CN108285916A - 用花青素检验益生菌活性的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明用花青素检验益生菌活性的方法属于测试领域，特别是涉及一种借助于测定材料的化学或物理性质来测试或分析材料的方法。其目的是为了提供一种可以更快速，直观的用花青素检验益生菌活性的方法。本发明用花青素检验益生菌活性的方法包括以下步骤：益生菌发酵；提取花青素；显色；根据显色判断益生菌活性。本发明的用花青素检验益生菌活性的方法可以直观的通过颜色变化证明益生菌产品的活性，为益生菌厂商参展或商务洽谈中促进成交量提供了有利条件。
Description
技术领域
本发明属于测试领域，特别是涉及一种借助于测定材料的化学或物理性质来测试或分析材料的方法。
背景技术
随着大量科学研究证明，肠道微生态系统稳定是人类健康的本源，现在社会，空气污染、水污染、饮食结构不均衡等诸多因素，导致了人体肠道微生态系统失衡，各种疾病泛滥，改变这一现状的办法，是合理补充益生菌产品。而市场上大量益生菌产品鱼龙混杂，随意添加辅料、加工工艺不达标、没有使用国家规定的益生菌目录菌株、菌株活性不够等等问题层出不穷。市场上普遍益生菌产品类型是冻干粉，菌株属于休眠状态，如何快速直观的给客户展示益生菌活性高低的方法成了每个益生菌厂商的痛点。
发明内容
本发明是为了解决现有益生菌活性检测中试验过程时间长的技术问题，而提供了一种可以更快速，直观的用花青素检验益生菌活性的方法。
本发明涉及一种用花青素检验益生菌活性的方法，所述方法包括以下步骤：
(1)将1份固态益生菌菌剂或液态益生菌菌剂放入1～5000份发酵培养基中，10～50℃保温1～48h，得到益生菌发酵液；所述发酵培养基包括：牛奶、复原乳、豆奶、花生奶或果蔬汁；
(2)将1份富含花青素的天然食物放入温度为0～50℃、pH值为4～8的5～100份水中浸泡0.1～15min，搅拌1～10min，制得检测液；
(3)在两个透明容器中加入等量步骤(2)制得的检测液；
(4)向步骤(3)的两份检测液中分别加入步骤(1)中的发酵培养基和步骤(1)制得的益生菌发酵液；
(5)静置1～10min，将加入益生菌发酵液的检测液与加入发酵培养基的检测液进行对比：当加入益生菌发酵液的检测液颜色与加入发酵培养基的检测液相比更红，则说明步骤(1)中加入的固态益生菌菌剂或液态益生菌菌剂具有活性；当加入益生菌发酵液的检测液颜色与加入发酵培养基的检测液相比无明显差异，则说明步骤(1)中加入的固态益生菌菌剂或液态益生菌菌剂不具有活性；
所述份数均为质量份数。
优选地，所述富含花青素的天然食物包括蓝莓、黑枸杞、桑葚、紫甘蓝、紫薯、黑莓、黑加仑、红枸杞、蔓越莓、蓝靛果、红树莓、钙果、葡萄、无花果、樱桃、甜菜根、茄子、血橙、红莓、草莓、山楂皮、紫苏、黑(红)米。
优选地，所述果蔬汁中，果蔬包括苹果、梨、芒果、葡萄、胡萝卜、番茄、芹菜、红薯、马铃薯、南瓜或山芋。水果中果酸等水溶性物质不会影响检测结果。
优选地，所述步骤(1)中保温的温度为30℃。
优选地，所述步骤(1)中保温的时间为30h。
优选地，所述步骤(2)中水的pH值为6。
本发明的工作原理为：
花青素(Anthocyanidins)，属酚类化合物中的类黄酮类，为水溶性色素。广泛存在于植物花瓣、果实的组织中及茎叶的表面细胞与下表皮层。其色泽随pH不同而改变，在低pH值(酸性条件)下存在有色花色素，呈现红色，而在较高pH值(碱性条件)下存在无色查尔酮形式。利用花青素在酸碱条件下显色反应的差异性间接证明益生菌活性，具体如图1所示。
乳酸菌(益生菌的一种)发酵的代谢产物主要有有机酸类、细菌素类、乙醛等芳香物质，利用含有乳酸菌株的益生菌制剂发酵溶液制造酸性环境，使花青素水溶液变色，乳酸菌活性越高，产酸越多，花青素水溶液显色反应越明显，间接证明益生菌制剂菌株活性高。
本发明用花青素检验益生菌活性的方法与现有技术不同之处在于：
1、本发明用花青素检验益生菌活性的方法中利用天然食物花青素来源，取材方便，价格便宜，利用其可溶于水的特点，可以快速提取制作花青素水溶液(即检测液)。
2、本发明用花青素检验益生菌活性的方法可以直观的通过颜色变化证明益生菌产品的活性，为益生菌厂商参展或商务洽谈中促进成交量提供了有利条件。
3、本发明用花青素检验益生菌活性的方法中取材全部为可食用食品，试验过程简单，易操作，安全环保。
附图说明
图1为本发明用花青素检验益生菌活性的反应原理图。
具体实施方式
通过以下实施例和验证试验对本发明的用花青素检验益生菌活性的方法作进一步的说明。
实施例1
