32h。

本发明采用球磨、高速剪切、高压均质联合喷雾干燥技术制备阿苯达唑纳米微粉的工艺稳定可行，重复性好，所制备的阿苯达唑纳米微粉外观、流动性和水化后再分散性良好；并且，相比于阿苯达唑原料，本发明的阿苯达唑纳米微粉的溶解性和吸收性显著提高，即本发明的阿苯达唑纳米微粉更适于制成口服制剂，可以被胃肠道吸收，生物利用度更高，并且阿苯达唑纳米微粉具有更好的抗包虫药效，为阿苯达唑纳米微粒制剂的后期研究与发展奠定了一定的基础。

附图说明

附图1为本发明阿苯达唑纳米微粉的吸湿曲线(n＝3)。

附图2为阿苯达唑原料的透射电镜图(30000×)。

附图3为阿苯达唑原料与吐温80(Tween-80)混合物透射电镜图(35000×)。

附图4为以吐温80(Tween-80)为分散剂的本发明阿苯达唑纳米微粉透射电镜图(35000×)。

附图5为阿苯达唑原料与泊洛沙姆407(F-127)混合物透射电镜图(35000×)。

附图6为以泊洛沙姆407(F-127)为分散剂的本发明阿苯达唑纳米微粉透射电镜图(35000×)。

附图7-A为阿苯达唑原料粒径分布图。

附图7-B为以泊洛沙姆407(F-127)为分散剂的本发明阿苯达唑纳米微粉粒径分布图。

附图7-C为以吐温80(Tween-80)为分散剂的本发明阿苯达唑纳米微粉粒径分布图。

附图8为溴化钾空白红外光谱图。

附图9为阿苯达唑原料红外光谱图。

附图10为泊洛沙姆407(F-127)与羟丙基-β-环糊精混合物红外光谱图。

附图11为阿苯达唑原料和泊洛沙姆407(F-127)与羟丙基-β-环糊精混合物红外光谱图。

附图12为以泊洛沙姆407(F-127)为分散剂的本发明阿苯达唑纳米微粉红外光谱图。

附图13为吐温80(Tween-80)与羟丙基-β-环糊精混合物红外光谱图。

附图14为阿苯达唑原料和吐温80(Tween-80)与羟丙基-β-环糊精混合物红外光谱图。

附图15为以吐温80(Tween-80)为分散剂的阿苯达唑纳米微粉红外光谱图。

附图16为本发明阿苯达唑纳米微粉的平衡溶解度曲线(n＝3)。

附图17为阿苯达唑原料和本发明阿苯达唑纳米微粉在人工胃液中的累积溶出速率曲线(n＝3)。

附图18为阿苯达唑原料和本发明阿苯达唑纳米微粉在人工肠液中的累积溶出速率曲线(n＝3)。

附图19为阿苯达唑原料和本发明阿苯达唑纳米微粉在水中的累积溶出速率曲线(n＝3)。

附图20为模型组的囊泡组织病理图(200×)。

附图21为阿苯达唑组的囊泡组织病理图(200×)。

附图22为本发明阿苯达唑纳米微粉组的囊泡组织病理图(200×)。

附图23为模型组的囊泡透射电镜图(10000×)。

附图24为阿苯达唑组的囊泡透射电镜图(10000×)。

附图25为本发明阿苯达唑纳米微粉组的囊泡透射电镜图(10000×)。

具体实施方式

本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。本发明中所提到各种化学试剂和化学用品如无特殊说明，均为现有技术中公知公用的化学试剂和化学用品；本发明中的百分数如没有特殊说明，均为质量百分数；本发明中的溶液若没有特殊说明，均为溶剂为水的水溶液，例如，盐酸溶液即为盐酸水溶液；本发明中的常温、室温一般指15℃到25℃的温度，一般定义为25℃。

下面结合实施例对本发明作进一步描述：

实施例1：该阿苯达唑纳米微粉，按下述制备方法得到：第一步，将阿苯达唑原料经过球磨后过筛得到阿苯达唑球磨原料；第二步，将阿苯达唑球磨原料与含有适量分散剂的水溶液混合后得到阿苯达唑原料混悬液；第三步，将阿苯达唑原料混悬液经过高速剪切后得到阿苯达唑初混悬液；第四步，将阿苯达唑初混悬液经过高压均质后得到阿苯达唑纳米混悬液；第五步，将阿苯达唑纳米混悬液中加入所需量的干燥保护剂，再经过干燥后得到阿苯达唑纳米微粉。

本实施例采用球磨、高速剪切、高压均质联合喷雾干燥技术制备阿苯达唑(ABZ)纳米微粉的工艺稳定可行，重复性好，所制备的阿苯达唑纳米微粉外观、流动性和水化后再分散性良好；并且，相比于阿苯达唑原料，本实施例得到的ABZ纳米微粉的溶解性和吸收性显著提高，即本实施例得到的ABZ纳米微粉更适于制成口服制剂，可以被胃肠道吸收，生物利用度更高，并且阿苯达唑纳米微粉具有更好的抗包虫药效，为阿苯达唑纳米微粒制剂的后期研究与发展奠定了一定的实验基础。

经过本方法得到的阿苯达唑纳米混悬液的平均粒径为272.36±7.56nm至336.52nm±8.36nm，且72h内稳定性良好。

经过本方法得到的阿苯达唑纳米微粉水化后平均粒径分别为359.92±0.94nm至362.43nm±3.98nm，其平均粒径符合《中国药典》“微粒制剂指导原则”所规定的纳米药物尺寸，且粒度分布均匀。

