CN108348452B - 用于局部递送5-氨基乙酰丙酸的亲水性凝胶 - Google Patents

Abstract

本发明涉及含有5‑氨基乙酰丙酸(5‑ALA)和水性低粘度凝胶基质的药物局部用凝胶溶液。本发明还涉及含有该组合物的药物制剂。这种类型的制剂可以用于光动力疗法以及用于异常增殖细胞的光动力检测。

Description

用于局部递送5-氨基乙酰丙酸的亲水性凝胶

发明领域

本发明涉及含有5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)的药物局部用凝胶溶液。本发明还涉及含有该组合物的药物制剂。这种类型的制剂可以用于光动力疗法以及用于异常增殖细胞的光动力检测。

发明背景

目前，世界正在经历患癌率稳步增长的情况，这主要是由于大型工业化国家人口的稳步年龄增长以及不断变化的生活方式。由于许多癌症的发病率稳步增长，所以这带来了对更多且更高质量的治疗的高需求。在各种类型的前期癌和癌症中，癌前病变诸如光化性角化病(Actinic Keratosis)和其它类型的非黑素瘤皮肤癌继续成为具有大量肤色白皙(金发、蓝眼睛)的白人和/或高度暴露于UV辐射的国家中的一个严重且与日俱增的问题。

光动力疗法是治疗与细胞增殖相关的那些恶变前和恶性疾病的快速增长和有希望的治疗方法。由于基于其内在性质(即，无毒性和对癌细胞的选择性)而具有高安全系数，所以5-ALA在商业产品中已经使用了二十多年。因为与仍销售的

(卟吩姆钠)的30-60天相比，治疗后对日光的敏感性显著降低至仅1-2天，所以它被称为第二代光敏剂。

为了治疗目的，5-ALA经局部或系统施用并且非选择性地渗透到所有细胞中，其中利用血红素生物合成途径将其代谢为活性敏化剂PPIX(原卟啉IX)。由于癌细胞或肿瘤细胞(快速生长细胞)通常具有比正常健康细胞更低的细胞内铁(Fe²⁺)水平，所以PPIX不能迅速转化为其最终产物血红素，并且因此仅在癌细胞内蓄积。

由于PPIX是一种有效的光敏剂，因此可以在光动力疗法(PDT)中利用这种代谢途径。这是已经被批准的治疗策略，使得5-ALA成为用于治疗各种癌前病变和癌病变的最成功的前药之一。(M.Wachowska等人，Aminolevulinic Acid as a Prodrug in PhotodynamicTherapy of Cancer，Molecules 2011，16，4140-4164)。

在光敏剂在肿瘤中选择性蓄积之后，可以通过使用适当波长和剂量的光进行照射而将其激活。

PPIX分子吸收光，并且吸收的能量随后转移到分子氧中，产生单线态氧¹O₂。然后，由PPIX上的PDT过程产生的单线态氧导致细胞内大分子的氧化损伤并因此导致细胞死亡。这种细胞毒性效应(特别是针对增殖细胞)来源于单线态氧与例如细胞膜和线粒体的反应或者引发细胞损伤性自由基的形成。PDT诱导的细胞死亡的模式通常是凋亡、坏死和自噬的混合。通常认为，除了直接的细胞毒性之外，另外两个重要因素促成总体PDT效应：血管关闭(其阻止血管生成并因此防止转移)和局部炎症反应。

除了5-ALA之外，选择用于进行PPIX激发的光的波长也非常重要，5-ALA本身进入受影响的组织的渗透深度也是非常重要的。对于完全浅表的治疗，最大吸收波长通常被认为是治疗的最佳波长。然而，对于较深的病变，必须达到光的激发和渗透深度之间的折中，这通常意味着偏移至更长(即，更红)的波长。5-ALA是极性分子，并且在生理条件下作为带电荷的两性离子出现。这解释了它的低脂溶性，并且这最终限制了透过具有脂质性顾的最外皮层(即，角顾层)的渗透。

此外，光敏剂的照射产生了可以用于检测增殖细胞的特征性荧光辐射。

根据现有技术，已知许多使用局部适用的5-氨基乙酰丙酸组合物的研究。尽管这些研究的共同特征在于利用5-氨基乙酰丙酸或其衍生物，但是在其它参数(诸如渗透时间、治疗周期、所利用的光的类型和所施加的光的剂量)方面存在差异。

