CN108348537B - 用cmp活化吡喃壬酮糖酸类似化合物治疗和预防奈瑟氏淋病球菌感染 - Google Patents

用cmp活化吡喃壬酮糖酸类似化合物治疗和预防奈瑟氏淋病球菌感染 Download PDF

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Abstract

本发明提供了用于治疗或预防受治者中奈瑟氏淋病球菌感染的方法，包括向受治者施用有效量的通式I的化合物或包含所述化合物，或其药学可接受的盐、或其溶剂化物或水合物，或其立体异构体的药物组合物。

Description

用CMP活化吡喃壬酮糖酸类似化合物治疗和预防奈瑟氏淋病 球菌感染
技术领域
本发明涉及奈瑟氏淋病球菌的医疗条件。更具体地说，本发明涉及基于胞苷5-单磷酸吡喃壬酮糖酸(CMP-NulO)类似物的治疗和预防奈瑟氏淋病球菌感染的方法。
背景技术
唾液酸是在每个脊椎动物和一些高级无脊椎动物的组织中表达的九碳糖家族(属于壬糖类或吡喃壬酮糖酸类的一个较大家族)[1]。唾液酸具有广泛的生物学作用，包括调节免疫功能的几个方面[2]。例如，细胞表面相关的唾液酸抑制补体的活化作用。作为免疫调节的一个例子，羊红细胞对旁路途径的裂解具有抗性，因为表面唾液酸增加了H因子(fH；旁路途径抑制剂)的亲合力[3]。以神经氨酸苷酶处理羊红细胞可降低fH的亲和力，可激活补体并促进溶血。最近的工作表明，fH C末端结构域19和20分别同时结合宿主细胞上的C3b(补体因子，结合微生物细胞表面)和糖胺聚糖(包括唾液酸)，这抑制了旁路途径[4]。唾液酸的缺失降低了fH结合并增强了旁路途径的活化。典型地，fH通过唾液酸结合脊椎动物细胞表面，使宿主细胞得以受到优先保护(即减少补体介导的损伤)。
许多微生物在它们的表面上表达唾液酸以及其他独特的微生物吡喃壬酮糖酸类(即legionaminic(Leg)酸和pseudaminic(Pse)酸)，它们以多种方式促成发病，包括破坏补体活化，促进生物膜形成和促进菌落形成[5]。一些病原体如奈瑟氏淋病球菌，流感嗜血杆菌，嗜睡菌(嗜睡流感嗜血杆菌)和A组脑膜炎奈瑟球菌缺乏合成唾液酸或吡喃壬酮糖酸类的能力，但能从宿主中获取这些分子(如Neu5Ac或Neu5Gc或其CMP活化形式：CMP-Neu5Ac)。其他病原体，例如大肠杆菌K1，无乳链球菌B、C、W和Y组，奈瑟氏脑膜炎球菌，空肠弯曲杆菌和某些特定的钩端螺旋体可以从头合成吡喃壬酮糖酸衍生物Neu5Ac，Leg5Ac7Ac或Pse5Ac7Ac。奈瑟氏淋病球菌靠淋球菌乳-N-新四糖(LNnT)脂寡糖(LOS)的唾液酸化，通过降低IgG针对特定的、比方说孔蛋白B(PorB)那样的细菌靶标的结合，来增强它们对补体依赖性杀伤的抵抗[6]，这使得经典途径减弱。LNnT LOS唾液酸化还增强fH结合，这也导致旁路途径的抑制[7]。
奈瑟氏淋病球菌(N.gonorrhoeae)对几乎每种常规抗生素都具有抗性。在过去的3年中，对头孢曲松的抵抗已经迎来了一个潜在无法治疗的淋病时代。目前迫切需要针对这种疾病的新型治疗剂和疫苗。LOS唾液酸化是淋球菌发病机制的一个重要方面，与其野生型相比，缺乏唾液酸化LOS能力的同基因突变体在体内处于劣势[8]。使淋球菌失去其LOS唾液酸化能力成为一种新的预防或治疗策略。
美国专利申请序列号14/627,396公开了用于治疗或预防受治者中的奈瑟氏淋病球菌感染的胞苷5’-单磷酸吡喃壬酮糖酸(CMP-NulO)类似物。
另外，发明人知道还有其他文件[36-46]。
目前存在提供更有效的用于治疗或预防的CMP-NulO类似物的需求。而且，需要对受治者呈现低毒性作用的CMP-NulO类似化合物。
发明内容
本发明涉及基于胞苷5’-单磷酸吡喃壬酮糖酸(CMP-NulO)类似物治疗或预防受治者奈瑟氏淋病球菌感染的方法。更具体地说，本发明的化合物涉及CMP-3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(CMP-KDN)。由于3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN，也称为3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-2-吡喃壬酮糖酸或者2-酮基-3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-壬酸)是在人体中发现的、以低水平存在的糖，所以预计使用本发明化合物相关的任何毒性作用都将很低。
因此，本发明根据以上所述提供以下内容：
(1)一种治疗或预防受治者感染奈瑟氏淋病球菌的方法，包括向受治者施用有效量的下述通式I化合物或包含所述化合物或者其衍生物，或其药学上可接受的盐，或其溶剂化物或水合物，或其立体异构体的药物组合物，
Figure BDA0001609784940000031
其中：
R5选自下列组成的基团：XR，其中X是O或S，R是H或C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基；NR’R”，其中R’和R”各自独立地为H，C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基，或者取代的或未取代的苯基或烷基苯基，或R’和R”一起与N共同形成5-或6-元环，该环可任意被C1-C3烷基取代；XCYR，其中X和Y各自独立地是O或S，R是C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基，或者R是取代或未取代的苯基或烷基苯基；和F，Cl，Br或I的卤素原子；以及
R4和R7至R9各自独立地选自：H；XR其中X是O或S，R是H或C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基；OR’R”，其中R’和R”各自独立地为H或C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基；XCYR，其中X和Y各自独立地是O或S，R是C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基，或者R是取代或未取代的苯基或烷基苯基；NR’R”，其中R’和R”各自独立地为H，C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基，或者R’和R”与N一起共同形成5-或6-元环，该环可任意被C1至C3烷基取代；NH-乙酰基；NH硫代乙酰基；NH-叠氮基乙酰基；NH-(D-丙氨酰基)；NH-(N-乙酰基-D-丙氨酰基)；N3；O-Sia；O-Glc；苯甲酰氨基[NHCOPh]；NH-甘氨酸；NH-Succ；己酰氨基[NHCO(CH2)4CH3]；O-乳酰基；O-磷酰基；O-硫酰基；和卤原子F，Cl，Br或I。
