CN108113923A - 一种皮肤修复液及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于护肤品领域,具体涉及一种皮肤修复液及其制备方法。所述组合物由以下质量分数的组分组成:人干细胞生长因子1.0×10‑3~1.0×10‑2%、碱性成纤维细胞生长因子5.0×10‑3~1.0×10‑2%、经电场处理的植物提取物12~25%、胶原蛋白3~6%、乙酰基六肽0.02~0.06%、维生素B 2~6%、稳定剂1~3%、尿囊素0.5~2%、甘油2~12%、椰油基葡糖苷0.5~0.8%以及水余量。本发明皮肤修复液对激素依赖性皮炎具有显著的修复作用,且其体系稳定,功效持久,更重要的是,使用时不会造成局部的刺痛感,提升了消费者的使用体验。

Description

一种皮肤修复液及其制备方法
技术领域
本发明属于护肤品领域,具体涉及一种皮肤修复液及其制备方法。
背景技术
激素依赖性皮炎是因长期反复不当的使用外用激素引起的皮炎。表现为外用糖皮质激素后原发皮损消失,但停用后又出现炎性损害,需反复使用糖皮质激素以控制症状并逐渐加重的一种皮炎。近年来,部分化妆品企业在化妆品中违规添加糖皮质激素,例如在防过敏产品中使用“地塞米松或倍他米松”;美白祛斑产品中使用“氢醌+维甲酸+地塞米松”或“白降汞+地塞米松”;在祛痘产品中使用“氯霉素+地塞米松”。更有甚者,为减少产品的过敏反应,在普通的化妆品中添加糖皮质激素。而这些产品虽然短时间内具有快速的效果,但是长期使用容易使得皮肤角质层越来越薄,容易敏感、干燥、发红、发痒、刺痛。
针对上述问题,目前市场上出现了一些用于修复激素依赖性皮炎的组合物,如在中国专利申请CN106074898A中,发明人将忍冬藤,灯心草,凤尾草,蛇床子,虎尾兰,珠子参,马鞭草,牡丹皮,炙红芪,山银花,鱼腥草,莲子心提取后混合形成一种组合物,其能有效地治疗激素依赖性皮炎,达到很好效果;如在中国专利申请CN106266495A中,发明人将防风1~30%、牛膝1~30%、紫苑1~30%和天门冬1~30%用酒精提取后用于治疗激素依赖性皮炎,亦取得了明显的改善效果。
诸如此类的组合物还有许多,但是均存在一些共性、难以克服的问题:一是多数组合物中使用了多种植物活性成分作为主要的功效成分,虽然具有较好的修复效果,但普遍好似忽视了植物提取物对皮肤的刺激性,特别是激素依赖性皮炎患者皮肤体表较正常皮肤更为敏感和脆弱,在使用时,若将该种组合物涂抹在皮肤上,特别是含有伤口的皮肤上时,通常会感觉到轻微的刺痛感,更有甚者,这种刺激加剧了病情;二是通常认为植物活性成分的活性难以长期保持,导致修复组合物无法长期发挥功效。而上述两个问题,目前尚未得到有效地解决。
因此,针对上述问题,有必要提供一种皮肤修复组合物,其对激素依赖性皮炎具有显著的修复效果,且其功效持久,质量稳定,更重要的是,使用时不会产生轻微的刺痛感。
发明内容
本发明旨在提供了一种皮肤修复液及其制备方法,该皮肤修复液对激素依赖性皮炎具有显著的修复效果,且其功效持久,质量稳定,更重要的是,使用时不会产生刺痛感。
为了达到上述目的,本发明采用以下技术方案:一种皮肤修复液,由以下质量分数的组分制成:人干细胞生长因子1.0×10-3~1.0×10-2%、碱性成纤维细胞生长因子5.0×10-3~1.0×10-2%、经电场处理的植物提取物12~25%、胶原蛋白3~6%、乙酰基六肽0.02~0.06%、维生素B2~6%、稳定剂1~3%、尿囊素0.5~2%、甘油2~12%、椰油基葡糖苷0.5~0.8%以及水余量。
进一步地,所述皮肤修复液由以下质量分数的组分制成:人干细胞生长因子5.0×10-3~1.0×10-2%、碱性成纤维细胞生长因子6.0×10-3~1.0×10-2%、经电场处理的植物提取物15~25%、胶原蛋白3~5%、乙酰基六肽0.03~0.06%、维生素B3~6%、稳定剂1~3%、尿囊素1~2%、甘油5~10%、椰油基葡糖苷0.6~0.8%以及水余量。