尽管现有技术中公开的研究清楚地证明了使用5-氨基乙酰丙酸进行光动力疗法的潜力，但是已经销售的不同制剂具有许多缺点。

开发PDT疗法的一般重要性是光敏剂在临床PDT中的指导原则(RR Allison等人，Photodiagnosis and Photodynamic Therapy(2004)1，27—42)，其已经定义了需要考虑的相关点。其中列出了产品需要满足的最重要的要求：

-应该形成无毒性的副产品并且不应该形成有毒或致癌的副产品；否则可以使用化学治疗剂

-容易去除是必须遵循的(光敏剂的半衰期短)

-需要容易渗透到皮肤中，足够深以到达整个癌组织，并且可靠且选择性地蓄积于癌细胞的线粒体内，用于在照射时有效诱导凋亡

-需要通过适当波长的光进行可靠的激活以防止意外的治疗

-相较于几个星期或几个月，治疗后整个皮肤的几小时或仅几天的光敏性是优选的

-通过局部、吞咽、吸入或静脉注射(IV)的多种用途，而不会引起类似例如变态反应或高血压的副作用

-每次都必须在需要它的地方获得并且在需要它时进行激活

-更长的激活波长允许更深的组织渗透

-与其它形式的治疗诸如手术、放疗和化疗联合使用的能力

-应该容易地允许治疗过量的照射而不引起副作用

-轻松和安全地进行施用，靶向合适的结构，避免正常组织，在需要时激活直到所讨论的结构被破坏，然后自行消除而不会对身体的其它部位造成永久性损伤。

对5-ALA尤其有效的是已知其在水溶液中降解，然而其在使用期间必须是稳定的，以便在治疗上是有用的。水溶液在pH＜6时表现出最好的稳定性(V.yon Arx等人(J.Pharm.Pharmacol.49：652-656，1997))。

另一个缺点是光敏剂渗透到受损组织中的深度受到其低脂溶性的影响。因此，尽管用于激活光敏剂的光所渗透的深度也能够到达更深层的待治疗的层，但是在许多情况下患病组织只可在其浅表面层中得到光动力治疗。

除了渗透深度之外，皮肤内的分布动力学以及进一步在细胞内代谢为PPIX的动力学对患者和医生都是息息相关的。目前的治疗只能在数小时温育时间后实现用于PDT治疗的临床相关的PPIX蓄积，而更快的治疗时间将是非常需要的(T.Maisch等人.(Experimental Dermatology，17，813-820)。

发明目的

因此，本发明的目的是提供一种包含5-ALA的组合物，其克服了现有技术产品中已知的缺点，并且提供了改进的5-ALA到患者组织的渗透，并且同时提供了5-ALA的足够的稳定性。本发明的另一个目的是提供一种包含5-ALA的组合物，其在施用至患者后有效地实现PPIX的快速蓄积。

发明概述

这些目的通过本发明所述的组合物来实现，所述组合物包含：

a)5-ALA或其盐酸盐作为活性成分；

b)选自一种或多种水混溶性醚化合物、优选非乙氧基化的水混溶性醚化合物的第一渗透促进剂；和

c)选自一种或多种糖胺聚糖化合物的第二渗透促进剂。

本发明人意想不到地发现，两步法可以导致5-ALA向深组织层的意想不到地增加的渗透。在第一步中，使用选自一种或多种水混溶性醚化合物、优选非乙氧基化的水混溶性醚化合物的化学渗透促进剂，其改变角质层的分配系数以使亲水性分子能够渗透到皮肤中。通过这种方法，与现有技术组合物中已经公开的相比，允许组分a)和c)更好地渗透角质层。

术语“非乙氧基化”意指未使用环氧乙烷进行乙氧基化的醚化合物。

一旦这些组分已经透过角质层到达表皮中，第二渗透促进剂(即，选自一种或多种糖胺聚糖化合物的一种)允许5-ALA或其盐酸盐通过基底层细胞的水合作用渗透到真皮中。基底层的水合作用对于促进紧密连接的打开以允许5-ALA的细胞旁转运是必需的。