(2)该方法(1)中，其中：
R4为OH，O-乙酰基，O-甲基或NH2；
R5是OH，O-乙酰基，O-甲基或巯基；
R7为OH，NH2，O-乙酰基，O-甲基，NH-乙酰基，NH-叠氮基乙酰基；NH-(D-丙氨酰基)，NH-(N-乙酰基-D-丙氨酰基)，F，H或N3；
R8为OH，NH2，N3，O-乙酰基，O-甲基，O-硫酰基，O-Sia或O-Glc；以及
R9为OH，O-乙酰基，N3，NH2，NH-乙酰基，NH-硫代乙酰基，苯甲酰氨基[NHCOPh]，NH-Gly，NH-Succ，SCH3，SO2CH3，己酰氨基[NHCO(CH2)4CH3]，O-甲基，O-乳酰基，O-磷酰基，O-硫酰基，O-Sia，F或H。
(3)该方法(1)中，其中，所述化合物具有以下通式IA
Figure BDA0001609784940000041
其中R4和R7至R9各自独立地如(1)中所定义。
(4)该方法(1)中，所述化合物具有以下通式II
Figure BDA0001609784940000042
其中R5和R7至R9各自独立地如(1)中所定义。
(5)该方法(1)中，所述化合物具有以下通式II
Figure BDA0001609784940000051
其中：
R5为OH，O-乙酰基，O-甲基或巯基；
R7为OH，NH2，O-乙酰基，O-甲基，NH-乙酰基，NH-叠氮基-乙酰基；NH-(D-丙氨酰基)，NH-(N-乙酰基-D-丙氨酰基)，F，H或N3；
R8为OH，NH2，N3，O-乙酰基，O-甲基，O-硫酰基，O-Sia或O-Glc；以及
R9为OH，O-乙酰基，N3，NH2，NH-乙酰基，NH-硫代乙酰基，苯甲酰氨基[NHCOPh]，NH-Gly，NH-Succ，SCH3，SO2CH3，己酰氨基[NHCO(CH2)4CH3]，O-甲基，O-乳酰基，O-磷酰基，O-硫酰基，O-Sia，F或H。
(6)该方法(1)中，所述化合物具有以下通式II
Figure BDA0001609784940000052
其中：
R5为OH，F，Cl，Br，甲基，O-乙酰基，O-甲基或巯基；
R7为OH，NH2，O-乙酰基，O-甲基，NH-乙酰基，NH-叠氮基-乙酰基，NH-(D-丙氨酰基)，NH-(N-乙酰基-D-丙氨酰基)，F，H或叠氮基；
R8为OH，NH2，N3，O-乙酰基，O-甲基，O-硫酰基，O-Sia或O-Glc；以及
R9为OH，O-乙酰基，N3，NH2，NH-乙酰基，NH-硫代乙酰基，苯甲酰氨基[NHCOPh]，NH-Gly，NH-Succ，SCH3，SO2CH3，己酰氨基[NHCO(CH2)4CH3]，O-甲基，O-乳酰基，O-磷酰基，O-硫酰基，O-Sia，F或H。
(7)该方法(1)中，所述化合物具有以下通式IIA
Figure BDA0001609784940000061
其中R7至R9各自独立地如(1)中所定义。
(8)该方法(1)中，所述化合物具有以下通式IIA
Figure BDA0001609784940000062
其中：
R7为OH，NH2，O-乙酰基，O-甲基，NH-乙酰基，NH-叠氮基-乙酰基，NH-(D-丙氨酰基)，NH-(N-乙酰基-D-丙氨酰基)，F，H或叠氮基；
R8为OH，NH2，N3，O-乙酰基，O-甲基，O-硫酰基，O-Sia或O-Glc；以及
R9为OH，O-乙酰基，N3，NH2，NH-乙酰基，NH-硫代乙酰基，苯甲酰氨基[NHCOPh]，NH-Gly，NH-Succ，SCH3，SO2CH3，己酰氨基[NHCO(CH2)4CH3]，O-甲基，O-乳酰基，O-磷酰基，O-硫酰基，O-Sia，F或H。
(9)该方法(1)中，所述化合物具有以下通式III
Figure BDA0001609784940000071
其中R5如(1)中所定义。
(10)该方法(1)中，所述化合物具有以下通式IV
Figure BDA0001609784940000072
其中R为H或C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基。
(11)该方法(1)中，所述化合物如以下通式V。
Figure BDA0001609784940000073
(12)该方法(1)中，所述化合物是下面的胞苷5’-单磷酸-3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸衍生物(CMP-KDN)
Figure BDA0001609784940000074
(13)该方法(1)中，所述化合物具有以下通式VI
Figure BDA0001609784940000081
其中R7如(1)中所定义。
(14)该方法(1)中，所述化合物具有以下通式VI
Figure BDA0001609784940000082
其中R7是N3，O-甲基，O-乙酰基，NH2或卤素原子。
(15)该方法(1)中，所述化合物如下式VII。
Figure BDA0001609784940000083
(16)该方法(1)中，所述化合物如下式所示的胞苷5’-单磷酸-3，7-二脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(CMP-KDN7N3)
Figure BDA0001609784940000084
(17)该方法(1)中，所述化合物为：
3-脱氧-9-O-乙酰基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN9OAc)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝OH，R8＝OH，R9＝O-乙酰基)；
3-脱氧-8-O-乙酰基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN8OAc)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝OH，R8＝O-乙酰基，R9＝OH)；