实施例2：作为上述实施例的优化，阿苯达唑原料与分散剂的质量比为1:2至4:1，所述分散剂为吐温80、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇1000天然维生素E琥珀酸酯、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、40聚氧乙烯氢化蓖麻油中的一种；干燥保护剂的加入量按100毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入5克至20克干燥保护剂，所述干燥保护剂为麦芽糊精、甘露醇、肌醇、山梨醇、木糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇、丙氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、乳糖、蔗糖、果糖、菊糖、海藻糖、麦芽糖、羟丙基-β-环糊精中的一种。

实施例3：作为上述实施例的优化，球磨时间为4h至12h，球磨温度为小于30℃，过筛为200目至300目；所述阿苯达唑原料混悬液中阿苯达唑的质量百分比为0.5％至2％；高速剪切的转速为3500r/min至24000r/min，剪切时间为5min至20min，剪切温度为0℃至60℃；高压均质的温度为0℃至60℃，高压均质的压力为10000Psi至30000Psi，高压均质循环次数为5次至35次；所述干燥为常压干燥、减压干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。

本实施例采用高能纳米球磨机对阿苯达唑原料进行球磨。

相对于其他干燥方式(冷冻干燥、常压干燥、减压干燥)，喷雾干燥工艺制备的ABZ纳米微粉收率高，流动性好，含水量低，水化后粒径较小，溶解度较大，成本较低，且工艺稳定可行，为阿苯达唑纳米固体剂型产品的开发奠定了基础。

均质压力大于30000Psi时，长时间工作会严重损耗均质机。

实施例4：作为上述实施例的优化，常压干燥温度为60℃至100℃，干燥时间为12h至72h；减压干燥温度为60℃至100℃，干燥时间为12h至72h；喷雾干燥的进风口温度为140℃至200℃，喷雾气流速度为2000ml/h至5000ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为0.5％至2.0％，进样速度为10ml/min至50ml/min；冷冻干燥的预冻温度为-18℃至-80℃，预冻时间为2h至6h，冷冻干燥的时间为24h至72h。

阿苯达唑纳米混悬液进样浓度为2％时，微粉收率最高，ABZ纳米微粉水化后平均粒径最小，ABZ回收率相对较高，48h水中溶解度最大，流动性好(休止角<30°)。

当阿苯达唑纳米混悬液进样浓度大于2％时，会发生堵塞高压均质机的现象。

实施例5：作为上述实施例的优化，分散剂为吐温80或泊洛沙姆407，阿苯达唑球磨原料与吐温80的质量比为2:1，阿苯达唑球磨原料与泊洛沙姆407的质量比为1:1；所述干燥保护剂为羟丙基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精的加入量按100毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入10克羟丙基-β-环糊精。

由于阿苯达唑原料药难溶于水，制成纳米混悬液属于胶体分散体系，其是一种热力学不稳定而动力学稳定的体系，具有巨大的表面积，易聚集，因此加入稳定作用的分散剂对于获得物理稳定的纳米混悬剂至关重要，分散剂必须能润湿药物晶体表面，提供空间或电荷屏障，通过产生立体位阻和形成静电斥力抑制结晶成长并避免Ostwald陈化效应，协助分散且防止团聚，而本实施例所述的吐温80和泊洛沙姆407恰好能够使阿苯达唑纳米混悬液胶体体系更加稳定。

并且，相对于其它分散剂(十二烷基硫酸钠、聚乙二醇1000天然维生素E琥珀酸酯、泊洛沙姆188、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油等)，吐温80和泊洛沙姆407能够使本实施例得到的ABZ纳米微粉的平均粒径更小、粒度分布更加均匀及水中溶解度最大。

本实施例所述的吐温80和泊洛沙姆407加入量，能够使水化后的ABZ纳米微粉的平均粒径最小，粒度分布最均匀，48h水中溶解度最大。

相对于甘露醇、山梨醇、木糖醇、肌醇、乳糖醇、麦芽糖醇、乳糖、蔗糖、果糖、菊糖、海藻糖、麦芽糖、丙氨酸、甘氨酸和L-组氨酸等，羟丙基-β-环糊精和麦芽糊精使制得的ABZ纳米微粉的流动性最好(休止角<30°)，ABZ纳米微粉水化后平均粒径相对最小，48h水中溶解度相对最高，回收率也相对最高。

实施例6：作为上述实施例的优化，球磨时间为5h，球磨温度为20℃，过筛为200目；所述阿苯达唑原料混悬液中阿苯达唑的质量百分比为2％；高速剪切的转速为24000r/min，剪切时间为10min，剪切温度为20℃；高压均质的温度为20℃，高压均质的压力和循环次数为15000Psi 5次和25000Psi 15次。

采用本实施例6所述的转速和温度，能够使制得的阿苯达唑初混悬液的平均粒径最小，当剪切温度过高时，平均粒径变大甚至会发生团聚现象。

实施例7：作为上述实施例的优化，常压干燥温度为80℃，干燥时间为48h；减压干燥温度为80℃，干燥时间为48h；喷雾干燥的进风口温度为180℃，喷雾气流速度为5000ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为2.0％，进样速度为20ml/min；冷冻干燥的预冻温度为-47℃，预冻时间为4h，冷冻干燥的时间为32h。

1本发明上述实施例得到的ABZ纳米微粉的质量评价

1.1ABZ纳米微粉的制备 分别按照本发明上述实施例制备ABZ纳米微粉。

1.2外观评价 经喷雾干燥后得以吐温80(Tween-80)为分散剂的ABZ纳米微粉为白色细粉状，且粉末均匀，放置一周后有少许粉末发生团聚现象；以泊洛沙姆407(F-127)为分散剂的ABZ纳米微粉为白色细粉状，且粉末均匀，放置一周后无团聚现象。

