CN108148790A - 一种畜禽生物粪便降解的混合菌种、载体及方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种畜禽生物粪便降解的混合菌种、载体及方法,混合菌种主要由枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌组成,混合菌种为黄色液体,载体与混合菌种混合再破碎得到菌种体,混合菌种与畜禽粪便混合进行粪便降解,产生的少量残物可作为有机肥应用于绿化。本发明的一种畜禽生物粪便降解的混合菌种、载体及方法,具有以下优点:使畜禽粪尿零排放,无污染,无臭味,同时畜禽生物降解含有天然抗生素,可提畜禽高免疫力,能保持恒温、稳定发酵;畜禽生物降解装置或设备可节约土地资源、畜禽养殖建设成本,节约人工和能源等,在此基础上对应工作目的进行组合使之达到处置有机物或降解有机物的目标。
Description
技术领域
本发明涉及畜禽粪尿处理技术领域,特别涉及一种畜禽生物粪便降解的混合菌种、载体及方法。
背景技术
近年来,随着集约化养殖业的快速发展,如何有效、经济的处理畜禽粪尿,使其不对环境造成污染,成为养殖企业的头等大事。
目前养殖企业普遍采用如图1所示的沼气工程技术来对所收集的畜禽粪尿进行处理。但是从客观上讲,沼气工程技术进步不明显,处理效率低下。另外,养殖场污染物包括畜禽粪便和圈舍冲洗水两类,前者浓度高,但是其量仅为冲洗水量的1/7左右。如果将两类粪污放在一起发酵处理,基建投资和运行费用很高,发酵条件也很难得到满足如要将冲洗水采用中温发酵就很得到满足。
再者,图1所示的沼气工程技术还存在着如下缺点:
(1)沼气处理的相关设备多,且成本昂贵,日常的管理与维护工作烦琐;
(2)为了达到圈舍内清粪目的,还必须依靠大量的人力或者昂贵的机械设备;
(3)沼气化处理需要消耗大量的淡水资源以及土地资源;
(4)厌氧微生物增殖缓慢,因此沼气处理的时间周期漫长,无法应对每天产生的大量畜禽粪尿;
(5)一般情况下,沼气处理后的出水水质不能直接达到符合排放标准的要求,需要进一步处理,因此还需要增加相应的处理设备;
(6)沼气处理过程中产生的以甲烷气体为主的沼气是一种易燃易爆气体,存在安全隐患;
(7)对温度要求严格,废水温度低时对处理效果影响很大,管理操作比较复杂;
(8)无法解决圈舍内的臭气,影响周边居民的生活环境。
为此,近年来,在养殖技术中采用了一种在发酵床的条件下养殖的技术,即利用特异微生物菌群将锯末、稻壳、米糠等有机物经发酵处理制成垫料,畜禽饲养在垫料上,由有益微生物组成的复合菌群以畜禽粪尿为基础营养迅速繁殖,各种病原微生物被杀灭抑制,为畜禽的生长发育提供了良好的养殖环境,同时粪尿也被消化分解,圈舍物臭味,实现零排放。发酵床的制作基本上是采用如米糠、谷壳、秸秆等有机质作为垫料,垫料厚度从50cm到80cm不等,并用微生物菌种对垫料进行发酵制成。这一类的技术有如以下专利:
中国专利申请公布号CN10280263公开的“一种微生物降解床料”,其由玉米粉、元宝风叶醇提取微生物菌种、元宝枫叶粉和有机碎屑制备而成,其采用的微生物菌种为益生菌系。
中国专利申请公布好CN10382126公开的“一种畜禽圈舍改良剂”,其由菠萝蛋白酶、糖化酶、纤维素酶、枯草芽孢杆菌、绿色木霉、米曲霉、蒙脱石或沸石粉制备而成。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于针对上述技术问题而提供一种畜禽生物粪便降解的混合菌种、载体及方法。
本发明所要解决的技术问题可以通过以下技术方案来实现:
一种畜禽生物粪便降解的混合菌种,其特征在于,由以下微生物组成:枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌,混合菌种为黄色液体。
进一步的,所述菌种的菌数范围比例为:枯草芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为6-30亿cfu/g,短小芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为7-35亿cfu/g,蜡状芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为6-35亿cfu/g,地衣芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为7-30亿cfu/g,鲁氏不动杆菌在混合菌种中的菌落数为3-15亿cfu/g,粪产碱杆菌在混合菌种中的菌落数为4-12亿cfu/g。
进一步的,所述载体为锯末、稻草、稻壳、花生壳、砻糠、麸皮、鱼粉、米糠中的一种或两种以上的混合,所述载体和混合菌种的质量比为100-2000:1。
进一步的,包括如下步骤:
步骤一、混合菌种的制备