3-脱氧-7-O-乙酰基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN7OAc)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝O-乙酰基，R8＝OH，R9＝OH)；
3-脱氧-5-O-乙酰基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN5OAc)(R4＝OH，R5＝O-乙酰基，R7＝OH，R8＝OH，R9＝OH)；
3-脱氧-4-O-乙酰基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN4OAc)(R4＝O-乙酰基，R5＝OH，R7＝OH，R8＝OH，R9＝OH)；
3-脱氧-8，9-双-O-乙酰基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN8，9diOAc)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝OH，R8＝O-乙酰基，R9＝O-乙酰)；
3-脱氧-9-O-甲基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN9OMe)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝OH，R8＝OH，R9＝O-甲基)；
3-脱氧-8-O-甲基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN8OMe)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝OH，R8＝O-甲基，R9＝OH)；
3-脱氧-7-O-甲基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN7OMe)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝O-甲基，R8＝OH，R9＝OH)；
3-脱氧-5-O-甲基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN5OMe)(R4＝OH，R5＝O-甲基，R7＝OH，R8＝OH，R9＝OH)；
3-脱氧-4-O-甲基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN4OMe)(R4＝O-甲基，R5＝OH，R7＝OH，R8＝OH，R9＝OH)；
3-脱氧-8，9-双-O-甲基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN8，9diOMe)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝OH，R8＝O-甲基，R9＝O-甲基)；
3，9-二脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(9-脱氧-KDN)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝OH，R8＝OH，R9＝H)；
3，7-二脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(7-脱氧-KDN)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝H，R8＝OH，R9＝OH)；
3，9-二脱氧-9-叠氮基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN9Az)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝OH，R8＝OH，R9＝N3)；
3，9-二脱氧-9-氟-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN9F)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝OH，R8＝OH，R9＝F)；；或
3，7-二脱氧-7-氟-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN7F)(R4＝OH，R5＝OH，R7＝F，R8＝OH，R9＝OH)。
(18)(1)至(17)中任一项的方法，其中所述药物组合物包含所述化合物和药学上可接受的载体。
(19)(1)至(18)中任一项的方法，其中所述药物组合物包含所述化合物和另一种治疗化合物。
(20)(1)至(18)中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含所述化合物和选自以下的另一种治疗性化合物：用于治疗或预防奈瑟氏淋病球菌感染的其他化合物，用于治疗或预防性传播疾病的化合物，包括腹股沟淋巴肉芽衣原体感染和HIV，以及抗菌肽。
(21)(1)至(20)中任一项的方法，其中所述受治者是哺乳动物。
(22)(1)至(20)中任一项的方法，其中所述受治者是人。
(23)(1)至(17)中任一项所定义的化合物在治疗或预防受治者的奈瑟氏淋病球菌感染上的应用。
(24)(1)至(17)中任一项所定义的药物组合物用于治疗或预防受治者的奈瑟氏淋病球菌感染上的应用。
(25)(1)至(17)中任一项所定义的化合物在制备用于治疗或预防受治者奈瑟氏淋病球菌感染的药物中的应用。
(26)被(1)至(17)中任一项所述的化合物涂覆或填充的用品。
(27)被(1)至(17)中任一项所述的药物组合物涂覆或填充的用品。
本发明的其它目的，优点和特征将通过阅读以下非限制性的具体实施方案以举例说明的方式(须参照附图)给出的描述而变得更加清楚。
附图说明
举出的实施例目的在于说明本发明，而不是用附图限制它，其中：
