CN108210876A - 一种滋阴补阳的人参口服液及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于保健品领域，尤其涉及一种滋阴补阳的人参口服液及其制备方法。本发明口服液由人参总苷提取物、熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物、淮山药提取物和小分子人参多肽‑锌螯合物制备而成，具有滋阴水制虚火、滋补肝肾、益精填髓、滋阴清肺、止渴止咳、清养安神的功效，特别适用于各类阴虚人群的健康养生。本发明中药提取工艺效率高、成本低、节约能源、绿色环保，进一步提高了中药材的经济价值，所制口服液高效无毒、服用方便，尤其添加了易于被人体吸收的小分子人参多肽‑锌螯合物，使服用者可以同时补充人体所需的氨基酸和微量元素，丰富了口服液保健品的营养价值。

Description

一种滋阴补阳的人参口服液及其制备方法
技术领域
本发明属于保健品领域，尤其涉及一种滋阴补阳的人参口服液及其制备方法。
背景技术
随着生活节奏的不断加快，工作和生活压力不断加大，同时生活环境恶劣，食品安全的问题也日渐严峻，亚健康的人群数量越来越多，如出现手脚心发热、口渴、咽干、虚汗等问题，就表示人体处于阴虚体质的状态。阴虚体质是指常有虚火的一类体质，由于精、血、津液等物质的亏耗，阴虚不能制阳，导致阳热相对偏亢，机体处于虚性亢奋的一种状态，使人适应能力减弱，机体容易衰老。中医理论讲究平衡，阴虚体质的调理原则是滋阴替阳，以期达到新的平衡，恢复身体健康。
人参(Panax ginseng C.A.Meyer)为五加科植物，是传统名贵中药材，因其具有悠久的药用历史和特殊功效，自古以来在东西方深受人们的青睐。人参在《神农本草经》中被列为上品，中医功效为大补元气、补脾益气、复脉固脱、益肺、生津、安神，大量药理研究、临床观察和流行病学调查研究均证实人参具有改善微循环、提高组织抗缺氧能力、抑制血小板聚集、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗疲劳等多种生物活性。2012年9月4日，中国卫生部批准人参成为新资源食品，人参的应用将由单一的中药材拓展到食品、饮料及保健产品等领域。
目前市场上常见的人参保健品，或添加人参粗提物不利于人体吸收有效成分，或因有效成分提取率低导致宝贵的原材料被大量浪费，或成分单一保健效果有限。
发明内容
为解决上述现有技术的不足，本发明提供了一种滋阴补阳的人参口服液及其制备方法。
本发明的技术方案：
一种滋阴补阳的人参口服液，包括以下重量份的组分：人参总苷提取物5～10份、熟地黄提取物10～30份、黄精提取物10～30份、何首乌提取物5～20份、女贞子提取物5～20份、枸杞子提取物5～20份、淮山药提取物5～20份、小分子人参多肽-锌螯合物30～80份；去离子水500份；其中小分子人参多肽-锌螯合物的制备方法步骤入如下：
S1、提取人参水溶性蛋白：
将新鲜人参清洗后切成小块，按一定质量体积比加入pH值为中性的Tris-HCl缓冲溶液，搅拌均匀后于一定温度下搅拌浸提，收集浸提液；重复浸提一次并将两次浸提液合并，用0.22～0.45μm滤膜将浸提液过滤澄清后，将其置于截留分子量为5～30KDa的超滤膜装置进行超滤，收集超滤保留液即为去除小分子杂质的人参水溶性蛋白粗提液；
S2、酶解人参水溶性蛋白制备小分子人参多肽：
将步骤S1得到的人参水溶性蛋白粗提液浓缩至原来体积的1/5，冷却至室温，得到人参水溶性蛋白浓缩液，将浓缩液pH值调至8.5～9.5，加入碱性蛋白酶，在一定温度下进行酶解，酶解过程中滴加NaOH溶液维持体系pH值，酶解完成后向酶解体系中加入HCl将体系pH调至5～7，加入中性蛋白酶，在一定温度下完成酶解后将酶解体系温度升至90～100℃并保持10分钟使酶失活，自然冷却至室温后调节pH值为中性，得到酶解液；利用SephadexG-25将酶解液中得到的酶解蛋白分级，收集分子量为500～1000Da的小分子人参多肽；