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法，按以下步骤进行：
(1)本实施例的检测样品为固态益生菌菌剂，将1份益生菌菌剂放入5000份发酵培养基中，10℃保温10h，得到益生菌发酵液；发酵培养基为果蔬汁；
(2)将1份富含花青素的天然食物放入温度为32℃、pH值为6的75份水中浸泡0.1min，搅拌3min，制得检测液；
(3)在两个透明容器中加入等量步骤(2)制得的检测液；
(4)向步骤(3)的两份检测液中分别加入步骤(1)中的发酵培养基和步骤(1)制得的益生菌发酵液；
(5)静置5min，将加入益生菌发酵液的检测液与加入发酵培养基的检测液进行对比：加入益生菌发酵液的检测液颜色与加入发酵培养基的检测液相比更红，说明步骤(1)中加入的固态益生菌菌剂具有活性；经过乳酸菌计数国标法再次验证，该固态益生菌菌剂具有活性。
其中，富含花青素的天然食物为黑枸杞；果蔬汁中，果蔬为苹果。
实施例2
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法，按以下步骤进行：
(1)本实施例的检测样品为液态益生菌菌剂，将1份益生菌菌剂放入3000份发酵培养基中，50℃保温1h，得到益生菌发酵液；发酵培养基为牛奶；
(2)将1份富含花青素的天然食物放入温度为20℃、pH值为4的5份水中浸泡15min，搅拌8min，制得检测液；
(3)在两个透明容器中加入等量步骤(2)制得的检测液；
(4)向步骤(3)的两份检测液中分别加入步骤(1)中的发酵培养基和步骤(1)制得的益生菌发酵液；
(5)静置1min，将加入益生菌发酵液的检测液与加入发酵培养基的检测液进行对比：加入益生菌发酵液的检测液颜色与加入发酵培养基的检测液相比更红，说明步骤(1)中加入的液态益生菌菌剂具有活性；经过乳酸菌计数国标法再次验证，该液态益生菌菌剂具有活性。
其中，富含花青素的天然食物为葡萄。
实施例3
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法，按以下步骤进行：
(1)本实施例的检测样品为液态益生菌菌剂，将1份益生菌菌剂放入1份发酵培养基中，30℃保温6h，得到益生菌发酵液；发酵培养基为豆奶；
(2)将1份富含花青素的天然食物放入温度为0℃、pH值为7的50份水中浸泡11min，搅拌10min，制得检测液；
(3)在两个透明容器中加入等量步骤(2)制得的检测液；
(4)向步骤(3)的两份检测液中分别加入步骤(1)中的发酵培养基和步骤(1)制得的益生菌发酵液；
(5)静置10min，将加入益生菌发酵液的检测液与加入发酵培养基的检测液进行对比：加入益生菌发酵液的检测液颜色与加入发酵培养基的检测液相比无明显差异，说明步骤(1)中加入的液态益生菌菌剂不具有活性；经过乳酸菌计数国标法再次验证，该液态益生菌菌剂不具有活性。
其中，富含花青素的天然食物为樱桃。
实施例4
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法，按以下步骤进行：
(1)本实施例的检测样品为固态益生菌菌剂，将1份益生菌菌剂放入4000份发酵培养基中，35℃保温30h，得到益生菌发酵液；发酵培养基为复原乳；
(2)将1份富含花青素的天然食物放入温度为50℃、pH值为8的25份水中浸泡8min，搅拌1min，制得检测液；
(3)在两个透明容器中加入等量步骤(2)制得的检测液；
(4)向步骤(3)的两份检测液中分别加入步骤(1)中的发酵培养基和步骤(1)制得的益生菌发酵液；
(5)静置3min，将加入益生菌发酵液的检测液与加入发酵培养基的检测液进行对比：加入益生菌发酵液的检测液颜色与加入发酵培养基的检测液相比更红，说明步骤(1)中加入的固态益生菌菌剂具有活性；经过乳酸菌计数国标法再次验证，该固态益生菌菌剂具有活性。
其中，富含花青素的天然食物为甜菜根。
实施例5
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法，按以下步骤进行：
(1)本实施例的检测样品为液态益生菌菌剂，将1份益生菌菌剂放入1800份发酵培养基中，20℃保温48h，得到益生菌发酵液；发酵培养基为花生奶；
(2)将1份富含花青素的天然食物放入温度为30℃、pH值为4的100份水中浸泡3min，搅拌5min，制得检测液；
(3)在两个透明容器中加入等量步骤(2)制得的检测液；
(4)向步骤(3)的两份检测液中分别加入步骤(1)中的发酵培养基和步骤(1)制得的益生菌发酵液；