图1：CMP-KDN用作淋球菌LOS的底物，并且KDN参与淋球菌乳糖-N-新四糖LOS增强因子H(fH)的结合。A.将KDN包含进入淋球菌。在含有CMP-KDN(20μg/mL)的培养基中生长淋球菌菌株F62ΔlgtD(表达来自HepI的乳糖-N-新四糖(LNnT))，并通过流式细胞测定术测量mAb 3F11的结合。mAb 3F11仅结合唾液酸化的LNnT；例如用NulO替代LNnT的末端Gal将降低mAb 3F11结合。将约5x107个细菌与mAb 3F11组织培养上清液在37℃温育15分钟。用抗小鼠IgM FITC(Sigma；稀释1∶100)显示mAb 3F11的结合。在CMP-Neu5Ac中或仅在培养基中生长的细菌分别用作唾液酸化的阳性和阴性对照。代表性直方图显示在该图上方。条形图显示了两次独立观测的荧光均值的平均值。B.因子H(fH)与在CMP-KDN中生长的淋球菌结合。将只有培养基(无唾液酸)，培养基加CMP-Neu5Ac(20μg/mL；fH结合的阳性对照)或含有CMP-KDN(20μg/mL)的培养基中分别生长的大约5107个细菌在HBSS++中与纯化的人FH(20μg/mL)在37℃下孵育15分钟，再用亲和分离的山羊抗人FH，然后再用抗山羊IgG FITC(Sigma；1∶100稀释)检测结合的FH。代表性直方图显示在该图上方。条形图显示了两次独立观测的荧光均值的平均值。
图2：对每一个5-6周龄处于发情周期的动情期中的雌性BALB/c小鼠(杰克逊实验室)分别在以下三天：-2天，0天和+2天(接种前，接种当天和接种后)皮下注射0.5mg普雷马林(Pfizer)以延长周期中的发情期，并促进对奈瑟氏淋病球菌感染的易感性。对奈瑟氏淋病球菌无效的抗生素(万古霉素，粘菌素，新霉素，甲氧苄氨嘧啶和链霉素)也用来减少竞争性微生物菌群。然后用106CFU的H041菌株感染小鼠(n＝40)。三组小鼠(n＝10/组)每天用10μg下列三种CMP-NulOs中的一种：CMP-Leg5Ac7Ac、CMP-Neu5Ac9Az、或CMP-KDN在生理盐水中的溶液于阴道内处理(在引入细菌前30分钟给予第一剂量)。第四组(n＝10)只给予生理盐水(载体对照)。从每只动物中每天获取阴道拭子样品，逐级稀释并涂布在含有万古霉素，粘菌素，新霉素，甲氧苄氨嘧啶和链霉素(VCNTS)的巧克力琼脂上以定量细菌载量。A、使用Kaplan-Meier生存曲线估计清除的平均时间；使用对数列秩检验比较各组间清除的时间。与各治疗组相比，对照组P＜0.0001。每个治疗组间的清除时间相似(P＞0.05)。B、计算每只小鼠曲线下的平均面积(log10 CFU对时间)以估计随时间的细菌负荷(累积感染)；因为曲线分布曲折陡峭，使用Kruskal-Wallis非参数秩列累加检测法比较组间曲线下的平均值。使用Dunn的多重比较试验法来对各组进行比较。****表示P＜0.0001；**表示P＜0.01；*表示P＜0.05。接受CMP-NulOs处理的各组差异不显着。
图3：CMP-KDN7N3作为淋球菌Lst的底物，导致KDN7N3参与了淋球菌的乳-N-新四糖(LNnT)LOS的结合，即淋球菌与KDN7N3结合了。在含有CMP-KDN7N3(20μg/mL)的培养基中生长淋球菌菌株F62ΔlgtD(表达来自HepI的乳糖-N-新四糖(LNnT))，并通过流式细胞计数器测量mAb 3F11的结合。mAb 3F11仅结合唾液酸化的LNnT；例如用NulO替代LNnT的末端Gal将降低mAb 3F11结合。将约5×107个细菌与mAb 3F11组织培养上清液在37℃温育15分钟。用抗小鼠IgM FITC(Sigma；稀释1∶100)显示mAb 3F11的结合。在CMP-Neu5Ac中或仅在培养基中生长的细菌分别用作唾液酸化的阳性和阴性对照。代表性的直方图显示在该图上方(A)中，下面的条形图显示了每种情况(B)的荧光均值。
根据附图以及随后的详细描述，本实施例的其他特征将变得显而易见。
具体实施方式
为了对本说明书中使用的术语提供清楚和一致的理解，下面提供了许多定义。此外，除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有的含义与具有本文所属领域技能的人员通常的理解相同。
当在权利要求书和/或说明书中与术语“包括”一起使用时，所使用的单词“a”或“an”可以表示“一个”，但是它也与“一个或更多”，“至少一个”和“一个或多于一个”相一致。同样，“another”一词可能意味着至少有第二个或更多。
本文所使用的词语“包含”(以及任何形式的comprising，例如comprise，comprises)，“具有”(以及“having”的任何形式，例如have，has)，或者“包括”(以及任何形式的containing，例如contain，contains)都是包含性的或开放式的，不排除其他未列出的元素或流程步骤。
本文所用的术语“有效量”是足以治疗奈瑟氏淋病球菌感染的CMP-吡喃壬酮糖酸类似物的量，即实现以下两种状况中的至少一种：减少奈瑟氏淋病球菌的毒力，降低其传播速率，并且降低与其感染相关的一种或多种症状的严重程度，例如，排尿期间的烧灼感，睾丸疼痛或肿胀以及增加的阴道分泌物。
本文所用的术语“受治者”应理解为包括用本发明化合物治疗的人在内的任何哺乳动物。
本文所用的术语“衍生物”应理解为在其结构中包含与给定化合物相同的基本碳骨架和碳官能团，但也可带有一个或多个取代基或环类。
本文所用的术语“类似物”应理解为与另一化合物结构相似的物质，但其在一些微结构细节上有不同。
本文所用的术语“盐”应理解为与无机酸和/或有机酸或碱形成的酸和/或碱盐。两性离子(内盐)被理解为包括在本文中使用的术语“盐”内，如季铵盐，例如烷基季铵盐。无毒的药学上可接受的盐是优选的，尽管其他盐可能也是可用的，例如在分离或纯化步骤中。
酸加成盐的实例包括、但不限于乙酸盐，己二酸盐，藻酸盐，天冬氨酸盐，苯甲酸盐，苯磺酸盐，硫酸氢盐，丁酸盐，柠檬酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，环戊烷丙酸盐，二葡糖酸盐，十二烷基硫酸盐，乙磺酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，甘油磷酸盐，硫酸氢盐，庚酸盐，己酸盐、盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，磷酸盐，2-羟基乙磺酸盐，乳酸盐，马来酸盐，扁桃酸盐，甲磺酸盐，2-萘磺酸盐，烟酸盐，草酸盐，果胶酸盐，过硫酸盐，3-苯基丙酸盐，苦味酸盐，新戊酸盐，丙酸盐，琥珀酸盐，酒石酸盐，硫氰酸盐，甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。
盐也可以由无机酸制成，例如盐酸，氢溴酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸。
碱加成盐的例子包括但不限于碱金属盐和碱土金属盐。碱金属盐的非限制性例子包括锂盐，钠盐和钾盐。碱土金属盐的非限制性实例包括镁盐和钙盐。