S3、制备小分子人参多肽-锌螯合物：
将步骤S2收集得到的小分子人参多肽与硫酸锌按一定质量比混合均匀，将反应体系调至一定pH值，在一定水浴温度下进行小分子人参多肽与硫酸锌的螯合，水浴一定时间后向体系中加入质量浓度为75％的乙醇溶液，静置20～30min，4000r/min离心15min，收集沉淀，真空干燥获得小分子人参多肽-锌螯合物。
进一步的，所述滋阴补阳的人参口服液包括以下重量份的组分：人参总苷提取物8份、熟地黄提取物20份、黄精提取物20份、何首乌提取物10份、女贞子提取物10份、枸杞子提取物10份、淮山药提取物10份、小分子人参多肽-锌螯合物50份；去离子水500份。
进一步的，所述人参总苷提取物中人参总苷纯度为90～96％，熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物和淮山药提取物的质量浓度均为75～85％。
进一步的，步骤S1所述人参原料与Tris-HCl缓冲溶液的质量体积比为1g:10～15mL；所述Tris-HCl缓冲溶液的摩尔浓度为0.01mol/L；所述搅拌浸提的温度为4℃，搅拌浸提时间为3～6h。
进一步的，步骤S2所述碱性蛋白酶的加酶量为底物质量的0.2～0.6％，酶解温度为55～70℃，酶解时间为1～2h；所述中性蛋白酶的加酶量为底物质量的2.0～3.0％，酶解温度为50～60℃，酶解时间为1～2h。
进一步的，步骤S3所述小分子人参多肽与硫酸锌的质量比为5～7:1；所述pH值为6.5～7.5，水浴温度为50～60℃，水浴时间为30～40min。
本发明所述滋阴补阳的人参口服液的制备方法步骤如下：
步骤一、制备人参总苷提取物：
选取新鲜的人参花蕾，清洗干净后将其置于60～65℃真空干燥箱中干燥10～15h，将充分干燥后的人参花蕾粉碎至50～100目；按质量体积比为1g：15～20mL向所得人参花蕾粉末中加入质量浓度为40％乙醇溶液，常温下浸泡2～3h，将浸泡有人参花蕾粉末的乙醇溶液装入耐压的塑料袋中，密封后放入高压提取装置的提取容器中；常温下在10～15min内将高压提取装置内的压强升高至300～600Mpa，保压15～25min后在10～20s内将高压提取装置内的压强迅速泄为常压；重复高压提取操作3～5次后，将塑料袋从高压提取装置的提取容器中取出，将物料过滤除去滤渣，将滤液置于3000～5000rmp离心转速下离心10～30min，取上清液重复离心1次，上清液即为人参总苷粗提液；将人参总苷粗提液进行浓缩，将浓缩液pH值调至中性后使其通过大孔吸附树脂D101色谱柱进行吸附；将质量浓度为20％的乙醇溶液pH值调至中性并以此为第1洗脱溶剂进行洗脱；将质量浓度为60％的乙醇溶液pH值调至中性并以此为第2洗脱溶剂进行洗脱，收集含有人参总苷成分的馏分，减压浓缩，喷雾干燥，得到纯化后的人参总苷提取物；
步骤二、采用超临界CO2提取方法制备熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物和淮山药提取物；
步骤三、分别按如下重量份称取人参总苷提取物5～10份、熟地黄提取物10～30份、黄精提取物10～30份、何首乌提取物5～20份、女贞子提取物5～20份、枸杞子提取物5～20份、淮山药提取物5～20份和小分子人参多肽-锌螯合物30～80份，加入500份水，经搅拌混合均匀后过滤除杂、灌装、高温灭菌，即制得所述滋阴补阳的人参口服液。
