CN108371147A - 黑水虻虫菌复合制剂及其生产方法 - Google Patents

黑水虻虫菌复合制剂及其生产方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了黑水虻虫菌复合制剂及其生产方法,属于生物处理固体有机废弃物技术领域,按重量份数计,所述黑水虻虫菌复合制剂包括以下组分:3龄黑水虻幼虫1份,活性菌粉0.6‑1份,麸皮0.1‑0.5份,珍珠岩0‑0.3份,丙酸钙0.1‑0.3份,维生素C 0.1‑0.3份;所述活性菌粉是按如下方法制得的:步骤A:使用液体LB培养基将甲基营养型芽孢杆菌在37℃培养至对数生长期作为种子液使用;步骤B:按1%接种量将步骤A中所述的种子液接种到发酵罐中的液体发酵培养基中发酵,发酵24小时后进行活菌计数,得发酵液;步骤C:将步骤B中所述的发酵液与沸石粉按照1∶1‑5体积的比例混合均匀,然后在60℃下干燥,即得活性菌粉。本申请有助于黑水虻幼虫在处理废弃物方面的规模化应用与推广。

Description

黑水虻虫菌复合制剂及其生产方法
技术领域
本发明属于生物处理固体有机废弃物技术领域,具体涉及黑水虻虫菌复合制剂及其生产方法。
背景技术
黑水虻(Hermetiaillucens L.),是一种食腐性环保昆虫,在世界各地广泛分布。它属于完全变态发育昆虫,在30℃左右环境条件下,整个生命周期分为四个阶段:卵历期约3天、幼虫历期21天、蛹历期10天和成虫历期9天。其中,黑水虻幼虫能够以禽畜粪便、餐厨垃圾和动物尸体等农业有机废弃物为食,同时生产高价值的昆虫蛋白饲料,且易饲养管理、成本低,目前具有广泛应用价值。在使用黑水虻幼虫处理农业有机废弃物的过程中,主要利用黑水虻3龄幼虫到5龄幼虫阶段,黑水虻幼虫体重呈现指数型生长,在8-10天内即可消耗并转化大量的有机固体废弃物。
然而,黑水虻繁殖要求条件较高,技术具有一定的复杂性,主要表现在以下方面:黑水虻成虫寿命较短,其交配和产卵需要较高温度25-30℃,黑水虻卵的收集需要引诱和定位,黑水虻的交配需要特殊光源刺激等因素。目前,为降低繁育成本,获得大量种虫,行业内通常采用“南方繁育,北方育虫”的策略。此法充分利用我国南方地域的高温、高湿的气候资源优势和黑水虻虫卵孵化具有一定周期特点,在我国南方大量繁育黑水虻虫卵,通过快递运输的方式向全国各地有机废弃物处理基地输送,一般快递周期2-4天,基本可输送至全国各地。
然而,在笔者长期实践中发现,黑水虻虫卵长距离输送具有体积小、效率高和运输成本低等优势,但在运输过程中虫卵孵化率会受到很大影响。一方面,虫卵运输过程中的运输周期、环境温度、氧气含量变化和物理压迫等外界因素都影响卵的孵化效率;另一方面,虫卵自身也会由于成虫交配率或细菌感染等内在因素导致孵化率不稳定。另外,还存在一部分虫卵使用者孵化虫卵技术操作不当等原因,总之会严重影响废弃物处理效率和昆虫的规模化、连续化培养。
发明内容
针对上述黑水虻虫卵长距离运输严重影响废弃物处理效率和昆虫的规模化、连续化培养的缺陷,本发明的目的在于提供黑水虻虫菌复合制剂及其制备方法,本发明的技术方案实现了黑水虻虫菌复合制剂处理农业有机废弃物的标准化和稳定化、节约处理工艺和人力成本,有助于黑水虻幼虫在处理畜禽粪便、餐厨垃圾、动物尸体和废弃果蔬方面的规模化应用与推广。