本文所使用的化合物的术语“治疗有效量”，是指其包括施用所述化合物在内的治疗干预中，足以治愈，减轻或部分控制特定疾病及其并发症的临床表现的化合物用量。足以实现这一点的量被定义为“治疗有效量”。用于各个目的的有效量将取决于疾病或损伤的严重程度以及受治者的体重和一般状态。
本文所用的术语“治疗”和“处理”，是指为了对抗疾病或病症之类而对受治者进行治理和护理。该术语旨在包括针对患者所遭受的特定病症的全范围的处理，例如活性化合物的施用以缓解症状或并发症，延缓病症的发展和/或治愈或消除待处理的症状。待治疗的受治者优选是哺乳动物，特别是人类。
本公开旨在提出基于胞苷5’-单磷酸吡喃壬酮糖酸(CMP-NulO)类似化合物的治疗或预防受治者中的奈瑟氏淋病球菌感染的方法。更具体地说，本发明的化合物涉及CMP-3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(CMP-KDN)。由于3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN，也称为3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-2-吡喃壬酮糖酸或者2-酮基-3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-壬酸)是在人体中发现的低水平糖，预计与使用本发明化合物相关的任何毒性作用将很低。
事实上，3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(KDN)是在正常发育和肿瘤发生过程中在脊椎动物中普遍表达的唾液酸或吡喃壬酮糖酸(NulO)的类似物。在KDN中，N-乙酰神经氨酸C5位的N-乙酰基被羟基替代，并且在脊椎动物糖共轭物和细菌多糖中也有发现，1986年在虹鳟鱼卵聚糖蛋白中首次发现它[9，10]。它的表达被设想涉及：i)甘露糖-6-磷酸+磷酰烯醇式丙酮酸(PEP)→KDN-9-磷酸(KDN-9-P)+Pi；ii)KDN-9-P→KDN+Pi；iii)KDN+CTP→CMP-KDN+PPi；和iv)CMP-KDN+R-OH→R-O-KDN+CMP(R，受体聚糖)[9，10]。总之，KDN广泛存在于脊椎动物和细菌中，几乎存在于所有类型的糖共轭物中，可以代替Neu5Ac与几乎所有聚糖结构连接，其生物合成涉及甘露糖，KDN的CMP-活化以及转移至受体糖残基[10]。
使用粗制酶制剂，已经显示哺乳动物CMP-唾液酸合成酶(负责上述步骤iii的酶)相对于来自虹鳟鱼的酶，其从KDN和CTP合成CMP-KDN的活性/能力非常低[11，12]。在人类中，上述的Neu5Ac-9-磷酸合酶(上述步骤i)可以催化PEP与底物ManNAc-6-磷酯或Man-6-磷酯的醛醇缩合反应分别合成Neu5Ac-9-磷酯和KDN-9-磷酯[13-15]。另外，人CMP-唾液酸合成酶可以CMP激活KDN[14]。重要的是，尽管据报道KDN存在于人体组织中，但它只是一个微量成分[16-19]，因此免疫原性很差。此外，在糖共轭物背景下的KDN已被证明是唾液酸酶抗性的[20，21]。由于KDN在人体组织中固有的存在，其具唾液酸酶抗性(即稳定性)及其化学合成相对容易[22，23]，因此CMP-KDN是对人类具有吸引力的治疗剂。
如下所列出，本发明化合物具有通式I，IA，II，IIA，III，IV，V，VI，VII。
Figure BDA0001609784940000151
Figure BDA0001609784940000161
Figure BDA0001609784940000171
其中：
R5选自：XR，其中X是O或S，R是H或C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基；NR’R”，其中R’和R”各自独立地为H，C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基，或者取代的或未取代的苯基或烷基苯基，或其中R’和R”与N一起共同形成五元或六元环，该环可任选地被C1-C3烷基取代；XCYR，其中X和Y各自独立地为O或S，R为C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基，或者R为取代或未取代的苯基或烷基苯基；以及为卤素原子F，Cl，Br或I。
R4和R7至R9各自独立地选自：H；XR，其中X是O或S，R是H或C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基；OR’R”，其中R’和R”各自独立地为H或C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基；XCYR，其中X和Y各自独立地是O或S，R是C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基，或者R是取代或未取代的苯基或烷基苯基；NR’R”，其中R’和R”各自独立地为H，C1-C6直链，支链，饱和或不饱和的烷基或环烷基；或者R’和R”与N一起共同形成五元或六元环，该环可任选地被C1至C3烷基取代；NH-乙酰基；NH硫代乙酰基；NH叠氮基乙酰基；NH-(D-丙氨酰基)；NH-(N-乙酰基-D-丙氨酰基)；N3；O-Sia；O-Glc；苯甲酰氨基[NHCOPh]；NH-甘氨酸；NH-Succ；己酰氨基[NHCO(CH2)4CH3]；O-乳酰基；O-磷酰基；O-硫酰基；和卤原子F，Cl，Br或I。
此外，本发明的化合物包括下面列出的化合物CMP-KDN和化合物CMP-KDN7N3。
Figure BDA0001609784940000181
此外，本发明药物还包括下面涉及的物质：
在一些实施方案中，制剂可以包括或可进一步包含酶抑制剂，pH调节化合物，缓冲剂，成盐剂，增溶剂，赋形剂，乳化剂，表面活性剂和/或抗氧化剂等。这样的药物组合物也包括在本发明的范围内。例如，制剂中可以包含比方说Lst之类的、或其他合适的唾液酸转移酶。
在其他实施方案中，该制剂可以是缓释制剂。如本文所用术语“缓释”是指以预定速率释放药物或化合物使其在一段特定时间内维持特定浓度。缓释制剂在本领域中是众所周知的，可以包含例如水凝胶，脂质体或聚合物。
在一些实施方案中，制剂可以包括或可以进一步包含酶抑制剂，pH调节化合物，缓冲剂，成盐剂，增溶剂，赋形剂，乳化剂，表面活性剂和/或抗氧化剂等。本发明的范围内也可想见包括这样的药物组合物。例如，制剂中可以包含比方说Lst之类、或其他合适的唾液酸转移酶。
