CN108368139B - 取代的恶唑烷酮化合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
式(I)所示的恶唑烷酮化合物，或其晶型、药学上可接受的盐、前药、代谢物、立体异构体、同位素变体、水合物或溶剂合物，包含该化合物的药物组合物。该化合物显示对广谱菌的抑制活性和低毒性，可作为抗生素。
Description
技术领域
本发明属于医药领域。具体地，本发明涉及氘代恶唑烷酮衍生物及其用途，更具体地是，涉及的恶唑烷酮化合物可作为抗生素。
背景技术
抗生素是临床上使用最频繁的基本药物之一。由于历史原因造成的抗生素不规范使用，造成细菌对现有抗生素严重的抗药性。多药耐药(MDR)的细菌感染已经成为全球公共健康的主要威胁之一。正因为多药耐药，抗菌素的联合用药也日趋增多，药物-药物相互作用也增加了不良反应的发生风险。根据最近国家食药监总局发布的2013年国家药品不良反应监测年度报告，由抗生素引起的不良反应高居不良反应/事件报告的首位。对目前绝大多数可用的抗生素都有抗药性的“超级细菌”也以惊人的速度在世界范围蔓延。另一方面，新型有效的抗生素研发并没有伴随MDR细菌的增加而增加。根据美国FDA新药评价中心(CDER)的数据，自1980年以来新批准的抗生素数量反而在不断减少。现有的抗生素已经无法治愈日益增加的感染和耐药。
Sivextro(通用名：tedizolid磷酸盐，曾用名：TR-701)由Cubist制药公司开发，是一种恶唑烷酮类抗生素。Sivextro是一种前药，在体内可被磷酸酶迅速转化为具有生物活性的tedizolid。后者能够和细菌的核糖体50S亚基结合，从而抑制蛋白质的合成。尽管自2000年辉瑞的同类抗菌素利奈唑胺获得美国FDA批准以后，至少有10个同类化合物进入临床，但Sivextro是第一个获得FDA批准的二代恶唑烷酮类抗生素。和一代产品利奈唑胺相比，Sivextro对一些细菌的体外抑制活性要高2-8倍，安全性在一定程度上也有所提高。
氘代修饰是改进药物代谢性质的一种有潜在吸引力的策略。氘是氢的安全、稳定、非辐射性的同位素。与C-H键相比，氘与碳形成的C-D键因为振动频率较低，所以较强。此外，药物的“重氢”型式可能对降解更稳定且在生物体内维持更长时间。氘化药物可对安全性、功效及耐受性都有正面影响，具有优良的研究前景。
发明内容
针对以上技术问题，本发明公开了一种恶唑烷酮化合物及包含该化合物的组合物，其作为一种有效的抗菌活性化合物和/或具有更好药效学/药代动力学性能。
对此，本发明采用的技术方案如下：
本发明的第一方面中，提供了一种式(I)所示的恶唑烷酮化合物，或其晶型、药学上可接受的盐、前药、代谢物、立体异构体、同位素变体、水合物或溶剂化合物：
式中：
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14各自独立地为氢、氘、卤素或三氟甲基；
附加条件是，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14中至少一个是氘代的或氘。
作为本发明的进一步改进，R1、R2、R3各自独立地为氘或氢。
作为本发明的进一步改进，R4、R5、R6各自独立地为氘或氢。
作为本发明的进一步改进，R7、R8、R9各自独立地为氘或氢。
作为本发明的进一步改进，R10、R11、R12各自独立地为氘或氢。
作为本发明的进一步改进，R13、R14各自独立地为氘或氢。
在另一优选例中，所述化合物选自下组化合物或其药学上可接受的盐，但不局限于下列化合物：
在另一优选例中，氘在氘代位置的氘同位素含量至少是大于天然氘同位素含量(0.015％)，较佳地大于30％，更佳地大于50％，更佳地大于75％，更佳地大于95％，更佳地大于99％。
具体地说，在本发明中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14各氘代位置中氘同位素含量至少是5％，较佳地大于10％，更佳地大于15％，更佳地大于20％，更佳地大于25％，更佳地大于30％，更佳地大于35％，更佳地大于40％，更佳地大于45％，更佳地大于50％，更佳地大于55％，更佳地大于60％，更佳地大于65％，更佳地大于70％，更佳地大于75％，更佳地大于80％，更佳地大于85％，更佳地大于90％，更佳地大于95％，更佳地大于99％。
在另一优选例中，式(I)中化合物的R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14，至少其中一个R含氘，更佳地两个R含氘，更佳地三个R含氘，更佳地四个R含氘，更佳地五个R含氘，更佳地六个R含氘，更佳地七个R含氘，更佳地八个R含氘，更佳地九个R含氘，更佳地十个R含氘，更佳地十一个R含氘，更佳地十二个R含氘，更佳地十三个R含氘，更佳地十四个R含氘。