按一定的菌数比例,取适量的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌进行培养,制备得到所需混合菌种;
步骤二、菌种体的制备
将步骤一制得的混合菌种与载体混合并进行粉碎,得到携带混合菌种的菌种体;
步骤三、畜禽生物的降解
将畜禽的粪便与水在化粪池中混合得到液体粪便,液体粪便与混合菌种在生物降解池里进行均匀混合,通过混合菌种降解液体粪便。
进一步的,步骤一中,枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌进行培养的具体过程包括以下步骤:
(1)菌种的斜面培养
将冷冻保藏管中的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌分别在斜面中活化,随后分别置于适配的培养皿中进行纯化,分别得到枯草芽孢杆菌菌种、短小芽孢杆菌菌种、蜡状芽孢杆菌菌种、地衣芽孢杆菌菌种、鲁氏不动杆菌菌种和粪产碱菌菌种,备用;
(2)菌种的液体培养
将步骤(1)得到的枯草芽孢杆菌斜面菌种、短小芽孢杆菌斜面菌种、蜡状芽孢杆菌斜面菌种、地衣芽孢杆菌斜面菌种、鲁氏不动杆菌斜面菌种和粪产碱菌斜面菌种分别接种于液体培养基中并分别进行培养一段时间,得到枯草芽孢杆菌菌液、短小芽孢杆菌菌液、蜡状芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、鲁氏不动杆菌菌液和粪产碱菌菌液,备用;
(3)一级种子培养
接种步骤(2)获得的枯草芽孢杆菌菌液、短小芽孢杆菌菌液、蜡状芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液,并于适合温度下好氧培养一段时间,然后再接种鲁氏不动杆菌菌液和粪产碱菌菌液,于适合温度下厌氧培养一段时间,得混合菌种的一级种子;
(4)二级种子培养
将步骤(3)所得的一级种子按一定的接种量接种于已灭菌的发酵培养基中,并于适当温度下先好氧培养3-5天再厌氧培养3-5天,得混合菌种的二级种子;
(5)成品种子培养
将步骤(4)所得的二级种子按一定的接种量接种至已灭菌的发酵培养基中,并于适合温度下先好氧培养适当时间后再厌氧培养适当时间,获得所需混合菌种。
进一步的,将步骤(1)得到的枯草芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,之后置于27-30℃下好氧培养1-2天,得到枯草芽孢杆菌液;将步骤(1)得到的短小芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,接着于28-30℃下、厌氧钨丝灯光照培养5-7天,得短小芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的蜡状芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,接着于28-30℃下好氧培养1-2天,得蜡状芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的地衣芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,之后置于30-37℃下厌氧培养1-2天,得地衣芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的鲁氏不动杆菌斜面菌种接种于已灭菌的已灭菌的液体培养基中,之后于27-30℃下好氧培养2-3天,得鲁氏不动杆菌菌液;将步骤(1)得到的粪产碱菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,之后于28-30℃下好氧培养3-5天,得粪产碱菌菌液。
进一步的,步骤三中,将步骤二制得的菌种体放入发酵床中,用喷淋机将化粪池中的液体粪便均匀喷洒到发酵床中,给氧翻刨,菌种体送入生物降解池,混合菌种与液体粪便在生物降解池里均匀混合,进行生物降解。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
本发明公开了一种畜禽生物粪便降解的混合菌种、载体及方法,混合菌种主要由枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌组成,混合菌种为黄色液体,载体与混合菌种混合再破碎得到菌种体,再进行粪便降解,产生的少量残物可作为有机肥应用于绿化。本发明的一种畜禽生物粪便降解的混合菌种、载体及方法,具有以下优点:使畜禽粪尿零排放,无污染,无臭味,同时畜禽生物降解含有天然抗生素,可提畜禽高免疫力,能保持恒温、稳定发酵;畜禽生物降解装置或设备可节约土地资源,节约畜禽养殖建设成本,节约人工,节约能源等,在此基础上对应工作目的进行组合使之达到处置有机物或降解有机物的目标。
附图说明
图1是现有技术的工艺流程图;
图2是本发明的简易结构图;