这种两步协同的方法已经非常适合于已知是干燥、鳞状和粗糙的患病皮肤的特性（例如受光化性角化病影响)。因此，本发明的组合物使得5-ALA或其盐酸盐可以最大程度地渗透到皮肤中，甚至不需要任何所需的治疗区域的吸留(occlusion)。

通常使用代表含有高水平油脂的草药形式(galenical forms)的目前销售的产品(如

或

)在局部PDT中进行吸留。

在升高的环境温度下(如例如在夏季期间)，这些油性/脂肪产品显示出在吸留下液化的趋势，导致涂抹出所需的治疗区域并因此降低它们的有效性。甚至更严重的是，当治疗额头上的区域时，它们能够滴落患者的面部，导致污染面部的其它区域(如眼睛)，在其中会引起患者的强烈不适，从而导致患者的依从性降低。另一种产品

甚至本身就是一种吸留贴剂制剂。

附图说明

在附图中显示了以下内容：

图1-描绘了反映天然卟啉荧光的未经处理的猪耳朵图像。

图2-描绘了反映在4小时的温育期后本发明的制剂进入猪耳朵的渗透深度的卟啉荧光图像(实施例11表1)。

图3-描绘了在15分钟的温育期后实施例12在614-643nm处的卟啉荧光信号。

图4-描绘了在60分钟的温育期后实施例12在614-643nm处的卟啉荧光信号。

图5-描绘了在15分钟的温育期后

Kerastick在614-643nm处的卟啉荧光信号。

图6-描绘了在60分钟的温育期后

Kerastick在614-643nm处的卟啉荧光信号。

发明详述

在优选的实施方案中，本发明所述的组合物包含呈其盐酸盐形式的5 ALA(5-ALAHCl)并且以5-30重量％的浓度范围包含在组合物中。甚至更优选的5-ALA HCl的浓度范围为约10-25重量％，均按组合物总重量计。

本发明的组合物优选为用于药物用途的组合物，并且因此将含有一种或多种药用助剂。这些助剂例如选自形成凝胶的聚合物，特别是用于形成水凝胶的聚合物。

这些类型的聚合物可以选择(但不限于)形成高吸收性天然或合成聚合物网络的水凝胶，其可以包括聚乙烯醇、聚丙烯酸钠、丙烯酸酯(共)聚合物或天然水凝胶材料，诸如琼脂糖、甲基纤维素、透明质酸/透明质酸盐。其它形成凝胶的聚合物是羟丙基纤维素、甲基羟乙基纤维素或羧甲基纤维素钠。另外的聚合物是黄原胶。

对于另外的信息，请参见Rudolf Voigt，Pharmazeutische Technologie，第11版，2010，特别是第396页和后续页面。

可以在本发明所述的药物组合物中使用的其它助剂是用于保存组合物的物质、螯合剂、缓冲剂和/或酸度调节剂。

作为常见的防腐剂，可以使用对羟基苯甲酸酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸丙酯(或其钠盐以及其组合)，或者备选地，可以使用山梨酸钾或山梨酸。保存活性也可以通过使用醇添加剂(诸如例如含有超过15％的丙二醇或甘油的那些醇添加剂)来实现。

其它助剂可以选自润湿剂，诸如甘油、丙二醇或山梨糖醇，优选浓度为按组合物总重量计的10-20重量％。这些成分将防止水凝胶变干并增强最终药物产品的适用性。

此外，在水凝胶的情况下，本发明的药物组合物可以含有确保合适的pH值的酸度调节剂。如上所述，5-ALA在水溶液中降解并且在低于6的pH值下显示出最好的稳定性。因此，使整个组合物的pH值调节为该pH范围是合适的方法，例如通过经由合适的成分将pH值设定为3.5-4.5这一耐受良好的范围。这些成分可以选自不同种类的酸或酸式盐，诸如柠檬酸三钠二水合物。

用在本发明的水凝胶中的其它助剂是螯合剂，诸如EDTA，以及应该需要的缓冲剂。

除了上面列出的那些之外的其它助剂也可以包括在组合物中。关于与水凝胶形式的局部用组合物不同的组合物，通常参见药物标准文献，诸如Remington，the Science andPractice of Pharmacy，第22版，2013。