进一步的，步骤二所述超临界CO2提取方法为：将充分干燥的中药原料粉碎，取100g粉碎后的中药原料放入1L萃取釜进行萃取，超临界CO2流体萃取操作流程为液态CO2→高压泵→萃取釜(进入超临界状态)→分离釜Ⅰ→分离釜Ⅱ→循环；萃取过程中CO2流体流量为20L/h，萃取釜温度为45℃，萃取压力为30MPa，分离釜Ⅰ、分离釜Ⅱ的压力均为6MPa，分离温度均为室温，萃取过程中使用无水乙醇作为夹带剂，无水乙醇用量为500mL，萃取2～3h即得中药提取物。
本发明的有益效果：
1、本发明滋阴补阳的人参口服液以人参总苷提取物等名贵中药材的有效成分提取物为制作原料，口服液有效活性成分含量高，杂质少，避免了传统中成药饮品中非有效成分潜在的致敏危险，以及复杂的药物成分给服用者肝肾带来的负担及损伤，所制得的口服液高效无毒、服用方便。
本发明各中药有效成分之间相互配伍，具有滋阴水制虚火、滋补肝肾、益精填髓、滋阴清肺、止渴止咳、清养安神等功效，特别适用于各类阴虚人群的健康养生，尤其针对手脚心发热、口渴、咽干、虚汗的亚健康人群效果尤佳。
本发明口服液中还添加了小分子人参多肽-锌螯合物，小分子人参多肽分子量在1000D以下，非常易于被人体吸收，将小分子人参多肽与微量元素锌相螯合，其金属离子与多肽分子通过配位键结合后，生成稳定的螯合物，不仅稳定性好，缓解了矿物质之间的拮抗作用，而且在消化过程中减少了pH值、脂类、纤维和胃酸等物质的影响，使服用者在吸收小分子人参多肽，为机体补充其所富含的人体必需氨基酸的同时能够更充分的吸收、利用小分子人参多肽上螯合的微量元素。
本发明为中药深加工与利用提供了新的思路，在实现滋阴补阳的保健功能的同时，还起到了补充氨基酸和微量元素的作用，丰富了口服液保健品的营养价值。
2、本发明提取人参总苷所采用的高压提取方法利用植物细胞内外渗透压瞬间发生变化时细胞膜产生的结构变化，使得细胞内的人参总苷能够穿过细胞膜而转移到细胞外的提取液中，提高人参总苷的转移率，使人参总苷提取的更加充分，提高了人参的利用率，降低了原料成本。与热回流、煎煮、微波、超声等提取方法相比，本发明在室温下进行提取，减少了对药物活性成分的破坏，得到的提取物具有更好的药用活性，还具有提取时间短、效率高、操作简便、节约能源、对环境污染小等优点。
3、本发明采用超临界CO2提取方法制备熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物和淮山药提取物，通过控制萃取压力和温度来提高超临界CO2流体对药物活性成分的溶解性，从而提高提取率和纯度；完成萃取后通过减压使CO2气化，不残留溶剂杂质，利于后续纯化；萃取过程中使用乙醇作为夹带剂提高了药物活性成分的提取率，且乙醇易于分离，对后续纯化不造成任何影响；本发明提取过程中不使用有机溶剂，不仅降低了提取成本，更绿色环保，安全高效。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。
实施例1
本实施例一种滋阴补阳的人参口服液，包括以下重量份的组分：人参总苷提取物5～10份、熟地黄提取物10～30份、黄精提取物10～30份、何首乌提取物5～20份、女贞子提取物5～20份、枸杞子提取物5～20份、淮山药提取物5～20份、小分子人参多肽-锌螯合物30～80份；去离子水500份；
其中小分子人参多肽-锌螯合物的制备方法步骤如下：
S1、提取人参水溶性蛋白：
将新鲜人参清洗后切成小块，按一定质量体积比加入pH值为中性的Tris-HCl缓冲溶液，搅拌均匀后于一定温度下搅拌浸提，收集浸提液；重复浸提一次并将两次浸提液合并，用0.22～0.45μm滤膜将浸提液过滤澄清后，将其置于截留分子量为5～30KDa的超滤膜装置进行超滤，收集超滤保留液即为去除小分子杂质的人参水溶性蛋白粗提液；
S2、酶解人参水溶性蛋白制备小分子人参多肽：