其中,1-菌种体;2-翻刨机;3-喷淋机;4-生物降解池。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
如图2所示,一种畜禽生物粪便降解的混合菌种,由以下微生物组成:枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌,混合菌种为黄色液体,各菌种的菌数范围比例为:枯草芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为6-30亿cfu/g,短小芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为7-35亿cfu/g,蜡状芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为6-35亿cfu/g,地衣芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为7-30亿cfu/g,鲁氏不动杆菌在混合菌种中的菌落数为3-15亿cfu/g,粪产碱杆菌在混合菌种中的菌落数为4-12亿cfu/g。
用以承载畜禽生物粪便降解的混合菌种的载体包括锯末、稻草、稻壳、花生壳、砻糠、麸皮、鱼粉、米糠或米糠中的麸皮、鱼粉、稻草的任一种或两种以上的混合,载体和混合菌种的质量比为100-2000:1。
一种畜禽生物粪便降解的方法,包括如下步骤:
步骤一、混合菌种的制备
按一定的菌数比例,取适量的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌进行培养,制备得到所需混合菌种,具体的制备过程为:
(1)菌种的斜面培养:
将冷冻保藏管中的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌分别在斜面中活化,随后分别置于适配的培养皿中进行纯化,得到枯草芽孢杆菌菌种、短小芽孢杆菌菌种、蜡状芽孢杆菌菌种、地衣芽孢杆菌菌种、鲁氏不动杆菌菌种和粪产碱菌菌种,备用。
步骤(1)中,枯草芽孢杆菌在斜面中活化的具体步骤为:用接种环将枯草芽孢杆菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅰ上,之后于27-30℃下好氧培养1-2天;斜面培养基Ⅰ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为20min,该斜面培养基Ⅰ的组分包括:蛋白胨15-25克/升,酵母浸粉5-15克/升,葡萄糖15-25克/升,磷酸氢二钠2-6克/升,磷酸二氢钾2-6克/升,硫酸镁0.6-0.7克/升,硫酸锰0.3-0.7克/升,氯化钙0.1-0.3克/升,豆粕0-10克/升、琼脂5-20克、水1000ml、pH为7.2。
步骤(1)中,短小芽孢杆菌在斜面中活化的具体步骤为:用接种短小芽孢杆菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅱ上,之后于28-30℃厌氧钨丝灯光照培养5-7天,斜面培养基Ⅱ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为15min,斜面培养基Ⅱ的组分:葡萄糖2-7克/升、玉米粉2-7克/升、蛋白胨5-20克/升、豆饼粉2-8克/升、磷酸二氢钾2-10克/升、硫酸镁2-5克/升、水1000ml、pH为7.0-7.2。
步骤(1)中,蜡状芽孢杆菌在斜面中活化的具体操作为:用接种环将蜡状芽孢杆菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅲ上,之后于30℃下好氧培养1-2天;所述斜面培养基Ⅲ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为20min,斜面培养基Ⅲ的组分:蛋白胨5-10克/升、酵母膏粉4-9克/升、磷酸氢二钠1-5克/升、磷酸二氢钾1-5克/升、琼脂5-20克/升、水1000ml、pH为7.2。
步骤(1)中,地衣芽孢杆菌在斜面中活化的具体操作为:用接种环将地衣芽孢杆菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅳ上,之后于37℃下厌氧培养1-2天,斜面培养基Ⅳ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为20min,斜面培养基Ⅳ的组分:蛋白胨15-25克/升,酵母浸粉5-15克/升,葡萄糖15-25克/升,磷酸氢二钠2-6克/升,磷酸二氢钾2-6克/升,硫酸镁0.6-0.7克/升,硫酸锰0.3-0.7克/升,氯化钙0.1-0.3克/升,豆粕0-10克/升,水1000ml、pH为7.0-7.5。