优选地，水凝胶采用低粘度水凝胶的形式。术语“低粘度”在本文中通常定义为描述在32℃测量的介于(且包括)1，000与13,000mPas之间的粘度。粘度可以使用锥板/平板流变仪(Rheostress RS-1，Thermo Haake，卡尔斯鲁厄，德国)，几何形状为35mm，锥角为2°，以使用1Hz的恒定形变和自动应变的振荡模式进行测量。使用流变仪的内置珀尔帖元件(built in peltier element)，以1℃/分钟的速率通过施加从20℃至40℃的线性温度上升进行测量。粘度读数[mPas]取自25℃和32℃的所得曲线，后者代表平均皮肤表面温度。

低粘度水凝胶的优选粘度范围为约3,000-7,000mPas。

根据更优选的实施方案，本发明的药物组合物含有一种或多种水混溶性醚化合物、优选非乙氧基化的水混溶性醚化合物，所述醚化合物选自基于异山梨醇的化合物，优选选自1，4∶3，6-二脱水山梨糖醇2，5-戊基乙基醚(戊基乙基异山梨醇)、1，4∶3，6-二脱水山梨糖醇2，5-月桂基甘油基醚(月桂基甘油基异山梨醇)和1，4∶3，6-二脱水山梨糖醇2，5-二甲基醚(二甲基异山梨醇)。这组醚化合物充当化学渗透促进剂，其改变角质层的分配系数并由此使得亲水性分子能够渗透皮肤。按组合物的总重量计，这些醚化合物的合适的浓度范围通常在约4-15重量％的范围内，更优选在8-12重量％的范围内。

形成亲水性皮内渗透促进剂的一种或多种糖胺聚糖化合物优选选自硫酸软骨素、硫酸角质素、硫酸皮肤素、硫酸肝素、硫酸乙酰肝素和/或透明质酸/透明质酸钠。透明质酸及其钠盐的组也称为“非硫酸化的糖胺聚糖”。

在优选的实施方案中，本发明的组合物包含选自一种或多种非乙氧基化的水混溶性醚化合物的第一渗透促进剂和选自一种或多种基于异山梨醇的化合物的第二渗透促进剂。

这些化合物通常以0.5-1.5重量％的浓度范围、更优选0.8-1.2重量％的范围添加到本发明的组合物中(按组合物的总重量计)。

在一个优选的实施方案中，本发明的药物组合物是低粘度水凝胶并且含有5-ALAHCl、二甲基异山梨醇和透明质酸钠。任选的助剂是作为pH调节剂的柠檬酸三钠，作为螯合剂的乙二胺四乙酸二钠，作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯以及作为粘度增强剂的黄原胶。此外，水凝胶含有药物级纯水。

在该优选组合物中，按组合物的总重量(包括水)计，5-ALA HCl以约20重量％的量存在，以约10重量％的量包含二甲基异山梨醇，并且透明质酸钠以约1重量％的量存在。

本发明所述的局部用药物组合物可以在用于施用含有5-ALA的水凝胶的装置中配制，诸如将活性成分5-ALA与凝胶基质(其包含在分隔的腔室中)分离的双室系统，其中在治疗之前通过破坏分隔两个腔室的密封物将两个腔室进行混合，以得到即时可用的局部用凝胶溶液，其能够集中于皮肤上的施用区域。

因此，水凝胶可以储存在双室系统中，该双室系统可以由透明的层压聚合物制成，所述双室系统由两个由易破的壁分开的腔室组成。所选择的材料保护一个腔室中的敏感活性成分不受氧气和水的影响，从而为5-ALA提供长期稳定性，而在另一腔室中储存水凝胶基质。观察到5-ALA成分在不同的储存条件下是长期稳定的，其在这种双室管中没有降解。

例如，可以通过向含有液体的腔室施加压力(这导致密封物的破坏)来破坏分隔两个腔室的密封物。一旦密封物打开，需要剧烈揉捏所得浆液直至得到透明凝胶。在该程序之后，产品准备好用于最终施用至患者的皮肤。