将步骤S1得到的人参水溶性蛋白粗提液浓缩至原来体积的1/5，冷却至室温，得到人参水溶性蛋白浓缩液，将浓缩液pH值调至8.5～9.5，加入碱性蛋白酶，在一定温度下进行酶解，酶解过程中滴加NaOH溶液维持体系pH值，酶解完成后向酶解体系中加入HCl将体系pH调至5～7，加入中性蛋白酶，在一定温度下完成酶解后将酶解体系温度升至90～100℃并保持10分钟使酶失活，自然冷却至室温后调节pH值为中性，得到酶解液；利用SephadexG-25将酶解液中得到的酶解蛋白分级，收集分子量为500～1000Da的小分子人参多肽；
S3、制备小分子人参多肽-锌螯合物：
将步骤S2收集得到的小分子人参多肽与硫酸锌按一定质量比混合均匀，将反应体系调至一定pH值，在一定水浴温度下进行小分子人参多肽与硫酸锌的螯合，水浴一定时间后向体系中加入质量浓度为75％的乙醇溶液，静置20～30min，4000r/min离心15min，收集沉淀，真空干燥获得小分子人参多肽-锌螯合物。
实施例2
本实施例与实施例1的区别仅在于：实施例2滋阴补阳的人参口服液包括以下重量份的组分：人参总苷提取物8份、熟地黄提取物20份、黄精提取物20份、何首乌提取物10份、女贞子提取物10份、枸杞子提取物10份、淮山药提取物10份、小分子人参多肽-锌螯合物50份；去离子水500份。
实施例3
本实施例与实施例1的区别在于：实施例3小分子人参多肽-锌螯合物的制备方法步骤如下：
S1、提取人参水溶性蛋白：
将新鲜人参清洗后切成小块，按质量体积比为1g:10～15mL加入pH值为中性的0.01mol/L的Tris-HCl缓冲溶液，搅拌均匀后于4℃下搅拌浸提3～6h，收集浸提液；重复浸提一次并将两次浸提液合并，用0.22～0.45μm滤膜将浸提液过滤澄清后，将其置于截留分子量为5～30KDa的超滤膜装置进行超滤，收集超滤保留液即为去除小分子杂质的人参水溶性蛋白粗提液；
S2、酶解人参水溶性蛋白制备人参多肽：
将步骤S1得到的人参水溶性蛋白粗提液浓缩至原来体积的1/5，冷却至室温，得到人参水溶性蛋白浓缩液，将浓缩液pH值调至8.5～9.5，温度为55～70℃，加入底物质量0.2～0.6％的碱性蛋白酶进行酶解，酶解过程中滴加NaOH溶液维持体系pH值，酶解1～2h后向酶解体系中加入HCl将体系pH调至5～7，温度为50～60℃，加入底物质量2.0～3.0％的中性蛋白酶进行酶解，酶解1～2h后将酶解体系温度升至90～100℃并保持10分钟使酶失活，自然冷却至室温后调节pH值为中性，得到酶解液；利用SephadexG-25将酶解液中得到的酶解蛋白分级，收集分子量为500～1000Da的小分子人参多肽；
S3、制备人参多肽-锌螯合物：
将步骤S2收集得到的小分子人参多肽与硫酸锌按质量比5～7:1混合均匀，调节体系pH值为6.5～7.5，50～60℃温度下水浴30～40min，向体系中加入质量浓度为75％的乙醇溶液，静置20～30min使溶液中络合物充分生成，4000r/min离心15min，收集沉淀，真空干燥获得人参多肽-锌螯合物。
实施例4
本实施例与实施例3的区别在于：实施例4小分子人参多肽-锌螯合物的制备方法步骤如下：
S1、提取人参水溶性蛋白：
将新鲜人参清洗后切成小块，按质量体积比为1g:12mL加入pH值为中性的0.01mol/L的Tris-HCl缓冲溶液，搅拌均匀后于4℃下搅拌浸提4h，收集浸提液；重复浸提一次并将两次浸提液合并，用0.22～0.45μm滤膜将浸提液过滤澄清后，将其置于截留分子量为5～30KDa的超滤膜装置进行超滤，收集超滤保留液即为去除小分子杂质的人参水溶性蛋白粗提液；
S2、酶解人参水溶性蛋白制备人参多肽：