1.3流动性 采用固定漏斗法分别测定阿苯达唑纳米微粉的休止角。将漏斗固定于水平放置的绘图纸的上方，漏斗下口距绘图纸的高度为h，小心将粉末倒入漏斗中，一直到漏斗下方形成的圆锥体尖端接触到漏斗下口为止，圆锥体的底面半径为r,tgα＝h/r。其中α为休止角。经喷雾干燥后得以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉的休止角为26.79±3.17；以F127为分散剂的ABZ纳米微粉的休止角为25.51±1.32；两者的休止角均<30°，表明其流动性良好。

1.4吸湿性 将底部盛有氯化钠过饱和溶液的玻璃干燥器在室温内放置72h，使其达到平衡，此时干燥器内的相对湿度约为75％。在已干燥恒重的的称量瓶底部放入约1g的样品(本发明的ABZ纳米微粉)(n＝3)，精密称定后，轻摇使其分布均匀，置于盛有氯化钠过饱和溶液的干燥器内(称量瓶盖揭开)，分别于4、8、12、24、48、72h定时称重，分别计算不同时间的吸湿百分率(％)。结果见图1。

吸湿百分率(％)＝(吸湿后样品重量(g)-吸湿前样品重量(g))/吸湿前样品重量(g)×100％

图1结果显示，以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉的吸湿性较大，相对易吸湿；而以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉的吸湿性较小，相对不易吸湿。

1.5水化后再分散性取0.1gABZ纳米微粉样品(本发明的ABZ纳米微粉)，加蒸馏水1mL，轻轻振摇，以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉和以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉30s内分散为均匀的乳白色纳米阿苯达唑混悬液，表明两种样品分散性良好。

1.6水化后表面形态观察 分别取ABZ原料、ABZ原料与Tween-80的混合物、以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉、ABZ原料与F-127的混合物、及以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉适量，分别加蒸馏水，轻轻振摇，使分散均匀，稀释后滴加在铜网上，2.0％磷钨酸钠溶液(pH4.47)负染，在透射电镜下观察粒径大小和形态。结果见图2到6。

图2到6结果显示，阿苯达唑原料的颗粒粒径大且团聚在一起，分别加入Tween-80和F-127两种分散剂后，粉末颗粒明显分散，但粒径仍很大，经过纳米微粉制备工艺获得的以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉水化后的平均粒径不但均明显变小了，而且颗粒与颗粒之间高度均匀分散。

1.7微粉水化后阿苯达唑粒径和粒度分布 分别称取0.1gABZ原料和ABZ纳米微粉，加1mL蒸馏水，超声10min，取10μL混悬液加1mL蒸馏水涡旋30s，混合均匀后于马尔文激光粒度仪进行测定。阿苯达唑原料平均粒径1752.22±11.5nm，PDI值为0.92±0.04，以F-127为分散剂的纳米微粉平均粒径为362.43±3.98nm，PDI值为0.170±0.01，以Tween-80为分散剂的纳米微粉平均粒径为359.92±0.94nm，PDI值为0.129±0.03。表明加入两种分散剂的ABZ纳米微粉水化后的平均粒径均符合《中国药典》“微粒制剂指导原则”所规定的纳米药物尺寸，且粒度分布均匀。结果见图7-A、7-B、7-C。

1.8 ABZ纳米微粉结晶的确证

红外光谱法 分别取阿苯达唑原料，分散剂与羟丙基-β-环糊精混合物，ABZ原料和分散剂与羟丙基-β-环糊精混合物以及加入2种分散剂(Tween-80和F-127)的ABZ纳米微粉，分别对7种样品进行红外光谱扫描。结果见图8到15。

图8到图15结果显示，阿苯达唑原料与辅料混合物、原料加辅料混合物以及ABZ纳米微粉的峰型均不一致；以F-127为分散剂和以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉与辅料混合物及原料加辅料混合物的峰型均相似，但是以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉在1000-1200cm-1、1250-1500cm-1、1750-2500cm-1波长范围内的小峰与ABZ原料和F127与羟丙基-β-环糊精混合物有所差异。以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉在1000-1250cm-1、1750-2500cm-1波长范围内的小峰与ABZ原料和F127与羟丙基-β-环糊精混合物有所差异。

2 ABZ纳米微粉的溶解性和吸收性评价

本研究通过对比纳米微粉和原料药的平衡溶解度、脂水分配系数、体外溶出度及体外肠吸收实验考察纳米阿苯达唑的溶解性和吸收性。

2.1实验动物

雄性SD大鼠24只，体重180-220g，SPF级，新疆医科大学动物实验中心提供，饲养环境：光照12h/d、温度21±2℃、湿度40-45％，生产许可证：SCXK(新)2011-0004，动物使用许可证：SYXK(新)2011-0001。

2.2方法与结果

2.2.1溶液的配制

2.2.1.1 ABZ对照品贮备液 精密称取ABZ对照品10mg置于10mL量瓶中，加入冰醋酸5mL溶解，用无水乙醇稀释至刻度，得1mg/mL对照品贮备液。临用时用无水乙醇稀释至4-16μg/mL范围，以制备紫外分光光度法的ABZ标准曲线。

2.2.1.2不同pH溶液 按2015年版《中国药典》四部“8004缓冲液”方法配制pH1.2的盐酸溶液，pH分别为2.0、2.5、5.0、5.8、6.5、6.8、7.0、7.8的磷酸盐缓冲液(PBS)。

2.2.1.3人工胃液和人工肠液人工胃液：取浓度为1mol/mL的稀盐酸，加水稀释，将pH调至1.5，每100mL液体中加入1g胃蛋白酶，混匀，用0.2um的无菌滤头过滤待用。人工肠液：取KH2PO46.8g加水500mL溶解，用0.4％(w/w)的NaOH回调pH至6.8。每100mL液体中加入1g胰蛋白酶，混匀，用0.2um的无菌滤头过滤待用。