在另一优选例中，所述化合物不包括非氘代化合物。
在本发明的第二方面中，提供了一种制备药物组合物的方法，包括步骤：将药学上可接受的载体与本发明第一方面中所述的化合物，或其晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物进行混合，从而形成药物组合物。
在本发明的第三方面中，提供了一种药物组合物，它含有药学上可接受的载体和本发明第一方面中所述的化合物，或其晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物。
本发明的恶唑烷酮化合物显示出对广谱菌、耐二甲氧基苯青霉素金黄色葡萄球菌以及耐万古霉素肠球菌具有抑制活性和在相对低浓度或在体内具有相对优异的抗菌活性。
进一步地，本发明化合物可以显示对包括革兰氏阳性菌如葡萄球菌、肠道球菌和链球菌，厌氧微生物如类菌体和梭菌体以及耐酸微生物如结核分支菌、鸟分支菌在内的人和动物病原体的有力抗菌活性。
本发明的组合物可以包括至少一种具有类似于恶唑烷酮衍生物功能的有效成分。
至于配制药物组合物，至少一种式(I)的化合物可以与至少一种药物可接受载体混合。药物可接受载体可以包括生理盐水、无菌水、林格氏溶液(Ringer’s solution)、生理盐水缓冲溶液、葡萄糖溶液、麦芽糖糊精溶液、甘油、乙醇等。
药物组合物可以含有常规赋形剂，如抗氧剂、缓冲、清污剂(soil cleaner)等。组合物也与稀释剂、崩解剂(diaintegrant)、表面活性剂、粘合剂、润滑剂、水溶液、悬浮液等混合，形成注射剂、粉剂、胶囊、颗粒、片剂等。优选情况下，根据疾病或组分，制剂可通过使用Remington’s Pharmaceutical Science(最新版)(Mack Publishing Company，EastonPA等)所述的方法制备。
本发明的化合物可以口服或肠道外给药，例如静脉、皮下、腹内、局部给药等。化合物的剂量可以随使用的具体化合物、给药方式、所要治疗的病症的症状和严重性、以及与治疗个体相关的各种身体因素而变化。当本发明的化合物在需要时以每千克体重约8-30毫克、优选12-21毫克的日剂量对个体给药时，根据本发明的用法可以获得满意的结果。更优选上述日剂量分成每天几次给药。
本发明的恶唑烷酮衍生物显示对广谱菌具有抑制活性和低毒性。通过具有羟基的化合物与氨基酸或磷酸酯反应制得的前体药物具有高水溶性。
进一步地，本发明的衍生物可以显示对包括革兰氏阳性菌如葡萄球菌、肠道球菌和链球菌，厌氧微生物如类菌体和梭菌体以及耐酸微生物如结核分支菌、鸟分支菌在内的人和动物病原体的有力抗菌活性。
因此，将含有该恶唑烷酮衍生物的组合物用于抗生素中。
本发明还包括同位素标记的化合物，等同于原始化合物在此公开。可以列为本发明的化合物同位素的例子包括氢，碳，氮，氧，磷，氟和氯同位素，分别如2H，3H，13C，14C，15N，17O，18O，31P，32P，18F以及36Cl。本发明中的化合物，或对映体，非对映体，异构体，或药学上可接受的盐或溶剂化物，其中含有上述化合物的同位素或其他其他同位素原子都在本发明的范围之内。本发明中某些同位素标记化合物，例如3H和14C的放射性同位素也在其中，在药物和底物的组织分布实验中是有用的。氚，即3H和碳-14，即14C，它们的制备和检测比较容易，是同位素中的首选。同位素标记的化合物可以用一般的方法，通过用易得的同位素标记试剂替换为非同位素的试剂，用示例中的方案可以制备。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明公开的取代的恶唑烷酮类化合物及包含该化合物的组合物对光谱菌(包括革兰氏阳性菌如葡萄球菌、肠道球菌和链球菌，厌氧微生物如类菌体和梭菌体以及耐酸微生物如结核分支菌、鸟分支菌)具有优异的抑制性，同时具有更好的药代动力学参数特性。可以改变剂量并形成长效制剂，改善适用性。用氘取代化合物中的氢原子，由于其氘同位素效应，能够提高化合物在动物体内的药物浓度，以提高药物疗效。用氘取代化合物中的氢原子，由于某些代谢产物被抑制，可能提高化合物的安全性。
具体实施方式
下面更具体地描述本发明式I结构化合物的制备方法，但这些具体方法不对本发明构成任何限制。本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述的或本领域已知的各种合成方法组合起来而方便地制得，这样的组合可由本发明所属领域的技术人员容易地进行。
