CN108368527A - 研磨方法 - Google Patents

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Abstract

一种用于处理作物籽粒的方法包括以下步骤：a)将籽粒浸泡在水中，以产生浸泡的籽粒；b)碾磨这些浸泡的籽粒；c)在有效量的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽或具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH43多肽的存在下处理这些浸泡的籽粒，其中在步骤b)之前、过程中或之后进行步骤c)。

Description

研磨方法
对序列表的引用
本申请含有计算机可读形式的序列表，将其通过引用结合在此。
发明背景
技术领域
本发明涉及一种处理作物籽粒的改进方法，以提供具有高品质的适于将淀粉转化为单糖和寡糖、乙醇、甜味剂等的淀粉产品。另外，本发明还涉及一种酶组合物并且涉及本发明的组合物的用途，该酶组合物包括一种或多种适于本发明的方法的酶活性。
背景技术
作为大部分作物(例如玉米、小麦、水稻、高粱大豆、大麦或果壳)籽粒的重要成分，在可以将淀粉用于将淀粉转化为糖(例如右旋糖、果糖)、醇(例如乙醇)和甜味剂之前，必须使淀粉可供使用并以一种提供高纯度淀粉的方式加以处理。如果淀粉包含多于0.5％的杂质(包括蛋白质)，则它不适于作为淀粉转化工艺的起始材料。为了从作物籽粒开始提供这样的纯的且高品质的淀粉产品，通常研磨籽粒，如将在下文进一步所描述。
通常使用湿磨将玉米籽粒分离为其四种基本组分：淀粉、胚芽、纤维以及蛋白质。
典型地，湿磨方法包括四个基本步骤。首先，将籽粒浸泡或浸渍约30分钟至约48小时，以开始使淀粉和蛋白质键断裂。该方法的下一步骤涉及粗磨，以破坏果皮并使胚芽与剩余的籽粒分离。剩余的浆液由纤维、淀粉和蛋白质组成，将其细磨并筛选，以将纤维与淀粉和蛋白质分离。在水力旋流器中将淀粉与剩余的浆液分离。然后，可以将淀粉转化为糖浆或醇，或干燥并销售为玉米淀粉，或用化学方法或物理方法修饰以产生改性玉米淀粉。
已经表明了酶对湿磨方法的浸渍步骤的用途。已经显示，商业酶产品(可得自诺维信公司(Novozymes A/S))适于湿磨方法的第一步骤，即将玉米籽粒浸泡在水中的浸渍步骤。
最近，已经研发了“酶研磨(enzymatic milling)”，这是一种改进的湿磨方法，该方法使用蛋白酶以在玉米湿磨过程中显著减少总的处理时间并消除了对作为加工剂的二氧化硫的需求。Johnston等人,Cereal Chem[谷物化学],81,第626-632页(2004)。
US 6,566,125披露了一种用于从玉蜀黍获得淀粉的方法，该方法涉及将玉蜀黍籽粒浸泡在水中以产生浸泡的玉蜀黍籽粒，碾磨浸泡的玉蜀黍籽粒以产生碾磨的玉蜀黍浆液并将碾磨的玉蜀黍浆液与酶(例如，蛋白酶)一起孵育。
US 5,066,218披露了一种研磨谷物(尤其是玉米)的方法，该方法包括清洗谷物，将谷物浸渍在水中以将其软化，并且然后用纤维素酶研磨谷物。
WO 2002/000731披露了一种处理作物籽粒的方法，该方法包括将籽粒在水中浸泡1-12小时，湿磨浸泡的籽粒并用一种或多种酶(包括酸性蛋白酶)处理籽粒。
WO 2002/000911披露了一种分离淀粉面筋的方法，该方法包括使研磨淀粉经受酸性蛋白酶。
WO 2002/002644披露了一种洗涤获得自研磨方法的淀粉面筋分离步骤的淀粉浆液的方法，该方法包括用包括有效量的酸性蛋白酶的水溶液洗涤淀粉浆液。
仍需要改进用于提供适于转化为单糖和寡糖、乙醇、甜味剂等的淀粉的方法。
发明内容
本发明提供了一种用于处理作物籽粒的方法，该方法包括以下步骤：a)将籽粒浸泡在水中，以产生浸泡的籽粒；b)碾磨这些浸泡的籽粒；c)在一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽的存在下处理这些浸泡的籽粒，其中在步骤b)之前、过程中或之后进行步骤c)。
在一个实施例中，本发明提供了一种用于处理作物籽粒的方法，该方法包括以下步骤：a)将籽粒浸泡在水中，以产生浸泡的籽粒；b)碾磨这些浸泡的籽粒；c)在一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽和一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽的存在下处理这些浸泡的籽粒，其中在步骤b)之前、过程中或之后进行步骤c)。
在一个实施例中，本发明提供了具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽用于增强一种或多种酶的湿磨益处的用途。
本发明提供了一种用于处理作物籽粒的方法，该方法包括以下步骤：a)将籽粒浸泡在水中，以产生浸泡的籽粒；b)碾磨这些浸泡的籽粒；c)在一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH43多肽的存在下处理这些浸泡的籽粒，其中在步骤b)之前、过程中或之后进行步骤c)。
在一个实施例中，本发明提供了一种用于处理作物籽粒的方法，该方法包括以下步骤：a)将籽粒浸泡在水中，以产生浸泡的籽粒；b)碾磨这些浸泡的籽粒；c)在一种或多种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH43多肽和一种或多种具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽的存在下处理这些浸泡的籽粒，其中在步骤b)之前、过程中或之后进行步骤c)。
在一个实施例中，上述步骤c)在纤维洗涤步骤过程中进行。
在一个实施例中，本发明提供了具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH43多肽用于增强一种或多种酶的湿磨益处的用途。
定义
辅助活性9多肽：术语“辅助活性9多肽”或“AA9多肽”意指分类为溶解性多糖单加氧酶(lytic polysaccharide monooxygenase)的多肽(Quinlan等人,2011,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]208:15079-15084；Phillips等人,2011,ACS Chem.Biol.[ACS化学生物学]6:1399-1406；Lin等人,2012,Structure[结构]20:1051-1061)。根据Henrissat,1991,Biochem.J.[生物化学杂志]280:309-316以及Henrissat和Bairoch,1996,Biochem.J.[生物化学杂志]316:695-696，AA9多肽之前被分类为糖苷水解酶家族61(GH61)。
AA9多肽通过具有纤维素分解活性的酶增强纤维素材料的水解。可以通过测量在以下条件下与具有无纤维素分解增强活性的相等的总蛋白负载的对照水解(1-50mg的纤维素分解蛋白/g的PCS中的纤维素)相比，由纤维素分解酶水解纤维素材料的还原糖的增加或纤维二糖与葡萄糖总量的增加来测定纤维素分解增强活性：1-50mg的总蛋白/g于预处理的玉米秸秆(PCS)中的纤维素，其中总蛋白由50％-99.5％w/w纤维素分解酶蛋白和0.5％-50％w/w AA9多肽蛋白组成，在适合的温度(如40℃-80℃，例如40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、或80℃)和适合的pH(如4-9，例如4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、或9.0)下持续1-7天。
可以使用1.5L(诺维信公司，巴格斯瓦德丹麦)和β-葡糖苷酶的混合物作为纤维素分解活性的来源来测定AA9多肽增强活性，其中该β-葡糖苷酶是以纤维素酶蛋白负载的至少2％-5％蛋白的重量存在的。在一方面，该β-葡糖苷酶是米曲霉β-葡糖苷酶(例如，根据WO 02/095014，在米曲霉中重组产生的)。在另一方面，该β-葡糖苷酶是烟曲霉β-葡糖苷酶(例如，如在WO 02/095014中所述的，在米曲霉中重组产生的)。
AA9多肽增强活性还可以通过以下来测定：在40℃下将AA9多肽与0.5％磷酸溶胀纤维素(PASC)、100mM乙酸钠(pH 5)、1mM MnSO4、0.1％没食子酸、0.025mg/ml的烟曲霉β-葡糖苷酶、以及0.01％X-100(4-(1,1,3,3-四甲基丁基)苯基-聚乙二醇)一起孵育24-96小时，接着测定从PASC释放的葡萄糖。
还可以根据WO 2013/028928测定高温组合物的AA9多肽增强活性。
AA9多肽通过将达到相同的水解程度所需要的纤维素分解酶的量降低优选至少1.01倍，例如，至少1.05倍、至少1.10倍、至少1.25倍、至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少10倍、或至少20倍，来增强由具有纤维素分解活性的酶催化的纤维素材料的水解。
根据WO 2008/151043或WO 2012/122518，AA9多肽也可以在可溶性活化二价金属阳离子(例如锰或铜)的存在下使用。
该AA9多肽可以在二氧化合物、二环化合物、杂环化合物、含氮化合物、醌化合物、含硫化合物、或从预处理的纤维素材料或半纤维素材料(如预处理的玉米秸杆)获得的液体的存在下使用(WO 2012/021394、WO 2012/021395、WO 2012/021396、WO 2012/021399、WO2012/021400、WO 2012/021401、WO 2012/021408、以及WO 2012/021410)。
等位基因变体：术语“等位基因变体”意指占用同一染色体基因座的基因的两个或更多个替代形式中的任一者。等位基因变异通过突变天然产生，并且可能导致群体内的多态性。基因突变可以是沉默的(在所编码的多肽中没有改变)或可编码具有改变的氨基酸序列的多肽。多肽的等位基因变体是由基因的等位基因变体编码的多肽。
阿拉伯呋喃糖苷酶：术语“阿拉伯呋喃糖苷酶”意指一种α-L-阿拉伯呋喃糖苷阿拉伯呋喃水解酶(EC 3.2.1.55)，其催化α-L-阿拉伯糖苷中的末端非还原性α-L-阿拉伯呋喃糖苷残基的水解。该酶对α-L-阿拉伯呋喃糖苷、包含(1,3)-和/或(1,2)-和/或(1,5)-键的α-L-阿拉伯聚糖、阿拉伯糖基木聚糖以及阿拉伯半乳聚糖起作用。α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶还被称为阿拉伯糖苷酶、α-阿拉伯糖苷酶、α-L-阿拉伯糖苷酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、多糖α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、α-L-阿拉伯呋喃糖苷水解酶、L-阿拉伯糖苷酶、或α-L-阿拉伯聚糖酶。可以使用每ml的100mM乙酸钠(pH 5)中5mg的中等粘度小麦阿拉伯糖基木聚糖(麦格酶国际爱尔兰股份有限公司(Megazyme International Ireland,Ltd.)，布瑞公司(Bray,Co.)，威克洛郡，爱尔兰)以总体积200μl在40℃下持续30分钟，接着通过HPX-87H柱层析(伯乐实验室有限公司(Bio-Rad Laboratories,Inc.)，赫拉克勒斯，加利福尼亚州，美国)进行阿拉伯糖分析来测定阿拉伯呋喃糖苷酶活性。
本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少50％，该列表由以下组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:48、SEQ IDNO:51、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:66和SEQID NO:69。在一个优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少70％，该列表由以下组成：SEQ ID NO:9、SEQID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQID NO:30、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:45、SEQID NO:48、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:63、SEQID NO:66、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118。在一个更优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少80％，该列表由以下组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:33、SEQ IDNO:36、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:51、SEQ IDNO:54、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:69、SEQ IDNO:117和SEQ ID NO:118。在一个甚至更优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少90％，该列表由以下组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:39、SEQ IDNO:42、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:57、SEQ IDNO:60、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118。在一个最优选的实施例中，本发明的阿拉伯呋喃糖苷酶具有选自以下列表的一种或多种多肽的阿拉伯呋喃糖苷酶活性的至少95％，该列表由以下组成：SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:45、SEQ IDNO:48、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:63、SEQ IDNO:66、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118。
含阿拉伯木聚糖的材料：术语“含阿拉伯木聚糖的材料”意指包含阿拉伯木聚糖的任何材料。阿拉伯木聚糖是在植物(包括木头和谷物)的初生和次生细胞壁中发现的半纤维素，由两种戊糖、阿拉伯糖和木糖的共聚物组成。阿拉伯木聚糖链包含大量的1,4-连接的木糖单元。许多木糖单元被2-、3-或2,3-取代的阿拉伯糖残基取代。
含阿拉伯木聚糖的材料的实例是草料、粗粮、种子和谷物(例如来自玉米、燕麦、黑麦、大麦、小麦的整体或通过粉碎、研磨等制备的)、树木或硬木(如杨树、柳树、桉树、棕榈、枫树、桦树)、竹子、草本和/或木本能源作物、农业粮食和饲料作物、动物饲料产品、木薯皮、可可豆荚、甘蔗、甜菜、槐豆粕、蔬菜或水果果渣、木材废料、树皮、刨花、锯末、木浆、制浆废液、废纸、纸板、建筑和拆除木材废料、工业或城市废水固体或污泥、肥料、来自酿造和/或发酵过程的副产物、湿酒糟、干酒糟、谷物渣、酒糟和甘蔗渣。
如在此所定义的草料还包括粗粮。草料是新鲜的植物物料，例如来自草料植物(禾草)和其他草料植物(海草、发芽谷物和豆类植物)或其任何组合的干草和青贮饲料。草料植物的实例是苜蓿(紫花苜蓿)、百脉根、芸苔属植物(例如，羽衣甘蓝、油菜籽(卡诺拉(canola))、芜菁甘蓝(瑞典芜菁)、萝卜)、三叶草(例如，杂三叶、红三叶、地三叶、白三叶)、禾草(例如，百慕大草、雀麦、伪燕麦草、羊茅、石南草(heath grass)、草地早熟禾、芒草、鸭茅(orchard grass)、黑麦草、柳枝稷、梯牧草(Timothy-grass))、玉米(玉蜀黍)、大麻、粟、大麦、燕麦、黑麦、高粱、大豆和小麦和蔬菜(如甜菜)。适用于青贮的作物是普通的禾草、三叶草、紫花苜蓿、野豌豆、燕麦、黑麦和玉蜀黍。草料进一步包括来自谷物产物的作物残余物(例如玉米秸秆，来自小麦、大麦、燕麦、黑麦和其他谷物的秸秆)，来自蔬菜像甜菜缨(beettop)的残余，来自油籽产物像来自大豆、油菜籽和其他豆类植物的茎和叶子的残余，以及来自用于动物或人类消耗的谷物精制过程或来自燃料生产或其他行业的部分。
粗粮一般是具有高水平纤维的干植物物料，例如来自种子和谷物以及作物残余(例如秸秆、干椰肉(copra)、稻草、谷壳、甜菜废料)的纤维、麸、苞叶。
包含阿拉伯木聚糖的材料的优选来源是草料、粗粮、种子和谷物、甘蔗、甜菜和木浆。
β-葡糖苷酶：术语“β-葡糖苷酶”意指一种β-D-葡糖苷葡糖水解酶(E.C.3.2.1.21)，其催化末端非还原性β-D-葡萄糖残基的水解，并释放β-D-葡萄糖。可以根据Venturi等人,2002,J.Basic Microbiol.[基础微生物学杂志]42:55-66的程序使用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷作为底物来测定β-葡糖苷酶活性。一个单位的β-葡糖苷酶定义为在25℃、pH 4.8下，在含有0.01％20的50mM柠檬酸钠中从作为底物的1mM对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷每分钟产生1.0微摩尔的对硝基苯酚阴离子。
β-木糖苷酶：术语“β-木糖苷酶”意指一种β-D-木糖苷木糖水解酶(β-D-xylosidexylohydrolase)(E.C.3.2.1.37)，其催化短β(1→4)-低聚木糖的外切水解，以将连续的D-木糖残基从非还原端移除。可以在含有0.01％20的100mM柠檬酸钠中，在pH 5、40℃下，使用1mM对硝基苯基-β-D-木糖苷作为底物来测定β-木糖苷酶活性。一个单位的β-木糖苷酶定义为在40℃、pH 5下，在含有0.01％20的100mM柠檬酸钠中从1mM对硝基苯基-β-D-木糖苷每分钟产生1.0微摩尔的对硝基酚根阴离子。
cDNA：术语“cDNA”意指可以通过从获得自真核或原核细胞的成熟的、剪接的mRNA分子进行反转录而制备的DNA分子。cDNA缺乏可存在于对应基因组DNA中的内含子序列。起初的原始RNA转录本是mRNA的前体，其通过一系列的步骤(包括剪接)加工，然后作为成熟的剪接的mRNA出现。
纤维二糖水解酶：术语“纤维二糖水解酶”意指一种1,4-β-D-葡聚糖纤维二糖水解酶(E.C.3.2.1.91和E.C.3.2.1.176)，其催化纤维素、纤维寡糖、或任何包含β-1,4-连接葡萄糖的聚合物中的1,4-β-D-糖苷键的水解，从而从链的还原性末端(纤维二糖水解酶I)或非还原性末端(纤维二糖水解酶II)释放纤维二糖(Teeri,1997,Trends in Biotechnology[生物技术趋势]15:160-167；Teeri等人,1998,Biochem.Soc.Trans.[生物化学学会会刊]26:173-178)。可以根据Lever等人,1972,Anal.Biochem.[分析生物化学]47:273-279；vanTilbeurgh等人,1982,FEBS Letters[欧洲生化学会联合会快报]149:152-156；vanTilbeurgh和Claeyssens,1985,FEBS Letters[欧洲生化学会联合会快报]187:283-288；以及Tomme等人,1988,Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学杂志]170:575-581所描述的程序来测定纤维二糖水解酶活性。
纤维素分解酶或纤维素酶：术语“纤维素分解酶”或“纤维素酶”意指一种或多种(例如，若干种)水解纤维素材料的酶。此类酶包括一种或多种内切葡聚糖酶、一种或多种纤维二糖水解酶、一种或多种β-葡糖苷酶、或其组合。用于测量纤维素分解酶活性的两种基本方法包括：(1)测量总纤维素分解酶活性，以及(2)测量单独的纤维素分解酶活性(内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和β-葡糖苷酶)，如在Zhang等人,2006,Biotechnology Advances[生物技术进展]24:452-481中所述的。可以使用不溶性底物(包括沃特曼(Whatman)№1滤纸、微晶纤维素、细菌纤维素、藻类纤维素、棉花、预处理的木质纤维素等)测量总纤维素分解酶活性。最常见的总纤维素分解活性测定是将沃特曼№1滤纸用作底物的滤纸测定。该测定是由国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)建立的(Ghose,1987,Pure Appl.Chem.[纯粹与应用化学]59:257-68)。
可以通过测量在以下条件下与未添加纤维素分解酶蛋白的对照水解相比，在一种或多种纤维素分解酶对纤维素材料的水解过程中产生/释放的糖的增加来测定纤维素分解酶活性：1-50mg的纤维素分解酶蛋白/g于预处理的玉米秸秆(PCS)中的纤维素(或其他预处理的纤维素材料)，在适合的温度(如40℃-80℃，例如40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、或80℃)和适合的pH(如4-9，例如，4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、或9.0)下持续3-7天。典型条件为：1ml反应，洗涤或未洗涤的PCS，5％不溶性固体(干重)，50mM乙酸钠(pH 5)，1mM MnSO4，50℃、55℃、或60℃，72小时，通过HPX-87H柱层析(伯乐实验室有限公司，赫拉克勒斯，加利福尼亚州，美国)进行糖分析。
纤维素材料：术语“纤维素材料”意指含有纤维素的任何材料。纤维素是脱水纤维二糖的均聚物，并且因此是线性β-(1-4)-D-葡聚糖，而半纤维素包括多种化合物，如具有一系列取代基以复杂支链结构存在的木聚糖、木葡聚糖、阿拉伯糖基木聚糖以及甘露聚糖。尽管纤维素一般为多态的，但发现其在植物组织中主要以平行葡聚糖链的不溶性晶体基质存在。半纤维素通常氢键合至纤维素连同其他半纤维素，这有助于稳定细胞壁基质。
编码序列：术语“编码序列”意指直接指定多肽的氨基酸序列的多核苷酸。编码序列的边界一般由开放阅读框决定，其从起始密码子(如ATG、GTG或TTG)开始并且以终止密码子(如TAA、TAG或TGA)结束。编码序列可为基因组DNA、cDNA、合成DNA或其组合。
控制序列：术语“控制序列”意指对于表达编码本发明的成熟多肽的多核苷酸所必需的核酸序列。每个控制序列对于编码该多肽的多核苷酸来说可以是天然的(即来自相同基因)或外源的(即来自不同基因)，或相对于彼此是天然的或外源的。此类控制序列包括但不限于前导序列、聚腺苷酸化序列、前肽序列、启动子、信号肽序列和转录终止子。最少，控制序列包括启动子、以及转录和翻译终止信号。出于引入有利于将这些控制序列与编码多肽的多核苷酸的编码区连接的特异性限制性酶切位点的目的，这些控制序列可以提供有多个接头。
作物籽粒：术语“作物籽粒”包括来自例如玉米(玉蜀黍)、水稻、大麦、高粱大豆、果壳以及小麦的籽粒。玉米籽粒是示例性的。已知多种玉米籽粒，包括例如马齿型玉米、硬粒玉米、有稃种玉米、具条纹玉米、甜玉米、糯玉米等。在一个实施例中，该玉米籽粒是黄色马齿型玉米籽粒。黄色马齿型玉米籽粒具有称为“果皮(Pericarp)”的外部覆盖物，保护籽粒中的胚芽。它防水和水蒸气并且是昆虫和微生物所不希望的。未被“果皮”覆盖的籽粒的唯一区域是“顶帽(Tip Cap)”，它是籽粒至穗轴的附着点。
干固体：术语“干固体”是在干重基础上的浆液的全固体(以百分比计)。
内切葡聚糖酶：术语“内切葡聚糖酶”意指一种4-(1,3；1,4)-β-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶(E.C.3.2.1.4)，其催化纤维素、纤维素衍生物(如羧甲基纤维素和羟乙基纤维素)、地衣多糖中的1,4-β-D-糖苷键和混合β-1,3-1,4葡聚糖如谷类β-D-葡聚糖或木葡聚糖以及含有纤维素组分的其他植物材料中的β-1,4键的内切水解。可以通过测量底物粘度的降低或通过还原糖测定所确定的还原性末端的增加来测定内切葡聚糖酶活性(Zhang等人,2006,Biotechnology Advances[生物技术进展]24:452-481)。还可以根据Ghose,1987,Pure and Appl.Chem.[纯粹与应用化学]59:257-268的程序，在pH 5、40℃下，使用羧甲基纤维素(CMC)作为底物来测确内切葡聚糖酶活性。
表达：术语“表达”包括涉及多肽产生的任何步骤，包括但不限于转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰、和分泌。
表达载体：术语“表达载体”意指线状或环状DNA分子，该分子包含编码多肽的多核苷酸并且该多核苷酸可操作地连接至供用于其表达的控制序列。
片段：术语“片段”意指从成熟多肽的氨基和/或羧基末端缺失一个或多个(例如，若干个)氨基酸的多肽，其中该片段具有酶活性。在一方面，片段包含酶的成熟多肽的至少85％(例如至少90％或至少95％)的氨基酸残基。
胚芽：“胚芽”是玉米籽粒的唯一存活部分。它包含籽粒生长为玉米植株所必需的遗传信息、酶、维生素以及矿物质。在黄色马齿型玉米中，约25％的胚芽是玉米油。被胚芽覆盖或包围的胚乳构成约82％的籽粒干重并且是种子萌发的能量(淀粉)和蛋白质来源。存在两种类型的胚乳，软胚乳和硬胚乳。在硬胚乳中，淀粉被紧紧地堆积在一起。在软胚乳中，淀粉是松散的。
碾磨(grind或grinding)：术语“碾磨”意指破坏果皮并打开作物籽粒的任何方法。
半纤维素分解酶或半纤维素酶：术语“半纤维素分解酶”或“半纤维素酶”意指一种或多种(例如，若干种)水解半纤维素材料的酶。参见例如，Shallom和Shoham,2003,CurrentOpinion In Microbiology[微生物学当前观点]6(3):219-228)。半纤维素酶是植物生物质的降解中的关键组分。半纤维素酶的实例包括但不限于乙酰基甘露聚糖酯酶、乙酰基木聚糖酯酶、阿拉伯聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、香豆酸酯酶、阿魏酸酯酶、半乳糖苷酶、葡糖醛酸糖苷酶、葡糖醛酸酯酶、甘露聚糖酶、甘露糖苷酶、木聚糖酶以及木糖苷酶。这些酶的底物半纤维素是支链和直链多糖的异质性组，其可以通过氢键与植物细胞壁中的纤维素微纤维相结合，交联成坚固的网络。半纤维素还共价附接至木质素，从而与纤维素一起形成高度复杂的结构。半纤维素的可变结构和组织要求许多酶的协同作用以使其完全降解。半纤维素酶的催化模块是水解糖苷键的糖苷水解酶(GH)，或是水解乙酸或阿魏酸侧基的酯键的碳水化合物酯酶(CE)。这些催化模块，基于其一级序列的同源性，可以分配到GH和CE家族。一些家族，具有总体上类似的折叠，可以进一步归类为宗族(clan)，以字母标记(例如，GH-A)。在碳水化合物活性酶(CAZy)数据库中可得到这些以及其他碳水化合物活性酶的最翔实和更新的分类。可以根据Ghose和Bisaria,1987,Pure&AppI.Chem.[纯粹与应用化学]59:1739-1752，在适合的温度(如40℃-80℃，例如40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、或80℃)以及适合的pH(如4-9，例如4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、或9.0)下测量半纤维素分解酶活性。
高度支链化的木聚糖：术语“高度支链化的木聚糖”意指在阿拉伯木聚糖主链中的超过50％的木糖单元是被取代的。这优选地从如在Huismann等人Carbohydrate Polymers[碳水化合物聚合物],2000,42:269-279中进行的连锁分析来计算。
宿主细胞：术语“宿主细胞”意指易于用包含本发明的多核苷酸的核酸构建体或表达载体转化、转染、转导等的任何细胞类型。术语“宿主细胞”涵盖由于复制过程中发生的突变而与亲本细胞不同的亲本细胞的任何后代。
分离的：术语“分离的”意指处于自然界中不存在的形式或环境中的物质。分离的物质的非限制性实例包括(1)任何非天然存在的物质；(2)包括但不限于任何酶、变体、核酸、蛋白质、肽或辅因子的任何物质，该物质至少部分地从与其本质相关的一种或多种或所有天然存在的成分中去除；(3)相对于在自然界中发现的物质通过人工修饰的任何物质；或(4)通过相对于与其天然相关的其他组分增加物质的量而修饰的任何物质(例如，宿主细胞中的重组产生；编码该物质的基因的多个拷贝；以及使用比与编码该物质的基因天然相关的启动子更强的启动子)。
研磨的：术语“研磨的”是指植物材料已经例如通过粉碎、分级、碾磨、磨碎等而被分解成更小的颗粒。
成熟多肽：术语“成熟多肽”意指在翻译和任何翻译后修饰如N-末端加工、C-末端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后处于其最终形式的多肽。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:8的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO:2的氨基酸-26至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:9的氨基酸1至302。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:11的氨基酸1至303，并且SEQ ID NO:11的氨基酸-26至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:12的氨基酸1至303。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:14的氨基酸1至382，并且SEQ ID NO:15的氨基酸-21至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:15的氨基酸1至382。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:17的氨基酸1至378，并且SEQ ID NO:17的氨基酸-17至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:18的氨基酸1至378。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:20的氨基酸1至311，并且SEQ ID NO:20的氨基酸-20至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:21的氨基酸1至311。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:23的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO:23的氨基酸-29至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:24的氨基酸1至302。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:26的氨基酸1至309，并且SEQ ID NO:26的氨基酸-16至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:27的氨基酸1至309。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:29的氨基酸1至438，并且SEQ ID NO:29的氨基酸-36至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:30的氨基酸1至438。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:32的氨基酸1至446，并且SEQ ID NO:32的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:33的氨基酸1至446。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:35的氨基酸1至438，并且SEQ ID NO:35的氨基酸-36至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:36的氨基酸1至438。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:38的氨基酸1至446，并且SEQ ID NO:38的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:39的氨基酸1至446。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:41的氨基酸1至318，并且SEQ ID NO:41的氨基酸-18至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:42的氨基酸1至318。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:44的氨基酸1至326，并且SEQ ID NO:44的氨基酸-18至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:45的氨基酸1至326。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:47的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO:47的氨基酸-25至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:48的氨基酸1至302。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:50的氨基酸1至311，并且SEQ ID NO:50的氨基酸-25至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:51的氨基酸1至311。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:53的氨基酸1至364，并且SEQ ID NO:53的氨基酸-24至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:54的氨基酸1至364。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:56的氨基酸1至373，并且SEQ ID NO:56的氨基酸-24至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:57的氨基酸1至373。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:59的氨基酸1至436，并且SEQ ID NO:59的氨基酸-31至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:60的氨基酸1至436。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:62的氨基酸1至444，并且SEQ ID NO:62的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:63的氨基酸1至444。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:65的氨基酸1至302，并且SEQ ID NO:65的氨基酸-19至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:66的氨基酸1至302。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:68的氨基酸1至311，并且SEQ ID NO:68的氨基酸-19至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:69的氨基酸1至311。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:77的氨基酸1至183，并且SEQ ID NO:77的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:78的氨基酸1至302。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:80的氨基酸1至181，并且SEQ ID NO:80的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:81的氨基酸1至181。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:83的氨基酸1至299，并且SEQ ID NO:83的氨基酸-42至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:84的氨基酸1至299。在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:86的氨基酸1至307，并且SEQ ID NO:86的氨基酸-27至-1是信号肽。在另一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:87的氨基酸1至307。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:117的氨基酸1至306，并且SEQ ID NO:117的氨基酸-26至-1是信号肽。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:118的氨基酸1至306，并且SEQ ID NO:118的氨基酸-26至-1是信号肽。
在一方面，该成熟多肽是SEQ ID NO:119的氨基酸1至300，并且SEQ ID NO:119的氨基酸-19至-1是信号肽。
在一方面，基于预测SEQ ID NO:96的氨基酸1至25是信号肽的SignalP3.0程序(Bendtsen等人,2004,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]340:783-795)，纤维二糖水解酶I的成熟多肽是SEQ ID NO:96的氨基酸26至532。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:98的氨基酸1至18是信号肽的SignalP3.0程序，纤维二糖水解酶II的成熟多肽是SEQ ID NO:98的氨基酸19至464。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:100的氨基酸1至19是信号肽的SignalP 3.0程序，β-葡糖苷酶的成熟多肽是SEQ ID NO:100的氨基酸20至863。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:102的氨基酸1至25是信号肽的SignalP 3.0程序，AA9多肽的成熟多肽是SEQ IDNO:102的氨基酸26至253。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:104的氨基酸1至20是信号肽的SignalP 3.0程序，GH10木聚糖酶的成熟多肽是SEQ ID NO:104的氨基酸21至405。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:106的氨基酸1至19是信号肽的SignalP 3.0程序，GH10木聚糖酶的成熟多肽是SEQ ID NO:106的氨基酸20至398。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:108的氨基酸1至21是信号肽的SignalP 3.0程序，β-木糖苷酶的成熟多肽是SEQ ID NO:108的氨基酸22至796。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:110的氨基酸1至22是信号肽的SignalP 3.0程序，内切葡聚糖酶I的成熟多肽是SEQ ID NO:110的氨基酸23至459。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:112的氨基酸1至21是信号肽的SignalP 3.0程序，内切葡聚糖酶II的成熟多肽是SEQ ID NO:112的氨基酸22至418。在一方面，基于预测SEQ ID NO:114的氨基酸1至26是信号肽的SignalP 3.0程序(Bendtsen等人,2004,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]340:783-795)，烟曲霉纤维二糖水解酶I的成熟多肽是SEQ ID NO:114的氨基酸27至532。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:116的氨基酸1至19是信号肽的SignalP 3.0程序，烟曲霉纤维二糖水解酶II的成熟多肽是SEQ ID NO:116的氨基酸20至454。
本领域已知，宿主细胞可以产生由相同多核苷酸表达的两种或更多种不同成熟多肽(即，具有不同C-末端和/或N-末端氨基酸)的混合物。本领域还已知，不同的宿主细胞不同地加工多肽，并且因此一个表达多核苷酸的宿主细胞当与另一个表达相同多核苷酸的宿主细胞相比时可以产生不同的成熟多肽(例如，具有不同的C-末端和/或N-末端氨基酸)。
成熟多肽编码序列：术语“成熟多肽编码序列”意指编码成熟多肽的多核苷酸。在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:10的核苷酸79至987，并且SEQ ID NO:10的核苷酸1至78编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:25的核苷酸49至70和核苷酸123至1027的结合序列或其cDNA序列，并且SEQ ID NO:25的核苷酸1至48编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:28的核苷酸109至1422，并且SEQ IDNO:28的核苷酸1至108编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:31的核苷酸82至1419，并且SEQ IDNO:31的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:34的核苷酸109至1422，并且SEQ IDNO:34的核苷酸1至108编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:37的核苷酸82至1419，并且SEQ IDNO:37的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:46的核苷酸76至981，并且SEQ IDNO:46的核苷酸1至75编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:49的核苷酸76至1008，并且SEQ IDNO:49的核苷酸1至75编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:52的核苷酸73至318、核苷酸470至1298和核苷酸1392至1408的结合序列，并且SEQ ID NO:52的核苷酸1至72编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:55的核苷酸73至318、核苷酸470至1298和核苷酸1392至1435的结合序列，并且SEQ ID NO:55的核苷酸1至72编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:58的核苷酸94至1401，并且SEQ IDNO:58的核苷酸1至93编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:61的核苷酸82至1413，并且SEQ IDNO:61的核苷酸1至81编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:64的核苷酸58至330、核苷酸403至655、核苷酸795至948和核苷酸1100至1325的结合序列，并且SEQ ID NO:64的核苷酸1至57编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:67的核苷酸58至330、核苷酸403至655、核苷酸795至948和核苷酸1100至1352的结合序列，并且SEQ ID NO:67的核苷酸1至57编码信号肽。
在一方面，该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:83的核苷酸127至1023，并且SEQ IDNO:83的核苷酸1至126编码信号肽。
在一方面，基于预测SEQ ID NO:95的核苷酸1至75编码信号肽的SignalP 3.0程序(Bendtsen等人,2004，见上文)，纤维二糖水解酶I的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:95的核苷酸76至1727或其cDNA序列。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:97的核苷酸1至54编码信号肽的SignalP 3.0程序，纤维二糖水解酶II的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:97的核苷酸55至1895或其cDNA序列。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:99的核苷酸1至57编码信号肽的SignalP 3.0程序，β-葡糖苷酶的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:99的核苷酸58至3057或其cDNA序列。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:101的核苷酸1至75编码信号肽的SignalP3.0程序，AA9多肽的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:101的核苷酸76至832或其cDNA序列。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:103的核苷酸1至123编码信号肽的SignalP3.0程序，GH10木聚糖酶的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:103的核苷酸124至1517或其cDNA序列。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:105的核苷酸1至57编码信号肽的SignalP 3.0程序，GH10木聚糖酶的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:105的核苷酸58至1194。在另一方面，基于预测SEQ IDNO:107的核苷酸1至63编码信号肽的SignalP 3.0程序，β-木糖苷酶的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:107的核苷酸64至2388。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:109的核苷酸1至66编码信号肽的SignalP 3.0程序，内切葡聚糖酶I的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:109的核苷酸67至1504或其cDNA序列。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:111的核苷酸1至63编码信号肽的SignalP 3.0程序，内切葡聚糖酶II的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:111的核苷酸64至1504。在一方面，基于预测SEQ ID NO:113的核苷酸1至78编码信号肽的SignalP 3.0程序(Bendtsen等人,2004，见上文)，烟曲霉纤维二糖水解酶I的成熟多肽编码序列是SEQ IDNO:113的79至1596。在另一方面，基于预测SEQ ID NO:115的核苷酸1至57编码信号肽的SignalP 3.0程序，烟曲霉纤维二糖水解酶II的成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:115的核苷酸58至1700或其cDNA序列。
核酸构建体：术语“核酸构建体”意指单链-或双链的核酸分子，该核酸分子是从天然存在的基因中分离的，或以本来不存在于自然界中的方式被修饰成包含核酸的区段，或是合成的，该核酸分子包含一个或多个控制序列。
寡糖：术语“寡糖”是具有2至10个单糖单位的化合物。
可操作地连接：术语“可操作地连接”意指将控制序列相对于多核苷酸的编码序列安置在适当位置这样使得该控制序列指导该编码序列的表达的构型。
蛋白酶：术语“蛋白水解酶”或“蛋白酶”意指一种或多种(例如，若干种)酶，其通过水解多肽链中将氨基酸连接在一起的肽键而分解蛋白质的酰胺键。蛋白酶可以包括例如金属蛋白酶、胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶样丝氨酸蛋白酶、和天冬氨酸蛋白酶。
序列一致性：用参数“序列一致性”来描述两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的相关性。
出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS:The European MolecularBiology Open Software Suite[EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件]，Rice等人,2000,Trends Genet.[遗传学趋势],16:276-277)(优选3.0.0版或更新版本)的尼德尔(Needle)程序中所实施的尼德尔曼-翁施(Needleman-Wunsch)算法(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列一致性的程度。使用版本6.1.0。所用的可选参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、和EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版)替代矩阵。尼德尔标注的“最长的一致性”的输出(使用-非简化选项获得)被用作百分比一致性，并且如下计算：
(相同的残基x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)。
出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件，Rice等人,2000，见上文)(优选3.0.0版或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德尔曼-翁施算法(Needleman和Wunsch,1970，见上文)来确定两个脱氧核糖核苷酸序列之间的序列一致性的程度。使用版本6.1.0。所用的任选参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、和EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版)替代矩阵。尼德尔标注的“最长的一致性”的输出(使用-非简化选项获得)被用作百分比一致性，并且如下计算：
(相同的脱氧核糖核苷酸x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)。
淀粉：术语“淀粉”意指由植物的复杂多糖构成、由广泛出现在植物组织中的呈贮藏粒形式的葡萄糖单元构成、由直链淀粉和支链淀粉组成且表示为(C6H10O5)n(其中n是任何数字)的任何材料。
浸渍(steep或steeping)：术语“浸渍”意指用水以及任选地SO2浸泡作物籽粒。
严格条件：不同的严格条件定义如下。
术语“非常低严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和25％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在60℃下使用2.0X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“低严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和25％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在60℃下使用1.0X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“中严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和35％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在65℃下使用1.0X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“中高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑精DNA和35％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在70℃下使用1.0X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和50％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在70℃下使用0.5X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“非常高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃下在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和50％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在75℃下使用0.5X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
子序列：术语“子序列”意指从成熟多肽编码序列的5'端和/或3'端缺失一个或多个(例如，若干个)核苷酸的多核苷酸；其中该子序列编码具有阿拉伯呋喃糖苷酶或木聚糖酶活性的片段。
基本上纯的多肽：术语“基本上纯的多肽”意指这样一种制剂，该制剂包含与其天然关联或重组关联的按重量计至多10％、至多8％、至多6％、至多5％、至多4％、至多3％、至多2％、至多1％、以及至多0.5％的其他多肽材料。优选地，该多肽按存在于制剂中的总多肽材料的重量计是至少92％纯的，例如至少94％纯的、至少95％纯的、至少96％纯的、至少97％纯的、至少98％纯的、至少99％纯的、至少99.5％纯的、以及100％纯的。本发明的多肽优选处于基本上纯的形式。例如，这可以通过采用熟知的重组方法或采用经典的纯化方法制备多肽来实现。
变体：术语“变体”意指在一个或多个(若干个)位置包含改变(即，一个或多个(若干个)氨基酸残基的取代、插入和/或缺失)的具有木聚糖酶或阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽。取代意指将占据一个位置的氨基酸用不同的氨基酸置换；缺失意指去除占据一个位置的氨基酸；并且插入意指邻近占据一个位置的氨基酸添加1-3个氨基酸。
湿磨益处：术语“湿磨益处”意指改进的淀粉产量和/或纯度，改进的面筋品质和/或产量，改进的纤维、面筋或浸渍水过滤、脱水和蒸发，更容易地分离胚芽和/或更好的糖化后过滤及其过程能源节约中的一种或多种。
木聚糖降解活性或木聚糖分解活性：术语“木聚糖降解活性”或“木聚糖分解活性”意指水解含有木聚糖的材料的生物活性。用于测量木聚糖分解活性的两种基本方法包括：(1)测量总木聚糖分解活性，以及(2)测量单独的木聚糖分解活性(例如，内切木聚糖酶、β-木糖苷酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、α-葡糖醛酸糖苷酶、乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、和α-葡糖醛酸酯酶)。木聚糖分解酶的测定的最近进展总结于若干出版物中，这些出版物包括Biely和Puchard,2006,Journal of the Science of Food and Agriculture[食品与农业科学杂志]86(11):1636-1647；Spanikova和Biely,2006,FEBS Letters[欧洲生化学会联合会快报]580(19):4597-4601；Herrimann等人,1997,Biochemical Journal[生物化学杂志]321:375-381。
可以通过确定由不同类型的木聚糖(包括例如燕麦木聚糖、山毛榉木材木聚糖、和落叶松木材木聚糖)形成的还原糖，或者通过光度确定从不同共价染色的木聚糖释放的染色的木聚糖片段来测量总木聚糖降解活性。常见的总木聚糖分解活性测定是基于由聚合4-O-甲基葡糖醛酸木聚糖产生还原糖，如描述于Bailey等人,1992,Interlaboratorytesting of methods for assay of xylanase activity[用于木聚糖酶活性测定的多个实验室测试方法],Journal of Biotechnology[生物技术杂志]23(3):257-270中。木聚糖酶活性还可以在37℃下在0.01％X-100和200mM磷酸钠(pH 6)中用0.2％AZCL-阿拉伯糖基木聚糖作为底物来测定。一个单位的木聚糖酶活性定义为在37℃、pH 6下，在200mM磷酸钠(pH 6)中从作为底物的0.2％AZCL-阿拉伯糖基木聚糖每分钟产生1.0微摩尔天青蛋白。
木聚糖降解活性可以通过测量由一种或多种木聚糖降解酶在以下典型条件下造成的桦木木聚糖(西格玛化学有限公司(Sigma Chemical Co.,Inc.)，圣路易斯，密苏里州，美国)水解的增加来测定：1ml反应，5mg/ml底物(总固体)，5mg木聚糖分解蛋白质/g底物，50mM乙酸钠(pH 5)，50℃，24小时，如Lever,1972,Anal.Biochem.[分析生物化学]47:273-279所述使用对羟基苯甲酸酰肼(PHBAH)测定进行糖分析。
木聚糖酶：术语“木聚糖酶”意指一种1,4-β-D-木聚糖-木糖水解酶(1,4-β-D-xylan-xylohydrolase)(E.C.3.2.1.8)，其催化木聚糖中1,4-β-D-木糖苷键的内部水解。木聚糖酶活性可以在37℃下在0.01％X-100和200mM磷酸钠(pH 6)中用0.2％AZCL-阿拉伯糖基木聚糖作为底物来测定。一个单位的木聚糖酶活性定义为在37℃、pH 6下，在200mM磷酸钠(pH 6)中从作为底物的0.2％AZCL-阿拉伯糖基木聚糖每分钟产生1.0微摩尔天青蛋白。
命名法
出于本发明的目的，命名[Y/F]意指在该位置处的氨基酸可以是酪氨酸(Try，Y)或苯丙氨酸(Phe，F)。同样，如在此所述，命名[V/G/A/I]意指在该位置处的氨基酸可以是缬氨酸(Val，V)、甘氨酸(Gly，G)、丙氨酸(Ala，A)或异亮氨酸(Ile，I)，对于如在此所述的其他组合，依次类推。除非进一步另有限制，氨基酸X被这样定义，使得它可以是20种天然氨基酸中的任一种。
具体实施方式
因此，本发明的目的在于提供处理作物籽粒的改进方法，以提供具有高品质的淀粉。
在一个实施例中，有用于本发明的方法的酶组合物提供以下益处，包括改进淀粉产量和/或纯度，改进面筋品质和/或产量，改进纤维、面筋或浸渍水过滤、脱水和蒸发，更容易地分离胚芽和/或更好的糖化后过滤及其过程能源节约。
此外，诸位发明人已经出人意料地发现，由于将淀粉和蛋白质两个级分都与纤维级分更好地分离，根据本发明有用的酶提供了减少的纤维质量和较低蛋白含量的纤维。将淀粉和面筋与纤维分离对于工业而言是有价值的，因为纤维是湿磨方法中价值最低的产品，并且较高纯度的淀粉和蛋白质是令人希望的。
出人意料地，诸位发明人已经发现，替换酶组合物中的一些蛋白酶活性可以提供优于仅主要包含蛋白酶活性的另外的类似组合物的改进。这例如可以在成本和易用性的基础上为工业提供益处。
研磨方法
研磨籽粒，以便打开结构并且允许进一步加工并且将籽粒分离成四种主要成分：淀粉、胚芽、纤维以及蛋白质。
在一个实施例中，使用湿磨方法。湿磨使胚芽与粗粉(淀粉颗粒和蛋白质)很好分离并且时常应用于平行生产糖浆的场所。
本发明的诸位发明人已经出人意料地发现，可以通过在如在此描述的方法中处理作物籽粒而改进淀粉终产物的品质。
本发明的方法与传统方法相比，产生了更高的淀粉品质，因为淀粉终产物更纯和/或获得了更高的产量和/或使用更少的加工时间。另一种优势可以是可以减少需要使用的化学品(例如SO2和NaHSO3)的量或甚至完全除去。
湿磨
淀粉是在植物细胞内作为不溶于水的微小颗粒形式而形成。当放入冷水中时，这些淀粉颗粒可以吸收少量的液体并膨胀。在高达约50℃至75℃的温度下，膨胀可以是可逆的。然而，在更高温度下，开始不可逆膨胀，称为“糊化”。有待根据本发明加工的颗粒状淀粉可以是包含粗淀粉的材料，该材料包括(例如，研磨的)全谷物，这些全谷物包括非淀粉级分，如胚芽残余物和纤维。可以例如通过湿磨将原料(如全谷物)的粒度减小，以便打开结构并允许进一步加工。湿磨使胚芽与粗粉(淀粉颗粒和蛋白质)很好分离并且时常应用于在例如糖浆的生产中使用淀粉水解物的场所。
在一个实施例中，粒度被减小至0.05-3.0mm、优选0.1-0.5mm之间，或使得至少30％、优选至少50％、更优选至少70％、甚至更优选至少90％的含淀粉材料适合通过具有0.05-3.0mm筛网、优选0.1-0.5mm筛网的筛子。
更具体而言，将玉米籽粒以及其他作物籽粒降解为适于将淀粉转化为单糖和寡糖、乙醇、甜味剂等的淀粉基本由四个步骤组成：
1.浸渍并分离胚芽，
2.洗涤纤维并干燥，
3.分离淀粉面筋，并且
4.洗涤淀粉。
1.浸渍并分离胚芽
通过在约50℃(例如约45℃至60℃之间)的温度下，在水中浸泡约30分钟至约48小时(优选30分钟至约15小时，如约1小时至约6小时)之间而软化玉米籽粒。在浸渍过程中，籽粒吸水，从而将其水分含量从15％增加至45％并使大小增加超过一倍。任选地向水中添加例如0.1％二氧化硫(SO2)和/或NaHSO3以防止细菌在温暖环境中生长。随着玉米膨胀并软化，浸渍水的温和酸度开始使玉米内的面筋键松散并释放淀粉。在将玉米籽粒浸渍后，它们裂了开来，以释放胚芽。胚芽包含有价值的玉米油。基本上通过使不含其他物质的胚芽段在密切受控的条件下“漂浮(floating)”而将胚芽与淀粉、外壳和纤维的较重密度的混合物分离。这一方法用于消除痕量的玉米油在后面的加工步骤中的任何不利影响。
在本发明的一个实施例中，于范围在40℃与60℃之间的温度(优选大约50℃)下，将籽粒在水中浸泡2-10小时、优选约3-5小时。
在一个实施例中，在浸泡过程中可以添加0.01％-1％、优选0.05％-0.3％、尤其是0.1％SO2和/或NaHSO3。
2.洗涤纤维并干燥
为了得到最大的淀粉回收同时将终产物中的任何纤维保持至绝对最小值，在加工过程中必须从纤维中洗涤出游离淀粉。收集纤维，并使其成浆并过筛，以回收任何残留的淀粉或蛋白质。
3.分离淀粉面筋
将来自纤维洗涤步骤的淀粉-面筋悬浮液(称作研磨淀粉)分离成淀粉和面筋。与淀粉相比，面筋具有较低的密度。通过使研磨淀粉穿过离心机而容易地旋出面筋。
4.洗涤淀粉
来自淀粉分离步骤的淀粉浆液包含一些不溶性蛋白质和许多的可溶物。在可以生产顶级品质的淀粉(高纯度淀粉)之前，必须将其除去。在水力旋流器中，将仅仅剩余1％或2％蛋白质的淀粉稀释，洗涤8至14次，重新稀释并再次洗涤，以除去最后痕量的蛋白质并产生高品质淀粉，典型地纯度大于99.5％。
产物
可以使用湿磨生产(但不限于)玉米浆、玉米面筋饲料、胚芽、玉米油、玉米面筋粉、玉米淀粉、改性玉米淀粉、糖浆(例如玉米糖浆)、以及玉米乙醇。
具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽
下文披露了本发明的方面的优选实施例，涉及具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽。在2015年1月19日提交的PCT/CN2015/071015中发现了具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的优选GH62多肽的另外的细节。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:9具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:11的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:12具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:14的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:15具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:17的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:18具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:20的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:21具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:23的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:24具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:26的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:27具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:29的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:30具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:35的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:36具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:41的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:42具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:47的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:48具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:53的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:54具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:59的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:60具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在另一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:65的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:66具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:117具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽与SEQ ID NO:118具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
多肽的来源
本发明的具有阿拉伯呋喃糖苷酶或木聚糖酶活性的多肽可以从任何属的微生物中获得。出于本发明的目的，如在此结合给定来源使用的术语“从……获得”应当意指由多核苷酸编码的多肽是由该来源或由已经插入了来自该来源的多核苷酸的菌株产生的。在一方面，获得自给定来源的多肽被分泌到细胞外。
该多肽可以是真菌多肽。在一个实施例中，该多肽来自散囊菌目的真菌，或来自曲霉科，或来自青霉属，或来自以下物种：黄灰青霉(Penicillium aurantiogriseum)、草酸青霉或胶囊青霉(Penicillium capsulatum)。
在一个实施例中，该多肽来自散囊菌目的真菌，或来自曲霉科，或来自曲霉属，或来自以下物种：棒曲霉(Aspergillus clavatus)或温特曲霉(Aspergillus wentii)或黑曲霉。
在一个实施例中，该多肽来自散囊菌目的真菌，或来自曲霉科，或来自新萨托菌属(Neosartorya)，或来自以下物种：费希新萨托菌(Neosartorya fischeri)。
在一个实施例中，该多肽来自散囊菌目的真菌，或来自发菌科，或来自篮状菌属(Talaromyces)，或来自以下物种：褐红篮状菌(Talaromyces pinophilus)。
在一个实施例中，该多肽来自黑粉菌目(Ustilaginales)的真菌，或来自黑粉菌科(Ustilaginaceae)，或来自黑粉菌属(Ustilago)，或来自以下物种：玉蜀黍黑粉菌(Ustilago maydis)。
在一个实施例中，该多肽来自子囊菌门的真菌，或来自端梗孢属(Acrophialophora)，或来自以下物种：梭孢端梗霉(Acrophialophora fusispora)。
该多肽可以是细菌多肽。在一个实施例中，该多肽来自放线菌目的细菌，或来自链霉菌科，或来自链霉菌属，或来自以下物种：硝孢链霉菌(Streptomyces nitrosporeus)或北疆链霉菌(Streptomyces beijiangensis)。
在一个实施例中，该多肽来自放线菌目的细菌，或来自链孢子囊菌科，或来自链孢子囊菌属，或来自以下物种：链孢囊菌属物种-60756。
将理解的是，对于以上提到的物种，本发明涵盖完全状态和不完全状态(perfectand imperfect states)二者、以及其他分类学等效物，例如无性型，而不管它们已知的物种名称。本领域的技术人员将容易地识别适当等效物的身份。
这些物种的菌株可容易地在许多培养物保藏中心为公众所获得，如美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)、德国微生物和细胞培养物保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH，DSMZ)、荷兰菌种保藏中心(Centraalbureau Voor Schimmelcultures，CBS)以及美国农业研究服务专利培养物保藏中心北方地区研究中心(Agricultural Research Service Patent CultureCollection,Northern Regional Research Center,NRRL)。
可以使用以上提到的探针从其他来源，包括从自然界(例如，土壤、堆肥、水等)分离的微生物或直接从天然材料(例如，土壤、堆肥、水等)获得的DNA样品鉴定和获得该多肽。用于从天然生境中直接分离微生物和DNA的技术是本领域已知的。然后可以通过类似地筛选另一微生物的基因组DNA或cDNA文库或混合的DNA样品来获得编码该多肽的多核苷酸。一旦已经用探针检测到编码多肽的多核苷酸，便可以通过利用本领域普通技术人员所知的技术(参见例如，Sambrook等人,1989，见上文)分离或克隆多核苷酸。
酶组合物
优选地，这些组合物富含根据本发明有用的多肽。术语“富含”表示，组合物的酶活性已经增加，例如富集因子为至少1.1，例如至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少2.0、至少3.0、至少4.0、至少5.0、至少10。在一个实施例中，该组合物包括本发明第一方面的多肽和一种或多种调配剂，如在下文“调配剂”部分中所述。
这些组合物可以包括本发明的多肽作为主要酶组分，例如单组分组合物。这样的组合物可以进一步包括调配剂，如在以下“调配剂”部分中所述。可替代地，这些组合物可以包括多种酶活性，如一种或多种(例如，若干种)选自下组的酶，该组由以下组成：植酸酶、木聚糖酶、半乳聚糖酶、α-半乳糖苷酶、蛋白酶、磷脂酶、葡糖苷酸酶、溶血磷脂酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶、内切-1,4-β-木聚糖酶乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、纤维素酶、纤维二糖水解酶、β-糖苷酶、支链淀粉酶或其任何混合物。如下文进一步概述的，另外的纤维素分解活性是特别考虑的。
在考虑阿拉伯呋喃糖苷酶和木聚糖酶活性的情况下，目前考虑，按以下量(剂量范围)中的一个或多个使用木聚糖酶：0.01-200；0.05-100；0.1-50；0.2-20；0.1-1；0.2-2；0.5-5；或1-10，其中所有这些范围都是每kg底物中木聚糖酶蛋白的mg数(ppm)。目前考虑，按以下量(剂量范围)中的一个或多个施用阿拉伯呋喃糖苷酶：0.01-200；0.05-100；0.1-50；0.2-20；0.1-1；0.2-2；0.5-5；或1-10，其中所有这些范围都是每kg底物中阿拉伯呋喃糖苷酶蛋白的mg数(ppm)。进一步考虑，GH10或GH11木聚糖酶与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶的比例是在100:1至1:100的木聚糖酶:阿拉伯呋喃糖苷酶的范围内，如50:1至1:50、50:1至1:10、25:1至1:5、10:1至1:2或如10:1至1:50、5:1至1:25、2:1至1:10的木聚糖酶:阿拉伯呋喃糖苷酶的范围。
调配剂
本发明的酶可以配制为液体或固体。针对液体配制品，该调配剂可以包括多元醇(像例如，甘油、乙二醇或丙二醇)、盐(像例如，氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾)或糖或糖衍生物(像例如，糊精、葡萄糖、蔗糖、和山梨醇)。因此，在一个实施例中，该组合物是一种液体组合物，该液体组合物包括本发明的多肽和一种或多种选自以下列表的调配剂，该列表由以下组成：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、糊精、葡萄糖、蔗糖、和山梨醇。
针对固体配制品，该配制品可以是例如作为颗粒、喷雾干粉或聚结物。调配剂可以包括盐(有机的或无机的锌、钠、钾或钙盐，像例如，如乙酸钙、苯甲酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、山梨酸钙、硫酸钙、乙酸钾、苯甲酸钾、碳酸钾、氯化钾、柠檬酸钾、山梨酸钾、硫酸钾、乙酸钠、苯甲酸钠、碳酸钠、氯化钠、柠檬酸钠、硫酸钠、乙酸锌、苯甲酸锌、碳酸锌、氯化锌、柠檬酸锌、山梨酸锌、硫酸锌)、淀粉或糖或糖衍生物(像例如，蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇)。
在一个实施例中，该固体组合物是处于颗粒形式。该颗粒可以具有基体结构(matrix structure)，其中组分是均匀混合的。然而，该颗粒典型地包括核心颗粒和一种或多种包衣，该包衣典型地是盐的和/或蜡质的包衣。该核心颗粒可以是任选地与一种或多种另外的酶组合的本发明的木聚糖酶并且任选地连同一种或多种盐的均匀共混物，抑或是惰性颗粒(具有本发明的木聚糖酶，该木聚糖酶任选地与施加到其上的一种或多种另外的酶组合)。
在一个实施例中，核心颗粒的材料选自下组，该组由以下组成：无机盐(如乙酸钙、苯甲酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、山梨酸钙、硫酸钙、乙酸钾、苯甲酸钾、碳酸钾、氯化钾、柠檬酸钾、山梨酸钾、硫酸钾、乙酸钠、苯甲酸钠、碳酸钠、氯化钠、柠檬酸钠、硫酸钠、乙酸锌、苯甲酸锌、碳酸锌、氯化锌、柠檬酸锌、山梨酸锌、硫酸锌)、淀粉或糖或糖衍生物(像例如，蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇)、糖或糖衍生物(像例如，蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇)、有机小分子、淀粉、面粉、纤维素和矿物质。
盐包衣典型地至少是1μm厚并且可以是一种具体的盐或多种盐的混合物，例如Na2SO4、K2SO4、MgSO4和/或柠檬酸钠。其他实例是在例如WO 2008/017659、WO 2006/034710、WO 1997/05245、WO 1998/54980、WO 1998/55599、WO 2000/70034中描述的那些，或是例如在WO 2001/00042中描述的聚合物包衣。
在另一个实施例中，该组合物是一种固体组合物，该固体组合物包括本发明的木聚糖酶和一种或多种选自以下列表的调配剂，该列表由以下组成：氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个优选的实施例中，该调配剂选自以下化合物中的一种或多种：硫酸钠、糊精、纤维素、硫代硫酸钠和碳酸钙。在一个优选的实施例中，该固体组合物是处于颗粒形式。在一个实施例中，该固体组合物是处于颗粒形式，并且包括核心颗粒、包含本发明的木聚糖酶的酶层以及盐包衣。
在另外的实施例中，该调配剂选自以下化合物中的一种或多种：甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个优选的实施例中，该调配剂选自以下化合物中的一种或多种：1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、硫酸钠、糊精、纤维素、硫代硫酸钠和碳酸钙。
来自黍亚科的基于植物的材料
在一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料来自蜀黍族，如级别须芒草属(Andropogon)或翼颖草属(Andropterum)或水蔗草属(Apluda)或楔颖草属(Apocopis)或荩草属(Arthraxon)或孔颖草属(Bothriochloa)或细柄草属(Capillipedium)或葫芦草属(Chionachne)或金须草属(Chrysopogon)或空轴茅属(Coelorachis)或薏苡属(Coix)或香茅属(Cymbopogon)或双花草属(Dichanthium)或双黄茅属(Diheteropogon)或觿茅属(Dimeria)或香鳞茅属(Elionurus)或娱蚣草属(Eremochloa)或优解草属(Euclasta)或金茅属(Eulalia)或吉曼草属(Germainia)或牛鞭草属(Hemarthria)或异蛇尾草属(Heteropholis)或黄茅属(Heteropogon)或苞芽属(Hyparrhenia)或金苞茅属(Hyperthelia)或白茅属(Imperata)或鸭嘴草属(Ischaemum)或合穗茅属(Iseilema)或泰蔗草属(Kerriochloa)或莠竹属(Microstegium)或芒羽藓属(Miscanthidium)或芒属或毛俭草属(Mnesithea)或蛇尾草属(Ophiuros)或偏基草属(Oxyrhachis)或束尾草属(Phacelurus)或蜥尾禾属(Pholiurus)或金丝草属(Pogonatherum)或多裔草属(Polytoca)或单序草属(Polytrias)或假金发草属(Pseudopogonatherum)或假高粱属(Pseudosorghum)或皱颖草属(Rhytachne)或筒轴茅属(Rottboellia)或甘蔗属(Saccharum)或针粱草属(Sarga)或裂稃草属(Schizachyrium)或沟颖草属(Sehima)或假高粱属(Sorghastrum)或高粱属(Sorghum)或大油芒属(Spodiopogon)或假蛇尾草属(Thaumastochloa)或疣颖草属(Thelepogon)或菅草属(Themeda)或皱芒草属(Trachypogon)或荻属(Triarrhena)或摩擦草属(Tripsacum)或尾鳞草属(Urelytrum)或香根草属(Vetiveria)或河马草属(Vossia)或旱米草属(Xerochloa)或玉蜀黍属(Zea)。