对于本领域技术人员来说，明显需要配制合适的产品。例如，如本文所讨论的，本发明的一种或多种CMP-吡喃壬酮糖酸可以配制成用于静脉内给药的或局部施用的。
对于口服给药，可将CMP-吡喃壬酮糖酸类似化合物配制成片剂，包衣片剂，胶囊或本领域已知用于口服给药的其他类似形式。
对于局部给药，可将CMP-吡喃壬酮糖酸类似化合物配制成喷雾剂，乳膏剂，洗剂，油膏剂或类似产品，以及类似于用于酵母感染的用品(即包括片剂等)。该用品可用于治疗和预防。在其他实施方案中，CMP-吡喃壬酮糖酸类似化合物可以配制成从预防器械中释放的形式。合适的预防器械的实例包括但不限于避孕套，宫颈帽，避孕隔膜，阴道环，用于酵母感染的器械等。
如本领域技术人员将理解的，在本发明的一些实施方案中，制剂包含有效量的一种或多种胞苷5’-单磷酸-吡喃壬酮糖酸类似化合物，并用作治疗患有或怀疑患有奈瑟氏淋病球菌感染或具有感染淋球菌风险的受治者。例如，可将胞苷5’-单磷酸-吡喃壬酮糖酸糖掺入本文公开的制剂中，并配制成用于治疗奈瑟氏淋病球菌感染的药物。例如，包含胞苷5’-单磷酸-吡喃壬酮糖酸糖的药物可以配制用于口服，静脉内施用或局部施用形式。如本文所讨论的，药物还可以配制用于持续释放。
在本发明的其他实施方案中，提供了一种预防性用品，其涂覆或填充有有效量的一种或多种上文定义的胞苷5’-单磷酸-吡喃壬酮糖酸类似化合物，用于治疗患有或怀疑患有患奈瑟氏淋病球菌感染或有感染淋球菌风险的患者。在一些实施方案中，将胞苷5’-单磷酸-吡喃壬酮糖酸类似化合物配制成缓释剂，如上所述。
如本领域技术人员将能理解的，处于感染奈瑟氏淋病球菌“风险”的受治者，是可能与受奈瑟氏淋病球菌感染的另一受治者性接触的受治者。
优选实施例的描述
CMP-3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸或CMP-脱氨基神经氨酸(CMP-KDN)的合成
使用出血败血性巴斯德氏菌醛缩酶[24]酶促制备KDN(3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸)。通常，反应物中有100mM Tris(pH 7.5)，20mM甘露糖，100mM丙酮酸钠和约0.15mg/mL醛缩酶。反应物在37℃温育并缓缓振摇24-48小时，最后通过离心超滤除去酶。接着使用来自空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)的CMP-唾液酸合成酶酶促合成实现KDN的CMP活化[25]。这里，反应物通常含有50mM Tris(pH 8.5)，50mM MgCl2，5mM CTP，约5mMKDN，4单位焦磷酸酶/mmol CTP和约0.1mg/mL CMP-唾液酸合成酶。反应物在37℃下孵育2小时，最后通过离心超滤去除酶。然后使用在1mM NaCl中平衡的Q琼脂糖快速流动柱(GEHealthcare)纯化经过滤的CMP-KDN。在进样前，CMP-KDN制剂在1mM NaCl中稀释约40倍。进样后，用2CV的1mM NaCl洗涤树脂，并用0.8CV 100mM NaCl阶梯洗脱获得纯化的CMP-KDN。将样品转移至渗滤池(Diaflo超滤膜，YCO5 76mm)，用渗滤法以3倍体积的1mM NaCl以32mL/h的流速将该CMP-KDN制备物进一步脱盐，然后过滤。24小时后，分离出含有最初CMP-KDN量约96％的渗余物。用CMP的摩尔消光系数(ε260＝7,400)对CMP-KDN制剂定量分析。然后将纯化和脱盐后的样品等分成小份，加以冷冻干燥。
CMP-3，7-二脱氧-7-叠氮基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸(CMP-KDN7N3)的合成
使用出血败血性巴斯德氏菌醛缩酶[24]酶促制备KDN7N3(3，7-二脱氧-7-叠氮基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸)。通常，反应含有128mM Tris(pH8.8)，17.5mM 4-叠氮基-4-脱氧-D-吡喃甘露糖(Sussex Research Laboratories Inc.)，128mM丙酮酸钠和足够量的醛缩酶。将反应物在37℃下温育约24小时，最后通过离心超滤除去酶。接下来，使用来自空肠弯曲杆菌的CMP-唾液酸合成酶酶促实现所合成KDN7N3的CMP活化[25]。这里，反应物通常含有50mM Tris(pH 9)，50mM MgCl2，5mM CTP，约5mM KDN7N3，4单位焦磷酸酶/mmol CTP和约0.68mg/mL CMP-唾液酸合成酶。将反应在37℃下孵育2小时，最后通过离心超滤去除酶。然后过滤后的CMP-KDN7N3样品被冻干，并使用Superdex Peptide 10/300GL(GEHealthcare)柱和10mM碳酸氢铵淋洗脱盐/纯化。为了获得更高的纯度，采用碳酸氢铵梯度淋洗对含有CMP-KDN7N3的洗脱级分进行阴离子交换色谱分离(Mono Q4.6/100PE，GEHealthcare)。根据CMP的摩尔消光系数(ε260＝7,400)对CMP-KDN7N3制品定量分析。在冻干之前，将NaCl以2∶1的摩尔比(盐∶NulO)加入到CMP-KDN7N3制品中。
CMP-KDN和CMP-KDN7N3的结构表征：将纯化的产品交换进入到100％D2O中。用具有Varian z-梯度3mm探针的Varian Inova 500MHz(1H)光谱仪或具有Varian 5mm Z-梯度探针的Varian 600MHz(1H)光谱仪进行结构分析。所有光谱参比内标丙酮(δH2.225ppm和δC31.07ppm)。结果示于下面的表2(CMP-KDN)和表3(CMP-KDN7N3)中，以验证每种化合物的产生。
所制备的化合物CMP-KDN和CMP-KDN7N3还用质谱(MS)或CE-MS分析来表征。对于CE-MS，使用API3000质谱仪(Applied Biosystems/Sciex，Concord，ON，Canada)获取质谱。CE使用Prince CE系统(Prince Technologies，荷兰)。在与CE-MS偶联的90cm长度的裸露熔融石英毛细管(365μm OD×50μm ID)上获得CE分离，使用液体鞘流界面，异丙醇∶甲醇(2∶1)作为鞘液。含30mM吗啉(用甲酸调节至pH 9)的含水缓冲液用于负离子模式的实验。或使用SQD2(Waters，Milford，MA)获取质谱。这种情况下不经分离以负离子模式收集谱图。使用的缓冲液是1∶1乙腈/水和0.31mg/mL碳酸氢铵的混合物。