本发明采用的技术方案如下:黑水虻虫菌复合制剂,按重量份数计,所述黑水虻虫菌复合制剂包括以下组分:3龄黑水虻幼虫1份,活性菌粉0.6-1份,麸皮0.1-0.5份,珍珠岩0-0.3份,丙酸钙0.1-0.3份,维生素C 0.1-0.3份;
所述活性菌粉是按如下方法制得的:
步骤A:使用液体LB培养基将甲基营养型芽孢杆菌在37℃培养至对数生长期作为种子液使用;
步骤B:按1%接种量将步骤A中所述的种子液接种到发酵罐中的液体发酵培养基中发酵,发酵24小时后进行活菌计数,得发酵液;
步骤C:将步骤B中所述的发酵液与沸石粉按照1∶1-5体积的比例混合均匀,然后在60℃下干燥,即得活性菌粉。
黑水虻幼虫与虫卵相比,具有较强抗逆性,在氧胁迫和高渗透压条件下的耐受特性较好,其平均死亡率低于20%,同时,黑水虻幼虫具有较强饥饿耐受能力和滞育现象,为黑水虻幼虫一定时间保存和长距离运输提供了理论依据,此外,为了实现黑水虻幼虫对畜禽粪便等有机物的高效分解,通常离不开微生物,特别是卵共生微生物辅助作用。珍珠岩增加了黑水虻虫菌复合制剂的透气性,减少其板结,便于3龄黑水虻幼虫呼吸,提高了存活率;维生素C是高效抗氧化剂,有助于增加3龄黑水虻幼虫的抵抗力和存活率;麦麸为3龄黑水虻幼虫提供了饲料;甲基营养型芽孢杆菌在营养和水分贫乏,且在丙酸钙的抑制作用下不会马上萌发,但将黑水虻虫菌复合制剂接入到废弃物中后,丙酸钙得到稀释,孢子萌发,与3龄黑水虻幼虫一起快速降解废弃物;甲基营养型芽孢杆菌在废弃物处理中具有除臭的作用,此外甲基营养型芽孢杆菌是黑水虻幼虫的体内的共生菌,具有促进黑水虻幼虫生长的作用,甲基营养型芽孢杆菌与3龄黑水虻幼虫按合适的比例混合后能显著促进3龄黑水虻幼虫的生长,使降解废弃物的效率更高,二者在降解废弃物起协同作用,达到了1+1大于2的效果;简化昆虫处理废弃物工艺,方便行业内使用,从根本上解决黑水虻虫卵产量供应不稳定与每天固定废弃物处理量要求之间的矛盾;提高处理效率,降低孵化带来的技术风险;幼虫成活率高,抗逆性强,提高黑水虻虫卵的利用效率,避免黑水虻繁育过程中可能造成的资源浪费;本申请的黑水虻虫菌复合制剂可以配套使用说明,属于简单化操作,只需要简单的接种环节,既节约了劳动力,又可以做到有机废弃物的彻底高效化处理,解决了黑水虻虫卵长距离运输严重影响废弃物处理效率和昆虫的规模化、连续化培养的缺陷。
优选的,按重量份数计,所述黑水虻虫菌复合制剂包括以下组分:3龄黑水虻幼虫1份,活性菌粉0.8份,麸皮0.3份,珍珠岩0.15份,丙酸钙0.2份,维生素C 0.2份。
优选的,步骤B中所述液体发酵培养基包括以下组分:葡萄糖1-5g/L,胰蛋白胨5-10g/L,酵母浸粉2-8g/L,氯化钠5-10g/L,磷酸氢二钾0.5-1.5g/L,硫酸镁0.5-2g/L;步骤B中所述发酵的条件为:发酵罐罐压0.03~0.1Mpa,搅拌转速170r/min,通风量1∶0.25~0.5,培养温度37℃。
优选的,步骤C中所述沸石粉为斜发沸石粉,颗粒大小为160-200目。
优选的,步骤C中所述干燥的方法为沸腾干燥或真空干燥。
优选的,所述珍珠岩颗粒大小为10-80目。
优选的,所述麦麸颗粒大小为40目。
黑水虻虫菌复合制剂的生产方法,包括如下步骤:
(1)使用搅拌混料机将丙酸钙,维生素C,活性菌粉,麸皮和珍珠岩混合均匀,之后加入3龄黑水虻幼虫混合均匀得黑水虻虫菌复合制剂;