2.2.1.4 Krebs-Ringer缓冲液(K-R缓冲液)精密称取NaCl 6.66g，KCl 0.37g，MgCl2 0.22g，Na2HPO4 0.59g，NaH2PO4 0.047g，葡萄糖1.98g，NaHCO3 2.1g，CaCl2 0.14g，加超纯水至1000mL，充分溶解后抽滤，并用盐酸调至pH7.4。

2.2.2溶液中ABZ含量测定方法

参考2015年版《中国药典》二部阿苯达唑片[含量测定]项下方法，精密量取待测液1mL，置10mL量瓶中，加入冰醋酸500μL，振摇，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，再用无水乙醇进一步稀释至标准曲线线性范围内(4-16μg/mL)，制备供试品溶液，采用紫外分光光度法测定295nm波长处测定吸光度A，把A代入标准曲线计算供试品中ABZ浓度(μg/mL)，再根据稀释倍数计算各溶液中ABZ的含量(μg/mL)。经系统适用性考察，不含ABZ的ABZ纳米微粉阴性溶液、不同pH溶液、正辛醇溶液、人工胃液、人工肠液及K-R缓冲液均在295nm处无紫外吸收，且经方法学考察，精密度和回收率均符合2015年版《中国药典》相关规定，ABZ质量浓度在4-16μg/mL范围内与吸收度呈良好线性关系(r＝0.9998)。供试品在24h内稳定，满足供试品测定所需放置时间。

2.2.3 ABZ纳米微粉平衡溶解度和油水分配系数的测定

2.2.3.1阿苯达唑原料粉末和ABZ纳米微粉平衡溶解度的对比研究

(1)ABZ纳米微粉的水中平衡溶解度曲线的测定称取过量的本发明ABZ纳米微粉粉末300mg置于100mL锥形瓶中，加入20mL蒸馏水，密封后放入空气恒温振荡器中，温度保持在(37±1)℃，分别于振摇12、24、36、48、50、72h，取上清液10000r/min离心10min后，吸取上层饱和溶液，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液作为待测液，按3.2.2项下测定溶液中ABZ含量，计算ABZ溶解度(μg/mL)。以时间(h)为横坐标，以ABZ溶解度(μg/mL)为纵坐标作图，分别获得以F-127为分散剂和以吐温80为分散剂的ABZ纳米微粉的平衡溶解度曲线。结果见表图16。

图16结果显示，两种分散剂的ABZ纳米微粉溶解度均在48h达平衡，即以48h时的平衡溶解度为指标来对比研究阿苯达唑原料粉末和ABZ纳米微粉平衡溶解度。

(2)平衡溶解度的测定分别测定在蒸馏水中，pH1.2的盐酸溶液和不同pH磷酸缓冲液中的平衡溶解度，pH值包括(2.0、2.5、5.0、5.8、6.5、6.8、7.0、7.8)。分别称取过量的阿苯达唑原料(n＝3)粉末300mg和ABZ纳米微粉(n＝3)粉末300mg置于100mL锥形瓶中，加入20mL水及不同pH的溶解介质，密封后放入空气恒温振荡器中，温度保持在(37±1)℃，共振摇待溶解平衡后，取上清液10000r/min离心，吸取上层的饱和清液，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，桉3.2.2项下测定溶液中ABZ含量，计算ABZ溶解度(μg/mL)。结果见表1。

从表1结果可以看出，ABZ作为水难溶性弱酸和弱碱两性化合物，在pH＝1.2-6.8偏酸性环境中，2种分散剂阿苯达唑纳米微粉溶解度依次下降，但较ABZ原料溶解度增大率却依次上升；在pH＝7.0-7.8偏碱性溶液中，2种分散剂阿苯达唑纳米微粉溶解度依次略微上升，较ABZ原料溶解度增大率依旧保持大幅上升。

2.2.3.2 ABZ原料粉末和ABZ纳米微粉油水分配系数的对比研究称取ABZ纳米微粉适量，溶于水溶液、pH＝1.2盐酸溶液、pH＝2.0、5.0、5.8、6.4、7.0、7.8的磷酸盐缓冲溶液饱和的正辛醇中，取该样品溶液5mL置于具塞锥形瓶中，再分别加入正辛醇饱和水溶液、pH＝1.2盐酸溶液、pH 2.0、5.0、5.8、6.4、7.0、7.8的磷酸盐缓冲液各50mL，放入空气振荡器中，温度保持(37±1)℃振摇48h，分别取上、下层(油、水相)，10000r/min离心15min，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液按3.2.2项下测定溶液中ABZ浓度，计算油相及水相中ABZ的质量浓度，分别记做Co，Cw；按公式计算表观脂水分配系数：Papp＝Co/Cw，lgP＝lg Co/Cw。其中，Co为药物分配平衡时，ABZ在正辛醇中的浓度，Cw为ABZ在水溶液，pH＝1.2盐酸溶液，pH＝2.0、5.0、5.8、6.4、7.0、7.8的磷酸盐缓冲溶液中的浓度。见表2-1和表2-2。

表2-1和表2-2考察2种分散剂ABZ纳米微粉在水和不同pH缓冲体系中的lgP值变化趋势，结果表明，无论是在正辛醇层，还是在水层或不同PH缓冲液中，2种分散剂的ABZ纳米微粉的ABZ质量浓度均大于ABZ原料的质量浓度，同时ABZ纳米微粉的lgP值与ABZ原料相比略有下降。