实施例1制备(R)-3-(4-(2-(2-d3-甲基四唑-5-基)吡啶-5-基)-3-氟苯基)-5-羟
甲基恶唑烷-2-酮磷酸酯(化合物T-1)
具体合成步骤如下：
步骤1 2-(2-d3-甲基四唑-5-基)-5-溴吡啶(化合物2)的合成。
将5-溴-2-(2H-四唑-5-基)吡啶(0.5g，2.2mmol)和K2CO3(0.61g，4.42mmol)溶于10mL DMF中，冰浴下缓慢滴加氘代碘甲烷(0.42g，2.88mmol)。滴毕在冰浴下搅拌1小时，TLC检测原料消失。将40mL水加入反应液中，用乙酸乙酯萃取，有机相用20mL饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到油状物2-(2-(甲基-d3)四唑-5-基)-5-溴吡啶(化合物2)0.27g，收率52.5％。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.83(dd，J＝2.4，0.8Hz，1H)，8.14(dd，J＝8.4，0.8Hz，1H)，8.00(dd，J＝8.4，2.3Hz，1H)。ESI-MS：243[M++1]。
步骤2(R)-3-(3-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮(化合物4)的合成。
将(R)-3-(4-溴-3-氟苯基)-5-羟甲基-恶唑烷-2-酮(0.58g，2.0mmol)，双联频哪醇硼酸酯(0.66g，2.6mmol)，乙酸钾(0.29g，3.0mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.07g，0.1mmol)加入50mL两口瓶，加入30ml二氧六环，用氮气置换三次，90℃反应过夜。将反应液冷却至室温，加入60mL水，用乙酸乙酯萃取＝，有机相用20mL饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到白色固体(R)-3-(3-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮(化合物4)0.55g，收率81.6％。ESI-MS：338[M++1]。
步骤3(R)-3-(4-(2-(2-(甲基-d3)四唑-5-基)吡啶-5-基)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮(化合物5)的合成。
将2-(2-(甲基-d3)四唑-5-基)-5-溴吡啶(0.15g，0.6mmol)，(R)-3-(3-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-5-(羟甲基)恶唑烷-2-酮(0.21g，0.6mmol)，磷酸钾(0.27g，1.3mmol)和Pd(dppf)Cl2(0.045g，0.06mmol)溶于20mL二氧六环中，加入2mL水，氮气球置换三次，90℃反应过夜。将反应液冷却至室温，加入50mL水，用乙酸乙酯萃取，有机相用20mL饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到油状物(R)-3-(4-(2-(2-(甲基-d3)四唑-5-基)吡啶-5-基)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮(化合物5)0.15g，收率64.8％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.94(s，1H)，8.26-8.17(m，2H)，7.78-7.68(m，2H)，7.53(dd，J＝8.6，2.3Hz，1H)，5.25(q，J＝5.5Hz，1H)，4.77(ddt，J＝9.6，6.4，3.5Hz，1H)，4.16(t，J＝9.1Hz，1H)，3.91(dd，J＝9.0，6.1Hz，1H)，3.71(ddd，J＝12.4，5.5，3.3Hz，1H)，3.59(ddd，J＝12.4，5.8，3.9Hz，1H)。ESI-MS：374[M++1]。
步骤4(R)-3-(4-(2-(2-(甲基-d3)四唑-5-基)吡啶-5-基)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮磷酸酯(化合物)的合成。