(2)将步骤(1)中所得的黑水虻虫菌复合制剂分装至包装袋,并避光、通风保存,环境温度为15-35℃。黑水虻虫菌复合制剂按照要求包装之后无特殊异味,无逃逸现象,可长期保存和运输,实现不同地域固体有机废弃物的连续化处理,便于此技术的规模化推广和应用。
优选的,所述包装袋为单覆膜或不覆膜的无纺布袋。黑水虻虫菌复合制剂,一方面黑水虻幼虫所出的环境中营养物质贫乏,在有一定水分存在条件不会大量发热,另一方面,由于无纺布袋透气性有限,水分也可以长时间保留,避免由于长时间保存造成水分流失和虫子的死亡。
优选的,每袋所述包装袋重量为5-25kg,装袋量为每袋所述包装袋体积的2/5-4/5,每袋所述包装袋采用线缝封口、热合封口或超声波封口。
本申请技术方案中:
所述甲基营养型芽孢杆菌的拉丁名为Corynebacterium glutamicum,菌株保藏号为CGMCC No.14202,菌株(CGMCC No.14202)由河南农业大学生命科学学院培育并提交至中国菌种保藏中心保藏;
所述活菌计数的具体方法为:使用固体LB培养基,按照梯度稀释平皿法进行活菌计数,质量要求芽孢数大于109个/g,水分小于10%;
所述液体LB培养基的配方为:胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,NaCl 10g/L;
所述固体LB培养基的配方为:胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,NaCl 10g/L,琼脂粉15-20g/L;
所述3龄黑水虻幼虫的百头体重范围0.2-0.3g;
所述黑水虻虫菌复合制剂运输时,堆积高度小于50cm,外层使用透气纸箱。
综上所述,由于采用了上述技术方案,本发明的有益效果是:(1)黑水虻虫菌复合制剂处理农业有机废弃物的标准化和稳定化、节约处理工艺和人力成本,有助于黑水虻幼虫在处理畜禽粪便、餐厨垃圾、动物尸体和废弃果蔬方面的规模化应用与推广;(2)简化昆虫处理废弃物工艺,方便行业内使用,从根本上解决黑水虻虫卵产量供应不稳定与每天固定废弃物处理量要求之间的矛盾;(3)甲基营养型芽孢杆菌在营养和水分贫乏,且在丙酸钙的抑制作用下不会马上萌发,但将黑水虻虫菌复合制剂接入到废弃物中后,丙酸钙得到稀释,孢子萌发,与3龄黑水虻幼虫一起快速降解废弃物;(4)甲基营养型芽孢杆菌在废弃物处理中具有除臭的作用,此外甲基营养型芽孢杆菌是黑水虻幼虫的体内的共生菌,具有促进黑水虻幼虫生长的作用,甲基营养型芽孢杆菌与3龄黑水虻幼虫按合适的比例混合后能显著促进3龄黑水虻幼虫的生长,使降解废弃物的效率更高,二者在降解废弃物起协同作用,达到了1+1大于2的效果;(5)提高处理效率,降低孵化带来的技术风险;(6)幼虫成活率高,抗逆性强,提高黑水虻虫卵的利用效率,避免黑水虻繁育过程中可能造成的资源浪费;(7)黑水虻虫菌复合制剂可以配套使用说明,属于简单化操作,只需要简单的接种环节,既节约了劳动力,又可以做到有机废弃物的彻底高效化处理;(8)黑水虻虫菌复合制剂按照要求包装之后无特殊异味,无逃逸现象,可长期保存和运输,实现不同地域固体有机废弃物的连续化处理,便于此技术的规模化推广和应用;(9)黑水虻虫菌复合制剂,一方面黑水虻幼虫所出的环境中营养物质贫乏,在有一定水分存在条件不会大量发热,另一方面,由于无纺布袋透气性有限,水分也可以长时间保留,避免由于长时间保存造成水分流失和虫子的死亡。
