CN108117587B - 光敏肽核酸单体及其合成方法 - Google Patents

光敏肽核酸单体及其合成方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种光敏肽核酸单体及其合成方法，光敏肽核酸单体包含了光敏性强的保护基，其制备方法是将叔丁氧羰基保护的肽核酸单体脱保护后，与光敏保护基酰氯化合物在碱性条件下反应，即得光敏肽核酸单体，该方法操作简单，产率高，且制备的光敏肽核酸单体光敏性强，能够广泛应用于生物传感等领域。

Description

光敏肽核酸单体及其合成方法
技术领域
本发明属于有机化学合成技术领域，涉及一种光敏肽核酸单体及其合成方法。
背景技术
肽核酸(Peptidenucleic acid,PNA)，是一种人工合成的核酸类似物，能特异性识别DNA与RNA并与其通过Waston-Crick碱基配对的形式稳定结合，具有优越的生物学效应，在分子生物学及生物传感等领域应用广泛。
PNA芯片是PNA在分子生物学及生物传感领域应用的典型代表，其制备方法主要有两种，一种是点样法：先通过基于酸敏或碱敏PNA单体的固相合成法制备PNA链，然后通过点样的方法将PNA固定在芯片基底上；另一种则是基于光敏PNA单体的光导原位合成法。相比于点样法，光导原位合成法制备PNA芯片更加便捷高效，但目前报道的光敏PNA单体只有两种，分别为Liu ZC等，Tetrahedron第61卷第33期，第7967-7973页，2005年公开的NVOC保护的非手性PNA单体和Yang FP等，Acs Combinatorial Science第17卷第10期，第608-614页，2015年公开的NPPOC保护的非手性PNA单体，这两种单体虽都已成功应用于光导原位合成PNA芯片，但由于其光敏保护基光敏性差，脱保护效率不高，从而需要较长的时间进行曝光，而长时间的紫外曝光一方面会导致芯片制备周期的延长，更重要的是会对芯片表面曝光位点造成破坏，从而影响芯片制备的质量。因此，制备新型高效的光敏PNA单体有利于拓宽PNA在分子生物学及生物传感等领域的应用。
发明内容
为实现上述目的，本发明提供一种光敏肽核酸单体及其合成方法，解决了现有技术中光敏肽核酸单体存在的光敏性差、种类单一、应用较少的问题。
本发明所采用的技术方案是，光敏肽核酸单体，具有式I结构：
Figure BDA0001534316520000011
其中：P为光敏保护基PhSNPPOC，结构式如下所示：
Figure BDA0001534316520000021
R1、R2为H原子、C1～C10饱和脂肪烃基、C2～C10不饱和脂肪烃基、C2～C10烷氧基、C6～C10芳基、-CH2-(OCH2-CH2)qOP1、-CH2-(OCH2-CH2)qNHP1、-CH2-(OCH2-CH2)qSP1或-CH2-(SCH2-CH2)qSP1，q为0～10，P1为H、C1～C10饱和脂肪烃基、C2～C10不饱和脂肪烃基、C2～C10烷氧基或C6～C10芳基，R1、R2相同或者不同；
B为核酸碱基。
进一步的，所述R1为-CH2-(OCH2-CH2)qOP1，q为0～10，P1为H、C1～C10饱和脂肪烃基、C2～C10不饱和脂肪烃基、C2～C10烷氧基或C6～C10芳基，R2为H原子。
进一步的，所述核酸碱基为T、C(Cbz)、A(Cbz)、G(Cbz)，具体结构式如下所示：
Figure BDA0001534316520000022
本发明所采用的另一技术方案是，光敏肽核酸单体的合成方法，具体按以下合成路线进行：取反应物肽核酸单体0.5mmol，加5mL二氯甲烷溶解，氩气保护，冰浴搅拌下，滴加TFA:CH2Cl2＝1:1的混合液3mL，然后室温反应1-3h，点板确认反应完全后，减压除去二氯甲烷及过量的TFA，然后加5mL溶剂进行溶解，通过碱性化合物提供碱性条件，在碱性条件下氩气保护，冰浴搅拌下滴加0.5mmol的光敏保护基酰氯化合物P-Cl，并加5mL溶剂溶解，反应1-3h，薄层层析法确认反应完全后，减压除去溶剂，加水10mL，乙酸乙酯萃取2次，每次20mL，水层用稀盐酸酸化至pH值为3-4，乙酸乙酯萃取3次，每次20mL，浓缩后柱层析得到目标产物，合成路线如下：
Figure BDA0001534316520000023
进一步的，所述肽核酸单体结构上的B、R1、R2和式I相同。
进一步的，所述光敏保护基酰氯化合物P-Cl为PhSNPPOC-Cl，结构式如下所示：
Figure BDA0001534316520000031
进一步的，所述碱性化合物为NH4OH、乙醇胺、环已胺、哌啶、三乙胺、NaOH、KOH、Na2CO3、K2CO3、NaHCO3、KHCO3、DIEA中的任意一种。
进一步的，所述溶剂为THF、DMF、CH2Cl2、EA、苯、甲苯、H2O中的任意一种。
本发明的技术方案与现有技术相比，带来的有益效果：
1、本发明采用PhSNPPOC保护的手性γPNA单体，光敏效果与传统的NPPOC保护的非手性PNA单体相比提高1倍以上，显著的缩短脱保护时间。
2、其次，本发明制备的PhSNPPOC保护的手性γPNA单体与传统的NPPOC保护的非手性PNA单体，性质更好，应用更广泛。