对每种化合物生成的验证结果显示在下表4中，其中来自MS分析观察到的m/z离子结果准确地对应于计算出的质量。
细菌菌株和生长条件
Daniel C.Stein博士(马里兰大学)提供了称为F62ΔlgtD[27]的，缺乏脂肪寡糖糖基转移酶D(lgtD)表达的奈瑟氏淋病球菌菌株F62[26]的突变体。LgtD将GalNAc残基添加到HepI乳糖-N-新四糖物种的末端Gal中[28]。因此，奈瑟氏淋病球菌F62ΔlgtD的HepI的任何延伸只限于加上吡喃壬酮糖酸残基，其是从添加至生长介质的CMP-吡喃壬酮糖酸类转移来的。
通常，将在巧克力琼脂平板上生长过夜的细菌(F62ΔlgtD)悬浮于补充有含特定浓度CMP-吡喃壬酮糖酸的IsoVitaleX[29]的淋球菌液体培养基中。然后将细菌在37℃孵育一段时间，此时间对每个实验是特定的。
抗体
在流式细胞术测定中使用山羊抗人fH来检测人fH与细菌的结合。mAb 3F11(小鼠IgM；由爱荷华大学的MichaelA.Apicella博士提供)结合非唾液酸化的HepI乳糖-N-新四糖结构；LOS的唾液酸化导致mAb 3F11的结合减少[30]。FITC共轭抗小鼠IgM和抗山羊IgG来自Sigma。
流式细胞计数分析或FACS分析
如本领域[31]和美国专利申请序列号14/627,396中所述方法进行fH和mAb 3F11结合的流式细胞计数分析。
动物模型实验
如本领域[32]和美国专利申请序列号14/627,396中所述方法进行小鼠模型实验和统计分析。
血清杀菌测定
与[32，33]和美国专利申请序列号14/627,396中概述的方法类似，血清杀菌测定如下进行。从巧克力琼脂平板上的过夜培养物中收获细菌，而每个实验中～105CFU的Ng在含有指定浓度CMP-NulO的液体培养基中生长。用Morse A稀释细菌，并将～2000CFU的Ng F62ΔlgtD与NHS(每个实验规定的浓度)一起温育。最终的反应体积保持在150μL。将25μL反应混合物的等分试样在测定开始时(t0)一式两份地涂布在巧克力琼脂上，并在37℃孵育30分钟后再次涂布(t30)。存活率计算为在t30时相对于t0的活菌落的数量。
用Neu5Ac替换奈瑟氏淋病球菌乳糖-N-新胞四糖(LNnT)脂寡糖(LOS)，导致细菌具有逃避补体介导杀伤的能力。先前的研究已经表明，向LNnT LOS添加Neu5Ac会降低特异性IgG的结合并增强因子H(fH)的结合，因子H是补体旁路途径的抑制剂。之前我们已经表明，几种CMP活化的吡喃壬酮糖酸(NulO)类似物，如CMP-Neu5Gc，CMP-Neu5Gc8Me，CMP-Neu5Ac9Ac，CMP-Neu5Ac9Az和CMP-Leg5Ac7Ac可以用作淋球菌LOS唾液酸转移酶(Lst)的底物(美国专利申请序列号14/627,396)。从已测试过的CMP-NulO中，只有CMP-Neu5Gc能够模拟报道的CMP-Neu5Ac的高水平血清抗性，以及高水平的fH与细菌的结合。重要的是，Neu5Gc与Neu5Ac在碳5位不同，它含有N-乙醇酰基而不是N-乙酰基。这里汇集的其余吡喃壬酮糖酸类似物在C8，C9或C7，9取代基上与Neu5Ac/Neu5Gc不同。我们发现这些CMP-NulO类似物在C8，C9或C7，9取代基发生变化时，没有增强因子H结合，也没有提供奈瑟氏淋病球菌细胞高水平的血清抗性。因此，看起来NulO的环外部分中的碳7，8和9在避免受奈瑟氏淋病球菌血清介导杀伤中起关键作用，这也可以通过如下实验看出：仅给予对照物处理时，用CMP-Neu5Gc8Me，CMP-Neu5Ac9Ac，CMP-Neu5Ac9Az和CMP-Leg5Ac7Ac也增强了对细菌血清介导的杀伤，而CMP-Neu5Ac或CMP-Neu5Gc则没有观察到。因此，与其他碳7，8和9上的变化相反，碳5位上的N-羟乙酰基取代对fH结合或血清抗性没有任何负面影响。因此，我们已提出使用CMP-NulO类似物，其碳7，8和/或9的变化作为针对多重耐药性淋病的全球威胁的新型治疗/预防策略。
令人惊讶的是，我们现在报道了一种不同的CMP-NulO，其中可以被淋病奈瑟氏菌Lst利用的NulO的碳5位置的变化会影响细菌的fH结合并导致血清敏感性。此外，这种CMP-NulO类似物也被发现在抗BALB/c阴道群集模型中对抗生素抗性超级细菌”H041具有一定功效。该CMP-NulO是CMP-3-脱氧-D-甘油基-D半乳糖基-吡喃壬酮糖酸或CMP-脱氨基神经氨酸，也称为CMP-KDN。与Neu5Gc一样，KDN在碳5处与Neu5Ac不同，但与在碳5处分别具有N-乙酰基或N-羟乙酰基的Neu5Ac或Neu5Gc不同，KDN在碳5处仅具有羟基。测试CMP-KDN的实验总结如下所述。
为了确定淋球菌LOS唾液酸转移酶(Lst)是否可以利用CMP-KDN，将奈瑟氏淋病球菌F62ΔlgtD在单独的培养基(参见图1A中的‘非唾液酸化’)或含有20μg/mL的CMP-Neu5Ac或CMP-KDN(图1A)中培养，并通过流式细胞计数术筛选细菌对mAb 3F11的结合。单克隆抗体3F11结合乳-N-新四糖(LNnT)的末端乳糖胺残基；任何超出终端Gal的扩展(例如，带有NulO)将会取消3F11结合。如图1A所示，包含CMP-KDN或CMP-Neu5Ac的培养基的生长类似地也降低了mAb 3F11的结合，表明CMP-KDN对活细菌起到淋球菌Lst的底物的作用，并且KDN被结合进LNnT。还检查了LNnT结合进KDN影响fH结合的能力(图1B)。此处，通过流式细胞计数术检查fH与20μg/mL的CMP-Neu5Ac或CMP-KDN存在下生长的奈瑟氏淋病球菌F62ΔlgtD的结合。用Neu5Ac观察到最大的fH结合，而用KDN结合的fH表现为Neu5Ac观察到的一半。这与使用Leg5Ac7Ac，Neu5Ac9Az或Neu5Gc8Me等CMP-NulO的测试结果形成对比，后者中发现它们不会使fH结合增强至高于未唾液酸化的F62ΔlgtD对照(美国专利申请序列号14/627,396)的水平。因此，KDN的参与，只适度影响fH结合，并且进一步确信KDN结合进LNnT LOS内。基于这些发现，在奈瑟氏淋病球菌LNnT LOS内结合进KDN不应该导致如在Leg5Ac7Ac LNnT LOS结合进时观察到的那样高的血清敏感性。