2.2.4阿苯达唑原料粉末和ABZ纳米微粉体外溶出速率对比研究

溶出试验采用中国药典(2015版)的桨法进行。操作如下：分别精密称取阿苯达唑原料0.02g、以F127为分散剂的ABZ纳米微粉0.14g(相当于含20mg阿苯达唑)和以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉0.13g(相当于含20mg阿苯达唑)，分别制成2mg/mL的ABZ水混悬液备用。把洗净的透析袋剪成适当长度，封住一端，取水化后样品，置透析袋中，封住另一端，置溶出度测定仪的溶出杯中，浆法，温度37℃，转速100rpm，分别以新鲜脱气的纯化水、人工胃液、人工肠液为释放介质，自药物开始接触介质计时，于2，5，10，20，30，40，50，60，75，90，105，120、150、180min设定时间点从溶出介质中取样，并迅速补充空白溶出介质，取出的样品过0.22μm膜，取续滤液lmL，按2.2.2项下测定溶液中ABZ浓度，通过溶出杯加样体积900mL，计算每个时间ABZ累积溶出量(μg)，与加入到透析袋中ABZ量(μg)的比值即为累积溶出速率(％)。以时间(h)为横坐标，以累积溶出速率(％)为纵坐标绘制ABZ累积溶出速率曲线，结果见图17到图19。

图17到图19的体外溶出速率测定表明，微粉纳米化可明显提高ABZ的溶出速率，在人工胃液中，以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉3h累积溶出速率高达80％，以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉3h累积溶出速率高达67％，ABZ原料3h累积溶出速率仅为45％，以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉在人工胃液中3h溶出速率是ABZ原料的2倍，以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉在人工胃液中3h累积溶出速率是ABZ原料的1.5倍；在人工肠液中，以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉3h累积溶出速率为34.77％，以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉3h累积溶出速率为31.94％，ABZ原料3h累积溶出速率仅为26.50％，以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉在人工肠液中溶出速率是ABZ原料的1.3倍，以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉在人工肠液中溶出速率是ABZ原料的1.2倍；在水中，以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉3h累积溶出速率为31.96％，以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉3h累积溶出速率为28.31％，ABZ原料3h累积溶出速率仅为21.85％，以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉在水中溶出速率是ABZ原料的1.5倍，以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉在水中溶出速率是ABZ原料的1.3倍；且根据结果可以看出，以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉和以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉及ABZ原料均在人工胃液中的累积溶出速率最高，说明溶出部位主要在胃部；且在每个溶出介质中，溶出速率由大到小排列为：以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉>以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉>ABZ原料，说明以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉的溶出速度最快。

2.2.5阿苯达唑原料粉末和ABZ纳米微粉体外小肠吸收性试验对比研究

2.2.5.1溶液的制备

(1)阿苯达唑原料混悬液的制备取阿苯达唑原料200mg置10mL容量瓶中，用蒸馏水溶解定容至刻度，得阿苯达唑原料混悬液。

(2)纳米阿苯达唑(以F-127为分散剂)混悬液的制备分别取ABZ纳米微粉(以F-127为分散剂)2.8g、1.4g、0.7g(相当于含ABZ 400mg、200mg、100mg)置10mL容量瓶中，用蒸馏水溶解定容至刻度，得40mg/mL、20mg/mL、10mg/mL纳米阿苯达唑(以F-127为分散剂)混悬液。

(3)纳米阿苯达唑(以Tween-80为分散剂)混悬液的制备分别取ABZ纳米微粉(以Tween-80为分散剂)2.6g、1.3g、0.65g相当于含ABZ 400mg、200mg、100mg)置10mL容量瓶中，用蒸馏水溶解定容至刻度，得40mg/mL、20mg/mL、10mg/mL纳米阿苯达唑(以Tween-80为分散剂)混悬液。

2.2.5.2体外Ussing Chamber实验测定

(1)Ussing Chamber肠黏膜组织的制备雄性SD大鼠24只，体重为(200±20)g，禁食16～18h，10％水合氯醛(ip，2.5mL/kg)麻醉，依次分离十二指肠、空肠、回肠和结肠段置于K-R缓冲液中，37℃水浴保温。分别剪2～3cm长的4个肠段，剖开，平铺于样本夹并固定于扩散池上，有效渗透面积为0.5cm2。在扩散池两室中加入3mL新鲜K-R缓冲液，37℃恒温维持肠黏膜的生物活性，进行预孵育5min，以使肠黏膜达稳态。

(2)大鼠肠渗透性测定参照文献(马雪红.大蒜辣素与血液中蛋白相互作用及在大鼠的肠吸收特性研究[D].新疆医科大学:新疆医科大学,2016)进行。实验过程中，各室均持续通入混合气体以保持肠黏膜活性。肠黏膜预孵育5min后，分别在黏膜侧加入3mLABZ原料和2种ABZ纳米混悬液溶液，浆膜侧加入3mLK-R缓冲液。分别于60、75、90、105、120min于浆膜侧取样1mL，同时补充1mL已预热的K-R缓冲液，维持漏槽条件。取出的样品0.22μm滤膜过滤，取续滤液测定溶液中ABZ浓度。数据处理后，得到各时间点浆膜侧ABZ原料混悬液和2种ABZ纳米微粉混悬液浓度Cn。分别计算药物累积吸收量(Q)、吸收速率常数(K a)和表观渗透系数(Papp)，结果列入表3到6。

吸收速率常数Ka(absorption rate constant)是表示药物吸收快慢的物理量，用于评价药物在体内起效的速度及被利用的快慢程度。Ka越大，过程进行的越快。将药物累积吸收量Q对时间t作相关回归分析，得出斜率(L)与有效渗透面积(A)的比得出吸收速率常数(Ka，μg·s-1·cm-2)和相关系数r。