3、本发明的光敏肽核酸单体的合成方法，只需在传统PNA单体的基础上进行一步简单的衍化，操作简便，产率高。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的1H NMR图谱；
图2是PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的1H NMR图谱；
图3是PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的1H NMR图谱；
图4是PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的1H NMR图谱；
图5是PhSNPPOC-T与NPPOC-T单体曝光结果对比图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
光敏肽核酸单体(2)PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的合成，合成路线如下所示，其中肽核酸单体(1)Boc-MP-T-COOH单体根据Sahu B等，Journal of Organic Chemistry第76卷第14期，第5614-5627页，2011公开的方法进行制备；化合物PhSNPPOC-Cl根据公开号为20140051605A1，发明名称为“Diarylsulfide Backbone Containing PhotolabileProtecting Groups”，公开日：2014年2月20日的专利中的方法进行制备。
Figure BDA0001534316520000041
取肽核酸单体(1)258mg(0.5mmol)于100mL三口烧瓶，加5mL二氯甲烷溶解，氩气保护，冰浴搅拌下，滴加TFA:CH2Cl2＝1:1的混合液3mL，然后室温反应1-3h，点板确认反应完全后，减压除去二氯甲烷及过量的TFA，然后加5mL THF溶解，加入到装有10mL Na2CO3(106mg,1mmol)水溶液的三口烧瓶中，氩气保护，冰浴搅拌下滴加PhSNPPOC-Cl(190mg,0.5mmol)的THF溶液5mL，反应1-3h，薄层层析法确认反应完全后，减压除去溶剂，加水10mL，乙酸乙酯萃取2次，每次20mL，水层用稀盐酸酸化至pH值为3-4，乙酸乙酯萃取3次，每次20mL，浓缩后柱层析得淡黄色固体目标产物(2)248mg，产率65.3％,1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.210(s,1H),7.102(s,1H),7.59–7.33(m,5H),7.23(d,J＝11.7Hz,1H),7.110–6.95(m,2H),4.53(d,J＝67.2Hz,2H),4.03(q,J＝7.1Hz,1H),3.910–3.65(m,5H),3.64–3.310(m,11H),3.31(d,J＝4.3Hz,2H),3.20(dd,J＝9.3,3.0Hz,3H),2.75(q,J＝7.4Hz,2H),1.74(s,3H),1.29–1.110(m,3H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H).HRMS(m/z):Calcd for[M+K]+,798.2417.Found,798.2305，如图1所示。
实施例2：
光敏肽核酸单体(2)PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的合成，合成路线如下所示，其中肽核酸单体(1)Boc-MP-T-COOH单体根据Sahu B等，Journal of Organic Chemistry第76卷第14期，第5614-5627页，2011公开的方法进行制备；化合物PhSNPPOC-Cl根据公开号为20140051605A1，发明名称为“Diarylsulfide Backbone Containing PhotolabileProtecting Groups”，公开日：2014年2月20日的专利中的方法进行制备。
Figure BDA0001534316520000051
取肽核酸单体(1)258mg(0.5mmol)于100mL三口烧瓶，加5mL二氯甲烷溶解，氩气保护，冰浴搅拌下，滴加TFA:CH2Cl2＝1:1的混合液3mL，然后室温反应1-3h，点板确认反应完全后，减压除去二氯甲烷及过量的TFA，然后加5mL DMF溶解，加入到装有10mL Na2CO3(106mg,1mmol)水溶液的三口烧瓶中，氩气保护，冰浴搅拌下滴加PhSNPPOC-Cl(190mg,0.5mmol)的DMF溶液5mL，反应1-3h，薄层层析法确认反应完全后，减压除去溶剂，加水10mL，乙酸乙酯萃取2次，每次20mL，水层用稀盐酸酸化至pH值为3-4，乙酸乙酯萃取3次，每次20mL，浓缩后柱层析得淡黄色固体目标产物(2)248mg，产率65.3％,1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.210(s,1H),7.102(s,1H),7.59–7.33(m,5H),7.23(d,J＝11.7Hz,1H),7.110–6.95(m,2H),4.53(d,J＝67.2Hz,2H),4.03(q,J＝7.1Hz,1H),3.910–3.65(m,5H),3.64–3.310(m,11H),3.31(d,J＝4.3Hz,2H),3.20(dd,J＝9.3,3.0Hz,3H),2.75(q,J＝7.4Hz,2H),1.74(s,3H),1.29–1.110(m,3H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H).HRMS(m/z):Calcd for[M+K]+,798.2417.Found,798.2305，如图1所示。