进一步地,所述皮肤修复液由以下质量分数的组分制成:人干细胞生长因子8.0×10-3%、碱性成纤维细胞生长因子8.0×10-3%、经电场处理的植物提取物20%、胶原蛋白3%、乙酰基六肽0.05%、维生素B5%、稳定剂1.5%、尿囊素1.5%、甘油5%、椰油基葡糖苷0.6%以及水余量。
进一步地,所述皮肤修复液由以下质量分数的组分制成:人干细胞生长因子5.0×10-3%、碱性成纤维细胞生长因子6.0×10-3%、经电场处理的植物提取物15%、胶原蛋白3%、乙酰基六肽0.03%、维生素B%、稳定剂1%、尿囊素1%、甘油5%、椰油基葡糖苷0.6%以及水余量。
进一步地,所述皮肤修复液由以下质量分数的组分制成:人干细胞生长因子1.0×10-2%、碱性成纤维细胞生长因子1.0×10-2%、经电场处理的植物提取物25%、胶原蛋白5%、乙酰基六肽0.06%、维生素B6%、稳定剂3%、尿囊素2%、甘油10%、椰油基葡糖苷0.8%以及水余量。
进一步地,所述人干细胞生长因子选自表皮生长因子、纤维细胞生长因子和神经生长因子中的一种。
进一步地,所述经电场处理的植物提取物由以下步骤制得:
S1、芦荟提取物的制备:取新鲜芦荟,洗净,晾干,榨汁,过滤,即得;
S2、鱼腥草提取物的制备:取新鲜鱼腥草,洗净,晾干,加入鱼腥草总量3~6倍量的水煎煮1~3次,每次30~60min,过滤,合并滤液,即得;
S3、不同强度的电场处理:将上述芦荟提取物和鱼腥草提取物混合,暴露在电压10~22V,电场强度8~10v/m的电场中1~3min后,将电场强度调节至3~6v/m,继续处理20~35s,即得。
进一步地,所述步骤S3中将上述芦荟提取物和鱼腥草提取物混合后暴露在12V,电场强度8v/m的电场中1min后,将电场强度调节至3v/m,处理22s。
进一步地,所述稳定剂为包含500~1000ppm聚山梨酯-80初级降解物和50~100ppmL-谷氨酰胺的水溶液。
进一步地,所述聚山梨酯-80初级降解物由以下步骤制得:
往100ml摇瓶内加入聚山梨酯-80溶液,接种1~5wt%浓度为800~1000cfu/mL的绿色木霉,设置温度为30~40℃,转速为100rpm,培养至培养液pH检测为2.0~3.0,离心,取上清;依次对上清进行微滤、阳离子交换和灭菌,制得聚山梨酯-80初级降解物。
相应地,本发明还提供了一种制备上述的皮肤修复液的方法,包括以下步骤:
将甘油以及维生素B混合均匀后,加入稳定剂,涡旋混匀后,加入人干细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、经电场处理的植物提取物、胶原蛋白、乙酰基六肽、尿囊素、椰油基葡糖苷和水,不断涡旋使其形成均一稳定的溶液,即得。
本发明植物提取物包含芦荟提取物以及鱼腥草提取物,但是由于芦荟的提取物在显微镜下观察呈锐利的结晶体,加上激素依赖性皮炎患者皮肤体表较正常皮肤更为敏感和脆弱,通常会感觉存在轻微的刺痛感。针对该问题,发明人经过大量的试验和创造性劳动,终于发现,若对植物提取物进行电场处理能够显著降低其对皮肤的刺激性,而令人惊奇地是,如果进行不同强度的电场处理,还可以显著提高其的长期稳定性。而取得上述效果的机制,尚未清楚,发明人认为可能是,电场的处理使芦荟提取物的晶体结构发生了一定的变化,结晶体的锐利程度较处理前显著降低,因此,对皮肤的刺激性降低。值得说明的是,电场的电压和电流强度对处理效果也有较大的影响,并且这种影响是毫无规律的。因此,发明人经过大量试验终于得出,先在电压为10~22V,电场强度为8~10v/m处理后再置于3~6v/m强度下处理,在该范围内,电场的处理带来的都是好的影响,如降低了植物提取物对皮肤的刺激性,且不会对其有效成分造成影响,申请人认为取得了意料不到的技术效果。
本发明提供的修复液有效成分主要有生长因子、植物提取物、胶原蛋白以及多肽,虽然各组有效成分协同对激素依赖性皮炎具有显著的治疗作用,但是多肽以及蛋白质的相互聚集不稳定现象和生长因子有效成分的活性下降仍然是个难以克服的困难。