将(R)-3-(4-(2-(2-(甲基-d3)四唑-5-基)吡啶-5-基)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮(0.15g，0.4mmol)和三乙胺(0.25g，2.4mmol)溶于20mL四氢呋喃中，冰浴下缓慢加入三氯氧磷(0.37g，2.43mmol)，冰浴下反应3小时后，加入5mL水继续搅拌1小时。旋蒸蒸除大部分四氢呋喃，加入30mL饱和碳酸钠溶液调节pH＝10，用二氯甲烷洗涤，然后将水相用3mol/L的盐酸调pH至1-2，有大量固体析出。过滤，滤饼水洗，干燥，得到(R)-3-(4-(2-(2-(甲基-d3)四唑-5-基)吡啶-5-基)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮磷酸酯45mg，收率24.7％。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.94(s，1H)，8.22(d，2H)，7.71(d，J＝19.7Hz，2H)，7.52(s，1H)，4.95(m，1H)，3.92-4.23(m，4H)。ESI-MS：454[M++1]。
实施例2制备(R)-3-(4-(2-(2-甲基四唑-5-基)吡啶-5-基-3，4，6-d3)-3-氟苯
基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮磷酸酯(化合物T-2)
具体合成步骤如下：
步骤1 2-(2-甲基四唑-5-基)-5-溴吡啶(化合物6)的合成。
将5-溴-2-(2H-四唑-5-基)吡啶(0.5g，2.2mmol)和K2CO3(0.61g，4.42mmol)溶于10mLDMF中，冰浴下缓慢滴加碘甲烷(0.41g，2.88mmol)。滴毕在冰浴下搅拌1小时，TLC检测原料消失。将40mL水加入反应液中，用乙酸乙酯萃取，有机相用20mL饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到油状物2-(2-甲基四唑-5-基)-5-溴吡啶0.28g，收率52.7％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.83(d，J＝2.3Hz，1H)，8.14(dd，J＝8.4，0.7Hz，1H)，8.00(dd，J＝8.4，2.3Hz，1H)，4.45(s，3H)。ESI-MS：240[M++1]。
步骤2 2-(2-甲基四唑-5-基)-5-溴-3，4，6-d3-吡啶(化合物7)的合成。
将2-(2-甲基四唑-5-基)-5-溴吡啶(0.28g，1.17mmol)加入到15mL10％氘氧化钠的重水溶液中，氮气保护下于180℃反应5小时。冷却至室温，加入10mL重水，用二氯甲烷萃取，有机相用10mL饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经硅胶柱分离得淡黄色油状物0.16g，收率56.5％。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ4.44(s，3H)。ESI-MS：243[M++1]。
步骤3(R)-3-(4-(2-(2-甲基四唑-5-基)吡啶-5-基-3，4，6-d3)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮(化合物8)的合成。
将2-(2-甲基四唑-5-基)-5-溴-3，4，6-d3-吡啶(0.15g，0.6mmol)，(R)-3-(3-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-5-(羟甲基)恶唑烷-2-酮(0.21g，0.6mmol)，磷酸钾(0.27g，1.3mmol)和Pd(dppf)Cl2(0.045g，0.06mmol)溶于20mL二氧六环中，加入2mL水，氮气球置换三次，90℃反应过夜。将反应液冷却至室温，加入50mL水，用乙酸乙酯萃取，有机相用20mL饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到油状物(R)-3-(4-(2-(2-甲基四唑-5-基)吡啶-5-基-3，4，6-d3)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮0.15g，收率64.8％。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.82-7.66(m，2H)，7.53(d，J＝9.1Hz，1H)，5.27(t，J＝5.6Hz，1H)，4.75(d，J＝9.0Hz，1H)，4.48(s，3H)，4.16(t，J＝9.1Hz，1H)，3.91(t，J＝7.5Hz，1H)，3.75-3.53(m，2H)。ESI-MS：374[M++1]。