将步骤S1得到的人参水溶性蛋白粗提液浓缩至原来体积的1/5，冷却至室温，得到人参水溶性蛋白浓缩液，将浓缩液pH值调至8.5～9.5，温度为60℃，加入底物质量0.3％的碱性蛋白酶进行酶解，酶解过程中滴加NaOH溶液维持体系pH值，酶解1h后向酶解体系中加入HCl将体系pH调至5～7，温度为50℃，加入底物质量2.0％的中性蛋白酶进行酶解，酶解1h后将酶解体系温度升至90～100℃并保持10分钟使酶失活，自然冷却至室温后调节pH值为中性，得到酶解液；利用SephadexG-25将酶解液中得到的酶解蛋白分级，收集分子量为500～1000Da的小分子人参多肽；
S3、制备人参多肽-锌螯合物：
将步骤S2收集得到的小分子人参多肽与硫酸锌按质量比5:1混合均匀，调节体系pH值为6.5，50℃温度下水浴30min，向体系中加入质量浓度为75％的乙醇溶液，静置20～30min使溶液中络合物充分生成，4000r/min离心15min，收集沉淀，真空干燥获得人参多肽-锌螯合物。
实施例5
本实施例与实施例3的区别在于：实施例5小分子人参多肽-锌螯合物的制备方法步骤如下：
S1、提取人参水溶性蛋白：
将新鲜人参清洗后切成小块，按质量体积比为1g:13mL加入pH值为中性的0.01mol/L的Tris-HCl缓冲溶液，搅拌均匀后于4℃下搅拌浸提5h，收集浸提液；重复浸提一次并将两次浸提液合并，用0.22～0.45μm滤膜将浸提液过滤澄清后，将其置于截留分子量为5～30KDa的超滤膜装置进行超滤，收集超滤保留液即为去除小分子杂质的人参水溶性蛋白粗提液；
S2、酶解人参水溶性蛋白制备人参多肽：
将步骤S1得到的人参水溶性蛋白粗提液浓缩至原来体积的1/5，冷却至室温，得到人参水溶性蛋白浓缩液，将浓缩液pH值调至8.5～9.5，温度为65℃，加入底物质量0.4％的碱性蛋白酶进行酶解，酶解过程中滴加NaOH溶液维持体系pH值，酶解1.5h后向酶解体系中加入HCl将体系pH调至5～7，温度为55℃，加入底物质量2.5％的中性蛋白酶进行酶解，酶解1.5h后将酶解体系温度升至90～100℃并保持10分钟使酶失活，自然冷却至室温后调节pH值为中性，得到酶解液；利用SephadexG-25将酶解液中得到的酶解蛋白分级，收集分子量为500～1000Da的小分子人参多肽；
S3、制备人参多肽-锌螯合物：
将步骤S2收集得到的小分子人参多肽与硫酸锌按质量比6:1混合均匀，调节体系pH值为7.0，55℃温度下水浴35min，向体系中加入质量浓度为75％的乙醇溶液，静置20～30min使溶液中络合物充分生成，4000r/min离心15min，收集沉淀，真空干燥获得人参多肽-锌螯合物。
实施例6
本实施例与实施例3的区别在于：实施例6小分子人参多肽-锌螯合物的制备方法步骤如下：
S1、提取人参水溶性蛋白：
将新鲜人参清洗后切成小块，按质量体积比为1g:14mL加入pH值为中性的0.01mol/L的Tris-HCl缓冲溶液，搅拌均匀后于4℃下搅拌浸提6h，收集浸提液；重复浸提一次并将两次浸提液合并，用0.22～0.45μm滤膜将浸提液过滤澄清后，将其置于截留分子量为5～30KDa的超滤膜装置进行超滤，收集超滤保留液即为去除小分子杂质的人参水溶性蛋白粗提液；
S2、酶解人参水溶性蛋白制备人参多肽：
将步骤S1得到的人参水溶性蛋白粗提液浓缩至原来体积的1/5，冷却至室温，得到人参水溶性蛋白浓缩液，将浓缩液pH值调至8.5～9.5，温度为70℃，加入底物质量0.5％的碱性蛋白酶进行酶解，酶解过程中滴加NaOH溶液维持体系pH值，酶解2h后向酶解体系中加入HCl将体系pH调至5～7，温度为60℃，加入底物质量3.0％的中性蛋白酶进行酶解，酶解2h后将酶解体系温度升至90～100℃并保持10分钟使酶失活，自然冷却至室温后调节pH值为中性，得到酶解液；利用SephadexG-25将酶解液中得到的酶解蛋白分级，收集分子量为500～1000Da的小分子人参多肽；