聚山梨酯-80虽然是常用的蛋白质稳定剂,但在实际应用中,发明人发现,聚山梨酯-80容易发生氧化或水解反应,产生的多种降解副产物,如脂肪酸、PEG酯等却容易导致蛋白质的浊度的增加和相互的聚集。由此,本发明提供了一种新的稳定剂,其为包含500~1000ppm聚山梨酯-80初级降解物和50~100ppmL-谷氨酰胺的水溶液。其中,所述聚山梨酯-80初级降解物是以聚山梨酯-80为唯一的碳源,接种绿色木霉培养,取上清,经一系列提纯步骤得到的组合物。令人意外的是,该组合物虽然为聚山梨酯-80的初级降解物,但是其对蛋白质的稳定作用并没有发明人预期的降低,反而与L-谷氨酰胺协同作用使生长因子的稳定性也得到了显著地提高。这一点从本发明试验例二可以看出,加入本发明稳定剂的皮肤修复液在温度25±2℃、相对湿度60±10%的条件下保存12个月后仍然澄清,并且在防止蛋白质相互聚集方面取得了与聚山梨酯-80同等的效果。在生长因子稳定作用方面,加入了本发明稳定剂的修复液在4℃以及常温的条件下储存30d后,细胞生长因子的含量与空白对照组(不含有稳定剂)相比均有极显著的上升,与加入了完整的聚山梨酯-80相比,含量也有显著的上升。这说明,与完整的聚山梨酯-80相比,本发明人创新性地提供的聚山梨酯-8降解物与L-谷氨酰胺协同作用,不仅能够抑制蛋白质以及多肽的相互聚集,还提高其对生长因子稳定的作用。而值得注意的是,本发明稳定剂含量或组分微小的变化均会导致不可预期的效果,发明人认为本发明稳定剂组成取得了意料不到的技术效果。
本发明具有以下优点:
1)本发明提供了一种皮肤修复液,主要活性成分为生长因子、植物提取物、胶原蛋白以及乙酰基六肽等,各个组分相互作用,协同增效,对激素依赖性皮炎具有显著的修复作用,且其体系稳定,功效持久。
2)本发明对植物提取物进行不同强度电场处理,显著降低了植物提取物对激素依赖性皮炎患者皮肤造成的刺痛感,提升了消费者的使用体验。
3)本发明提供了一种新型的稳定剂,其创造性地加入聚山梨酯-80的降解物,克服了蛋白质和多肽的相互聚集和生长因子有效成分的活性下降的问题,显著延长了修复液的保质期,取得了令人意料不到的技术效果。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。
实施例1、聚山梨酯-80初级降解物的制备
往100ml摇瓶内加入聚山梨酯-80溶液,接种2wt%浓度为1000cfu/mL的绿色木霉,设置温度为35℃,转速为100rpm,培养至培养液pH检测为2.0,离心,取上清;依次对上清进行微滤、经732型阳离子交换树脂进行阳离子交换和灭菌,制得聚山梨酯-80初级降解物。
实施例2、一种皮肤修复液
表皮生长因子8.0×10-3%、碱性成纤维细胞生长因子8.0×10-3%、经电场处理的植物提取物20%、胶原蛋白3%、乙酰基六肽0.05%、维生素B5%、稳定剂1.5%、尿囊素1.5%、甘油5%、椰油基葡糖苷0.6%以及水余量,其中稳定剂为包含实施例1所述600ppm聚山梨酯-80初级降解物和60ppmL-谷氨酰胺的水溶液。
制备方法:
A)经电场处理的植物提取物制备:包括S1~S3步骤:
S1、芦荟提取物的制备:取新鲜芦荟,洗净,晾干,榨汁,过滤,即得;
S2、鱼腥草提取物的制备:取新鲜鱼腥草,洗净,晾干,加入鱼腥草总量5倍量的水煎煮2次,每次35min,过滤,合并滤液,即得;
S3、不同强度的电场处理:将上述芦荟提取物和鱼腥草提取物混合,暴露在电压12V,电场强度8v/m的电场中1min后,将电场强度调节至3v/m,继续处理22s,即得;
B)将甘油以及维生素B混合均匀后,加入稳定剂,涡旋混匀后,加入表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、经电场处理的植物提取物、胶原蛋白、乙酰基六肽、尿囊素、椰油基葡糖苷和水,不断涡旋使其形成均一稳定的溶液,包装,即得。
实施例3、一种皮肤修复液