表3到6结果显示，大鼠各肠段的吸收速率常数Ka随阿苯达唑质量浓度的增加而增加。以阿苯达唑的累积吸收量对时间做相关回归分析，发现阿苯达唑在不同肠段的吸收均为线性吸收，其回归相关系数r均达到0.96以上，符合零级吸收。在相同ABZ质量浓度下以F-127为分散剂的纳米微粉在十二指肠的吸收速率常数Ka在比原料药的高出2.05倍左右，在空肠的吸收速率常数Ka比原料药的高出2.00倍左右，在回肠的吸收速率常数Ka比原料药的高出2.17倍左右，在结肠的吸收速率常数Ka比原料药的高出2.33倍左右；以Tween-80为分散剂的纳米微粉在十二指肠的吸收速率常数Ka在比原料药的高出1.97倍左右，在空肠的吸收速率常数Ka比原料药的高出1.85倍左右，在回肠的吸收速率常数Ka比原料药的高出2.10倍左右，在结肠的吸收速率常数Ka比原料药的高出2.15倍左右；以F-127为分散剂的纳米微粉在整个肠段的吸收速率比以Tween-80为分散剂的纳米微粉的吸收速率略高。阿苯达唑在大鼠不同肠段的表观渗透系数Papp经统计软件SPSS17.0统计分析，同一浓度不同肠段的Papp存在统计学差异(P<0.05)，其中空肠的Papp值最大，且在同一浓度水平下，不同肠段的Papp由大到小排列为空肠>回肠>十二指肠>结肠，提示阿苯达唑在空肠段吸收较好。

3、阿苯达唑纳米微粉的体内抗包虫药效学实验

3.1细粒棘球蚴囊泡的制备

制备细粒棘球蚴(方法同体外细粒棘球蚴的制备)，取活力大于95％的细粒棘球蚴于培养液中培养，培养2个月至3个月后形成直径为2mm至3mm的细粒棘球蚴囊泡。培养条件为37℃、5％CO2的培养箱，根据培养液的颜色，每隔5天至7天更换培养液1次。

3.2囊型包虫病小鼠动物模型的建立

无菌条件下挑选2mm至3mm大小均一的细粒棘球蚴囊泡，腹腔注射接种于6周至8周龄、体重为20g至25g的昆明白小鼠体内，于感染3个月至4个月左右进行B超检测，直径超过0.5cm的细粒棘球蚴囊泡的昆明白小鼠为造模成功。

3.3实验分组

将造模成功的包虫小鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性药物组(阿苯达唑片(治疗囊性包虫病的临床首选))、药物干预组(阿苯达唑纳米微粉组)，每组12只。

3.4药物干预

空白对照组和模型组注射灭菌生理盐水；阳性药物组给药阿苯达唑片，给药剂量为50mg/kg；药物干预组给药阿苯达唑纳米微粉组，给药剂量为600mg/kg(其中含阿苯达唑50mg/kg)，每组12只，口服灌胃给药，每天1次，给药30天。

3.5药物配制方法：(同一组动物根据体重按同浓度不同药量给予)

阳性药物组：精密称取150mg阿苯达唑，置于已灭菌的研钵中，用吐温-80致使药物完全润湿，在研钵中进行研磨，然后慢慢加入0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液30mL并混匀，即为50mg/kg(5mg/mL)剂量。

药物干预组：

阿苯达唑纳米微粉组：精密称取600mg阿苯达唑纳米微粉，置于已灭菌的离心管中，然后加入蒸馏水10mL并混匀，即为600mg/kg其中含阿苯达唑50mg/kg(60mg/mL)剂量。

空白对照组：生理盐水。

模型组：生理盐水。

3.6去氢骆驼蓬碱衍生物囊湿重及抑囊率结果

给药结束后处死小鼠，收集每只小鼠的细粒棘球蚴囊泡，称重，统计囊湿重并计算抑囊率。抑囊率＝(模型组细粒棘球蚴囊湿重-用药组细粒棘球蚴囊湿重)/模型组细粒棘球蚴囊湿重×100％。各实验组的囊湿重及抑囊率结果见表7。在表7中，*与模型组相比较，P<0.05；#与ABZ组相比较，P<0.05。

对给药干预的小鼠进行剖检，剖检小鼠后大体观察发现，模型组小鼠体内的囊泡数目较多、直径较大，囊泡呈透明状且囊液清亮；给药组小鼠体内的囊泡大多呈半透明状或质地比较硬的钙化结节且囊液呈乳黄色；表7中，与模型组(＝15.86g±5.80)相比较，各给药组平均囊湿重均显著下降，差异均具有统计学意义(P<0.05)；与阳性组相比，阿苯达唑纳米微粉的囊湿重有显著差异(P<0.05)。囊湿重结果显示：阿苯达唑纳米微粉具有更好的体内抗包虫效果，其抑囊率达78.69％，大于阿苯达唑(其抑囊率为56.75％)。

3.7组织病理学

取出囊泡置于生理盐水中清洗后用滤纸吸干，然后进行切割整理，取适量组织置于4％多聚甲醛中固定，包埋、切片、HE染色，进行病理组织学检查。组织病理结果如下：

3.7.1囊泡组织病理结果

囊泡组织病理结果显示：模型组细粒棘球蚴囊泡生发层结构及轮廓清晰，内壁平整，无坏死灶及钙化灶，无异物肉芽肿，外层可见角质层细胞较多，具有吸收营养物质及保护生发层作用(如附图20所示)；阿苯达唑组、阿苯达唑纳米微粉组的生发层结构被不同程度的破坏；外层角质层细胞不同程度减少；生发层均不同程度产生钙化灶、空泡样变化及色素沉着(如附图21至22所示)。