S3、制备人参多肽-锌螯合物：
将步骤S2收集得到的小分子人参多肽与硫酸锌按质量比7:1混合均匀，调节体系pH值为7.5，60℃温度下水浴40min，向体系中加入质量浓度为75％的乙醇溶液，静置20～30min使溶液中络合物充分生成，4000r/min离心15min，收集沉淀，真空干燥获得人参多肽-锌螯合物。
实施例7
本实施例为实施例1-7公开的滋阴补阳的人参口服液的制备方法，具体步骤如下：
步骤一、制备人参总苷提取物：
为了降低本发明口服液成本，本实施例选取了人参总苷含量高，但价格相对人参根及根茎低廉的新鲜的人参花蕾为原材料，清洗干净后将其置于60～65℃真空干燥箱中干燥10～15h，将充分干燥后的人参花蕾粉碎至50～100目；按质量体积比为1g：15～20mL向所得人参花蕾粉末中加入质量浓度为40％乙醇溶液，常温下浸泡2～3h，将浸泡有人参花蕾粉末的乙醇溶液装入耐压的塑料袋中，密封后放入高压提取装置的提取容器中；常温下在10～15min内将高压提取装置内的压强升高至300～600Mpa，保压15～25min后在10～20s内将高压提取装置内的压强迅速泄为常压；重复高压提取操作3～5次后，将塑料袋从高压提取装置的提取容器中取出，将物料过滤除去滤渣，将滤液置于3000～5000rmp离心转速下离心10～30min，取上清液重复离心1次，上清液即为人参总苷粗提液；将人参总苷粗提液进行浓缩，将浓缩液pH值调至中性后使其通过大孔吸附树脂D101色谱柱进行吸附；将质量浓度为20％的乙醇溶液pH值调至中性并以此为第1洗脱溶剂进行洗脱；将质量浓度为60％的乙醇溶液pH值调至中性并以此为第2洗脱溶剂进行洗脱，收集含有人参总苷成分的馏分，减压浓缩，喷雾干燥，得到纯化后的人参总苷提取物，其中人参总苷纯度为90～96％；
步骤二、采用超临界CO2提取方法制备熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物和淮山药提取物，所得熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物和淮山药提取物的质量浓度均为75～85％；
步骤三、分别按重量份称取人参总苷提取物、熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物、淮山药提取物和小分子人参多肽-锌螯合物，加入500份水，经搅拌混合均匀后过滤除杂、灌装、高温灭菌，即制得所述滋阴补阳的人参口服液。
实施例8
本实施例与实施例7的区别在于，实施例8提取熟地黄、黄精、何首乌、女贞子、枸杞子和淮山药的超临界CO2提取方法为：将充分干燥的熟地黄、黄精、何首乌、女贞子、枸杞子或淮山药原料粉碎，取100g粉碎后的中药原料放入1L萃取釜进行萃取，超临界CO2流体萃取操作流程为液态CO2→高压泵→萃取釜(进入超临界状态)→分离釜Ⅰ→分离釜Ⅱ→循环；萃取过程中CO2流体流量为20L/h，萃取釜温度为45℃，萃取压力为30MPa，分离釜Ⅰ、分离釜Ⅱ的压力均为6MPa，分离温度均为室温，萃取过程中使用无水乙醇作为夹带剂，无水乙醇用量为500mL，萃取2～3h并将所得萃取液浓缩，即得熟地黄、黄精、何首乌、女贞子、枸杞子或淮山药提取物；所得熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物和淮山药提取物的质量浓度均为75～85％。
对比例1
本对比例与实施例1的区别仅在于，对比例1的口服液配方包括以下重量份的组分：熟地黄提取物10～30份、黄精提取物10～30份、何首乌提取物5～20份、女贞子提取物5～20份、枸杞子提取物5～20份、淮山药提取物5～20份、去离子水500份。
对比例2