(5)静置8min，将加入益生菌发酵液的检测液与加入发酵培养基的检测液进行对比：加入益生菌发酵液的检测液颜色与加入发酵培养基的检测液相比无明显差异，说明步骤(1)中加入的液态益生菌菌剂不具有活性；经过乳酸菌计数国标法再次验证，该液态益生菌菌剂不具有活性。
其中，富含花青素的天然食物为黑(红)米。
实施例6
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法与实施例1的不同之处在于：本实施例中的果蔬汁中果蔬为芒果，所得结果与实施例1相同。
实施例7
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法与实施例1的不同之处在于：本实施例中的果蔬汁中果蔬为葡萄，所得结果与实施例1相同。
实施例8
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法与实施例1的不同之处在于：本实施例中的果蔬汁中果蔬为番茄，所得结果与实施例1相同。
实施例9
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法与实施例1的不同之处在于：本实施例中的果蔬汁中果蔬为红薯，所得结果与实施例1相同。
实施例10
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法与实施例5的不同之处在于：本实施例中的富含花青素的天然食物为血橙，所得结果与实施例1相同。
实施例11
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法与实施例5的不同之处在于：本实施例中的富含花青素的天然食物为山楂皮，所得结果与实施例1相同。
实施例12
本实施例的用花青素检验益生菌活性的方法与实施例5的不同之处在于：本实施例中的富含花青素的天然食物为草莓，所得结果与实施例1相同。
验证试验
将本发明的技术方案与现有技术对比，具体优缺点如下表：
由上表可知，采用本发明的技术方案可以快速准确的对益生菌的活性进行检验，其操作简便，取材方便，准确性高。
虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域的技术人员应当理解，这些仅是举例说明，本发明的保护范围是由所附权利要求书限定的。本领域的技术人员在不背离本发明的原理和实质的前提下，可以对这些实施方式作出多种变更或修改，但这些变更和修改均落入本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种用花青素检验益生菌活性的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
(1)将1份固态益生菌菌剂或液态益生菌菌剂放入1～5000份发酵培养基中，10～50℃保温1～48h，得到益生菌发酵液；所述发酵培养基包括：牛奶、复原乳、豆奶、花生奶或果蔬汁；
(2)将1份富含花青素的天然食物放入温度为0～50℃、pH值为4～8的5～100份水中浸泡0.1-15min，搅拌1～10min，制得检测液；
(3)在两个透明容器中加入等量步骤(2)制得的检测液；
(4)向步骤(3)的两份检测液中分别加入步骤(1)中的发酵培养基和步骤(1)制得的益生菌发酵液；
(5)静置1～10min，将加入益生菌发酵液的检测液与加入发酵培养基的检测液进行对比：当加入益生菌发酵液的检测液颜色与加入发酵培养基的检测液相比更红，则说明步骤(1)中加入的固态益生菌菌剂或液态益生菌菌剂具有活性；当加入益生菌发酵液的检测液颜色与加入发酵培养基的检测液相比无明显差异，则说明步骤(1)中加入的固态益生菌菌剂或液态益生菌菌剂不具有活性；
所述份数均为质量份数。
2.根据权利要求1所述的用花青素检验益生菌活性的方法，其特征在于：所述富含花青素的天然食物包括蓝莓、黑枸杞、桑葚、紫甘蓝、紫薯、黑莓、黑加仑、红枸杞、蔓越莓、蓝靛果、红树莓、钙果、葡萄、无花果、樱桃、甜菜根、茄子、血橙、红莓、草莓、山楂皮、紫苏、黑米。
3.根据权利要求1所述的用花青素检验益生菌活性的方法，其特征在于：所述果蔬汁中，果蔬包括苹果、梨、芒果、葡萄、胡萝卜、番茄、芹菜、红薯、马铃薯、南瓜或山芋。
4.根据权利要求1所述的用花青素检验益生菌活性的方法，其特征在于：所述步骤(1)中保温的温度为30℃。
5.根据权利要求1所述的用花青素检验益生菌活性的方法，其特征在于：所述步骤(1)中保温的时间为30h。
6.根据权利要求1所述的用花青素检验益生菌活性的方法，其特征在于：所述步骤(2)中水的pH值为6。
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