组织病理学结果中，阿苯达唑纳米微粉显示出优于阿苯达唑的抗包虫药效。

3.8囊泡透射电镜

透射电镜下观察囊泡超微结构结果显示：模型组细粒棘球蚴囊泡生发层结构清晰，微毛整齐且数量较多，皮层细胞核大而圆，核仁清晰，核膜边界有少许异染色质，角质层结构均匀，板层结构清晰(如附图23所示)；阿苯达唑组、阿苯达唑纳米微粉组的角质层、生化层及板层结构不同程度的破坏；微毛不同程度减少；皮层细胞核仁不同程度的消失(如附图24至25所示)。

透射电镜下观察囊泡超微结构结果表明阿苯达唑纳米微粉具有较好的抗包虫药效。

4小结

(1)ABZ纳米混悬液的质量评价为：以F-127为分散剂的ABZ纳米混悬液的平均粒径为336.52±1.5nm，PDI值为0.211±0.062，以Tween-80为分散剂的ABZ纳米混悬液平均粒径为272.36±3.6nm，PDI值为0.253±0.035；且加入两种分散剂的ABZ纳米混悬液放置72h内稳定性好。

(2)ABZ纳米微粉的质量评价结果为：分别以Tween-80和F-127为分散剂的2种ABZ纳米微粉的外观、流动性和水化后再分散性均良好，水化后平均粒径符合纳米尺寸且粒度分布均匀。但以Tween-80为分散剂的ABZ纳米微粉的吸湿性大于以F-127为分散剂的ABZ纳米微粉的吸湿性。此外，经红外光谱检测2种分散剂的ABZ纳米微粉与ABZ原料，分散剂与羟丙基-β-环糊精组成的混合物的峰形均有差异。

(3)ABZ纳米微粉在48h的溶解度达到平衡，其在水中和pH1.2-7.8不同pH的介质中平衡溶解度均大于ABZ原料。

(4)无论是在正辛醇层，还是在水层或不同PH介质中，ABZ纳米微粉的ABZ质量浓度均大于ABZ原料的质量浓度，同时ABZ纳米微粉的lgP值与ABZ原料相比略有下降。

(5)与ABZ原料相比，ABZ纳米微粉在人工胃液、人工肠液和水中的累积溶出速率均有所提高。

(6)与ABZ原料相比，ABZ纳米微粉的吸收速率常数Ka和表观渗透系数Papp均有所提高。

(7)与ABZ原料相比，阿苯达唑纳米微粉具有更好的抗包虫药效。

综上所述，本发明采用球磨、高速剪切、高压均质联合喷雾干燥技术制备阿苯达唑纳米微粉的工艺稳定可行，重复性好，所制备的阿苯达唑纳米微粉外观、流动性和水化后再分散性良好；并且，相比于阿苯达唑原料，本发明的ABZ纳米微粉的溶解性和吸收性显著提高，即本发明的ABZ纳米微粉更适于制成口服制剂，可以被胃肠道吸收，生物利用度更高，并且阿苯达唑纳米微粉具有更好的抗包虫药效，为阿苯达唑纳米微粒制剂的后期研究与发展奠定了一定的基础。

以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。

表1阿苯达唑纳米微粉在水和不同PH溶液中的平衡溶解度(n＝3)

表2-1阿苯达唑纳米微粉的表观脂水分配系数(n＝3)

表2-2阿苯达唑纳米微粉的表观脂水分配系数(n＝3)

表3以F-127为分散剂的阿苯达唑在大鼠各肠段的吸收速率常数Ka和相关系数r(

n＝3)

表4以F-127为分散剂的阿苯达唑在大鼠各肠段表观渗透系数Papp(cm·s^-1，

n＝3)

表5以Tween-80为分散剂的阿苯达唑在大鼠各肠段的吸收速率常数Ka和相关系数r(

n＝3)

表6以Tween-80为分散剂的阿苯达唑在大鼠各肠段表观渗透系数Papp(cm·s^-1，

n＝3)

表7囊湿重及抑囊率(

n＝12)

组别	剂量(mg/kg)	囊湿重(g)	抑囊率(％)
				模型组	--	15.86±5.80	--
阿苯达唑组	50.00	6.86±3.38*	56.75
				阿苯达唑纳米微粉组	600mg/kg	3.38±2.70*<sup>#</sup>	78.69

Claims (11)

1.一种阿苯达唑纳米微粉，其特征在于阿苯达唑纳米微粉按下述方法得到：第一步，将阿苯达唑原料经过球磨后过筛得到阿苯达唑球磨原料；第二步，将阿苯达唑球磨原料与含有适量分散剂的水溶液混合后得到阿苯达唑原料混悬液；第三步，将阿苯达唑原料混悬液经过高速剪切后得到阿苯达唑初混悬液；第四步，将阿苯达唑初混悬液经过高压均质后得到阿苯达唑纳米混悬液；第五步，将阿苯达唑纳米混悬液中加入所需量的干燥保护剂，再经过干燥后得到阿苯达唑纳米微粉；其中，

阿苯达唑原料与分散剂的质量比为 1:2 至 4:1，所述分散剂为吐温 80、泊洛沙姆407、泊洛沙姆 188、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇 1000 天然维生素 E 琥珀酸酯、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、40 聚氧乙烯氢化蓖麻油中的一种；干燥保护剂的加入量按 100 毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入 5 克至 20 克干燥保护剂，所述干燥保护剂为麦芽糊精、甘露醇、肌醇、山梨醇、木糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇、丙氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、乳糖、蔗糖、果糖、菊糖、海藻糖、麦芽糖、羟丙基-β-环糊精中的一种。