实施例3：
光敏肽核酸单体(2)PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的合成，合成路线如下所示，其中肽核酸单体(1)Boc-MP-T-COOH单体根据Sahu B等，Journal of Organic Chemistry第76卷第14期，第5614-5627页，2011公开的方法进行制备；化合物PhSNPPOC-Cl根据公开号为20140051605A1，发明名称为“Diarylsulfide Backbone Containing PhotolabileProtecting Groups”，公开日：2014年2月20日的专利中的方法进行制备。
Figure BDA0001534316520000052
取肽核酸单体(1)258mg(0.5mmol)于100mL三口烧瓶，加5mL二氯甲烷溶解，氩气保护，冰浴搅拌下，滴加TFA:CH2Cl2＝1:1的混合液3mL，然后室温反应1-3h，点板确认反应完全后，减压除去二氯甲烷及过量的TFA，然后加5mL甲苯溶解，加入到装有10mL Na2CO3(106mg,1mmol)水溶液的三口烧瓶中，氩气保护，冰浴搅拌下滴加PhSNPPOC-Cl(190mg,0.5mmol)的甲苯溶液5mL，反应1-3h，薄层层析法确认反应完全后，减压除去溶剂，加水10mL，乙酸乙酯萃取2次，每次20mL，水层用稀盐酸酸化至pH值为3-4，乙酸乙酯萃取3次，每次20mL，浓缩后柱层析得淡黄色固体目标产物(2)248mg，产率65.3％,1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.210(s,1H),7.102(s,1H),7.59–7.33(m,5H),7.23(d,J＝11.7Hz,1H),7.110–6.95(m,2H),4.53(d,J＝67.2Hz,2H),4.03(q,J＝7.1Hz,1H),3.910–3.65(m,5H),3.64–3.310(m,11H),3.31(d,J＝4.3Hz,2H),3.20(dd,J＝9.3,3.0Hz,3H),2.75(q,J＝7.4Hz,2H),1.74(s,3H),1.29–1.110(m,3H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H).HRMS(m/z):Calcd for[M+K]+,798.2417.Found,798.2305，如图1所示。
实施例4：
光敏肽核酸单体(2)PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的合成，实施例4与实施例1不同的地方在于碱性条件由10mL NH4OH(35mg,1mmol)水溶液提供，其他条件同实施例1。
实施例5：
光敏肽核酸单体(2)PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的合成，实施例5与实施例4不同的地方在于溶剂由DMF提供，其他条件同实施例4。
实施例6：
光敏肽核酸单体(2)PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的合成，实施例6与实施例4不同的地方在于溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例4。
实施例7：
光敏肽核酸单体(2)PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的合成，实施例7与实施例1不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的THF溶液提供，其他条件同实施例1。
实施例8：
光敏肽核酸单体(2)PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的合成，实施例8与实施例1不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的DMF溶液提供，溶剂由DMF提供，其他条件同实施例1。
实施例9：
光敏肽核酸单体(2)PhSNPPOC-MP-T-COOH单体的合成，实施例9与实施例1不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的甲苯溶液提供，溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例1。