在一个优选的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料来自玉蜀黍属级别，如以下物种：二倍体多年生类玉米(Zea diploperennis)、繁茂类玉米(Zea luxurians)、玉蜀黍(Zea mays)、尼加拉瓜类玉米(Zea nicaraguensis)或四倍体多年生类玉米(Zeaperennis)。
在一个优选的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料来自高粱属级别，如以下物种：阔叶高粱(Sorghum amplum)、狭叶高粱(Sorghum angustum)、澳大利亚高粱(Sorghumaustraliense)、双色高粱(Sorghum bicolor)、短柄高粱(Sorghum brachypodum)、球茎高粱(Sorghum bulbosum)、龙骨状高粱(Sorghum ecarinatum)、外鞘柄高粱(Sorghumexstans)、格兰德高粱(Sorghum grande)、假高粱(Sorghum halepense)、高粱杂种栽培品种、中间高粱(Sorghum interjectum)、非可迁黍(Sorghum intrans)、疏花高粱(Sorghumlaxiflorum)、利奥克拉德高粱(Sorghum leiocladum)、巨籽高粱(Sorghummacrospermum)、麦特粒高粱(Sorghum matarankense)、光高粱(Sorghum nitidum)、羽状高粱(Sorghum plumosum)、拟高梁(Sorghum propinquum)、紫绢毛高粱(Sorghumpurpureosericeum)、针茅高粱(Sorghum stipoideum)、苏丹草(Sorghum sudanense)、帝汶高粱(Sorghum timorense)、多色高粱(Sorghum versicolor)、高粱属物种(Sorghum sp.)“西尔克”(‘Silk’)、或如WO2007/002267中所定义的高粱属物种。
在另一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料来自黍族，如级别缠芒草属(Acritochaete)、凤头黍属(Acroceras)、Alexfloydia、毛颖草属(Alloteropsis)、姬苇属(Amphicarpum)、钩穗草属(Ancistrachne)、瓶刷草属(Anthephora)、臂形草属(Brachiaria)、纤隐草属(Calyptochloa)、蒺藜草属(Cenchrus)、髯柄草属(Chaetium)、鬃禾属(Chaetopoa)、鬃针茅属(Chamaeraphis)、绿兜草属(Chlorocalymma)、蔺隐草属(Cleistochloa)、拱稃草属(Cyphochlaena)、弓果黍属(Cyrtococcum)、二型花属(Dichanthelium)、马唐属(Digitaria)、假狗尾草属(Dissochondrus)、稗草属(Echinochloa)、内毛草属(Entolasia)、野黍属(Eriochloa)、同鳞虎属(Homopholis)、水鞭草属(Hygrochloa)、林行黍属(Hylebates)、火鸡草属(Ixophorus)、小芦竹属(Lasiacis)、玉毛虫属(Leucophrys)、泥稗属(Louisiella)、长颖马唐属(Megaloprotachne)、大序黍属(Megathyrsus)、糖蜜草属(Melinis)、新小竹属(Microcalamus)、Moorochloa、脉颖草属(Neurachne)、水斗草属(Odontelytrum)、球米草属(Oplismenus)、露籽草属(Ottochloa)、黍属(Panicum)、秃刷草属(Paractaenum)、异脉颖草属(Paraneurachne)、隐鬃草属(Paratheria)、Parodiophyllochloa、类雀稗属(Paspalidium)、狼尾草属(Pennisetum)、鬃刷草属(Plagiosetum)、灿穗黍属(Poecilostachys)、钩毛草属(Pseudechinolaena)、枝狼草属(Pseudochaetochloa)、伪针茅属(Pseudoraphis)、Rupichloa、囊颖草属(Sacciolepis)、盾颖黍属(Scutachne)、狗尾草属(Setaria)、坚狗尾草属(Setariopsis)、胁穗草属(Snowdenia)、滨刺草属(Spinifex)、钝叶草属(Stenotaphrum)、芒马唐属(Stereochlaena)、交雀草属(Thrasya)、萏雷草属(Thuarea)、窗颖草属(Thyridolepis)、贫地黍属(Tricholaena)、未归类的黍、节鞭草属(Uranthoecium)、尾稃草属(Urochloa)、Walwhalleya、丝梗黍属(Whiteochloa)、柱梗黍属(Yakirra)、弱臂草属(Yvesia)、Zuloagaea或沙芜草属(Zygochloa)。
在一个优选的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料来自黍属级别，如以下物种：紫茎黍(Panicum adenophorum)、尖头黍(Panicum aff.Aquaticum)JKT-2012、苦黍(Panicum amarum)、蓝黍(Panicum antidotale)、粉绿黍(Panicum aquaticum)、天栌黍(Panicum arctum)、筒节黍(Panicum arundinariae)、暗红黍(Panicum atrosanguineum)、奥里科姆黍(Panicum auricomum)、折萼黍(Panicum auritum)、巴氏黍(Panicumbartlettii)、伯氏黍(Panicum bergii)、糠稷(Panicum bisulcatum)、勃氏黍(Panicumboliviense)、布拉柴维尔黍(Panicum brazzavillense)、短叶黍(Panicum brevifolium)、卡瓜苏黍(Panicum caaguazuense)、坎佩斯特雷黍(Panicum campestre)、毛绒稷(Panicumcapillare)、卡宴恩瑟黍(Panicum cayennense)、卡约恩瑟黍(Panicum cayoense)、塞尔维黍(Panicum cervicatum)、绿亮状黍(Panicum chloroleucum)、克氏黍(Panicumclaytonii)、着色黍(Panicum coloratum)、暗蓝黍(Panicum cyanescens)、多籽黍(Panicum decompositum)、焦色黍(Panicum deustum)、洋野黍(Panicumdichotomiflorum)、细叶黍(Panicum dinklagei)、黄藓黍(Panicum distichophyllum)、藤黍(Panicum dregeanum)、象脚黍(Panicum elephantipes)、傅氏黍(Panicum fauriei)、柔性黍(Panicum flexile)、弗吕科拉黍(Panicum fluviicola)、铺地黍(Panicum gouinii)、细长黍(Panicum gracilicaule)、广东黍(Panicum granuliferum)、危地马拉黍(Panicumguatemalense)、霍氏黍(Panicum hallii)、杂多穗黍(Panicum heterostachyum)、腺毛茎黍(Panicum hirticaule)、恶味黍(Panicum hirtum)、雨林黍(Panicum hylaeicum)、背倚黍(Panicum incumbens)、致病黍(Panicum infestum)、意大利黍(Panicum italicum)、光泽黍(Panicum laetum)、光滑节点黍(Panicum laevinode)、绵柄黍(Panicum lanipes)、拉科尼亚黍(Panicum larcomianum)、长梗黍(Panicum longipedicellatum)、町田黍(Panicum machrisianum)、软毛黍(Panicum malacotrichum)、珠黍(Panicummargaritiferum)、硬叶黍(Panicum micranthum)、猪粟(Panicum miliaceum)、多花黍(Panicum milioides)、粒结节黍(Panicum millegrana)、神秘黍(Panicum mystasipum)、纳塔莱黍(Panicum natalense)、霞石黍(Panicum nephelophilum)、多脉黍(Panicumnervosum)、心叶稷(Panicum notatum)、奥格罗黍(Panicum olyroides)、水生黍(Panicumpaludosum)、扩展黍(Panicum pansum)、周毛黍(Panicum pantrichum)、小叶黍(Panicumparvifolium)、铃珑黍(Panicum parviglume)、佩氏黍(Panicum pedersenii)、潘氏黍(Panicum penicillatu)、彼氏黍(Panicum petersonii)、苇状黍(Panicumphragmitoides)、皮奥伊州黍(Panicum piauiense)、疏毛黍(Panicum pilosum)、丰饶黍(Panicum pleianthum)、多毛黍(Panicum polycomum)、黄精黍(Panicum polygonatum)、柳叶箬黍(Panicum pseudisachne)、多疣黍(Panicum pygmaeum)、梨果黍(Panicumpyrularium)、昆士兰单黍(Panicum queenslandicum)、葡萄状黍(Panicum racemosum)、铺地黍(Panicum repens)、桧藓稷(Panicum rhizogonum)、微硬毛黍(Panicum rigidulum)、紫萼黍(Panicum rivale)、野稷(Panicum rude)、汝孜黍(Panicum rudgei)、欣氏黍(Panicum schinzii)、施拉克黍(Panicum schwackeanum)、塞氏黍(Panicum sellowii)、半裸黍(Panicum seminudum)、毛梗黍(Panicum stapfianum)、窄纹黍(Panicum stenodes)、草黄黍(Panicum stramineum)、亚亮黍(Panicum subalbidum)、亚提拉米苏黍(Panicumsubtiramulosum)、细柄黍(Panicum sumatrense)、柔叶黍(Panicum tenellum)、细叶黍(Panicum tenuifolium)、长毛黍(Panicum trichanthum)、毛鹧鸪黍(Panicumtrichidiachne)、毛样黍(Panicum trichoides)、毛腺状黍(Panicum tricholaenoides)、阔叶黍(Panicum tuerckheimii)、圆锥黍(Panicum turgidum)、长尖黍(Panicumurvilleanum)、强壮黍(Panicum validum)、委内瑞拉黍(Panicum venezuelae)、鲜绿黍(Panicum verrucosum)、柳枝稷(Panicum virgatum)、宽叶雀稗(Panicum wettsteinii)、黍属(Panicum sp.)、黍属克里斯汀(Christin)16-200、黍属ELS-2011、黍属EM389或黍属福雷斯特(Forest)761。
在另外的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料是玉蜀黍(maize)(玉蜀黍属(zea))、玉米(corn)(玉蜀黍属)、高粱(高粱属)、柳枝稷(switchgrass)(柳枝稷(Panicumvirgatum))、粟(millet)(黍(Panicum miliaceum))、珍珠粟(Cenchrus violaceus，还称珍珠稷(Pennisetum glaucum))、谷子(粟(Setaria italica)，还称为秫米(Panicumitalicum))，或其经加工的形式，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。
在一个实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料来自植物的种子。在一个优选的实施例中，来自黍亚科的基于植物的材料来自玉蜀黍(maize)(玉蜀黍属(zea))、玉米(corn)(玉蜀黍属)、高粱(高粱属)、柳枝稷(switchgrass)(柳枝稷(Panicum virgatum))、粟(millet)(黍(Panicum miliaceum))、珍珠粟(Cenchrus violaceus，还称珍珠稷(Pennisetum glaucum))、谷子(粟(Setaria italica)，还称为秫米(Panicum italicum))的种子，或其中该种子已经被加工，如研磨的玉米、研磨的玉蜀黍、脱脂玉蜀黍、脱脂脱淀粉的玉蜀黍、研磨的高粱、研磨的柳枝稷、研磨的粟、研磨的谷子、研磨的珍珠粟、或其任何组合。
另外的酶
在一个实施例中，考虑了除或除了根据本发明有用的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的多肽之外的酶活性。具体而言，考虑了蛋白酶和另外的纤维素分解活性。
在一个实施例中，本发明包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽和GH10木聚糖酶的使用。
在一个实施例中，本发明包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽和GH11木聚糖酶的使用。
在一个实施例中，本发明包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH43多肽和GH10木聚糖酶的使用。
在一个实施例中，本发明包括具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH43多肽和GH11木聚糖酶的使用。
蛋白酶
该蛋白酶可以是任何蛋白酶。适合的蛋白酶包括微生物蛋白酶，如真菌和细菌蛋白酶。优选的蛋白酶是酸性蛋白酶，即由在低于pH 7的酸性条件下水解蛋白质的能力表征的蛋白酶。优选的蛋白酶是酸性内切蛋白酶。酸性真菌蛋白酶是优选的，但是也可以使用其他蛋白酶。
酸性真菌蛋白酶可以来源于曲霉属、假丝酵母属、革盖菌属、内座壳属、虫霉属(Enthomophtra)、耙齿菌属、毛霉属、青霉属、根霉属、小核菌属以及球拟酵母菌属。具体而言，该蛋白酶可以来源于棘孢曲霉(WO95/02044)、泡盛曲霉(Hayashida等人,1977,Agric.Biol.Chem.[农业、生物学与化学]42(5),927-933)、黑曲霉(参见例如，Koaze等人,1964,Agr.Biol.Chem.Japan[日本农业、生物学与化学]28:216)、斋藤曲霉(Aspergillussaitoi)(参见例如，Yoshida,1954,J.Agr.Chem.Soc.Japan[日本农业、化学与社会学杂志]28:66)、或米曲霉，如pepA蛋白酶；以及来自米黑毛霉或微小毛霉的酸性蛋白酶。
在一个实施例中，该酸性蛋白酶是一种来自米曲霉的在商品名(来自诺维信公司)下销售的蛋白酶复合体或来自米黑根毛霉的天冬氨酸蛋白酶或来自杰能科公司(Genencor Int.)的FAN或GC 106。
在一个优选的实施例中，该酸性蛋白酶是一种天冬氨酸蛋白酶，例如来源于曲霉属的菌株(特别是棘孢曲霉，尤其是棘孢曲霉CBD 101.43)的天冬氨酸蛋白酶。
优选的酸性蛋白酶是天冬氨酸蛋白酶，其在选自下组的抑制剂的存在下保留活性，该组由以下组成：胃酶抑素、Pefabloc、PMSF、或EDTA。来源于棘孢曲霉CBS 101.43的蛋白酶I是这样的酸性蛋白酶。
在一个优选的实施例中，在有效量的来源于棘孢曲霉CBS 101.43的酸性蛋白酶I的存在下进行本发明的方法。
在另一个实施例中，该蛋白酶来源于曲霉属的菌株，例如棘孢曲霉的菌株，例如棘孢曲霉CBS 101.43(例如披露于WO 95/02044中的一种)，或与WO 95/02044的蛋白酶具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性的蛋白酶。在一方面，该蛋白酶与WO 95/02044的成熟多肽相差多达10个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)氨基酸。在另一个实施例中，本发明涉及在一个或多个(例如，若干个)位置处包括取代、缺失和/或插入的WO 95/02044的成熟多肽的变体。在一个实施例中，引入WO 95/02044的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基-或羧基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸。
该蛋白酶可以是一种中性或碱性蛋白酶，如来源于芽孢杆菌属的菌株的蛋白酶。一种具体蛋白酶来源于解淀粉芽孢杆菌并且具有作为登录号P06832可在Swissprot获得的序列。这些蛋白酶与披露于Swissprot数据库中的氨基酸序列(登录号P06832)可以具有至少90％序列一致性，例如至少92％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或特别是至少99％一致性。
该蛋白酶与WO 2003/048353中披露为序列1的氨基酸序列可以具有至少90％序列一致性，例如至少92％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或特别是至少99％一致性。
该蛋白酶可以是选自下组的木瓜蛋白酶样蛋白酶，该组由以下组成：EC3.4.22.*内的蛋白酶(半胱氨酸蛋白酶)，例如EC 3.4.22.2(木瓜蛋白酶)、EC 3.4.22.6(木瓜凝乳蛋白酶)、EC 3.4.22.7(萝蘼蛋白酶(asclepain))、EC 3.4.22.14(猕猴桃蛋白酶)、EC3.4.22.15(组织蛋白酶L)、EC 3.4.22.25(甘氨酰内肽酶)以及EC 3.4.22.30(木瓜蛋白酶Q(caricain))。
在一个实施例中，该蛋白酶是来源于曲霉属的菌株(例如米曲霉)的蛋白酶制剂。在另一个实施例中，该蛋白酶来源于根毛霉属的菌株，优选是米黑根毛霉。在另一个实施例中，该蛋白酶是一种蛋白酶制剂，优选是来源于曲霉属的菌株(例如米曲霉)的蛋白质分解制剂和来源于根毛霉属的菌株(优选米黑根毛霉)的蛋白酶的混合物。
天冬氨酸蛋白酶描述于例如Handbook of Proteolytic Enzymes[蛋白水解酶手册],由A.J.Barrett,N.D.Rawlings和J.F.Woessner编辑,Academic Press[学术出版社],圣地亚哥,1998,第270章。天冬氨酸蛋白酶的实例包括例如披露于以下中的那些：Berka等人,1990,Gene[基因]96:313；Berka等人,1993,Gene[基因]125:195-198；和Gomi等人,1993,Biosci.Biotech.Biochem.[生物科学、生物科技与生物化学]57:1095-1100，将其通过引用而特此结合。
该蛋白酶还可以是一种金属蛋白酶，将其定义为选自下组的蛋白酶，该组由以下组成：
(a)属于EC 3.4.24的蛋白酶(金属内肽酶)；优选EC 3.4.24.39(酸性金属蛋白酶)；
(b)属于以上手册的M组的金属蛋白酶；
(c)尚未指定宗族的金属蛋白酶(指定：宗族MX)，或属于宗族MA、MB、MC、MD、ME、MF、MG、MH中的任一种的金属蛋白酶(如在以上手册的第989-991页所定义)；
(d)其他家族的金属蛋白酶(如在以上手册的第1448-1452页所定义)；
(e)具有HEXXH基序的金属蛋白酶；
(f)具有HEFTH基序的金属蛋白酶；
(g)属于家族M3、M26、M27、M32、M34、M35、M36、M41、M43或M47中的任一种的金属蛋白酶(如在以上手册的第1448-1452页所定义)；
(h)属于M28E家族的金属蛋白酶；以及
(i)属于家族M35的金属蛋白酶(如在以上手册的第1492-1495页所定义)。
在其他具体实施例中，金属蛋白酶是其中肽键上的亲核攻击由被二价金属阳离子活化的水分子介导的水解酶。二价阳离子的实例是锌、钴或锰。可以通过氨基酸配体将金属离子保持在适当位置。配体的数目可以是五、四、三、二、一或零。在具体实施例中，数目是二或三，优选是三。
对于在本发明的方法中使用的金属蛋白酶的起源没有限制。在一个实施例中，将该金属蛋白酶分类为EC 3.4.24、优选EC 3.4.24.39。在一个实施例中，该金属蛋白酶是酸稳定的金属蛋白酶，例如真菌酸稳定的金属蛋白酶，如来源于嗜热子嚢菌属的菌株、优选橙色嗜热子囊菌的菌株、尤其是橙色嗜热子囊菌CGMCC No.0670的金属蛋白酶(分类为EC3.4.24.39)。在另一个实施例中，该金属蛋白酶来源于曲霉属的菌株、优选米曲霉的菌株。
在一个实施例中，该金属蛋白酶与WO 2010/008841的序列号1(一种橙色嗜热子囊菌金属蛋白酶)的氨基酸-159至177、或优选氨基酸+1至177(成熟多肽)具有至少80％、至少82％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少97％的序列一致性程度；并且该金属蛋白酶具有金属蛋白酶活性。
橙色嗜热子囊菌金属蛋白酶是适于在本发明的方法中使用的金属蛋白酶的一个优选实例。另一种金属蛋白酶来源于米曲霉并且包括披露于WO2003/048353中的序列号11，或其氨基酸23-353、23-374、23-397、1-353、1-374、1-397、177-353、177-374、或177-397，以及披露于WO 2003/048353中的序列号10。
另一种适于在本发明的方法中使用的金属蛋白酶是包括WO 2010/008841的序列号5的米曲霉金属蛋白酶，或一种作为分离的多肽的金属蛋白酶，该多肽与序列号5具有至少约80％、至少82％、至少85％、至少90％、至少95％或至少97％一致性程度；并且该多肽具有金属蛋白酶活性。在具体实施例中，该金属蛋白酶由序列号5的氨基酸序列组成。
在一个具体实施例中，金属蛋白酶具有以下氨基酸序列，该氨基酸序列与橙色嗜热子囊菌或米曲霉金属蛋白酶的氨基酸序列的氨基酸-159至177或+1至177相差四十个、三十五个、三十个、二十五个、二十个或相差十五个氨基酸。
在另一个实施例中，金属蛋白酶具有以下氨基酸序列，该氨基酸序列与这些金属蛋白酶的氨基酸序列的氨基酸-159至177或+1至177相差十个、或相差九个、或相差八个、或相差七个、或相差六个、或相差五个氨基酸，例如，相差四个、相差三个、相差两个或相差一个氨基酸。
在具体实施例中，该金属蛋白酶a)包括以下或b)由以下组成
i)WO 2010/008841的序列号1的氨基酸-159至177、或+1至177的氨基酸序列；
ii)WO 2010/008841的序列号3的氨基酸23-353、23-374、23-397、1-353、1-374、1-397、177-353、177-374、或177-397的氨基酸序列；
iii)WO 2010/008841的序列号5的氨基酸序列；或
i)、ii)和iii)的具有蛋白酶活性的序列的等位基因变体或片段。
WO 2010/008841的序列号1的氨基酸-159至177、或+1至177或WO2010/008841的序列号3的氨基酸23-353、23-374、23-397、1-353、1-374、1-397、177-353、177-374、或177-397的片段是一种自这些氨基酸序列的氨基和/或羧基末端缺失一个或多个氨基酸的多肽。在一个实施例中，片段包含至少75个氨基酸残基、或至少100个氨基酸残基、或至少125个氨基酸残基、或至少150个氨基酸残基、或至少160个氨基酸残基、或至少165个氨基酸残基、或至少170个氨基酸残基、或至少175个氨基酸残基。
在另一个实施例中，该金属蛋白酶与另一种蛋白酶组合，该蛋白酶是例如真菌蛋白酶，优选是酸性真菌蛋白酶。
在另一个实施例中，该蛋白酶选自下组，该组由以下组成：
(a)属于EC 3.4.21酶组的蛋白酶；和/或
(b)属于EC 3.4.14酶组的蛋白酶；和/或
(c)肽酶家族S53的丝氨酸蛋白酶，其包括两种不同类型的肽酶：三肽基氨肽酶(外切型)和内切肽酶；如在1993,Biochem.J.[生物化学杂志]290:205-218和在MEROPS蛋白酶数据库，发行9.4(2011年1月31日)(www.merops.ac.uk)中所述的。该数据库描述于Rawlings,N.D.,Barrett,A.J.和Bateman,A.,2010,“MEROPS：肽酶数据库(MEROPS:thepeptidase database)”,Nucl.Acids Res.[核酸研究]38:D227-D233中。还参见2013年11月26日提交的PCT/CN2013/087861。
可商购产品包括ESPERASETM、FLAVOURZYMETM、NOVOZYMTMFM 2.0L及iZyme BA(可得自诺维信公司，丹麦)以及来自美国的杰能科国际公司(Genencor International,Inc.)的GC106TM和SPEZYMETMFAN。
该蛋白酶能以0.0001-1mg酶蛋白/g干固体(DS)籽粒、优选0.001至0.1mg酶蛋白/gDS籽粒的量存在。
在一个实施例中，该蛋白酶是一种按以下量添加的酸性蛋白酶：1-20,000HUT/100g DS籽粒，例如1-10,000HUT/100g DS籽粒、优选300-8,000HUT/100g DS籽粒、尤其是3,000-6,000HUT/100g DS籽粒、或4,000-20,000HUT/100g DS籽粒酸性蛋白酶、优选5,000-10,000HUT/100g、尤其是从6,000-16,500HUT/100g DS籽粒。
纤维素分解组合物
在另外的实施例中，本发明涉及与纤维素分解组合物的组合的使用。
示例性的纤维素分解组合物如在例如WO 2015/081139和PCT/US2015/034179中所述。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物来源于木霉属的菌株，例如里氏木霉的菌株；腐质霉属的菌株，例如特异腐质霉的菌株，和/或金孢子菌属的菌株，例如卢克诺文思金孢子菌(Chrysosporium lucknowense)的菌株。
在一个优选的实施例中，该纤维素分解组合物来源于里氏木霉的菌株。
该纤维素分解组合物可以包括以下多肽(包括酶)中的一种或多种：具有纤维素分解增强活性的GH61多肽，β-葡糖苷酶，β-木糖苷酶，CBHI和CBHII，内切葡聚糖酶，木聚糖酶或其两种、三种或四种的混合物。在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽以及β-葡糖苷酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽以及β-木糖苷酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽以及内切葡聚糖酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽以及木聚糖酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、内切葡聚糖酶以及木聚糖酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-葡糖苷酶以及β-木糖苷酶。在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-葡糖苷酶以及内切葡聚糖酶。在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-葡糖苷酶以及木聚糖酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-木糖苷酶以及内切葡聚糖酶。在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-木糖苷酶以及木聚糖酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-葡糖苷酶、β-木糖苷酶以及内切葡聚糖酶。在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-葡糖苷酶、β-木糖苷酶以及木聚糖酶。在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-葡糖苷酶、内切葡聚糖酶以及木聚糖酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-木糖苷酶、内切葡聚糖酶以及木聚糖酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-葡糖苷酶、β-木糖苷酶、内切葡聚糖酶以及木聚糖酶。
在一个实施例中，该内切葡聚糖酶是一种内切葡聚糖酶I。
在一个实施例中，该内切葡聚糖酶是一种内切葡聚糖酶II。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、内切葡聚糖酶I以及木聚糖酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、内切葡聚糖酶II以及木聚糖酶。
在另一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-葡糖苷酶以及CBHI。
在另一个实施例中，该纤维素分解组合物包括具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、β-葡糖苷酶、CBHI以及CBHII。
该纤维素分解组合物可以进一步包括一种或多种选自下组的酶，该组由以下组成：酯酶、棒曲霉素、漆酶、木质素分解酶、果胶酶、过氧化物酶、蛋白酶、膨胀蛋白以及植酸酶。
木聚糖酶(GH10和GH11多肽)
涉及具有木聚糖酶活性的GH10或GH11多肽的示例性实施例在下文披露，可替代地分别称为家族10木聚糖酶和家族11木聚糖酶。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽，例如如在WO1994/021785中披露为SEQ ID NO:5且在此披露为SEQ ID NO:70的来自棘孢曲霉的木聚糖酶(Xyl II)。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:70具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽，例如如在J.Bacteriol.[细菌学杂志]2001,183(16):4823中披露为Swissprot:Q97TP5且在此披露为SEQ ID NO:71的来自丙酮丁醇梭杆菌的木聚糖酶。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:71具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽，例如如在WO2005/059084中披露为SEQ ID NO:8且在此披露为SEQ ID NO:72的来自棘孢曲霉的木聚糖酶。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:72具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在WO1996/23062中披露为SEQ ID NO:2且在此披露为SEQ ID NO:73的来自疏棉状嗜热丝孢菌的木聚糖酶。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:73具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在WO2011/057140中披露为SEQ ID NO:305且在此披露为SEQ ID NO:74的来自嗜热网团菌(Dictyoglomusthermophilum)的木聚糖酶。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:74具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在WO2005/079585中披露为SEQ ID NO:2且在此披露为SEQ ID NO:75的来自饲料类芽孢杆菌(Paenibacilluspabuli)的木聚糖酶。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:75具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在此披露为SEQ ID NO:78的来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的木聚糖酶。在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ ID NO:77的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:78具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在此披露为SEQ ID NO:84的来自北疆链霉菌的木聚糖酶。在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ ID NO:83的成熟多肽具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:84具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在WO 2014/019220中披露为SEQ ID NO:2且如在此披露为SEQ ID NO:88的称为FoxXyn6的来自尖孢镰孢菌的木聚糖酶。
在一个实施例中，该组合物包括具有木聚糖酶活性的GH10多肽，该多肽与SEQ IDNO:88具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH11多肽，例如如在WO 2014/020143中披露为SEQ ID NO:7且如在此披露为SEQ ID NO:89的称为AclXyn5的来自尖孢镰孢菌的木聚糖酶。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:89具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH11多肽是来自棒囊菌属(Cornyascus)(例如嗜热棒囊菌(Corynascus thermophilus))、来自柱顶孢霉属(Scytalidium)(例如嗜热柱顶孢霉(Scytalidium thermophilum))、来自青霉属(例如草酸青霉)(如WO 2013/075642中所披露)的木聚糖酶，或以下具有木聚糖酶活性的GH11多肽，该多肽与这些中的任一个具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽包括如在WO 2013/019827中披露且在此披露为SEQ ID NO:104的来自雷塞氏篮状菌(Talaromyces leycettanus)的木聚糖酶。在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:104具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽包括如在WO 2011/057083中披露且在此披露为SEQ ID NO:106的来自褐孢长毛盘菌(Trichophaea saccata)的木聚糖酶。在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:106具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括木聚糖酶。在一个优选方面，该木聚糖酶是一种家族10木聚糖酶。
有用于本发明的方法的木聚糖酶的实例包括但不限于来自以下的木聚糖酶：棘孢曲霉(GeneSeqP:AAR63790；WO 94/21785)、烟曲霉(WO 2006/078256)、嗜松青霉(Penicillium pinophilum)(WO 2011/041405)、青霉属物种(WO 2010/126772)、土生梭孢壳霉NRRL 8126(WO 2009/079210)以及褐孢长毛盘菌GH10(WO 2011/057083)。
在一个实施例中，该GH10木聚糖酶来源于曲霉属，例如棘孢曲霉的菌株(例如在WO94/021785中描述为序列号5的一种(称为Xyl II))；或以下GH10木聚糖酶，该木聚糖酶与WO94/021785中的序列号5具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性。在一方面，该蛋白酶与该成熟多肽相差多达10个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)氨基酸。在另一个实施例中，本发明涉及在一个或多个(例如，若干个)位置处包括取代、缺失和/或插入的该成熟多肽的变体。在一个实施例中，引入该成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基-或羧基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸。
在一个实施例中，该GH10木聚糖酶来源于曲霉属，例如烟曲霉的菌株，例如在WO2006/078256中描述为Xyl III；或以下GH10木聚糖酶，该木聚糖酶与WO 2006/078256中的Xyl III具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性。在一方面，该蛋白酶与该成熟多肽相差多达10个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)氨基酸。在另一个实施例中，本发明涉及在一个或多个(例如，若干个)位置处包括取代、缺失和/或插入的该成熟多肽的变体。在一个实施例中，引入该成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基-或羧基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽，例如如在此披露为SEQ ID NO:119的来自黑曲霉的木聚糖酶。
在一个实施例中，具有木聚糖酶活性的GH10多肽与SEQ ID NO:119具有至少80％，例如至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。
具有纤维素分解增强活性的AA9(GH61)多肽
在一个实施例中，该纤维素分解组合物可以包括一种或多种具有纤维素分解增强活性的AA9(GH61)多肽。
在一方面，该AA9(GH61)多肽是具有纤维素分解增强活性的任何AA9多肽。AA9多肽的实例包括但不限于来自于以下的AA9多肽：土生梭孢壳霉(WO 2005/074647、WO 2008/148131和WO 2011/035027)、橙色嗜热子囊菌(WO 2005/074656和WO 2010/065830)、里氏木霉(WO 2007/089290和WO 2012/149344)、嗜热毁丝霉(WO 2009/085935、WO 2009/085859、WO 2009/085864、WO 2009/085868、WO 2009/033071、WO 2012/027374、及WO 2012/068236)、烟曲霉(WO 2010/138754)、嗜松青霉(WO 2011/005867)、嗜热子嚢菌属物种(WO2011/039319)、青霉属物种(埃默森青霉(emersonii))(WO 2011/041397和WO 2012/000892)、甲壳嗜热子囊菌(Thermoascus crustaceous)(WO 2011/041504)、棘孢曲霉(WO2012/125925)、疏棉状嗜热丝孢菌(WO 2012/113340、WO 2012/129699、WO 2012/130964及WO 2012/129699)、Aurantiporus alborubescens(WO 2012/122477)、褐孢长毛盘菌(WO2012/122477)、托姆青霉(WO 2012/122477)、柄篮状菌(WO 2012/135659)、特异腐质霉(WO2012/146171)、樟绒枝霉(WO 2012/101206)、雷塞氏篮状菌(WO 2012/101206)、以及嗜热毛壳菌(WO 2012/101206)、埃默森篮状菌(Talaromyces emersonii)(WO 2012/000892)、变色栓菌(Trametes versicolor)(WO 2012/092676和WO 2012/093149)、和嗜热篮状菌(Talaromyces thermophilus)(WO 2012/129697和WO 2012/130950)；将其都通过引用以其全文结合在此。
在另一方面，具有纤维素分解增强活性的AA9多肽选自下组，该组由以下组成：(i)具有纤维素分解增强活性的AA9多肽，包括SEQ ID NO:102的成熟多肽或由其组成；(ii)具有纤维素分解增强活性的AA9多肽，包括与SEQ ID NO:102的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)具有纤维素分解增强活性的AA9多肽，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:101的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)具有纤维素分解增强活性的AA9多肽，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQID NO:101的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交。
在另一方面，具有纤维素分解增强活性的青霉属物种(埃默森青霉)AA9多肽或其同系物选自下组，该组由以下组成：(i)具有纤维素分解增强活性的AA9多肽，包括SEQ IDNO:102的成熟多肽或由其组成；(ii)具有纤维素分解增强活性的AA9多肽，包括与SEQ IDNO:102的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)具有纤维素分解增强活性的AA9多肽，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:101的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)具有纤维素分解增强活性的AA9多肽，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:101的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交。
在一个实施例中，具有纤维素分解增强活性的GH61多肽来源于嗜热子嚢菌属，例如橙色嗜热子囊菌的菌株(例如在WO 2005/074656中描述为序列号2的一种)；或以下具有纤维素分解增强活性的GH61多肽，该多肽与WO 2005/074656中的序列号2具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性。在一方面，该蛋白酶与该成熟多肽相差多达10个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)氨基酸。在另一个实施例中，本发明涉及在一个或多个(例如，若干个)位置处包括取代、缺失和/或插入的该成熟多肽的变体。在一个实施例中，引入该成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基-或羧基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸。
在一个实施例中，具有纤维素分解增强活性的GH61多肽来源于来自青霉属的菌株，例如埃默森青霉的菌株(例如在WO 2011/041397中披露的一种)，或以下具有纤维素分解增强活性的GH61多肽，该多肽与WO 2011/041397中的序列号2具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性。在一方面，该蛋白酶与该成熟多肽相差多达10个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)氨基酸。在另一个实施例中，本发明涉及在一个或多个(例如，若干个)位置处包括取代、缺失和/或插入的该成熟多肽的变体。在一个实施例中，引入该成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基-或羧基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸。
在一个实施例中，具有纤维素分解增强活性的GH61多肽来源于梭孢壳属，例如土生梭孢壳霉的菌株(例如在WO 2005/074647中披露为序列号7或序列号8的一种)；或来源于曲霉属的菌株的一种，例如烟曲霉的菌株(例如在WO 2010/138754中描述为序列号2的一种)，或以下具有纤维素分解增强活性的GH61多肽，该多肽与这些中的任一个具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性。
内切葡聚糖酶
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括内切葡聚糖酶，例如内切葡聚糖酶I或内切葡聚糖酶II。
可以在本发明的方法中使用的细菌内切葡聚糖酶的实例包括但不限于解纤维热酸菌(Acidothermus cellulolyticus)内切葡聚糖酶(WO 91/05039；WO 93/15186；美国专利号5,275,944；WO 96/02551；美国专利号5,536,655；WO 00/70031；WO 05/093050)；褐色高温双歧菌(Thermobifida fusca)内切葡聚糖酶III(WO 05/093050)；以及褐色高温双歧菌内切葡聚糖酶V(WO 05/093050)。
可以用于本发明的真菌内切葡聚糖酶的实例包括但不限于里氏木霉内切葡聚糖酶I(Penttila等人,1986,Gene[基因]45:253-263)；里氏木霉Cel7B内切葡聚糖酶I(GENBANKTM登录号M15665)；里氏木霉内切葡聚糖酶II(Saloheimo等人,1988,Gene[基因]63:11-22)；里氏木霉Cel5A内切葡聚糖酶II(GENBANKTM登录号M19373)；里氏木霉内切葡聚糖酶III(Okada等人,1988,Appl.Environ.Microbiol.[应用与环境微生物学]64:555-563，GENBANKTM登录号AB003694)；里氏木霉内切葡聚糖酶V(Saloheimo等人,1994,MolecularMicrobiology[分子微生物学]13:219-228，GENBANKTM登录号Z33381)；棘孢曲霉内切葡聚糖酶(Ooi等人,1990,Nucleic Acids Research[核酸研究]18:5884)；川地曲霉(Aspergilluskawachii)内切葡聚糖酶(Sakamoto等人,1995,Current Genetics[当代遗传学]27:435-439)；胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovara)内切葡聚糖酶(Saarilahti等人,1990,Gene[基因]90:9-14)；尖孢镰孢菌内切葡聚糖酶(GENBANKTM登录号L29381)；灰腐质霉高温变种内切葡聚糖酶(GENBANKTM登录号AB003107)；热白丝菌(Melanocarpus albomyces)内切葡聚糖酶(GENBANKTM登录号MAL515703)；粗糙链孢菌内切葡聚糖酶(GENBANKTM登录号XM_324477)；特异腐质霉内切葡聚糖酶V；嗜热毁丝霉CBS 117.65内切葡聚糖酶；担子菌纲(basidiomycete)CBS 495.95内切葡聚糖酶；担子菌纲CBS 494.95内切葡聚糖酶；土生梭孢壳霉NRRL 8126CEL6B内切葡聚糖酶；土生梭孢壳霉NRRL 8126CEL6C内切葡聚糖酶；土生梭孢壳霉NRRL 8126CEL7C内切葡聚糖酶；土生梭孢壳霉NRRL 8126CEL7E内切葡聚糖酶；土生梭孢壳霉NRRL 8126CEL7F内切葡聚糖酶；Cladorrhinum foecundissimum ATCC62373CEL7A内切葡聚糖酶；以及里氏木霉菌株号VTT-D-80133内切葡聚糖酶(GENBANKTM登录号M15665)。
在一个实施例中，该内切葡聚糖酶是一种内切葡聚糖酶II，例如来源于木霉属的一种，例如里氏木霉的菌株(例如在WO 2011/057140中描述为序列号22的一种)；或以下内切葡聚糖酶，该内切葡聚糖酶与WO 2011/057140中的序列号22具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性。在一方面，该蛋白酶与该成熟多肽3相差多达10个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)氨基酸。在另一个实施例中，本发明涉及在一个或多个(例如，若干个)位置处包括取代、缺失和/或插入的该成熟多肽的变体。在一个实施例中，引入该成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基-或羧基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸。
在一方面，该内切葡聚糖酶I选自下组，该组由以下组成：(i)内切葡聚糖酶I，包括SEQ ID NO:110的成熟多肽或由其组成；(ii)内切葡聚糖酶I，包括与SEQ ID NO:110的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)内切葡聚糖酶I，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQID NO:109的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)内切葡聚糖酶I，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:109的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交。
在另一方面，该内切葡聚糖酶II选自下组，该组由以下组成：(i)内切葡聚糖酶II，包括SEQ ID NO:112的成熟多肽或由其组成；(ii)内切葡聚糖酶II，包括与SEQ ID NO:112的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)内切葡聚糖酶II，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:111的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)内切葡聚糖酶II，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:111的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交。
β-木糖苷酶
有用于本发明的方法的β-木糖苷酶的实例包括但不限于来自以下的β-木糖苷酶：粗糙链孢菌(SwissProt登录号Q7SOW4)、里氏木霉(UniProtKB/TrEMBL登录号Q92458)以及埃默森篮状菌(SwissProt登录号Q8X212)。
在一个实施例中，该β-木糖苷酶来源于曲霉属，例如烟曲霉的菌株(例如在WO2011/057140中描述为序列号206的一种)；或以下β-木糖苷酶，该β-木糖苷酶与WO 2011/057140中的序列号206具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性。在一方面，该蛋白酶与该成熟多肽相差多达10个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)氨基酸。在另一个实施例中，本发明涉及在一个或多个(例如，若干个)位置处包括取代、缺失和/或插入的SEQID NO:6的成熟多肽的变体。在一个实施例中，引入SEQ ID NO:6的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基-或羧基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸。
在一个实施例中，该β-木糖苷酶来源于曲霉属的菌株，例如烟曲霉的菌株(例如在美国临时号61/526,833或PCT/US12/052163(实例16和17)中披露的一种)，或来源于木霉属的菌株，例如里氏木霉的菌株，例如WO2011/057140中的序列号58的成熟多肽，或与其具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性的β-木糖苷酶。
在另一方面，该埃默森篮状菌β-木糖苷酶或其同系物选自下组，该组由以下组成：(i)β-木糖苷酶，包括SEQ ID NO:108的成熟多肽或由其组成；(ii)β-木糖苷酶，包括与SEQID NO:108的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)β-木糖苷酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:107的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)β-木糖苷酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:107的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交。
β-葡糖苷酶
在一个实施例中，该纤维素分解组合物可以包括一种或多种β-葡糖苷酶。在一个实施例中，该β-葡糖苷酶可以是来源于曲霉属的菌株的一种，例如来源于米曲霉，例如披露于WO 2002/095014中的一种或在WO 2008/057637中披露的具有β-葡糖苷酶活性的融合蛋白，或来源于烟曲霉，例如在WO 2005/047499中披露的一种或烟曲霉β-葡糖苷酶变体，例如在PCT申请WO 2012/044915披露中，例如具有以下取代的一种：F100D、S283G、N456E、F512Y。
在一个实施例中，该β-葡糖苷酶来源于曲霉属，例如烟曲霉的菌株，例如在WO2005/047499中描述的一种，或与其具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性的β-葡糖苷酶。
在一个实施例中，该β-葡糖苷酶来源于曲霉属，例如烟曲霉的菌株，例如在WO2012/044915中描述的一种，或与其具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性的β-木糖苷酶。
在另一方面，该烟曲霉β-葡糖苷酶或其同系物选自下组，该组由以下组成：(i)β-葡糖苷酶，包括SEQ ID NO:100的成熟多肽或由其组成；(ii)β-葡糖苷酶，包括与SEQ IDNO:100的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)β-葡糖苷酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:99的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)β-葡糖苷酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:99的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交。
纤维二糖水解酶I
在一个实施例中，该纤维素分解组合物可以包括一种或多种CBH I(纤维二糖水解酶I)。在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括纤维二糖水解酶I(CBHI)，例如来源于曲霉属的菌株的一种，例如烟曲霉的菌株，例如披露于WO 2011/057140中的序列号2中的Cel7A CBHI，或来源于木霉属的菌株，例如里氏木霉的菌株。
在一个实施例中，该纤维二糖水解酶I来源于曲霉属，例如烟曲霉的菌株，例如在WO 2011/057140中描述的一种，或与其具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性的CBHI。
在一方面，该烟曲霉纤维二糖水解酶I或其同系物选自下组，该组由以下组成：(i)纤维二糖水解酶I，包括SEQ ID NO:114的成熟多肽或由其组成；(ii)纤维二糖水解酶I，包括与SEQ ID NO:114的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)纤维二糖水解酶I，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:113的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)纤维二糖水解酶I，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:113的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交。
纤维二糖水解酶II
在一个实施例中，该纤维素分解组合物可以包括一种或多种CBH II(纤维二糖水解酶II)。在一个实施例中，该纤维二糖水解酶II(CBHII)，例如来源于曲霉属的菌株的一种，例如烟曲霉的菌株；或木霉属的菌株，例如里氏木霉；或梭孢壳属的菌株，例如土生梭孢壳霉的菌株，例如来自土生梭孢壳霉的纤维二糖水解酶II CEL6A。
在一个实施例中，该纤维二糖水解酶II来源于曲霉属，例如烟曲霉的菌株，例如在WO 2011/057140中描述的一种，或与其具有至少80％，例如至少85％、例如至少90％、优选至少95％、例如至少96％、例如97％、例如至少98％、例如至少99％一致性的CBHII。
在另一方面，该烟曲霉纤维二糖水解酶II或其同系物选自下组，该组由以下组成：(i)纤维二糖水解酶II，包括SEQ ID NO:116的成熟多肽或由其组成；(ii)纤维二糖水解酶II，包括与SEQ ID NO:116的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)纤维二糖水解酶II，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:115的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)纤维二糖水解酶II，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:115的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交。
示例性纤维素分解组合物
具体而言，根据一个实施例，本发明涉及酶组合物的用途，这些酶组合物包括：(A)(i)纤维二糖水解酶I，(ii)纤维二糖水解酶II，以及(iii)至少一种选自下组的酶，该组由以下组成：β-葡糖苷酶或其变体、具有纤维素分解增强活性的AA9多肽、GH10木聚糖酶和β-木糖苷酶；(B)(i)GH10木聚糖酶和(ii)β-木糖苷酶；或(C)(i)纤维二糖水解酶I，(ii)纤维二糖水解酶II，(iii)GH10木聚糖酶，和(iv)β-木糖苷酶；
其中该纤维二糖水解酶I选自下组，该组由以下组成：(i)纤维二糖水解酶I，包括SEQ ID NO:96的成熟多肽或由其组成；(ii)纤维二糖水解酶I，包括与SEQ ID NO:96的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)纤维二糖水解酶I，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:95的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)纤维二糖水解酶I，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:95的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交；
其中该纤维二糖水解酶II选自下组，该组由以下组成：(i)纤维二糖水解酶II，包括SEQ ID NO:98的成熟多肽或由其组成；(ii)纤维二糖水解酶II，包括与SEQ ID NO:98的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)纤维二糖水解酶II，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)纤维二糖水解酶II，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQID NO:97的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交；
其中该β-葡糖苷酶选自下组，该组由以下组成：(i)β-葡糖苷酶，包括SEQ ID NO:100的成熟多肽或由其组成；(ii)β-葡糖苷酶，包括与SEQ ID NO:100的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)β-葡糖苷酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:99的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)β-葡糖苷酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:99的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交；
其中该木聚糖酶选自下组，该组由以下组成：(i)木聚糖酶，包括SEQ ID NO:104的成熟多肽或SEQ ID NO:106的成熟多肽或由其组成；(ii)木聚糖酶，包括与SEQ ID NO:104的成熟多肽或SEQ ID NO:106的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)木聚糖酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列或SEQ ID NO:105的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)木聚糖酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:103的成熟多肽编码序列或SEQ IDNO:105的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交；并且
其中该β-木糖苷酶选自下组，该组由以下组成：(i)β-木糖苷酶，包括SEQ ID NO:108的成熟多肽或由其组成；(ii)β-木糖苷酶，包括与SEQ ID NO:108的成熟多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列一致性的氨基酸序列或由其组成；(iii)β-木糖苷酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸包括与SEQ ID NO:107的成熟多肽编码序列具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性的核苷酸序列或由其组成；以及(iv)β-木糖苷酶，其由以下多核苷酸编码，该多核苷酸在至少高严格条件，例如，非常高严格条件下与SEQ ID NO:107的成熟多肽编码序列或其全长互补体杂交。
具体而言，根据一个实施例，本发明涉及酶组合物的用途，这些酶组合物包括：(A)(i)烟曲霉纤维二糖水解酶I；(ii)烟曲霉纤维二糖水解酶II；(iii)烟曲霉β-葡糖苷酶或其变体；(iv)具有纤维素分解增强活性的青霉属物种AA9多肽；(v)褐孢长毛盘菌GH10木聚糖酶；和(vi)埃默森篮状菌β-木糖苷酶；或其同系物；(B)(i)烟曲霉纤维二糖水解酶I；(ii)烟曲霉纤维二糖水解酶II；(iii)褐孢长毛盘菌GH10木聚糖酶；和(iv)埃默森篮状菌β-木糖苷酶；或其同系物；或(C)(i)褐孢长毛盘菌GH10木聚糖酶；和(ii)埃默森篮状菌β-木糖苷酶；或其同系物。
在一个实施例中，在本发明的酶组合物中的纤维二糖水解酶I的量是该酶组合物的总蛋白质的5％至60％，例如该酶组合物的总蛋白质的7.5％至55％、10％至50％、12.5％至45％、15％至40％、17.5％至35％、和20％至30％。
在另一个实施例中，在本发明的酶组合物中的纤维二糖水解酶II的量是该酶组合物的总蛋白质的2.0％至40％，例如该酶组合物的总蛋白质的3.0％至35％、4.0％至30％、5％至25％、6％至20％、7％至15％、和7.5％至12％。
在另一个实施例中，在本发明的酶组合物中的β-葡糖苷酶的量是该酶组合物的总蛋白质的0％至30％，例如该酶组合物的总蛋白质的1％至27.5％、1.5％至25％、2％至22.5％、3％至20％、4％至19％、4.5％至18％、5％至17％、和6％至16％。
在另一个实施例中，在本发明的酶组合物中的AA9多肽的量是该酶组合物的总蛋白质的0％至50％，例如该酶组合物的总蛋白质的2.5％至45％、5％至40％、7.5％至35％、10％至30％、12.5％至25％、和15％至25％。
在另一个实施例中，在本发明的酶组合物中的木聚糖酶的量是该酶组合物的总蛋白质的0％至30％，例如该酶组合物的总蛋白质的0.5％至30％、1.0％至27.5％、1.5％至25％、2％至22.5％、2.5％至20％、3％至19％、3.5％至18％、和4％至17％。
在另一个实施例中，在本发明的酶组合物中的β-木糖苷酶的量是该酶组合物的总蛋白质的0％至50％，例如该酶组合物的总蛋白质的0.5％至30％、1.0％至27.5％、1.5％至25％、2％至22.5％、2.5％至20％、3％至19％、3.5％至18％、和4％至17％。
在另一个实施例中，在本发明的酶组合物中的内切葡聚糖酶I的量是该酶组合物的总蛋白质的0.5％至30％，例如该酶组合物的总蛋白质的1.0％至25％、2％至20％、4％至25％、5％至20％、16％至15％、和7％至12％。
在另一个实施例中，在本发明的酶组合物中的内切葡聚糖酶II的量是该酶组合物的总蛋白质的0.5％至30％，例如该酶组合物的总蛋白质的1.0％至25％、2％至20％、4％至25％、5％至20％、16％至15％、和7％至12％。
如以上提及的，该纤维素分解组合物可以包括多种不同的多肽(例如酶)。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括里氏木霉纤维素酶制剂，该制剂包含米曲霉β-葡糖苷酶融合蛋白(WO 2008/057637)以及橙色嗜热子囊菌GH61A多肽(WO 2005/074656)。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括棘孢曲霉GH10木聚糖酶(WO 94/021785)与含有烟曲霉β-葡糖苷酶(WO 2005/047499)和橙色嗜热子囊菌GH61A多肽(WO2005/074656)的里氏木霉纤维素酶制剂的共混物。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括烟曲霉GH10木聚糖酶(WO 2006/078256)和烟曲霉β-木糖苷酶(WO 2011/057140)与含有烟曲霉纤维二糖水解酶I(WO 2011/057140)、烟曲霉纤维二糖水解酶II(WO 2011/057140)、烟曲霉β-葡糖苷酶变体(WO 2012/044915)和青霉属物种(埃默森青霉)GH61多肽(WO 2011/041397)的里氏木霉纤维素酶制剂的共混物。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括里氏木霉纤维素分解酶组合物，该组合物进一步包括具有纤维素分解增强活性的橙色嗜热子囊菌GH61A多肽(WO 2005/074656)以及米曲霉β-葡糖苷酶融合蛋白(WO 2008/057637)。
在另一个实施例中，该纤维素分解组合物包括里氏木霉纤维素分解酶组合物，该组合物进一步包括具有纤维素分解增强活性的橙色嗜热子囊菌GH61A多肽(WO 2005/074656中的序列号2)以及烟曲霉β-葡糖苷酶(WO 2005/047499的序列号2)。
在另一个实施例中，该纤维素分解组合物包括里氏木霉纤维素分解酶组合物，该组合物进一步包括在WO 2011/041397中披露的具有纤维素分解增强活性的埃默森青霉菌GH61A多肽、烟曲霉β-葡糖苷酶(WO 2005/047499的序列号2)或其具有以下取代的变体：F100D、S283G、N456E、F512Y。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括棘孢曲霉家族10木聚糖酶以及来源于里氏木霉RutC30的纤维素分解组合物。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括棘孢曲霉家族10木聚糖酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物来源于里氏木霉RutC30。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括褐孢长毛盘菌GH10木聚糖酶(WO2011/057083)和埃默森篮状菌β-木糖苷酶与含有烟曲霉纤维二糖水解酶I(WO 2011/057140)、烟曲霉纤维二糖水解酶II(WO 2011/057140)、烟曲霉β-葡糖苷酶变体(WO 2012/044915)和青霉属物种(埃默森青霉)GH61多肽(WO 2011/041397)的里氏木霉纤维素酶制剂的共混物。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括里氏木霉纤维素酶制剂，该制剂包含褐孢长毛盘菌GH10木聚糖酶(WO 2011/057083)以及埃默森篮状菌β-木糖苷酶。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括雷塞氏篮状菌GH10木聚糖酶(WO2013/019827)。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物包括褐孢长毛盘菌GH10木聚糖酶(WO2011/057083)。
在一个实施例中，该纤维素分解组合物如PCT/US2015/034179中所述。
本发明的酶组合物可以处于任何适于使用的形式，例如像除去或未除去细胞的粗发酵液、具有或不具有细胞碎片的细胞裂解液、半纯化或纯化的酶组合物、或作为酶的来源的宿主细胞(例如，木霉属宿主细胞)。
该酶组合物可以是干粉或颗粒、非尘颗粒、液体、稳定化的液体或稳定化的受保护的酶。可以根据已建立的方法例如通过添加稳定剂(如糖、糖醇或其他多元醇)、和/或乳酸或另一种有机酸，对液体酶组合物进行稳定化。
根据本发明，以下活性中的一种或多种的有效量可以在处理籽粒的过程中存在或添加：乙酰木聚糖酯酶、戊聚糖酶、果胶酶、阿拉伯聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶(arabinofurasidase)、木葡聚糖酶、植酸酶活性。
据信在将籽粒分为更细的颗粒后，该一种或多种酶可以更直接地作用于籽粒的细胞壁和蛋白质基质并且因此更有效。因而，在随后的步骤中，更加容易地将淀粉洗出。
酶量
可以按有效量添加酶，可以根据从业者和具体过程需要调节该有效量。通常，酶能以0.0001-1mg酶蛋白/g干固体(DS)籽粒，例如0.001-0.1mg酶蛋白/g DS籽粒的量存在。在具体实施例中，该酶可以按以下量存在，例如1μg、2.5μg、5μg、10μg、20μg、25μg、30μg、35μg、40μg、45μg、50μg、75μg、100μg、125μg、150μg、175μg、200μg、225μg、250μg、275μg、300μg、325μg、350μg、375μg、400μg、450μg、500μg、550μg、600μg、650μg、700μg、750μg、800μg、850μg、900μg、950μg、1000μg酶蛋白/g DS籽粒。
通过以下实例进一步描述本发明，这些实例不应理解为对本发明的范围进行限制。
实例
材料与方法
酶
GH62阿拉伯呋喃糖苷酶A：来自胶囊青霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(WO 2006/125438)。
GH62阿拉伯呋喃糖苷酶B：来自草酸青霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:24)。
GH62阿拉伯呋喃糖苷酶C：来自褐红篮状菌的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:27)。
GH62阿拉伯呋喃糖苷酶D：来源于黑曲霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:117)。
GH62阿拉伯呋喃糖苷酶E：来源于黑曲霉的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶(SEQ ID NO:118)。
具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的酶单独使用或与例如以下任何一种组合使用：Celluclast、纤维素酶A、纤维素酶B、纤维素酶C、纤维素酶D、纤维素酶E、纤维素酶F、纤维素酶G、纤维素酶H、纤维素酶J、纤维素酶K、纤维素酶L、纤维素酶M、GH10木聚糖酶A、蛋白酶A、蛋白酶B、蛋白酶C和/或蛋白酶D。
Celluclast：来源于Celluclast 1.5L(可在诺维信公司购得的商业产品)的纤维素酶。
纤维素酶A：棘孢曲霉GH10木聚糖酶(WO 94/021785)与包含烟曲霉β-葡糖苷酶(WO2005/047499)和橙色嗜热子囊菌GH61A多肽(WO 2005/074656)的里氏木霉纤维素酶制剂的共混物。
纤维素酶B：包含米曲霉β-葡糖苷酶融合蛋白(WO 2008/057637)和橙色嗜热子囊菌GH61A多肽(WO 2005/074656)的里氏木霉纤维素酶制剂。
纤维素酶C：烟曲霉GH10木聚糖酶(WO 2006/078256)和烟曲霉β-木糖苷酶(WO2011/057140)与包含烟曲霉纤维二糖水解酶I(WO 2011/057140)、烟曲霉纤维二糖水解酶II(WO 2011/057140)、烟曲霉β-葡糖苷酶变体(WO 2012/044915)和青霉属物种(埃默森青霉)GH61多肽(WO 2011/041397)的里氏木霉纤维素酶制剂的共混物。
纤维素酶D：棘孢曲霉GH10木聚糖酶(WO 94/021785)。
纤维素酶E：包含棘孢曲霉GH10木聚糖酶(WO 94/021785)的里氏木霉纤维素酶制剂。
纤维素酶F：包含烟曲霉GH10木聚糖酶(WO 2006/078256)和烟曲霉β-木糖苷酶(WO2011/057140)的里氏木霉纤维素酶制剂。
纤维素酶G：一种纤维素分解酶组合物，该纤维素分解酶组合物包括棘孢曲霉家族10木聚糖酶(WO 1994/021785)和来源于里氏木霉RutC30的纤维素分解酶组合物。
纤维素酶H：一种来源于里氏木霉RutC30的纤维素分解组合物。
纤维素酶J：褐孢长毛盘菌GH10木聚糖酶(WO 2011/057083)和埃默森篮状菌β-木糖苷酶与含有烟曲霉纤维二糖水解酶I(WO 2011/057140)、烟曲霉纤维二糖水解酶II(WO2011/057140)、烟曲霉β-葡糖苷酶变体(WO 2012/044915)和青霉属物种(埃默森青霉)GH61多肽(WO 2011/041397)的里氏木霉纤维素酶制剂的共混物。
纤维素酶K：包含褐孢长毛盘菌GH10木聚糖酶(WO 2011/057083)和埃默森篮状菌β-木糖苷酶的里氏木霉纤维素酶制剂。
纤维素酶L：含有SEQ ID NO:104的GH10木聚糖酶的里氏木霉纤维素酶制剂。
纤维素酶M：含有SEQ ID NO:106的GH10木聚糖酶的里氏木霉纤维素酶制剂。
纤维素酶N：含有SEQ ID NO:96的纤维二糖水解酶I、SEQ ID NO:98的纤维二糖水解酶II、SEQ ID NO:104的GH10木聚糖酶、和SEQ ID NO:108的β-木糖苷酶的里氏木霉纤维素酶制剂。
纤维素酶P：含有SEQ ID NO:96的纤维二糖水解酶I、SEQ ID NO:98的纤维二糖水解酶II、SEQ ID NO:100的β-葡糖苷酶变体、和SEQ ID NO:102的AA9(GH61)的里氏木霉纤维素酶制剂。
纤维素酶Q：含有SEQ ID NO:96的纤维二糖水解酶I、SEQ ID NO:98的纤维二糖水解酶II、和SEQ ID NO:102的AA9(GH61)的里氏木霉纤维素酶制剂。
GH10木聚糖酶A：来源于黑曲霉的GH10木聚糖酶(SEQ ID NO:119)。
蛋白酶I：来自披露于WO 95/02044中的棘孢曲霉CBS 101.43的酸性蛋白酶。
蛋白酶A：米曲霉曲霉蛋白酶(aspergillopepsin)A，披露于Gene[基因],第125卷,第2期,第195–198页(1993年3月30日)。
蛋白酶B：来自橙色嗜热子囊菌(AP025)的具有如WO 2003/048353-A1中的SEQ IDNO:2的氨基酸1-177所示的成熟酸序列的金属蛋白酶。
蛋白酶C：产生于米曲霉中的可得自丹麦的诺维信公司的米黑根毛霉衍生的天冬氨酸内肽酶(NovorenTM)。
蛋白酶D：来自披露于WO 2014/037438中的大型亚灰树花菌(Meripilusgiganteus)的S53蛋白酶3(SEQ ID NO:6)。
方法
蛋白酶HUT活性的测定：
1HUT是在40℃和pH 4.7下经30分钟在275nm处的吸光度下将变性的血红蛋白等效物消化为吸光度为0.0084的1.10μg/ml酪氨酸于0.006N HCl中的溶液而形成水解物的酶量。在给定条件下，在0.5M乙酸盐缓冲液中通过酶消化变性的血红蛋白底物。将未消化的血红蛋白用三氯乙酸加以沉淀并且测量上清液中的水解物在275nm下的吸光度。
木糖测定
从2.5mg木糖/mL的储液(通过将0.125g木糖溶解于50mL去离子水中来制备)制备从0至125μg木糖/mL的木糖标准曲线。
测定原理。通过木糖变旋酶(XMR)使用来自麦格酶国际爱尔兰股份有限公司(Megazyme International Ireland)的D-木糖测定试剂盒催化D-木糖的α-和β-异头形式的相互转化。在pH 7.5，在β-木糖脱氢酶(β-XDH)存在下，通过NAD+将β-D-木糖氧化成D-木糖酸。在该反应中形成的NADH的量采用D-木糖的量进行化学计量，并通过在340nm处的吸光度增加进行测量。
实例1.