2.根据权利要求 1 所述的阿苯达唑纳米微粉，其特征在于球磨时间为 4h 至 12h，球磨温度为小于 30℃，过筛为 200 目至 300 目；所述阿苯达唑原料混悬液中阿苯达唑的质量百分比为 0.5%至 2%；高速剪切的转速为 3500r/min 至 24000r/min，剪切时间为 5min至 20min，剪切温度为 0℃至 60℃；高压均质的温度为 0℃至 60℃，高压均质的压力为10000 Psi 至 30000 Psi，高压均质循环次数为 5 次至 35 次；所述干燥为常压干燥、减压干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。

3.根据权利要求 2 所述的阿苯达唑纳米微粉，其特征在于常压干燥温度为60℃至100 ℃，干燥时间为 12h 至 72h；或者，减压干燥温度为 60℃至 100℃，干燥时间为 12h至 72h；或者，喷雾干燥的进风口温度为 140℃至 200℃，喷雾气流速度为 2000 ml/h 至5000 ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为 0.5%至 2.0%，进样速度为 10 ml/min 至50 ml/min；或者，冷冻干燥的预冻温度为-18℃至-80℃，预冻时间为 2h 至 6h，冷冻干燥的时间为 24h 至 72h。

4.根据权利要求 2或3 所述的阿苯达唑纳米微粉，其特征在于分散剂为吐温 80 或泊洛沙姆 407，阿苯达唑球磨原料与吐温 80 的质量比为 2:1，阿苯达唑球磨原料与泊洛沙姆 407 的质量比为 1:1；所述干燥保护剂为羟丙基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精的加入量按 100 毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入 10 克羟丙基-β-环糊精。

5.根据权利要求 2或3 所述的阿苯达唑纳米微粉，其特征在于球磨时间为 5h，球磨温度为 20℃，过筛为 200 目；所述阿苯达唑原料混悬液中阿苯达唑的质量百分比为 2%；高速剪切的转速为 24000r/min，剪切时间为 10min，剪切温度为 20℃；高压均质的温度为20℃，高压均质的压力和循环次数为 15000 Psi 5 次和 25000 Psi 15 次。

6.根据权利要求 4 所述的阿苯达唑纳米微粉，其特征在于球磨时间为 5h，球磨温度为 20℃，过筛为 200 目；所述阿苯达唑原料混悬液中阿苯达唑的质量百分比为 2%；高速剪切的转速为 24000r/min，剪切时间为 10min，剪切温度为 20℃；高压均质的温度为 20℃，高压均质的压力和循环次数为 15000 Psi 5 次和 25000 Psi 15 次。

7.根据权利要求 2 或 3或 6 所述的阿苯达唑纳米微粉，其特征在于常压干燥温度为 80℃，干燥时间为 48h；减压干燥温度为 80℃，干燥时间为 48h；喷雾干燥的进风口温度为 180℃，喷雾气流速度为 5000 ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为 2.0%，进样速度为 20 ml/min；冷冻干燥的预冻温度为-47℃，预冻时间为 4h，冷冻干燥的时间为32h。

8.根据权利要求 4 所述的阿苯达唑纳米微粉，其特征在于常压干燥温度为 80℃，干燥时间为 48h；减压干燥温度为 80℃，干燥时间为 48h；喷雾干燥的进风口温度为 180℃，喷雾气流速度为 5000 ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为 2.0%，进样速度为 20ml/min；冷冻干燥的预冻温度为-47℃，预冻时间为 4h，冷冻干燥的时间为 32h。

9.根据权利要求 5 所述的阿苯达唑纳米微粉，其特征在于常压干燥温度为 80℃，干燥时间为 48h；减压干燥温度为 80℃，干燥时间为 48h；喷雾干燥的进风口温度为 180℃，喷雾气流速度为 5000 ml/h，阿苯达唑纳米混悬液的进样浓度为 2.0%，进样速度为 20ml/min；冷冻干燥的预冻温度为-47℃，预冻时间为 4h，冷冻干燥的时间为 32h。

10.一种根据权利要求2或3或5或9所述的阿苯达唑纳米微粉的制备方法，其特征在于按下述步骤进行：第一步，将阿苯达唑原料经过球磨后过筛得到阿苯达唑球磨原料；第二步，将阿苯达唑球磨原料与含有适量分散剂的水溶液混合后得到阿苯达唑原料混悬液；第三步，将阿苯达唑原料混悬液经过高速剪切后得到阿苯达唑初混悬液；第四步，将阿苯达唑初混悬液经过高压均质后得到阿苯达唑纳米混悬液；第五步，将阿苯达唑纳米混悬液中加入所需量的干燥保护剂，再经过干燥后得到阿苯达唑纳米微粉；其中，

阿苯达唑原料与分散剂的质量比为 1:2 至 4:1，所述分散剂为吐温 80、泊洛沙姆407、泊洛沙姆 188、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇 1000 天然维生素 E 琥珀酸酯、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、40 聚氧乙烯氢化蓖麻油中的一种；干燥保护剂的加入量按 100 毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入 5 克至 20 克干燥保护剂，所述干燥保护剂为麦芽糊精、甘露醇、肌醇、山梨醇、木糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇、丙氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、乳糖、蔗糖、果糖、菊糖、海藻糖、麦芽糖、羟丙基-β-环糊精中的一种。

11.根据权利要求 10 所述的阿苯达唑纳米微粉的制备方法，其特征在于分散剂为吐温 80 或泊洛沙姆 407，阿苯达唑球磨原料与吐温 80 的质量比为 2:1，阿苯达唑球磨原料与泊洛沙姆 407 的质量比为 1:1；所述干燥保护剂为羟丙基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精的加入量按 100 毫升阿苯达唑纳米混悬液中加入 10 克羟丙基-β-环糊精。

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