实施例10：
光敏肽核酸单体(4)PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的合成，合成路线如下所示，其中肽核酸单体(3)Boc-MP-C(Cbz)-COOH单体根据文献方法Sahu B等，Journal ofOrganic Chemistry第76卷第14期，第5614-5627页，2011公开的方法进行制备。
Figure BDA0001534316520000071
采用与实施例1相同的操作制备光敏肽核酸单体(4)，产率69.2％，1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.78(s,1H),7.94–7.75(m,2H),7.61–7.28(m,10H),7.24–6.84(m,3H),5.20(s,2H),4.69(d,J＝83.2Hz,2H),4.15–3.66(m,5H),3.66–3.37(m,12H),3.33–3.25(m,2H),3.20(dd,J＝12.5,2.3Hz,3H),2.75(q,J＝7.1Hz,2H),1.21(t,J＝7.5Hz,3H),1.09–0.99(m,3H).HRMS(m/z):Calcd for[M+Na]+:901.3049.Found,901.1436，如图2所示。
实施例11：
光敏肽核酸单体(4)PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的合成，实施例11与实施例10不同的地方在于溶剂由DMF提供，其他条件同实施例10。
实施例12：
光敏肽核酸单体(4)PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的合成，实施例12与实施例10不同的地方在于溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例10。
实施例13：
光敏肽核酸单体(4)PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的合成，实施例13与实施例10不同的地方在于碱性条件由10mL NH4OH(35mg,1mmol)水溶液提供，其他条件同实施例10。
实施例14：
光敏肽核酸单体(4)PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的合成，实施例14与实施例13不同的地方在于溶剂由DMF提供，其他条件同实施例13。
实施例15：
光敏肽核酸单体(4)PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的合成，实施例15与实施例13不同的地方在于溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例13。
实施例16：
光敏肽核酸单体(4)PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的合成，实施例16与实施例10不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的THF溶液提供，其他条件同实施例10。
实施例17：
光敏肽核酸单体(4)PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的合成，实施例17与实施例10不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的DMF溶液提供，溶剂由DMF提供，其他条件同实施例10。
实施例18：
光敏肽核酸单体(4)PhSNPPOC-MP-C(Cbz)-COOH单体的合成，实施例18与实施例10不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的甲苯溶液提供，溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例10。
实施例19
光敏肽核酸单体(6)PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的合成，合成路线如下所示，其中肽核酸单体(3)Boc-MP-C(Cbz)-COOH单体根据文献方法Sahu B等，Journal ofOrganic Chemistry第76卷第14期，第5614-5627页，2011公开的方法进行制备。
Figure BDA0001534316520000081
采用与实施例1相同的操作制备光敏肽核酸单体(4)，产率68.3％，1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.66(s,1H),8.56(s,1H),8.28(s,1H),7.81(s,1H),7.58–7.28(m,10H),7.19–6.95(m,2H),5.23(s,2H),5.09(s,2H),4.08–4.00(m,1H),3.99–3.66(m,5H),3.62–3.38(m,11H),3.31–3.24(m,2H),3.24–3.12(m,3H),2.75(q,J＝7.1Hz,2H),1.21(t,J＝8.9Hz,3H),1.08–0.96(m,3H).HRMS(m/z):Calcd for[M+Na]+:925.3161,Found,925.1704，如图3所示。