该10-g纤维测定通常包括：在酶存在下，在与该方法相关的条件(pH3.5至4，温度约52℃)下并且经1至4hr之间的时间段，孵育从湿磨设备获得的湿纤维样品。孵育后，将纤维转移并压在筛(典型地为100微米或更小)上，在其中然后收集主要由分离的淀粉和面筋组成的滤过物。在筛上进行多次洗涤，并将洗涤液与初始滤液一起收集。然后将收集的滤液通过漏斗过滤器(具有0.45微米开口的玻璃过滤器)，以进一步将不溶性固体(淀粉和面筋)与剩余滤液(主要是溶解的固体)分离。将这些保留的不溶性固体洗涤，并且然后烘干至干燥。称取不溶性干物质，并且然后分析淀粉含量。
在pH 3.8下进行10-g纤维测定，以30ug EP/g玉米的剂量在52℃下孵育1小时。使用GH62阿拉伯呋喃糖苷酶B+纤维素酶L、GH62阿拉伯呋喃糖苷酶B+纤维素酶M、GH62阿拉伯呋喃糖苷酶C+纤维素酶L、和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶C+纤维素酶M的共混物。测量淀粉+面筋(干物质)从30ug/g玉米的剂量的玉米纤维的释放。
更具体地，根据示例性的10-g纤维测定，使用以下设备和试剂来分析按压的玉米纤维样品(源自湿磨设备)，其在使用前被冷冻储存并解冻，根据下表中的步骤：
●150-μm的开式筛和托盘(莱驰股份有限公司(Retsch GmbH))
●250ml带盖的锥形瓶
●150ml瓶
●玻璃微滤纸(沃特曼150mm直径)
●真空过滤装置
●小铝盘
●2000ml塑料烧杯
●600ml玻璃烧杯
●漏斗
●水分分析仪
●用于HPLC系统的玻璃小瓶和盖子
●HPLC系统
●0.45μm孔径聚丙烯针筒式滤器(沃特曼公司(Whatman))
●3ml塑料注射器
●烘箱(能够加热至105℃)
●冰浴
●分析天平
●橡胶刮刀
●0.4M HCl
●1M乙酸钠缓冲液(pH 4)
●1M乙酸
●1M pH 7乙酸钠
实例2.
在pH 4.0下进行10-g纤维测定，以35ug EP/g玉米的剂量在52℃下孵育4小时，使用与蛋白酶D和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶C进一步组合的纤维素酶K、纤维素酶L或纤维素酶N的共混物。共混物由以下组成：10％(w/w)的蛋白酶D、10％(w/w)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶C和剩余80％(w/w)来自纤维素酶K/纤维素酶L/纤维素酶N。为了比较，包括仅含有纤维素酶K和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶C(无GH62)的共混物。测量淀粉+面筋(干物质)从以下指定剂量的玉米纤维的释放。
实例3.
在pH 4.0下进行10-g纤维测定，以35ug EP/g玉米或50ug EP/g玉米70ug EP/g玉米的剂量在52℃下孵育4小时，使用与蛋白酶D和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶B组合的纤维素酶L或纤维素酶N的共混物。共混物由以下组成：10％(w/w)的蛋白酶D、10％(w/w)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶B和剩余80％(w/w)来自纤维素酶L或纤维素酶N。为了比较，包括不含GH62的共混物。测量淀粉+面筋(干物质)从以下指定剂量的玉米纤维的释放。
实例4.
该10-g纤维测定通常包括：在酶存在下，在与该方法相关的条件(pH3.5至4，温度约52℃)下并且经1至4hr之间的时间段，孵育从湿磨设备获得的湿纤维样品。孵育后，将纤维转移并压在筛(典型地为100微米或更小)上，在其中然后收集主要由分离的淀粉和面筋组成的滤过物。在筛上进行多次洗涤，并将洗涤液与初始滤液一起收集。然后将收集的滤液通过漏斗过滤器(具有0.45微米开口的玻璃过滤器)，以进一步将不溶性固体(淀粉和面筋)与剩余滤液(主要是溶解的固体)分离。将这些保留的不溶性固体洗涤，并且然后烘干至干燥。称取不溶性干物质，并且然后分析淀粉含量。
在pH 4.0下进行10-g纤维测定，以35ug EP/g玉米的剂量在52℃下孵育4小时，使用纤维素酶N的共混物，包含或不包含GH62阿拉伯呋喃糖苷酶B，以及包含或不包含蛋白酶D。共混物由以下组成：10％(w/w)的蛋白酶D(当包括时)、10％(w/w)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶B(当包括时)和剩余量(80％、90％、或100％(w/w))的纤维素酶N。测量淀粉+面筋(干物质)从玉米纤维的释放。
实例5.
在pH 3.8下进行10-g纤维测定，以35ug EP/g玉米的剂量在52℃下孵育1小时，使用与GH62阿拉伯呋喃糖苷酶D或GH62阿拉伯呋喃糖苷酶E组合的包括Celluclast和GH10木聚糖酶A的共混物。共混物由以下组成：5％(w/w)的GH62阿拉伯呋喃糖苷酶D或GH62阿拉伯呋喃糖苷酶E、15％(w/w)的GH10木聚糖酶A和剩余80％(w/w)来自Celluclast。为了比较，包括仅含有Celluclast和GH10木聚糖酶D(无GH62)的共混物。测量淀粉+面筋(干物质)从以下指定剂量的玉米纤维的释放。
因此，在Celluclast+GH10木聚糖酶A上添加GH62阿拉伯呋喃糖苷酶D和GH62阿拉伯呋喃糖苷酶E可以显著提高玉米湿磨过程中淀粉+面筋的产量。
实例6.
在每天磨1400MT玉米的湿磨设备中进行全规模工业试验。该试验进行了几个月，可以大致分为酶前基线(基线1)、共混物1阶段、共混物1后基线(基线2)和共混物2阶段。下表1中给出了测试的酶和使用的相关剂量。在第三次碾磨步骤之后，将酶直接添加到纤维洗涤阶段。
表1
在该试验中使用的两种酶共混物之间的主要组成差异是添加GH62阿拉伯呋喃糖苷酶，并且在这两种共混物之间使用的木聚糖酶(家族GH10)来源生物体不同。
表1显示了这些共混物在试验过程中的剂量差异。与共混物2相比，共混物1在总酶蛋白中的剂量高4倍。下表2和3显示了在纤维组成和实际实现的产量两方面，与其基线相比在过程中添加酶的作用。在条件相对稳定的情况下，这些产量数据和纤维组成在两周的价值数据上取平均值，并且在纤维洗涤中的总停留时间始终在80-90分钟左右。
4x低剂量和更好性能的共混物2的组合强烈指向共混物中GH62的促进作用，如从纤维中淀粉含量的较高降低(10对比6个百分点的差异)中所判断的。两者都表现出纤维中的蛋白质和水分的相同的降低。至于实现的产量，共混物2的更好的性能再次表现为实现了更高的淀粉产量(相差约1个百分点的淀粉产量)。这些酶之间的面筋减少大致相同(与基线相差0.2到0.3个百分点，共混物2可能略好)。当将进来的玉米的蛋白质含量归一化时也显示了这一点(使用共混物2总回收似乎稍好一些)。
表2.纤维组成
表3.实现的产量/能量减少
序列表
<110> 诺维信公司（Novozymes A/S）
<120> 研磨方法
<130> 12985-WO-PCT
<160> 119
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 保守基序:
[H/Y][L/M]F[F/S][A/C/H/S/T/V][A/D/G/N/R]D[D/E/N]G
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(1)
<223> 保守基序位置1的氨基酸是
组氨酸（His, H）或酪氨酸 (Tyr, Y）。
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (2)..(2)
<223> 保守基序位置2的氨基酸是
亮氨酸（Leu，L）或甲硫氨酸（Met，M）。
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (4)..(4)
<223> 保守基序位置4的氨基酸是
苯丙氨酸（Phy，F）或丝氨酸（Ser，S）。
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> 保守基序位置5的氨基酸是
丙氨酸（Ala，A）、半胱氨酸（Cys，C）、组氨酸（His，H）、丝氨酸
（Ser，S）、苏氨酸（Thr，T）或缬氨酸（Val，V）。
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (6)..(6)
<223> 保守基序位置6的氨基酸是
丙氨酸（Ala，A）、天冬氨酸（Asp，D）、甘氨酸（Gly，G）、
天冬酰胺（Asn，N）或精氨酸（Arg，R）。
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (8)..(8)
<223> 保守基序位置8的氨基酸是
天冬氨酸（Asp，D）、谷氨酸（Glu，E）或天冬酰胺（Asn，N）。
<400> 1
Xaa Xaa Phe Xaa Xaa Xaa Asp Xaa Gly
1 5
<210> 2
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 保守基序: [H/Y]LF[F/S][A/S/V][A/D/G]DNG
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(1)
<223> 保守基序位置1的氨基酸是
组氨酸 (His, H）或酪氨酸 (Tyr, Y）。
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (4)..(4)
<223> 保守基序位置4的氨基酸是
苯丙氨酸（Phy，F）或丝氨酸（Ser，S）。
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> 保守基序位置5的氨基酸是
丙氨酸（Ala，A）、丝氨酸（Ser，S）或缬氨酸（Val，V）。
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (6)..(6)
<223> 保守基序位置6的氨基酸是
丙氨酸（Ala，A）、天冬氨酸（Asp，D）或甘氨酸（Gly，G）。
<400> 2
Xaa Leu Phe Xaa Xaa Xaa Asp Asn Gly
1 5
<210> 3
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 保守基序: YLFF[A/V][A/G]DNG
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> 保守基序位置5的氨基酸是
丙氨酸（Ala，A）或缬氨酸（Val，V）。
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (6)..(6)
<223> 保守基序位置6的氨基酸是
丙氨酸（Ala，A）或甘氨酸（Gly，G）。
<400> 3
Tyr Leu Phe Phe Xaa Xaa Asp Asn Gly
1 5
<210> 4
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 保守基序: YLFFAGDNG
<400> 4
Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly
1 5
<210> 5
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 保守基序: [H/Y]LFSSDDNG
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(1)
<223> 保守基序位置1的氨基酸是
组氨酸（His, H）或酪氨酸（Tyr, Y）。
<400> 5
Xaa Leu Phe Ser Ser Asp Asp Asn Gly
1 5
<210> 6
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 保守基序: YLFSSDDNG
<400> 6
Tyr Leu Phe Ser Ser Asp Asp Asn Gly
1 5
<210> 7
<211> 987
<212> DNA
<213> 胶囊青霉
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(984)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(78)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (79)..(984)
<400> 7
atg aga ttc ttc caa gcg aaa gct ggc ctg ata tca tca ggg ata act 48
Met Arg Phe Phe Gln Ala Lys Ala Gly Leu Ile Ser Ser Gly Ile Thr
-25 -20 -15
ttg ctc gcg tca gtg cca gta gtc atc gcc aat tgc gcc ctt cca tcg 96
Leu Leu Ala Ser Val Pro Val Val Ile Ala Asn Cys Ala Leu Pro Ser
-10 -5 -1 1 5
aca tat agc tgg aca tca act agc gct tta gcg aat ccc aag ccc ggg 144
Thr Tyr Ser Trp Thr Ser Thr Ser Ala Leu Ala Asn Pro Lys Pro Gly
10 15 20
tgg aca gca atc aag gat ttt acc aat gtg gtc ttc aat aac agg cat 192
Trp Thr Ala Ile Lys Asp Phe Thr Asn Val Val Phe Asn Asn Arg His
25 30 35
gtc gtc tat gca tct acc acc gac aca agt ggg aac tac ggc gca atg 240
Val Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Thr Ser Gly Asn Tyr Gly Ala Met
40 45 50
agc ttc ggt gtc ttt tcg gat tgg cct ggc atg gca tct gcg agc caa 288
Ser Phe Gly Val Phe Ser Asp Trp Pro Gly Met Ala Ser Ala Ser Gln
55 60 65 70
aac gca ttg agc ttt gca gcc gtc gca ccc acc ttg ttc tac ttt cag 336
Asn Ala Leu Ser Phe Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Gln
75 80 85
cca aaa agt ata tgg gtt ctg gcc tat caa tgg ggc tct agc acg ttt 384
Pro Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ser Ser Thr Phe
90 95 100
acc tac cga aca tca agt gat ccc acc aat gcc tat gga tgg tca tcg 432
Thr Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Tyr Gly Trp Ser Ser
105 110 115
gag caa gcc ctt ttc tct ggg aaa gtt acc ggc tcg agc act ggc gcc 480
Glu Gln Ala Leu Phe Ser Gly Lys Val Thr Gly Ser Ser Thr Gly Ala
120 125 130
att gat cag aca ctt atc ggt gac gcc acg cat atg tat ctt ttc ttt 528
Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Thr His Met Tyr Leu Phe Phe
135 140 145 150
gcc gga gac aat ggc aaa ata tat cgc tct agc atg ccc atc agc aat 576
Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Pro Ile Ser Asn
155 160 165
ttc cct gga aac ttt gga aca gtg tca gag gtg gta cta agt gac act 624
Phe Pro Gly Asn Phe Gly Thr Val Ser Glu Val Val Leu Ser Asp Thr
170 175 180
cag aat aat cta ttt gag gcg gtc caa gtg tac act gtg aaa ggt caa 672
Gln Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Lys Gly Gln
185 190 195
aac cag tac ctg atg atc gtt gag gca att gga tca gaa ggg cgg tat 720
Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser Glu Gly Arg Tyr
200 205 210
ttc cgt tca ttc act gcc agc agt ctt ggt ggt ttg tgg act gcc cag 768
Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Gly Gly Leu Trp Thr Ala Gln
215 220 225 230
gca gca agc gag act aag ccc ttt gct ggt aaa gcc aat agc ggt gca 816
Ala Ala Ser Glu Thr Lys Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala
235 240 245
acc tgg acc aac gac atc agt cac ggc gat ttg gtt cgt tcc aac cct 864
Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Ser Asn Pro
250 255 260
gac caa aca atg acg atc gat cca tgc aac ctg caa ttc ctc tac cag 912
Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Phe Leu Tyr Gln
265 270 275
gga cga aat cct ggc gca agt ggc aac tac aat acc tta ccg tgg agg 960
Gly Arg Asn Pro Gly Ala Ser Gly Asn Tyr Asn Thr Leu Pro Trp Arg
280 285 290
ccg ggt gtg ctc act ttg aat aat taa 987
Pro Gly Val Leu Thr Leu Asn Asn
295 300
<210> 8
<211> 328
<212> PRT
<213> 胶囊青霉
<400> 8
Met Arg Phe Phe Gln Ala Lys Ala Gly Leu Ile Ser Ser Gly Ile Thr
-25 -20 -15
Leu Leu Ala Ser Val Pro Val Val Ile Ala Asn Cys Ala Leu Pro Ser
-10 -5 -1 1 5
Thr Tyr Ser Trp Thr Ser Thr Ser Ala Leu Ala Asn Pro Lys Pro Gly
10 15 20
Trp Thr Ala Ile Lys Asp Phe Thr Asn Val Val Phe Asn Asn Arg His
25 30 35
Val Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Thr Ser Gly Asn Tyr Gly Ala Met
40 45 50
Ser Phe Gly Val Phe Ser Asp Trp Pro Gly Met Ala Ser Ala Ser Gln
55 60 65 70
Asn Ala Leu Ser Phe Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Gln
75 80 85
Pro Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ser Ser Thr Phe
90 95 100
Thr Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Tyr Gly Trp Ser Ser
105 110 115
Glu Gln Ala Leu Phe Ser Gly Lys Val Thr Gly Ser Ser Thr Gly Ala
120 125 130
Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Thr His Met Tyr Leu Phe Phe
135 140 145 150
Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Pro Ile Ser Asn
155 160 165
Phe Pro Gly Asn Phe Gly Thr Val Ser Glu Val Val Leu Ser Asp Thr
170 175 180
Gln Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Lys Gly Gln
185 190 195
Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser Glu Gly Arg Tyr
200 205 210
Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Gly Gly Leu Trp Thr Ala Gln
215 220 225 230
Ala Ala Ser Glu Thr Lys Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala
235 240 245
Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Ser Asn Pro
250 255 260
Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Phe Leu Tyr Gln
265 270 275
Gly Arg Asn Pro Gly Ala Ser Gly Asn Tyr Asn Thr Leu Pro Trp Arg
280 285 290
Pro Gly Val Leu Thr Leu Asn Asn
295 300
<210> 9
<211> 302
<212> PRT
<213> 胶囊青霉
<400> 9
Asn Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr Ser Trp Thr Ser Thr Ser Ala Leu
1 5 10 15
Ala Asn Pro Lys Pro Gly Trp Thr Ala Ile Lys Asp Phe Thr Asn Val
20 25 30
Val Phe Asn Asn Arg His Val Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Thr Ser
35 40 45
Gly Asn Tyr Gly Ala Met Ser Phe Gly Val Phe Ser Asp Trp Pro Gly
50 55 60
Met Ala Ser Ala Ser Gln Asn Ala Leu Ser Phe Ala Ala Val Ala Pro
65 70 75 80
Thr Leu Phe Tyr Phe Gln Pro Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln
85 90 95
Trp Gly Ser Ser Thr Phe Thr Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn
100 105 110
Ala Tyr Gly Trp Ser Ser Glu Gln Ala Leu Phe Ser Gly Lys Val Thr
115 120 125
Gly Ser Ser Thr Gly Ala Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Thr
130 135 140
His Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser
145 150 155 160
Ser Met Pro Ile Ser Asn Phe Pro Gly Asn Phe Gly Thr Val Ser Glu
165 170 175
Val Val Leu Ser Asp Thr Gln Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val
180 185 190
Tyr Thr Val Lys Gly Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile
195 200 205
Gly Ser Glu Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Gly
210 215 220
Gly Leu Trp Thr Ala Gln Ala Ala Ser Glu Thr Lys Pro Phe Ala Gly
225 230 235 240
Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp
245 250 255
Leu Val Arg Ser Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn
260 265 270
Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly Arg Asn Pro Gly Ala Ser Gly Asn Tyr
275 280 285
Asn Thr Leu Pro Trp Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Asn Asn
290 295 300
<210> 10
<211> 990
<212> DNA
<213> 黄灰青霉
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(987)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(78)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (79)..(987)
<400> 10
atg aaa ttc tcc aag gca aaa gct ggc ctg gtg tca tct ggc atg ctg 48
Met Lys Phe Ser Lys Ala Lys Ala Gly Leu Val Ser Ser Gly Met Leu
-25 -20 -15
ttg ctc gca tca gta cca gtt gcc gtc gcc gac tgc gcg ctt cca tca 96
Leu Leu Ala Ser Val Pro Val Ala Val Ala Asp Cys Ala Leu Pro Ser
-10 -5 -1 1 5
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Thr Tyr Thr Trp Thr Ser Thr Gly Ala Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly
10 15 20
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25 30 35
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40 45 50
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Asn Phe Gly Pro Phe Ser Asp Trp Ser Gly Met Ala Thr Ala Ser Gln
55 60 65 70
atc aaa acg agc ttt aac gct gtt gcg ccc act ttg ttc tac ttc cag 336
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75 80 85
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Pro Lys Asp Ile Trp Val Ile Ala Tyr Gln Trp Gly Ser Ser Thr Phe
90 95 100
acc tat cga aca tca agt gat cct acc aat gcc aat gga tgg tca tcg 432
Thr Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ser
105 110 115
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Asp Gln Thr Val Ile Gly Asp Ser Thr His Met Tyr Leu Phe Phe Ala
135 140 145 150
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Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Ser Ile Asp Lys Phe
155 160 165
cct gga aac ttc gga aca agt tcg gaa ata gta ctg agt ggc gct agg 624
Pro Gly Asn Phe Gly Thr Ser Ser Glu Ile Val Leu Ser Gly Ala Arg
170 175 180
aac gac ctg ttc gaa gca gtt caa gtg tac act gtt aag ggt cag aac 672
Asn Asp Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Lys Gly Gln Asn
185 190 195
aag tac ctt atg ctt gtc gaa gca att gga gca caa ggg cag cgg tat 720
Lys Tyr Leu Met Leu Val Glu Ala Ile Gly Ala Gln Gly Gln Arg Tyr
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Phe Arg Ser Phe Val Ser Ser Ser Leu Gly Gly Lys Trp Glu Pro Gln
215 220 225 230
gca gca agc gag agc aag ccc ttc gcc gga aaa gcc aat gtc ggt gca 816
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Thr Trp Thr Lys Asp Phe Ser His Gly Asp Leu Val Arg Thr Asn Pro
250 255 260
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Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln
265 270 275
gga cgg gat ccc acc gcc acc agt agt aac tac aat acc ata ccg tgg 960
Gly Arg Asp Pro Thr Ala Thr Ser Ser Asn Tyr Asn Thr Ile Pro Trp
280 285 290
cag ccc gcc gtt ctc acc ctg aag aag taa 990
Gln Pro Ala Val Leu Thr Leu Lys Lys
295 300
<210> 11
<211> 329
<212> PRT
<213> 黄灰青霉
<400> 11
Met Lys Phe Ser Lys Ala Lys Ala Gly Leu Val Ser Ser Gly Met Leu
-25 -20 -15
Leu Leu Ala Ser Val Pro Val Ala Val Ala Asp Cys Ala Leu Pro Ser
-10 -5 -1 1 5
Thr Tyr Thr Trp Thr Ser Thr Gly Ala Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly
10 15 20
Trp Thr Ala Ile Lys Asp Phe Thr Asn Val Val Val Asn Asn Lys His
25 30 35
Leu Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Ala Ser Gly Asn Tyr Gly Ala Met
40 45 50
Asn Phe Gly Pro Phe Ser Asp Trp Ser Gly Met Ala Thr Ala Ser Gln
55 60 65 70
Ile Lys Thr Ser Phe Asn Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Gln
75 80 85
Pro Lys Asp Ile Trp Val Ile Ala Tyr Gln Trp Gly Ser Ser Thr Phe
90 95 100
Thr Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ser
105 110 115
Glu Gln Ala Leu Phe Ser Gly Lys Ile Thr Ala Pro Asp Ala Ala Ile
120 125 130
Asp Gln Thr Val Ile Gly Asp Ser Thr His Met Tyr Leu Phe Phe Ala
135 140 145 150
Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Ser Ile Asp Lys Phe
155 160 165
Pro Gly Asn Phe Gly Thr Ser Ser Glu Ile Val Leu Ser Gly Ala Arg
170 175 180
Asn Asp Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Lys Gly Gln Asn
185 190 195
Lys Tyr Leu Met Leu Val Glu Ala Ile Gly Ala Gln Gly Gln Arg Tyr
200 205 210
Phe Arg Ser Phe Val Ser Ser Ser Leu Gly Gly Lys Trp Glu Pro Gln
215 220 225 230
Ala Ala Ser Glu Ser Lys Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Val Gly Ala
235 240 245
Thr Trp Thr Lys Asp Phe Ser His Gly Asp Leu Val Arg Thr Asn Pro
250 255 260
Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln
265 270 275
Gly Arg Asp Pro Thr Ala Thr Ser Ser Asn Tyr Asn Thr Ile Pro Trp
280 285 290
Gln Pro Ala Val Leu Thr Leu Lys Lys
295 300
<210> 12
<211> 303
<212> PRT
<213> 黄灰青霉
<400> 12
Asp Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr Thr Trp Thr Ser Thr Gly Ala Leu
1 5 10 15
Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Thr Ala Ile Lys Asp Phe Thr Asn Val
20 25 30
Val Val Asn Asn Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Ala Ser
35 40 45
Gly Asn Tyr Gly Ala Met Asn Phe Gly Pro Phe Ser Asp Trp Ser Gly
50 55 60
Met Ala Thr Ala Ser Gln Ile Lys Thr Ser Phe Asn Ala Val Ala Pro
65 70 75 80
Thr Leu Phe Tyr Phe Gln Pro Lys Asp Ile Trp Val Ile Ala Tyr Gln
85 90 95
Trp Gly Ser Ser Thr Phe Thr Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn
100 105 110
Ala Asn Gly Trp Ser Ser Glu Gln Ala Leu Phe Ser Gly Lys Ile Thr
115 120 125
Ala Pro Asp Ala Ala Ile Asp Gln Thr Val Ile Gly Asp Ser Thr His
130 135 140
Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser
145 150 155 160
Met Ser Ile Asp Lys Phe Pro Gly Asn Phe Gly Thr Ser Ser Glu Ile
165 170 175
Val Leu Ser Gly Ala Arg Asn Asp Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr
180 185 190
Thr Val Lys Gly Gln Asn Lys Tyr Leu Met Leu Val Glu Ala Ile Gly
195 200 205
Ala Gln Gly Gln Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Val Ser Ser Ser Leu Gly
210 215 220
Gly Lys Trp Glu Pro Gln Ala Ala Ser Glu Ser Lys Pro Phe Ala Gly
225 230 235 240
Lys Ala Asn Val Gly Ala Thr Trp Thr Lys Asp Phe Ser His Gly Asp
245 250 255
Leu Val Arg Thr Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn
260 265 270
Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Asp Pro Thr Ala Thr Ser Ser Asn
275 280 285
Tyr Asn Thr Ile Pro Trp Gln Pro Ala Val Leu Thr Leu Lys Lys
290 295 300
<210> 13
<211> 1212
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 密码子优化的DNA序列
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1209)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(63)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (64)..(1209)
<400> 13
atg atc ttg tcg gcg aag atg ctc gga gcg att ctc ttg gag ttg gcc 48
Met Ile Leu Ser Ala Lys Met Leu Gly Ala Ile Leu Leu Glu Leu Ala
-20 -15 -10
ctc aca gca gca gcg cag cag act ctc tac ggc cag tgt gga ggc aac 96
Leu Thr Ala Ala Ala Gln Gln Thr Leu Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Asn
-5 -1 1 5 10
ggc tgg aca gga ccc acc cag tgt gtg tcg gga gcc tgt tgt cag atc 144
Gly Trp Thr Gly Pro Thr Gln Cys Val Ser Gly Ala Cys Cys Gln Ile
15 20 25
cag aac ccc tgg tat tcg cag tgt ctc cct ggc tcc tgt tcc ccc tcc 192
Gln Asn Pro Trp Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Gly Ser Cys Ser Pro Ser
30 35 40
acc act ttg aca cgg gtc aca aca acc gca aca tcc act gca tcc aca 240
Thr Thr Leu Thr Arg Val Thr Thr Thr Ala Thr Ser Thr Ala Ser Thr
45 50 55
gcc act tcc ggc aca gga ggc tcc ttg ccc tcg tcc ttc aag tgg tcg 288
Ala Thr Ser Gly Thr Gly Gly Ser Leu Pro Ser Ser Phe Lys Trp Ser
60 65 70 75
tcg tcc gga ccc ttg gtc gac cct aag aac gac ggt cga ggc atc gca 336
Ser Ser Gly Pro Leu Val Asp Pro Lys Asn Asp Gly Arg Gly Ile Ala
80 85 90
gcg ttg aaa gat ccg tcg atc gtc gag gtc gat ggc aca tat cac gtg 384
Ala Leu Lys Asp Pro Ser Ile Val Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val
95 100 105
ttc gca tcg act gca act tcg gca ggc tac aac atg gtg tat ttc aac 432
Phe Ala Ser Thr Ala Thr Ser Ala Gly Tyr Asn Met Val Tyr Phe Asn
110 115 120
ttc acc gat ttc aac cag gca aac aac gca ccc ttc ttc tat ttg gac 480
Phe Thr Asp Phe Asn Gln Ala Asn Asn Ala Pro Phe Phe Tyr Leu Asp
125 130 135
aaa tcg cct att ggc tcg gga tac cga gcc gca ccc cag gtc ttc ttc 528
Lys Ser Pro Ile Gly Ser Gly Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Phe
140 145 150 155
ttc aag ccc cag aac ttg tgg tac ctc gtc tac cag aac ggc aac gca 576
Phe Lys Pro Gln Asn Leu Trp Tyr Leu Val Tyr Gln Asn Gly Asn Ala
160 165 170
gcc tac tcg acc aac aaa gat atc tcc aac cct gca ggc tgg tcc gca 624
Ala Tyr Ser Thr Asn Lys Asp Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Ser Ala
175 180 185
ccc aag aca ttc tac tcg tcg cag ccc tcg atc atc aca gag aac atc 672
Pro Lys Thr Phe Tyr Ser Ser Gln Pro Ser Ile Ile Thr Glu Asn Ile
190 195 200
ggt aac ggt tac tgg gtc gat atg tgg gtc atc tgt gat tcg gcc aac 720
Gly Asn Gly Tyr Trp Val Asp Met Trp Val Ile Cys Asp Ser Ala Asn
205 210 215
tgt cac ttg ttc tcg tcc gac gat aac ggc cat ttg tac cgc tcg cag 768
Cys His Leu Phe Ser Ser Asp Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln
220 225 230 235
acg acg ttg gcg aac ttc ccc aac ggt atg acc aac aca gtg atc gcg 816
Thr Thr Leu Ala Asn Phe Pro Asn Gly Met Thr Asn Thr Val Ile Ala
240 245 250
atg cag gac tcg aac ccc aac aac ttg ttc gag gca tcc aac gtc tac 864
Met Gln Asp Ser Asn Pro Asn Asn Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr
255 260 265
cat gtg gga ggc ggt aag tat ctc ctc att gtc gag gcc atc ggc tcc 912
His Val Gly Gly Gly Lys Tyr Leu Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser
270 275 280
gga ggc gac cga tac ttc cgg tcg tgg acg tcg acg tcc ctc act ggt 960
Gly Gly Asp Arg Tyr Phe Arg Ser Trp Thr Ser Thr Ser Leu Thr Gly
285 290 295
acc tgg act gca ctc gca gca tcg gaa tcg aac cct ttc gca ggt gcc 1008
Thr Trp Thr Ala Leu Ala Ala Ser Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Ala
300 305 310 315
aag aac gtg gcc ttc tcc ggc aac gtc tgg acc aaa tcc atc tcg cac 1056
Lys Asn Val Ala Phe Ser Gly Asn Val Trp Thr Lys Ser Ile Ser His
320 325 330
gga gag atg atc cga gac cag gtg gat cag acc ttg aca atc tcc ccg 1104
Gly Glu Met Ile Arg Asp Gln Val Asp Gln Thr Leu Thr Ile Ser Pro
335 340 345
tgt aag ctc agg tac ttg tac cag ggc gtc gat ccg gca gca acc ggt 1152
Cys Lys Leu Arg Tyr Leu Tyr Gln Gly Val Asp Pro Ala Ala Thr Gly
350 355 360
aac tac aac tcg ttg ccg tgg aag ctc gcg ctc ctc acg cag acg aac 1200
Asn Tyr Asn Ser Leu Pro Trp Lys Leu Ala Leu Leu Thr Gln Thr Asn
365 370 375
tcg gca tgt tga 1212
Ser Ala Cys
380
<210> 14
<211> 403
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 14
Met Ile Leu Ser Ala Lys Met Leu Gly Ala Ile Leu Leu Glu Leu Ala
-20 -15 -10
Leu Thr Ala Ala Ala Gln Gln Thr Leu Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Asn
-5 -1 1 5 10
Gly Trp Thr Gly Pro Thr Gln Cys Val Ser Gly Ala Cys Cys Gln Ile
15 20 25
Gln Asn Pro Trp Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Gly Ser Cys Ser Pro Ser
30 35 40
Thr Thr Leu Thr Arg Val Thr Thr Thr Ala Thr Ser Thr Ala Ser Thr
45 50 55
Ala Thr Ser Gly Thr Gly Gly Ser Leu Pro Ser Ser Phe Lys Trp Ser
60 65 70 75
Ser Ser Gly Pro Leu Val Asp Pro Lys Asn Asp Gly Arg Gly Ile Ala
80 85 90
Ala Leu Lys Asp Pro Ser Ile Val Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val
95 100 105
Phe Ala Ser Thr Ala Thr Ser Ala Gly Tyr Asn Met Val Tyr Phe Asn
110 115 120
Phe Thr Asp Phe Asn Gln Ala Asn Asn Ala Pro Phe Phe Tyr Leu Asp
125 130 135
Lys Ser Pro Ile Gly Ser Gly Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Phe
140 145 150 155
Phe Lys Pro Gln Asn Leu Trp Tyr Leu Val Tyr Gln Asn Gly Asn Ala
160 165 170
Ala Tyr Ser Thr Asn Lys Asp Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Ser Ala
175 180 185
Pro Lys Thr Phe Tyr Ser Ser Gln Pro Ser Ile Ile Thr Glu Asn Ile
190 195 200
Gly Asn Gly Tyr Trp Val Asp Met Trp Val Ile Cys Asp Ser Ala Asn
205 210 215
Cys His Leu Phe Ser Ser Asp Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln
220 225 230 235
Thr Thr Leu Ala Asn Phe Pro Asn Gly Met Thr Asn Thr Val Ile Ala
240 245 250
Met Gln Asp Ser Asn Pro Asn Asn Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr
255 260 265
His Val Gly Gly Gly Lys Tyr Leu Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser
270 275 280
Gly Gly Asp Arg Tyr Phe Arg Ser Trp Thr Ser Thr Ser Leu Thr Gly
285 290 295
Thr Trp Thr Ala Leu Ala Ala Ser Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Ala
300 305 310 315
Lys Asn Val Ala Phe Ser Gly Asn Val Trp Thr Lys Ser Ile Ser His
320 325 330
Gly Glu Met Ile Arg Asp Gln Val Asp Gln Thr Leu Thr Ile Ser Pro
335 340 345
Cys Lys Leu Arg Tyr Leu Tyr Gln Gly Val Asp Pro Ala Ala Thr Gly
350 355 360
Asn Tyr Asn Ser Leu Pro Trp Lys Leu Ala Leu Leu Thr Gln Thr Asn
365 370 375
Ser Ala Cys
380
<210> 15
<211> 382
<212> PRT
<213> 棒曲霉
<400> 15
Gln Gln Thr Leu Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Thr Gly Pro
1 5 10 15
Thr Gln Cys Val Ser Gly Ala Cys Cys Gln Ile Gln Asn Pro Trp Tyr
20 25 30
Ser Gln Cys Leu Pro Gly Ser Cys Ser Pro Ser Thr Thr Leu Thr Arg
35 40 45
Val Thr Thr Thr Ala Thr Ser Thr Ala Ser Thr Ala Thr Ser Gly Thr
50 55 60
Gly Gly Ser Leu Pro Ser Ser Phe Lys Trp Ser Ser Ser Gly Pro Leu
65 70 75 80
Val Asp Pro Lys Asn Asp Gly Arg Gly Ile Ala Ala Leu Lys Asp Pro
85 90 95
Ser Ile Val Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr Ala
100 105 110
Thr Ser Ala Gly Tyr Asn Met Val Tyr Phe Asn Phe Thr Asp Phe Asn
115 120 125
Gln Ala Asn Asn Ala Pro Phe Phe Tyr Leu Asp Lys Ser Pro Ile Gly
130 135 140
Ser Gly Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Phe Phe Lys Pro Gln Asn
145 150 155 160
Leu Trp Tyr Leu Val Tyr Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr Asn
165 170 175
Lys Asp Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Ser Ala Pro Lys Thr Phe Tyr
180 185 190
Ser Ser Gln Pro Ser Ile Ile Thr Glu Asn Ile Gly Asn Gly Tyr Trp
195 200 205
Val Asp Met Trp Val Ile Cys Asp Ser Ala Asn Cys His Leu Phe Ser
210 215 220
Ser Asp Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Thr Leu Ala Asn
225 230 235 240
Phe Pro Asn Gly Met Thr Asn Thr Val Ile Ala Met Gln Asp Ser Asn
245 250 255
Pro Asn Asn Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr His Val Gly Gly Gly
260 265 270
Lys Tyr Leu Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser Gly Gly Asp Arg Tyr
275 280 285
Phe Arg Ser Trp Thr Ser Thr Ser Leu Thr Gly Thr Trp Thr Ala Leu
290 295 300
Ala Ala Ser Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Ala Lys Asn Val Ala Phe
305 310 315 320
Ser Gly Asn Val Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met Ile Arg
325 330 335
Asp Gln Val Asp Gln Thr Leu Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu Arg Tyr
340 345 350
Leu Tyr Gln Gly Val Asp Pro Ala Ala Thr Gly Asn Tyr Asn Ser Leu
355 360 365
Pro Trp Lys Leu Ala Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys
370 375 380
<210> 16
<211> 1188
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 密码子优化的DNA序列
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1185)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(51)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (52)..(1185)
<400> 16
atg aag gcg atc gga gcg acc ctc ctc gga ttg gcc ctc gcg gtg cag 48
Met Lys Ala Ile Gly Ala Thr Leu Leu Gly Leu Ala Leu Ala Val Gln
-15 -10 -5
gca cag cag ccg ctc tat gca cag tgt gga ggc aac gga tgg acc ggt 96
Ala Gln Gln Pro Leu Tyr Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Thr Gly
-1 1 5 10 15
tcg acg cag tgt gtg gca ggt gcc tgt tgt tcg tcc att aac gcc tgg 144
Ser Thr Gln Cys Val Ala Gly Ala Cys Cys Ser Ser Ile Asn Ala Trp
20 25 30
tac tat cag tgt ttg tcc gga aac tgt atg ccc tcg aca acg atg acg 192
Tyr Tyr Gln Cys Leu Ser Gly Asn Cys Met Pro Ser Thr Thr Met Thr
35 40 45
aca acc gca act agg acc aca tcg acc tcc acg tcc gga ccc acg ggc 240
Thr Thr Ala Thr Arg Thr Thr Ser Thr Ser Thr Ser Gly Pro Thr Gly
50 55 60
tcc ttg cct cct tcc ttc aag tgg tcc tcg acc aac gcc ctc gtg ggt 288
Ser Leu Pro Pro Ser Phe Lys Trp Ser Ser Thr Asn Ala Leu Val Gly
65 70 75
cct aag aac gat ggc cga aac ctc gca ggt atc aaa gat ccg tcc atc 336
Pro Lys Asn Asp Gly Arg Asn Leu Ala Gly Ile Lys Asp Pro Ser Ile
80 85 90 95
atc gaa gtg gac ggc aca tac cat gtg ttc gcc tcg aca gcg cag gcc 384
Ile Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr Ala Gln Ala
100 105 110
tcc ggc tat aac ttg gtc tac ttc aac ttc acc gac ttc aac cag gca 432
Ser Gly Tyr Asn Leu Val Tyr Phe Asn Phe Thr Asp Phe Asn Gln Ala
115 120 125
ggt aac gca ccc ttc ttc tac ttg gat cag tcg ggc att ggc aca ggt 480
Gly Asn Ala Pro Phe Phe Tyr Leu Asp Gln Ser Gly Ile Gly Thr Gly
130 135 140
tat cgg gca gca ccc cag gtg ttc tac ttc cag cct cag cag ttg tgg 528
Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Tyr Phe Gln Pro Gln Gln Leu Trp
145 150 155
tac ctc atc ttc cag aac gga aac gca gca tac tcg acc aac aag gat 576
Tyr Leu Ile Phe Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr Asn Lys Asp
160 165 170 175
atc tcc aac cct gca ggt tgg tcc gca ccg aaa aac ttc ttc tcc tcg 624
Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Ser Ala Pro Lys Asn Phe Phe Ser Ser
180 185 190
gtc cct tcc att atc acg cag aac atc ggt aac ggc tac tgg gtc gat 672
Val Pro Ser Ile Ile Thr Gln Asn Ile Gly Asn Gly Tyr Trp Val Asp
195 200 205
atg tgg gtc atc tgt gac tcg tcc aac tgt tac ttg ttc tcc tcg gat 720
Met Trp Val Ile Cys Asp Ser Ser Asn Cys Tyr Leu Phe Ser Ser Asp
210 215 220
gac aac ggc cat ctc tac cga tcc cag acg acg ttg tcg aac ttc ccc 768
Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Thr Leu Ser Asn Phe Pro
225 230 235
aac ggc atg ggt aac acc gtc atc gcc ctc tcg gat tcc aac ccc aac 816
Asn Gly Met Gly Asn Thr Val Ile Ala Leu Ser Asp Ser Asn Pro Asn
240 245 250 255
aac ttg ttc gag gcc tcg aac gtc tac cgg gtg ggc aac gag tac ctc 864
Asn Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr Arg Val Gly Asn Glu Tyr Leu
260 265 270
ctc atc gtc gag gca atc ggt tcc gat gga aac agg tat ttc cgc tcg 912
Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser Asp Gly Asn Arg Tyr Phe Arg Ser
275 280 285
tgg aca gca ccg tcg ctc aca ggt acg tgg aca ggc ctc gca aac aca 960
Trp Thr Ala Pro Ser Leu Thr Gly Thr Trp Thr Gly Leu Ala Asn Thr
290 295 300
gaa gcc aac ccc ttc gcc agg tgg aac aac gtc gtg ttc tcc ggc acg 1008
Glu Ala Asn Pro Phe Ala Arg Trp Asn Asn Val Val Phe Ser Gly Thr
305 310 315
gcc tgg act aag tcg atc tcg cac ggc gag atg gtg cga tcc cag gtc 1056
Ala Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met Val Arg Ser Gln Val
320 325 330 335
gac cag acg atg aca att tcg ccg tgt aag ttg agg tac ttg tat cag 1104
Asp Gln Thr Met Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu Arg Tyr Leu Tyr Gln
340 345 350
ggc ttg tcg ccc act gca aca ggc gac tat aac tcc ttg ccc tgg aag 1152
Gly Leu Ser Pro Thr Ala Thr Gly Asp Tyr Asn Ser Leu Pro Trp Lys
355 360 365
ttg gcc ctc ctc acc cag aca aac tcg gca tgt tag 1188
Leu Ala Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys
370 375
<210> 17
<211> 395
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 17
Met Lys Ala Ile Gly Ala Thr Leu Leu Gly Leu Ala Leu Ala Val Gln
-15 -10 -5
Ala Gln Gln Pro Leu Tyr Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Thr Gly
-1 1 5 10 15
Ser Thr Gln Cys Val Ala Gly Ala Cys Cys Ser Ser Ile Asn Ala Trp
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Tyr Tyr Gln Cys Leu Ser Gly Asn Cys Met Pro Ser Thr Thr Met Thr
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Thr Thr Ala Thr Arg Thr Thr Ser Thr Ser Thr Ser Gly Pro Thr Gly
50 55 60
Ser Leu Pro Pro Ser Phe Lys Trp Ser Ser Thr Asn Ala Leu Val Gly
65 70 75
Pro Lys Asn Asp Gly Arg Asn Leu Ala Gly Ile Lys Asp Pro Ser Ile
80 85 90 95
Ile Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr Ala Gln Ala
100 105 110
Ser Gly Tyr Asn Leu Val Tyr Phe Asn Phe Thr Asp Phe Asn Gln Ala
115 120 125
Gly Asn Ala Pro Phe Phe Tyr Leu Asp Gln Ser Gly Ile Gly Thr Gly
130 135 140
Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Tyr Phe Gln Pro Gln Gln Leu Trp
145 150 155
Tyr Leu Ile Phe Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr Asn Lys Asp
160 165 170 175
Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Ser Ala Pro Lys Asn Phe Phe Ser Ser
180 185 190
Val Pro Ser Ile Ile Thr Gln Asn Ile Gly Asn Gly Tyr Trp Val Asp
195 200 205
Met Trp Val Ile Cys Asp Ser Ser Asn Cys Tyr Leu Phe Ser Ser Asp
210 215 220
Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Thr Leu Ser Asn Phe Pro
225 230 235
Asn Gly Met Gly Asn Thr Val Ile Ala Leu Ser Asp Ser Asn Pro Asn
240 245 250 255
Asn Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr Arg Val Gly Asn Glu Tyr Leu
260 265 270
Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser Asp Gly Asn Arg Tyr Phe Arg Ser
275 280 285
Trp Thr Ala Pro Ser Leu Thr Gly Thr Trp Thr Gly Leu Ala Asn Thr
290 295 300
Glu Ala Asn Pro Phe Ala Arg Trp Asn Asn Val Val Phe Ser Gly Thr
305 310 315
Ala Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met Val Arg Ser Gln Val
320 325 330 335
Asp Gln Thr Met Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu Arg Tyr Leu Tyr Gln
340 345 350
Gly Leu Ser Pro Thr Ala Thr Gly Asp Tyr Asn Ser Leu Pro Trp Lys
355 360 365
Leu Ala Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys
370 375
<210> 18
<211> 378
<212> PRT
<213> 费希新萨托菌
<400> 18
Gln Gln Pro Leu Tyr Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Thr Gly Ser
1 5 10 15
Thr Gln Cys Val Ala Gly Ala Cys Cys Ser Ser Ile Asn Ala Trp Tyr
20 25 30
Tyr Gln Cys Leu Ser Gly Asn Cys Met Pro Ser Thr Thr Met Thr Thr
35 40 45
Thr Ala Thr Arg Thr Thr Ser Thr Ser Thr Ser Gly Pro Thr Gly Ser
50 55 60
Leu Pro Pro Ser Phe Lys Trp Ser Ser Thr Asn Ala Leu Val Gly Pro
65 70 75 80
Lys Asn Asp Gly Arg Asn Leu Ala Gly Ile Lys Asp Pro Ser Ile Ile
85 90 95
Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr Ala Gln Ala Ser
100 105 110
Gly Tyr Asn Leu Val Tyr Phe Asn Phe Thr Asp Phe Asn Gln Ala Gly
115 120 125
Asn Ala Pro Phe Phe Tyr Leu Asp Gln Ser Gly Ile Gly Thr Gly Tyr
130 135 140
Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Tyr Phe Gln Pro Gln Gln Leu Trp Tyr
145 150 155 160
Leu Ile Phe Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr Asn Lys Asp Ile
165 170 175
Ser Asn Pro Ala Gly Trp Ser Ala Pro Lys Asn Phe Phe Ser Ser Val
180 185 190
Pro Ser Ile Ile Thr Gln Asn Ile Gly Asn Gly Tyr Trp Val Asp Met
195 200 205
Trp Val Ile Cys Asp Ser Ser Asn Cys Tyr Leu Phe Ser Ser Asp Asp
210 215 220
Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Thr Leu Ser Asn Phe Pro Asn
225 230 235 240
Gly Met Gly Asn Thr Val Ile Ala Leu Ser Asp Ser Asn Pro Asn Asn
245 250 255
Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr Arg Val Gly Asn Glu Tyr Leu Leu
260 265 270
Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser Asp Gly Asn Arg Tyr Phe Arg Ser Trp
275 280 285
Thr Ala Pro Ser Leu Thr Gly Thr Trp Thr Gly Leu Ala Asn Thr Glu
290 295 300
Ala Asn Pro Phe Ala Arg Trp Asn Asn Val Val Phe Ser Gly Thr Ala
305 310 315 320
Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met Val Arg Ser Gln Val Asp
325 330 335
Gln Thr Met Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu Arg Tyr Leu Tyr Gln Gly
340 345 350
Leu Ser Pro Thr Ala Thr Gly Asp Tyr Asn Ser Leu Pro Trp Lys Leu
355 360 365
Ala Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys
370 375
<210> 19
<211> 996
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 密码子优化的DNA序列
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(993)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(60)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (61)..(993)
<400> 19
atg aaa ttg tcc tgt gca ttc gtc gca gtg gca gca ttg gtg gcg acc 48
Met Lys Leu Ser Cys Ala Phe Val Ala Val Ala Ala Leu Val Ala Thr
-20 -15 -10 -5
gca gtg gag gcc aac ccc gag acc gaa cga agg cgg tcc tgt gcg ctc 96
Ala Val Glu Ala Asn Pro Glu Thr Glu Arg Arg Arg Ser Cys Ala Leu
-1 1 5 10
cct aca aca tat cgg tgg acg tcc tcg gca ccg ctc gcc cag ccc aag 144
Pro Thr Thr Tyr Arg Trp Thr Ser Ser Ala Pro Leu Ala Gln Pro Lys
15 20 25
gat ggc tgg gtc tcc ttg aaa gat ttc act cat gtc ccg tac aac gga 192
Asp Gly Trp Val Ser Leu Lys Asp Phe Thr His Val Pro Tyr Asn Gly
30 35 40
cag cac ttg gtg tat gca tcc tac cat gat tcg acc aag tat gga tcg 240
Gln His Leu Val Tyr Ala Ser Tyr His Asp Ser Thr Lys Tyr Gly Ser
45 50 55 60
atg gca ttc tcc ccc ttc aag cac tgg gca gat atg gcg aca gca acc 288
Met Ala Phe Ser Pro Phe Lys His Trp Ala Asp Met Ala Thr Ala Thr
65 70 75
cag acg gga atg aca cag gca gcc gtg gca ccg acg gtg ttc tac ttc 336
Gln Thr Gly Met Thr Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Val Phe Tyr Phe
80 85 90
aca ccc aaa aag ctc tgg ttc ttg gtg tcc cag tgg ggt tcg gca ccc 384
Thr Pro Lys Lys Leu Trp Phe Leu Val Ser Gln Trp Gly Ser Ala Pro
95 100 105
ttc aca tac cgg act tcg acg gac cct aca aaa gtc aac ggc tgg tcg 432
Phe Thr Tyr Arg Thr Ser Thr Asp Pro Thr Lys Val Asn Gly Trp Ser
110 115 120
gca ccc cag ccc ctc ttc acg ggc aaa gtg gca gat tcc ggc aca gga 480
Ala Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Lys Val Ala Asp Ser Gly Thr Gly
125 130 135 140
ccg atc gat cag aca gtg atc gcg gat gac cgg aag gtc tac ttg ttc 528
Pro Ile Asp Gln Thr Val Ile Ala Asp Asp Arg Lys Val Tyr Leu Phe
145 150 155
ttc gtc gca gac aac gga aag gtg tac cgc aca tcc atg gca att gga 576
Phe Val Ala Asp Asn Gly Lys Val Tyr Arg Thr Ser Met Ala Ile Gly
160 165 170
gac ttc cct gcc aac ttc ggc aca gcc tcc gag gtg att ttg tcg gat 624
Asp Phe Pro Ala Asn Phe Gly Thr Ala Ser Glu Val Ile Leu Ser Asp
175 180 185
acc cag gca aag ttg ttc gaa gca gtc cag gtc tac acc gtg gca ggt 672
Thr Gln Ala Lys Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Ala Gly
190 195 200
cag aac cag tac ctc atg atc gtg gag gcc cag ggt acc aac gga agg 720
Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Gln Gly Thr Asn Gly Arg
205 210 215 220
tac ttc cgg tcc ttc act gca aac tcg ttg gat gga gag tgg aag gtg 768
Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Asn Ser Leu Asp Gly Glu Trp Lys Val
225 230 235
cag gca ggc tcg gag tcc gca cct ttc gca ggc aag gcc aac tcg gga 816
Gln Ala Gly Ser Glu Ser Ala Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly
240 245 250
gcg tcc tgg acc aac gat gtc tcc cac ggt gat ctc att agg tcc aac 864
Ala Ser Trp Thr Asn Asp Val Ser His Gly Asp Leu Ile Arg Ser Asn
255 260 265
ccg gat cag aca atg acc atc gat cct tgt cgc ctc cag ctc ctc tac 912
Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Arg Leu Gln Leu Leu Tyr
270 275 280
cag gga cgc gac aag aac aag gtc ccg tcg tcc tat gat ttg gca ccg 960
Gln Gly Arg Asp Lys Asn Lys Val Pro Ser Ser Tyr Asp Leu Ala Pro
285 290 295 300
tat cgc cct ggc ctc ctc acc ttg tat ggc ctc tag 996
Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Tyr Gly Leu
305 310
<210> 20
<211> 331
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 20
Met Lys Leu Ser Cys Ala Phe Val Ala Val Ala Ala Leu Val Ala Thr
-20 -15 -10 -5
Ala Val Glu Ala Asn Pro Glu Thr Glu Arg Arg Arg Ser Cys Ala Leu
-1 1 5 10
Pro Thr Thr Tyr Arg Trp Thr Ser Ser Ala Pro Leu Ala Gln Pro Lys
15 20 25
Asp Gly Trp Val Ser Leu Lys Asp Phe Thr His Val Pro Tyr Asn Gly
30 35 40
Gln His Leu Val Tyr Ala Ser Tyr His Asp Ser Thr Lys Tyr Gly Ser
45 50 55 60
Met Ala Phe Ser Pro Phe Lys His Trp Ala Asp Met Ala Thr Ala Thr
65 70 75
Gln Thr Gly Met Thr Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Val Phe Tyr Phe
80 85 90
Thr Pro Lys Lys Leu Trp Phe Leu Val Ser Gln Trp Gly Ser Ala Pro
95 100 105
Phe Thr Tyr Arg Thr Ser Thr Asp Pro Thr Lys Val Asn Gly Trp Ser
110 115 120
Ala Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Lys Val Ala Asp Ser Gly Thr Gly
125 130 135 140
Pro Ile Asp Gln Thr Val Ile Ala Asp Asp Arg Lys Val Tyr Leu Phe
145 150 155
Phe Val Ala Asp Asn Gly Lys Val Tyr Arg Thr Ser Met Ala Ile Gly
160 165 170
Asp Phe Pro Ala Asn Phe Gly Thr Ala Ser Glu Val Ile Leu Ser Asp
175 180 185
Thr Gln Ala Lys Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Ala Gly
190 195 200
Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Gln Gly Thr Asn Gly Arg
205 210 215 220
Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Asn Ser Leu Asp Gly Glu Trp Lys Val
225 230 235
Gln Ala Gly Ser Glu Ser Ala Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly
240 245 250
Ala Ser Trp Thr Asn Asp Val Ser His Gly Asp Leu Ile Arg Ser Asn
255 260 265
Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Arg Leu Gln Leu Leu Tyr
270 275 280
Gln Gly Arg Asp Lys Asn Lys Val Pro Ser Ser Tyr Asp Leu Ala Pro
285 290 295 300
Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Tyr Gly Leu
305 310
<210> 21
<211> 311
<212> PRT
<213> 玉蜀黍黑粉菌
<400> 21
Asn Pro Glu Thr Glu Arg Arg Arg Ser Cys Ala Leu Pro Thr Thr Tyr
1 5 10 15
Arg Trp Thr Ser Ser Ala Pro Leu Ala Gln Pro Lys Asp Gly Trp Val
20 25 30
Ser Leu Lys Asp Phe Thr His Val Pro Tyr Asn Gly Gln His Leu Val
35 40 45
Tyr Ala Ser Tyr His Asp Ser Thr Lys Tyr Gly Ser Met Ala Phe Ser
50 55 60
Pro Phe Lys His Trp Ala Asp Met Ala Thr Ala Thr Gln Thr Gly Met
65 70 75 80
Thr Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Val Phe Tyr Phe Thr Pro Lys Lys
85 90 95
Leu Trp Phe Leu Val Ser Gln Trp Gly Ser Ala Pro Phe Thr Tyr Arg
100 105 110
Thr Ser Thr Asp Pro Thr Lys Val Asn Gly Trp Ser Ala Pro Gln Pro
115 120 125
Leu Phe Thr Gly Lys Val Ala Asp Ser Gly Thr Gly Pro Ile Asp Gln
130 135 140
Thr Val Ile Ala Asp Asp Arg Lys Val Tyr Leu Phe Phe Val Ala Asp
145 150 155 160
Asn Gly Lys Val Tyr Arg Thr Ser Met Ala Ile Gly Asp Phe Pro Ala
165 170 175
Asn Phe Gly Thr Ala Ser Glu Val Ile Leu Ser Asp Thr Gln Ala Lys
180 185 190
Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Ala Gly Gln Asn Gln Tyr
195 200 205
Leu Met Ile Val Glu Ala Gln Gly Thr Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser
210 215 220
Phe Thr Ala Asn Ser Leu Asp Gly Glu Trp Lys Val Gln Ala Gly Ser
225 230 235 240