纤维细胞生长因子5.0×10-3%、碱性成纤维细胞生长因子6.0×10-3%、经电场处理的植物提取物15%、胶原蛋白3%、乙酰基六肽0.03%、维生素B%、稳定剂1%、尿囊素1%、甘油5%、椰油基葡糖苷0.6%以及水余量,其中稳定剂为包含500ppm聚山梨酯-80初级降解物和50ppmL-谷氨酰胺的水溶液。
制备方法与实施例2的区别在于:所述步骤S3中将上述芦荟提取物和鱼腥草提取物混合,暴露在电压22V,电场强度8v/m的电场中1min后,将电场强度调节至3v/m,继续处理22s,其余参数及操作如实施例2所示。
实施例4、一种皮肤修复液
表皮生长因子1.0×10-2%、碱性成纤维细胞生长因子1.0×10-2%、经电场处理的植物提取物25%、胶原蛋白5%、乙酰基六肽0.06%、维生素B6%、稳定剂3%、尿囊素2%、甘油10%、椰油基葡糖苷0.8%以及水余量,其中稳定剂为包含1000ppm聚山梨酯-80初级降解物和100ppmL-谷氨酰胺的水溶液。
制备方法与实施例2的区别在于:所述步骤S3中将上述芦荟提取物和鱼腥草提取物混合,暴露在电压10V,电场强度10v/m的电场中1min后,将电场强度调节至6v/m,继续处理22s,其余参数及操作如实施例2所示。
对比例1、一种皮肤修复液
对比例1与实施例2的区别在于,去掉步骤S3,其余参数及操作如实施例4。
对比例2、一种皮肤修复液
对比例2与实施例2的区别在于,步骤S3为将上述芦荟提取物和鱼腥草提取物暴露在电压12V,电场强度8v/m的电场中1min22s(去掉低强度电场处理步骤)。
试验例一、激素依赖性皮炎治疗试验
1.1分组:180名面部激素依赖性皮炎患者,随机分为5组,分别使用本发明实施例2~4以及对比例1~2制备得到的修复液,每组36例。
1.2使用方法:温水洁面后,取适量修复液涂抹于面部,每天早晚2次,期间不使用其他药物治疗,持续使用4周。
1.3疗效观察:在使用前后分别观察患者的症状(瘙痒、疼痛、紧绷等)和体征(红斑、肿胀、脱屑、干燥、毛细血管扩张等),同时观察不良反应。根据疗效指数将疗效分为痊愈、显效、有效和无效4级,观察结果如表1所示。
有效率=(痊愈+显效+有效)例数/总例数×100%。
其中,痊愈:患者面部症状和体征全部消退,症状基本消失;显效:患者面部症状和体征大部分消退,症状明显减轻;有效:患者面部症状和体征部分消退,症状有所改善;无效:患者面部症状和体征消退不明显,症状未见减轻,甚或加重。
1.4使用感评价:按表2评价标准对使用时的刺痛感程度进行评价,评价结果如表3所示。
1.5试验结果。
1.5.1疗效观察结果:
表1试验结果
组别 痊愈(率) 显效(率) 有效(率) 无效(率) 有效率
实施例2 21(58.3%) 12(33.3%) 3(8.3%) 0 100%
实施例3 20(55.6%) 9(25.0%) 5(13.9%) 2(5.5%) 94.5%
实施例4 20(55.6%) 10(27.8%) 4(11.1%) 2(5.5%) 94.5%
对比例1 13(36.1%) 8(22.2%) 9(25.0%) 6(16.7%) 83.3%
对比例2 15(41.7%) 10(27.8%) 6(16.7%) 5(13.8%) 86.2%
1.5.2使用感评价
表2评价标准
指标 0~3分 4~7分 8~10分
刺痛感 存在强烈的刺痛感 存在轻微刺痛感 无刺激痛
表3评价结果
组别 分数
实施例2 9.73
实施例3 9.52
实施例4 9.43
对比例1 4.72
对比例2 6.65
2.结果分析
2.1疗效观察:由表1可知,本发明实施例2~4所述皮肤修复液对激素依赖性皮炎均有显著的治疗作用,总有效率均在90%以上,其中尤以实施例2的效果最为显著,总有效率高达100%。而与实施例2相比,对比例1~2所述皮肤修复液对激素依赖性皮炎的疗效亦有一定程度上的降低。