本对比例与实施例1的区别仅在于，对比例2的口服液配方仅包括以下重量份的组分：人参总苷提取物5～10份、小分子人参多肽-锌螯合物30～80份，去离子水500份。
临床药效试验
测试对象：选择30～50岁，有手脚心发热、口渴、咽干、虚汗症状的男性、女性各150名；
试验方法：将300名测试对象随机分成5组，每组30名男性、30名女性；
第1组服用实施例1提供的人参滋阴补阳口服液，
第2组服用实施例2提供的人参滋阴补阳口服液，
第3组服用对比例1制备的口服液，
第4组服用对比例2制备的口服液，
第5组服用安慰剂，安慰剂由焦糖色素和苦味剂调配而成，不含任何药物成分；，
以上五组每天早晚各服用一次，坚持服用30天后，对测试对象手脚心发热、口渴、咽干和虚汗症状进行考察，结果如表1所示：
表1
由表1测试结果可知，第1、2组的测试对象中有95.5％左右在服用本发明实施例3、4、5制备的滋阴补阳人参口服液1个月后，手脚心发热、口渴、咽干和虚汗症状均得到了有效缓解；第3组服用仅由熟地黄、黄精、何首乌、女贞子、枸杞子和淮山药提取物制备的口服液和第4组服用仅由人参总苷提取物和小分子人参多肽-锌螯合物制备的口服液的测试对象中，仅32.5％和42％手脚心发热、口渴、咽干和虚汗症状均得到缓解；而第5组服用安慰剂的测试对象中仅3％症状得到了缓解。由此可见，本发明滋阴补阳人参口服液中各有效药物成分相配伍能够更有效的起到滋阴水制虚火、滋补肝肾、益精填髓、滋阴清肺、止渴止咳、清养安神的功效，从而更好的缓解服用者手脚心发热、口渴、咽干和虚汗的症状。

Claims (8)

1.一种滋阴补阳的人参口服液，其特征在于所述滋阴补阳的人参口服液包括以下重量份的组分：人参总苷提取物5～10份、熟地黄提取物10～30份、黄精提取物10～30份、何首乌提取物5～20份、女贞子提取物5～20份、枸杞子提取物5～20份、淮山药提取物5～20份、小分子人参多肽-锌螯合物30～80份；去离子水500份；其中小分子人参多肽-锌螯合物的制备方法步骤入如下：
S1、提取人参水溶性蛋白：
将新鲜人参清洗后切成小块，按一定质量体积比加入pH值为中性的Tris-HCl缓冲溶液，搅拌均匀后于一定温度下搅拌浸提，收集浸提液；重复浸提一次并将两次浸提液合并，用0.22～0.45μm滤膜将浸提液过滤澄清后，将其置于截留分子量为5～30KDa的超滤膜装置进行超滤，收集超滤保留液即为去除小分子杂质的人参水溶性蛋白粗提液；
S2、酶解人参水溶性蛋白制备小分子人参多肽：
将步骤S1得到的人参水溶性蛋白粗提液浓缩至原来体积的1/5，冷却至室温，得到人参水溶性蛋白浓缩液，将浓缩液pH值调至8.5～9.5，加入碱性蛋白酶，在一定温度下进行酶解，酶解过程中滴加NaOH溶液维持体系pH值，酶解完成后向酶解体系中加入HCl将体系pH调至5～7，加入中性蛋白酶，在一定温度下完成酶解后将酶解体系温度升至90～100℃并保持10分钟使酶失活，自然冷却至室温后调节pH值为中性，得到酶解液；利用SephadexG-25将酶解液中得到的酶解蛋白分级，收集分子量为500～1000Da的小分子人参多肽；
S3、制备小分子人参多肽-锌螯合物：
将步骤S2收集得到的小分子人参多肽与硫酸锌按一定质量比混合均匀，将反应体系调至一定pH值，在一定水浴温度下进行小分子人参多肽与硫酸锌的螯合，水浴一定时间后向体系中加入质量浓度为75％的乙醇溶液，静置20～30min，4000r/min离心15min，收集沉淀，真空干燥获得小分子人参多肽-锌螯合物。
2.根据权利要求1所述一种滋阴补阳的人参口服液，其特征在于所述滋阴补阳的人参口服液包括以下重量份的组分：人参总苷提取物8份、熟地黄提取物20份、黄精提取物20份、何首乌提取物10份、女贞子提取物10份、枸杞子提取物10份、淮山药提取物10份、小分子人参多肽-锌螯合物50份；去离子水500份。