Glu Ser Ala Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Ser Trp Thr
245 250 255
Asn Asp Val Ser His Gly Asp Leu Ile Arg Ser Asn Pro Asp Gln Thr
260 265 270
Met Thr Ile Asp Pro Cys Arg Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Asp
275 280 285
Lys Asn Lys Val Pro Ser Ser Tyr Asp Leu Ala Pro Tyr Arg Pro Gly
290 295 300
Leu Leu Thr Leu Tyr Gly Leu
305 310
<210> 22
<211> 996
<212> DNA
<213> 草酸青霉
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(993)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(87)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (88)..(993)
<400> 22
atg cgt tcc cct atc tct aac ctc gac ctg tgg tcg tct ttc act gtg 48
Met Arg Ser Pro Ile Ser Asn Leu Asp Leu Trp Ser Ser Phe Thr Val
-25 -20 -15
ctt ctc gca tcg gct ggt acc ctt gcg agt gcc gcg tgc ccc gtc ccc 96
Leu Leu Ala Ser Ala Gly Thr Leu Ala Ser Ala Ala Cys Pro Val Pro
-10 -5 -1 1
tcc cag ggt caa tac cgc tgg tct tcc acc ggt gcc ctg gct cag cct 144
Ser Gln Gly Gln Tyr Arg Trp Ser Ser Thr Gly Ala Leu Ala Gln Pro
5 10 15
cag cac ggc tgg act tcc atc aag gac ttc acc aac gtt gtc tac aac 192
Gln His Gly Trp Thr Ser Ile Lys Asp Phe Thr Asn Val Val Tyr Asn
20 25 30 35
ggc aag cac ctt gtc tac gcc tcc gtg gcc gac tcc aag ggc aac tac 240
Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Val Ala Asp Ser Lys Gly Asn Tyr
40 45 50
cac tcc atg aac ttc ggt ctc ttc agt gac tgg tcc cag atg gcc tcc 288
His Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Asp Trp Ser Gln Met Ala Ser
55 60 65
gcc agc cag aac ccc atg aac ttc aac gct gtc gcc ccg act ctg ttc 336
Ala Ser Gln Asn Pro Met Asn Phe Asn Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe
70 75 80
ttc ttc gct ccc aag aac gtc tgg gtt ctc gcc tac cag tgg ggc gcc 384
Phe Phe Ala Pro Lys Asn Val Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala
85 90 95
aac gcc ttc tcc tac cgt acc tcc aac gac ccc gcc aat gcc aat gga 432
Asn Ala Phe Ser Tyr Arg Thr Ser Asn Asp Pro Ala Asn Ala Asn Gly
100 105 110 115
tgg tcg tct gag cac ccg ctg ttc acc gga aag atc gcc aac agc ggt 480
Trp Ser Ser Glu His Pro Leu Phe Thr Gly Lys Ile Ala Asn Ser Gly
120 125 130
acc ggc ccc atc gac cag acc ctg atc ggt gac aac cag aac atg tac 528
Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Asn Gln Asn Met Tyr
135 140 145
ctg ttc ttc gcc ggt gat aac ggc aag atc tac cgg tcc agc atg ccc 576
Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Pro
150 155 160
ctc aac aac ttc ccc gga tcc ttc ggc ggt gcc tcc gag gtc atc ctg 624
Leu Asn Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Gly Ala Ser Glu Val Ile Leu
165 170 175
agc gac acc acc gcc aac ctc ttc gag gcc gtc cag gtc tac aag gtt 672
Ser Asp Thr Thr Ala Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Lys Val
180 185 190 195
gcc ggt gag aac aag tat ctc atg atc gtc gag gcc atg ggt gcc cac 720
Ala Gly Glu Asn Lys Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala His
200 205 210
ggc cgc tac ttc cgc tcc ttc act gcc acc agc ctc aac ggc aag tgg 768
Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Thr Ser Leu Asn Gly Lys Trp
215 220 225
acc ctc aac gct ggc tcc gag ggt gct ccc ttc gcc ggc aag gcc aac 816
Thr Leu Asn Ala Gly Ser Glu Gly Ala Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn
230 235 240
agc ggt gct ggc tgg acc aac gac atc agc cac ggt gac ctc gtc cgt 864
Ser Gly Ala Gly Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg
245 250 255
acc aac cct gac cag acc atg acc gtc gac atg tgc aac ctc cag ttc 912
Thr Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Met Cys Asn Leu Gln Phe
260 265 270 275
ctg tac cag ggc cgt gac ccc aac gcc aac ccc acc tac aac gct ctg 960
Leu Tyr Gln Gly Arg Asp Pro Asn Ala Asn Pro Thr Tyr Asn Ala Leu
280 285 290
cct tac cgc ccc ggt gtt ctc acc ctg aag cac tag 996
Pro Tyr Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Lys His
295 300
<210> 23
<211> 331
<212> PRT
<213> 草酸青霉
<400> 23
Met Arg Ser Pro Ile Ser Asn Leu Asp Leu Trp Ser Ser Phe Thr Val
-25 -20 -15
Leu Leu Ala Ser Ala Gly Thr Leu Ala Ser Ala Ala Cys Pro Val Pro
-10 -5 -1 1
Ser Gln Gly Gln Tyr Arg Trp Ser Ser Thr Gly Ala Leu Ala Gln Pro
5 10 15
Gln His Gly Trp Thr Ser Ile Lys Asp Phe Thr Asn Val Val Tyr Asn
20 25 30 35
Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Val Ala Asp Ser Lys Gly Asn Tyr
40 45 50
His Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Asp Trp Ser Gln Met Ala Ser
55 60 65
Ala Ser Gln Asn Pro Met Asn Phe Asn Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe
70 75 80
Phe Phe Ala Pro Lys Asn Val Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala
85 90 95
Asn Ala Phe Ser Tyr Arg Thr Ser Asn Asp Pro Ala Asn Ala Asn Gly
100 105 110 115
Trp Ser Ser Glu His Pro Leu Phe Thr Gly Lys Ile Ala Asn Ser Gly
120 125 130
Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Asn Gln Asn Met Tyr
135 140 145
Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Pro
150 155 160
Leu Asn Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Gly Ala Ser Glu Val Ile Leu
165 170 175
Ser Asp Thr Thr Ala Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Lys Val
180 185 190 195
Ala Gly Glu Asn Lys Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala His
200 205 210
Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Thr Ser Leu Asn Gly Lys Trp
215 220 225
Thr Leu Asn Ala Gly Ser Glu Gly Ala Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn
230 235 240
Ser Gly Ala Gly Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg
245 250 255
Thr Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Met Cys Asn Leu Gln Phe
260 265 270 275
Leu Tyr Gln Gly Arg Asp Pro Asn Ala Asn Pro Thr Tyr Asn Ala Leu
280 285 290
Pro Tyr Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Lys His
295 300
<210> 24
<211> 302
<212> PRT
<213> 草酸青霉
<400> 24
Pro Val Pro Ser Gln Gly Gln Tyr Arg Trp Ser Ser Thr Gly Ala Leu
1 5 10 15
Ala Gln Pro Gln His Gly Trp Thr Ser Ile Lys Asp Phe Thr Asn Val
20 25 30
Val Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Val Ala Asp Ser Lys
35 40 45
Gly Asn Tyr His Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Asp Trp Ser Gln
50 55 60
Met Ala Ser Ala Ser Gln Asn Pro Met Asn Phe Asn Ala Val Ala Pro
65 70 75 80
Thr Leu Phe Phe Phe Ala Pro Lys Asn Val Trp Val Leu Ala Tyr Gln
85 90 95
Trp Gly Ala Asn Ala Phe Ser Tyr Arg Thr Ser Asn Asp Pro Ala Asn
100 105 110
Ala Asn Gly Trp Ser Ser Glu His Pro Leu Phe Thr Gly Lys Ile Ala
115 120 125
Asn Ser Gly Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Asn Gln
130 135 140
Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser
145 150 155 160
Ser Met Pro Leu Asn Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Gly Ala Ser Glu
165 170 175
Val Ile Leu Ser Asp Thr Thr Ala Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val
180 185 190
Tyr Lys Val Ala Gly Glu Asn Lys Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met
195 200 205
Gly Ala His Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Thr Ser Leu Asn
210 215 220
Gly Lys Trp Thr Leu Asn Ala Gly Ser Glu Gly Ala Pro Phe Ala Gly
225 230 235 240
Lys Ala Asn Ser Gly Ala Gly Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp
245 250 255
Leu Val Arg Thr Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Met Cys Asn
260 265 270
Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly Arg Asp Pro Asn Ala Asn Pro Thr Tyr
275 280 285
Asn Ala Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Lys His
290 295 300
<210> 25
<211> 1030
<212> DNA
<213> 褐红篮状菌
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(70)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(48)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (49)..(1027)
<220>
<221> CDS
<222> (123)..(1027)
<400> 25
atg cat ttc ctc gcc gcg ttg ctc gcg gtt ctg cca ctt gta tct ggg 48
Met His Phe Leu Ala Ala Leu Leu Ala Val Leu Pro Leu Val Ser Gly
-15 -10 -5 -1
tct cca gta ccc gag aaa cga t gtaagttgta tccacctgaa cagtgaaagc 100
Ser Pro Val Pro Glu Lys Arg
1 5
tggacggtat tgacaatcac ag cc gga tgc gca ctt ccc tct acg tac aag 151
Ser Gly Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr Lys
10 15
tgg aca tcc act ggc ccg ctg gca agc ccc aag tcg ggt ttg gtt gct 199
Trp Thr Ser Thr Gly Pro Leu Ala Ser Pro Lys Ser Gly Leu Val Ala
20 25 30
ctg aga gac tat agc cat gtc atc tac aac ggc caa cat ctc gta tac 247
Leu Arg Asp Tyr Ser His Val Ile Tyr Asn Gly Gln His Leu Val Tyr
35 40 45
gga tcg acc gcc aac aca gct ggc agc tat ggt tcc atg aac ttt ggc 295
Gly Ser Thr Ala Asn Thr Ala Gly Ser Tyr Gly Ser Met Asn Phe Gly
50 55 60 65
ctg ttt tcg gac tgg tct gag atg tca tct gcc agc caa aac acg atg 343
Leu Phe Ser Asp Trp Ser Glu Met Ser Ser Ala Ser Gln Asn Thr Met
70 75 80
agc act ggc gcc gtc gct ccc acg atc ttc tac ttt gca cca aag agt 391
Ser Thr Gly Ala Val Ala Pro Thr Ile Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Ser
85 90 95
gtc tgg atc ctt gcc tat caa tgg ggt cca tat gcg ttt tcc tac agg 439
Val Trp Ile Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Pro Tyr Ala Phe Ser Tyr Arg
100 105 110
act tct acc gat cct tcc aat gcc aat ggc tgg tca tcg cca cag cct 487
Thr Ser Thr Asp Pro Ser Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ser Pro Gln Pro
115 120 125
ctt ttc acg gga act att tcc ggc tcc agt acc ggt gtc atc gat cag 535
Leu Phe Thr Gly Thr Ile Ser Gly Ser Ser Thr Gly Val Ile Asp Gln
130 135 140 145
aca gtt att ggc gat agc gaa aac atg tat ctc ttc ttt gct gga gat 583
Thr Val Ile Gly Asp Ser Glu Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp
150 155 160
aat ggc cat att tac cgt gct agc atg ccc att gga gac ttt cct gga 631
Asn Gly His Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asp Phe Pro Gly
165 170 175
agt ttc ggc tca gca tcg acg att gtc ctc agc gac tcg act aac aac 679
Ser Phe Gly Ser Ala Ser Thr Ile Val Leu Ser Asp Ser Thr Asn Asn
180 185 190
ttg ttc gag gcg gta gag gtc tac acc gtc gag ggt caa aat caa tac 727
Leu Phe Glu Ala Val Glu Val Tyr Thr Val Glu Gly Gln Asn Gln Tyr
195 200 205
ctc atg att gtc gag gca att ggt gcc aat gga cgt tat ttc cgc tcc 775
Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Ala Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser
210 215 220 225
ttc aca gct agt agt ctg gga ggc aca tgg acg gcg cag gct tca acc 823
Phe Thr Ala Ser Ser Leu Gly Gly Thr Trp Thr Ala Gln Ala Ser Thr
230 235 240
gag tcc aac cca ttc gct ggc aag gct aac agt ggc gcc acc tgg acc 871
Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr
245 250 255
aac gac atc agc agc ggc gat ttg gtc cgt act aat ccc gat cag aca 919
Asn Asp Ile Ser Ser Gly Asp Leu Val Arg Thr Asn Pro Asp Gln Thr
260 265 270
cag acg atc gat gcc tgc aat cta caa ttc ctc tat caa gga cga tcc 967
Gln Thr Ile Asp Ala Cys Asn Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly Arg Ser
275 280 285
acc agc tcc ggc ggc gac tac aac ctt ctt cct tac cag cct ggt ctg 1015
Thr Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Asn Leu Leu Pro Tyr Gln Pro Gly Leu
290 295 300 305
ttg aca ctt gct tag 1030
Leu Thr Leu Ala
<210> 26
<211> 325
<212> PRT
<213> 褐红篮状菌
<400> 26
Met His Phe Leu Ala Ala Leu Leu Ala Val Leu Pro Leu Val Ser Gly
-15 -10 -5 -1
Ser Pro Val Pro Glu Lys Arg Ser Gly Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr
1 5 10 15
Lys Trp Thr Ser Thr Gly Pro Leu Ala Ser Pro Lys Ser Gly Leu Val
20 25 30
Ala Leu Arg Asp Tyr Ser His Val Ile Tyr Asn Gly Gln His Leu Val
35 40 45
Tyr Gly Ser Thr Ala Asn Thr Ala Gly Ser Tyr Gly Ser Met Asn Phe
50 55 60
Gly Leu Phe Ser Asp Trp Ser Glu Met Ser Ser Ala Ser Gln Asn Thr
65 70 75 80
Met Ser Thr Gly Ala Val Ala Pro Thr Ile Phe Tyr Phe Ala Pro Lys
85 90 95
Ser Val Trp Ile Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Pro Tyr Ala Phe Ser Tyr
100 105 110
Arg Thr Ser Thr Asp Pro Ser Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ser Pro Gln
115 120 125
Pro Leu Phe Thr Gly Thr Ile Ser Gly Ser Ser Thr Gly Val Ile Asp
130 135 140
Gln Thr Val Ile Gly Asp Ser Glu Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly
145 150 155 160
Asp Asn Gly His Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asp Phe Pro
165 170 175
Gly Ser Phe Gly Ser Ala Ser Thr Ile Val Leu Ser Asp Ser Thr Asn
180 185 190
Asn Leu Phe Glu Ala Val Glu Val Tyr Thr Val Glu Gly Gln Asn Gln
195 200 205
Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Ala Asn Gly Arg Tyr Phe Arg
210 215 220
Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Gly Gly Thr Trp Thr Ala Gln Ala Ser
225 230 235 240
Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp
245 250 255
Thr Asn Asp Ile Ser Ser Gly Asp Leu Val Arg Thr Asn Pro Asp Gln
260 265 270
Thr Gln Thr Ile Asp Ala Cys Asn Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly Arg
275 280 285
Ser Thr Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Asn Leu Leu Pro Tyr Gln Pro Gly
290 295 300
Leu Leu Thr Leu Ala
305
<210> 27
<211> 309
<212> PRT
<213> 褐红篮状菌
<400> 27
Ser Pro Val Pro Glu Lys Arg Ser Gly Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr
1 5 10 15
Lys Trp Thr Ser Thr Gly Pro Leu Ala Ser Pro Lys Ser Gly Leu Val
20 25 30
Ala Leu Arg Asp Tyr Ser His Val Ile Tyr Asn Gly Gln His Leu Val
35 40 45
Tyr Gly Ser Thr Ala Asn Thr Ala Gly Ser Tyr Gly Ser Met Asn Phe
50 55 60
Gly Leu Phe Ser Asp Trp Ser Glu Met Ser Ser Ala Ser Gln Asn Thr
65 70 75 80
Met Ser Thr Gly Ala Val Ala Pro Thr Ile Phe Tyr Phe Ala Pro Lys
85 90 95
Ser Val Trp Ile Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Pro Tyr Ala Phe Ser Tyr
100 105 110
Arg Thr Ser Thr Asp Pro Ser Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ser Pro Gln
115 120 125
Pro Leu Phe Thr Gly Thr Ile Ser Gly Ser Ser Thr Gly Val Ile Asp
130 135 140
Gln Thr Val Ile Gly Asp Ser Glu Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly
145 150 155 160
Asp Asn Gly His Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asp Phe Pro
165 170 175
Gly Ser Phe Gly Ser Ala Ser Thr Ile Val Leu Ser Asp Ser Thr Asn
180 185 190
Asn Leu Phe Glu Ala Val Glu Val Tyr Thr Val Glu Gly Gln Asn Gln
195 200 205
Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Ala Asn Gly Arg Tyr Phe Arg
210 215 220
Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Gly Gly Thr Trp Thr Ala Gln Ala Ser
225 230 235 240
Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp
245 250 255
Thr Asn Asp Ile Ser Ser Gly Asp Leu Val Arg Thr Asn Pro Asp Gln
260 265 270
Thr Gln Thr Ile Asp Ala Cys Asn Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly Arg
275 280 285
Ser Thr Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Asn Leu Leu Pro Tyr Gln Pro Gly
290 295 300
Leu Leu Thr Leu Ala
305
<210> 28
<211> 1425
<212> DNA
<213> 硝孢链霉菌
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1422)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(108)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (109)..(1422)
<400> 28
atg tac aga gga agt ctc agc cgc ggg cgc acg ccc gcg gtg ctc gcc 48
Met Tyr Arg Gly Ser Leu Ser Arg Gly Arg Thr Pro Ala Val Leu Ala
-35 -30 -25
gcc gcg gtc gcg gtc ctg gcg gcg ctg gcg gcg atg ctt gtc gcc acc 96
Ala Ala Val Ala Val Leu Ala Ala Leu Ala Ala Met Leu Val Ala Thr
-20 -15 -10 -5
ccg gcc cag gcg gcc gcc agc ggc gcc ctg cgc ggt gcc ggt tcg ggc 144
Pro Ala Gln Ala Ala Ala Ser Gly Ala Leu Arg Gly Ala Gly Ser Gly
-1 1 5 10
cgg tgc gtc gac gtg acg ggc ggc gaa cgg acc gac ggc act acc ctc 192
Arg Cys Val Asp Val Thr Gly Gly Glu Arg Thr Asp Gly Thr Thr Leu
15 20 25
cag ctc tac gac tgc tgg ggc ggg acc aac cag cag tgg acg tcg acg 240
Gln Leu Tyr Asp Cys Trp Gly Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr
30 35 40
gac agc ggc cag ctg acc gtg tac ggc gac aag tgc ctg gac gtt ccg 288
Asp Ser Gly Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asp Lys Cys Leu Asp Val Pro
45 50 55 60
ggc cac gcc acc aca ccc ggt acc agg gtg cag atc tgg ggc tgc tcc 336
Gly His Ala Thr Thr Pro Gly Thr Arg Val Gln Ile Trp Gly Cys Ser
65 70 75
ggc ggt gcg aac cag cag tgg cgg gtg aac tcc gac ggc acg gtc gtc 384
Gly Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Val
80 85 90
ggc gtg gag tcc ggg ctg tgc ctg gag gcc gcg ggc gcc ggt acg gcc 432
Gly Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Gly Thr Ala
95 100 105
aac ggc aca gcg gtc cag ctc tgg acg tgc aac ggc ggc agc aac cag 480
Asn Gly Thr Ala Val Gln Leu Trp Thr Cys Asn Gly Gly Ser Asn Gln
110 115 120
aag tgg acc ggt ctg ccc gcg acg ccg ccg acg gac ggc acg tgt tcc 528
Lys Trp Thr Gly Leu Pro Ala Thr Pro Pro Thr Asp Gly Thr Cys Ser
125 130 135 140
ctt ccg tcg gcg tac cgg tgg acg tct acg ggc gtg ctg gcg cag ccg 576
Leu Pro Ser Ala Tyr Arg Trp Thr Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro
145 150 155
gcg aac ggg tgg gcc gcg gtg aag gac ttc acc acc gtg acc cac aac 624
Ala Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr His Asn
160 165 170
ggc aag cac ctg gtc tac gcg tcg aac gtg tcg ggg tcg tcg tac ggt 672
Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly
175 180 185
tcg atg atg ttc agt ccc ttc acg gac tgg ccg gac atg gcg tcg gcc 720
Ser Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asp Trp Pro Asp Met Ala Ser Ala
190 195 200
ggc cag acg gga atg agc cag gcc gcg gtg gcg ccc acg ctg ttc tac 768
Gly Gln Thr Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr
205 210 215 220
ttc gcg ccc aag aac atc tgg gta ctg gcg tac cag tgg ggc gcg tgg 816
Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Trp
225 230 235
ccc ttc atc tac cgc acg tcg agc aac ccc gcc gac ccc aac ggc tgg 864
Pro Phe Ile Tyr Arg Thr Ser Ser Asn Pro Ala Asp Pro Asn Gly Trp
240 245 250
tcc tcc ccg cag ccg ctg ttc acc ggg agc atc tcc gga tcc gac acc 912
Ser Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr
255 260 265
ggc ccg atc gat cag acc ctg atc gcc gac gga cag aac atg tac ctg 960
Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu
270 275 280
ttc ttc gcc ggt gac aac ggg aag atc tac cgg gcg agc atg ccg atc 1008
Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile
285 290 295 300
ggg aac ttc ccg ggc agc ttc ggc tcg tcg tac acg acg gtc atg agc 1056
Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser
305 310 315
gac acg aag gcc aac ctg ttc gag ggc gtc cag gtc tac aag gtc aag 1104
Asp Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Lys
320 325 330
gac cgg agc cag tac ctc atg atc gtc gag gcg atg ggt gcg aac ggg 1152
Asp Arg Ser Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly
335 340 345
cgc tac ttc cgc tcc ttc acg gcc tcc agc ctg aac ggg acg tgg acc 1200
Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Thr Trp Thr
350 355 360
ccg cag gcc gcc acc gag agc agc ccc ttc gcg ggc aag gcc aac agc 1248
Pro Gln Ala Ala Thr Glu Ser Ser Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser
365 370 375 380
ggt gcc acc tgg acc aac gac atc agc cac ggc gac ctg gtc cgc gac 1296
Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Asp
385 390 395
aac ccc gac cag acc atg acc gtc gac ccc tgc aac ctg cgg ttc ctc 1344
Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Arg Phe Leu
400 405 410
tac cag ggc aag gcg ccc gac gcg ggc ggc gag tac aac cgg ctg ccg 1392
Tyr Gln Gly Lys Ala Pro Asp Ala Gly Gly Glu Tyr Asn Arg Leu Pro
415 420 425
tgg cgg ccg ggg gtc ctc acc ctg cgg cgc tga 1425
Trp Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Arg Arg
430 435
<210> 29
<211> 474
<212> PRT
<213> 硝孢链霉菌
<400> 29
Met Tyr Arg Gly Ser Leu Ser Arg Gly Arg Thr Pro Ala Val Leu Ala
-35 -30 -25
Ala Ala Val Ala Val Leu Ala Ala Leu Ala Ala Met Leu Val Ala Thr
-20 -15 -10 -5
Pro Ala Gln Ala Ala Ala Ser Gly Ala Leu Arg Gly Ala Gly Ser Gly
-1 1 5 10
Arg Cys Val Asp Val Thr Gly Gly Glu Arg Thr Asp Gly Thr Thr Leu
15 20 25
Gln Leu Tyr Asp Cys Trp Gly Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr
30 35 40
Asp Ser Gly Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asp Lys Cys Leu Asp Val Pro
45 50 55 60
Gly His Ala Thr Thr Pro Gly Thr Arg Val Gln Ile Trp Gly Cys Ser
65 70 75
Gly Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Val
80 85 90
Gly Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Gly Thr Ala
95 100 105
Asn Gly Thr Ala Val Gln Leu Trp Thr Cys Asn Gly Gly Ser Asn Gln
110 115 120
Lys Trp Thr Gly Leu Pro Ala Thr Pro Pro Thr Asp Gly Thr Cys Ser
125 130 135 140
Leu Pro Ser Ala Tyr Arg Trp Thr Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro
145 150 155
Ala Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr His Asn
160 165 170
Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly
175 180 185
Ser Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asp Trp Pro Asp Met Ala Ser Ala
190 195 200
Gly Gln Thr Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr
205 210 215 220
Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Trp
225 230 235
Pro Phe Ile Tyr Arg Thr Ser Ser Asn Pro Ala Asp Pro Asn Gly Trp
240 245 250
Ser Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr
255 260 265
Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu
270 275 280
Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile
285 290 295 300
Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser
305 310 315
Asp Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Lys
320 325 330
Asp Arg Ser Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly
335 340 345
Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Thr Trp Thr
350 355 360
Pro Gln Ala Ala Thr Glu Ser Ser Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser
365 370 375 380
Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Asp
385 390 395
Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Arg Phe Leu
400 405 410
Tyr Gln Gly Lys Ala Pro Asp Ala Gly Gly Glu Tyr Asn Arg Leu Pro
415 420 425
Trp Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Arg Arg
430 435
<210> 30
<211> 438
<212> PRT
<213> 硝孢链霉菌
<400> 30
Ala Ala Ser Gly Ala Leu Arg Gly Ala Gly Ser Gly Arg Cys Val Asp
1 5 10 15
Val Thr Gly Gly Glu Arg Thr Asp Gly Thr Thr Leu Gln Leu Tyr Asp
20 25 30
Cys Trp Gly Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr Asp Ser Gly Gln
35 40 45
Leu Thr Val Tyr Gly Asp Lys Cys Leu Asp Val Pro Gly His Ala Thr
50 55 60
Thr Pro Gly Thr Arg Val Gln Ile Trp Gly Cys Ser Gly Gly Ala Asn
65 70 75 80
Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Val Gly Val Glu Ser
85 90 95
Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Gly Thr Ala Asn Gly Thr Ala
100 105 110
Val Gln Leu Trp Thr Cys Asn Gly Gly Ser Asn Gln Lys Trp Thr Gly
115 120 125
Leu Pro Ala Thr Pro Pro Thr Asp Gly Thr Cys Ser Leu Pro Ser Ala
130 135 140
Tyr Arg Trp Thr Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro Ala Asn Gly Trp
145 150 155 160
Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr His Asn Gly Lys His Leu
165 170 175
Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly Ser Met Met Phe
180 185 190
Ser Pro Phe Thr Asp Trp Pro Asp Met Ala Ser Ala Gly Gln Thr Gly
195 200 205
Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys
210 215 220
Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Trp Pro Phe Ile Tyr
225 230 235 240
Arg Thr Ser Ser Asn Pro Ala Asp Pro Asn Gly Trp Ser Ser Pro Gln
245 250 255
Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr Gly Pro Ile Asp
260 265 270
Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly
275 280 285
Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro
290 295 300
Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser Asp Thr Lys Ala
305 310 315 320
Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Lys Asp Arg Ser Gln
325 330 335
Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly Arg Tyr Phe Arg
340 345 350
Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Thr Trp Thr Pro Gln Ala Ala
355 360 365
Thr Glu Ser Ser Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp
370 375 380
Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Asp Asn Pro Asp Gln
385 390 395 400
Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Arg Phe Leu Tyr Gln Gly Lys
405 410 415
Ala Pro Asp Ala Gly Gly Glu Tyr Asn Arg Leu Pro Trp Arg Pro Gly
420 425 430
Val Leu Thr Leu Arg Arg
435
<210> 31
<211> 1422
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 表达构建体
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1419)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(81)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (82)..(1419)
<400> 31
atg aag aaa ccg ttg ggg aaa att gtc gca agc acc gca cta ctc att 48
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
-25 -20 -15
tct gtt gct ttt agt tca tcg ata gca tca gca cat cat cat cac cat 96
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala His His His His His
-10 -5 -1 1 5
cat cct agg gcc gcc agc ggc gcc ctg cgc ggt gcc ggt tcg ggc cgg 144
His Pro Arg Ala Ala Ser Gly Ala Leu Arg Gly Ala Gly Ser Gly Arg
10 15 20
tgc gtc gac gtg acg ggc ggc gaa cgg acc gac ggc act acc ctc cag 192
Cys Val Asp Val Thr Gly Gly Glu Arg Thr Asp Gly Thr Thr Leu Gln
25 30 35
ctc tac gac tgc tgg ggc ggg acc aac cag cag tgg acg tcg acg gac 240
Leu Tyr Asp Cys Trp Gly Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr Asp
40 45 50
agc ggc cag ctg acc gtg tac ggc gac aag tgc ctg gac gtt ccg ggc 288
Ser Gly Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asp Lys Cys Leu Asp Val Pro Gly
55 60 65
cac gcc acc aca ccc ggt acc agg gtg cag atc tgg ggc tgc tcc ggc 336
His Ala Thr Thr Pro Gly Thr Arg Val Gln Ile Trp Gly Cys Ser Gly
70 75 80 85
ggt gcg aac cag cag tgg cgg gtg aac tcc gac ggc acg gtc gtc ggc 384
Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Val Gly
90 95 100
gtg gag tcc ggg ctg tgc ctg gag gcc gcg ggc gcc ggt acg gcc aac 432
Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Gly Thr Ala Asn
105 110 115
ggc aca gcg gtc cag ctc tgg acg tgc aac ggc ggc agc aac cag aag 480
Gly Thr Ala Val Gln Leu Trp Thr Cys Asn Gly Gly Ser Asn Gln Lys
120 125 130
tgg acc ggt ctg ccc gcg acg ccg ccg acg gac ggc acg tgt tcc ctt 528
Trp Thr Gly Leu Pro Ala Thr Pro Pro Thr Asp Gly Thr Cys Ser Leu
135 140 145
ccg tcg gcg tac cgg tgg acg tct acg ggc gtg ctg gcg cag ccg gcg 576
Pro Ser Ala Tyr Arg Trp Thr Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro Ala
150 155 160 165
aac ggg tgg gcc gcg gtg aag gac ttc acc acc gtg acc cac aac ggc 624
Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr His Asn Gly
170 175 180
aag cac ctg gtc tac gcg tcg aac gtg tcg ggg tcg tcg tac ggt tcg 672
Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly Ser
185 190 195
atg atg ttc agt ccc ttc acg gac tgg ccg gac atg gcg tcg gcc ggc 720
Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asp Trp Pro Asp Met Ala Ser Ala Gly
200 205 210
cag acg gga atg agc cag gcc gcg gtg gcg ccc acg ctg ttc tac ttc 768
Gln Thr Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe
215 220 225
gcg ccc aag aac atc tgg gta ctg gcg tac cag tgg ggc gcg tgg ccc 816
Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Trp Pro
230 235 240 245
ttc atc tac cgc acg tcg agc aac ccc gcc gac ccc aac ggc tgg tcc 864
Phe Ile Tyr Arg Thr Ser Ser Asn Pro Ala Asp Pro Asn Gly Trp Ser
250 255 260
tcc ccg cag ccg ctg ttc acc ggg agc atc tcc gga tcc gac acc ggc 912
Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr Gly
265 270 275
ccg atc gat cag acc ctg atc gcc gac gga cag aac atg tac ctg ttc 960
Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu Phe
280 285 290
ttc gcc ggt gac aac ggg aag atc tac cgg gcg agc atg ccg atc ggg 1008
Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly
295 300 305
aac ttc ccg ggc agc ttc ggc tcg tcg tac acg acg gtc atg agc gac 1056
Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser Asp
310 315 320 325
acg aag gcc aac ctg ttc gag ggc gtc cag gtc tac aag gtc aag gac 1104
Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Lys Asp
330 335 340
cgg agc cag tac ctc atg atc gtc gag gcg atg ggt gcg aac ggg cgc 1152
Arg Ser Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly Arg
345 350 355
tac ttc cgc tcc ttc acg gcc tcc agc ctg aac ggg acg tgg acc ccg 1200
Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Thr Trp Thr Pro
360 365 370
cag gcc gcc acc gag agc agc ccc ttc gcg ggc aag gcc aac agc ggt 1248
Gln Ala Ala Thr Glu Ser Ser Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly
375 380 385
gcc acc tgg acc aac gac atc agc cac ggc gac ctg gtc cgc gac aac 1296
Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Asp Asn
390 395 400 405
ccc gac cag acc atg acc gtc gac ccc tgc aac ctg cgg ttc ctc tac 1344
Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Arg Phe Leu Tyr
410 415 420
cag ggc aag gcg ccc gac gcg ggc ggc gag tac aac cgg ctg ccg tgg 1392
Gln Gly Lys Ala Pro Asp Ala Gly Gly Glu Tyr Asn Arg Leu Pro Trp
425 430 435
cgg ccg ggg gtc ctc acc ctg cgg cgc tga 1422
Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Arg Arg
440 445
<210> 32
<211> 473
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 32
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
-25 -20 -15
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala His His His His His
-10 -5 -1 1 5
His Pro Arg Ala Ala Ser Gly Ala Leu Arg Gly Ala Gly Ser Gly Arg
10 15 20
Cys Val Asp Val Thr Gly Gly Glu Arg Thr Asp Gly Thr Thr Leu Gln
25 30 35
Leu Tyr Asp Cys Trp Gly Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr Asp
40 45 50
Ser Gly Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asp Lys Cys Leu Asp Val Pro Gly
55 60 65
His Ala Thr Thr Pro Gly Thr Arg Val Gln Ile Trp Gly Cys Ser Gly
70 75 80 85
Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Val Gly
90 95 100
Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Gly Thr Ala Asn
105 110 115
Gly Thr Ala Val Gln Leu Trp Thr Cys Asn Gly Gly Ser Asn Gln Lys
120 125 130
Trp Thr Gly Leu Pro Ala Thr Pro Pro Thr Asp Gly Thr Cys Ser Leu
135 140 145
Pro Ser Ala Tyr Arg Trp Thr Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro Ala
150 155 160 165
Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr His Asn Gly
170 175 180
Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly Ser
185 190 195
Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asp Trp Pro Asp Met Ala Ser Ala Gly
200 205 210
Gln Thr Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe
215 220 225
Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Trp Pro
230 235 240 245
Phe Ile Tyr Arg Thr Ser Ser Asn Pro Ala Asp Pro Asn Gly Trp Ser
250 255 260
Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr Gly
265 270 275
Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu Phe
280 285 290
Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly
295 300 305
Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser Asp
310 315 320 325
Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Lys Asp
330 335 340
Arg Ser Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly Arg
345 350 355
Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Thr Trp Thr Pro
360 365 370
Gln Ala Ala Thr Glu Ser Ser Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly
375 380 385
Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Asp Asn
390 395 400 405
Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Arg Phe Leu Tyr
410 415 420
Gln Gly Lys Ala Pro Asp Ala Gly Gly Glu Tyr Asn Arg Leu Pro Trp
425 430 435
Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Arg Arg
440 445
<210> 33
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有His标签的成熟序列
<400> 33
His His His His His His Pro Arg Ala Ala Ser Gly Ala Leu Arg Gly
1 5 10 15
Ala Gly Ser Gly Arg Cys Val Asp Val Thr Gly Gly Glu Arg Thr Asp
20 25 30
Gly Thr Thr Leu Gln Leu Tyr Asp Cys Trp Gly Gly Thr Asn Gln Gln
35 40 45
Trp Thr Ser Thr Asp Ser Gly Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asp Lys Cys
50 55 60
Leu Asp Val Pro Gly His Ala Thr Thr Pro Gly Thr Arg Val Gln Ile
65 70 75 80
Trp Gly Cys Ser Gly Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp
85 90 95
Gly Thr Val Val Gly Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly
100 105 110
Ala Gly Thr Ala Asn Gly Thr Ala Val Gln Leu Trp Thr Cys Asn Gly
115 120 125
Gly Ser Asn Gln Lys Trp Thr Gly Leu Pro Ala Thr Pro Pro Thr Asp
130 135 140
Gly Thr Cys Ser Leu Pro Ser Ala Tyr Arg Trp Thr Ser Thr Gly Val
145 150 155 160
Leu Ala Gln Pro Ala Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr
165 170 175
Val Thr His Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly
180 185 190
Ser Ser Tyr Gly Ser Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asp Trp Pro Asp
195 200 205
Met Ala Ser Ala Gly Gln Thr Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro
210 215 220
Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln
225 230 235 240
Trp Gly Ala Trp Pro Phe Ile Tyr Arg Thr Ser Ser Asn Pro Ala Asp
245 250 255
Pro Asn Gly Trp Ser Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser
260 265 270
Gly Ser Asp Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln
275 280 285
Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala
290 295 300
Ser Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Thr
305 310 315 320
Thr Val Met Ser Asp Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val
325 330 335
Tyr Lys Val Lys Asp Arg Ser Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met
340 345 350
Gly Ala Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn
355 360 365
Gly Thr Trp Thr Pro Gln Ala Ala Thr Glu Ser Ser Pro Phe Ala Gly
370 375 380
Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp
385 390 395 400
Leu Val Arg Asp Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn
405 410 415
Leu Arg Phe Leu Tyr Gln Gly Lys Ala Pro Asp Ala Gly Gly Glu Tyr
420 425 430
Asn Arg Leu Pro Trp Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Arg Arg
435 440 445
<210> 34
<211> 1425
<212> DNA
<213> 北疆链霉菌
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1422)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(108)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (109)..(1422)
<400> 34
atg agc aga cga act ttc agt cgc agg cat cca tct gct gtg ctc gcc 48
Met Ser Arg Arg Thr Phe Ser Arg Arg His Pro Ser Ala Val Leu Ala
-35 -30 -25
gcc gtg atc gcg gct ctg gga gca ttg gcg gcg atg ctc gtc gcc acc 96
Ala Val Ile Ala Ala Leu Gly Ala Leu Ala Ala Met Leu Val Ala Thr
-20 -15 -10 -5
ccg gct cag gcg gct gcc ggc ggc gcc ctg cgc cag gcc gct tcc ggc 144
Pro Ala Gln Ala Ala Ala Gly Gly Ala Leu Arg Gln Ala Ala Ser Gly
-1 1 5 10
cgg tgc ctc gat gtg ccg ggc gcc gtc cag acc gac ggt acg tcc gtg 192
Arg Cys Leu Asp Val Pro Gly Ala Val Gln Thr Asp Gly Thr Ser Val
15 20 25
cag atc tat gac tgc tgg agt gga acc aac cag cag tgg acg tcg acg 240
Gln Ile Tyr Asp Cys Trp Ser Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr
30 35 40
gac gcc aac cag ctc acc gtg tac ggc aac aag tgc ctg gat gtc ccc 288
Asp Ala Asn Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asn Lys Cys Leu Asp Val Pro
45 50 55 60
ggt cac gcc acc acg gcc ggg acc cgg gtg cag ata tgg agc tgt tcc 336
Gly His Ala Thr Thr Ala Gly Thr Arg Val Gln Ile Trp Ser Cys Ser
65 70 75
ggc ggt gcg aac cag cag tgg agg gtg aac tcc gac ggc acg gtc acc 384
Gly Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Thr
80 85 90
ggc gtg gag tca ggg ctg tgc ctg gag gcc gcg ggc gcc gcc acg gcc 432
Gly Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Ala Thr Ala
95 100 105
aac gga acg gcg gtg cag ctg gga acg tgc aac cag gga agc aac cag 480
Asn Gly Thr Ala Val Gln Leu Gly Thr Cys Asn Gln Gly Ser Asn Gln
110 115 120
aaa tgg agc ggt ctg acc ggg acg ccg ccg acg gac ggc tcg tgt tcc 528
Lys Trp Ser Gly Leu Thr Gly Thr Pro Pro Thr Asp Gly Ser Cys Ser
125 130 135 140
ctg ccg tcg acg tac cgc tgg tcg tcg acg ggt gtg ctg gcg cag cct 576
Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Ser Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro
145 150 155
gcg aac ggg tgg gcg gcg gtg aag gac ttc acc acc gtg acc tac aac 624
Ala Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr Tyr Asn
160 165 170
ggc aag cac ctg gtc tac gcc tcg aac gtg tcg gga tcg tcg tac ggc 672
Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly
175 180 185
tcg atg atg ttc agt ccc ttc acg aac tgg tcg gac atg gcg tcg gcc 720
Ser Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala
190 195 200
ggc cag agc ggg atg agc cag gcc gcg gtg gca ccc acg ctg ttc tac 768
Gly Gln Ser Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr
205 210 215 220
ttc gcg ccc aag aac atc tgg gtg ctg gcg tac cag tgg ggc gcg tcg 816
Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Ser
225 230 235
ccc ttc gtc tac cgc acg tcg agc gac ccc acc aac ccc aac ggc tgg 864
Pro Phe Val Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Pro Asn Gly Trp
240 245 250
tca tca ccg cag cca ctg ttc acc ggg agc atc tcc ggc tcc gac acc 912
Ser Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr
255 260 265
gga ccg atc gac cag acc ctg atc gcc gac ggc cag aac atg tac ctg 960
Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu
270 275 280
ttc ttc gcc ggc gac aac ggc aag atc tac cgg gcg agc atg ccg atc 1008
Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile
285 290 295 300
ggg aac ttc ccg ggc aac ttc ggc tcg tcg tac acg acg gtc atg agc 1056
Gly Asn Phe Pro Gly Asn Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser
305 310 315
gac acc aag gcc aac ctg ttc gag ggc gta cag gtc tac aag gtc cag 1104
Asp Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Gln
320 325 330
ggc cag aac cag tac ctc atg atc gtc gag gcg atg ggt gcg aac ggg 1152
Gly Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly
335 340 345
cgc tac ttc cgc tcc ttc acc gcc tcc agt ctg aac ggg tca tgg gcc 1200
Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Ser Trp Ala
350 355 360
ccg cag gcg gca acc gag agc aac ccc ttc gcg ggc aag gcc aac agc 1248
Pro Gln Ala Ala Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser
365 370 375 380
ggt gcc acc tgg acc aac gac atc agc cac ggg gac ctg gtc cgg ggc 1296
Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Gly
385 390 395
aac ccg gat cag acc atg acg atc gat cct tgc aac ctg caa ctc ctc 1344
Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu
400 405 410
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Tyr Gln Gly Lys Ser Pro Thr Ala Gly Gly Pro Tyr Asp Gln Leu Pro
415 420 425
tgg cgg cca ggc gtc ctc tcc ctt cag cgc tga 1425
Trp Arg Pro Gly Val Leu Ser Leu Gln Arg
430 435
<210> 35
<211> 474
<212> PRT
<213> 北疆链霉菌
<400> 35
Met Ser Arg Arg Thr Phe Ser Arg Arg His Pro Ser Ala Val Leu Ala
-35 -30 -25
Ala Val Ile Ala Ala Leu Gly Ala Leu Ala Ala Met Leu Val Ala Thr
-20 -15 -10 -5
Pro Ala Gln Ala Ala Ala Gly Gly Ala Leu Arg Gln Ala Ala Ser Gly
-1 1 5 10
Arg Cys Leu Asp Val Pro Gly Ala Val Gln Thr Asp Gly Thr Ser Val
15 20 25
Gln Ile Tyr Asp Cys Trp Ser Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr
30 35 40
Asp Ala Asn Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asn Lys Cys Leu Asp Val Pro
45 50 55 60
Gly His Ala Thr Thr Ala Gly Thr Arg Val Gln Ile Trp Ser Cys Ser
65 70 75
Gly Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Thr
80 85 90
Gly Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Ala Thr Ala
95 100 105
Asn Gly Thr Ala Val Gln Leu Gly Thr Cys Asn Gln Gly Ser Asn Gln
110 115 120
Lys Trp Ser Gly Leu Thr Gly Thr Pro Pro Thr Asp Gly Ser Cys Ser
125 130 135 140
Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Ser Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro
145 150 155
Ala Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr Tyr Asn
160 165 170
Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly
175 180 185
Ser Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala
190 195 200
Gly Gln Ser Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr
205 210 215 220
Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Ser
225 230 235
Pro Phe Val Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Pro Asn Gly Trp
240 245 250
Ser Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr
255 260 265
Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu
270 275 280
Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile
285 290 295 300
Gly Asn Phe Pro Gly Asn Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser
305 310 315
Asp Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Gln
320 325 330
Gly Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly
335 340 345
Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Ser Trp Ala
350 355 360
Pro Gln Ala Ala Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser
365 370 375 380
Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Gly
385 390 395
Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu
400 405 410
Tyr Gln Gly Lys Ser Pro Thr Ala Gly Gly Pro Tyr Asp Gln Leu Pro
415 420 425
Trp Arg Pro Gly Val Leu Ser Leu Gln Arg
430 435
<210> 36
<211> 438
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有His标签的成熟序列
<400> 36
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1 5 10 15
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Cys Trp Ser Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr Asp Ala Asn Gln
35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Thr Gly Val Glu Ser
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Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Ala Thr Ala Asn Gly Thr Ala
100 105 110
Val Gln Leu Gly Thr Cys Asn Gln Gly Ser Asn Gln Lys Trp Ser Gly
115 120 125
Leu Thr Gly Thr Pro Pro Thr Asp Gly Ser Cys Ser Leu Pro Ser Thr
130 135 140
Tyr Arg Trp Ser Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro Ala Asn Gly Trp
145 150 155 160
Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr Tyr Asn Gly Lys His Leu
165 170 175
Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly Ser Met Met Phe
180 185 190
Ser Pro Phe Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Gly Gln Ser Gly
195 200 205
Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys
210 215 220
Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Ser Pro Phe Val Tyr
225 230 235 240
Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Pro Asn Gly Trp Ser Ser Pro Gln