步骤4(R)-3-(4-(2-(2-甲基四唑-5-基)吡啶-5-基-3，4，6-d3)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮磷酸酯(化合物T-2)的合成。
将(R)-3-(4-(2-(2-甲基四唑-5-基)吡啶-5-基-3，4，6-d3)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮(0.15g，0.4mmol)和三乙胺(0.25g，2.4mmol)溶于20mL四氢呋喃中，冰浴下缓慢加入三氯氧磷(0.37g，2.43mmol)，冰浴下反应3小时后，加入5mL水继续搅拌1小时。旋蒸蒸除大部分四氢呋喃，加入30mL饱和碳酸钠溶液调节pH＝10，用二氯甲烷洗涤，然后将水相用3mol/L的盐酸调pH至1-2，有大量固体析出。过滤，滤饼水洗，干燥，得到(R)-3-(4-(2-(2-甲基四唑-5-基)吡啶-5-基-3，4，6-d3)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮磷酸酯46mg，收率25％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.80-7.67(m，2H)，7.52(dd，J＝8.7，2.2Hz，1H)，4.96(m，1H)，4.48(s，3H)，4.23(t，J＝9.1Hz，1H)，4.18-3.99(m，2H)，3.96-3.88(m，1H)。ESI-MS：454[M++1]。
生物活性测试
(1)体内抗菌活性的评估。
采用Chemotheraphy，29(1)，76，(1981)中描述的方法测试恶唑烷酮化合物的抗菌活性，利用琼脂稀释溶液将包括耐二甲氧基苯青霉素金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐万古霉素肠道球菌(VRE)在内的抗菌活性表示为最小抑制浓度(MIC50，微克/毫升)。结果如下表1所示。
表1实施例化合物抗菌活性测试结果
| 化合物 | MRSA最小抑制浓度(MIC50，μM) | VRE最小抑制浓度(MIC50，μM) |
| T-1 | ＜1 | ＜1 |
| T-2 | ＜1 | ＜1 |
实验结果表明本发明化合物对耐二甲氧基苯青霉素金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐万古霉素肠道球菌(VRE)显示足够的抗菌活性效效力。因此，本发明的化合物可用作抗生素。
(2)大鼠中的药代动力学评价
8只雄性Sprague-Dawley大鼠，7-8周龄，体重约210g，分成2组，每组4只，单次口服给予5mg/kg剂量的(a)对照组：(R)-3-(4-(2-(2-甲基四唑-5-基)吡啶-5-基)-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮；(b)试验组：实施例化合物，比较其药代动力学差异。
大鼠采用标准饲料饲养，给予水。试验前16小时开始禁食。药物用PEG400和二甲亚砜溶解。眼眶采血，采血的时间点为给药后0.083小时，0.25小时、0.5小时、1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、12小时和24小时。
大鼠吸入乙醚后短暂麻醉，眼眶采集300μL血样于试管。试管内有30μL1％肝素盐溶液。使用前，试管于60℃烘干过夜。在随后一个时间点血样采集完成之后，大鼠乙醚麻醉后处死。
血样采集后，立即温和地颠倒试管至少5次，保证混合充分后放置于冰上。血样在4℃5000rpm离心5分钟，将血浆与红细胞分离。用移液器吸出100μL血浆到干净的塑料离心管中，标明化合物的名称和时间点。血浆在进行分析前保存在-80℃。用LC-MS/MS测定血浆中本发明化合物的浓度。药代动力学参数基于每只动物在不同时间点的血药浓度进计算。
实验结果表明，相对于对照化合物，本发明化合物在动物体内具有更好的药物动力学，因而具有更好的药效学和治疗效果。
(3)代谢稳定性评价
微粒体实验：人肝微粒体：0.5mg/mL，BD Gentest；大鼠肝微粒体：0.5mg/mL，Xenotech；小鼠肝微粒体：0.5mg/mL，Xenotech；辅酶(NADPH/NADH)：1mM，Sigma LifeScience；氯化镁：5mM，100mM磷酸盐缓冲剂(pH为7.4)。
储备液的配制：精密称取一定量的实施例化合物粉末，并用DMSO分别溶解至5mM。