附图说明
图1为本申请黑水虻虫菌复合制剂生产方法路线图。
具体实施方式
本说明书中公开的所有特征,除了互相排斥的特征和/或步骤以外,均可以以任何方式组合。
实施例1
如图1,黑水虻虫菌复合制剂,按重量份数计,所述黑水虻虫菌复合制剂包括以下组分:3龄黑水虻幼虫1份,活性菌粉0.6份,麸皮0.1份,珍珠岩0份,丙酸钙0.1份,维生素C0.1份,所述珍珠岩颗粒大小为10目,所述麦麸颗粒大小为40目;
所述活性菌粉是按如下方法制得的:
步骤A:使用液体LB培养基将甲基营养型芽孢杆菌在37℃培养至对数生长期作为种子液使用;
步骤B:按1%接种量将步骤A中所述的种子液接种到发酵罐中的液体发酵培养基中发酵,发酵24小时后进行活菌计数,得发酵液,所述液体发酵培养基包括以下组分:葡萄糖1g/L,胰蛋白胨5g/L,酵母浸粉2g/L,氯化钠5g/L,磷酸氢二钾0.5g/L,硫酸镁0.5g/L;步骤B中所述发酵的条件为:发酵罐罐压0.03Mpa,搅拌转速170r/min,通风量1∶0.25,培养温度37℃;
步骤C:将步骤B中所述的发酵液与沸石粉按照1∶1体积的比例混合均匀,然后在60℃下干燥,即得活性菌粉,所述干燥的方法为沸腾干燥,所述沸石粉为斜发沸石粉,颗粒大小为160目。
黑水虻虫菌复合制剂的生产方法,包括如下步骤:
(1)使用搅拌混料机将丙酸钙,维生素C,活性菌粉,麸皮和珍珠岩混合均匀,之后加入3龄黑水虻幼虫混合均匀得黑水虻虫菌复合制剂;
(2)将步骤(1)中所得的黑水虻虫菌复合制剂分装至包装袋,并避光、通风保存,环境温度为15℃,所述包装袋为单覆膜或不覆膜的无纺布袋,每袋所述包装袋重量为5kg,装袋量为每袋所述包装袋体积的2/5,每袋所述包装袋采用线缝封口、热合封口或超声波封口。
对本实施例所得的黑水虻虫菌复合制剂进行检测,具体为:每天随机取一个样袋进行活菌数和幼虫死亡率检测,检测结果如表1所示:
表1黑水虻虫菌复合制剂贮藏一周之后活菌数变化与存活率统计
结果表明:1至6天甲基营养型芽孢杆菌的芽孢数均大于109/g,3龄黑水虻幼虫的存活率均大于95%,说明黑水虻虫菌复合制剂所含的甲基营养型芽孢杆菌的芽孢量多、活性高,且3龄黑水虻幼虫的存活率高。
本实施例中黑水虻虫菌复合制剂的使用方法如下:将150kg猪粪或餐厨垃圾等废弃物堆在盒子、地槽或本领域常规的盛放废弃物的设备上,中间扒开直径为30cm小坑,将一袋黑水虻虫菌复合制剂集中倒在小坑中,待废弃物自然散开后,再在5天内均匀添加废弃物700kg,最后3天内均匀添加废弃物150kg,处理废弃物的总周期为10天。每袋黑水虻虫菌复合制剂能处理1吨废弃物。
实施例2
如图1,黑水虻虫菌复合制剂,按重量份数计,所述黑水虻虫菌复合制剂包括以下组分:3龄黑水虻幼虫1份,活性菌粉0.8份,麸皮0.3份,珍珠岩0.15份,丙酸钙0.2份,维生素C 0.2份,所述珍珠岩颗粒大小为45目,所述麦麸颗粒大小为40目;
所述活性菌粉是按如下方法制得的:
步骤A:使用液体LB培养基将甲基营养型芽孢杆菌在37℃培养至对数生长期作为种子液使用;