245 250 255
Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr Gly Pro Ile Asp
260 265 270
Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly
275 280 285
Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro
290 295 300
Gly Asn Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser Asp Thr Lys Ala
305 310 315 320
Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Gln Gly Gln Asn Gln
325 330 335
Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly Arg Tyr Phe Arg
340 345 350
Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Ser Trp Ala Pro Gln Ala Ala
355 360 365
Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp
370 375 380
Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Gly Asn Pro Asp Gln
385 390 395 400
Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Lys
405 410 415
Ser Pro Thr Ala Gly Gly Pro Tyr Asp Gln Leu Pro Trp Arg Pro Gly
420 425 430
Val Leu Ser Leu Gln Arg
435
<210> 37
<211> 1422
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 表达构建体
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1419)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(81)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (82)..(1419)
<400> 37
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Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
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tct gtt gct ttt agt tca tcg ata gca tca gca cat cat cat cac cat 96
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala His His His His His
-10 -5 -1 1 5
cat cct agg gct gcc ggc ggc gcc ctg cgc cag gcc gct tcc ggc cgg 144
His Pro Arg Ala Ala Gly Gly Ala Leu Arg Gln Ala Ala Ser Gly Arg
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tgc ctc gat gtg ccg ggc gcc gtc cag acc gac ggt acg tcc gtg cag 192
Cys Leu Asp Val Pro Gly Ala Val Gln Thr Asp Gly Thr Ser Val Gln
25 30 35
atc tat gac tgc tgg agt gga acc aac cag cag tgg acg tcg acg gac 240
Ile Tyr Asp Cys Trp Ser Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr Asp
40 45 50
gcc aac cag ctc acc gtg tac ggc aac aag tgc ctg gat gtc ccc ggt 288
Ala Asn Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asn Lys Cys Leu Asp Val Pro Gly
55 60 65
cac gcc acc acg gcc ggg acc cgg gtg cag ata tgg agc tgt tcc ggc 336
His Ala Thr Thr Ala Gly Thr Arg Val Gln Ile Trp Ser Cys Ser Gly
70 75 80 85
ggt gcg aac cag cag tgg agg gtg aac tcc gac ggc acg gtc acc ggc 384
Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Thr Gly
90 95 100
gtg gag tca ggg ctg tgc ctg gag gcc gcg ggc gcc gcc acg gcc aac 432
Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Ala Thr Ala Asn
105 110 115
gga acg gcg gtg cag ctg gga acg tgc aac cag gga agc aac cag aaa 480
Gly Thr Ala Val Gln Leu Gly Thr Cys Asn Gln Gly Ser Asn Gln Lys
120 125 130
tgg agc ggt ctg acc ggg acg ccg ccg acg gac ggc tcg tgt tcc ctg 528
Trp Ser Gly Leu Thr Gly Thr Pro Pro Thr Asp Gly Ser Cys Ser Leu
135 140 145
ccg tcg acg tac cgc tgg tcg tcg acg ggt gtg ctg gcg cag cct gcg 576
Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Ser Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro Ala
150 155 160 165
aac ggg tgg gcg gcg gtg aag gac ttc acc acc gtg acc tac aac ggc 624
Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr Tyr Asn Gly
170 175 180
aag cac ctg gtc tac gcc tcg aac gtg tcg gga tcg tcg tac ggc tcg 672
Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly Ser
185 190 195
atg atg ttc agt ccc ttc acg aac tgg tcg gac atg gcg tcg gcc ggc 720
Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Gly
200 205 210
cag agc ggg atg agc cag gcc gcg gtg gca ccc acg ctg ttc tac ttc 768
Gln Ser Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe
215 220 225
gcg ccc aag aac atc tgg gtg ctg gcg tac cag tgg ggc gcg tcg ccc 816
Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Ser Pro
230 235 240 245
ttc gtc tac cgc acg tcg agc gac ccc acc aac ccc aac ggc tgg tca 864
Phe Val Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Pro Asn Gly Trp Ser
250 255 260
tca ccg cag cca ctg ttc acc ggg agc atc tcc ggc tcc gac acc gga 912
Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr Gly
265 270 275
ccg atc gac cag acc ctg atc gcc gac ggc cag aac atg tac ctg ttc 960
Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu Phe
280 285 290
ttc gcc ggc gac aac ggc aag atc tac cgg gcg agc atg ccg atc ggg 1008
Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly
295 300 305
aac ttc ccg ggc aac ttc ggc tcg tcg tac acg acg gtc atg agc gac 1056
Asn Phe Pro Gly Asn Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser Asp
310 315 320 325
acc aag gcc aac ctg ttc gag ggc gta cag gtc tac aag gtc cag ggc 1104
Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Gln Gly
330 335 340
cag aac cag tac ctc atg atc gtc gag gcg atg ggt gcg aac ggg cgc 1152
Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly Arg
345 350 355
tac ttc cgc tcc ttc acc gcc tcc agt ctg aac ggg tca tgg gcc ccg 1200
Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Ser Trp Ala Pro
360 365 370
cag gcg gca acc gag agc aac ccc ttc gcg ggc aag gcc aac agc ggt 1248
Gln Ala Ala Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly
375 380 385
gcc acc tgg acc aac gac atc agc cac ggg gac ctg gtc cgg ggc aac 1296
Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Gly Asn
390 395 400 405
ccg gat cag acc atg acg atc gat cct tgc aac ctg caa ctc ctc tac 1344
Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr
410 415 420
cag ggg aaa tct ccc acc gcg ggc ggc ccc tac gac caa ctg ccg tgg 1392
Gln Gly Lys Ser Pro Thr Ala Gly Gly Pro Tyr Asp Gln Leu Pro Trp
425 430 435
cgg cca ggc gtc ctc tcc ctt cag cgc tga 1422
Arg Pro Gly Val Leu Ser Leu Gln Arg
440 445
<210> 38
<211> 473
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 38
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
-25 -20 -15
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala His His His His His
-10 -5 -1 1 5
His Pro Arg Ala Ala Gly Gly Ala Leu Arg Gln Ala Ala Ser Gly Arg
10 15 20
Cys Leu Asp Val Pro Gly Ala Val Gln Thr Asp Gly Thr Ser Val Gln
25 30 35
Ile Tyr Asp Cys Trp Ser Gly Thr Asn Gln Gln Trp Thr Ser Thr Asp
40 45 50
Ala Asn Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asn Lys Cys Leu Asp Val Pro Gly
55 60 65
His Ala Thr Thr Ala Gly Thr Arg Val Gln Ile Trp Ser Cys Ser Gly
70 75 80 85
Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp Gly Thr Val Thr Gly
90 95 100
Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly Ala Ala Thr Ala Asn
105 110 115
Gly Thr Ala Val Gln Leu Gly Thr Cys Asn Gln Gly Ser Asn Gln Lys
120 125 130
Trp Ser Gly Leu Thr Gly Thr Pro Pro Thr Asp Gly Ser Cys Ser Leu
135 140 145
Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Ser Ser Thr Gly Val Leu Ala Gln Pro Ala
150 155 160 165
Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr Val Thr Tyr Asn Gly
170 175 180
Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly Ser Ser Tyr Gly Ser
185 190 195
Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Gly
200 205 210
Gln Ser Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe
215 220 225
Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ala Ser Pro
230 235 240 245
Phe Val Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Pro Asn Gly Trp Ser
250 255 260
Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Asp Thr Gly
265 270 275
Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln Asn Met Tyr Leu Phe
280 285 290
Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly
295 300 305
Asn Phe Pro Gly Asn Phe Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Val Met Ser Asp
310 315 320 325
Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val Tyr Lys Val Gln Gly
330 335 340
Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met Gly Ala Asn Gly Arg
345 350 355
Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn Gly Ser Trp Ala Pro
360 365 370
Gln Ala Ala Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly
375 380 385
Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Gly Asn
390 395 400 405
Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr
410 415 420
Gln Gly Lys Ser Pro Thr Ala Gly Gly Pro Tyr Asp Gln Leu Pro Trp
425 430 435
Arg Pro Gly Val Leu Ser Leu Gln Arg
440 445
<210> 39
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有His标签的成熟序列
<400> 39
His His His His His His Pro Arg Ala Ala Gly Gly Ala Leu Arg Gln
1 5 10 15
Ala Ala Ser Gly Arg Cys Leu Asp Val Pro Gly Ala Val Gln Thr Asp
20 25 30
Gly Thr Ser Val Gln Ile Tyr Asp Cys Trp Ser Gly Thr Asn Gln Gln
35 40 45
Trp Thr Ser Thr Asp Ala Asn Gln Leu Thr Val Tyr Gly Asn Lys Cys
50 55 60
Leu Asp Val Pro Gly His Ala Thr Thr Ala Gly Thr Arg Val Gln Ile
65 70 75 80
Trp Ser Cys Ser Gly Gly Ala Asn Gln Gln Trp Arg Val Asn Ser Asp
85 90 95
Gly Thr Val Thr Gly Val Glu Ser Gly Leu Cys Leu Glu Ala Ala Gly
100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
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145 150 155 160
Leu Ala Gln Pro Ala Asn Gly Trp Ala Ala Val Lys Asp Phe Thr Thr
165 170 175
Val Thr Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Val Ser Gly
180 185 190
Ser Ser Tyr Gly Ser Met Met Phe Ser Pro Phe Thr Asn Trp Ser Asp
195 200 205
Met Ala Ser Ala Gly Gln Ser Gly Met Ser Gln Ala Ala Val Ala Pro
210 215 220
Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln
225 230 235 240
Trp Gly Ala Ser Pro Phe Val Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn
245 250 255
Pro Asn Gly Trp Ser Ser Pro Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser
260 265 270
Gly Ser Asp Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Ala Asp Gly Gln
275 280 285
Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala
290 295 300
Ser Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Asn Phe Gly Ser Ser Tyr Thr
305 310 315 320
Thr Val Met Ser Asp Thr Lys Ala Asn Leu Phe Glu Gly Val Gln Val
325 330 335
Tyr Lys Val Gln Gly Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Met
340 345 350
Gly Ala Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asn
355 360 365
Gly Ser Trp Ala Pro Gln Ala Ala Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly
370 375 380
Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp
385 390 395 400
Leu Val Arg Gly Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn
405 410 415
Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Lys Ser Pro Thr Ala Gly Gly Pro Tyr
420 425 430
Asp Gln Leu Pro Trp Arg Pro Gly Val Leu Ser Leu Gln Arg
435 440 445
<210> 40
<211> 1011
<212> DNA
<213> 棒曲霉
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1008)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(54)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (55)..(1008)
<400> 40
atg cgg tcg atc ctc ttc cta gtc act tcc acc ctc gct gct gct gct 48
Met Arg Ser Ile Leu Phe Leu Val Thr Ser Thr Leu Ala Ala Ala Ala
-15 -10 -5
gct gct gct tcc tta ccc aga agc ttc aaa tgg agc tcc agc gcc gcc 96
Ala Ala Ala Ser Leu Pro Arg Ser Phe Lys Trp Ser Ser Ser Ala Ala
-1 1 5 10
ctc gtg ggc cct aag aac gat ggc cgc cat atc gag ggc atc aag gat 144
Leu Val Gly Pro Lys Asn Asp Gly Arg His Ile Glu Gly Ile Lys Asp
15 20 25 30
ccc tcc atc gtc gag gtg gac ggc acc tac cac gtc ttc gct agc acc 192
Pro Ser Ile Val Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr
35 40 45
gcc cag gcc tcc ggc tac aac ctg gtg tat ctt agc ttc acc gac ttc 240
Ala Gln Ala Ser Gly Tyr Asn Leu Val Tyr Leu Ser Phe Thr Asp Phe
50 55 60
aat aag gct cac ctg gct cca ttc cac tac ctg gac cag acc cgg atc 288
Asn Lys Ala His Leu Ala Pro Phe His Tyr Leu Asp Gln Thr Arg Ile
65 70 75
ggc aaa ggc tac cgc gcc gcg cca cag gtc ttc tac ttc aag ccc cac 336
Gly Lys Gly Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Tyr Phe Lys Pro His
80 85 90
aaa ctg tgg tat ctg gtc tac cag aac ggc aac gca gcc tat tcc acc 384
Lys Leu Trp Tyr Leu Val Tyr Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr
95 100 105 110
aac ccc gac atc agc aac ccg gcc ggc tgg acc tct ccg cag aac ttc 432
Asn Pro Asp Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Thr Ser Pro Gln Asn Phe
115 120 125
ttc agc ggc aca ccc agc atc atc acc cac aac atg ggc cgc ggc gcc 480
Phe Ser Gly Thr Pro Ser Ile Ile Thr His Asn Met Gly Arg Gly Ala
130 135 140
tgg gtg gac atg tgg acc atc tgc gac aca cgc aac tgc tac ctc ttc 528
Trp Val Asp Met Trp Thr Ile Cys Asp Thr Arg Asn Cys Tyr Leu Phe
145 150 155
tcc tca gac gac aac gga cac ctc tac cgc tcc cag aca tcc ctg gcc 576
Ser Ser Asp Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Ser Leu Ala
160 165 170
gac ttc ccc cac ggc atg ggc aac act gct att gcc ctc gca gac cgc 624
Asp Phe Pro His Gly Met Gly Asn Thr Ala Ile Ala Leu Ala Asp Arg
175 180 185 190
aac aag ttc agc ctc ttc gaa gca tcc aat gtc tac cac acc ggg gat 672
Asn Lys Phe Ser Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr His Thr Gly Asp
195 200 205
gga agc tat ctg ctc atc gtc gag gcg atc ggc aac gac ggc cag cgg 720
Gly Ser Tyr Leu Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Asn Asp Gly Gln Arg
210 215 220
tac ttc cgc tcc tgg act gcg agc agc ttg gcc ggc cag tgg aag ccc 768
Tyr Phe Arg Ser Trp Thr Ala Ser Ser Leu Ala Gly Gln Trp Lys Pro
225 230 235
ctg gcg gat acc gag tcg aac ccc ttc gcg cgc tcg aac aat gtt gcc 816
Leu Ala Asp Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Arg Ser Asn Asn Val Ala
240 245 250
ttc gct aat ggc cat gcc tgg acg aag agc atc agc cac ggc gag atg 864
Phe Ala Asn Gly His Ala Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met
255 260 265 270
atc cga acc cag acg gat cag act atg act atc agc ccg tgc aag ctg 912
Ile Arg Thr Gln Thr Asp Gln Thr Met Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu
275 280 285
cgg tat ctg tac cag ggg gtg gat cct gcg gct aag ggg gat tat aat 960
Arg Tyr Leu Tyr Gln Gly Val Asp Pro Ala Ala Lys Gly Asp Tyr Asn
290 295 300
gcg ctt ccg tgg aag ctg ggc ttg ctg acc cag acg aac tcg gct tgt 1008
Ala Leu Pro Trp Lys Leu Gly Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys
305 310 315
taa 1011
<210> 41
<211> 336
<212> PRT
<213> 棒曲霉
<400> 41
Met Arg Ser Ile Leu Phe Leu Val Thr Ser Thr Leu Ala Ala Ala Ala
-15 -10 -5
Ala Ala Ala Ser Leu Pro Arg Ser Phe Lys Trp Ser Ser Ser Ala Ala
-1 1 5 10
Leu Val Gly Pro Lys Asn Asp Gly Arg His Ile Glu Gly Ile Lys Asp
15 20 25 30
Pro Ser Ile Val Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr
35 40 45
Ala Gln Ala Ser Gly Tyr Asn Leu Val Tyr Leu Ser Phe Thr Asp Phe
50 55 60
Asn Lys Ala His Leu Ala Pro Phe His Tyr Leu Asp Gln Thr Arg Ile
65 70 75
Gly Lys Gly Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Tyr Phe Lys Pro His
80 85 90
Lys Leu Trp Tyr Leu Val Tyr Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr
95 100 105 110
Asn Pro Asp Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Thr Ser Pro Gln Asn Phe
115 120 125
Phe Ser Gly Thr Pro Ser Ile Ile Thr His Asn Met Gly Arg Gly Ala
130 135 140
Trp Val Asp Met Trp Thr Ile Cys Asp Thr Arg Asn Cys Tyr Leu Phe
145 150 155
Ser Ser Asp Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Ser Leu Ala
160 165 170
Asp Phe Pro His Gly Met Gly Asn Thr Ala Ile Ala Leu Ala Asp Arg
175 180 185 190
Asn Lys Phe Ser Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr His Thr Gly Asp
195 200 205
Gly Ser Tyr Leu Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Asn Asp Gly Gln Arg
210 215 220
Tyr Phe Arg Ser Trp Thr Ala Ser Ser Leu Ala Gly Gln Trp Lys Pro
225 230 235
Leu Ala Asp Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Arg Ser Asn Asn Val Ala
240 245 250
Phe Ala Asn Gly His Ala Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met
255 260 265 270
Ile Arg Thr Gln Thr Asp Gln Thr Met Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu
275 280 285
Arg Tyr Leu Tyr Gln Gly Val Asp Pro Ala Ala Lys Gly Asp Tyr Asn
290 295 300
Ala Leu Pro Trp Lys Leu Gly Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys
305 310 315
<210> 42
<211> 318
<212> PRT
<213> 棒曲霉
<400> 42
Ala Ser Leu Pro Arg Ser Phe Lys Trp Ser Ser Ser Ala Ala Leu Val
1 5 10 15
Gly Pro Lys Asn Asp Gly Arg His Ile Glu Gly Ile Lys Asp Pro Ser
20 25 30
Ile Val Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr Ala Gln
35 40 45
Ala Ser Gly Tyr Asn Leu Val Tyr Leu Ser Phe Thr Asp Phe Asn Lys
50 55 60
Ala His Leu Ala Pro Phe His Tyr Leu Asp Gln Thr Arg Ile Gly Lys
65 70 75 80
Gly Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Tyr Phe Lys Pro His Lys Leu
85 90 95
Trp Tyr Leu Val Tyr Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr Asn Pro
100 105 110
Asp Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Thr Ser Pro Gln Asn Phe Phe Ser
115 120 125
Gly Thr Pro Ser Ile Ile Thr His Asn Met Gly Arg Gly Ala Trp Val
130 135 140
Asp Met Trp Thr Ile Cys Asp Thr Arg Asn Cys Tyr Leu Phe Ser Ser
145 150 155 160
Asp Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Ser Leu Ala Asp Phe
165 170 175
Pro His Gly Met Gly Asn Thr Ala Ile Ala Leu Ala Asp Arg Asn Lys
180 185 190
Phe Ser Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr His Thr Gly Asp Gly Ser
195 200 205
Tyr Leu Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Asn Asp Gly Gln Arg Tyr Phe
210 215 220
Arg Ser Trp Thr Ala Ser Ser Leu Ala Gly Gln Trp Lys Pro Leu Ala
225 230 235 240
Asp Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Arg Ser Asn Asn Val Ala Phe Ala
245 250 255
Asn Gly His Ala Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met Ile Arg
260 265 270
Thr Gln Thr Asp Gln Thr Met Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu Arg Tyr
275 280 285
Leu Tyr Gln Gly Val Asp Pro Ala Ala Lys Gly Asp Tyr Asn Ala Leu
290 295 300
Pro Trp Lys Leu Gly Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys
305 310 315
<210> 43
<211> 1035
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 表达构建体
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1032)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(54)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (55)..(1032)
<400> 43
atg cgg tcg atc ctc ttc cta gtc act tcc acc ctc gct gct gct gct 48
Met Arg Ser Ile Leu Phe Leu Val Thr Ser Thr Leu Ala Ala Ala Ala
-15 -10 -5
gct gct gct tcc tta ccc aga agc ttc aaa tgg agc tcc agc gcc gcc 96
Ala Ala Ala Ser Leu Pro Arg Ser Phe Lys Trp Ser Ser Ser Ala Ala
-1 1 5 10
ctc gtg ggc cct aag aac gat ggc cgc cat atc gag ggc atc aag gat 144
Leu Val Gly Pro Lys Asn Asp Gly Arg His Ile Glu Gly Ile Lys Asp
15 20 25 30
ccc tcc atc gtc gag gtg gac ggc acc tac cac gtc ttc gct agc acc 192
Pro Ser Ile Val Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr
35 40 45
gcc cag gcc tcc ggc tac aac ctg gtg tat ctt agc ttc acc gac ttc 240
Ala Gln Ala Ser Gly Tyr Asn Leu Val Tyr Leu Ser Phe Thr Asp Phe
50 55 60
aat aag gct cac ctg gct cca ttc cac tac ctg gac cag acc cgg atc 288
Asn Lys Ala His Leu Ala Pro Phe His Tyr Leu Asp Gln Thr Arg Ile
65 70 75
ggc aaa ggc tac cgc gcc gcg cca cag gtc ttc tac ttc aag ccc cac 336
Gly Lys Gly Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Tyr Phe Lys Pro His
80 85 90
aaa ctg tgg tat ctg gtc tac cag aac ggc aac gca gcc tat tcc acc 384
Lys Leu Trp Tyr Leu Val Tyr Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr
95 100 105 110
aac ccc gac atc agc aac ccg gcc ggc tgg acc tct ccg cag aac ttc 432
Asn Pro Asp Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Thr Ser Pro Gln Asn Phe
115 120 125
ttc agc ggc aca ccc agc atc atc acc cac aac atg ggc cgc ggc gcc 480
Phe Ser Gly Thr Pro Ser Ile Ile Thr His Asn Met Gly Arg Gly Ala
130 135 140
tgg gtg gac atg tgg acc atc tgc gac aca cgc aac tgc tac ctc ttc 528
Trp Val Asp Met Trp Thr Ile Cys Asp Thr Arg Asn Cys Tyr Leu Phe
145 150 155
tcc tca gac gac aac gga cac ctc tac cgc tcc cag aca tcc ctg gcc 576
Ser Ser Asp Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Ser Leu Ala
160 165 170
gac ttc ccc cac ggc atg ggc aac act gct att gcc ctc gca gac cgc 624
Asp Phe Pro His Gly Met Gly Asn Thr Ala Ile Ala Leu Ala Asp Arg
175 180 185 190
aac aag ttc agc ctc ttc gaa gca tcc aat gtc tac cac acc ggg gat 672
Asn Lys Phe Ser Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr His Thr Gly Asp
195 200 205
gga agc tat ctg ctc atc gtc gag gcg atc ggc aac gac ggc cag cgg 720
Gly Ser Tyr Leu Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Asn Asp Gly Gln Arg
210 215 220
tac ttc cgc tcc tgg act gcg agc agc ttg gcc ggc cag tgg aag ccc 768
Tyr Phe Arg Ser Trp Thr Ala Ser Ser Leu Ala Gly Gln Trp Lys Pro
225 230 235
ctg gcg gat acc gag tcg aac ccc ttc gcg cgc tcg aac aat gtt gcc 816
Leu Ala Asp Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Arg Ser Asn Asn Val Ala
240 245 250
ttc gct aat ggc cat gcc tgg acg aag agc atc agc cac ggc gag atg 864
Phe Ala Asn Gly His Ala Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met
255 260 265 270
atc cga acc cag acg gat cag act atg act atc agc ccg tgc aag ctg 912
Ile Arg Thr Gln Thr Asp Gln Thr Met Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu
275 280 285
cgg tat ctg tac cag ggg gtg gat cct gcg gct aag ggg gat tat aat 960
Arg Tyr Leu Tyr Gln Gly Val Asp Pro Ala Ala Lys Gly Asp Tyr Asn
290 295 300
gcg ctt ccg tgg aag ctg ggc ttg ctg acc cag acg aac tcg gct tgt 1008
Ala Leu Pro Trp Lys Leu Gly Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys
305 310 315
cga cat cac cat cac cat cac cca tga 1035
Arg His His His His His His Pro
320 325
<210> 44
<211> 344
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 44
Met Arg Ser Ile Leu Phe Leu Val Thr Ser Thr Leu Ala Ala Ala Ala
-15 -10 -5
Ala Ala Ala Ser Leu Pro Arg Ser Phe Lys Trp Ser Ser Ser Ala Ala
-1 1 5 10
Leu Val Gly Pro Lys Asn Asp Gly Arg His Ile Glu Gly Ile Lys Asp
15 20 25 30
Pro Ser Ile Val Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr
35 40 45
Ala Gln Ala Ser Gly Tyr Asn Leu Val Tyr Leu Ser Phe Thr Asp Phe
50 55 60
Asn Lys Ala His Leu Ala Pro Phe His Tyr Leu Asp Gln Thr Arg Ile
65 70 75
Gly Lys Gly Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Tyr Phe Lys Pro His
80 85 90
Lys Leu Trp Tyr Leu Val Tyr Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr
95 100 105 110
Asn Pro Asp Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Thr Ser Pro Gln Asn Phe
115 120 125
Phe Ser Gly Thr Pro Ser Ile Ile Thr His Asn Met Gly Arg Gly Ala
130 135 140
Trp Val Asp Met Trp Thr Ile Cys Asp Thr Arg Asn Cys Tyr Leu Phe
145 150 155
Ser Ser Asp Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Ser Leu Ala
160 165 170
Asp Phe Pro His Gly Met Gly Asn Thr Ala Ile Ala Leu Ala Asp Arg
175 180 185 190
Asn Lys Phe Ser Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr His Thr Gly Asp
195 200 205
Gly Ser Tyr Leu Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Asn Asp Gly Gln Arg
210 215 220
Tyr Phe Arg Ser Trp Thr Ala Ser Ser Leu Ala Gly Gln Trp Lys Pro
225 230 235
Leu Ala Asp Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Arg Ser Asn Asn Val Ala
240 245 250
Phe Ala Asn Gly His Ala Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met
255 260 265 270
Ile Arg Thr Gln Thr Asp Gln Thr Met Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu
275 280 285
Arg Tyr Leu Tyr Gln Gly Val Asp Pro Ala Ala Lys Gly Asp Tyr Asn
290 295 300
Ala Leu Pro Trp Lys Leu Gly Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys
305 310 315
Arg His His His His His His Pro
320 325
<210> 45
<211> 326
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有His标签的成熟序列
<400> 45
Ala Ser Leu Pro Arg Ser Phe Lys Trp Ser Ser Ser Ala Ala Leu Val
1 5 10 15
Gly Pro Lys Asn Asp Gly Arg His Ile Glu Gly Ile Lys Asp Pro Ser
20 25 30
Ile Val Glu Val Asp Gly Thr Tyr His Val Phe Ala Ser Thr Ala Gln
35 40 45
Ala Ser Gly Tyr Asn Leu Val Tyr Leu Ser Phe Thr Asp Phe Asn Lys
50 55 60
Ala His Leu Ala Pro Phe His Tyr Leu Asp Gln Thr Arg Ile Gly Lys
65 70 75 80
Gly Tyr Arg Ala Ala Pro Gln Val Phe Tyr Phe Lys Pro His Lys Leu
85 90 95
Trp Tyr Leu Val Tyr Gln Asn Gly Asn Ala Ala Tyr Ser Thr Asn Pro
100 105 110
Asp Ile Ser Asn Pro Ala Gly Trp Thr Ser Pro Gln Asn Phe Phe Ser
115 120 125
Gly Thr Pro Ser Ile Ile Thr His Asn Met Gly Arg Gly Ala Trp Val
130 135 140
Asp Met Trp Thr Ile Cys Asp Thr Arg Asn Cys Tyr Leu Phe Ser Ser
145 150 155 160
Asp Asp Asn Gly His Leu Tyr Arg Ser Gln Thr Ser Leu Ala Asp Phe
165 170 175
Pro His Gly Met Gly Asn Thr Ala Ile Ala Leu Ala Asp Arg Asn Lys
180 185 190
Phe Ser Leu Phe Glu Ala Ser Asn Val Tyr His Thr Gly Asp Gly Ser
195 200 205
Tyr Leu Leu Ile Val Glu Ala Ile Gly Asn Asp Gly Gln Arg Tyr Phe
210 215 220
Arg Ser Trp Thr Ala Ser Ser Leu Ala Gly Gln Trp Lys Pro Leu Ala
225 230 235 240
Asp Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Arg Ser Asn Asn Val Ala Phe Ala
245 250 255
Asn Gly His Ala Trp Thr Lys Ser Ile Ser His Gly Glu Met Ile Arg
260 265 270
Thr Gln Thr Asp Gln Thr Met Thr Ile Ser Pro Cys Lys Leu Arg Tyr
275 280 285
Leu Tyr Gln Gly Val Asp Pro Ala Ala Lys Gly Asp Tyr Asn Ala Leu
290 295 300
Pro Trp Lys Leu Gly Leu Leu Thr Gln Thr Asn Ser Ala Cys Arg His
305 310 315 320
His His His His His Pro
325
<210> 46
<211> 984
<212> DNA
<213> 温特曲霉
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(981)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(75)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (76)..(981)
<400> 46
atg aaa ttc ttc aag gcg caa gct ggt gtg cca tct ggc ata ttc ttg 48
Met Lys Phe Phe Lys Ala Gln Ala Gly Val Pro Ser Gly Ile Phe Leu
-25 -20 -15 -10
ctc tct ctg gca cca gtt gtc att gcc gac tgc gct ctt ccg tca acc 96
Leu Ser Leu Ala Pro Val Val Ile Ala Asp Cys Ala Leu Pro Ser Thr
-5 -1 1 5
tat agc tgg aca tca act ggc tct ctg gca gat cca aag tct gga tgg 144
Tyr Ser Trp Thr Ser Thr Gly Ser Leu Ala Asp Pro Lys Ser Gly Trp
10 15 20
acg gcg ctc aag gat ttt acc aat gtg gtc tcc aac aac aaa cat atc 192
Thr Ala Leu Lys Asp Phe Thr Asn Val Val Ser Asn Asn Lys His Ile
25 30 35
gtc tat gca tca acc act gac gcc agt gga aac tac ggc tcg atg aat 240
Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Ala Ser Gly Asn Tyr Gly Ser Met Asn
40 45 50 55
ttt gcc tcc ttt tca gac tgg tct gac atg gca tct gca agt caa gcc 288
Phe Ala Ser Phe Ser Asp Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Ser Gln Ala
60 65 70
gcg acg agc ttt acg gca gtt gcg ccc act ttg ctc tac ttc cag cca 336
Ala Thr Ser Phe Thr Ala Val Ala Pro Thr Leu Leu Tyr Phe Gln Pro
75 80 85
aag agc atc tgg gtg ctg gcc tac caa tgg ggc tcg agt acg ttt acc 384
Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ser Ser Thr Phe Thr
90 95 100
tac cga acg tca agc gat cct acc aat gcc aat gga tgg tca tcc gag 432
Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ser Glu
105 110 115
aaa gct ctt ttc tct gga aag atc acc ggc tcg gac act ggc gcc att 480
Lys Ala Leu Phe Ser Gly Lys Ile Thr Gly Ser Asp Thr Gly Ala Ile
120 125 130 135
gat cag acc ctt atc ggt gac gcc acg aat atg tat ctt ttc ttt gcg 528
Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala
140 145 150
gga gat aac ggc aag atc tat cgg tcg agc atg cca atc gcc aac ttc 576
Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Pro Ile Ala Asn Phe
155 160 165
cct gga gac ttc gga acg gcg tca gaa gtc gtt ctt agt gac agc cgg 624
Pro Gly Asp Phe Gly Thr Ala Ser Glu Val Val Leu Ser Asp Ser Arg
170 175 180
aac aat ctc ttc gaa gca gtc caa gtt tac acc gtc gaa ggg caa aac 672
Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Glu Gly Gln Asn
185 190 195
cag tat ctg atg atc gtc gag gca att gga aca aac ggc cgt tat ttc 720
Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Thr Asn Gly Arg Tyr Phe
200 205 210 215
cgt tca ttc acc gcc agc agt ctc gac ggt tcg tgg aca gag cag gca 768
Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asp Gly Ser Trp Thr Glu Gln Ala
220 225 230
gcc agc gag aac aat ccc ttc gct gga aag gcc aac agc ggt gcg acc 816
Ala Ser Glu Asn Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr
235 240 245
tgg acc aac gac atc agt cac ggc gat ttg gtt cgc aat aac cct gac 864
Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Asn Asn Pro Asp
250 255 260
caa aca atg act atc gac cca tgc aac ctg caa ttc ctc tac cag ggg 912
Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly
265 270 275
cgc gat gcg agt gcc ggt ggt aac tac aat acc ctg ccg tgg agg cca 960
Arg Asp Ala Ser Ala Gly Gly Asn Tyr Asn Thr Leu Pro Trp Arg Pro
280 285 290 295
ggt gta ctg act ctg aag cac taa 984
Gly Val Leu Thr Leu Lys His
300
<210> 47
<211> 327
<212> PRT
<213> 温特曲霉
<400> 47
Met Lys Phe Phe Lys Ala Gln Ala Gly Val Pro Ser Gly Ile Phe Leu
-25 -20 -15 -10
Leu Ser Leu Ala Pro Val Val Ile Ala Asp Cys Ala Leu Pro Ser Thr
-5 -1 1 5
Tyr Ser Trp Thr Ser Thr Gly Ser Leu Ala Asp Pro Lys Ser Gly Trp
10 15 20
Thr Ala Leu Lys Asp Phe Thr Asn Val Val Ser Asn Asn Lys His Ile
25 30 35
Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Ala Ser Gly Asn Tyr Gly Ser Met Asn
40 45 50 55
Phe Ala Ser Phe Ser Asp Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Ser Gln Ala
60 65 70
Ala Thr Ser Phe Thr Ala Val Ala Pro Thr Leu Leu Tyr Phe Gln Pro
75 80 85
Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ser Ser Thr Phe Thr
90 95 100
Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ser Glu
105 110 115
Lys Ala Leu Phe Ser Gly Lys Ile Thr Gly Ser Asp Thr Gly Ala Ile
120 125 130 135
Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala
140 145 150
Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Pro Ile Ala Asn Phe
155 160 165
Pro Gly Asp Phe Gly Thr Ala Ser Glu Val Val Leu Ser Asp Ser Arg
170 175 180
Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Glu Gly Gln Asn
185 190 195
Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Thr Asn Gly Arg Tyr Phe
200 205 210 215
Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asp Gly Ser Trp Thr Glu Gln Ala
220 225 230
Ala Ser Glu Asn Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr
235 240 245
Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Asn Asn Pro Asp
250 255 260
Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly
265 270 275
Arg Asp Ala Ser Ala Gly Gly Asn Tyr Asn Thr Leu Pro Trp Arg Pro
280 285 290 295
Gly Val Leu Thr Leu Lys His
300
<210> 48
<211> 302
<212> PRT
<213> 温特曲霉
<400> 48
Asp Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr Ser Trp Thr Ser Thr Gly Ser Leu
1 5 10 15
Ala Asp Pro Lys Ser Gly Trp Thr Ala Leu Lys Asp Phe Thr Asn Val
20 25 30
Val Ser Asn Asn Lys His Ile Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Ala Ser
35 40 45
Gly Asn Tyr Gly Ser Met Asn Phe Ala Ser Phe Ser Asp Trp Ser Asp
50 55 60
Met Ala Ser Ala Ser Gln Ala Ala Thr Ser Phe Thr Ala Val Ala Pro
65 70 75 80
Thr Leu Leu Tyr Phe Gln Pro Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln
85 90 95
Trp Gly Ser Ser Thr Phe Thr Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn
100 105 110
Ala Asn Gly Trp Ser Ser Glu Lys Ala Leu Phe Ser Gly Lys Ile Thr
115 120 125
Gly Ser Asp Thr Gly Ala Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Thr
130 135 140
Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser
145 150 155 160
Ser Met Pro Ile Ala Asn Phe Pro Gly Asp Phe Gly Thr Ala Ser Glu
165 170 175
Val Val Leu Ser Asp Ser Arg Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val
180 185 190
Tyr Thr Val Glu Gly Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile
195 200 205
Gly Thr Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asp
210 215 220
Gly Ser Trp Thr Glu Gln Ala Ala Ser Glu Asn Asn Pro Phe Ala Gly
225 230 235 240
Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp
245 250 255
Leu Val Arg Asn Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn
260 265 270
Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly Arg Asp Ala Ser Ala Gly Gly Asn Tyr
275 280 285
Asn Thr Leu Pro Trp Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Lys His
290 295 300
<210> 49
<211> 1011
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 表达构建体
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1008)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(75)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (76)..(1008)
<400> 49
atg aaa ttc ttc aag gcg caa gct ggt gtg cca tct ggc ata ttc ttg 48
Met Lys Phe Phe Lys Ala Gln Ala Gly Val Pro Ser Gly Ile Phe Leu
-25 -20 -15 -10
ctc tct ctg gca cca gtt gtc att gcc gac tgc gct ctt ccg tca acc 96
Leu Ser Leu Ala Pro Val Val Ile Ala Asp Cys Ala Leu Pro Ser Thr
-5 -1 1 5
tat agc tgg aca tca act ggc tct ctg gca gat cca aag tct gga tgg 144
Tyr Ser Trp Thr Ser Thr Gly Ser Leu Ala Asp Pro Lys Ser Gly Trp
10 15 20
acg gcg ctc aag gat ttt acc aat gtg gtc tcc aac aac aaa cat atc 192
Thr Ala Leu Lys Asp Phe Thr Asn Val Val Ser Asn Asn Lys His Ile
25 30 35
gtc tat gca tca acc act gac gcc agt gga aac tac ggc tcg atg aat 240
Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Ala Ser Gly Asn Tyr Gly Ser Met Asn
40 45 50 55
ttt gcc tcc ttt tca gac tgg tct gac atg gca tct gca agt caa gcc 288
Phe Ala Ser Phe Ser Asp Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Ser Gln Ala
60 65 70
gcg acg agc ttt acg gca gtt gcg ccc act ttg ctc tac ttc cag cca 336
Ala Thr Ser Phe Thr Ala Val Ala Pro Thr Leu Leu Tyr Phe Gln Pro
75 80 85
aag agc atc tgg gtg ctg gcc tac caa tgg ggc tcg agt acg ttt acc 384
Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ser Ser Thr Phe Thr
90 95 100
tac cga acg tca agc gat cct acc aat gcc aat gga tgg tca tcc gag 432
Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ser Glu
105 110 115
aaa gct ctt ttc tct gga aag atc acc ggc tcg gac act ggc gcc att 480
Lys Ala Leu Phe Ser Gly Lys Ile Thr Gly Ser Asp Thr Gly Ala Ile
120 125 130 135
gat cag acc ctt atc ggt gac gcc acg aat atg tat ctt ttc ttt gcg 528
Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala
140 145 150
gga gat aac ggc aag atc tat cgg tcg agc atg cca atc gcc aac ttc 576
Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Pro Ile Ala Asn Phe
155 160 165
cct gga gac ttc gga acg gcg tca gaa gtc gtt ctt agt gac agc cgg 624
Pro Gly Asp Phe Gly Thr Ala Ser Glu Val Val Leu Ser Asp Ser Arg
170 175 180
aac aat ctc ttc gaa gca gtc caa gtt tac acc gtc gaa ggg caa aac 672
Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Glu Gly Gln Asn
185 190 195
cag tat ctg atg atc gtc gag gca att gga aca aac ggc cgt tat ttc 720
Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Thr Asn Gly Arg Tyr Phe
200 205 210 215
cgt tca ttc acc gcc agc agt ctc gac ggt tcg tgg aca gag cag gca 768
Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asp Gly Ser Trp Thr Glu Gln Ala
220 225 230
gcc agc gag aac aat ccc ttc gct gga aag gcc aac agc ggt gcg acc 816
Ala Ser Glu Asn Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr
235 240 245
tgg acc aac gac atc agt cac ggc gat ttg gtt cgc aat aac cct gac 864
Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Asn Asn Pro Asp
250 255 260
caa aca atg act atc gac cca tgc aac ctg caa ttc ctc tac cag ggg 912
Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly
265 270 275
cgc gat gcg agt gcc ggt ggt aac tac aat acc ctg ccg tgg agg cca 960
Arg Asp Ala Ser Ala Gly Gly Asn Tyr Asn Thr Leu Pro Trp Arg Pro
280 285 290 295
ggt gta ctg act ctg aag cac acg cgt gcg cat cac cat cac cat cac 1008
Gly Val Leu Thr Leu Lys His Thr Arg Ala His His His His His His
300 305 310
taa 1011
<210> 50
<211> 336
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 50
Met Lys Phe Phe Lys Ala Gln Ala Gly Val Pro Ser Gly Ile Phe Leu
-25 -20 -15 -10
Leu Ser Leu Ala Pro Val Val Ile Ala Asp Cys Ala Leu Pro Ser Thr
-5 -1 1 5
Tyr Ser Trp Thr Ser Thr Gly Ser Leu Ala Asp Pro Lys Ser Gly Trp
10 15 20
Thr Ala Leu Lys Asp Phe Thr Asn Val Val Ser Asn Asn Lys His Ile
25 30 35
Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Ala Ser Gly Asn Tyr Gly Ser Met Asn
40 45 50 55
Phe Ala Ser Phe Ser Asp Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Ser Gln Ala
60 65 70
Ala Thr Ser Phe Thr Ala Val Ala Pro Thr Leu Leu Tyr Phe Gln Pro
75 80 85
Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ser Ser Thr Phe Thr
90 95 100
Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ser Glu
105 110 115
Lys Ala Leu Phe Ser Gly Lys Ile Thr Gly Ser Asp Thr Gly Ala Ile
120 125 130 135
Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala
140 145 150
Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Pro Ile Ala Asn Phe
155 160 165
Pro Gly Asp Phe Gly Thr Ala Ser Glu Val Val Leu Ser Asp Ser Arg
170 175 180
Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Glu Gly Gln Asn
185 190 195
Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Thr Asn Gly Arg Tyr Phe
200 205 210 215
Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asp Gly Ser Trp Thr Glu Gln Ala
220 225 230
Ala Ser Glu Asn Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr
235 240 245
Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Asn Asn Pro Asp
250 255 260
Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly
265 270 275
Arg Asp Ala Ser Ala Gly Gly Asn Tyr Asn Thr Leu Pro Trp Arg Pro
280 285 290 295
Gly Val Leu Thr Leu Lys His Thr Arg Ala His His His His His His
300 305 310
<210> 51
<211> 311
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有His标签的成熟序列
<400> 51
Asp Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr Ser Trp Thr Ser Thr Gly Ser Leu
1 5 10 15
Ala Asp Pro Lys Ser Gly Trp Thr Ala Leu Lys Asp Phe Thr Asn Val
20 25 30
Val Ser Asn Asn Lys His Ile Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Ala Ser
35 40 45
Gly Asn Tyr Gly Ser Met Asn Phe Ala Ser Phe Ser Asp Trp Ser Asp
50 55 60
Met Ala Ser Ala Ser Gln Ala Ala Thr Ser Phe Thr Ala Val Ala Pro
65 70 75 80
Thr Leu Leu Tyr Phe Gln Pro Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln
85 90 95
Trp Gly Ser Ser Thr Phe Thr Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn
100 105 110
Ala Asn Gly Trp Ser Ser Glu Lys Ala Leu Phe Ser Gly Lys Ile Thr
115 120 125
Gly Ser Asp Thr Gly Ala Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Thr
130 135 140
Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser
145 150 155 160
Ser Met Pro Ile Ala Asn Phe Pro Gly Asp Phe Gly Thr Ala Ser Glu
165 170 175
Val Val Leu Ser Asp Ser Arg Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val
180 185 190
Tyr Thr Val Glu Gly Gln Asn Gln Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile
195 200 205
Gly Thr Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Asp
210 215 220
Gly Ser Trp Thr Glu Gln Ala Ala Ser Glu Asn Asn Pro Phe Ala Gly
225 230 235 240
Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp
245 250 255
Leu Val Arg Asn Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Ile Asp Pro Cys Asn
260 265 270
Leu Gln Phe Leu Tyr Gln Gly Arg Asp Ala Ser Ala Gly Gly Asn Tyr
275 280 285
Asn Thr Leu Pro Trp Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Lys His Thr Arg
290 295 300
Ala His His His His His His
305 310
<210> 52
<211> 1411
<212> DNA
<213> 梭孢端梗霉
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(318)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(72)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (73)..(1408)
<220>
<221> CDS
<222> (470)..(1298)
<220>
<221> CDS
<222> (1392)..(1408)
<400> 52
atg aag ttc tcc aaa tcg gat ctc ggc gct gcc gtc gcc ttc ctg gct 48
Met Lys Phe Ser Lys Ser Asp Leu Gly Ala Ala Val Ala Phe Leu Ala
-20 -15 -10
tcg gcc gtc cct ctc gct gaa gcc gcg tgc tcc ttg ccg tcc agc tac 96
Ser Ala Val Pro Leu Ala Glu Ala Ala Cys Ser Leu Pro Ser Ser Tyr
-5 -1 1 5
cgc tgg gca agc acc ggg cca ttg gcc aac ccc aag tca ggc tgg tac 144
Arg Trp Ala Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Tyr
10 15 20
agt ctc aag gac ttt act cat gtc cct tac aac ggc aag cac ttg gtc 192
Ser Leu Lys Asp Phe Thr His Val Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val
25 30 35 40
tat gcg tca aac tat gcc gga tcc gcc tac ggc tcc atg aac ttc ggc 240
Tyr Ala Ser Asn Tyr Ala Gly Ser Ala Tyr Gly Ser Met Asn Phe Gly
45 50 55
ctc ttc tcc aac tgg tcc gac atg gcc tcg gcg agt caa aac tct atg 288
Leu Phe Ser Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Ser Gln Asn Ser Met
60 65 70
aat gcg gcc gcc gtc gca ccc acc ctg ttt gtaagtcaga cctttgccgc 338
Asn Ala Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe
75 80
tttgctctat ccttaaagcc ttaaggggtt gtcattcctc tggaccctgt ttccgttaaa 398
ctgctcggac aaacaacccc cttcccccca actctccttc cccgaaaaac acatgactga 458
cagctgggca g tac ttt gca cct aag aat atc tgg gta ctt gca tcg cag 508
Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Ser Gln
85 90 95
tgg gga gct act ccc ttc ttc tac cgc acg tcg acc gac cct acg aat 556
Trp Gly Ala Thr Pro Phe Phe Tyr Arg Thr Ser Thr Asp Pro Thr Asn
100 105 110
ccc aac agc tgg tcg tcg aac cag ccg ctg ttc acc ggc tcc atc tcg 604
Pro Asn Ser Trp Ser Ser Asn Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser
115 120 125
gac tca tcc act ggg ccc atc gac cag acg ctc att ggt gat gcc aac 652
Asp Ser Ser Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Asn
130 135 140
tac atg tat ctc ttc ttt gcg ggc gac aac ggc aag att tac cgc tct 700
Tyr Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser
145 150 155
cgg atg ccc atc gga aac ttc ccg ggc agc ttt ggc tca tcc tac gaa 748
Arg Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Glu
160 165 170 175
gtc atc ctg agc ggc tcg agg aac gat ttc ttc gag gcg gtc cag gtc 796
Val Ile Leu Ser Gly Ser Arg Asn Asp Phe Phe Glu Ala Val Gln Val
180 185 190
tac acc gtg aca ggc caa agc tcg ccg ctg tac ctc atg atc atc gag 844
Tyr Thr Val Thr Gly Gln Ser Ser Pro Leu Tyr Leu Met Ile Ile Glu
195 200 205
agc atc ggt agc aga ggc cgg tac ttc cgc tcc tac acg gcc acc aac 892
Ser Ile Gly Ser Arg Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Tyr Thr Ala Thr Asn
210 215 220
ctc ggg ggc tcg tgg tct ccg cag gcc acg agc gag agc tcg ccg ttt 940
Leu Gly Gly Ser Trp Ser Pro Gln Ala Thr Ser Glu Ser Ser Pro Phe
225 230 235
gcc ggg gcc gcg aac agc ggc gcg acc tgg acc aac gac atc agc cac 988
Ala Gly Ala Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His
240 245 250 255