本发明的组合物用于身体的内部或外部表面的病症或异常的光化学治疗性治疗或诊断。这些病症或异常选自前期癌和癌症，皮肤的癌前病变诸如光化性角化病和其它类型的非黑素瘤皮肤癌、SCC(鳞状细胞癌)或BCC(基底细胞癌)。

现在通过以下举例说明本发明的实施例来描述本发明：

实施例

进行配制试验以进一步满足上述对于局部施用的光敏剂的要求。本发明所述的实施例按以下两步法制备：

步骤I：在室温(约22℃)，使用磁力搅拌电机(IKAMAG RT 15，IKA Werke，德国)以300rpm的搅拌速率搅拌5分钟，将乙二胺四乙酸二钠(Komplexon III，Merck，Darmstadt)溶于纯水。向所得溶液中添加透明质酸钠(HA-EP1，760KDa，Shandong Freda Biopharm Co.，Ltd，济南，中国)，并且用玻璃棒以慢速旋转运动分散1分钟。将所得分散体在2-8℃保存于冰箱中12-18小时。在这段时间后，透明质酸钠完全溶胀，并且所得制剂呈现澄清和粘稠的样子。

步骤II：如前所用，在使用磁力搅拌电机进行搅拌的情况下，在室温(约22℃)下以300rpm的搅拌速率搅拌10分钟，将对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯(Sigma-AldrichChemie GmbH，Buchs，瑞士)(如果存在的话)溶于二甲基异山梨醇(

DottikonExclusive Synthesis，Dottikon，瑞士)。使用如前所用的磁力搅拌电机，在搅拌下以最初300rpm的搅拌速率将所得澄清溶液添加到步骤I。在室温(约22℃)下在20分钟内将搅拌速率逐渐增加至700rpm，以产生透明凝胶。

使用如前所用的磁力搅拌电机，在以700rpm的搅拌速率的搅拌下向该透明凝胶中缓慢(1分钟内)添加柠檬酸三钠二水合物(Sigma-Aldrich Chemie GmbH，Buchs，瑞士)，并且在室温(约22℃)下以相同的速率继续搅拌30分钟。然后，在混合期间添加黄原胶(型号：FNCS，Jungbunzlauer，巴塞尔，瑞士)(如果存在的话)，使用转子/定子均化器(Polytron PT10-35GT，Kinematica，瑞士)在室温(约22℃)以5000rpm进行20分钟，直至获得均匀的凝胶。

对于最终产品，将基质凝胶与适量的5-ALA(成分a)混合。

使用锥板/平板流变仪(Rheostress RS-1，Thermo Haake，卡尔斯鲁厄，德国)，几何形状为35mm，锥角为2°，以使用1Hz的恒定形变和自动应变的振荡模式对粘度进行测量。使用流变仪的内置珀尔帖元件，以1℃/分钟的速率通过施加从20℃至40℃的线性温度上升进行测量。粘度读数[mPas]取自25℃和32℃的所得曲线，后者代表平均皮肤表面温度。

以下表1和2中的数字代表总产品的重量％。以下化合物用于组合物中：

a)5-ALA HCl：活性成分

b)二甲基异山梨醇：表面渗透促进剂

c)HA-Na LMW：(透明质酸钠，低分子量)皮内渗透促进剂

d)柠檬酸三钠：pH调节剂

e)乙二胺四乙酸二钠：金属螯合剂

f)对羟基苯甲酸甲酯：防腐剂

g)对羟基苯甲酸丙酯：防腐剂

h)黄原胶：粘度增强剂

i)纯水：填料

表1：

为了估计两种渗透促进剂的理想比率，根据对设计质量(Quality by Design，QbD)方法的规范(ICH)要求进行实验设计。

作为研发的一部分，已经对猪耳朵皮肤进行离体测试以评价渗透深度，并且意想不到地发现，通过使用本发明的组合物可以实现非常显著的渗透深度(＞1mm，图2)。更大的渗透深度是特别意想不到的，因为之前已经设想，由于其亲水性，5-氨基乙酰丙酸将在任何情况下都不能够容易地透过表皮。