步骤B:按1%接种量将步骤A中所述的种子液接种到发酵罐中的液体发酵培养基中发酵,发酵24小时后进行活菌计数,得发酵液,所述液体发酵培养基包括以下组分:葡萄糖3g/L,胰蛋白胨7.5g/L,酵母浸粉5g/L,氯化钠7.5g/L,磷酸氢二钾1g/L,硫酸镁1.25g/L;步骤B中所述发酵的条件为:发酵罐罐压0.065Mpa,搅拌转速170r/min,通风量1∶0.35,培养温度37℃,;
步骤C:将步骤B中所述的发酵液与沸石粉按照1∶3体积的比例混合均匀,然后在60℃下干燥,即得活性菌粉,所述干燥的方法为真空干燥,所述沸石粉为斜发沸石粉,颗粒大小为180目。
黑水虻虫菌复合制剂的生产方法,包括如下步骤:
(1)使用搅拌混料机将丙酸钙,维生素C,活性菌粉,麸皮和珍珠岩混合均匀,之后加入3龄黑水虻幼虫混合均匀得黑水虻虫菌复合制剂;
(2)将步骤(1)中所得的黑水虻虫菌复合制剂分装至包装袋,并避光、通风保存,环境温度为25℃,所述包装袋为单覆膜或不覆膜的无纺布袋,每袋所述包装袋重量为15kg,装袋量为每袋所述包装袋体积的3/5,每袋所述包装袋采用线缝封口、热合封口或超声波封口。
对本实施例所得的黑水虻虫菌复合制剂进行检测,具体为:每天随机取一个样袋进行活菌数和幼虫死亡率检测,检测结果如表1所示:
表1黑水虻虫菌复合制剂贮藏一周之后活菌数变化与存活率统计
结果表明:1至6天甲基营养型芽孢杆菌的芽孢数均大于109/g,3龄黑水虻幼虫的存活率均大于95%,说明黑水虻虫菌复合制剂所含的甲基营养型芽孢杆菌的芽孢量多、活性高,且3龄黑水虻幼虫的存活率高。
本实施例中黑水虻虫菌复合制剂的使用方法如下:将450kg猪粪或餐厨垃圾等废弃物堆在盒子、地槽或本领域常规的盛放废弃物的设备上,中间扒开直径为40cm小坑,将一袋黑水虻虫菌复合制剂集中倒在小坑中,待废弃物自然散开后,再在5天内均匀添加废弃物2100kg,最后3天内均匀添加废弃物450kg,处理废弃物的总周期为10天。每袋黑水虻虫菌复合制剂能处理3吨废弃物。
实施例3
如图1,黑水虻虫菌复合制剂,按重量份数计,所述黑水虻虫菌复合制剂包括以下组分:3龄黑水虻幼虫1份,活性菌粉1份,麸皮0.5份,珍珠岩0.3份,丙酸钙0.3份,维生素C0.3份,所述珍珠岩颗粒大小为80目,所述麦麸颗粒大小为40目;
所述活性菌粉是按如下方法制得的:
步骤A:使用液体LB培养基将甲基营养型芽孢杆菌使用液体LB培养基在37℃培养至对数生长期作为种子液使用;
步骤B:按1%接种量将步骤A中所述的种子液接种到发酵罐中的液体发酵培养基中发酵,发酵24小时后进行活菌计数,得发酵液,所述液体发酵培养基包括以下组分:葡萄糖5g/L,胰蛋白胨10g/L,酵母浸粉8g/L,氯化钠10g/L,磷酸氢二钾1.5g/L,硫酸镁2g/L;步骤B中所述发酵的条件为:发酵罐罐压0.1Mpa,搅拌转速170r/min,通风量1∶0.5,培养温度37℃,;
步骤C:将步骤B中所述的发酵液与沸石粉按照1∶5体积的比例混合均匀,然后在60℃下干燥,即得活性菌粉,所述干燥的方法为沸腾干燥,所述沸石粉为斜发沸石粉,颗粒大小为200目。
黑水虻虫菌复合制剂的生产方法,包括如下步骤:
(1)使用搅拌混料机将丙酸钙,维生素C,活性菌粉,麸皮和珍珠岩混合均匀,之后加入3龄黑水虻幼虫混合均匀得黑水虻虫菌复合制剂;
(2)将步骤(1)中所得的黑水虻虫菌复合制剂分装至包装袋,并避光、通风保存,环境温度为35℃,所述包装袋为单覆膜或不覆膜的无纺布袋,每袋所述包装袋重量为25kg,装袋量为每袋所述包装袋体积的4/5,每袋所述包装袋采用线缝封口、热合封口或超声波封口。