步骤(1)中,鲁氏不动杆菌在斜面中活化的具体操作为:用接种环将鲁氏不动杆菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅴ上,之后于28-30℃下好氧培养3天;所述斜面培养基Ⅴ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为30min,斜面培养基Ⅴ的组分:硫化铵1-5克/升、磷酸二氢钾2.5-8克/升、磷酸氢二钠0.1-0.5克/升、七水合硫酸镁1-5克/升、七水合硫酸铁0.1-0.2克/升、酵母膏0.5-5克/升,水1000ml、pH7.1。
步骤(1)中,粪产碱菌原菌在斜面中活化的具体操作为:用接种环将粪产碱菌原菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅵ上,之后于28-30℃下好氧培养3天;所述斜面培养基Ⅵ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为30min;且该斜面培养基Ⅵ的组分:蛋白胨1-5克/升、牛肉粉1-6克/升、硝酸钾1-5克/升、琼脂2-20克/升、水1000ml、pH为7.4。
(2)菌种的液体培养:
将步骤(1)得到的枯草芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅰ中,之后置于27-30℃下好氧培养1-2天,得到枯草芽孢杆菌液;将步骤(1)得到的短小芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅱ中,接着于28-30℃下、厌氧钨丝灯光照培养5-7天,得短小芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的蜡状芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅲ中,接着于28-30℃下好氧培养1-2天,得蜡状芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的地衣芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅳ中,之后置于30-37℃下厌氧培养1-2天,得地衣芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的鲁氏不动杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅴ中,之后于27-30℃下好氧培养2-3天,得鲁氏不动杆菌菌液;将步骤(1)得到的粪产碱菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅵ中,之后于28-30℃下好氧培养3-5天,得粪产碱菌菌液。
步骤(2)中液体培养基Ⅰ的组分:蛋白胨15-25克/升,酵母浸粉5-15克/升,葡萄糖15-25克/升,磷酸氢二钠2-6克/升,磷酸二氢钾2-6克/升,硫酸镁0.6-0.7克/升,硫酸锰0.3-0.7克/升,氯化钙0.1-0.3克/升,豆粕0-10克/升、琼脂5-20克、水1000ml、pH 7.2;液体培养基Ⅱ的组分:葡萄糖2-7克/升、玉米粉2-7克/升、蛋白胨5-20克/升、豆饼粉2-8克/升、磷酸二氢钾2-10克/升、硫酸镁2-5克/升、水1000ml、pH为7.0-7.2;液体培养基Ⅲ的组分:蛋白胨5-10克/升、酵母膏粉4-9克/升、磷酸氢二钠1-5克/升、磷酸二氢钾1-5克/升、琼脂5-20克/升、水1000ml、pH为7.2;液体培养基Ⅳ的组分:蛋白胨15-25克/升,酵母浸粉5-15克/升,葡萄糖15-25克/升,磷酸氢二钠2-6克/升,磷酸二氢钾2-6克/升,硫酸镁0.6-0.7克/升,硫酸锰0.3-0.7克/升,氯化钙0.1-0.3克/升,豆粕0-10克/升,水1000ml、pH为7.0-7.5;液体培养基Ⅴ的组分:硫化铵1-5克/升、磷酸二氢钾2.5-8克/升、磷酸氢二钠0.1-0.5克/升、七水合硫酸镁1-5克/升、七水合硫酸铁0.1-0.2克/升、酵母膏0.5-5克/升,水1000ml、pH7.1;液体培养基Ⅵ的组分:蛋白胨1-5克/升、牛肉粉1-6克/升、硝酸钾1-5克/升、琼脂2-20克/升、水1000ml、pH为7.4。
(3)一级种子培养:
将步骤(2)获得的枯草芽孢杆菌菌液、短小芽孢杆菌菌液、蜡状芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、鲁氏不动杆菌菌液和粪产碱菌菌液按一定的菌量比例接种于已灭菌的一个发酵培养基Ⅰ中进行培养,具体过程为:先接种枯草芽孢杆菌菌液、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌菌液,并于适合温度下好氧培养3-5天,然后再接种鲁氏不动杆菌和粪产碱菌菌液,于适合温度下厌氧培养3-5天,得混合菌种的一级种子。