另一个意想不到的优点是，根据本发明，通过使用第二渗透促进剂，5-氨基乙酰丙酸明显透过基底膜被吸收到真皮中。

同样作为研发的一部分，已经对猪耳朵皮肤进行了时间分辨的离体测试以研究分布和代谢动力学。

在这些试验中，应用了更短的温育时间，并且所得荧光信号(平均像素强度)被能量分散(energy-dispersive)记录，每个能量通道包括在584-716nm的整个检测范围内的5nm带宽。根据卟啉(尿卟啉/粪卟啉以及PPIX)的独特荧光发射光谱，仅选择614nm至643nm的值，并且显示于图3和4中(通过使用显微镜软件(ZEN Black，发布版本8.1，ZEISS AG，Oberkochen，德国)的图像)。针对各个波长范围，表皮层的积分强度值(作为平均像素强度)显示于表2中。除了实施例12之外，温育并测量市售产品

Kerastick。一安瓿的

Kerastic含有1.5mL的包含酒精USP(乙醇含量＝48％v/v)、水、月桂醇聚醚-4、异丙醇和聚乙二醇的溶液赋形剂(vehicle)。另一个安瓿含有354mg的ALA HCl，其为干燥固体。

表2：

意想不到的优点是，在15分钟温育时间后，已经能够在表皮层中检测到显著量的卟啉，并且与市售产品相比，能够达到更高的卟啉浓度。在60分钟温育时间后，本发明所述的实施例的结果大于市售产品的各个值。

根据本发明，制剂包含活性物质，其为呈其盐酸盐形式的5-氨基乙酰丙酸，其在细胞中转化为原卟啉IX。基质基本上呈水相，其对于皮肤施用是最佳的，并且经调节用于治疗的pH处于pH 3.5至pH 4.5的可接受且耐受良好的范围内。该pH值范围保证了产品在24小时内的稳定性，以便在治疗上使用。调节的粘度导致在32℃(皮肤温度)最终混合物的相当低粘度的凝胶，范围为3000-5000mPas。这种粘度允许凝胶在施用区域上易于扩散，并且还允许探索难以到达的皮肤表面，同时它对皮肤具有足够的粘附性，使得其保持在皮肤上而不会不受控制地扩散。

结果

考虑以下标准文献，在猪耳朵皮肤上进行离体试验：

-W..Meyer，Dermatologist 47.178-182，1996；Meyer等人，Münch TierarztlWschr.114：92-99，2001；Meyer等人，Münch Tierarztl Wschr 114：100-111，2001)

-专利WO 2004092726 A1

-Biana Godin，Elka Touitou Transdermal skin delivery：Predictions forhumans from in vivo，ex vivo and animal models

-Histochemical Techniques，JD Bancroft

猪耳朵皮肤被描述为与人皮肤相比在生理和尺寸方面最接近的方法。据记载，人表皮厚度为0.08至0.12mm。与人皮肤相比，猪耳朵皮肤中不存在皮下脂肪组织，所描绘的图片仅由表皮层下面的真皮层组成。

猪耳朵取自新鲜屠宰的猪(Süddeutsches Schweinefleischzentrum UlmDonautal GmbH，德国)。在使用热水清洗整只猪之前切下猪耳朵，以尽可能保持皮肤完整。

将限定量的药物产品施用在猪耳朵皮肤的标记方形区域上，然后在37℃将整个猪耳朵在Heracell 150i恒温箱(Thermo Scientific，Waltham，USA)中进行温育。4小时后，将猪耳朵从恒温箱中取出，并且使用解剖刀切下含有药物产品的先前标记的区域。

然后将所得的一块猪耳朵皮肤包埋到用于冷冻切片的包埋介质中(Nr.020108926；Leica Instruments，Nussloch)。在-20℃冷冻所包埋的块之后，使用冷冻切片机(CM-3050S，Leica Instruments，Nussloch)制备限定厚度的垂直切片。然后使用甘油凝胶(甘油明胶水性载玻片封固剂，Sigma-Aldrich，St.Louis，USA)将这些切片固定在载玻片上。然后将这些样品储存在-40℃。

