CN108318456A - 一种基于曙红测定罗红霉素的方法 - Google Patents

一种基于曙红测定罗红霉素的方法 Download PDF

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唐宁莉
马小龙
王文平
符小恋
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    • G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/47—Scattering, i.e. diffuse reflection
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Abstract

本发明公开了一种基于曙红测定罗红霉素的方法。8支10mL比色管中依次加入0.0、0.1、0.2、0.3、0.5、0.7、1.0、1.2mL 0.05mg/L罗红霉素，再分别加入曙红、醋酸，稀释，反应后，用1cm比色皿于荧光光度计上以λex=λem的方式扫描光谱,在567nm处分别测定加有罗红霉素和不加罗红霉素的空白的散射强度I和I0，计算散射强度差值ΔI=I‑I0。取罗红霉素胶囊用无水乙醇溶解，过滤，超纯水定容至100mL，取5mL用乙醇定容至50mL，再取稀释后的溶液0.5mL用乙醇定容至50mL作为待测液，同法测定散射强度值，计算出胶囊中罗红霉素的含量。本发明测定方法简单、灵敏度高。

Description

一种基于曙红测定罗红霉素的方法
技术领域
本发明涉及罗红霉素的测定方法，特别是基于曙红测定罗红霉素的共振散射光谱法。
背景技术
罗红霉素(ROX)是一种半合成的大环内酯类抗生素，对化脓性链球菌、肺炎双球菌、表皮葡萄球菌、阴道厌氧菌、金葡菌、军团菌、衣原体、梅毒螺旋体、脑炎弓形体及肺炎支原体等有抗菌作用。目前，测定大环内酯类抗生素的主要方法有微生物法、分光光度法、色谱法、电化学发光法、旋光法等。共振散射光谱法因具有简便快速、灵敏度高、检出限低等特点，近年来已用于痕量分析。曙红是一种阴离子生物染色剂，带有亲水性基团磺酸基，易溶于水，在酸性条件下，罗红霉素与曙红之间以静电引力相结合形成离子缔合物，使体系的共振散射强度增大，根据反应前后体系共振散射强度的变化可建立定量测定罗红霉素的方法，此方法目前尚未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种基于曙红测定罗红霉素的共振散射光谱法。
具体步骤为：
于8支10mL比色管中，依次加入0.0、0.1、0.2、0.3、0.5、0.7、1.0、1.2mL浓度为0.05mg/L的罗红霉素溶液，再在8支比色管中分别加入1.5mL浓度为1.0×10-3mol/L的曙红和0.3mL浓度为0.1mol/L的醋酸，用超纯水稀释至刻度，35℃下反应10分钟后，用1cm比色皿于荧光光度计上以λex＝λem的方式扫描光谱，在567nm波长处分别测定加有罗红霉素溶液的散射强度I和不加罗红霉素的试剂空白溶液的散射强度I0，计算散射强度的差值ΔI＝I-I0，其散射强度的差值ΔI与罗红霉素浓度c在5.0×10-4～6.0×10-3mg/L范围内成线性关系，线性回归方程为ΔΙ＝4.595×104c-9.497，相关系数0.9981，检出限9.3×10-5mg/L。另取罗红霉素胶囊1粒，称取0.0050g，用20mL无水乙醇溶解，过滤，滤液用超纯水定容于100mL容量瓶中，然后取5mL上述溶液用质量百分比浓度为20％的乙醇定容于50mL容量瓶，再取稀释后的溶液0.5mL用质量百分比浓度为20％的乙醇定容于50mL容量瓶中作为待测液，取0.3mL待测液同法测定散射强度值，计算出罗红霉素胶囊中罗红霉素的含量。
本发明测定方法简单、灵敏度高。
附图说明
图1为本发明实施例空白与3.5×10-3mg/L罗红霉素的共振散射光谱图。
图中标记：a：空白；b：空白-3.5×10-3mg/L ROX。
具体实施方式
实施例：
于8支10mL比色管中，依次加入0.0、0.1、0.2、0.3、0.5、0.7、1.0、1.2mL浓度为0.05mg/L罗红霉素溶液，再在8支比色管中都加入1.5mL浓度为1.0×10-3mol/L的曙红溶液和0.3mL浓度为0.1mol/L的醋酸溶液，用超纯水稀释至刻度，35℃下反应10分钟后，用1cm比色皿于荧光光度计上以λex＝λem的方式扫描光谱，在567nm处分别测定加有罗红霉素溶液的散射强度I和不加罗红霉素的试剂空白溶液的散射强度I0，计算散射强度的差值ΔI＝I-I0，其散射强度的差值ΔI与罗红霉素浓度c在5.0×10-4～6.0×10-3mg/L范围内成线性关系，线性回归方程为ΔΙ＝4.595×104c-9.497，相关系数0.9981，检出限9.3×10-5mg/L。分别取珠海安生凤凰制药股份有限公司(样品1)和江苏福邦药业有限公司(样品2)生产的罗红霉素胶囊各1粒(规格：150mg/粒)，分别称取0.0050g，用无水乙醇溶解，过滤，滤液用超纯水定容于100mL容量瓶中，然后分别取5mL上述溶液用质量百分比浓度为20％的乙醇定容于50mL容量瓶中，再分别取稀释后的溶液0.5mL用质量百分比浓度为20％的乙醇定容于50mL容量瓶中作为待测液，分别取0.3mL待测液同法测定散射强度值，分别计算出罗红霉素胶囊中罗红霉素的含量,结果见表1。
表1:罗红霉素胶囊分析结果(n＝5)
样品 测定值(mg/粒) 回收率(％) RSD(％)
1 145.2 97.3 2.3
2 144.6 106.5 2.9

Claims (1)

1.一种测定罗红霉素的方法，其特征在于具体步骤为：
于8支10 mL比色管中，依次加入0.0、0.1、0.2、0.3、0.5、0.7、1.0、1.2mL 浓度为0.05mg/L的罗红霉素溶液，再在8支比色管中分别加入1.5mL 浓度为1.0×10-3 mol/L的曙红和0.3mL浓度为 0.1mol/L的醋酸，用超纯水稀释至刻度，35℃下反应10分钟后，用1cm比色皿于荧光光度计上以λex=λem的方式扫描光谱,在567nm处分别测定加有罗红霉素溶液的散射强度I和不加罗红霉素的试剂空白溶液的散射强度I0，计算散射强度的差值ΔI = I-I0，其散射强度的差值ΔI与罗红霉素浓度c在5.0×10-4～6.0×10-3 mg/L范围内成线性关系，线性回归方程为ΔΙ=4.595×104c-9.497，相关系数0.9981，检出限9.3×10-5 mg/L；另取罗红霉素胶囊1粒，称取0.0050g，用无水乙醇溶解，过滤，滤液用超纯水定容于100mL容量瓶中，然后取5mL上述溶液用质量百分比浓度为20%的乙醇定容于50mL容量瓶中，再取稀释后的溶液0.5mL用质量百分比浓度为20%的乙醇定容于50mL容量瓶中作为待测液，取0.3mL待测液同法测定散射强度值，计算出罗红霉素胶囊中罗红霉素的含量。
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