步骤(3)中,一级种子培养中发酵培养基Ⅰ的组分:桔水5%、酵母粉0.5%、蛋白胨1%、氯化铵0.1%、氯化钠0.05%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、硫酸锌0.025%、硫酸亚铁0.025%,余量为水。
(4)二级种子培养:
将步骤(3)所得的一级种子按一定的接种量接种于已灭菌的另一个发酵培养基Ⅱ中,并于适当温度下先好氧培养3-5天再厌氧培养3-5天,得混合菌种的二级种子。
步骤(4)中,二级种子培养中发酵培养基Ⅱ的组分:桔水5%、酵母粉0.1%、蛋白胨0.1%、氯化铵0.1%、氯化钠0.1%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸镁0.05%、硫酸锌0.025%、硫酸亚铁0.025%,余量为水。发酵培养基Ⅲ的组分:桔水5%、氯化铵0.2%、氯化钠0.05%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、硫酸锌0.025%、硫酸亚铁0.025%,余量为水。
(5)成品种子培养:
将步骤(4)所得的二级种子按一定的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ中,并于适合温度下先好氧3-5天再厌氧培养3-5天,获得成品混合菌种。
步骤二、菌种体的制备
将步骤一制得的混合菌种与载体混合并进行粉碎,得到携带混合菌种的菌种体1;
步骤三、畜禽生物粪便的降解
1)将养殖现场的畜禽粪便排入化粪池,将粪便与水混合,粪便与水混合的比例范围是5-7:2-3;
2)将步骤二制得的用于畜禽生物粪便降解的菌种体1放入发酵床中,用喷淋机3将化粪池中的粪水混合物即液体粪便均匀喷洒到发酵床中,给氧翻刨,喷洒粪水混合物用翻刨机2进行均匀翻刨,将翻刨后的畜禽生物粪便降解的菌种体1送入生物降解池4,液体粪与混合菌种在生物降解池4里进行均匀混合,进行生物降解,生物降解过程是混合菌种进行异化作用、氧化作用、同化分解和合成,分解完成后产出少量的高度含菌有机肥、二氧化碳和水,实现将粪便处理到零排放或者处理成可以使用的有机肥料,通过混合菌种降解液体粪便,实现零排放,无毒、无污染,环保性强。
本发明所使用的畜禽生物粪便降解装置包括化粪池、生物降解池4、高效益生菌、发酵床、轨道菌床、喷淋机3和翻刨机2等,畜禽生物粪便降解装置为机械化处理设备,操作简单,节能减排,实现养殖户零排放。
需要说明的是,本发明中各培养基的百分比均为质量百分比,本发明选择的培养时间和温度及培养基的组分含量可根据实际需求进行灵活选择,确保菌种具有较高的活性且能正常生存。
本发明采用的各菌群完全由自然界采集、筛选、优化并依据降解各自有机物的目的挑选降解能力及可逆性强的,主要以芽孢杆菌类组成,有益效果在于:利用混合菌种发酵处理粪便,能够缩短发酵周期、提高堆肥效率,从而既处理了畜禽粪便、避免产生二次污染,又能够在较短的时间内产生的少量残物可作为有机肥应用于绿化,无环境污染。
实施例1
一种畜禽生物粪便降解的混合菌种,由以下微生物组成:枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌、粪产碱菌和微生物代谢活性产物组成,混合菌种为黄色液体,各菌种的菌数范围比例为:枯草芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为6-30亿cfu/g,短小芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为7-35亿cfu/g,蜡状芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为6-35亿cfu/g,地衣芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为7-30亿cfu/g,鲁氏不动杆菌在混合菌种中的菌落数为3-15亿cfu/g,粪产碱杆菌在混合菌种中的菌落数为4-12亿cfu/g。
用以承载畜禽生物粪便降解的混合菌种的载体为麸皮、鱼粉、米糠和稻草的混合,其中,麸皮、鱼粉、米糠、稻草的质量比为2:2:1:1,载体的总重量为600kg。
一种畜禽生物粪便降解的方法,包括如下步骤:
步骤一、混合菌种的制备
按一定的菌数比例,取适量的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌进行混合,随后进行发酵,制备得到所需混合菌种,具体制备过程为:
(1)菌种的斜面培养:
将冷冻保藏管中的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌分别在斜面中活化,随后分别置于90mm培养皿中进行纯化,得到枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌菌种,备用;