磷酸盐缓冲液(100mM，pH7.4)的配制：取预先配好的0.5M磷酸二氢钾150mL和700mL的0.5M磷酸氢二钾溶液混合，再用0.5M磷酸氢二钾溶液调节混合液pH值至7.4，使用前用超纯水稀释5倍，加入氯化镁，得到磷酸盐缓冲液(100mM)，其中含100mM磷酸钾，3.3mM氯化镁，pH为7.4。
配制NADPH再生系统溶液(含有6.5mM NADP，16.5mM G-6-P，3U/mL G-6-P D，3.3mM氯化镁)，使用前置于湿冰上。
配制终止液：含有50ng/mL盐酸普萘洛尔和200ng/mL甲苯磺丁脲(内标)的乙腈溶液。取25057.5μL磷酸盐缓冲液(pH7.4)至50mL离心管中，分别加入812.5μL人肝微粒体，混匀，得到蛋白浓度为0.625mg/mL的肝微粒体稀释液。取25057.5μL磷酸盐缓冲液(pH7.4)至50mL离心管中，分别加入812.5μL大鼠肝微粒体，混匀，得到蛋白浓度为0.625mg/mL的肝微粒体稀释液。取25057.5μL磷酸盐缓冲液(pH7.4)至50mL离心管中，分别加入812.5μL小鼠肝微粒体，混匀，得到蛋白浓度为0.625mg/mL的肝微粒体稀释液。
样品的孵育：用含70％乙腈的水溶液将相应化合物的储备液分别稀释至0.25mM，作为工作液，备用。分别取398μL的人肝微粒体或者大鼠肝微粒体或者小鼠肝微粒体稀释液加入96孔孵育板中(N＝2)，分别加入2μL 0.25mM的的工作液中，混匀。
代谢稳定性的测定：在96孔深孔板的每孔中加入300μL预冷的终止液，并置于冰上，作为终止板。将96孔孵育板和NADPH再生系统置于37℃水浴箱中，100转/分钟震荡，预孵5min。从孵育板每孔取出80μL孵育液加入终止板，混匀，补充20μL NADPH再生系统溶液，作为0min样品。再向孵育板每孔加入80μL的NADPH再生系统溶液，启动反应，开始计时。相应化合物的反应浓度为1μM，蛋白浓度为0.5mg/mL。分别于反应10、30、90min时，各取100μL反应液，加入终止板中，涡旋3min终止反应。将终止板于5000×g，4℃条件下离心10min。取100μL上清液至预先加入100μL蒸馏水的96孔板中，混匀，采用LC-MS/MS进行样品分析。
数据分析：通过LC-MS/MS系统检测相应化合物及内标的峰面积，计算化合物与内标峰面积比值。通过化合物剩余量的百分率的自然对数与时间作图测得斜率，并根据以下公式计算t1/2和CLint，其中V/M即等于1/蛋白浓度。
对Tedizolid、化合物T-1和T-2按照上述步骤进行分析，结果如表2所示。
表2实施例化合物代谢稳定性的测定结果
如表2所示，本发明化合物在人肝微粒体、大鼠肝微粒体和小鼠肝微粒体实验中都表现出优异的代谢稳定性，且都显著优于未氘代的化合物Tedizolid。由此说明，本发明的氘代化合物T-1和T-2明显改进了未氘代化合物的代谢稳定性。
应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则份数和百分比为重量份和重量百分比。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。
Claims (6)
1.化合物或其药学上可接受的盐，其中，所述化合物选自：
2.一种药物组合物，其含有药学上可接受的载体和权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐。
3.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，或权利要求2所述的药物组合物在制备抑制革兰氏阳性菌、厌氧微生物或耐酸微生物的药物中的用途。
4.根据权利要求3所述的用途，其中，革兰氏阳性菌选自葡萄球菌、肠道球菌或链球菌。
5.根据权利要求3所述的用途，其中，厌氧微生物选自类菌体或梭菌体。
6.根据权利要求3所述的用途，其中，耐酸微生物选自结核分支菌或鸟分支菌。
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| "The drug industry is seeking profits by modifying hydrogen in existing medications";Katharine S;《Nature》;20090316;第1页 * |
| "恶唑烷酮类抗菌药物的研究";王鲁燕等;《药学进展》;20021231;第26卷(第1期);第16-21页 * |
| "氘代作用在药物研究中的应用";江文峰等;《齐鲁药事》;20101231;第29卷(第11期);第682-684页 * |
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