实施例20：
光敏肽核酸单体(6)PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的合成，实施例20与实施例19不同的地方在于溶剂由DMF提供，其他条件同实施例19。
实施例21：
光敏肽核酸单体(6)PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的合成，实施例21与实施例19不同的地方在于溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例19。
实施例22：
光敏肽核酸单体(6)PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的合成，实施例22与实施例19不同的地方在于碱性条件由10mL NH4OH(35mg,1mmol)水溶液提供，其他条件同实施例19。
实施例23：
光敏肽核酸单体(6)PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的合成，实施例23与实施例22不同的地方在于溶剂由DMF提供，其他条件同实施例22。
实施例24：
光敏肽核酸单体(6)PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的合成，实施例24与实施例22不同的地方在于溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例22。
实施例25：
光敏肽核酸单体(6)PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的合成，实施例25与实施例19不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的THF溶液提供，其他条件同实施例19。
实施例26：
光敏肽核酸单体(6)PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的合成，实施例26与实施例19不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的DMF溶液提供，溶剂由DMF提供，其他条件同实施例19。
实施例27：
光敏肽核酸单体(6)PhSNPPOC-MP-A(Cbz)-COOH单体的合成，实施例27与实施例19不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的甲苯溶液提供，溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例19。
实施例28
光敏肽核酸单体(8)PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的合成，合成路线如下所示，其中肽核酸单体(7)Boc-MP-G(Cbz)-COOH单体根据Sahu B等，Journal of OrganicChemistry第76卷第14期，第5614-5627页，2011公开的方法进行制备。
Figure BDA0001534316520000101
采用与实施例1相同的操作制备光敏肽核酸单体(8)，产率62.5％，1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.38(s,1H),7.90–7.73(m,2H),7.59–7.32(m,10H),7.23(d,J＝8.5Hz,1H),7.14–6.98(m,1H),5.25(d,J＝3.1Hz,2H),5.18–5.00(m,1H),4.97–4.79(m,1H),4.04(dd,J＝14.2,7.1Hz,1H),4.00–3.61(m,5H),3.60–3.36(m,13H),3.32–3.26(m,3H),3.23–3.12(m,3H),2.74(q,J＝7.4Hz,2H),1.20(t,J＝7.9Hz,3H),1.02(d,J＝6.8Hz,3H).HRMS(m/z):Calcd for[M+Na]+:941.3110.Found,941.1448.如图4所示。
实施例29：
光敏肽核酸单体(8)PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的合成，实施例29与实施例28不同的地方在于溶剂由DMF提供，其他条件同实施例28。
实施例30：
光敏肽核酸单体(8)PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的合成，实施例30与实施例28不同的地方在于溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例28。
实施例31：