发生在体内的一个末端Neu5Ac残基加成至奈瑟氏淋病球菌LnT LOS，或者随着CMP-Neu5Ac加到生长培养基中，导致对补体依赖性杀伤的抗御[34]。我们接下来确定LNnT加入KDN对奈瑟氏淋病菌F62ΔlgtD抵抗3.3％或10％浓度的正常人血清补体依赖性杀伤的能力的影响。细菌在单独的培养基或补充有20μg/mL的CMP-Neu5Ac或CMP-KDN的培养基中生长。此外，CMP-NulO竞争实验也在20μg/mL或2μg/mL的CMP-Neu5Ac，CMP-Leg5Ac7Ac和CMP-KDN浓度下进行，如所示，其中添加第二个CMP-NulO是在加入第一个15分钟后(下表1)。值得注意的是，这些CMP-NulO竞争实验是检测选择CMP-NulOs对抗由CMP-Neu5Ac添加引起的的血清抗性能力增强的一种方法，提供了它们治疗潜力的信息(因为任何潜在的治疗将需要与CMP-Neu5Ac在体内竞争)。如表1所示，无论添加顺序如何(即CMP-Neu5Ac或CMP-Leg5Ac7Ac何者在先)，CMP-Leg5Ac7Ac在3.3％和10％血清浓度均阻断由CMP-Neu5Ac介导的血清抗性。当单独检查CMP-KDN时，在10％血清浓度下观察到血清敏感性，但在3.3％血清浓度下观察到完全血清抗性。此外CMP-KDN只有在CMP-Neu5Ac之前提供，才能抵抗CMP-Neu5Ac诱导的血清抵抗，并且仅在10％血清浓度时才观察到血清敏感性。这些结果进一步表明CMP-KDN的治疗潜力应该低于CMP-Leg5Ac7Ac。
尽管CMP-KDN获得的结果已是最谨慎的，我们仍决定进行此类似物的体内功效的实验的评估，这某种程度上是由于KDN对Neu5Gc观察到的不同表型，两种NulO在C5处都有变化。在BALB/c小鼠阴道群集模型中测试了CMP-KDN对抗奈瑟氏淋病球菌抗生素耐药“超级细菌”H041的功效[35，32](图2)。
按如下所述感染四组经过雌激素处理的BALB/c小鼠(每组10只小鼠)：i)H041只用生理盐水，即未处理对照样(‘对照’组)，ii)H041 CMP-Leg5Ac7Ac组(每天10μg阴道内处理)，iii)H041 CMP-KDN组(每天10μg阴道内处理)以及iv)H041 CMP-Neu5Ac9Az组(每天10μg阴道内处理)。所有这些CMP-NulOs的治疗显著减弱奈瑟氏淋病球菌H041感染。考虑到CMP-KDN相对于CMP-Leg5Ac7Ac获得的较“差”的fH结合和杀菌结果，令人惊讶的是CMP-KDN在菌落定殖的动物模型中却是有效的。
在努力测试其他CMP-KDN类似物时，我们选择研究CMP-KDN7N3，其仅在NulO的C7位置处与CMP-KDN不同。与CMP-KDN的研究类似，通过mAb 3F11结合研究，我们发现CMP-KDN7N3可以被淋球菌LOS唾液酸转移酶(Lst)利用(图3)。此外，我们确定向生长培养基中添加CMP-KDN7N3导致奈瑟氏淋病球菌F62 1gtD产生血清敏感性(尽管仅在10％血清浓度下)(表5)，类似于用CMP-KDN获得的结果(表1)。
表1.CMP-KDN对奈瑟氏淋病球菌F62ΔlgtD的补体灭活的影响。CMP-NulO浓度显示在括号内(μg/mL)。
Figure BDA0001609784940000251
A表示在添加下一个CMP-NulO之前有15分钟的时间间隔。
表2.CMP-KDN的NMR化学位移δ(ppm)。
Figure BDA0001609784940000252
Figure BDA0001609784940000261
表3.CMP-KDN7N3的NMR化学位移δ(ppm)。
H<sub>3</sub>ax 1.67
H<sub>3</sub>eq 2.48 C<sub>3</sub> 42.0
H4 4.03 C<sub>4</sub> 69.7
H5 3.61 C<sub>5</sub> 72.2
H6 4.20 C<sub>6</sub> 73.8
H7 3.82 C<sub>7</sub> 62.3
H8 4.06 C<sub>8</sub> 69.7
H9 3.77；3.94 C<sub>9</sub> 64.1
表4.CMP-KDN和CMP-KDN7N3的MS数据
Figure BDA0001609784940000262
表5.CMP-KDN7N3对奈瑟氏淋病球菌F62ΔlgtD的补体灭活的影响。CMP-NulO浓度显示在括号内(μg/mL)。
Figure BDA0001609784940000263
权利要求的范围不应该受实施例中提出的优选实施方式的限制，而应该给予与整个说明书一致的最宽泛的解释。
本说明书涉及大量文献，其整体内容通过引用包含进本文。
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Claims (9)

1.下述通式V的化合物或其药学可接受的盐的应用，用于制备治疗或预防受治者的奈瑟氏淋病球菌感染的药物，
Figure FDA0003239857580000011
2.根据权利要求1所述应用，其中所述化合物为下面的胞苷5’-单磷酸-3-脱氧-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸或其药学可接受的盐，
Figure FDA0003239857580000012
3.下述通式VII的化合物或其药学可接受的盐的应用，用于制备治疗或预防受治者的奈瑟氏淋病球菌感染的药物，
Figure FDA0003239857580000013
4.根据权利要求3所述的应用，其中所述化合物为下面的胞苷5’-单磷酸-3,7-二脱氧-7-叠氮基-D-甘油基-D-半乳糖基-吡喃壬酮糖酸衍生物或其药学可接受的盐，
Figure FDA0003239857580000021
5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其中所述的药物包含权利要求1-4任一项所述的化合物和药学上可接受的载体。
6.根据权利要求5所述的应用，其中所述药物包含所述化合物和另一种治疗化合物。
7.根据权利要求5所述的应用，其中所述药物包含所述化合物和选自以下的另一种治疗性化合物：用于治疗或预防奈瑟氏淋病球菌感染的其他化合物，用于治疗或预防包括腹股沟淋巴肉芽衣原体感染和HIV在内的性传播疾病的化合物，以及抗菌肽。
8.根据权利要求5所述的应用，其中所述受治者是哺乳动物。
9.根据权利要求5所述的应用，其中所述受治者是人。
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