3.根据权利要求1或2所述一种滋阴补阳的人参口服液，其特征在于所述人参总苷提取物中人参总苷纯度为90～96％，熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物和淮山药提取物的质量浓度均为75～85％。
4.根据权利要求3所述一种滋阴补阳的人参口服液，其特征在于步骤S1所述人参原料与Tris-HCl缓冲溶液的质量体积比为1g:10～15mL；所述Tris-HCl缓冲溶液的摩尔浓度为0.01mol/L；所述搅拌浸提的温度为4℃，搅拌浸提时间为3～6h。
5.根据权利要求4所述一种滋阴补阳的人参口服液，其特征在于步骤S2所述碱性蛋白酶的加酶量为底物质量的0.2～0.6％，酶解温度为55～70℃，酶解时间为1～2h；所述中性蛋白酶的加酶量为底物质量的2.0～3.0％，酶解温度为50～60℃，酶解时间为1～2h。
6.根据权利要求5所述一种滋阴补阳的人参口服液，其特征在于步骤S3所述小分子人参多肽与硫酸锌的质量比为5～7:1；所述pH值为6.5～7.5，水浴温度为50～60℃，水浴时间为30～40min。
7.一种如权利要求1-6任一权利要求所述滋阴补阳的人参口服液的制备方法，其特征在于所述制备方法步骤如下：
步骤一、制备人参总苷提取物：
选取新鲜的人参花蕾，清洗干净后将其置于60～65℃真空干燥箱中干燥10～15h，将充分干燥后的人参花蕾粉碎至50～100目；按质量体积比为1g：15～20mL向所得人参花蕾粉末中加入质量浓度为40％乙醇溶液，常温下浸泡2～3h，将浸泡有人参花蕾粉末的乙醇溶液装入耐压的塑料袋中，密封后放入高压提取装置的提取容器中；常温下在10～15min内将高压提取装置内的压强升高至300～600Mpa，保压15～25min后在10～20s内将高压提取装置内的压强迅速泄为常压；重复高压提取操作3～5次后，将塑料袋从高压提取装置的提取容器中取出，将物料过滤除去滤渣，将滤液置于3000～5000rmp离心转速下离心10～30min，取上清液重复离心1次，上清液即为人参总苷粗提液；将人参总苷粗提液进行浓缩，将浓缩液pH值调至中性后使其通过大孔吸附树脂D101色谱柱进行吸附；将质量浓度为20％的乙醇溶液pH值调至中性并以此为第1洗脱溶剂进行洗脱；将质量浓度为60％的乙醇溶液pH值调至中性并以此为第2洗脱溶剂进行洗脱，收集含有人参总苷成分的馏分，减压浓缩，喷雾干燥，得到纯化后的人参总苷提取物；
步骤二、采用超临界CO2提取方法制备熟地黄提取物、黄精提取物、何首乌提取物、女贞子提取物、枸杞子提取物和淮山药提取物；
步骤三、分别按如下重量份称取人参总苷提取物5～10份、熟地黄提取物10～30份、黄精提取物10～30份、何首乌提取物5～20份、女贞子提取物5～20份、枸杞子提取物5～20份、淮山药提取物5～20份和小分子人参多肽-锌螯合物30～80份，加入500份水，经搅拌混合均匀后过滤除杂、灌装、高温灭菌，即制得所述滋阴补阳的人参口服液。
8.根据权利要求7所述一种滋阴补阳的人参口服液的制备方法，其特征在于步骤二所述超临界CO2提取方法为：将充分干燥的中药原料粉碎，取100g粉碎后的中药原料放入1L萃取釜进行萃取，超临界CO2流体萃取操作流程为液态CO2→高压泵→萃取釜(进入超临界状态)→分离釜Ⅰ→分离釜Ⅱ→循环；萃取过程中CO2流体流量为20L/h，萃取釜温度为45℃，萃取压力为30MPa，分离釜Ⅰ、分离釜Ⅱ的压力均为6MPa，分离温度均为室温，萃取过程中使用无水乙醇作为夹带剂，无水乙醇用量为500mL，萃取2～3h即得中药提取物。
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