光敏肽核酸单体(8)PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的合成，实施例31与实施例28不同的地方在于碱性条件由10mL NH4OH(35mg,1mmol)水溶液提供，其他条件同实施例28。
实施例32：
光敏肽核酸单体(8)PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的合成，实施例32与实施例31不同的地方在于溶剂由DMF提供，其他条件同实施例31。
实施例33：
光敏肽核酸单体(8)PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的合成，实施例33与实施例31不同的地方在于溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例31。
实施例34：
光敏肽核酸单体(8)PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的合成，实施例34与实施例28不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的THF溶液提供，其他条件同实施例28。
实施例35：
光敏肽核酸单体(8)PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的合成，实施例35与实施例28不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的DMF溶液提供，溶剂由DMF提供，其他条件同实施例28。
实施例36：
光敏肽核酸单体(8)PhSNPPOC-MP-G(Cbz)-COOH单体的合成，实施例36与实施例28不同的地方在于碱性条件由10mL DIEA(124mg,1mmol)的甲苯溶液提供，溶剂由甲苯提供，其他条件同实施例28。
实施例37
PhSNPPOC和NPPOC保护的PNA单体曝光脱保护效率对比：
①配制1mmol/L PhSNPPOC保护的手性γPNA单体(PhSNPPOC-T)甲醇溶液和1mmol/L NPPOC保护的PNA单体(NPPOC-T)甲醇溶液各1mL；
②取0.5mL透明离心管22个，平均分成两组，每组11个，第一组为PhSNPPOC-T组，按顺序标号0，1，2，···，10，然后每个加入配制好的PhSNPPOC-T溶液50μL；第二组为NPPOC-T组，同样标号0，1，2，···，10，每个加入配制好的NPPOC-T溶液50μL；
③将两组样品同时按时间梯度曝光(波长365nm,光强13.4mW)，0号不曝光，1号曝光1min，2号曝光2min，···，10号曝光10min；
④薄层色谱分析曝光结果，如图5所示(展开剂：乙酸乙酯：甲醇＝10：1，Rf(PhSNPPOC-T)＝0.52，Rf(NPPOC-T)＝0.55)
由图5可得，PhSNPPOC-T单体约3min便几乎脱保护完全，而NPPOC-T单体则至少约要6min。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围内。

Claims (4)

1.光敏肽核酸单体，其特征在于，具有式I结构：
Figure FDA0003076071340000011
其中：P为光敏保护基PhSNPPOC，结构式如下所示：
Figure FDA0003076071340000012
R1为-CH2-(OCH2-CH2)qOP1，q为0～10，P1为H、C1～C10饱和脂肪烃基、C2～C10不饱和脂肪烃基、或C6～C10芳基，R2为H原子；
B的具体结构式如下所示：
Figure FDA0003076071340000013
2.一种如权利要求1所述的光敏肽核酸单体的合成方法，其特征在于，具体按以下合成路线进行：取反应物肽核酸单体0.5mmol，加5mL二氯甲烷溶解，氩气保护，冰浴搅拌下，滴加TFA:CH2Cl2＝1:1的混合液3mL，然后室温反应1-3h，点板确认反应完全后，减压除去二氯甲烷及过量的TFA，然后加5mL溶剂进行溶解，通过碱性化合物提供碱性条件，在碱性条件下氩气保护，冰浴搅拌下滴加0.5mmol的光敏保护基酰氯化合物P-Cl，并加5mL溶剂溶解，反应1-3h，薄层层析法确认反应完全后，减压除去溶剂，加水10mL，乙酸乙酯萃取2次，每次20mL，水层用稀盐酸酸化至pH值为3-4，乙酸乙酯萃取3次，每次20mL，浓缩后柱层析得到目标产物，合成路线如下：
Figure FDA0003076071340000014
3.根据权利要求2所述的光敏肽核酸单体的合成方法，其特征在于，所述碱性化合物为NH4OH、乙醇胺、环已胺、哌啶、三乙胺、NaOH、KOH、Na2CO3、K2CO3、NaHCO3、KHCO3、DIEA中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的光敏肽核酸单体的合成方法，其特征在于，所述溶剂为THF、DMF、CH2Cl2、EA、苯、甲苯、H2O中的任意一种。
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