通过共聚焦激光扫描显微镜(CLSM 510Meta ZEISS AG，Oberkochen，德国)，使用10倍物镜(10x 0.3NA EC Plan-Neofluar Ph1 M27，ZEISS AG，Oberkochen，德国)拍摄到图中所示的图片。通过选定的10倍放大倍数物镜所得到的显示顶层猪耳朵皮肤的图片尺寸为1.4mm x 1.4mm。图2反映了本发明的制剂(实施例11)到猪耳朵中的渗透深度。如能够容易看出的，与对比例的那些相比，本发明的组合物显示出大得多的渗透深度(通过箭头示出)。

仍通过共聚焦激光扫描显微镜成像，但是通过使用20倍物镜，拍摄到图3至图6的图片。通过选定的20倍放大倍数物镜所得到的显示顶层猪耳朵的图片尺寸为0.7mm x0.7mm。图3显示在15分钟温育时间后实施例12的组合物在表皮层中的卟啉强度分布，并且图4显示在60分钟温育时间后的分布。为了进行比较，图5描绘了15分钟温育时间后表皮层的

Kerastick卟啉强度分布，并且图6描绘了60分钟温育时间后的分布。显而易见的是，与市售制剂相比，在表皮层中以及甚至更深处能够检测到显著的卟啉信号，发现所述信号要强得多。这证明了所述发明的独特渗透机制在5-ALA分子向用于PDT治疗的治疗可用的卟啉光敏剂的更快分布和代谢方面的结果。

Claims (15)

1.一种组合物，其包含：

a)作为活性成分的5-氨基-4-氧代-戊酸(5-氨基乙酰丙酸或5-ALA)或其盐酸盐(5-ALA-HCl)；

b)8-12％w/w的选自一种或多种非乙氧基化的水混溶性醚化合物的第一渗透促进剂，所述非乙氧基化的水混溶性醚化合物选自1,4:3,6-二脱水山梨糖醇2,5-戊基乙基醚(戊基乙基异山梨醇)、1,4:3,6-二脱水山梨糖醇2,5-月桂基甘油基醚(月桂基甘油基异山梨醇)和1,4:3,6-二脱水山梨糖醇2,5-二甲基醚(二甲基异山梨醇)；和

c)0.5-1.5％w/w的选自糖胺聚糖化合物的第二渗透促进剂，所述糖胺聚糖化合物是透明质酸钠，并且

其中所述组合物的pH值为3.5以上且低于6。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述活性成分是呈其盐酸盐形式的5-氨基乙酰丙酸(5-ALA HCl)，并且，按组合物总重量计，以5-30％w/w的浓度范围包含在所述组合物中。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述活性成分是呈其盐酸盐形式的5-氨基乙酰丙酸(5-ALA HCl)，并且，按组合物总重量计，以10-25％w/w的浓度范围包含在所述组合物中。

4.根据权利要求1或2所述的组合物，其是药物组合物并且包含一种或多种药用助剂。

5.根据权利要求1或2所述的组合物，其是呈低粘度水凝胶形式的局部用组合物。

6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述低粘度水凝胶在32℃具有1,000-13,000mPas的粘度。

7.根据权利要求1所述的组合物，其中，按组合物总重量计，所述一种或多种糖胺聚糖化合物以0.8-1.2％w/w的范围包含在所述组合物中。

8.根据权利要求1所述的组合物，其是低粘度水凝胶并且含有5-ALA HCl、二甲基异山梨醇和透明质酸钠。

9.根据权利要求8所述的组合物，其以20％w/w的量含有5-ALA HCl，以10％w/w的量含有二甲基异山梨醇，并且以1％w/w的量含有透明质酸钠。

10.根据权利要求1所述的组合物，其进一步包含一种或多种防腐剂、螯合剂和/或缓冲剂/酸度调节剂。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的组合物在制备用于在身体的内部或外部表面的病症或异常的光化学治疗性治疗或诊断中的药物中的用途。

12.根据权利要求11所述的用途，其中所述身体的内部或外部表面的病症或异常选自前期癌和癌症。

13.根据权利要求11所述的用途，其中所述身体的内部或外部表面的病症或异常选自皮肤的癌前病变和其它类型的非黑素瘤皮肤癌。

14.根据权利要求13所述的用途，其中所述皮肤的癌前病变是光化性角化病。

15.根据权利要求13所述的用途，其中所述其它类型的非黑素瘤皮肤癌为鳞状细胞癌或基底细胞癌。

Images