ggc gac ctg atc cgt agc ggt ccc gac cag act atg cct atc gac ccg 1036
Gly Asp Leu Ile Arg Ser Gly Pro Asp Gln Thr Met Pro Ile Asp Pro
260 265 270
tgc aac ctg cag ctg ctg tac cag ggc ctg gtc ggc acc aac tcc gac 1084
Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Leu Val Gly Thr Asn Ser Asp
275 280 285
tac aac aag ctg ccc tac cgg ccc ggc ctc ctg acg ctg cag aac cct 1132
Tyr Asn Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Gln Asn Pro
290 295 300
gtg ggc ggc ggt ggc act ccg acc acg acc acg agc aag ccg ccc gcg 1180
Val Gly Gly Gly Gly Thr Pro Thr Thr Thr Thr Ser Lys Pro Pro Ala
305 310 315
acg acg acg tcc acc ggc ggt ggt ggc acc gct cct cag tat gct cag 1228
Thr Thr Thr Ser Thr Gly Gly Gly Gly Thr Ala Pro Gln Tyr Ala Gln
320 325 330 335
tgc ggc ggt cag gga tac acc ggc ccg acg gtg tgc gcc agc ccg tac 1276
Cys Gly Gly Gln Gly Tyr Thr Gly Pro Thr Val Cys Ala Ser Pro Tyr
340 345 350
aag tgc acc tac tct aac cct t gtaagttttt ctgaaattct gttttctttt 1328
Lys Cys Thr Tyr Ser Asn Pro
355
ctctttgtat ctcttccttt ttcatgatta cattggattg ttgctgacga tatctccaca 1388
tag gg tat tcc cag tgc ctg taa 1411
Trp Tyr Ser Gln Cys Leu
360
<210> 53
<211> 388
<212> PRT
<213> 梭孢端梗霉
<400> 53
Met Lys Phe Ser Lys Ser Asp Leu Gly Ala Ala Val Ala Phe Leu Ala
-20 -15 -10
Ser Ala Val Pro Leu Ala Glu Ala Ala Cys Ser Leu Pro Ser Ser Tyr
-5 -1 1 5
Arg Trp Ala Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Tyr
10 15 20
Ser Leu Lys Asp Phe Thr His Val Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val
25 30 35 40
Tyr Ala Ser Asn Tyr Ala Gly Ser Ala Tyr Gly Ser Met Asn Phe Gly
45 50 55
Leu Phe Ser Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Ser Gln Asn Ser Met
60 65 70
Asn Ala Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn
75 80 85
Ile Trp Val Leu Ala Ser Gln Trp Gly Ala Thr Pro Phe Phe Tyr Arg
90 95 100
Thr Ser Thr Asp Pro Thr Asn Pro Asn Ser Trp Ser Ser Asn Gln Pro
105 110 115 120
Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Asp Ser Ser Thr Gly Pro Ile Asp Gln
125 130 135
Thr Leu Ile Gly Asp Ala Asn Tyr Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp
140 145 150
Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Arg Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly
155 160 165
Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Glu Val Ile Leu Ser Gly Ser Arg Asn Asp
170 175 180
Phe Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Thr Gly Gln Ser Ser Pro
185 190 195 200
Leu Tyr Leu Met Ile Ile Glu Ser Ile Gly Ser Arg Gly Arg Tyr Phe
205 210 215
Arg Ser Tyr Thr Ala Thr Asn Leu Gly Gly Ser Trp Ser Pro Gln Ala
220 225 230
Thr Ser Glu Ser Ser Pro Phe Ala Gly Ala Ala Asn Ser Gly Ala Thr
235 240 245
Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Ile Arg Ser Gly Pro Asp
250 255 260
Gln Thr Met Pro Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly
265 270 275 280
Leu Val Gly Thr Asn Ser Asp Tyr Asn Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly
285 290 295
Leu Leu Thr Leu Gln Asn Pro Val Gly Gly Gly Gly Thr Pro Thr Thr
300 305 310
Thr Thr Ser Lys Pro Pro Ala Thr Thr Thr Ser Thr Gly Gly Gly Gly
315 320 325
Thr Ala Pro Gln Tyr Ala Gln Cys Gly Gly Gln Gly Tyr Thr Gly Pro
330 335 340
Thr Val Cys Ala Ser Pro Tyr Lys Cys Thr Tyr Ser Asn Pro Trp Tyr
345 350 355 360
Ser Gln Cys Leu
<210> 54
<211> 364
<212> PRT
<213> 梭孢端梗霉
<400> 54
Ala Cys Ser Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Trp Ala Ser Thr Gly Pro Leu
1 5 10 15
Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Tyr Ser Leu Lys Asp Phe Thr His Val
20 25 30
Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Tyr Ala Gly Ser
35 40 45
Ala Tyr Gly Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Asn Trp Ser Asp Met
50 55 60
Ala Ser Ala Ser Gln Asn Ser Met Asn Ala Ala Ala Val Ala Pro Thr
65 70 75 80
Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Ser Gln Trp
85 90 95
Gly Ala Thr Pro Phe Phe Tyr Arg Thr Ser Thr Asp Pro Thr Asn Pro
100 105 110
Asn Ser Trp Ser Ser Asn Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Asp
115 120 125
Ser Ser Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Asn Tyr
130 135 140
Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Arg
145 150 155 160
Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Glu Val
165 170 175
Ile Leu Ser Gly Ser Arg Asn Asp Phe Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr
180 185 190
Thr Val Thr Gly Gln Ser Ser Pro Leu Tyr Leu Met Ile Ile Glu Ser
195 200 205
Ile Gly Ser Arg Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Tyr Thr Ala Thr Asn Leu
210 215 220
Gly Gly Ser Trp Ser Pro Gln Ala Thr Ser Glu Ser Ser Pro Phe Ala
225 230 235 240
Gly Ala Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly
245 250 255
Asp Leu Ile Arg Ser Gly Pro Asp Gln Thr Met Pro Ile Asp Pro Cys
260 265 270
Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Leu Val Gly Thr Asn Ser Asp Tyr
275 280 285
Asn Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Gln Asn Pro Val
290 295 300
Gly Gly Gly Gly Thr Pro Thr Thr Thr Thr Ser Lys Pro Pro Ala Thr
305 310 315 320
Thr Thr Ser Thr Gly Gly Gly Gly Thr Ala Pro Gln Tyr Ala Gln Cys
325 330 335
Gly Gly Gln Gly Tyr Thr Gly Pro Thr Val Cys Ala Ser Pro Tyr Lys
340 345 350
Cys Thr Tyr Ser Asn Pro Trp Tyr Ser Gln Cys Leu
355 360
<210> 55
<211> 1438
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 表达构建体
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(318)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(72)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (73)..(1438)
<220>
<221> CDS
<222> (470)..(1298)
<220>
<221> CDS
<222> (1392)..(1435)
<400> 55
atg aag ttc tcc aaa tcg gat ctc ggc gct gcc gtc gcc ttc ctg gct 48
Met Lys Phe Ser Lys Ser Asp Leu Gly Ala Ala Val Ala Phe Leu Ala
-20 -15 -10
tcg gcc gtc cct ctc gct gaa gcc gcg tgc tcc ttg ccg tcc agc tac 96
Ser Ala Val Pro Leu Ala Glu Ala Ala Cys Ser Leu Pro Ser Ser Tyr
-5 -1 1 5
cgc tgg gca agc acc ggg cca ttg gcc aac ccc aag tca ggc tgg tac 144
Arg Trp Ala Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Tyr
10 15 20
agt ctc aag gac ttt act cat gtc cct tac aac ggc aag cac ttg gtc 192
Ser Leu Lys Asp Phe Thr His Val Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val
25 30 35 40
tat gcg tca aac tat gcc gga tcc gcc tac ggc tcc atg aac ttc ggc 240
Tyr Ala Ser Asn Tyr Ala Gly Ser Ala Tyr Gly Ser Met Asn Phe Gly
45 50 55
ctc ttc tcc aac tgg tcc gac atg gcc tcg gcg agt caa aac tct atg 288
Leu Phe Ser Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Ser Gln Asn Ser Met
60 65 70
aat gcg gcc gcc gtc gca ccc acc ctg ttt gtaagtcaga cctttgccgc 338
Asn Ala Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe
75 80
tttgctctat ccttaaagcc ttaaggggtt gtcattcctc tggaccctgt ttccgttaaa 398
ctgctcggac aaacaacccc cttcccccca actctccttc cccgaaaaac acatgactga 458
cagctgggca g tac ttt gca cct aag aat atc tgg gta ctt gca tcg cag 508
Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Ser Gln
85 90 95
tgg gga gct act ccc ttc ttc tac cgc acg tcg acc gac cct acg aat 556
Trp Gly Ala Thr Pro Phe Phe Tyr Arg Thr Ser Thr Asp Pro Thr Asn
100 105 110
ccc aac agc tgg tcg tcg aac cag ccg ctg ttc acc ggc tcc atc tcg 604
Pro Asn Ser Trp Ser Ser Asn Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser
115 120 125
gac tca tcc act ggg ccc atc gac cag acg ctc att ggt gat gcc aac 652
Asp Ser Ser Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Asn
130 135 140
tac atg tat ctc ttc ttt gcg ggc gac aac ggc aag att tac cgc tct 700
Tyr Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser
145 150 155
cgg atg ccc atc gga aac ttc ccg ggc agc ttt ggc tca tcc tac gaa 748
Arg Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Glu
160 165 170 175
gtc atc ctg agc ggc tcg agg aac gat ttc ttc gag gcg gtc cag gtc 796
Val Ile Leu Ser Gly Ser Arg Asn Asp Phe Phe Glu Ala Val Gln Val
180 185 190
tac acc gtg aca ggc caa agc tcg ccg ctg tac ctc atg atc atc gag 844
Tyr Thr Val Thr Gly Gln Ser Ser Pro Leu Tyr Leu Met Ile Ile Glu
195 200 205
agc atc ggt agc aga ggc cgg tac ttc cgc tcc tac acg gcc acc aac 892
Ser Ile Gly Ser Arg Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Tyr Thr Ala Thr Asn
210 215 220
ctc ggg ggc tcg tgg tct ccg cag gcc acg agc gag agc tcg ccg ttt 940
Leu Gly Gly Ser Trp Ser Pro Gln Ala Thr Ser Glu Ser Ser Pro Phe
225 230 235
gcc ggg gcc gcg aac agc ggc gcg acc tgg acc aac gac atc agc cac 988
Ala Gly Ala Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His
240 245 250 255
ggc gac ctg atc cgt agc ggt ccc gac cag act atg cct atc gac ccg 1036
Gly Asp Leu Ile Arg Ser Gly Pro Asp Gln Thr Met Pro Ile Asp Pro
260 265 270
tgc aac ctg cag ctg ctg tac cag ggc ctg gtc ggc acc aac tcc gac 1084
Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Leu Val Gly Thr Asn Ser Asp
275 280 285
tac aac aag ctg ccc tac cgg ccc ggc ctc ctg acg ctg cag aac cct 1132
Tyr Asn Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Gln Asn Pro
290 295 300
gtg ggc ggc ggt ggc act ccg acc acg acc acg agc aag ccg ccc gcg 1180
Val Gly Gly Gly Gly Thr Pro Thr Thr Thr Thr Ser Lys Pro Pro Ala
305 310 315
acg acg acg tcc acc ggc ggt ggt ggc acc gct cct cag tat gct cag 1228
Thr Thr Thr Ser Thr Gly Gly Gly Gly Thr Ala Pro Gln Tyr Ala Gln
320 325 330 335
tgc ggc ggt cag gga tac acc ggc ccg acg gtg tgc gcc agc ccg tac 1276
Cys Gly Gly Gln Gly Tyr Thr Gly Pro Thr Val Cys Ala Ser Pro Tyr
340 345 350
aag tgc acc tac tct aac cct t gtaagttttt ctgaaattct gttttctttt 1328
Lys Cys Thr Tyr Ser Asn Pro
355
ctctttgtat ctcttccttt ttcatgatta cattggattg ttgctgacga tatctccaca 1388
tag gg tat tcc cag tgc ctg acg cgt gcg cat cac cat cac cat cac 1435
Trp Tyr Ser Gln Cys Leu Thr Arg Ala His His His His His His
360 365 370
taa 1438
<210> 56
<211> 397
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 56
Met Lys Phe Ser Lys Ser Asp Leu Gly Ala Ala Val Ala Phe Leu Ala
-20 -15 -10
Ser Ala Val Pro Leu Ala Glu Ala Ala Cys Ser Leu Pro Ser Ser Tyr
-5 -1 1 5
Arg Trp Ala Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Tyr
10 15 20
Ser Leu Lys Asp Phe Thr His Val Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val
25 30 35 40
Tyr Ala Ser Asn Tyr Ala Gly Ser Ala Tyr Gly Ser Met Asn Phe Gly
45 50 55
Leu Phe Ser Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Ser Gln Asn Ser Met
60 65 70
Asn Ala Ala Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn
75 80 85
Ile Trp Val Leu Ala Ser Gln Trp Gly Ala Thr Pro Phe Phe Tyr Arg
90 95 100
Thr Ser Thr Asp Pro Thr Asn Pro Asn Ser Trp Ser Ser Asn Gln Pro
105 110 115 120
Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Asp Ser Ser Thr Gly Pro Ile Asp Gln
125 130 135
Thr Leu Ile Gly Asp Ala Asn Tyr Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp
140 145 150
Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Arg Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly
155 160 165
Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Glu Val Ile Leu Ser Gly Ser Arg Asn Asp
170 175 180
Phe Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Thr Gly Gln Ser Ser Pro
185 190 195 200
Leu Tyr Leu Met Ile Ile Glu Ser Ile Gly Ser Arg Gly Arg Tyr Phe
205 210 215
Arg Ser Tyr Thr Ala Thr Asn Leu Gly Gly Ser Trp Ser Pro Gln Ala
220 225 230
Thr Ser Glu Ser Ser Pro Phe Ala Gly Ala Ala Asn Ser Gly Ala Thr
235 240 245
Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Ile Arg Ser Gly Pro Asp
250 255 260
Gln Thr Met Pro Ile Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly
265 270 275 280
Leu Val Gly Thr Asn Ser Asp Tyr Asn Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly
285 290 295
Leu Leu Thr Leu Gln Asn Pro Val Gly Gly Gly Gly Thr Pro Thr Thr
300 305 310
Thr Thr Ser Lys Pro Pro Ala Thr Thr Thr Ser Thr Gly Gly Gly Gly
315 320 325
Thr Ala Pro Gln Tyr Ala Gln Cys Gly Gly Gln Gly Tyr Thr Gly Pro
330 335 340
Thr Val Cys Ala Ser Pro Tyr Lys Cys Thr Tyr Ser Asn Pro Trp Tyr
345 350 355 360
Ser Gln Cys Leu Thr Arg Ala His His His His His His
365 370
<210> 57
<211> 373
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有His标签的成熟序列
<400> 57
Ala Cys Ser Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Trp Ala Ser Thr Gly Pro Leu
1 5 10 15
Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Tyr Ser Leu Lys Asp Phe Thr His Val
20 25 30
Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Ser Asn Tyr Ala Gly Ser
35 40 45
Ala Tyr Gly Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Asn Trp Ser Asp Met
50 55 60
Ala Ser Ala Ser Gln Asn Ser Met Asn Ala Ala Ala Val Ala Pro Thr
65 70 75 80
Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Ser Gln Trp
85 90 95
Gly Ala Thr Pro Phe Phe Tyr Arg Thr Ser Thr Asp Pro Thr Asn Pro
100 105 110
Asn Ser Trp Ser Ser Asn Gln Pro Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Asp
115 120 125
Ser Ser Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Ala Asn Tyr
130 135 140
Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Arg
145 150 155 160
Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Ser Tyr Glu Val
165 170 175
Ile Leu Ser Gly Ser Arg Asn Asp Phe Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr
180 185 190
Thr Val Thr Gly Gln Ser Ser Pro Leu Tyr Leu Met Ile Ile Glu Ser
195 200 205
Ile Gly Ser Arg Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Tyr Thr Ala Thr Asn Leu
210 215 220
Gly Gly Ser Trp Ser Pro Gln Ala Thr Ser Glu Ser Ser Pro Phe Ala
225 230 235 240
Gly Ala Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly
245 250 255
Asp Leu Ile Arg Ser Gly Pro Asp Gln Thr Met Pro Ile Asp Pro Cys
260 265 270
Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Leu Val Gly Thr Asn Ser Asp Tyr
275 280 285
Asn Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Gln Asn Pro Val
290 295 300
Gly Gly Gly Gly Thr Pro Thr Thr Thr Thr Ser Lys Pro Pro Ala Thr
305 310 315 320
Thr Thr Ser Thr Gly Gly Gly Gly Thr Ala Pro Gln Tyr Ala Gln Cys
325 330 335
Gly Gly Gln Gly Tyr Thr Gly Pro Thr Val Cys Ala Ser Pro Tyr Lys
340 345 350
Cys Thr Tyr Ser Asn Pro Trp Tyr Ser Gln Cys Leu Thr Arg Ala His
355 360 365
His His His His His
370
<210> 58
<211> 1404
<212> DNA
<213> 链孢子囊菌物种-60756
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1401)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(93)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (94)..(1401)
<400> 58
atg aaa atc ccc cgt ctc cgg ctc tgg ctc tcc gcc ggg gtc gcc gcc 48
Met Lys Ile Pro Arg Leu Arg Leu Trp Leu Ser Ala Gly Val Ala Ala
-30 -25 -20
gcg gtc ggc gtg gtc ggc acg gtc ggc gcg gtg acc gca ccg gcc gcc 96
Ala Val Gly Val Val Gly Thr Val Gly Ala Val Thr Ala Pro Ala Ala
-15 -10 -5 -1 1
ggc gcc gcc gcc gga tgc cgc gtg gac tac acg gtg agc aac cag tgg 144
Gly Ala Ala Ala Gly Cys Arg Val Asp Tyr Thr Val Ser Asn Gln Trp
5 10 15
ccg ggc ggc ttc ggc gcg aac gtg aac atc acc aac ctc ggc gac ccc 192
Pro Gly Gly Phe Gly Ala Asn Val Asn Ile Thr Asn Leu Gly Asp Pro
20 25 30
atc aac ggc tgg cgc ctg acc tgg tcg ttc ccc gcg ggg cag acc atc 240
Ile Asn Gly Trp Arg Leu Thr Trp Ser Phe Pro Ala Gly Gln Thr Ile
35 40 45
acc cag ctg tgg agc ggc tcc cac acc cag tcc ggc tcc cag gtc acc 288
Thr Gln Leu Trp Ser Gly Ser His Thr Gln Ser Gly Ser Gln Val Thr
50 55 60 65
gtg acc aac gtg gac tac aac gcc ggc ctc ccc acc ggg ggc agc gcg 336
Val Thr Asn Val Asp Tyr Asn Ala Gly Leu Pro Thr Gly Gly Ser Ala
70 75 80
aac ttc ggg ttc aac ggc tcc ttc aac ggc agc aac ccg gca ccg acg 384
Asn Phe Gly Phe Asn Gly Ser Phe Asn Gly Ser Asn Pro Ala Pro Thr
85 90 95
agc ttc gcc ctc aac ggt gtg acc tgc acc ggc ggc gtg acc gct tcg 432
Ser Phe Ala Leu Asn Gly Val Thr Cys Thr Gly Gly Val Thr Ala Ser
100 105 110
ccc agc ccg tcc acc agc ccc tcg acc ggc ccg tcg ccg tcg tcc acg 480
Pro Ser Pro Ser Thr Ser Pro Ser Thr Gly Pro Ser Pro Ser Ser Thr
115 120 125
ccg acg tcg ccc ggc acc tgc gct ctt ccg tcg acg tac cgc tgg acg 528
Pro Thr Ser Pro Gly Thr Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Thr
130 135 140 145
tcg acg ggc ccg ctg gcg aac ccg aag tcg ggg tgg gtc tcg ctc aag 576
Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Val Ser Leu Lys
150 155 160
gac ttc acc aac gtc gtc cac aac ggc aag cac ctc gtc tac gcc acg 624
Asp Phe Thr Asn Val Val His Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Thr
165 170 175
acg cac gac acg ggg acg agc tgg ggc tcg atg aac ttc agc ccc ttc 672
Thr His Asp Thr Gly Thr Ser Trp Gly Ser Met Asn Phe Ser Pro Phe
180 185 190
acg aac tgg tcc gac atg gcc tcg gcc ggc cag aac aag atg aac ttc 720
Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Gly Gln Asn Lys Met Asn Phe
195 200 205
tcc acc gtc gcg ccc acg ctc ttc tac ttc gcc ccg aag aac atc tgg 768
Ser Thr Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp
210 215 220 225
gtg ctg gcc tac cag tgg ggc ggg acc gcc ttc tcc tac cgg acc tcc 816
Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Gly Thr Ala Phe Ser Tyr Arg Thr Ser
230 235 240
agt gac ccc acc aac gcc aac ggc tgg tcg gcg cag cag acc ctc ttc 864
Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ala Gln Gln Thr Leu Phe
245 250 255
acc gga agc atc tcc ggc tcc gga acc ggg ccc atc gac cag acg ctc 912
Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Gly Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu
260 265 270
atc ggc gac ggc acc aac atg tac ctg ttc ttc gcc ggg gac aac ggc 960
Ile Gly Asp Gly Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly
275 280 285
aag atc tac cgg gcc agc atg ccg atc ggg aac ttc ccg ggc agc ttc 1008
Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe
290 295 300 305
ggc tcg aac tac acg acg atc atg agc gac acg acg aac aac ctg ttc 1056
Gly Ser Asn Tyr Thr Thr Ile Met Ser Asp Thr Thr Asn Asn Leu Phe
310 315 320
gaa ggg gtc gag gtc tac aag ctc cag ggg cag aac aag tac ctc atg 1104
Glu Gly Val Glu Val Tyr Lys Leu Gln Gly Gln Asn Lys Tyr Leu Met
325 330 335
ctc gtc gag gcg atc ggc tcg cag ggt cgc tac ttc cgc tcg ttc acg 1152
Leu Val Glu Ala Ile Gly Ser Gln Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr
340 345 350
gcc acc agc ctg gac ggc aca tgg aca ccc cag gcc gcg acc gag ggc 1200
Ala Thr Ser Leu Asp Gly Thr Trp Thr Pro Gln Ala Ala Thr Glu Gly
355 360 365
aac ccc ttc gcc ggc aag gcc aac agc ggc gcc acc tgg acc aac gac 1248
Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp
370 375 380 385
atc agc cac ggc gat ctg gtc cgc agc aac ccc gac cag acc aag acc 1296
Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Ser Asn Pro Asp Gln Thr Lys Thr
390 395 400
gtc gac ccc tgc aac ctg caa ctg ctc tac cag ggc cgc agc ccc aac 1344
Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Ser Pro Asn
405 410 415
tcc ggt ggc gac tac ggc ctg ctg ccc tac cgg ccg ggg gtg ctg aca 1392
Ser Gly Gly Asp Tyr Gly Leu Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Val Leu Thr
420 425 430
ctg cag cgc tga 1404
Leu Gln Arg
435
<210> 59
<211> 467
<212> PRT
<213> 链孢子囊菌物种-60756
<400> 59
Met Lys Ile Pro Arg Leu Arg Leu Trp Leu Ser Ala Gly Val Ala Ala
-30 -25 -20
Ala Val Gly Val Val Gly Thr Val Gly Ala Val Thr Ala Pro Ala Ala
-15 -10 -5 -1 1
Gly Ala Ala Ala Gly Cys Arg Val Asp Tyr Thr Val Ser Asn Gln Trp
5 10 15
Pro Gly Gly Phe Gly Ala Asn Val Asn Ile Thr Asn Leu Gly Asp Pro
20 25 30
Ile Asn Gly Trp Arg Leu Thr Trp Ser Phe Pro Ala Gly Gln Thr Ile
35 40 45
Thr Gln Leu Trp Ser Gly Ser His Thr Gln Ser Gly Ser Gln Val Thr
50 55 60 65
Val Thr Asn Val Asp Tyr Asn Ala Gly Leu Pro Thr Gly Gly Ser Ala
70 75 80
Asn Phe Gly Phe Asn Gly Ser Phe Asn Gly Ser Asn Pro Ala Pro Thr
85 90 95
Ser Phe Ala Leu Asn Gly Val Thr Cys Thr Gly Gly Val Thr Ala Ser
100 105 110
Pro Ser Pro Ser Thr Ser Pro Ser Thr Gly Pro Ser Pro Ser Ser Thr
115 120 125
Pro Thr Ser Pro Gly Thr Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Thr
130 135 140 145
Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Val Ser Leu Lys
150 155 160
Asp Phe Thr Asn Val Val His Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Thr
165 170 175
Thr His Asp Thr Gly Thr Ser Trp Gly Ser Met Asn Phe Ser Pro Phe
180 185 190
Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Gly Gln Asn Lys Met Asn Phe
195 200 205
Ser Thr Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp
210 215 220 225
Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Gly Thr Ala Phe Ser Tyr Arg Thr Ser
230 235 240
Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ala Gln Gln Thr Leu Phe
245 250 255
Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Gly Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu
260 265 270
Ile Gly Asp Gly Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly
275 280 285
Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe
290 295 300 305
Gly Ser Asn Tyr Thr Thr Ile Met Ser Asp Thr Thr Asn Asn Leu Phe
310 315 320
Glu Gly Val Glu Val Tyr Lys Leu Gln Gly Gln Asn Lys Tyr Leu Met
325 330 335
Leu Val Glu Ala Ile Gly Ser Gln Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr
340 345 350
Ala Thr Ser Leu Asp Gly Thr Trp Thr Pro Gln Ala Ala Thr Glu Gly
355 360 365
Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp
370 375 380 385
Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Ser Asn Pro Asp Gln Thr Lys Thr
390 395 400
Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Ser Pro Asn
405 410 415
Ser Gly Gly Asp Tyr Gly Leu Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Val Leu Thr
420 425 430
Leu Gln Arg
435
<210> 60
<211> 436
<212> PRT
<213> 链孢子囊菌物种-60756
<400> 60
Ala Gly Ala Ala Ala Gly Cys Arg Val Asp Tyr Thr Val Ser Asn Gln
1 5 10 15
Trp Pro Gly Gly Phe Gly Ala Asn Val Asn Ile Thr Asn Leu Gly Asp
20 25 30
Pro Ile Asn Gly Trp Arg Leu Thr Trp Ser Phe Pro Ala Gly Gln Thr
35 40 45
Ile Thr Gln Leu Trp Ser Gly Ser His Thr Gln Ser Gly Ser Gln Val
50 55 60
Thr Val Thr Asn Val Asp Tyr Asn Ala Gly Leu Pro Thr Gly Gly Ser
65 70 75 80
Ala Asn Phe Gly Phe Asn Gly Ser Phe Asn Gly Ser Asn Pro Ala Pro
85 90 95
Thr Ser Phe Ala Leu Asn Gly Val Thr Cys Thr Gly Gly Val Thr Ala
100 105 110
Ser Pro Ser Pro Ser Thr Ser Pro Ser Thr Gly Pro Ser Pro Ser Ser
115 120 125
Thr Pro Thr Ser Pro Gly Thr Cys Ala Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp
130 135 140
Thr Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Val Ser Leu
145 150 155 160
Lys Asp Phe Thr Asn Val Val His Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala
165 170 175
Thr Thr His Asp Thr Gly Thr Ser Trp Gly Ser Met Asn Phe Ser Pro
180 185 190
Phe Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Gly Gln Asn Lys Met Asn
195 200 205
Phe Ser Thr Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile
210 215 220
Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Gly Thr Ala Phe Ser Tyr Arg Thr
225 230 235 240
Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ala Gln Gln Thr Leu
245 250 255
Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Gly Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr
260 265 270
Leu Ile Gly Asp Gly Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn
275 280 285
Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Ser
290 295 300
Phe Gly Ser Asn Tyr Thr Thr Ile Met Ser Asp Thr Thr Asn Asn Leu
305 310 315 320
Phe Glu Gly Val Glu Val Tyr Lys Leu Gln Gly Gln Asn Lys Tyr Leu
325 330 335
Met Leu Val Glu Ala Ile Gly Ser Gln Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe
340 345 350
Thr Ala Thr Ser Leu Asp Gly Thr Trp Thr Pro Gln Ala Ala Thr Glu
355 360 365
Gly Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn
370 375 380
Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Ser Asn Pro Asp Gln Thr Lys
385 390 395 400
Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Ser Pro
405 410 415
Asn Ser Gly Gly Asp Tyr Gly Leu Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Val Leu
420 425 430
Thr Leu Gln Arg
435
<210> 61
<211> 1416
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 表达构建体
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1413)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(81)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (82)..(1413)
<400> 61
atg aag aaa ccg ttg ggg aaa att gtc gca agc acc gca cta ctc att 48
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
-25 -20 -15
tct gtt gct ttt agt tca tcg ata gca tca gca cat cat cat cac cat 96
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala His His His His His
-10 -5 -1 1 5
cat cct agg gcc ggc gcc gcc gcc gga tgc cgc gtg gac tac acg gtg 144
His Pro Arg Ala Gly Ala Ala Ala Gly Cys Arg Val Asp Tyr Thr Val
10 15 20
agc aac cag tgg ccg ggc ggc ttc ggc gcg aac gtg aac atc acc aac 192
Ser Asn Gln Trp Pro Gly Gly Phe Gly Ala Asn Val Asn Ile Thr Asn
25 30 35
ctc ggc gac ccc atc aac ggc tgg cgc ctg acc tgg tcg ttc ccc gcg 240
Leu Gly Asp Pro Ile Asn Gly Trp Arg Leu Thr Trp Ser Phe Pro Ala
40 45 50
ggg cag acc atc acc cag ctg tgg agc ggc tcc cac acc cag tcc ggc 288
Gly Gln Thr Ile Thr Gln Leu Trp Ser Gly Ser His Thr Gln Ser Gly
55 60 65
tcc cag gtc acc gtg acc aac gtg gac tac aac gcc ggc ctc ccc acc 336
Ser Gln Val Thr Val Thr Asn Val Asp Tyr Asn Ala Gly Leu Pro Thr
70 75 80 85
ggg ggc agc gcg aac ttc ggg ttc aac ggc tcc ttc aac ggc agc aac 384
Gly Gly Ser Ala Asn Phe Gly Phe Asn Gly Ser Phe Asn Gly Ser Asn
90 95 100
ccg gca ccg acg agc ttc gcc ctc aac ggt gtg acc tgc acc ggc ggc 432
Pro Ala Pro Thr Ser Phe Ala Leu Asn Gly Val Thr Cys Thr Gly Gly
105 110 115
gtg acc gct tcg ccc agc ccg tcc acc agc ccc tcg acc ggc ccg tcg 480
Val Thr Ala Ser Pro Ser Pro Ser Thr Ser Pro Ser Thr Gly Pro Ser
120 125 130
ccg tcg tcc acg ccg acg tcg ccc ggc acc tgc gct ctt ccg tcg acg 528
Pro Ser Ser Thr Pro Thr Ser Pro Gly Thr Cys Ala Leu Pro Ser Thr
135 140 145
tac cgc tgg acg tcg acg ggc ccg ctg gcg aac ccg aag tcg ggg tgg 576
Tyr Arg Trp Thr Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp
150 155 160 165
gtc tcg ctc aag gac ttc acc aac gtc gtc cac aac ggc aag cac ctc 624
Val Ser Leu Lys Asp Phe Thr Asn Val Val His Asn Gly Lys His Leu
170 175 180
gtc tac gcc acg acg cac gac acg ggg acg agc tgg ggc tcg atg aac 672
Val Tyr Ala Thr Thr His Asp Thr Gly Thr Ser Trp Gly Ser Met Asn
185 190 195
ttc agc ccc ttc acg aac tgg tcc gac atg gcc tcg gcc ggc cag aac 720
Phe Ser Pro Phe Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Gly Gln Asn
200 205 210
aag atg aac ttc tcc acc gtc gcg ccc acg ctc ttc tac ttc gcc ccg 768
Lys Met Asn Phe Ser Thr Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro
215 220 225
aag aac atc tgg gtg ctg gcc tac cag tgg ggc ggg acc gcc ttc tcc 816
Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Gly Thr Ala Phe Ser
230 235 240 245
tac cgg acc tcc agt gac ccc acc aac gcc aac ggc tgg tcg gcg cag 864
Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ala Gln
250 255 260
cag acc ctc ttc acc gga agc atc tcc ggc tcc gga acc ggg ccc atc 912
Gln Thr Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Gly Thr Gly Pro Ile
265 270 275
gac cag acg ctc atc ggc gac ggc acc aac atg tac ctg ttc ttc gcc 960
Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Gly Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala
280 285 290
ggg gac aac ggc aag atc tac cgg gcc agc atg ccg atc ggg aac ttc 1008
Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asn Phe
295 300 305
ccg ggc agc ttc ggc tcg aac tac acg acg atc atg agc gac acg acg 1056
Pro Gly Ser Phe Gly Ser Asn Tyr Thr Thr Ile Met Ser Asp Thr Thr
310 315 320 325
aac aac ctg ttc gaa ggg gtc gag gtc tac aag ctc cag ggg cag aac 1104
Asn Asn Leu Phe Glu Gly Val Glu Val Tyr Lys Leu Gln Gly Gln Asn
330 335 340
aag tac ctc atg ctc gtc gag gcg atc ggc tcg cag ggt cgc tac ttc 1152
Lys Tyr Leu Met Leu Val Glu Ala Ile Gly Ser Gln Gly Arg Tyr Phe
345 350 355
cgc tcg ttc acg gcc acc agc ctg gac ggc aca tgg aca ccc cag gcc 1200
Arg Ser Phe Thr Ala Thr Ser Leu Asp Gly Thr Trp Thr Pro Gln Ala
360 365 370
gcg acc gag ggc aac ccc ttc gcc ggc aag gcc aac agc ggc gcc acc 1248
Ala Thr Glu Gly Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr
375 380 385
tgg acc aac gac atc agc cac ggc gat ctg gtc cgc agc aac ccc gac 1296
Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Ser Asn Pro Asp
390 395 400 405
cag acc aag acc gtc gac ccc tgc aac ctg caa ctg ctc tac cag ggc 1344
Gln Thr Lys Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly
410 415 420
cgc agc ccc aac tcc ggt ggc gac tac ggc ctg ctg ccc tac cgg ccg 1392
Arg Ser Pro Asn Ser Gly Gly Asp Tyr Gly Leu Leu Pro Tyr Arg Pro
425 430 435
ggg gtg ctg aca ctg cag cgc tga 1416
Gly Val Leu Thr Leu Gln Arg
440
<210> 62
<211> 471
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 62
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
-25 -20 -15
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala His His His His His
-10 -5 -1 1 5
His Pro Arg Ala Gly Ala Ala Ala Gly Cys Arg Val Asp Tyr Thr Val
10 15 20
Ser Asn Gln Trp Pro Gly Gly Phe Gly Ala Asn Val Asn Ile Thr Asn
25 30 35
Leu Gly Asp Pro Ile Asn Gly Trp Arg Leu Thr Trp Ser Phe Pro Ala
40 45 50
Gly Gln Thr Ile Thr Gln Leu Trp Ser Gly Ser His Thr Gln Ser Gly
55 60 65
Ser Gln Val Thr Val Thr Asn Val Asp Tyr Asn Ala Gly Leu Pro Thr
70 75 80 85
Gly Gly Ser Ala Asn Phe Gly Phe Asn Gly Ser Phe Asn Gly Ser Asn
90 95 100
Pro Ala Pro Thr Ser Phe Ala Leu Asn Gly Val Thr Cys Thr Gly Gly
105 110 115
Val Thr Ala Ser Pro Ser Pro Ser Thr Ser Pro Ser Thr Gly Pro Ser
120 125 130
Pro Ser Ser Thr Pro Thr Ser Pro Gly Thr Cys Ala Leu Pro Ser Thr
135 140 145
Tyr Arg Trp Thr Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp
150 155 160 165
Val Ser Leu Lys Asp Phe Thr Asn Val Val His Asn Gly Lys His Leu
170 175 180
Val Tyr Ala Thr Thr His Asp Thr Gly Thr Ser Trp Gly Ser Met Asn
185 190 195
Phe Ser Pro Phe Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala Ser Ala Gly Gln Asn
200 205 210
Lys Met Asn Phe Ser Thr Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Ala Pro
215 220 225
Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Gly Thr Ala Phe Ser
230 235 240 245
Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Ser Ala Gln
250 255 260
Gln Thr Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser Gly Thr Gly Pro Ile
265 270 275
Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Gly Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala
280 285 290
Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Gly Asn Phe
295 300 305
Pro Gly Ser Phe Gly Ser Asn Tyr Thr Thr Ile Met Ser Asp Thr Thr
310 315 320 325
Asn Asn Leu Phe Glu Gly Val Glu Val Tyr Lys Leu Gln Gly Gln Asn
330 335 340
Lys Tyr Leu Met Leu Val Glu Ala Ile Gly Ser Gln Gly Arg Tyr Phe
345 350 355
Arg Ser Phe Thr Ala Thr Ser Leu Asp Gly Thr Trp Thr Pro Gln Ala
360 365 370
Ala Thr Glu Gly Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr
375 380 385
Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val Arg Ser Asn Pro Asp
390 395 400 405
Gln Thr Lys Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly
410 415 420
Arg Ser Pro Asn Ser Gly Gly Asp Tyr Gly Leu Leu Pro Tyr Arg Pro
425 430 435
Gly Val Leu Thr Leu Gln Arg
440
<210> 63
<211> 444
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有His标签的成熟序列
<400> 63
His His His His His His Pro Arg Ala Gly Ala Ala Ala Gly Cys Arg
1 5 10 15
Val Asp Tyr Thr Val Ser Asn Gln Trp Pro Gly Gly Phe Gly Ala Asn
20 25 30
Val Asn Ile Thr Asn Leu Gly Asp Pro Ile Asn Gly Trp Arg Leu Thr
35 40 45
Trp Ser Phe Pro Ala Gly Gln Thr Ile Thr Gln Leu Trp Ser Gly Ser
50 55 60
His Thr Gln Ser Gly Ser Gln Val Thr Val Thr Asn Val Asp Tyr Asn
65 70 75 80
Ala Gly Leu Pro Thr Gly Gly Ser Ala Asn Phe Gly Phe Asn Gly Ser
85 90 95
Phe Asn Gly Ser Asn Pro Ala Pro Thr Ser Phe Ala Leu Asn Gly Val
100 105 110
Thr Cys Thr Gly Gly Val Thr Ala Ser Pro Ser Pro Ser Thr Ser Pro
115 120 125
Ser Thr Gly Pro Ser Pro Ser Ser Thr Pro Thr Ser Pro Gly Thr Cys
130 135 140
Ala Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Thr Ser Thr Gly Pro Leu Ala Asn
145 150 155 160
Pro Lys Ser Gly Trp Val Ser Leu Lys Asp Phe Thr Asn Val Val His
165 170 175
Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Thr Thr His Asp Thr Gly Thr Ser
180 185 190
Trp Gly Ser Met Asn Phe Ser Pro Phe Thr Asn Trp Ser Asp Met Ala
195 200 205
Ser Ala Gly Gln Asn Lys Met Asn Phe Ser Thr Val Ala Pro Thr Leu
210 215 220
Phe Tyr Phe Ala Pro Lys Asn Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly
225 230 235 240
Gly Thr Ala Phe Ser Tyr Arg Thr Ser Ser Asp Pro Thr Asn Ala Asn
245 250 255
Gly Trp Ser Ala Gln Gln Thr Leu Phe Thr Gly Ser Ile Ser Gly Ser
260 265 270
Gly Thr Gly Pro Ile Asp Gln Thr Leu Ile Gly Asp Gly Thr Asn Met
275 280 285
Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met
290 295 300
Pro Ile Gly Asn Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Asn Tyr Thr Thr Ile
305 310 315 320
Met Ser Asp Thr Thr Asn Asn Leu Phe Glu Gly Val Glu Val Tyr Lys
325 330 335
Leu Gln Gly Gln Asn Lys Tyr Leu Met Leu Val Glu Ala Ile Gly Ser
340 345 350
Gln Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Thr Ser Leu Asp Gly Thr
355 360 365
Trp Thr Pro Gln Ala Ala Thr Glu Gly Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala
370 375 380
Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val
385 390 395 400
Arg Ser Asn Pro Asp Gln Thr Lys Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln
405 410 415
Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Ser Pro Asn Ser Gly Gly Asp Tyr Gly Leu
420 425 430
Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Val Leu Thr Leu Gln Arg
435 440
<210> 64
<211> 1328
<212> DNA
<213> 梭孢端梗霉
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(330)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(57)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (58)..(1325)
<220>
<221> CDS
<222> (403)..(655)
<220>
<221> CDS
<222> (795)..(948)
<220>
<221> CDS
<222> (1100)..(1325)
<400> 64
atg aag ctt ctc aac tcg ggt atc agc ctg ctg gca ttg gca gtg ggc 48
Met Lys Leu Leu Asn Ser Gly Ile Ser Leu Leu Ala Leu Ala Val Gly
-15 -10 -5
gtc acg gcg cag tgc ccc ttg ccc tcc acc tac cgc tgg aaa tcg aca 96
Val Thr Ala Gln Cys Pro Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Lys Ser Thr
-1 1 5 10
ggg gtg ctt gcc aac cca aag tcc gga tgg gtg tcc ctc aaa gac ttt 144
Gly Val Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Val Ser Leu Lys Asp Phe
15 20 25
acc gtc gcg ccg tac aac ggc aag cat ctc gtc tac gct acg acc cac 192
Thr Val Ala Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Thr Thr His
30 35 40 45
gac acg gga tcg agc tgg ggc tcc atg aac ttc ggc ctg ttc agc agc 240
Asp Thr Gly Ser Ser Trp Gly Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Ser
50 55 60
tgg tcc gac atg gcc acg gcc ccc cag aat ggg atg aac cag ggc act 288
Trp Ser Asp Met Ala Thr Ala Pro Gln Asn Gly Met Asn Gln Gly Thr
65 70 75
gtt gcg ccc acc ctg ttc tac ttc aag ccg aag gat atc tgg 330
Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Lys Pro Lys Asp Ile Trp
80 85 90
gtacgtaatt gcatcccaga cttctttcgt ttcccttcac gatgccatac tcacgagatt 390
ccccgtctca ag gtg ctc gcg tat caa tgg ggc ccg acg acc ttc tcc tac 441
Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Pro Thr Thr Phe Ser Tyr
95 100
aag aca tca aag gac ccc acc aat gcg aac ggc tgg ggg tcg gcg cag 489
Lys Thr Ser Lys Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Gly Ser Ala Gln
105 110 115 120
acc ctc ttc tcg ggg aaa atc tcg ggc tct tcc acc ggc gcc att gac 537
Thr Leu Phe Ser Gly Lys Ile Ser Gly Ser Ser Thr Gly Ala Ile Asp
125 130 135
cag acc gtc att ggc gat gac acc aac atg tac ctc ttc ttc gcc ggc 585
Gln Thr Val Ile Gly Asp Asp Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly
140 145 150
gac aac ggc aag atc tac cgc gcc agc atg ccc atc gac agg ttc ccc 633
Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Asp Arg Phe Pro
155 160 165
ggc agc ttc ggc gac cag tac c gtacgtccaa tccgagttgt tcattcccct 685
Gly Ser Phe Gly Asp Gln Tyr
170 175
ttctaactgt ctcgtgtgcc ctgggagtcg tgtggcctct tgagaggctt gtttgccact 745
ctcgagacac ccacaaaata ggcatccaat gactgacata gctgggcag ag acc atc 802
Gln Thr Ile
ctg agc gat agc acc aac aac ttg ttc gag gcc gtc cag gtc tac aag 850
Leu Ser Asp Ser Thr Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Lys
180 185 190
ctc cag ggc ttg aac aag tat ctg atg att gtc gag gcc att ggc agc 898
Leu Gln Gly Leu Asn Lys Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser
195 200 205 210
aac ggg cgc tac ttc cgc tct ttc acg gct gac agg ttg gac ggg cag 946
Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Asp Arg Leu Asp Gly Gln
215 220 225
tg gtacgtctat ccgctctcct ttccccccct tttaagcgac tctcatagtc 998
Trp
tcggcgtcac cttccccgca aggcgactcc gctcctccca aaccgcccct cctcagcaac 1058
ccaagtaccg taagggtttt ctgactttaa ttcttgcaca g g acc ccc cag gca 1112
Thr Pro Gln Ala
230
gcc acc gag agc aat cct ttc gcg ggc aag gca aac agc gga gcg acc 1160
Ala Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr
235 240 245
tgg acc aac gat atc agc cac ggc gag ctg atc cgc gtg agc gcc gac 1208
Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Glu Leu Ile Arg Val Ser Ala Asp
250 255 260
cag acc ttt aca gtc gac ccg tgc aac ctg cag ctg ctc tac cag ggc 1256
Gln Thr Phe Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly
265 270 275
cgc tcc ccc agc tcg ggc ggc gac tac ggg aag ctg ccg tac cgg ccg 1304
Arg Ser Pro Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Gly Lys Leu Pro Tyr Arg Pro
280 285 290 295
ggg ctg ttg acg ctg cag cgt taa 1328
Gly Leu Leu Thr Leu Gln Arg
300
<210> 65
<211> 321
<212> PRT
<213> 梭孢端梗霉
<400> 65
Met Lys Leu Leu Asn Ser Gly Ile Ser Leu Leu Ala Leu Ala Val Gly
-15 -10 -5
Val Thr Ala Gln Cys Pro Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Lys Ser Thr
-1 1 5 10
Gly Val Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Val Ser Leu Lys Asp Phe
15 20 25
Thr Val Ala Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Thr Thr His
30 35 40 45
Asp Thr Gly Ser Ser Trp Gly Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Ser
50 55 60
Trp Ser Asp Met Ala Thr Ala Pro Gln Asn Gly Met Asn Gln Gly Thr
65 70 75
Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Lys Pro Lys Asp Ile Trp Val Leu
80 85 90
Ala Tyr Gln Trp Gly Pro Thr Thr Phe Ser Tyr Lys Thr Ser Lys Asp
95 100 105
Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Gly Ser Ala Gln Thr Leu Phe Ser Gly
110 115 120 125
Lys Ile Ser Gly Ser Ser Thr Gly Ala Ile Asp Gln Thr Val Ile Gly
130 135 140
Asp Asp Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile
145 150 155
Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Asp Arg Phe Pro Gly Ser Phe Gly Asp
160 165 170
Gln Tyr Gln Thr Ile Leu Ser Asp Ser Thr Asn Asn Leu Phe Glu Ala
175 180 185
Val Gln Val Tyr Lys Leu Gln Gly Leu Asn Lys Tyr Leu Met Ile Val
190 195 200 205
Glu Ala Ile Gly Ser Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Asp
210 215 220
Arg Leu Asp Gly Gln Trp Thr Pro Gln Ala Ala Thr Glu Ser Asn Pro
225 230 235
Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser
240 245 250
His Gly Glu Leu Ile Arg Val Ser Ala Asp Gln Thr Phe Thr Val Asp
255 260 265
Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Ser Pro Ser Ser Gly
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Gly Asp Tyr Gly Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Gln
290 295 300
Arg
<210> 66
<211> 302
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<213> 梭孢端梗霉
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Gln Cys Pro Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Lys Ser Thr Gly Val Leu
1 5 10 15
Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Val Ser Leu Lys Asp Phe Thr Val Ala
20 25 30
Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Thr Thr His Asp Thr Gly
35 40 45
Ser Ser Trp Gly Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Ser Trp Ser Asp
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Met Ala Thr Ala Pro Gln Asn Gly Met Asn Gln Gly Thr Val Ala Pro
65 70 75 80
Thr Leu Phe Tyr Phe Lys Pro Lys Asp Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln
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100 105 110
Ala Asn Gly Trp Gly Ser Ala Gln Thr Leu Phe Ser Gly Lys Ile Ser
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Gly Ser Ser Thr Gly Ala Ile Asp Gln Thr Val Ile Gly Asp Asp Thr
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Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala
145 150 155 160
Ser Met Pro Ile Asp Arg Phe Pro Gly Ser Phe Gly Asp Gln Tyr Gln
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Thr Ile Leu Ser Asp Ser Thr Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val
180 185 190
Tyr Lys Leu Gln Gly Leu Asn Lys Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile
195 200 205
Gly Ser Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Asp Arg Leu Asp
210 215 220
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Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Glu
245 250 255
Leu Ile Arg Val Ser Ala Asp Gln Thr Phe Thr Val Asp Pro Cys Asn
260 265 270
Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Ser Pro Ser Ser Gly Gly Asp Tyr
275 280 285
Gly Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Gln Arg
290 295 300
<210> 67
<211> 1355
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 表达构建体
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(330)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(57)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (58)..(1352)
<220>
<221> CDS
<222> (403)..(655)
<220>
<221> CDS
<222> (795)..(948)
<220>
<221> CDS
<222> (1100)..(1352)
<400> 67
atg aag ctt ctc aac tcg ggt atc agc ctg ctg gca ttg gca gtg ggc 48
Met Lys Leu Leu Asn Ser Gly Ile Ser Leu Leu Ala Leu Ala Val Gly
-15 -10 -5
gtc acg gcg cag tgc ccc ttg ccc tcc acc tac cgc tgg aaa tcg aca 96
Val Thr Ala Gln Cys Pro Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Lys Ser Thr
-1 1 5 10
ggg gtg ctt gcc aac cca aag tcc gga tgg gtg tcc ctc aaa gac ttt 144
Gly Val Leu Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Val Ser Leu Lys Asp Phe
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acc gtc gcg ccg tac aac ggc aag cat ctc gtc tac gct acg acc cac 192