对本实施例所得的黑水虻虫菌复合制剂进行检测,具体为:每天随机取一个样袋进行活菌数和幼虫死亡率检测,检测结果如表1所示:
表1黑水虻虫菌复合制剂贮藏一周之后活菌数变化与存活率统计
结果表明:1至6天甲基营养型芽孢杆菌的芽孢数均大于109/g,3龄黑水虻幼虫的存活率均大于95%,说明黑水虻虫菌复合制剂所含的甲基营养型芽孢杆菌的芽孢量多、活性高,且3龄黑水虻幼虫的存活率高。
本实施例中黑水虻虫菌复合制剂的使用方法如下:将750kg猪粪或餐厨垃圾等废弃物堆在盒子、地槽或本领域常规的盛放废弃物的设备上,中间扒开直径为50cm小坑,将一袋黑水虻虫菌复合制剂集中倒在小坑中,待废弃物自然散开后,再在5天内均匀添加废弃物3500kg,最后3天内均匀添加废弃物750kg,处理废弃物的总周期为10天。每袋黑水虻虫菌复合制剂能处理5吨废弃物。
对比例1
如图1,黑水虻虫菌复合制剂,按重量份数计,所述黑水虻虫菌复合制剂包括以下组分:3龄黑水虻幼虫1份,活性菌粉0.8份,麸皮0.3份,珍珠岩0.15份,丙酸钙0.2份,维生素C 0.2份,所述珍珠岩颗粒大小为45目,所述麦麸颗粒大小为40目;
所述活性菌粉是按如下方法制得的:
步骤A:使用液体LB培养基将甲基营养型芽孢杆菌在37℃培养至对数生长期作为种子液使用;
步骤B:按1%接种量将步骤A中所述的种子液接种到发酵罐中的液体发酵培养基中发酵,发酵24小时后进行活菌计数,得发酵液,所述液体发酵培养基包括以下组分:葡萄糖3g/L,胰蛋白胨7.5g/L,酵母浸粉5g/L,氯化钠7.5g/L,磷酸氢二钾1g/L,硫酸镁1.25g/L;步骤B中所述发酵的条件为:发酵罐罐压0.065Mpa,搅拌转速170r/min,通风量1∶0.35,培养温度37℃,;
步骤C:将步骤B中所述的发酵液与沸石粉按照1∶3体积的比例混合均匀,然后在60℃下干燥,即得活性菌粉,所述干燥的方法为沸腾干燥,所述沸石粉为斜发沸石粉,颗粒大小为180目。
黑水虻虫菌复合制剂的生产方法,包括如下步骤:
(1)使用搅拌混料机将维生素C,活性菌粉和珍珠岩混合均匀,之后加入3龄黑水虻幼虫混合均匀得黑水虻虫菌复合制剂;
(2)将步骤(1)中所得的黑水虻虫菌复合制剂分装至包装袋,并避光、通风保存,环境温度为25℃,所述包装袋为单覆膜或不覆膜的无纺布袋,每袋所述包装袋重量为15kg,装袋量为每袋所述包装袋体积的3/5,每袋所述包装袋采用线缝封口、热合封口或超声波封口。
本对比例去掉了麦麸和丙酸钙。
对本对比所得的黑水虻虫菌复合制剂进行检测,具体为:每天随机取一个样袋进行活菌数和幼虫死亡率检测,检测结果如表1所示:
表1黑水虻虫菌复合制剂贮藏一周之后活菌数变化与存活率统计
结果表明:1至4天甲基营养型芽孢杆菌的芽孢数均大于109/g,第5天及以后甲基营养型芽孢杆菌的芽孢数均小于109/g,第1和第2天,3龄黑水虻幼虫的存活率均大于95%,第三天及以后3龄黑水虻幼虫的存活率均小于95%,说明去掉丙酸钙后,其对甲基营养型芽孢杆菌的芽孢萌发抑制作用消失,导致芽孢萌发,芽孢数降低,此外。去掉3龄黑水虻幼虫的饲料麦麸后,其存活率显著降低。