2.2使用评价:从表3可以看出,全部激素依赖性皮炎患者均认为在使用本发明实施例2~4所述皮肤修复液时不存在轻微的刺痛感;而需要说明的是,与实施例2相比,对比例1(与实施例2相比,省略了电场处理步骤)评分为4.72分,这说明,使用了对比例1所述皮肤修复液后,大部分激素依赖性皮炎患者感觉存在轻微的刺激痛感,表示电场处理有利于降低植物提取物对皮肤的刺激性;使用了对比例2(与实施例2相比,省略了低强度电场处理步骤)所述皮肤修复液后,虽然刺激痛感评分较对比例1有所升高,但从评分来看,仍有部分患者感觉使用时存在轻微的刺激痛。
试验例二、稳定性评价
2.1稳定剂组成对生长因子稳定性考察
取实施例2~4所述皮肤修复液,并在实施例2的基础上按下表4设置各对照组,制备得到各对照组皮肤修复液,设置各组制备得到的皮肤修复液中的初始表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的浓度为8μg/L,将各组样品置于4℃、-20℃以及常温的条件下储存30d后,采用ELASA方法检测生长因子的含量(试剂盒购自美国RapidBio公司,实验操作按试剂盒说明进行)试验结果如下表5、6所示。
表4不同稳定剂组成
组别 稳定剂组成
空白对照组 不含稳定剂
A组 含有660ppm聚山梨酯-80初级降解物的水溶液
B组 含有660ppmL-谷氨酰胺的水溶液
C组 含有660ppm聚山梨酯-80的水溶液
表5稳定剂组成对表皮生长因子含量的影响
注:与空白对照组同项相比,**P<0.01,*P<0.05;与实施例2组同项相比,##P<0.01,#P<0.05。
表6稳定剂组成对碱性成纤维细胞生长因子含量的影响
注:与空白对照组同项相比,**P<0.01,*P<0.05;与实施例2组同项相比,##P<0.01,#P<0.05。
由表5、6可知,各组样品在-20℃条件下储藏30d两种生长因子的含量无明显差异,不具有统计学意义。但是在4℃以及常温的条件下储藏30d后,本发明实施例2~4修复液中人干细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的含量均显著高于空白对照组(不加入稳定剂),具有极显著的差异(P<0.01)。
与本发明实施例2相比,A组(与实施例2相比,去掉了L-谷氨酰胺)皮肤修复液在4℃以及常温的条件下储藏30d,两种生长因子含量均有显著下降(P<0.05);B组(与实施例2相比,去掉了聚山梨酯-80初级降解物)皮肤修复液在4℃以及常温的条件下储存30d后,两种胞生长因子的含量均有极显著下降(P<0.01)。
C组加入了完整聚山梨酯-80,其制备得到的修复液在4℃以及常温的条件下储藏30d后与本发明相比亦有显著下降(P<0.05),这说明,与加入完整的聚山梨酯-80相比,本发明加入聚山梨酯-80协同L-谷氨酰胺取得了更加优异的效果。
2.2稳定剂组成对各组皮肤修复液澄清度的影响
取上述2.1各组皮肤修复液,将其置于为温度25±2℃、相对湿60±10%的条件下储存3、6、9、12个月后,观察各自皮肤修复液澄清情况,并记录,试验结果如表7所示。
表7稳定剂对各组皮肤修复组合物澄清度的影响
由表7可知,本发明2~4所述皮肤修复液在温度25±2℃、相对湿度60±10%的条件下储存12个月后仍然澄清,其与C组(与实施例2相比,稳定剂为聚山梨酯-80)制备得到的修复液无明显差别,这说明,本发明稳定剂在蛋白质防止聚集方面,能够取得与聚山梨酯-80同等的效果。而不含本发明稳定剂的皮肤修复液(空白对照组)在相同条件下储存6个月后即有少许沉淀产生,推测是胶原蛋白和多肽发生了相互聚集导致的。
A组(与实施例2相比,稳定剂为聚山梨酯-80初级降解物)和B组(与实施例2相比,稳定剂为L-谷氨酰胺)制备得到的修复液在相同的条件下储存9个月后出现了沉淀,聚山梨酯-80初级降解物和L-谷氨酰胺对蛋白质的相互聚集具有一定的抑制作用,但作用不显著。而两者联合使这种抑制作用变得更加显著,这说明,L-谷氨酰胺和聚山梨酯-80初级降解物两者协同在防止蛋白质稳定方面能够取得协同增效的效果。