Thr Val Ala Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Thr Thr His
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gac acg gga tcg agc tgg ggc tcc atg aac ttc ggc ctg ttc agc agc 240
Asp Thr Gly Ser Ser Trp Gly Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Ser
50 55 60
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Trp Ser Asp Met Ala Thr Ala Pro Gln Asn Gly Met Asn Gln Gly Thr
65 70 75
gtt gcg ccc acc ctg ttc tac ttc aag ccg aag gat atc tgg 330
Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Lys Pro Lys Asp Ile Trp
80 85 90
gtacgtaatt gcatcccaga cttctttcgt ttcccttcac gatgccatac tcacgagatt 390
ccccgtctca ag gtg ctc gcg tat caa tgg ggc ccg acg acc ttc tcc tac 441
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aag aca tca aag gac ccc acc aat gcg aac ggc tgg ggg tcg gcg cag 489
Lys Thr Ser Lys Asp Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Gly Ser Ala Gln
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215 220 225
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Trp
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230
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Gly Leu Leu Thr Leu Gln Arg Thr Arg Ala His His His His His His
300 305 310
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<211> 330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 68
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Thr Val Ala Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Thr Thr His
30 35 40 45
Asp Thr Gly Ser Ser Trp Gly Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Ser
50 55 60
Trp Ser Asp Met Ala Thr Ala Pro Gln Asn Gly Met Asn Gln Gly Thr
65 70 75
Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Lys Pro Lys Asp Ile Trp Val Leu
80 85 90
Ala Tyr Gln Trp Gly Pro Thr Thr Phe Ser Tyr Lys Thr Ser Lys Asp
95 100 105
Pro Thr Asn Ala Asn Gly Trp Gly Ser Ala Gln Thr Leu Phe Ser Gly
110 115 120 125
Lys Ile Ser Gly Ser Ser Thr Gly Ala Ile Asp Gln Thr Val Ile Gly
130 135 140
Asp Asp Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile
145 150 155
Tyr Arg Ala Ser Met Pro Ile Asp Arg Phe Pro Gly Ser Phe Gly Asp
160 165 170
Gln Tyr Gln Thr Ile Leu Ser Asp Ser Thr Asn Asn Leu Phe Glu Ala
175 180 185
Val Gln Val Tyr Lys Leu Gln Gly Leu Asn Lys Tyr Leu Met Ile Val
190 195 200 205
Glu Ala Ile Gly Ser Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Asp
210 215 220
Arg Leu Asp Gly Gln Trp Thr Pro Gln Ala Ala Thr Glu Ser Asn Pro
225 230 235
Phe Ala Gly Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser
240 245 250
His Gly Glu Leu Ile Arg Val Ser Ala Asp Gln Thr Phe Thr Val Asp
255 260 265
Pro Cys Asn Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Ser Pro Ser Ser Gly
270 275 280 285
Gly Asp Tyr Gly Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Gln
290 295 300
Arg Thr Arg Ala His His His His His His
305 310
<210> 69
<211> 311
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有His标签的成熟序列
<400> 69
Gln Cys Pro Leu Pro Ser Thr Tyr Arg Trp Lys Ser Thr Gly Val Leu
1 5 10 15
Ala Asn Pro Lys Ser Gly Trp Val Ser Leu Lys Asp Phe Thr Val Ala
20 25 30
Pro Tyr Asn Gly Lys His Leu Val Tyr Ala Thr Thr His Asp Thr Gly
35 40 45
Ser Ser Trp Gly Ser Met Asn Phe Gly Leu Phe Ser Ser Trp Ser Asp
50 55 60
Met Ala Thr Ala Pro Gln Asn Gly Met Asn Gln Gly Thr Val Ala Pro
65 70 75 80
Thr Leu Phe Tyr Phe Lys Pro Lys Asp Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln
85 90 95
Trp Gly Pro Thr Thr Phe Ser Tyr Lys Thr Ser Lys Asp Pro Thr Asn
100 105 110
Ala Asn Gly Trp Gly Ser Ala Gln Thr Leu Phe Ser Gly Lys Ile Ser
115 120 125
Gly Ser Ser Thr Gly Ala Ile Asp Gln Thr Val Ile Gly Asp Asp Thr
130 135 140
Asn Met Tyr Leu Phe Phe Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ala
145 150 155 160
Ser Met Pro Ile Asp Arg Phe Pro Gly Ser Phe Gly Asp Gln Tyr Gln
165 170 175
Thr Ile Leu Ser Asp Ser Thr Asn Asn Leu Phe Glu Ala Val Gln Val
180 185 190
Tyr Lys Leu Gln Gly Leu Asn Lys Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile
195 200 205
Gly Ser Asn Gly Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Asp Arg Leu Asp
210 215 220
Gly Gln Trp Thr Pro Gln Ala Ala Thr Glu Ser Asn Pro Phe Ala Gly
225 230 235 240
Lys Ala Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asn Asp Ile Ser His Gly Glu
245 250 255
Leu Ile Arg Val Ser Ala Asp Gln Thr Phe Thr Val Asp Pro Cys Asn
260 265 270
Leu Gln Leu Leu Tyr Gln Gly Arg Ser Pro Ser Ser Gly Gly Asp Tyr
275 280 285
Gly Lys Leu Pro Tyr Arg Pro Gly Leu Leu Thr Leu Gln Arg Thr Arg
290 295 300
Ala His His His His His His
305 310
<210> 70
<211> 384
<212> PRT
<213> 棘孢曲霉
<400> 70
Val Gly Leu Asp Gln Ala Ala Val Ala Lys Gly Leu Gln Tyr Phe Gly
1 5 10 15
Thr Ala Thr Asp Asn Pro Glu Leu Thr Asp Ile Pro Tyr Val Thr Gln
20 25 30
Leu Asn Asn Thr Ala Asp Phe Gly Gln Ile Thr Pro Gly Asn Ser Met
35 40 45
Lys Trp Asp Ala Thr Glu Pro Ser Gln Gly Thr Phe Thr Phe Thr Lys
50 55 60
Gly Asp Val Ile Ala Asp Leu Ala Glu Gly Asn Gly Gln Tyr Leu Arg
65 70 75 80
Cys His Thr Leu Val Trp Tyr Asn Gln Leu Pro Ser Trp Val Thr Ser
85 90 95
Gly Thr Trp Thr Asn Ala Thr Leu Thr Ala Ala Leu Lys Asn His Ile
100 105 110
Thr Asn Val Val Ser His Tyr Lys Gly Lys Cys Leu His Trp Asp Val
115 120 125
Val Asn Glu Ala Leu Asn Asp Asp Gly Thr Tyr Arg Thr Asn Ile Phe
130 135 140
Tyr Thr Thr Ile Gly Glu Ala Tyr Ile Pro Ile Ala Phe Ala Ala Ala
145 150 155 160
Ala Ala Ala Asp Pro Asp Ala Lys Leu Phe Tyr Asn Asp Tyr Asn Leu
165 170 175
Glu Tyr Gly Gly Ala Lys Ala Ala Ser Ala Arg Ala Ile Val Gln Leu
180 185 190
Val Lys Asn Ala Gly Ala Lys Ile Asp Gly Val Gly Leu Gln Ala His
195 200 205
Phe Ser Val Gly Thr Val Pro Ser Thr Ser Ser Leu Val Ser Val Leu
210 215 220
Gln Ser Phe Thr Ala Leu Gly Val Glu Val Ala Tyr Thr Glu Ala Asp
225 230 235 240
Val Arg Ile Leu Leu Pro Thr Thr Ala Thr Thr Leu Ala Gln Gln Ser
245 250 255
Ser Asp Phe Gln Ala Leu Val Gln Ser Cys Val Gln Thr Thr Gly Cys
260 265 270
Val Gly Phe Thr Ile Trp Asp Trp Thr Asp Lys Tyr Ser Trp Val Pro
275 280 285
Ser Thr Phe Ser Gly Tyr Gly Ala Ala Leu Pro Trp Asp Glu Asn Leu
290 295 300
Val Lys Lys Pro Ala Tyr Asn Gly Leu Leu Ala Gly Met Gly Val Thr
305 310 315 320
Val Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ala Thr Ala Thr Gly Lys Thr
325 330 335
Thr Thr Thr Thr Thr Gly Ala Thr Ser Thr Gly Thr Thr Ala Ala His
340 345 350
Trp Gly Gln Cys Gly Gly Leu Asn Trp Ser Gly Pro Thr Ala Cys Ala
355 360 365
Thr Gly Tyr Thr Cys Thr Tyr Val Asn Asp Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu
370 375 380
<210> 71
<211> 288
<212> PRT
<213> 丙酮丁醇梭杆菌
<400> 71
Ala Met Ser His Ser Lys Phe Val Gly Asn Ile Ile Ala Gly Ser Ile
1 5 10 15
Pro Ser Asn Phe Asp Thr Tyr Trp Asn Gln Val Thr Pro Glu Asn Ala
20 25 30
Thr Lys Trp Gly Ala Ile Glu Tyr Gly Arg Gly Asn Tyr Asn Trp Gly
35 40 45
Ser Ala Asp Leu Ile Tyr Asn Tyr Ala Arg Ser Lys Asn Met Pro Phe
50 55 60
Lys Phe His Asn Leu Val Trp Gly Ser Gln Gln Leu Thr Trp Leu Ser
65 70 75 80
Asn Leu Ser Pro Gln Asp Gln Lys Ser Glu Val Ser Lys Trp Ile Ala
85 90 95
Ala Ala Gly Gln Arg Tyr Ser Gly Ser Ala Phe Val Asp Val Val Asn
100 105 110
Glu Pro Leu His Thr Gln Pro Ser Tyr Lys Asn Ala Leu Gly Gly Asp
115 120 125
Gly Ser Thr Gly Tyr Asp Trp Ile Val Trp Ser Tyr Gln Gln Ala Arg
130 135 140
Lys Ala Phe Pro Asn Ser Lys Leu Leu Ile Asn Glu Tyr Gly Ile Ile
145 150 155 160
Gly Asp Pro Asn Ala Ala Ala Asn Tyr Val Lys Ile Ile Asn Val Leu
165 170 175
Lys Ser Lys Gly Leu Ile Asp Gly Ile Gly Ile Gln Cys His Tyr Phe
180 185 190
Asn Met Asp Asn Val Ser Val Gly Thr Met Asn Tyr Val Leu Asn Met
195 200 205
Leu Ser Asn Thr Gly Leu Pro Ile Tyr Val Ser Glu Leu Asp Met Thr
210 215 220
Gly Asp Asp Ser Thr Gln Leu Ala Arg Tyr Gln Gln Lys Phe Pro Val
225 230 235 240
Leu Tyr Gln Asn Pro Asn Val Lys Gly Ile Thr Leu Trp Gly Tyr Met
245 250 255
Gln Gly Gln Thr Trp Asn Ser Gly Thr Tyr Leu Val Asn Ser Asn Gly
260 265 270
Thr Glu Arg Pro Ala Leu Lys Trp Leu Arg Ser Tyr Leu Ala Ser His
275 280 285
<210> 72
<211> 308
<212> PRT
<213> 棘孢曲霉
<400> 72
Asn Pro Ile Glu Pro Arg Gln Ala Ser Val Ser Ile Asp Ala Lys Phe
1 5 10 15
Lys Ala His Gly Lys Lys Tyr Leu Gly Thr Ile Gly Asp Gln Tyr Thr
20 25 30
Leu Asn Lys Asn Ala Lys Thr Pro Ala Ile Ile Lys Ala Asp Phe Gly
35 40 45
Gln Leu Thr Pro Glu Asn Ser Met Lys Trp Asp Ala Thr Glu Pro Asn
50 55 60
Arg Gly Gln Phe Ser Phe Ser Gly Ser Asp Tyr Leu Val Asn Phe Ala
65 70 75 80
Gln Ser Asn Gly Lys Leu Ile Arg Gly His Thr Leu Val Trp His Ser
85 90 95
Gln Leu Pro Ser Trp Val Gln Ser Ile Ser Asp Lys Asn Thr Leu Ile
100 105 110
Gln Val Met Gln Asn His Ile Thr Thr Val Met Gln Arg Tyr Lys Gly
115 120 125
Lys Val Tyr Ala Trp Asp Val Val Asn Glu Ile Phe Asn Glu Asp Gly
130 135 140
Ser Leu Cys Gln Ser His Phe Tyr Asn Val Ile Gly Glu Asp Tyr Val
145 150 155 160
Arg Ile Ala Phe Glu Thr Ala Arg Ala Val Asp Pro Asn Ala Lys Leu
165 170 175
Tyr Ile Asn Asp Tyr Asn Leu Asp Ser Ala Ser Tyr Pro Lys Leu Thr
180 185 190
Gly Leu Val Asn His Val Lys Lys Trp Val Ala Ala Gly Val Pro Ile
195 200 205
Asp Gly Ile Gly Ser Gln Thr His Leu Ser Ala Gly Ala Gly Ala Ala
210 215 220
Val Ser Gly Ala Leu Asn Ala Leu Ala Gly Ala Gly Thr Lys Glu Val
225 230 235 240
Ala Ile Thr Glu Leu Asp Ile Ala Gly Ala Ser Ser Thr Asp Tyr Val
245 250 255
Asn Val Val Lys Ala Cys Leu Asn Gln Pro Lys Cys Val Gly Ile Thr
260 265 270
Val Trp Gly Ser Ser Asp Pro Asp Ser Trp Arg Ser Ser Ser Ser Pro
275 280 285
Leu Leu Phe Asp Ser Asn Tyr Asn Pro Lys Ala Ala Tyr Thr Ala Ile
290 295 300
Ala Asn Ala Leu
305
<210> 73
<211> 195
<212> PRT
<213> 疏棉状嗜热丝孢菌
<400> 73
Arg Gln Thr Thr Pro Asn Ser Glu Gly Trp His Asp Gly Tyr Tyr Tyr
1 5 10 15
Ser Trp Trp Ser Asp Gly Gly Ala Gln Ala Thr Tyr Thr Asn Leu Glu
20 25 30
Gly Gly Thr Tyr Glu Ile Ser Trp Gly Asp Gly Gly Asn Leu Val Gly
35 40 45
Gly Lys Gly Trp Asn Pro Gly Leu Asn Ala Arg Ala Ile His Phe Glu
50 55 60
Gly Val Tyr Gln Pro Asn Gly Asn Ser Tyr Leu Ala Val Tyr Gly Trp
65 70 75 80
Thr Arg Asn Pro Leu Val Glu Tyr Tyr Ile Val Glu Asn Phe Gly Thr
85 90 95
Tyr Asp Pro Ser Ser Gly Ala Thr Asp Leu Gly Thr Val Glu Cys Asp
100 105 110
Gly Ser Ile Tyr Arg Leu Gly Lys Thr Thr Arg Val Asn Ala Pro Ser
115 120 125
Ile Asp Gly Thr Gln Thr Phe Asp Gln Tyr Trp Ser Val Arg Gln Asp
130 135 140
Lys Arg Thr Ser Gly Thr Val Gln Thr Gly Cys His Phe Asp Ala Trp
145 150 155 160
Ala Arg Ala Gly Leu Asn Val Asn Gly Asp His Tyr Tyr Gln Ile Val
165 170 175
Ala Thr Glu Gly Tyr Phe Ser Ser Gly Tyr Ala Arg Ile Thr Val Ala
180 185 190
Asp Val Gly
195
<210> 74
<211> 203
<212> PRT
<213> 嗜热网团菌
<400> 74
Gln Thr Ser Ile Thr Leu Thr Ser Asn Ala Ser Gly Thr Phe Asp Gly
1 5 10 15
Tyr Tyr Tyr Glu Leu Trp Lys Asp Thr Gly Asn Thr Thr Met Thr Val
20 25 30
Tyr Thr Gln Gly Arg Phe Ser Cys Gln Trp Ser Asn Ile Asn Asn Ala
35 40 45
Leu Phe Arg Thr Gly Lys Lys Tyr Asn Gln Asn Trp Gln Ser Leu Gly
50 55 60
Thr Ile Arg Ile Thr Tyr Ser Ala Thr Tyr Asn Pro Asn Gly Asn Ser
65 70 75 80
Tyr Leu Cys Ile Tyr Gly Trp Ser Thr Asn Pro Leu Val Glu Phe Tyr
85 90 95
Ile Val Glu Ser Trp Gly Asn Trp Arg Pro Pro Gly Ala Thr Ser Leu
100 105 110
Gly Gln Val Thr Ile Asp Gly Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Arg Thr Thr
115 120 125
Arg Val Asn Gln Pro Ser Ile Val Gly Thr Ala Thr Phe Asp Gln Tyr
130 135 140
Trp Ser Val Arg Thr Ser Lys Arg Thr Ser Gly Thr Val Thr Val Thr
145 150 155 160
Asp His Phe Arg Ala Trp Ala Asn Arg Gly Leu Asn Leu Gly Thr Ile
165 170 175
Asp Gln Ile Thr Leu Cys Val Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Ser Ala
180 185 190
Asn Ile Thr Gln Asn Thr Phe Ser Gln Gly Ser
195 200
<210> 75
<211> 182
<212> PRT
<213> 饲料类芽孢杆菌
<400> 75
Thr Asp Tyr Trp Gln Asn Trp Thr Asp Gly Gly Gly Thr Val Asn Ala
1 5 10 15
Val Asn Gly Ser Gly Gly Asn Tyr Ser Val Asn Trp Gln Asn Thr Gly
20 25 30
Asn Phe Val Val Gly Lys Gly Trp Thr Tyr Gly Thr Pro Asn Arg Val
35 40 45
Val Asn Tyr Asn Ala Gly Val Phe Ser Pro Ser Gly Asn Gly Tyr Leu
50 55 60
Thr Phe Tyr Gly Trp Thr Arg Asn Ala Leu Ile Glu Tyr Tyr Val Val
65 70 75 80
Asp Asn Trp Gly Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Thr Tyr Lys Gly Thr Val
85 90 95
Thr Ser Asp Gly Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Thr Thr Met Arg Tyr Asn
100 105 110
Gln Pro Ser Ile Asp Gly Tyr Ser Thr Phe Pro Gln Tyr Trp Ser Val
115 120 125
Arg Gln Ser Lys Arg Pro Ile Gly Val Asn Ser Gln Ile Thr Phe Gln
130 135 140
Asn His Val Asn Ala Trp Ala Ser Lys Gly Met Tyr Leu Gly Asn Ser
145 150 155 160
Trp Ser Tyr Gln Val Met Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Ser
165 170 175
Ser Asn Val Thr Val Trp
180
<210> 76
<211> 633
<212> DNA
<213> 嗜热脂肪土芽孢杆菌
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(630)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(81)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (82)..(633)
<400> 76
atg aag tta aag aag aag atg ctt act cta ctc ctg acg gct tcg atg 48
Met Lys Leu Lys Lys Lys Met Leu Thr Leu Leu Leu Thr Ala Ser Met
-25 -20 -15
agt ttc ggt tta ttt ggg gca acc tca agt gca gca acg gat tat tgg 96
Ser Phe Gly Leu Phe Gly Ala Thr Ser Ser Ala Ala Thr Asp Tyr Trp
-10 -5 -1 1 5
caa tat tgg acg gat ggc ggc ggg atg gtg aat gcg gtt aat ggg ccc 144
Gln Tyr Trp Thr Asp Gly Gly Gly Met Val Asn Ala Val Asn Gly Pro
10 15 20
gga ggc aat tac agt gtt acc tgg caa aat acc ggg aac ttc gtg gtc 192
Gly Gly Asn Tyr Ser Val Thr Trp Gln Asn Thr Gly Asn Phe Val Val
25 30 35
ggc aaa ggc tgg acg gtt gga tcg ccg aat cgg gtg atc aac tac aat 240
Gly Lys Gly Trp Thr Val Gly Ser Pro Asn Arg Val Ile Asn Tyr Asn
40 45 50
gcg ggc atc tgg gaa cct tcg ggg aac ggg tac tta acc ctt tac gga 288
Ala Gly Ile Trp Glu Pro Ser Gly Asn Gly Tyr Leu Thr Leu Tyr Gly
55 60 65
tgg acg agg aac gcg ctg atc gag tat tac gtt gtg gac agc tgg ggg 336
Trp Thr Arg Asn Ala Leu Ile Glu Tyr Tyr Val Val Asp Ser Trp Gly
70 75 80 85
acg tac cgg cct acc ggc aat tac aag gga acg gtg aac agc gac gga 384
Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Asn Tyr Lys Gly Thr Val Asn Ser Asp Gly
90 95 100
gga act tac gat att tat acg acc atg cgt tat aat gca cct tcc att 432
Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Thr Thr Met Arg Tyr Asn Ala Pro Ser Ile
105 110 115
gat ggc acg cag acg ttc caa cag ttc tgg agt gtg cgg caa tcg aaa 480
Asp Gly Thr Gln Thr Phe Gln Gln Phe Trp Ser Val Arg Gln Ser Lys
120 125 130
cga cct acc ggc agc aac gta tcc atc acc ttc agc aat cac gtg aat 528
Arg Pro Thr Gly Ser Asn Val Ser Ile Thr Phe Ser Asn His Val Asn
135 140 145
gcc tgg aga agc aag ggc atg aac ctg ggc agc agc tgg gct tat cag 576
Ala Trp Arg Ser Lys Gly Met Asn Leu Gly Ser Ser Trp Ala Tyr Gln
150 155 160 165
gtt ctg gcg acg gaa ggc tat cag agc agc gga aga tcc aac gtt acg 624
Val Leu Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Arg Ser Asn Val Thr
170 175 180
gtt tgg taa 633
Val Trp
<210> 77
<211> 210
<212> PRT
<213> 嗜热脂肪土芽孢杆菌
<400> 77
Met Lys Leu Lys Lys Lys Met Leu Thr Leu Leu Leu Thr Ala Ser Met
-25 -20 -15
Ser Phe Gly Leu Phe Gly Ala Thr Ser Ser Ala Ala Thr Asp Tyr Trp
-10 -5 -1 1 5
Gln Tyr Trp Thr Asp Gly Gly Gly Met Val Asn Ala Val Asn Gly Pro
10 15 20
Gly Gly Asn Tyr Ser Val Thr Trp Gln Asn Thr Gly Asn Phe Val Val
25 30 35
Gly Lys Gly Trp Thr Val Gly Ser Pro Asn Arg Val Ile Asn Tyr Asn
40 45 50
Ala Gly Ile Trp Glu Pro Ser Gly Asn Gly Tyr Leu Thr Leu Tyr Gly
55 60 65
Trp Thr Arg Asn Ala Leu Ile Glu Tyr Tyr Val Val Asp Ser Trp Gly
70 75 80 85
Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Asn Tyr Lys Gly Thr Val Asn Ser Asp Gly
90 95 100
Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Thr Thr Met Arg Tyr Asn Ala Pro Ser Ile
105 110 115
Asp Gly Thr Gln Thr Phe Gln Gln Phe Trp Ser Val Arg Gln Ser Lys
120 125 130
Arg Pro Thr Gly Ser Asn Val Ser Ile Thr Phe Ser Asn His Val Asn
135 140 145
Ala Trp Arg Ser Lys Gly Met Asn Leu Gly Ser Ser Trp Ala Tyr Gln
150 155 160 165
Val Leu Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Arg Ser Asn Val Thr
170 175 180
Val Trp
<210> 78
<211> 183
<212> PRT
<213> 嗜热脂肪土芽孢杆菌
<400> 78
Ala Thr Asp Tyr Trp Gln Tyr Trp Thr Asp Gly Gly Gly Met Val Asn
1 5 10 15
Ala Val Asn Gly Pro Gly Gly Asn Tyr Ser Val Thr Trp Gln Asn Thr
20 25 30
Gly Asn Phe Val Val Gly Lys Gly Trp Thr Val Gly Ser Pro Asn Arg
35 40 45
Val Ile Asn Tyr Asn Ala Gly Ile Trp Glu Pro Ser Gly Asn Gly Tyr
50 55 60
Leu Thr Leu Tyr Gly Trp Thr Arg Asn Ala Leu Ile Glu Tyr Tyr Val
65 70 75 80
Val Asp Ser Trp Gly Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Asn Tyr Lys Gly Thr
85 90 95
Val Asn Ser Asp Gly Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Thr Thr Met Arg Tyr
100 105 110
Asn Ala Pro Ser Ile Asp Gly Thr Gln Thr Phe Gln Gln Phe Trp Ser
115 120 125
Val Arg Gln Ser Lys Arg Pro Thr Gly Ser Asn Val Ser Ile Thr Phe
130 135 140
Ser Asn His Val Asn Ala Trp Arg Ser Lys Gly Met Asn Leu Gly Ser
145 150 155 160
Ser Trp Ala Tyr Gln Val Leu Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly
165 170 175
Arg Ser Asn Val Thr Val Trp
180
<210> 79
<211> 627
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(624)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(81)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (82)..(624)
<400> 79
atg aag aaa ccg ttg ggg aaa att gtc gca agc acc gca cta ctc att 48
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
-25 -20 -15
tct gtt gct ttt agt tca tcg atc gca tcg gct gac tat tgg caa tac 96
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala Asp Tyr Trp Gln Tyr
-10 -5 -1 1 5
tgg aca gat ggt ggc ggt atg gtt aac gct gtt aac ggt cct gga ggc 144
Trp Thr Asp Gly Gly Gly Met Val Asn Ala Val Asn Gly Pro Gly Gly
10 15 20
aac tat tct gtt act tgg cag aac aca ggc aac ttc gtt gtt ggc aaa 192
Asn Tyr Ser Val Thr Trp Gln Asn Thr Gly Asn Phe Val Val Gly Lys
25 30 35
gga tgg acg gtt ggt tct cct aac cgc gtt atc aac tac aac gct ggc 240
Gly Trp Thr Val Gly Ser Pro Asn Arg Val Ile Asn Tyr Asn Ala Gly
40 45 50
atc tgg gag cct tct ggc aac ggt tac ctt acg ctt tac ggc tgg aca 288
Ile Trp Glu Pro Ser Gly Asn Gly Tyr Leu Thr Leu Tyr Gly Trp Thr
55 60 65
cgc aac gct ctt atc gag tac tat gtt gtt gac tct tgg ggc act tat 336
Arg Asn Ala Leu Ile Glu Tyr Tyr Val Val Asp Ser Trp Gly Thr Tyr
70 75 80 85
cgc cct acg ggc aac tac aaa ggc acg gta aac tct gat ggt ggc acg 384
Arg Pro Thr Gly Asn Tyr Lys Gly Thr Val Asn Ser Asp Gly Gly Thr
90 95 100
tac gac atc tat aca aca atg cgc tac aac gct cct tct atc gac ggc 432
Tyr Asp Ile Tyr Thr Thr Met Arg Tyr Asn Ala Pro Ser Ile Asp Gly
105 110 115
act cag act ttt caa cag ttt tgg tca gtt cgc caa tct aaa cgc cct 480
Thr Gln Thr Phe Gln Gln Phe Trp Ser Val Arg Gln Ser Lys Arg Pro
120 125 130
aca ggc tct aac gtt tct atc aca ttc tct aac cat gtt aac gct tgg 528
Thr Gly Ser Asn Val Ser Ile Thr Phe Ser Asn His Val Asn Ala Trp
135 140 145
cgc tct aaa ggc atg aac ctt ggc agc tca tgg gct tat caa gta ctt 576
Arg Ser Lys Gly Met Asn Leu Gly Ser Ser Trp Ala Tyr Gln Val Leu
150 155 160 165
gca act gag ggc tac caa tct tct gga cgc tct aac gtt aca gta tgg 624
Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Arg Ser Asn Val Thr Val Trp
170 175 180
taa 627
<210> 80
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 80
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
-25 -20 -15
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala Asp Tyr Trp Gln Tyr
-10 -5 -1 1 5
Trp Thr Asp Gly Gly Gly Met Val Asn Ala Val Asn Gly Pro Gly Gly
10 15 20
Asn Tyr Ser Val Thr Trp Gln Asn Thr Gly Asn Phe Val Val Gly Lys
25 30 35
Gly Trp Thr Val Gly Ser Pro Asn Arg Val Ile Asn Tyr Asn Ala Gly
40 45 50
Ile Trp Glu Pro Ser Gly Asn Gly Tyr Leu Thr Leu Tyr Gly Trp Thr
55 60 65
Arg Asn Ala Leu Ile Glu Tyr Tyr Val Val Asp Ser Trp Gly Thr Tyr
70 75 80 85
Arg Pro Thr Gly Asn Tyr Lys Gly Thr Val Asn Ser Asp Gly Gly Thr
90 95 100
Tyr Asp Ile Tyr Thr Thr Met Arg Tyr Asn Ala Pro Ser Ile Asp Gly
105 110 115
Thr Gln Thr Phe Gln Gln Phe Trp Ser Val Arg Gln Ser Lys Arg Pro
120 125 130
Thr Gly Ser Asn Val Ser Ile Thr Phe Ser Asn His Val Asn Ala Trp
135 140 145
Arg Ser Lys Gly Met Asn Leu Gly Ser Ser Trp Ala Tyr Gln Val Leu
150 155 160 165
Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Arg Ser Asn Val Thr Val Trp
170 175 180
<210> 81
<211> 181
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 成熟序列
<400> 81
Asp Tyr Trp Gln Tyr Trp Thr Asp Gly Gly Gly Met Val Asn Ala Val
1 5 10 15
Asn Gly Pro Gly Gly Asn Tyr Ser Val Thr Trp Gln Asn Thr Gly Asn
20 25 30
Phe Val Val Gly Lys Gly Trp Thr Val Gly Ser Pro Asn Arg Val Ile
35 40 45
Asn Tyr Asn Ala Gly Ile Trp Glu Pro Ser Gly Asn Gly Tyr Leu Thr
50 55 60
Leu Tyr Gly Trp Thr Arg Asn Ala Leu Ile Glu Tyr Tyr Val Val Asp
65 70 75 80
Ser Trp Gly Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Asn Tyr Lys Gly Thr Val Asn
85 90 95
Ser Asp Gly Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Thr Thr Met Arg Tyr Asn Ala
100 105 110
Pro Ser Ile Asp Gly Thr Gln Thr Phe Gln Gln Phe Trp Ser Val Arg
115 120 125
Gln Ser Lys Arg Pro Thr Gly Ser Asn Val Ser Ile Thr Phe Ser Asn
130 135 140
His Val Asn Ala Trp Arg Ser Lys Gly Met Asn Leu Gly Ser Ser Trp
145 150 155 160
Ala Tyr Gln Val Leu Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Arg Ser
165 170 175
Asn Val Thr Val Trp
180
<210> 82
<211> 1026
<212> DNA
<213> 北疆链霉菌
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1023)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(126)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (127)..(1023)
<400> 82
atg agc gca ccc gtg cca ctg ccc cgc aga cgc aga ccc ggc cgc ttc 48
Met Ser Ala Pro Val Pro Leu Pro Arg Arg Arg Arg Pro Gly Arg Phe
-40 -35 -30
atg acc ctg ctg aga agc tcc tgg gcg atc gcc ctg gcc gcg gtc gcc 96
Met Thr Leu Leu Arg Ser Ser Trp Ala Ile Ala Leu Ala Ala Val Ala
-25 -20 -15
gtg ctg ctg ctg ccc aac gcc gcc agc gcc gac acc gtc gtc aac tcg 144
Val Leu Leu Leu Pro Asn Ala Ala Ser Ala Asp Thr Val Val Asn Ser
-10 -5 -1 1 5
aac cag acc ggc acc aac aac ggt tac tac tac tcg cac tgg agc gat 192
Asn Gln Thr Gly Thr Asn Asn Gly Tyr Tyr Tyr Ser His Trp Ser Asp
10 15 20
ggc ggc ggc tcg gtg tcg atg acg ctg ggc tcg ggc ggc aac tac ggc 240
Gly Gly Gly Ser Val Ser Met Thr Leu Gly Ser Gly Gly Asn Tyr Gly
25 30 35
tac cag tgg agc aac gtc gga aac ttc gtc ggc ggc aag ggg tgg agc 288
Tyr Gln Trp Ser Asn Val Gly Asn Phe Val Gly Gly Lys Gly Trp Ser
40 45 50
acc ggc gga cgc aag tcc gtg aac tac tcc ggc agt ttc aac ccg tcg 336
Thr Gly Gly Arg Lys Ser Val Asn Tyr Ser Gly Ser Phe Asn Pro Ser
55 60 65 70
ggc aac gcc tac ctc gcg ctc tac ggc tgg acc acc aac ccg ctg gtc 384
Gly Asn Ala Tyr Leu Ala Leu Tyr Gly Trp Thr Thr Asn Pro Leu Val
75 80 85
gag tac tac gtc gtc gag aac ttc ggc acg tac cgc ccc acc ggc acc 432
Glu Tyr Tyr Val Val Glu Asn Phe Gly Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Thr
90 95 100
ttc aag ggc acg gtc acc agc gac gga ggc acc tac gac atc tat gag 480
Phe Lys Gly Thr Val Thr Ser Asp Gly Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Glu
105 110 115
acg acc cgg gtg aac cag ccc tcg atc gag ggc acc aag acc ttc aag 528
Thr Thr Arg Val Asn Gln Pro Ser Ile Glu Gly Thr Lys Thr Phe Lys
120 125 130
cag tac tgg agc gtc cgc cag tcg aag cgg acg ggg ggc acc atc acc 576
Gln Tyr Trp Ser Val Arg Gln Ser Lys Arg Thr Gly Gly Thr Ile Thr
135 140 145 150
acg ggc aac cac ttc gac gcc tgg tcg agc cac ggc atg agc atg ggt 624
Thr Gly Asn His Phe Asp Ala Trp Ser Ser His Gly Met Ser Met Gly
155 160 165
tcc ttc aac tac atg atc atg gcg acc gag ggc tac cag agc agc ggc 672
Ser Phe Asn Tyr Met Ile Met Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly
170 175 180
agc tcc aac atc acc gtc agc gag ggc agt tcc ggt ggc ggg acg ggc 720
Ser Ser Asn Ile Thr Val Ser Glu Gly Ser Ser Gly Gly Gly Thr Gly
185 190 195
ggt ggc ggc acg ggc ggc ggt acg ggc ggc ggc ggc tcc ggc ggc tgc 768
Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Cys
200 205 210
acc gcg acg ctt tcc gcg gga gac aag tgg agc gac cgc tac aac ctg 816
Thr Ala Thr Leu Ser Ala Gly Asp Lys Trp Ser Asp Arg Tyr Asn Leu
215 220 225 230
aac gtc tcc gtc tcc ggc gcc ggc aac tgg acc gtc acg atg aag gtc 864
Asn Val Ser Val Ser Gly Ala Gly Asn Trp Thr Val Thr Met Lys Val
235 240 245
ccc tcg ccc gag aag gtg ctg tcc acc tgg aac gtg agc gcc gcc tac 912
Pro Ser Pro Glu Lys Val Leu Ser Thr Trp Asn Val Ser Ala Ala Tyr
250 255 260
ccg gac agc cag acc ctc gtg gcc aag tcc aac ggc agc ggc agc aac 960
Pro Asp Ser Gln Thr Leu Val Ala Lys Ser Asn Gly Ser Gly Ser Asn
265 270 275
tgg ggg gcg acc atc cag acc aac ggc tcc tgg acg tgg ccc acg gtc 1008
Trp Gly Ala Thr Ile Gln Thr Asn Gly Ser Trp Thr Trp Pro Thr Val
280 285 290
acc tgc agc gcc ggc tga 1026
Thr Cys Ser Ala Gly
295
<210> 83
<211> 341
<212> PRT
<213> 北疆链霉菌
<400> 83
Met Ser Ala Pro Val Pro Leu Pro Arg Arg Arg Arg Pro Gly Arg Phe
-40 -35 -30
Met Thr Leu Leu Arg Ser Ser Trp Ala Ile Ala Leu Ala Ala Val Ala
-25 -20 -15
Val Leu Leu Leu Pro Asn Ala Ala Ser Ala Asp Thr Val Val Asn Ser
-10 -5 -1 1 5
Asn Gln Thr Gly Thr Asn Asn Gly Tyr Tyr Tyr Ser His Trp Ser Asp
10 15 20
Gly Gly Gly Ser Val Ser Met Thr Leu Gly Ser Gly Gly Asn Tyr Gly
25 30 35
Tyr Gln Trp Ser Asn Val Gly Asn Phe Val Gly Gly Lys Gly Trp Ser
40 45 50
Thr Gly Gly Arg Lys Ser Val Asn Tyr Ser Gly Ser Phe Asn Pro Ser
55 60 65 70
Gly Asn Ala Tyr Leu Ala Leu Tyr Gly Trp Thr Thr Asn Pro Leu Val
75 80 85
Glu Tyr Tyr Val Val Glu Asn Phe Gly Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Thr
90 95 100
Phe Lys Gly Thr Val Thr Ser Asp Gly Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Glu
105 110 115
Thr Thr Arg Val Asn Gln Pro Ser Ile Glu Gly Thr Lys Thr Phe Lys
120 125 130
Gln Tyr Trp Ser Val Arg Gln Ser Lys Arg Thr Gly Gly Thr Ile Thr
135 140 145 150
Thr Gly Asn His Phe Asp Ala Trp Ser Ser His Gly Met Ser Met Gly
155 160 165
Ser Phe Asn Tyr Met Ile Met Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly
170 175 180
Ser Ser Asn Ile Thr Val Ser Glu Gly Ser Ser Gly Gly Gly Thr Gly
185 190 195
Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Cys
200 205 210
Thr Ala Thr Leu Ser Ala Gly Asp Lys Trp Ser Asp Arg Tyr Asn Leu
215 220 225 230
Asn Val Ser Val Ser Gly Ala Gly Asn Trp Thr Val Thr Met Lys Val
235 240 245
Pro Ser Pro Glu Lys Val Leu Ser Thr Trp Asn Val Ser Ala Ala Tyr
250 255 260
Pro Asp Ser Gln Thr Leu Val Ala Lys Ser Asn Gly Ser Gly Ser Asn
265 270 275
Trp Gly Ala Thr Ile Gln Thr Asn Gly Ser Trp Thr Trp Pro Thr Val
280 285 290
Thr Cys Ser Ala Gly
295
<210> 84
<211> 299
<212> PRT
<213> 北疆链霉菌
<400> 84
Asp Thr Val Val Asn Ser Asn Gln Thr Gly Thr Asn Asn Gly Tyr Tyr
1 5 10 15
Tyr Ser His Trp Ser Asp Gly Gly Gly Ser Val Ser Met Thr Leu Gly
20 25 30
Ser Gly Gly Asn Tyr Gly Tyr Gln Trp Ser Asn Val Gly Asn Phe Val
35 40 45
Gly Gly Lys Gly Trp Ser Thr Gly Gly Arg Lys Ser Val Asn Tyr Ser
50 55 60
Gly Ser Phe Asn Pro Ser Gly Asn Ala Tyr Leu Ala Leu Tyr Gly Trp
65 70 75 80
Thr Thr Asn Pro Leu Val Glu Tyr Tyr Val Val Glu Asn Phe Gly Thr
85 90 95
Tyr Arg Pro Thr Gly Thr Phe Lys Gly Thr Val Thr Ser Asp Gly Gly
100 105 110
Thr Tyr Asp Ile Tyr Glu Thr Thr Arg Val Asn Gln Pro Ser Ile Glu
115 120 125
Gly Thr Lys Thr Phe Lys Gln Tyr Trp Ser Val Arg Gln Ser Lys Arg
130 135 140
Thr Gly Gly Thr Ile Thr Thr Gly Asn His Phe Asp Ala Trp Ser Ser
145 150 155 160
His Gly Met Ser Met Gly Ser Phe Asn Tyr Met Ile Met Ala Thr Glu
165 170 175
Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Ser Ser Asn Ile Thr Val Ser Glu Gly Ser
180 185 190
Ser Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Thr Gly Gly
195 200 205
Gly Gly Ser Gly Gly Cys Thr Ala Thr Leu Ser Ala Gly Asp Lys Trp
210 215 220
Ser Asp Arg Tyr Asn Leu Asn Val Ser Val Ser Gly Ala Gly Asn Trp
225 230 235 240
Thr Val Thr Met Lys Val Pro Ser Pro Glu Lys Val Leu Ser Thr Trp
245 250 255
Asn Val Ser Ala Ala Tyr Pro Asp Ser Gln Thr Leu Val Ala Lys Ser
260 265 270
Asn Gly Ser Gly Ser Asn Trp Gly Ala Thr Ile Gln Thr Asn Gly Ser
275 280 285
Trp Thr Trp Pro Thr Val Thr Cys Ser Ala Gly
290 295
<210> 85
<211> 1005
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 表达构建体
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1002)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(81)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (82)..(1002)
<400> 85
atg aag aaa ccg ttg ggg aaa att gtc gca agc acc gca cta ctc att 48
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
-25 -20 -15
tct gtt gct ttt agt tca tcg ata gca tca gca cat cat cat cac cat 96
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala His His His His His
-10 -5 -1 1 5
cat cct agg gac acc gtc gtc aac tcg aac cag acc ggc acc aac aac 144
His Pro Arg Asp Thr Val Val Asn Ser Asn Gln Thr Gly Thr Asn Asn
10 15 20
ggt tac tac tac tcg cac tgg agc gat ggc ggc ggc tcg gtg tcg atg 192
Gly Tyr Tyr Tyr Ser His Trp Ser Asp Gly Gly Gly Ser Val Ser Met
25 30 35
acg ctg ggc tcg ggc ggc aac tac ggc tac cag tgg agc aac gtc gga 240
Thr Leu Gly Ser Gly Gly Asn Tyr Gly Tyr Gln Trp Ser Asn Val Gly
40 45 50
aac ttc gtc ggc ggc aag ggg tgg agc acc ggc gga cgc aag tcc gtg 288
Asn Phe Val Gly Gly Lys Gly Trp Ser Thr Gly Gly Arg Lys Ser Val
55 60 65
aac tac tcc ggc agt ttc aac ccg tcg ggc aac gcc tac ctc gcg ctc 336
Asn Tyr Ser Gly Ser Phe Asn Pro Ser Gly Asn Ala Tyr Leu Ala Leu
70 75 80 85
tac ggc tgg acc acc aac ccg ctg gtc gag tac tac gtc gtc gag aac 384
Tyr Gly Trp Thr Thr Asn Pro Leu Val Glu Tyr Tyr Val Val Glu Asn
90 95 100
ttc ggc acg tac cgc ccc acc ggc acc ttc aag ggc acg gtc acc agc 432
Phe Gly Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Thr Phe Lys Gly Thr Val Thr Ser
105 110 115
gac gga ggc acc tac gac atc tat gag acg acc cgg gtg aac cag ccc 480
Asp Gly Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Glu Thr Thr Arg Val Asn Gln Pro
120 125 130
tcg atc gag ggc acc aag acc ttc aag cag tac tgg agc gtc cgc cag 528
Ser Ile Glu Gly Thr Lys Thr Phe Lys Gln Tyr Trp Ser Val Arg Gln
135 140 145
tcg aag cgg acg ggg ggc acc atc acc acg ggc aac cac ttc gac gcc 576
Ser Lys Arg Thr Gly Gly Thr Ile Thr Thr Gly Asn His Phe Asp Ala
150 155 160 165
tgg tcg agc cac ggc atg agc atg ggt tcc ttc aac tac atg atc atg 624
Trp Ser Ser His Gly Met Ser Met Gly Ser Phe Asn Tyr Met Ile Met
170 175 180
gcg acc gag ggc tac cag agc agc ggc agc tcc aac atc acc gtc agc 672
Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Ser Ser Asn Ile Thr Val Ser
185 190 195
gag ggc agt tcc ggt ggc ggg acg ggc ggt ggc ggc acg ggc ggc ggt 720
Glu Gly Ser Ser Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly
200 205 210
acg ggc ggc ggc ggc tcc ggc ggc tgc acc gcg acg ctt tcc gcg gga 768
Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Cys Thr Ala Thr Leu Ser Ala Gly
215 220 225
gac aag tgg agc gac cgc tac aac ctg aac gtc tcc gtc tcc ggc gcc 816
Asp Lys Trp Ser Asp Arg Tyr Asn Leu Asn Val Ser Val Ser Gly Ala
230 235 240 245
ggc aac tgg acc gtc acg atg aag gtc ccc tcg ccc gag aag gtg ctg 864
Gly Asn Trp Thr Val Thr Met Lys Val Pro Ser Pro Glu Lys Val Leu
250 255 260
tcc acc tgg aac gtg agc gcc gcc tac ccg gac agc cag acc ctc gtg 912
Ser Thr Trp Asn Val Ser Ala Ala Tyr Pro Asp Ser Gln Thr Leu Val
265 270 275
gcc aag tcc aac ggc agc ggc agc aac tgg ggg gcg acc atc cag acc 960
Ala Lys Ser Asn Gly Ser Gly Ser Asn Trp Gly Ala Thr Ile Gln Thr
280 285 290
aac ggc tcc tgg acg tgg ccc acg gtc acc tgc agc gcc ggc tga 1005
Asn Gly Ser Trp Thr Trp Pro Thr Val Thr Cys Ser Ala Gly
295 300 305
<210> 86
<211> 334
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 86
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
-25 -20 -15
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala His His His His His
-10 -5 -1 1 5
His Pro Arg Asp Thr Val Val Asn Ser Asn Gln Thr Gly Thr Asn Asn
10 15 20
Gly Tyr Tyr Tyr Ser His Trp Ser Asp Gly Gly Gly Ser Val Ser Met
25 30 35
Thr Leu Gly Ser Gly Gly Asn Tyr Gly Tyr Gln Trp Ser Asn Val Gly
40 45 50
Asn Phe Val Gly Gly Lys Gly Trp Ser Thr Gly Gly Arg Lys Ser Val
55 60 65
Asn Tyr Ser Gly Ser Phe Asn Pro Ser Gly Asn Ala Tyr Leu Ala Leu
70 75 80 85
Tyr Gly Trp Thr Thr Asn Pro Leu Val Glu Tyr Tyr Val Val Glu Asn
90 95 100
Phe Gly Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Thr Phe Lys Gly Thr Val Thr Ser
105 110 115
Asp Gly Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Glu Thr Thr Arg Val Asn Gln Pro
120 125 130
Ser Ile Glu Gly Thr Lys Thr Phe Lys Gln Tyr Trp Ser Val Arg Gln
135 140 145
Ser Lys Arg Thr Gly Gly Thr Ile Thr Thr Gly Asn His Phe Asp Ala
150 155 160 165
Trp Ser Ser His Gly Met Ser Met Gly Ser Phe Asn Tyr Met Ile Met
170 175 180
Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Ser Ser Asn Ile Thr Val Ser
185 190 195
Glu Gly Ser Ser Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly
200 205 210
Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Cys Thr Ala Thr Leu Ser Ala Gly
215 220 225
Asp Lys Trp Ser Asp Arg Tyr Asn Leu Asn Val Ser Val Ser Gly Ala
230 235 240 245
Gly Asn Trp Thr Val Thr Met Lys Val Pro Ser Pro Glu Lys Val Leu
250 255 260
Ser Thr Trp Asn Val Ser Ala Ala Tyr Pro Asp Ser Gln Thr Leu Val
265 270 275
Ala Lys Ser Asn Gly Ser Gly Ser Asn Trp Gly Ala Thr Ile Gln Thr
280 285 290
Asn Gly Ser Trp Thr Trp Pro Thr Val Thr Cys Ser Ala Gly
295 300 305
<210> 87
<211> 307
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有His标签的成熟序列
<400> 87
His His His His His His Pro Arg Asp Thr Val Val Asn Ser Asn Gln
1 5 10 15
Thr Gly Thr Asn Asn Gly Tyr Tyr Tyr Ser His Trp Ser Asp Gly Gly
20 25 30
Gly Ser Val Ser Met Thr Leu Gly Ser Gly Gly Asn Tyr Gly Tyr Gln
35 40 45
Trp Ser Asn Val Gly Asn Phe Val Gly Gly Lys Gly Trp Ser Thr Gly
50 55 60
Gly Arg Lys Ser Val Asn Tyr Ser Gly Ser Phe Asn Pro Ser Gly Asn
65 70 75 80
Ala Tyr Leu Ala Leu Tyr Gly Trp Thr Thr Asn Pro Leu Val Glu Tyr
85 90 95
Tyr Val Val Glu Asn Phe Gly Thr Tyr Arg Pro Thr Gly Thr Phe Lys
100 105 110
Gly Thr Val Thr Ser Asp Gly Gly Thr Tyr Asp Ile Tyr Glu Thr Thr
115 120 125
Arg Val Asn Gln Pro Ser Ile Glu Gly Thr Lys Thr Phe Lys Gln Tyr
130 135 140
Trp Ser Val Arg Gln Ser Lys Arg Thr Gly Gly Thr Ile Thr Thr Gly
145 150 155 160
Asn His Phe Asp Ala Trp Ser Ser His Gly Met Ser Met Gly Ser Phe
165 170 175
Asn Tyr Met Ile Met Ala Thr Glu Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Ser Ser
180 185 190
Asn Ile Thr Val Ser Glu Gly Ser Ser Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly
195 200 205
Gly Thr Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Cys Thr Ala
210 215 220
Thr Leu Ser Ala Gly Asp Lys Trp Ser Asp Arg Tyr Asn Leu Asn Val
225 230 235 240
Ser Val Ser Gly Ala Gly Asn Trp Thr Val Thr Met Lys Val Pro Ser
245 250 255
Pro Glu Lys Val Leu Ser Thr Trp Asn Val Ser Ala Ala Tyr Pro Asp
260 265 270
Ser Gln Thr Leu Val Ala Lys Ser Asn Gly Ser Gly Ser Asn Trp Gly
275 280 285
Ala Thr Ile Gln Thr Asn Gly Ser Trp Thr Trp Pro Thr Val Thr Cys
290 295 300
Ser Ala Gly
305
<210> 88
<211> 188
<212> PRT
<213> 尖孢镰孢菌
<400> 88
Thr Gln Pro Thr Thr Gly Thr Ser Gly Gly Tyr Tyr Phe Ser Phe Trp
1 5 10 15
Thr Asp Thr Pro Asn Ser Val Thr Tyr Thr Asn Gly Asn Gly Gly Gln
20 25 30
Phe Ser Met Gln Trp Ser Gly Asn Gly Asn His Val Gly Gly Lys Gly
35 40 45
Trp Met Pro Gly Thr Ser Arg Thr Ile Lys Tyr Ser Gly Ser Tyr Asn
50 55 60
Pro Asn Gly Asn Ser Tyr Leu Ala Val Tyr Gly Trp Thr Arg Asn Pro
65 70 75 80
Leu Ile Glu Tyr Tyr Ile Val Glu Asn Phe Gly Thr Tyr Asn Pro Ser
85 90 95
Ser Gly Gly Gln Lys Lys Gly Glu Val Asn Val Asp Gly Ser Val Tyr
100 105 110
Asp Ile Tyr Val Ser Thr Arg Val Asn Ala Pro Ser Ile Asp Gly Asn
115 120 125
Lys Thr Phe Gln Gln Tyr Trp Ser Val Arg Arg Asn Lys Arg Ser Ser
130 135 140
Gly Ser Val Asn Thr Gly Ala His Phe Gln Ala Trp Lys Asn Val Gly
145 150 155 160
Leu Asn Leu Gly Thr His Asp Tyr Gln Ile Leu Ala Val Glu Gly Tyr
165 170 175
Tyr Ser Ser Gly Ser Ala Ser Met Thr Val Ser Gln
180 185
<210> 89
<211> 189
<212> PRT
<213> 棒曲霉
<400> 89
Ala Gly Thr Pro Ser Ser Thr Gly Trp Asn Asn Gly Tyr Tyr Tyr Ser
1 5 10 15
Phe Trp Thr Asp Asn Gly Gly Thr Val Asn Tyr Gln Asn Gly Asn Gly
20 25 30
Gly Ser Tyr Ser Val Gln Trp Lys Asp Thr Gly Asn Phe Val Gly Gly
35 40 45
Lys Gly Trp Asn Pro Gly Ser Ala Arg Thr Ile Asn Tyr Ser Gly Ser
50 55 60
Phe Asn Pro Ser Gly Asn Ala Tyr Leu Thr Val Tyr Gly Trp Thr Thr
65 70 75 80
Asn Pro Leu Val Glu Tyr Tyr Ile Val Glu Asn Tyr Gly Thr Tyr Asn
85 90 95
Pro Gly Asn Gly Gly Thr Tyr Arg Gly Ser Val Tyr Ser Asp Gly Ala
100 105 110
Asn Tyr Asn Ile Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr Asn Ala Pro Ser Ile Glu
115 120 125
Gly Asp Lys Thr Phe Thr Gln Tyr Trp Ser Val Arg Gln Ser Lys Arg
130 135 140
Thr Gly Gly Thr Val Thr Thr Ala Asn His Phe Asn Ala Trp Ala Gln
145 150 155 160
Leu Gly Met Ser Leu Gly Thr His Asn Tyr Gln Ile Val Ala Thr Glu
165 170 175
Gly Tyr Gln Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ile Thr Val Tyr
180 185
<210> 90
<211> 27
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 迟缓芽孢杆菌分泌信号
<400> 90
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
1 5 10 15
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala
20 25
<210> 91
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> His-tag RHHHHHHP
<400> 91
Arg His His His His His His Pro
1 5
<210> 92
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> His-tag HHHHHHPR
<400> 92
His His His His His His Pro Arg
1 5
<210> 93
<211> 558
<212> PRT
<213> 特异腐质霉
<220>
<221> 信号
<222> (1)..(18)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (19)..(558)
<400> 93
Met Leu Gly Leu Lys Val Leu Cys Leu Ser Ala Val Val Gly Thr Ala
-15 -10 -5
Val Ser Val Pro His Ala Gly Asn Leu Pro Arg Gln Ala Ser Thr Phe
-1 1 5 10
Thr Asn Pro Val Leu Trp Glu Asp His Pro Asp Leu Glu Val Phe Arg
15 20 25 30
Val Gly Ser Val Phe Tyr Tyr Ser Ser Ser Thr Phe Ala Tyr Ser Pro
35 40 45
Gly Ala Pro Val Leu Lys Ser Tyr Asp Leu Val His Trp Thr Pro Val
50 55 60
Thr His Ser Val Pro Arg Leu Asn Phe Gly Ser Asn Tyr Asp Leu Pro
65 70 75
Ser Gly Thr Pro Gly Ala Tyr Val Lys Gly Ile Trp Ala Ser Thr Leu
80 85 90
Arg Tyr Arg Arg Ser Asn Asp Arg Phe Tyr Trp Tyr Gly Cys Val Glu
95 100 105 110
Gly Arg Thr Tyr Leu Trp Thr Ser Pro Gly Gly Asn Ala Leu Ala Asn
115 120 125
Asn Gly Glu Val Pro Pro Ser Ala Trp Asn Trp Gln His Thr Ala Thr
130 135 140
Ile Asp Asn Cys Tyr Tyr Asp Ala Gly Leu Leu Ile Asp Asp Asp Asp
145 150 155
Thr Met Tyr Ile Ala Tyr Gly Asn Pro Thr Ile Asn Val Ala Gln Leu
160 165 170
Ser Pro Asp Gly Thr Arg Gln Val Arg Val Gln Gln Arg Val Tyr Ala
175 180 185 190
His Pro Gln Gly Gln Thr Val Glu Gly Ala Arg Met Tyr Lys Ile Arg
195 200 205
Gly Asn Tyr Tyr Ile Leu Val Thr Arg Pro Ala Asp Ala Glu Tyr Val
210 215 220
Leu Arg Ser Thr Thr Gly Ser Pro Phe Gly Pro Tyr Glu Ala Arg Thr
225 230 235
Leu Val Ser Arg Ile Gln Gly Pro Leu Ala Asn Ala Gly Phe Ala His
240 245 250
Gln Gly Gly Ile Val Asp Ala Pro Asp Gly Thr Trp His Tyr Val Ala
255 260 265 270
Phe Met Asp Ala Tyr Pro Gly Gly Arg Ile Pro Val Val Ala Pro Leu
275 280 285
Arg Trp Thr Ala Asp Gly Trp Pro Glu Val Val Thr Asp Ser Gln Gly
290 295 300
Arg Trp Gly Thr Ser Tyr Pro Ile Pro Val Arg Gly Ala Lys Asn Ala
305 310 315
Thr Glu Gly Leu Ala Ser Thr Asp Leu Asp Glu Phe Arg Gly Thr Arg
320 325 330
Phe Ser Glu His Trp Glu Trp Asn His Asn Pro Asp Thr Ser Lys Phe
335 340 345 350
Thr Leu Leu Gly Gly Asn Glu Gly Gly Leu Ile Leu Arg Thr Ala Thr
355 360 365
Val Thr Gly Asp Leu Phe Ala Ala Arg Asn Thr Leu Thr Arg Arg Ile
370 375 380
Ala Gly Pro Lys Ala Ser Gly Ile Phe Arg Leu Asp Val Arg Gly Met
385 390 395
Arg Asp Gly Asp Arg Ala Gly Ala Val Leu Phe Arg Asp Arg Ala Ala
400 405 410
Tyr Ile Gly Val Trp Lys Gln Gly Asn Glu Ala Arg Ile Val Met Val
415 420 425 430
Asp Asp Leu Arg Leu Asn Glu Asp Gly Trp Arg Thr Ala Ser Thr Gly
435 440 445
Arg Val Ala Ala Asn Gly Pro Val Ile Asp Thr Asn Ala Gln Gln Asp
450 455 460
Ile Trp Leu Arg Ile Asp Ala Asp Ile Thr Pro Ala Phe Gly Thr Asn
465 470 475
Thr Glu Arg Thr Thr Thr Phe Tyr Tyr Ser Ile Asp Gly Gly Arg Thr
480 485 490
Tyr Thr Arg Leu Gly Pro Ala Phe Ala Met Thr Asn Ser Trp Arg Tyr
495 500 505 510
Phe Thr Gly Tyr Arg Phe Gly Val Phe Asn Phe Ser Thr Lys Ser Leu
515 520 525
Gly Gly Glu Val Lys Val Lys Gly Phe Lys Met Asn Met Ile
530 535 540
<210> 94
<211> 643
<212> PRT
<213> 大型亚灰树花菌
<220>
<221> 信号
<222> (1)..(16)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (17)..(643)
<400> 94
Met Lys Leu Leu Phe Leu Leu Gly Ala Phe Val Ala Gln Cys Leu Ala
-15 -10 -5 -1
Val Thr Val Thr Val Asn Lys Asn Pro Ser His Thr Val Pro Ser Thr
1 5 10 15
Leu Tyr Gly Leu Met Phe Glu Asp Ile Asn His Ser Gly Asp Gly Gly
20 25 30
Leu Tyr Ala Glu Leu Leu Gln Asn Arg Ala Phe Gln Gln Val Thr Pro
35 40 45
Asn Thr Ala Ala Ala Leu Ala Ala Trp His Pro Ile Ser Asn Ala Lys
50 55 60
Leu Ala Val Ile Gln Asp Pro Ser Pro Val Ser Asn Ala Leu Pro Asn
65 70 75 80
Ser Leu Gln Phe Ser Val Pro Ser Gly Ser Ser Gly Arg Val Gly Phe
85 90 95
Thr Asn Glu Gly Phe Trp Gly Ile Lys Val Asp Ser Thr Trp Thr Tyr
100 105 110
Lys Ala Ser Leu Phe Phe Arg Phe Pro Thr Ser Ser Ser Phe Ser Gly
115 120 125
Ala Leu Thr Val Gly Leu Gln Thr Asn Ala Gly Arg Val Leu Ala Gln
130 135 140
Asn Ser Thr Gln Ile Arg Gly Thr Thr Thr Lys Trp Thr Gln Ile Asn
145 150 155 160
Leu Glu Leu His Pro Thr Ala Ser Ala Pro Asp Val Ser Asn Ser Phe
165 170 175
Phe Val Thr Ile Asp Gly Ala Ala Gly Ala Gly Gln Thr Ile Asn Phe
180 185 190
Ala Met Phe Ser Leu Phe Pro Pro Thr Phe Lys Asn Arg Pro Asn Gly
195 200 205
Leu Arg Ala Asp Ile Ala Glu Thr Leu Ala Glu Met Gly Pro Ser Phe
210 215 220
Phe Arg Phe Pro Gly Gly Asn Asn Leu Glu Gly Gln Thr Thr Ala Thr
225 230 235 240
Arg Trp Gln Trp Asn Ala Thr Val Gly Ser Leu Leu Asp Arg Pro Gly
245 250 255
Arg Val Gly Asp Trp Gly Tyr Val Asn Thr Asp Gly Leu Gly Leu Leu
260 265 270
Glu Tyr Leu Gln Phe Phe Glu Asp Thr Gly Met Glu Pro Ile Met Ala
275 280 285
Val Trp Ala Gly Tyr Ser Leu Gly Gly Thr Ser Leu Ala Glu Asn Gln
290 295 300
Leu Ala Pro Tyr Ile Gln Gln Ala Ile Asp Gln Ile Asn Phe Val Ile
305 310 315 320
Gly Asp Pro Ala Lys Ser Ala Pro Ala Ala Leu Arg Ala Ser Leu Gly
325 330 335
His Pro Glu Pro Phe Thr Leu Arg Phe Val Glu Val Gly Asn Glu Asp