(2)菌种的液体培养:
将步骤(1)得到的枯草芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅰ中,之后置于27-30℃下好氧培养1-2天,得到枯草芽孢杆菌液;将步骤(1)得到的短小芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅱ中,接着于28-30℃下、厌氧钨丝灯光照培养5-7天,得短小芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的蜡状芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅲ中,接着于30℃下好氧培养1-2天,得蜡状芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的地衣芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅳ中,之后置于37℃下厌氧培养1-2天,得地衣芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的鲁氏不动杆菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅴ中,之后于27-30℃下好氧培养2-3天,得鲁氏不动杆菌菌液;将步骤(1)得到的粪产碱菌斜面菌种接种于已灭菌的一个液体培养基Ⅵ中,之后于28-30℃下好氧培养3-5天,得粪产碱菌菌液;
(3)一级种子培养:
将步骤(2)获得的枯草芽孢杆菌菌液、短小芽孢杆菌菌液、蜡状芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、鲁氏不动杆菌菌液和粪产碱菌菌液按2:2:2:2:1:1的菌量比例接种于已灭菌的一个发酵培养基Ⅰ中进行培养,具体过程为:先接种短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌菌液,并于30℃下好氧培养3天,然后再接种鲁氏不动杆菌和粪产碱菌菌液,于37℃下厌氧培养3天,得混合菌种的一级种子;
(4)二级种子培养:
将步骤(3)所得的一级种子按5%的接种量接种于已灭菌的另一个发酵培养基Ⅱ中,并于30℃下先好氧培养3-5天再厌氧培养3-5天,得混合菌种的二级种子;
(5)成品种子培养:
将步骤(4)所得的二级种子按5%的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ中,并于30℃下先好氧3-5天再厌氧培养3-5天,获得成品混合菌种。
步骤二、菌种体的制备
将步骤一制得的混合菌种与载体混合并进行粉碎,得到携带混合菌种的菌种体1;
步骤三、畜禽生物粪便的降解
养殖场中,每只大、小生猪的每天水泡粪量为平均五公斤,按1000头猪场生猪粪污比例计算,每天水泡粪的总产量为五吨左右。
(1)轨道菌床发酵降解除臭制作
现有轨道菌床高1.4m、宽4m、长20m,轨道菌床总计160m2;
(2)轨道菌床木屑垫料比例
1t杉木木屑垫料十平方,木屑铺垫轨道菌床的高度为80cm,总计需16t木屑;
(2)混合菌种发酵降解除臭处理比例
一公斤混合菌种发酵降解处理面积三十平方的生物降解池4,使用方法为:将养殖现场的畜禽粪便排入化粪池,将粪便与水混合,得到液体粪便,粪便与水混合的比例范围是5:2;将步骤二制得的用于畜禽生物粪便降解的菌种体1放入发酵床中,用喷淋机3将化粪池中的粪水混合物均匀喷洒到发酵床中,给氧翻刨,喷洒液体粪便用翻刨机2进行均匀翻刨,将翻刨后的畜禽生物粪便降解的菌种体1送入生物降解池4,液体粪便与混合菌种在生物降解池4里进行均匀混合,进行生物降解,生物降解过程是混合菌种进行异化作用、氧化作用、同化分解和合成,分解完成后产出少量的高度含菌有机肥、二氧化碳和水,实现将粪便处理到零排放或者处理成可以使用的有机肥料,通过混合菌种降解液体粪便,实现零排放,无毒、无污染,环保性强。
Claims (7)
1.一种畜禽生物粪便降解的混合菌种,其特征在于,由以下微生物组成:枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌,混合菌种为黄色液体。
2.根据权利要求1所述的一种畜禽生物粪便降解的混合菌种,其特征在于,所述菌种的菌数范围比例为:枯草芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为6-30亿cfu/g,短小芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为7-35亿cfu/g,蜡状芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为6-35亿cfu/g,地衣芽孢杆菌在混合菌种中的菌落数为7-30亿cfu/g,鲁氏不动杆菌在混合菌种中的菌落数为3-15亿cfu/g,粪产碱杆菌在混合菌种中的菌落数为4-12亿cfu/g。