最重要的是,从本试验例可以看出,本发明稳定剂的组成的变化均会使得皮肤修复液的稳定性具有较大的变化,且这种变化的幅度不可预期,发明人认为取得了意料不到的技术效果。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效,而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下,对上述实施例进行修饰或改变。因此,举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变,仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (8)

1.一种皮肤修复液,其特征在于,由以下质量分数的组分制成:人干细胞生长因子1.0×10-3~1.0×10-2%、碱性成纤维细胞生长因子5.0×10-3~1.0×10-2%、经电场处理的植物提取物12~25%、胶原蛋白3~6%、乙酰基六肽0.02~0.06%、维生素B 2~6%、稳定剂1~3%、尿囊素0.5~2%、甘油2~12%、椰油基葡糖苷0.5~0.8%以及水余量。
2.如权利要求1所述的修复液,其特征在于,由以下质量分数的组分制成:人干细胞生长因子5.0×10-3~1.0×10-2%、碱性成纤维细胞生长因子6.0×10-3~1.0×10-2%、经电场处理的植物提取物15~25%、胶原蛋白3~5%、乙酰基六肽0.03~0.06%、维生素B 3~6%、稳定剂1~3%、尿囊素1~2%、甘油5~10%、椰油基葡糖苷0.6~0.8%以及水余量。
3.如权利要求2所述的修复液,其特征在于,由以下质量分数的组分制成:人干细胞生长因子8.0×10-3%、碱性成纤维细胞生长因子8.0×10-3%、经电场处理的植物提取物20%、胶原蛋白3%、乙酰基六肽0.05%、维生素B 5%、稳定剂1.5%、尿囊素1.5%、甘油5%、椰油基葡糖苷0.6%以及水余量。
4.如权利要求1~3任一所述的修复液,其特征在于,所述经电场处理的植物提取物由以下步骤制得:
S1、芦荟提取物的制备:取新鲜芦荟,洗净,晾干,榨汁,过滤,即得;
S2、鱼腥草提取物的制备:取新鲜鱼腥草,洗净,晾干,加入鱼腥草总量3~6倍量的水煎煮1~3次,每次30~60min,过滤,合并滤液,即得;
S3、不同强度的电场处理:将上述芦荟提取物和鱼腥草提取物混合,暴露在电压10~22V,电场强度8~10v/m的电场中1~3min后,将电场强度调节至3~6v/m,继续处理20~35s,即得。
5.如权利要求4所述的修复液,其特征在于,所述步骤S3中将上述芦荟提取物和鱼腥草提取物混合后暴露在12V,电场强度8v/m的电场中1min后,将电场强度调节至3v/m,处理22s。
6.如权利要求1~3任一所述的修复液,其特征在于,所述稳定剂为包含500~1000ppm聚山梨酯-80初级降解物和50~100ppm L-谷氨酰胺的水溶液。
7.如权利要求6所述的修复液,其特征在于,所述聚山梨酯-80初级降解物由以下步骤制得:
往100ml摇瓶内加入聚山梨酯-80溶液,接种1~5wt%浓度为800~1000cfu/mL的绿色木霉,设置温度为30~40℃,转速为100rpm,培养至培养液pH检测为2.0~3.0,离心,取上清;依次对上清进行微滤、阳离子交换和灭菌,制得聚山梨酯-80初级降解物。
8.一种制备如权利要求1~7任一所述的皮肤修复液的方法,其特征在于,包括以下步骤:
将甘油以及维生素B混合均匀后,加入稳定剂,涡旋混匀后,加入人干细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、经电场处理的植物提取物、胶原蛋白、乙酰基六肽、尿囊素、椰油基葡糖苷和水,不断涡旋使其形成均一稳定的溶液,即得。
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