340 345 350
Phe Phe Ala Ala Gly Ser Tyr Pro Tyr Arg Trp His Asp Phe Val Thr
355 360 365
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370 375 380
Ala Trp Asn Pro Val Leu Ser Pro Val Pro Gln Ser Tyr Asp Val His
385 390 395 400
Val Tyr Gln Thr Pro Thr Trp Phe Tyr Gln Asn Ala Phe Tyr Tyr Asp
405 410 415
Gly Phe Gln Arg Asn Gly Thr Thr Tyr Phe Glu Gly Glu Tyr Ala Ala
420 425 430
Ile Ser Thr Asn Ala Asn Asp Leu Phe Gly Thr Val Ala Asp Gly Arg
435 440 445
Leu Ala Phe Pro Thr Val Gln Ser Ala Thr Gly Glu Ala Ala Phe Met
450 455 460
Thr Gly Leu Glu Arg Asn Ser Asp Ile Val Phe Ala Ala Ser Tyr Ala
465 470 475 480
Pro Leu Leu Gln His Val Asn Ser Thr Gln Trp Thr Pro Asp Leu Val
485 490 495
Ser Tyr Asp Ala Gly Ser Val Ile Lys Ser Thr Ser Phe Phe Ala Gln
500 505 510
Lys Leu Phe Ala Leu Asn Lys Gly Asp Gln Tyr Leu Pro Ser Thr Leu
515 520 525
Pro Thr Asn Gly Gly Thr Leu His Trp Ser Ile Thr Arg Ala Ser Ser
530 535 540
Ser Gly Lys Thr Phe Ile Lys Ile Ala Asn Ala Gly Ser Ser Ala Gln
545 550 555 560
Ser Leu Thr Phe Gln Leu Thr Gln Phe Asn Ser Val Ser Ser Thr Gly
565 570 575
Thr Leu Gln Val Leu Thr Gly Pro Glu Thr Ala Ser Asn Thr Pro Glu
580 585 590
Ala Pro Gln Ala Ile Val Pro Lys Thr Ser Thr Ile Gly Thr Gly Lys
595 600 605
Thr Phe Thr Tyr Asn Ala Pro Ala Phe Ser Val Ser Val Ile Thr Val
610 615 620
Thr Thr Asn
625
<210> 95
<211> 1430
<212> DNA
<213> 雷塞氏篮状菌
<400> 95
gccgactact cgggcaccta cggagtgacc accagcggca actccctccg cctcaacttc 60
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gtggcatggc caagtacccc accaacaagg ctggtgccaa gtacggtacc gggtactgcg 360
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agccgtcgtc caacgatccc aactctggca ttggcaacca cggatcctgc tgcgcggaga 480
tggatatctg ggaggccaac agcatctcca atgctgtcac tccccacccg tgcgacactc 540
ccggccaggt gatgtgcacc ggtaacaact gcggtggcac atacagcact actcgctatg 600
cgggcacttg cgatcccgac ggctgcgact tcaaccccta ccgcatgggc aaccacagct 660
tctacggccc taaacagatc gtcgatacca gctcgaagtt caccgtcgtg acgcagttcc 720
tcacggatga cggcacctcc accggcaccc tctctgaaat ccgccgcttc tatgtccaga 780
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ccaccgagtt ctgcactgcc cagaagcagg ccttcggcga cacggacgac ttctcaaagc 900
acggcggcct gtccggcatg agcgctgccc tctctcaggg tatggttctg gtcatgagtc 960
tgtgggatga tgtgagtttg atggacaaac atgcgcgttg acaaagagtc aagcagctga 1020
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cggatgtcga atccaacgac cccaacgcct acgtggtcta ctcgaacatc aaggttggtc 1200
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tggcacagca ctggggccag tgtggtggac agggctggac cggccccaca acctgcgtca 1380
gcccttatac ttgccaggag ctgaaccctt actactacca gtgtctgtaa 1430
<210> 96
<211> 532
<212> PRT
<213> 雷塞氏篮状菌
<400> 96
Met Ala Ser Leu Phe Ser Phe Lys Met Tyr Lys Ala Ala Leu Val Leu
1 5 10 15
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Ala Leu Asp Gly Ala Asp Tyr Ser Gly Thr Tyr Gly Val Thr Thr Ser
100 105 110
Gly Asn Ser Leu Arg Leu Asn Phe Val Thr Gln Ala Ser Gln Lys Asn
115 120 125
Val Gly Ser Arg Leu Tyr Leu Met Glu Asn Asp Thr Thr Tyr Gln Ile
130 135 140
Phe Lys Leu Leu Asn Gln Glu Phe Thr Phe Asp Val Asp Val Ser Asn
145 150 155 160
Leu Pro Cys Gly Leu Asn Gly Ala Leu Tyr Leu Val Ala Met Asp Ala
165 170 175
Asp Gly Gly Met Ala Lys Tyr Pro Thr Asn Lys Ala Gly Ala Lys Tyr
180 185 190
Gly Thr Gly Tyr Cys Asp Ser Gln Cys Pro Arg Asp Leu Lys Phe Ile
195 200 205
Asn Gly Glu Ala Asn Val Glu Gly Trp Gln Pro Ser Ser Asn Asp Pro
210 215 220
Asn Ser Gly Ile Gly Asn His Gly Ser Cys Cys Ala Glu Met Asp Ile
225 230 235 240
Trp Glu Ala Asn Ser Ile Ser Asn Ala Val Thr Pro His Pro Cys Asp
245 250 255
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260 265 270
Ser Thr Thr Arg Tyr Ala Gly Thr Cys Asp Pro Asp Gly Cys Asp Phe
275 280 285
Asn Pro Tyr Arg Met Gly Asn His Ser Phe Tyr Gly Pro Lys Gln Ile
290 295 300
Val Asp Thr Ser Ser Lys Phe Thr Val Val Thr Gln Phe Leu Thr Asp
305 310 315 320
Asp Gly Thr Ser Thr Gly Thr Leu Ser Glu Ile Arg Arg Phe Tyr Val
325 330 335
Gln Asn Gly Gln Val Ile Pro Asn Ser Val Ser Thr Ile Ser Gly Val
340 345 350
Ser Gly Asn Ser Ile Thr Thr Glu Phe Cys Thr Ala Gln Lys Gln Ala
355 360 365
Phe Gly Asp Thr Asp Asp Phe Ser Lys His Gly Gly Leu Ser Gly Met
370 375 380
Ser Ala Ala Leu Ser Gln Gly Met Val Leu Val Met Ser Leu Trp Asp
385 390 395 400
Asp His Ala Ala Asn Met Leu Trp Leu Asp Ser Thr Tyr Pro Thr Asn
405 410 415
Ala Thr Ser Ser Thr Pro Gly Ala Ala Arg Gly Thr Cys Asp Ile Ser
420 425 430
Ser Gly Val Pro Ala Asp Val Glu Ser Asn Asp Pro Asn Ala Tyr Val
435 440 445
Val Tyr Ser Asn Ile Lys Val Gly Pro Ile Gly Ser Thr Phe Ser Ser
450 455 460
Ser Gly Ser Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Thr Thr Thr Thr Thr Thr
465 470 475 480
Ala Ser Pro Thr Thr Thr Thr Ser Ser Ala Ser Ser Thr Gly Thr Gly
485 490 495
Val Ala Gln His Trp Gly Gln Cys Gly Gly Gln Gly Trp Thr Gly Pro
500 505 510
Thr Thr Cys Val Ser Pro Tyr Thr Cys Gln Glu Leu Asn Pro Tyr Tyr
515 520 525
Tyr Gln Cys Leu
530
<210> 97
<211> 1898
<212> DNA
<213> 雷塞氏篮状菌
<400> 97
atgcggtctc tcctggctct tgcccctacc ctgctcgcgc ctgttgttca ggctcagcaa 60
accatgtggg gtcaatgtaa gttcttttca ctgcttacca tgtataatct ttgatatcaa 120
gcatcatatc tgactcacgt tttaggcggt ggtcagggct ggaccggacc taccatctgt 180
gtagcaggcg cgacatgcag cacacagaac ccttgtaagt cgggccttca tcaaaacttc 240
aacatcacca cctcgatgga gcaggagttg acctgatctt tacccttagg gtatgcgcag 300
tgcaccccag cacctaccgc gccgacgacc ttgcaaacaa caactacgac gagctcgaaa 360
tcgtccacga ccacgagctc gaagtcgtcc acgaccacag gtggaagtgg cggtggaact 420
acgacctcaa cgtcagccac catcaccgcg gctccatctg gtaacccata ctccggatac 480
cagctctatg tgaaccagga atactcgtcc gaggtgtacg cgtctgctat tccttccctt 540
accggcactc tggtcgcgaa ggcaagcgcc gcggcagagg tgccatcttt cctgtggctg 600
taagtttttt tgaccttgaa tgaacgccct gtcctctacg agtggccgca ggagctaatt 660
gagatgccaa tgaacaggga cactgcctcc aaggtgccac tgatgggcac ttacttgcag 720
gatatccagg cgaagaacgc tgctggcgcc aaccccccat atgccggtca attcgtggtt 780
tacgacttgc cggatcgtga ttgcgctgca ttggccagca atggagagta ctccattgct 840
aacaatggtg ttgccaacta caaggcttac atcgactcca tccgcgcgct tcttgttcaa 900
tactcgaacg tccatgtcat ccttgtgatc ggtgagctat tgcagtctcg ctttaaagca 960
tttgactaga tcaatgtcgc taatggtacc taccgcacag agcccgacag cttggccaac 1020
cttgtcacca acctgaatgt tcagaagtgt gctaatgctc agagtgctta cctggagtgc 1080
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gtcatgcagg tcatgctgga tggctcggct ggcccgccaa ccttagcccg gccgctcaac 1260
tctttgcttc cgtataccag aatgcaagct ccccagctgc cgttcgcggc ctggcaacca 1320
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ttgagcaact ccttaccaac gccaacccct ctttctaa 1898
<210> 98
<211> 464
<212> PRT
<213> 雷塞氏篮状菌
<400> 98
Met Arg Ser Leu Leu Ala Leu Ala Pro Thr Leu Leu Ala Pro Val Val
1 5 10 15
Gln Ala Gln Gln Thr Met Trp Gly Gln Cys Gly Gly Gln Gly Trp Thr
20 25 30
Gly Pro Thr Ile Cys Val Ala Gly Ala Thr Cys Ser Thr Gln Asn Pro
35 40 45
Trp Tyr Ala Gln Cys Thr Pro Ala Pro Thr Ala Pro Thr Thr Leu Gln
50 55 60
Thr Thr Thr Thr Thr Ser Ser Lys Ser Ser Thr Thr Thr Ser Ser Lys
65 70 75 80
Ser Ser Thr Thr Thr Gly Gly Ser Gly Gly Gly Thr Thr Thr Ser Thr
85 90 95
Ser Ala Thr Ile Thr Ala Ala Pro Ser Gly Asn Pro Tyr Ser Gly Tyr
100 105 110
Gln Leu Tyr Val Asn Gln Glu Tyr Ser Ser Glu Val Tyr Ala Ser Ala
115 120 125
Ile Pro Ser Leu Thr Gly Thr Leu Val Ala Lys Ala Ser Ala Ala Ala
130 135 140
Glu Val Pro Ser Phe Leu Trp Leu Asp Thr Ala Ser Lys Val Pro Leu
145 150 155 160
Met Gly Thr Tyr Leu Gln Asp Ile Gln Ala Lys Asn Ala Ala Gly Ala
165 170 175
Asn Pro Pro Tyr Ala Gly Gln Phe Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg
180 185 190
Asp Cys Ala Ala Leu Ala Ser Asn Gly Glu Tyr Ser Ile Ala Asn Asn
195 200 205
Gly Val Ala Asn Tyr Lys Ala Tyr Ile Asp Ser Ile Arg Ala Leu Leu
210 215 220
Val Gln Tyr Ser Asn Val His Val Ile Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser
225 230 235 240
Leu Ala Asn Leu Val Thr Asn Leu Asn Val Gln Lys Cys Ala Asn Ala
245 250 255
Gln Ser Ala Tyr Leu Glu Cys Ile Asn Tyr Ala Leu Thr Gln Leu Asn
260 265 270
Leu Lys Asn Val Ala Met Tyr Ile Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu
275 280 285
Gly Trp Pro Ala Asn Leu Ser Pro Ala Ala Gln Leu Phe Ala Ser Val
290 295 300
Tyr Gln Asn Ala Ser Ser Pro Ala Ala Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn
305 310 315 320
Val Ala Asn Tyr Asn Ala Trp Ser Ile Ala Thr Cys Pro Ser Tyr Thr
325 330 335
Gln Gly Asp Pro Asn Cys Asp Glu Gln Lys Tyr Ile Asn Ala Leu Ala
340 345 350
Pro Leu Leu Gln Gln Gln Gly Trp Ser Ser Val His Phe Ile Thr Asp
355 360 365
Thr Gly Arg Asn Gly Val Gln Pro Thr Lys Gln Asn Ala Trp Gly Asp
370 375 380
Trp Cys Asn Val Ile Gly Thr Gly Phe Gly Val Arg Pro Thr Thr Asn
385 390 395 400
Thr Gly Asp Pro Leu Glu Asp Ala Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly
405 410 415
Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asn Ser Thr Ser Pro Arg Tyr Asp Ala His
420 425 430
Cys Gly Tyr Ser Asp Ala Leu Gln Pro Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp
435 440 445
Phe Glu Ala Tyr Phe Glu Gln Leu Leu Thr Asn Ala Asn Pro Ser Phe
450 455 460
<210> 99
<211> 3060
<212> DNA
<213> 烟曲霉
<400> 99
atgagattcg gttggctcga ggtggccgct ctgacggccg cttctgtagc caatgcccag 60
gtttgtgatg ctttcccgtc attgtttcgg atatagttga caatagtcat ggaaataatc 120
aggaattggc tttctctcca ccattctacc cttcgccttg ggctgatggc cagggagagt 180
gggcagatgc ccatcgacgc gccgtcgaga tcgtttctca gatgacactg gcggagaagg 240
ttaaccttac aacgggtact gggtgggttg cgactttttt gttgacagtg agctttcttc 300
actgaccatc tacacagatg ggaaatggac cgatgcgtcg gtcaaaccgg cagcgttccc 360
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acttggtatc aactggggtc tttgtggcca ggattcccct ttgggtatcc gtttctgtga 480
gctatacccg cggagtcttt cagtccttgt attatgtgct gatgattgtc tctgtatagc 540
tgacctcaac tccgccttcc ctgctggtac taatgtcgcc gcgacatggg acaagacact 600
cgcctacctt cgtggcaagg ccatgggtga ggaattcaac gacaagggcg tggacatttt 660
gctggggcct gctgctggtc ctctcggcaa atacccggac ggcggcagaa tctgggaagg 720
cttctctcct gatccggttc tcactggtgt acttttcgcc gaaactatca agggtatcca 780
agacgcgggt gtgattgcta ctgccaagca ttacattctg aatgaacagg agcatttccg 840
acaggttggc gaggcccagg gatatggtta caacatcacg gagacgatca gctccaacgt 900
ggatgacaag accatgcacg agttgtacct ttggtgagta gttgacactg caaatgagga 960
ccttgattga tttgactgac ctggaatgca ggccctttgc agatgctgtg cgcggtaaga 1020
ttttccgtag acttgacctc gcgacgaaga aatcgctgac gaaccatcgt agctggcgtt 1080
ggcgctgtca tgtgttccta caatcaaatc aacaacagct acggttgtca aaacagtcaa 1140
actctcaaca agctcctcaa ggctgagctg ggcttccaag gcttcgtcat gagtgactgg 1200
agcgctcacc acagcggtgt cggcgctgcc ctcgctgggt tggatatgtc gatgcctgga 1260
gacatttcct tcgacgacgg actctccttc tggggcacga acctaactgt cagtgttctt 1320
aacggcaccg ttccagcctg gcgtgtcgat gacatggctg ttcgtatcat gaccgcgtac 1380
tacaaggttg gtcgtgaccg tcttcgtatt ccccctaact tcagctcctg gacccgggat 1440
gagtacggct gggagcattc tgctgtctcc gagggagcct ggaccaaggt gaacgacttc 1500
gtcaatgtgc agcgcagtca ctctcagatc atccgtgaga ttggtgccgc tagtacagtg 1560
ctcttgaaga acacgggtgc tcttcctttg accggcaagg aggttaaagt gggtgttctc 1620
ggtgaagacg ctggttccaa cccgtggggt gctaacggct gccccgaccg cggctgtgat 1680
aacggcactc ttgctatggc ctggggtagt ggtactgcca acttccctta ccttgtcacc 1740
cccgagcagg ctatccagcg agaggtcatc agcaacggcg gcaatgtctt tgctgtgact 1800
gataacgggg ctctcagcca gatggcagat gttgcatctc aatccaggtg agtgcgggct 1860
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ggcaagactc gggagtctta cggggctccc ttgctcaccg agcctaacaa tggcaatggt 2280
gctccccagg atgatttcaa cgagggcgtc ttcattgact accgtcactt tgacaagcgc 2340
aatgagaccc ccatttatga gtttggccat ggcttgagct acaccacctt tggttactct 2400
caccttcggg ttcaggccct caatagttcg agttcggcat atgtcccgac tagcggagag 2460
accaagcctg cgccaaccta tggtgagatc ggtagtgccg ccgactacct gtatcccgag 2520
ggtctcaaaa gaattaccaa gtttatttac ccttggctca actcgaccga cctcgaggat 2580
tcttctgacg acccgaacta cggctgggag gactcggagt acattcccga aggcgctagg 2640
gatgggtctc ctcaacccct cctgaaggct ggcggcgctc ctggtggtaa ccctaccctt 2700
tatcaggatc ttgttagggt gtcggccacc ataaccaaca ctggtaacgt cgccggttat 2760
gaagtccctc aattggtgag tgacccgcat gttccttgcg ttgcaatttg gctaactcgc 2820
ttctagtatg tttcactggg cggaccgaac gagcctcggg tcgttctgcg caagttcgac 2880
cgaatcttcc tggctcctgg ggagcaaaag gtttggacca cgactcttaa ccgtcgtgat 2940
ctcgccaatt gggatgtgga ggctcaggac tgggtcatca caaagtaccc caagaaagtg 3000
cacgtcggca gctcctcgcg taagctgcct ctgagagcgc ctctgccccg tgtctactag 3060
<210> 100
<211> 863
<212> PRT
<213> 烟曲霉
<400> 100
Met Arg Phe Gly Trp Leu Glu Val Ala Ala Leu Thr Ala Ala Ser Val
1 5 10 15
Ala Asn Ala Gln Glu Leu Ala Phe Ser Pro Pro Phe Tyr Pro Ser Pro
20 25 30
Trp Ala Asp Gly Gln Gly Glu Trp Ala Asp Ala His Arg Arg Ala Val
35 40 45
Glu Ile Val Ser Gln Met Thr Leu Ala Glu Lys Val Asn Leu Thr Thr
50 55 60
Gly Thr Gly Trp Glu Met Asp Arg Cys Val Gly Gln Thr Gly Ser Val
65 70 75 80
Pro Arg Leu Gly Ile Asn Trp Gly Leu Cys Gly Gln Asp Ser Pro Leu
85 90 95
Gly Ile Arg Phe Ser Asp Leu Asn Ser Ala Phe Pro Ala Gly Thr Asn
100 105 110
Val Ala Ala Thr Trp Asp Lys Thr Leu Ala Tyr Leu Arg Gly Lys Ala
115 120 125
Met Gly Glu Glu Phe Asn Asp Lys Gly Val Asp Ile Leu Leu Gly Pro
130 135 140
Ala Ala Gly Pro Leu Gly Lys Tyr Pro Asp Gly Gly Arg Ile Trp Glu
145 150 155 160
Gly Phe Ser Pro Asp Pro Val Leu Thr Gly Val Leu Phe Ala Glu Thr
165 170 175
Ile Lys Gly Ile Gln Asp Ala Gly Val Ile Ala Thr Ala Lys His Tyr
180 185 190
Ile Leu Asn Glu Gln Glu His Phe Arg Gln Val Gly Glu Ala Gln Gly
195 200 205
Tyr Gly Tyr Asn Ile Thr Glu Thr Ile Ser Ser Asn Val Asp Asp Lys
210 215 220
Thr Met His Glu Leu Tyr Leu Trp Pro Phe Ala Asp Ala Val Arg Ala
225 230 235 240
Gly Val Gly Ala Val Met Cys Ser Tyr Asn Gln Ile Asn Asn Ser Tyr
245 250 255
Gly Cys Gln Asn Ser Gln Thr Leu Asn Lys Leu Leu Lys Ala Glu Leu
260 265 270
Gly Phe Gln Gly Phe Val Met Ser Asp Trp Ser Ala His His Ser Gly
275 280 285
Val Gly Ala Ala Leu Ala Gly Leu Asp Met Ser Met Pro Gly Asp Ile
290 295 300
Ser Phe Asp Asp Gly Leu Ser Phe Trp Gly Thr Asn Leu Thr Val Ser
305 310 315 320
Val Leu Asn Gly Thr Val Pro Ala Trp Arg Val Asp Asp Met Ala Val
325 330 335
Arg Ile Met Thr Ala Tyr Tyr Lys Val Gly Arg Asp Arg Leu Arg Ile
340 345 350
Pro Pro Asn Phe Ser Ser Trp Thr Arg Asp Glu Tyr Gly Trp Glu His
355 360 365
Ser Ala Val Ser Glu Gly Ala Trp Thr Lys Val Asn Asp Phe Val Asn
370 375 380
Val Gln Arg Ser His Ser Gln Ile Ile Arg Glu Ile Gly Ala Ala Ser
385 390 395 400
Thr Val Leu Leu Lys Asn Thr Gly Ala Leu Pro Leu Thr Gly Lys Glu
405 410 415
Val Lys Val Gly Val Leu Gly Glu Asp Ala Gly Ser Asn Pro Trp Gly
420 425 430
Ala Asn Gly Cys Pro Asp Arg Gly Cys Asp Asn Gly Thr Leu Ala Met
435 440 445
Ala Trp Gly Ser Gly Thr Ala Asn Phe Pro Tyr Leu Val Thr Pro Glu
450 455 460
Gln Ala Ile Gln Arg Glu Val Ile Ser Asn Gly Gly Asn Val Phe Ala
465 470 475 480
Val Thr Asp Asn Gly Ala Leu Ser Gln Met Ala Asp Val Ala Ser Gln
485 490 495
Ser Ser Val Ser Leu Val Phe Val Asn Ala Asp Ser Gly Glu Gly Phe
500 505 510
Ile Ser Val Asp Gly Asn Glu Gly Asp Arg Lys Asn Leu Thr Leu Trp
515 520 525
Lys Asn Gly Glu Ala Val Ile Asp Thr Val Val Ser His Cys Asn Asn
530 535 540
Thr Ile Val Val Ile His Ser Val Gly Pro Val Leu Ile Asp Arg Trp
545 550 555 560
Tyr Asp Asn Pro Asn Val Thr Ala Ile Ile Trp Ala Gly Leu Pro Gly
565 570 575
Gln Glu Ser Gly Asn Ser Leu Val Asp Val Leu Tyr Gly Arg Val Asn
580 585 590
Pro Ser Ala Lys Thr Pro Phe Thr Trp Gly Lys Thr Arg Glu Ser Tyr
595 600 605
Gly Ala Pro Leu Leu Thr Glu Pro Asn Asn Gly Asn Gly Ala Pro Gln
610 615 620
Asp Asp Phe Asn Glu Gly Val Phe Ile Asp Tyr Arg His Phe Asp Lys
625 630 635 640
Arg Asn Glu Thr Pro Ile Tyr Glu Phe Gly His Gly Leu Ser Tyr Thr
645 650 655
Thr Phe Gly Tyr Ser His Leu Arg Val Gln Ala Leu Asn Ser Ser Ser
660 665 670
Ser Ala Tyr Val Pro Thr Ser Gly Glu Thr Lys Pro Ala Pro Thr Tyr
675 680 685
Gly Glu Ile Gly Ser Ala Ala Asp Tyr Leu Tyr Pro Glu Gly Leu Lys
690 695 700
Arg Ile Thr Lys Phe Ile Tyr Pro Trp Leu Asn Ser Thr Asp Leu Glu
705 710 715 720
Asp Ser Ser Asp Asp Pro Asn Tyr Gly Trp Glu Asp Ser Glu Tyr Ile
725 730 735
Pro Glu Gly Ala Arg Asp Gly Ser Pro Gln Pro Leu Leu Lys Ala Gly
740 745 750
Gly Ala Pro Gly Gly Asn Pro Thr Leu Tyr Gln Asp Leu Val Arg Val
755 760 765
Ser Ala Thr Ile Thr Asn Thr Gly Asn Val Ala Gly Tyr Glu Val Pro
770 775 780
Gln Leu Tyr Val Ser Leu Gly Gly Pro Asn Glu Pro Arg Val Val Leu
785 790 795 800
Arg Lys Phe Asp Arg Ile Phe Leu Ala Pro Gly Glu Gln Lys Val Trp
805 810 815
Thr Thr Thr Leu Asn Arg Arg Asp Leu Ala Asn Trp Asp Val Glu Ala
820 825 830
Gln Asp Trp Val Ile Thr Lys Tyr Pro Lys Lys Val His Val Gly Ser
835 840 845
Ser Ser Arg Lys Leu Pro Leu Arg Ala Pro Leu Pro Arg Val Tyr
850 855 860
<210> 101
<211> 835
<212> DNA
<213> 埃默森青霉物种
<400> 101
atgctgtctt cgacgactcg caccctcgcc tttacaggcc ttgcgggcct tctgtccgct 60
cccctggtca aggcccatgg ctttgtccag ggcattgtca tcggtgacca attgtaagtc 120
cctctcttgc agttctgtcg attaactgct ggactgcttg cttgactccc tgctgactcc 180
caacagctac agcgggtaca tcgtcaactc gttcccctac gaatccaacc caccccccgt 240
catcggctgg gccacgaccg ccaccgacct gggcttcgtc gacggcacag gataccaagg 300
cccggacatc atctgccacc ggaatgcgac gcccgcgccg ctgacagccc ccgtggccgc 360
cggcggcacc gtcgagctgc agtggacgcc gtggccggac agccaccacg gacccgtcat 420
cacctacctg gcgccgtgca acggcaactg ctcgaccgtc gacaagacga cgctggagtt 480
cttcaagatc gaccagcagg gcctgatcga cgacacgagc ccgccgggca cctgggcgtc 540
ggacaacctc atcgccaaca acaatagctg gaccgtcacc attcccaaca gcgtcgcccc 600
cggcaactac gtcctgcgcc acgagatcat cgccctgcac tcggccaaca acaaggacgg 660
cgcccagaac tacccccagt gcatcaacat cgaggtcacg ggcggcggct ccgacgcgcc 720
tgagggtact ctgggcgagg atctctacca tgacaccgac ccgggcattc tggtcgacat 780
ttacgagccc attgcgacgt ataccattcc ggggccgcct gagccgacgt tctag 835
<210> 102
<211> 253
<212> PRT
<213> 埃默森青霉物种
<400> 102
Met Leu Ser Ser Thr Thr Arg Thr Leu Ala Phe Thr Gly Leu Ala Gly
1 5 10 15
Leu Leu Ser Ala Pro Leu Val Lys Ala His Gly Phe Val Gln Gly Ile
20 25 30
Val Ile Gly Asp Gln Phe Tyr Ser Gly Tyr Ile Val Asn Ser Phe Pro
35 40 45
Tyr Glu Ser Asn Pro Pro Pro Val Ile Gly Trp Ala Thr Thr Ala Thr
50 55 60
Asp Leu Gly Phe Val Asp Gly Thr Gly Tyr Gln Gly Pro Asp Ile Ile
65 70 75 80
Cys His Arg Asn Ala Thr Pro Ala Pro Leu Thr Ala Pro Val Ala Ala
85 90 95
Gly Gly Thr Val Glu Leu Gln Trp Thr Pro Trp Pro Asp Ser His His
100 105 110
Gly Pro Val Ile Thr Tyr Leu Ala Pro Cys Asn Gly Asn Cys Ser Thr
115 120 125
Val Asp Lys Thr Thr Leu Glu Phe Phe Lys Ile Asp Gln Gln Gly Leu
130 135 140
Ile Asp Asp Thr Ser Pro Pro Gly Thr Trp Ala Ser Asp Asn Leu Ile
145 150 155 160
Ala Asn Asn Asn Ser Trp Thr Val Thr Ile Pro Asn Ser Val Ala Pro
165 170 175
Gly Asn Tyr Val Leu Arg His Glu Ile Ile Ala Leu His Ser Ala Asn
180 185 190
Asn Lys Asp Gly Ala Gln Asn Tyr Pro Gln Cys Ile Asn Ile Glu Val
195 200 205
Thr Gly Gly Gly Ser Asp Ala Pro Glu Gly Thr Leu Gly Glu Asp Leu
210 215 220
Tyr His Asp Thr Asp Pro Gly Ile Leu Val Asp Ile Tyr Glu Pro Ile
225 230 235 240
Ala Thr Tyr Thr Ile Pro Gly Pro Pro Glu Pro Thr Phe
245 250
<210> 103
<211> 1520
<212> DNA
<213> 雷塞氏篮状菌
<400> 103
atggtccatc tttcttccct ggccctggct ttggccgccg gctcgcagct gtatgtgatc 60
catgccatga ctcgagaagt gctcccaaaa ctgactccaa gtctcaatct tagtgcccaa 120
gctgcaggtc ttaacactgc tgccaaagcg attggaaagc tctatttcgg taccgcaacc 180
gacaacccgg agctgtccga cagcacatac atgcaggaga cggataacac cgatgatttc 240
ggccaactca ccccagctaa ctccatgaag gttcgctgac atcttagttc cccccccctt 300
ttgggaatct gcgcggagat atgctgagcc ttcaaaacta gtgggatgcc accgagccct 360
ctcagaacac cttcaccttc accaacggtg atcagatcgc aaaccttgct aagagcaacg 420
gtcagatgct gagatgccac aacctggtgt ggtacaacca gttgcccagc tggggtaagc 480
aaccggttct gttaatatca tcagcgtgac cgcatcgatc gtattgcgcg gagattggaa 540
agatttgcaa gctaatgtca ctacagtcac cagcggatct tggaccaatg ccacgcttct 600
tgcggccatg aagaaccaca tcaccaacgt tgtgacccac tacaagggac agtgctacgc 660
ttgggatgtt gtcaacgaag gtacgtttcg attcggcttc cctcggaccg tatctgcagg 720
caaaaaggtc aatcaattga caatcgtgat ccccagctct caacgatgat ggcacctacc 780
gatccaatgt cttctatcag tacatcggcg aggcatacat tcccattgcc tttgcgaccg 840
ctgccgccgc cgatccaaac gcgaagctct actacaacga ctacaacatt gagtaccccg 900
gcgccaaggc caccgccgcc cagaacatcg tcaagatggt caaggcttac ggcgcgaaaa 960
tcgacggtgt cggtctgcaa tctcacttca tcgttggcag cacccctagc cagagctccc 1020
agcagagcaa catggctgct ttcaccgcgc tcggcgtcga ggtcgccatc accgaactgg 1080
atatccgcat gacgttgcct tccaccagtg ctctcttggc ccagcaatcc accgattacc 1140
agagcactgt gtcggcttgc gtgaacactc cgaagtgcat tggtatcacc ctctgggact 1200
ggaccgacaa gtactcctgg gttcccaaca ccttctccgg ccaaggtgac gcctgcccct 1260
gggattctaa ctaccagaag aagcctgcct actacggtat cttgactgcg ctcggaggca 1320
gcgcttccac ctccaccacc accactctgg tgacctccac caggacttcg actacgacca 1380
gcacttcggc cacctccacg tctactggcg ttgctcagca ctggggccag tgcggtggta 1440
tcggctggac agggccgact acctgcgcta gcccctacac ctgccaggaa ctgaatccct 1500
actactacca gtgcctgtaa 1520
<210> 104
<211> 405
<212> PRT
<213> 雷塞氏篮状菌
<400> 104
Met Val His Leu Ser Ser Leu Ala Leu Ala Leu Ala Ala Gly Ser Gln
1 5 10 15
Leu Ala Gln Ala Ala Gly Leu Asn Thr Ala Ala Lys Ala Ile Gly Lys
20 25 30
Leu Tyr Phe Gly Thr Ala Thr Asp Asn Pro Glu Leu Ser Asp Ser Thr
35 40 45
Tyr Met Gln Glu Thr Asp Asn Thr Asp Asp Phe Gly Gln Leu Thr Pro
50 55 60
Ala Asn Ser Met Lys Trp Asp Ala Thr Glu Pro Ser Gln Asn Thr Phe
65 70 75 80
Thr Phe Thr Asn Gly Asp Gln Ile Ala Asn Leu Ala Lys Ser Asn Gly
85 90 95
Gln Met Leu Arg Cys His Asn Leu Val Trp Tyr Asn Gln Leu Pro Ser
100 105 110
Trp Val Thr Ser Gly Ser Trp Thr Asn Ala Thr Leu Leu Ala Ala Met
115 120 125
Lys Asn His Ile Thr Asn Val Val Thr His Tyr Lys Gly Gln Cys Tyr
130 135 140
Ala Trp Asp Val Val Asn Glu Ala Leu Asn Asp Asp Gly Thr Tyr Arg
145 150 155 160
Ser Asn Val Phe Tyr Gln Tyr Ile Gly Glu Ala Tyr Ile Pro Ile Ala
165 170 175
Phe Ala Thr Ala Ala Ala Ala Asp Pro Asn Ala Lys Leu Tyr Tyr Asn
180 185 190
Asp Tyr Asn Ile Glu Tyr Pro Gly Ala Lys Ala Thr Ala Ala Gln Asn
195 200 205
Ile Val Lys Met Val Lys Ala Tyr Gly Ala Lys Ile Asp Gly Val Gly
210 215 220
Leu Gln Ser His Phe Ile Val Gly Ser Thr Pro Ser Gln Ser Ser Gln
225 230 235 240
Gln Ser Asn Met Ala Ala Phe Thr Ala Leu Gly Val Glu Val Ala Ile
245 250 255
Thr Glu Leu Asp Ile Arg Met Thr Leu Pro Ser Thr Ser Ala Leu Leu
260 265 270
Ala Gln Gln Ser Thr Asp Tyr Gln Ser Thr Val Ser Ala Cys Val Asn
275 280 285
Thr Pro Lys Cys Ile Gly Ile Thr Leu Trp Asp Trp Thr Asp Lys Tyr
290 295 300
Ser Trp Val Pro Asn Thr Phe Ser Gly Gln Gly Asp Ala Cys Pro Trp
305 310 315 320
Asp Ser Asn Tyr Gln Lys Lys Pro Ala Tyr Tyr Gly Ile Leu Thr Ala
325 330 335
Leu Gly Gly Ser Ala Ser Thr Ser Thr Thr Thr Thr Leu Val Thr Ser
340 345 350
Thr Arg Thr Ser Thr Thr Thr Ser Thr Ser Ala Thr Ser Thr Ser Thr
355 360 365
Gly Val Ala Gln His Trp Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly Trp Thr Gly
370 375 380
Pro Thr Thr Cys Ala Ser Pro Tyr Thr Cys Gln Glu Leu Asn Pro Tyr
385 390 395 400
Tyr Tyr Gln Cys Leu
405
<210> 105
<211> 1197
<212> DNA
<213> 褐孢长毛盘菌
<400> 105
atgcgtacct tctcgtctct tctcggtgtt gcccttctct tgggtgcagc taatgcccag 60
gtcgcggttt ggggacagtg tggtggcatt ggttactctg gctcgacaac ctgcgctgcg 120
ggaacgactt gtgttaagct gaacgactac tactcccaat gccaacccgg cggtaccact 180
ttgacaacca ccaccaaacc cgccaccact accactacca ccacggcaac ttctccctca 240
tcttctcccg gattaaatgc cctggcacaa aagagcggcc ggtacttcgg tagtgcaact 300
gacaacccag agctctccga tgcggcatac attgccatcc tgagcaacaa aaacgagttt 360
gggatcatca cgcctggaaa ctcgatgaaa tgggatgcta ctgaaccgtc ccgcgggagt 420
ttctcgttca ctggtggaca gcaaattgtt gattttgcgc agggcaatgg gcaggctatc 480
agaggccata ctcttgtctg gtactcccag ttgccgtcct gggttactag cggaaacttc 540
gataaagcta cattgacatc gatcatgcaa aatcacatta caactcttgt cagccactgg 600
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cgtcaaaacg tgttctacac aaccattgga gaggactaca tccagctcgc cttcgaagcc 720
gcccgtgccg ccgacccgac cgcaaagctc tgcatcaacg actacaacat cgagggcact 780
ggagccaagt caacagccat gtacaatctc gtctcgaagc tgaaatccgc cggcgttccc 840
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gccaacctgc agaagaagcc agcctactcc gctattgcgt ctgctcttgc ggcttga 1197
<210> 106
<211> 398
<212> PRT
<213> 褐孢长毛盘菌
<400> 106
Met Arg Thr Phe Ser Ser Leu Leu Gly Val Ala Leu Leu Leu Gly Ala
1 5 10 15
Ala Asn Ala Gln Val Ala Val Trp Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly Tyr
20 25 30
Ser Gly Ser Thr Thr Cys Ala Ala Gly Thr Thr Cys Val Lys Leu Asn
35 40 45
Asp Tyr Tyr Ser Gln Cys Gln Pro Gly Gly Thr Thr Leu Thr Thr Thr
50 55 60
Thr Lys Pro Ala Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ala Thr Ser Pro Ser
65 70 75 80
Ser Ser Pro Gly Leu Asn Ala Leu Ala Gln Lys Ser Gly Arg Tyr Phe
85 90 95
Gly Ser Ala Thr Asp Asn Pro Glu Leu Ser Asp Ala Ala Tyr Ile Ala
100 105 110
Ile Leu Ser Asn Lys Asn Glu Phe Gly Ile Ile Thr Pro Gly Asn Ser
115 120 125
Met Lys Trp Asp Ala Thr Glu Pro Ser Arg Gly Ser Phe Ser Phe Thr
130 135 140
Gly Gly Gln Gln Ile Val Asp Phe Ala Gln Gly Asn Gly Gln Ala Ile
145 150 155 160
Arg Gly His Thr Leu Val Trp Tyr Ser Gln Leu Pro Ser Trp Val Thr
165 170 175
Ser Gly Asn Phe Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ser Ile Met Gln Asn His
180 185 190
Ile Thr Thr Leu Val Ser His Trp Lys Gly Gln Leu Ala Tyr Trp Asp
195 200 205
Val Val Asn Glu Ala Phe Asn Asp Asp Gly Thr Phe Arg Gln Asn Val
210 215 220
Phe Tyr Thr Thr Ile Gly Glu Asp Tyr Ile Gln Leu Ala Phe Glu Ala
225 230 235 240
Ala Arg Ala Ala Asp Pro Thr Ala Lys Leu Cys Ile Asn Asp Tyr Asn
245 250 255
Ile Glu Gly Thr Gly Ala Lys Ser Thr Ala Met Tyr Asn Leu Val Ser
260 265 270
Lys Leu Lys Ser Ala Gly Val Pro Ile Asp Cys Ile Gly Val Gln Gly
275 280 285
His Leu Ile Val Gly Glu Val Pro Thr Thr Ile Gln Ala Asn Leu Ala
290 295 300
Gln Phe Ala Ser Leu Gly Val Asp Val Ala Ile Thr Glu Leu Asp Ile
305 310 315 320
Arg Met Thr Leu Pro Ser Thr Thr Ala Leu Leu Gln Gln Gln Ala Lys
325 330 335
Asp Tyr Val Ser Val Val Thr Ala Cys Met Asn Val Pro Arg Cys Ile
340 345 350
Gly Ile Thr Ile Trp Asp Tyr Thr Asp Lys Tyr Ser Trp Val Pro Gln
355 360 365
Thr Phe Ser Gly Gln Gly Asp Ala Cys Pro Trp Asp Ala Asn Leu Gln
370 375 380
Lys Lys Pro Ala Tyr Ser Ala Ile Ala Ser Ala Leu Ala Ala
385 390 395
<210> 107
<211> 2391
<212> DNA
<213> 埃默森篮状菌
<400> 107
atgatgactc ccacggcgat tctcaccgca gtggcggcgc tcctgcccac cgcgacatgg 60
gcacaggata accaaaccta tgccaattac tcgtcgcagt ctcagccgga cctgtttccc 120
cggaccgtcg cgaccatcga cctgtccttc cccgactgtg agaatggccc gctcagcacg 180
aacctggtgt gcaacaaatc ggccgatccc tgggcccgag ctgaggccct catctcgctc 240
tttaccctcg aagagctgat taacaacacc cagaacaccg ctcctggcgt gccccgtttg 300
ggtctgcccc agtatcaggt gtggaatgaa gctctgcacg gactggaccg cgccaatttc 360
tcccattcgg gcgaatacag ctgggccacg tccttcccca tgcccatcct gtcgatggcg 420
tccttcaacc ggaccctcat caaccagatt gcctccatca ttgcaacgca agcccgtgcc 480
ttcaacaacg ccggccgtta cggccttgac agctatgcgc ccaacatcaa tggcttccgc 540
agtcccctct ggggccgtgg acaggagacg cctggtgagg atgcgttctt cttgagttcc 600
acctatgcgt acgagtacat cacaggcctg cagggcggtg tcgacccaga gcatgtcaag 660
atcgtcgcga cggcgaagca cttcgccggc tatgatctgg agaactgggg caacgtctct 720
cggctggggt tcaatgctat catcacgcag caggatctct ccgagtacta cacccctcag 780
ttcctggcgt ctgctcgata cgccaagacg cgcagcatca tgtgctccta caatgcagtg 840
aatggagtcc caagctgtgc caactccttc ttcctccaga cgcttctccg agaaaacttt 900
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ccacacggtt acgcccttaa ccagtcggga gccgctgcgg actcgctcct agcaggtacc 1020
gatatcgact gtggtcagac cttgccgtgg cacctgaatg agtccttcgt agaaggatac 1080
gtctcccgcg gtgatatcga gaaatccctc acccgtctct actcaaacct ggtgcgtctc 1140
ggctactttg acggcaacaa cagcgagtac cgcaacctca actggaacga cgtcgtgact 1200
acggacgcct ggaacatctc gtacgaggcc gcggtggaag gtatcaccct gctcaagaac 1260
gacggaacgc tgccgctgtc caagaaggtc cgcagcattg cgctcatcgg tccttgggcc 1320
aatgccacgg tgcagatgca gggtaactac tatggaacgc caccgtatct gatcagtccg 1380
ctggaagccg ccaaggccag tgggttcacg gtcaactatg cattcggtac caacatctcg 1440
accgattcta cccagtggtt cgcggaagcc atcgcggcgg cgaagaagtc ggacgtgatc 1500
atctacgccg gtggtattga caacacgatc gaggcagagg gacaggaccg cacggatctc 1560
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gtcgtcctgc agatgggcgg tggccaggtg gattcgtcgt cactcaaggc caacaagaat 1680
gtcaacgctc tggtgtgggg tggctatccc ggacagtcgg gtggtgcggc cctgtttgac 1740
atccttacgg gcaagcgtgc gccggccggt cgtctggtga gcacgcagta cccggccgag 1800
tatgcgacgc agttcccggc caacgacatg aacctgcgtc cgaacggcag caacccggga 1860
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acggagttcc aggagtcggc tgcggcgggc acgaacaaga cgtcgacttt cgacattctg 1980
gaccttttct ccacccctca tccgggatac gagtacatcg agcaggttcc gttcatcaac 2040
gtgactgtgg acgtgaagaa cgtcggccac acgccatcgc cgtacacggg tctgttgttc 2100
gcgaacacga cagccgggcc caagccgtac ccgaacaaat ggctcgtcgg gttcgactgg 2160
ctgccgacga tccagccggg cgagactgcc aagttgacga tcccggtgcc gttgggcgcg 2220
attgcgtggg cggacgagaa cggcaacaag gtggtcttcc cgggcaacta cgaattggca 2280
ctgaacaatg agcgatcggt agtggtgtcg ttcacgctga cgggcgatgc ggcgactcta 2340
gagaaatggc ctttgtggga gcaggcggtt ccgggggtgc tgcagcaata a 2391
<210> 108
<211> 796
<212> PRT
<213> 埃默森篮状菌
<400> 108
Met Met Thr Pro Thr Ala Ile Leu Thr Ala Val Ala Ala Leu Leu Pro
1 5 10 15
Thr Ala Thr Trp Ala Gln Asp Asn Gln Thr Tyr Ala Asn Tyr Ser Ser
20 25 30
Gln Ser Gln Pro Asp Leu Phe Pro Arg Thr Val Ala Thr Ile Asp Leu
35 40 45
Ser Phe Pro Asp Cys Glu Asn Gly Pro Leu Ser Thr Asn Leu Val Cys
50 55 60
Asn Lys Ser Ala Asp Pro Trp Ala Arg Ala Glu Ala Leu Ile Ser Leu
65 70 75 80
Phe Thr Leu Glu Glu Leu Ile Asn Asn Thr Gln Asn Thr Ala Pro Gly
85 90 95
Val Pro Arg Leu Gly Leu Pro Gln Tyr Gln Val Trp Asn Glu Ala Leu
100 105 110
His Gly Leu Asp Arg Ala Asn Phe Ser His Ser Gly Glu Tyr Ser Trp
115 120 125
Ala Thr Ser Phe Pro Met Pro Ile Leu Ser Met Ala Ser Phe Asn Arg
130 135 140
Thr Leu Ile Asn Gln Ile Ala Ser Ile Ile Ala Thr Gln Ala Arg Ala
145 150 155 160
Phe Asn Asn Ala Gly Arg Tyr Gly Leu Asp Ser Tyr Ala Pro Asn Ile
165 170 175
Asn Gly Phe Arg Ser Pro Leu Trp Gly Arg Gly Gln Glu Thr Pro Gly
180 185 190
Glu Asp Ala Phe Phe Leu Ser Ser Thr Tyr Ala Tyr Glu Tyr Ile Thr
195 200 205
Gly Leu Gln Gly Gly Val Asp Pro Glu His Val Lys Ile Val Ala Thr
210 215 220
Ala Lys His Phe Ala Gly Tyr Asp Leu Glu Asn Trp Gly Asn Val Ser
225 230 235 240
Arg Leu Gly Phe Asn Ala Ile Ile Thr Gln Gln Asp Leu Ser Glu Tyr
245 250 255
Tyr Thr Pro Gln Phe Leu Ala Ser Ala Arg Tyr Ala Lys Thr Arg Ser
260 265 270
Ile Met Cys Ser Tyr Asn Ala Val Asn Gly Val Pro Ser Cys Ala Asn
275 280 285
Ser Phe Phe Leu Gln Thr Leu Leu Arg Glu Asn Phe Asp Phe Val Asp
290 295 300
Asp Gly Tyr Val Ser Ser Asp Cys Asp Ala Val Tyr Asn Val Phe Asn
305 310 315 320
Pro His Gly Tyr Ala Leu Asn Gln Ser Gly Ala Ala Ala Asp Ser Leu
325 330 335
Leu Ala Gly Thr Asp Ile Asp Cys Gly Gln Thr Leu Pro Trp His Leu
340 345 350
Asn Glu Ser Phe Val Glu Gly Tyr Val Ser Arg Gly Asp Ile Glu Lys
355 360 365
Ser Leu Thr Arg Leu Tyr Ser Asn Leu Val Arg Leu Gly Tyr Phe Asp
370 375 380
Gly Asn Asn Ser Glu Tyr Arg Asn Leu Asn Trp Asn Asp Val Val Thr
385 390 395 400
Thr Asp Ala Trp Asn Ile Ser Tyr Glu Ala Ala Val Glu Gly Ile Thr
405 410 415
Leu Leu Lys Asn Asp Gly Thr Leu Pro Leu Ser Lys Lys Val Arg Ser
420 425 430
Ile Ala Leu Ile Gly Pro Trp Ala Asn Ala Thr Val Gln Met Gln Gly
435 440 445
Asn Tyr Tyr Gly Thr Pro Pro Tyr Leu Ile Ser Pro Leu Glu Ala Ala
450 455 460
Lys Ala Ser Gly Phe Thr Val Asn Tyr Ala Phe Gly Thr Asn Ile Ser
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Thr Asp Ser Thr Gln Trp Phe Ala Glu Ala Ile Ala Ala Ala Lys Lys
485 490 495
Ser Asp Val Ile Ile Tyr Ala Gly Gly Ile Asp Asn Thr Ile Glu Ala
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Glu Gly Gln Asp Arg Thr Asp Leu Lys Trp Pro Gly Asn Gln Leu Asp
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Leu Ile Glu Gln Leu Ser Gln Val Gly Lys Pro Leu Val Val Leu Gln
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Met Gly Gly Gly Gln Val Asp Ser Ser Ser Leu Lys Ala Asn Lys Asn
545 550 555 560
Val Asn Ala Leu Val Trp Gly Gly Tyr Pro Gly Gln Ser Gly Gly Ala
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Ala Leu Phe Asp Ile Leu Thr Gly Lys Arg Ala Pro Ala Gly Arg Leu
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Val Ser Thr Gln Tyr Pro Ala Glu Tyr Ala Thr Gln Phe Pro Ala Asn
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Phe Asp Ile Leu Asp Leu Phe Ser Thr Pro His Pro Gly Tyr Glu Tyr
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Leu Pro Thr Ile Gln Pro Gly Glu Thr Ala Lys Leu Thr Ile Pro Val
725 730 735
Pro Leu Gly Ala Ile Ala Trp Ala Asp Glu Asn Gly Asn Lys Val Val
740 745 750
Phe Pro Gly Asn Tyr Glu Leu Ala Leu Asn Asn Glu Arg Ser Val Val
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Val Ser Phe Thr Leu Thr Gly Asp Ala Ala Thr Leu Glu Lys Trp Pro
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<212> DNA
<213> 里氏木霉
<400> 109
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<212> PRT
<213> 里氏木霉
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Asn Asn Asn Leu Gly Gly Asn Leu Asp Ser Thr Ser Ile Ser Lys Tyr
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Asp Gln Leu Val Gln Gly Cys Leu Ser Leu Gly Ala Tyr Cys Ile Val
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Asp Ile His Asn Tyr Ala Arg Trp Asn Gly Gly Ile Ile Gly Gln Gly
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Gly Pro Thr Asn Ala Gln Phe Thr Ser Leu Trp Ser Gln Leu Ala Ser
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Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Arg Val Trp Phe Gly Ile Met Asn Glu Pro
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His Asp Val Asn Ile Asn Thr Trp Ala Ala Thr Val Gln Glu Val Val
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Thr Ala Ile Arg Asn Ala Gly Ala Thr Ser Gln Phe Ile Ser Leu Pro
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Gly Asn Asp Trp Gln Ser Ala Gly Ala Phe Ile Ser Asp Gly Ser Ala
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Ala Ala Leu Ser Gln Val Thr Asn Pro Asp Gly Ser Thr Thr Asn Leu
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Ala Glu Cys Thr Thr Asn Asn Ile Asp Gly Ala Phe Ser Pro Leu Ala
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<212> DNA
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<400> 113
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<213> 烟曲霉
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Ile Trp Glu Ala Asn Ser Ile Ser Thr Ala Phe Thr Pro His Pro Cys
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275 280 285
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Thr Val Asp Thr Lys Ser Lys Phe Thr Val Val Thr Gln Phe Ile Thr
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Asp Asp Gly Thr Ser Ser Gly Thr Leu Lys Glu Ile Lys Arg Phe Tyr
325 330 335
Val Gln Asn Gly Lys Val Ile Pro Asn Ser Glu Ser Thr Trp Thr Gly
340 345 350
Val Ser Gly Asn Ser Ile Thr Thr Glu Tyr Cys Thr Ala Gln Lys Ser
355 360 365
Leu Phe Gln Asp Gln Asn Val Phe Glu Lys His Gly Gly Leu Glu Gly
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Met Gly Ala Ala Leu Ala Gln Gly Met Val Leu Val Met Ser Leu Trp
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<212> PRT
<213> 烟曲霉
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Met Lys His Leu Ala Ser Ser Ile Ala Leu Thr Leu Leu Leu Pro Ala
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Val Gln Ala Gln Gln Thr Val Trp Gly Gln Cys Gly Gly Gln Gly Trp
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Ser Gly Pro Thr Ser Cys Val Ala Gly Ala Ala Cys Ser Thr Leu Asn
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100 105 110
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115 120 125
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195 200 205
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Tyr Ala Leu Lys Gln Leu Asn Leu Pro Asn Val Ala Met Tyr Leu Asp
260 265 270
Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Leu Gly Pro Ala
275 280 285
Ala Thr Leu Phe Ala Lys Val Tyr Thr Asp Ala Gly Ser Pro Ala Ala
290 295 300
Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala Asn Tyr Asn Ala Trp Ser Leu
305 310 315 320
Ser Thr Cys Pro Ser Tyr Thr Gln Gly Asp Pro Asn Cys Asp Glu Lys
325 330 335
Lys Tyr Ile Asn Ala Met Ala Pro Leu Leu Lys Glu Ala Gly Phe Asp
340 345 350
Ala His Phe Ile Met Asp Thr Ser Arg Asn Gly Val Gln Pro Thr Lys
355 360 365
Gln Asn Ala Trp Gly Asp Trp Cys Asn Val Ile Gly Thr Gly Phe Gly
370 375 380
Val Arg Pro Ser Thr Asn Thr Gly Asp Pro Leu Gln Asp Ala Phe Val
385 390 395 400
Trp Ile Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asn Ser Thr Ser
405 410 415
Pro Arg Tyr Asp Ala His Cys Gly Tyr Ser Asp Ala Leu Gln Pro Ala
420 425 430
Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Gln Leu Leu Thr
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Asn Ala Asn Pro Ser Phe
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<212> PRT
<213> 黑曲霉
<220>
<221> 信号
<222> (1)..(26)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (27)..(332)
<400> 117
Met Lys Phe Phe Asn Ala Lys Gly Ser Leu Leu Ser Ser Gly Ile Tyr
-25 -20 -15
Leu Ile Ala Leu Thr Pro Phe Val Asn Ala Lys Cys Ser Leu Pro Ser
-10 -5 -1 1 5
Ser Tyr Ser Trp Ser Ser Thr Asp Ala Leu Ala Thr Pro Lys Ser Gly
10 15 20
Trp Thr Ala Leu Lys Asp Phe Thr Asp Val Val Ser Asp Gly Lys His
25 30 35
Ile Val Tyr Ala Ser Thr Thr Asp Glu Ala Gly Asn Tyr Gly Ser Met
40 45 50
Thr Phe Gly Ala Phe Ser Glu Trp Ser Asn Met Ala Ser Ala Ser Gln
55 60 65 70
Thr Ala Thr Pro Phe Asn Ala Val Ala Pro Thr Leu Phe Tyr Phe Lys
75 80 85
Pro Lys Ser Ile Trp Val Leu Ala Tyr Gln Trp Gly Ser Ser Thr Phe
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Thr Tyr Arg Thr Ser Gln Asp Pro Thr Asn Val Asn Gly Trp Ser Ser
105 110 115
Glu Gln Ala Leu Phe Thr Gly Lys Leu Ser Asp Ser Ser Thr Gly Ala
120 125 130
Ile Asp Gln Thr Val Ile Gly Asp Asp Thr Asn Met Tyr Leu Phe Phe
135 140 145 150
Ala Gly Asp Asn Gly Lys Ile Tyr Arg Ser Ser Met Ser Ile Asp Glu
155 160 165
Phe Pro Gly Ser Phe Gly Ser Gln Tyr Glu Glu Ile Leu Ser Gly Ala
170 175 180
Thr Asn Asp Leu Phe Glu Ala Val Gln Val Tyr Thr Val Asp Gly Gly
185 190 195
Glu Gly Asn Ser Lys Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser Thr
200 205 210
Gly His Arg Tyr Phe Arg Ser Phe Thr Ala Ser Ser Leu Gly Gly Glu
215 220 225 230
Trp Thr Ala Gln Ala Ala Ser Glu Asp Lys Pro Phe Ala Gly Lys Ala
235 240 245
Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Glu Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val
250 255 260
Arg Asn Asn Pro Asp Gln Thr Met Thr Val Asp Pro Cys Asn Leu Gln
265 270 275
Leu Leu Tyr Gln Gly His Asp Pro Asn Ser Ser Gly Asp Tyr Asn Leu
280 285 290
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<211> 332
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<213> 黑曲霉
<220>
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<221> 成熟肽
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170 175 180
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185 190 195
Glu Gly Asp Ser Lys Tyr Leu Met Ile Val Glu Ala Ile Gly Ser Thr
200 205 210
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Asn Ser Gly Ala Thr Trp Thr Asp Asp Ile Ser His Gly Asp Leu Val
250 255 260
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Leu Leu Tyr Gln Gly His Asp Pro Asn Ser Asn Ser Asp Tyr Asn Leu
280 285 290
Leu Pro Trp Lys Pro Gly Val Leu Thr Leu Lys Gln
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<212> PRT
<213> 黑曲霉
<220>
<221> 信号
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<220>
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<400> 119
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-15 -10 -5
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-1 1 5 10
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15 20 25
Gln Tyr Thr Leu Thr Lys Asn Ser Lys Thr Pro Ala Ile Ile Lys Ala
30 35 40 45
Asp Phe Gly Ala Leu Thr Pro Glu Asn Ser Met Lys Trp Asp Ala Thr
50 55 60
Glu Pro Ser Arg Gly Gln Phe Ser Phe Ser Gly Ser Asp Tyr Leu Val
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Asn Phe Ala Gln Ser Asn Asn Lys Leu Ile Arg Gly His Thr Leu Val
80 85 90
Trp His Ser Gln Leu Pro Ser Trp Val Gln Ser Ile Thr Asp Lys Asn
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190 195 200 205
Ile Pro Ile Asp Gly Ile Gly Ser Gln Thr His Leu Ser Ala Ala Leu
210 215 220
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225 230 235
Asp Ile Ala Gly Ala Ser Ser Thr Asp Tyr Val Glu Val Val Glu Ala
240 245 250
Cys Leu Asn Gln Pro Lys Cys Ile Gly Ile Thr Val Trp Gly Val Ala
255 260 265
Asp Pro Asp Ser Trp Arg Ser Ser Ser Thr Pro Leu Leu Phe Asp Ser
270 275 280 285
Asn Tyr Asn Pro Lys Pro Ala Tyr Thr Ala Ile Ala Asn Ala Leu
290 295 300

Claims (16)

1.一种用于处理作物籽粒的方法，该方法包括以下步骤：
a)将籽粒浸泡在水中，以产生浸泡的籽粒；
b)碾磨这些浸泡的籽粒；和
c)在有效量的具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽或具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH43多肽的存在下处理这些浸泡的籽粒；
其中在步骤b)之前、过程中或之后进行步骤c)。
2.如权利要求1所述的方法，该方法进一步包括在蛋白酶的存在下处理这些浸泡的籽粒。
3.如上述权利要求中任一项所述的方法，该方法进一步包括在纤维素分解酶的存在下处理这些浸泡的籽粒。
4.如上述权利要求中任一项所述的方法，该方法进一步包括在选自下组的酶的存在下处理这些浸泡的籽粒，该组由以下组成：内切葡聚糖酶、木聚糖酶、纤维二糖水解酶I、纤维二糖水解酶II、GH61、或其组合。
5.如上述权利要求中任一项所述的方法，该方法进一步包括在内切葡聚糖酶的存在下处理这些浸泡的籽粒。
6.如上述权利要求中任一项所述的方法，该方法进一步包括在木聚糖酶的存在下处理这些浸泡的籽粒。
7.如上述权利要求中任一项所述的方法，其中将这些籽粒在水中浸泡约2-10小时、优选约3小时。
8.如上述权利要求中任一项所述的方法，其中该浸泡在约40℃与约60℃之间的温度、优选约50℃下进行。
9.如上述权利要求中任一项所述的方法，其中该浸泡在酸性pH、优选约3-5、例如约3-4下进行。
10.如上述权利要求中任一项所述的方法，其中该浸泡在0.01％-1％之间、优选0.05％-0.3％、尤其是0.1％SO2和/或NaHSO3的存在下进行。
11.如上述权利要求中任一项所述的方法，其中这些作物籽粒来自玉米(玉蜀黍)、水稻、大麦、高粱大豆、或果壳、或小麦。
12.如上述权利要求中任一项所述的方法，其中具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的该GH62多肽来源于青霉属的菌株，例如胶囊青霉或草酸青霉的菌株；篮状菌属的菌株，例如褐红篮状菌的菌株；或曲霉属的菌株，例如黑曲霉的菌株。
13.如上述权利要求中任一项所述的方法，该方法进一步包括在GH10木聚糖酶或GH11木聚糖酶的存在下处理这些浸泡的籽粒。
14.如上述权利要求中任一项所述的方法，其中该GH10木聚糖酶来源于篮状菌属的菌株，例如雷塞氏篮状菌的菌株；或长毛盘菌属，例如褐孢长毛盘菌的菌株；或曲霉属的菌株，例如黑曲霉的菌株。
15.具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH62多肽或具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的GH43多肽用于增强一种或多种酶的湿磨益处的用途。
16.GH11木聚糖酶用于增强一种或多种酶的湿磨益处的用途。
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