3.用以承载权利要求1或2所述的一种畜禽生物粪便降解的混合菌种的载体,其特征在于,所述载体为锯末、稻草、稻壳、花生壳、砻糠、麸皮、鱼粉、米糠中的一种或两种以上的混合,所述载体和混合菌种的质量比为100-2000:1。
4.一种畜禽生物粪便降解的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一、混合菌种的制备
按一定的菌数比例,取适量的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌进行培养,制备得到所需混合菌种;
步骤二、菌种体的制备
将步骤一制得的混合菌种与载体混合并进行粉碎,得到携带混合菌种的菌种体;
步骤三、畜禽生物的降解
将畜禽的粪便与水在化粪池中混合得到液体粪便,液体粪便与混合菌种在生物降解池里进行均匀混合,通过混合菌种降解液体粪便。
5.根据权利要求4所述的一种畜禽生物粪便降解的方法,其特征在于,步骤一中,枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌进行培养的具体过程包括以下步骤:
(1)菌种的斜面培养
将冷冻保藏管中的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、鲁氏不动杆菌和粪产碱菌分别在斜面中活化,随后分别置于适配的培养皿中进行纯化,分别得到枯草芽孢杆菌菌种、短小芽孢杆菌菌种、蜡状芽孢杆菌菌种、地衣芽孢杆菌菌种、鲁氏不动杆菌菌种和粪产碱菌菌种,备用;
(2)菌种的液体培养
将步骤(1)得到的枯草芽孢杆菌斜面菌种、短小芽孢杆菌斜面菌种、蜡状芽孢杆菌斜面菌种、地衣芽孢杆菌斜面菌种、鲁氏不动杆菌斜面菌种和粪产碱菌斜面菌种分别接种于液体培养基中并分别进行培养一段时间,得到枯草芽孢杆菌菌液、短小芽孢杆菌菌液、蜡状芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、鲁氏不动杆菌菌液和粪产碱菌菌液,备用;
(3)一级种子培养
接种步骤(2)获得的枯草芽孢杆菌菌液、短小芽孢杆菌菌液、蜡状芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液,并于适合温度下好氧培养一段时间,然后再接种鲁氏不动杆菌菌液和粪产碱菌菌液,于适合温度下厌氧培养一段时间,得混合菌种的一级种子;
(4)二级种子培养
将步骤(3)所得的一级种子按一定的接种量接种于已灭菌的发酵培养基中,并于适当温度下先好氧培养3-5天再厌氧培养3-5天,得混合菌种的二级种子;
(5)成品种子培养
将步骤(4)所得的二级种子按一定的接种量接种至已灭菌的发酵培养基中,并于适合温度下先好氧培养适当时间后再厌氧培养适当时间,获得所需混合菌种。
6.根据权利要求5所述的一种畜禽生物粪便降解的方法,其特征在于,将步骤(1)得到的枯草芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,之后置于27-30℃下好氧培养1-2天,得到枯草芽孢杆菌液;将步骤(1)得到的短小芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,接着于28-30℃下、厌氧钨丝灯光照培养5-7天,得短小芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的蜡状芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,接着于28-30℃下好氧培养1-2天,得蜡状芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的地衣芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,之后置于30-37℃下厌氧培养1-2天,得地衣芽孢杆菌菌液;将步骤(1)得到的鲁氏不动杆菌斜面菌种接种于已灭菌的已灭菌的液体培养基中,之后于27-30℃下好氧培养2-3天,得鲁氏不动杆菌菌液;将步骤(1)得到的粪产碱菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基中,之后于28-30℃下好氧培养3-5天,得粪产碱菌菌液。
7.根据权利要求4所述的一种畜禽生物粪便降解的方法,其特征在于,步骤三中,将步骤二制得的菌种体放入发酵床中,用喷淋机将化粪池中的液体粪便均匀喷洒到发酵床中,给氧翻刨,菌种体送入生物降解池,混合菌种与液体粪便在生物降解池里均匀混合,进行生物降解。
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