本对比例中黑水虻虫菌复合制剂的使用方法如下:将450kg猪粪或餐厨垃圾等废弃物堆在盒子、地槽或本领域常规的盛放废弃物的设备上,中间扒开直径为40cm小坑,将一袋黑水虻虫菌复合制剂集中倒在小坑中,待废弃物自然散开后,再在5天内均匀添加废弃物1500kg,最后3天内均匀添加废弃物450kg,处理废弃物的总周期为10天。每袋黑水虻虫菌复合制剂能处理2.2吨废弃物。
本发明不局限于上述实施方式,任何人应该得知在本发明的启示下做出的结构变化,凡是与本发明具有相同或相近的技术方案,均落入本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.黑水虻虫菌复合制剂,其特征在于:按重量份数计,所述黑水虻虫菌复合制剂包括以下组分:3龄黑水虻幼虫1份,活性菌粉0.6-1份,麸皮0.1-0.5份,珍珠岩0-0.3份,丙酸钙0.1-0.3份,维生素C 0.1-0.3份;
所述活性菌粉是按如下方法制得的:
步骤A:使用液体LB培养基将甲基营养型芽孢杆菌在37℃培养至对数生长期作为种子液使用;
步骤B:按1%接种量将步骤A中所述的种子液接种到发酵罐中的液体发酵培养基中发酵,发酵24小时后进行活菌计数,得发酵液;
步骤C:将步骤B中所述的发酵液与沸石粉按照1:1-5体积的比例混合均匀,然后在60℃下干燥,即得活性菌粉。
2.根据权利要求1所述的黑水虻虫菌复合制剂,其特征在于:按重量份数计,所述黑水虻虫菌复合制剂包括以下组分:3龄黑水虻幼虫1份,活性菌粉0.8份,麸皮0.3份,珍珠岩0.15份,丙酸钙0.2份,维生素C 0.2份。
3.根据权利要求1所述的黑水虻虫菌复合制剂,其特征在于:步骤B中所述液体发酵培养基包括以下组分:葡萄糖1-5g/L,胰蛋白胨5-10g/L,酵母浸粉2-8g/L,氯化钠5-10g/L,磷酸氢二钾0.5-1.5g/L,硫酸镁0.5-2g/L;步骤B中所述发酵的条件为:发酵罐罐压0.03~0.1Mpa,搅拌转速170r/min,通风量1:0.25~0.5,培养温度37℃。
4.根据权利要求1所述的黑水虻虫菌复合制剂,其特征在于:步骤C中所述沸石粉为斜发沸石粉,颗粒大小为160-200目。
5.根据权利要求1所述的黑水虻虫菌复合制剂,其特征在于:步骤C中所述干燥的方法为沸腾干燥或真空干燥。
6.根据权利要求1或2所述的黑水虻虫菌复合制剂,其特征在于:所述珍珠岩颗粒大小为10-80目。
7.根据权利要求1或2所述的黑水虻虫菌复合制剂,其特征在于:所述麦麸颗粒大小为40目。
8.权利要求1-7任一项所述的黑水虻虫菌复合制剂的生产方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)使用搅拌混料机将丙酸钙,维生素C,活性菌粉,麸皮和珍珠岩混合均匀,之后加入3龄黑水虻幼虫混合均匀得黑水虻虫菌复合制剂;
(2)将步骤(1)中所得的黑水虻虫菌复合制剂分装至包装袋,并避光、通风保存,环境温度为15-35℃。
9.根据权利要求8所述的黑水虻虫菌复合制剂的生产方法,其特征在于:所述包装袋为单覆膜或不覆膜的无纺布袋。
10.根据权利要求8所述的黑水虻虫菌复合制剂的生产方法,其特征在于:每袋所述包装袋重量为5-25kg,装袋量为每袋所述包装袋体积的2/5-4/5,每袋所述包装袋采用线缝封口、热合封口或超声波封口。
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