CN108037243A - 一种用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置及测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，该装置包括通过软管顺次连接的吸气部分、气流控制部分和毒力测定部分，所述的吸气部分包括吸气装置，气流控制部分包括相连的分流器和气流计，分流器与吸气装置连接，所述的毒力测定部分包括吸取内管和生测管，吸取内管包括管头部，管头部的后端通过软管与气流计连接，前端设置有管体部，管体部的直径小于管头部直径，管体部置于生测管内且与管头部密闭连接。采用本发明的装置药膜制作和试虫采集速度均显著提高，且因操作造成的螨及昆虫死亡率显著降低，各处理间线性更好，结果更稳定。

Description

一种用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装 置及测定方法

技术领域

本发明涉及一种用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置及测定方法，属于病虫害生物测定技术领域。

背景技术

微小生物包括螨类及小型昆虫类，具体包括叶螨类，如：苹果全爪螨、柑橘全爪螨、山楂叶螨、朱砂叶螨、二斑叶螨、果苔螨、江原氏苔螨、针叶小爪螨、榆广叶螨、竹裂爪螨、东方真叶螨、杨始叶螨、李始叶螨、截形叶螨、野生叶螨、侧多食跗线螨、葡萄短须螨、加州短须螨等；蓟马类，如：葱蓟马、瓜蓟马、稻蓟马、西花蓟马、日本蓟马、橙黄蓟马、褐带蓟马、黄带蓟马、普通大蓟马、色蓟马、褐三鬃蓟马、边腹曲管蓟马、褐条网纹蓟马、稻管蓟马、广肩网纹蓟马、蓝黄蓟马、中华管蓟马、柑橘蓟马、花蓟马、棕榈蓟马、杜鹃蓟马、禾蓟马、黄胸蓟马、八节黄蓟马、端大蓟马、橘简管蓟马、狭翅简管蓟马等；蚜虫等，如：苹果黄蚜、桃蚜、桃粉蚜、苹果绵蚜、麦长管蚜、麦二叉蚜、黍缢管蚜、无网长管蚜、玉米蚜等；粉虱等，如：烟粉虱、黑刺粉虱、白粉虱等以及韭蛆、果蝇等昆虫的幼虫等。该类昆虫具有体型微小、产卵量大、繁殖速度快(室内饲养可达10代/年以上)、饲养简单等特点，可在短时间内获得大量试验昆虫，并在螨及昆虫毒理学研究中应用广泛。

螨及昆虫毒理学主要通过运用生理生化方法或分子手段研究药物对螨及昆虫的中毒机理以及选择性药剂的解毒机理、抗药性机理等，为合成新农药和解决抗性问题提供依据。进行螨或昆虫的毒力测定试验是开展毒理学研究的先决条件。生物测定的测试的对象不是个体而是群体。毒力测定试验需要进行药剂不同浓度的处理，而且每个处理需要足够数量的重复，一般重复至少4次，每个重复20～50头试验螨或昆虫，以保证试验的准确性和可靠性。按每个药剂至少7个浓度处理，每个处理4个重复，每个处理重复30头试验螨或昆虫计算，一次试验至少需要虫态、虫龄和生理上尽可能一致试验螨或昆虫840头。

目前，进行毒力测定方法有药膜法(Residual films)、玻片浸渍法(slide-dipmethod)和喷雾触杀法(Spray tag method)等，其中以药膜法为主。药膜法具有接近实际防治情况、结果准确、方法简单、操作方便、应用范围广，几乎一切爬行的螨类和昆虫都适用等优点，药膜法又包括容器药膜法、滤纸药膜法、蜡纸粉膜法，其中以容器药膜法最为常用。容器药膜法是指采用干燥的培养皿、三角瓶、离心管或其他容器，加入一定量的药液或丙酮(对照)，然后均匀地转动容器，使药液在容器中形成一层药膜，待药液干燥后(或丙酮挥发后)，放入一定数量试验螨或昆虫进行毒力测定的方法。为保证试验的准确性，常需要在短时间内挑取大量虫态、性别、活力一致的试验螨或昆虫进行试验，加大了挑虫的工作量。

目前，试验螨或昆虫挑取主要有毛笔法挑虫，该法选择一定型号的毛笔蘸水后，一边转动笔杆一边微微舔笔形成笔尖，利用笔尖上水的附着力及笔尖的作用力将螨类或昆虫挑入已做好药膜的容器内。该法在实际操作中遇到诸多问题，如：(1)利用毛笔挑虫，速度较慢，难以在短时间内开展多处理、多重复、多虫量的毒力测定试验。(2)由于利用毛笔挑虫的试验者熟练程度、用力大小等因素的差异，难以保证所挑试验螨或昆虫成活率的一致性，造成试验误差，影响试验结果。(3)由于生物测定的测试的对象是该生物群体而非个体，每个处理需虫量较大，挑取时间较长，容易造成计数误差。

目前，微小生物室内毒力测定的挑虫问题已成为制约微小生物毒力测定时效性和准确性的瓶颈。

因此，有必要开发一种在保证试虫成活率的前提下，采集迅速、毒力测定效率高的农药室内毒力测定装置。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置及测定方法。

本发明的技术方案如下：

一种用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，该装置包括通过软管顺次连接的吸气部分、气流控制部分和毒力测定部分，所述的吸气部分包括吸气装置，气流控制部分包括相连的分流器和气流计，分流器与吸气装置连接，所述的毒力测定部分包括吸取内管和生测管，吸取内管包括管头部，管头部的后端通过软管与气流计连接，前端设置有管体部，管体部的直径小于管头部直径，管体部置于生测管内且与管头部密闭连接。

本发明优选的，吸取内管的管体部与管头部一体连接且呈直线型，管体部的开口端呈弧形收缩且开口为平口。

本发明优选的，吸取内管的管头部为圆柱形长管，在管头部外表面设置有手持部。便于进行实验操作。手持部材质可以为橡胶或磨砂塑料等，以减轻长期持握造成的疲劳感。

本发明优选的，所述的生测管的纵截面形状为梭型，梭型的两侧窄、中间宽，上下表面为弧形表面，生测管的一端开口，管体部从该开口端伸入生测管内，另一端在端部形成斜切口，斜切口外部设置有下盖。本发明生测管的设计增大试验螨及昆虫的数量，降低拥挤度。

优选的，所述斜切口斜度为30～80°。该设计目的在于生测管口与螨及昆虫饲养介质易于紧密结合，并将试验螨及昆虫吸入生测管中。另外，斜切口优点还在于便于试验操作，减小长时间试验操作的疲劳程度。

本发明的斜切口斜度指的是切口斜面与生测管中轴之间的夹角。

根据本发明优选的，生测管的斜切口长度为2-5mm，斜切口最宽处的宽度为1-5mm，生测管的容量为1-20mL。

优选的，所述下盖呈圆锥型，下盖内面有与生测管前端斜切口斜度相同的斜面。以保证下盖将管体斜切口密封。该设计目的在于保证下盖将管体斜切口密封，试验时防止试验螨及昆虫逃逸，影响试验结果。

进一步优选的，生测管的开口端一侧连接有上盖，且上盖设有若干通气孔，通气孔直径大小与试验螨及昆虫虫体大小匹配。其目的在于既可以防止试验螨及昆虫逃逸，又可以在试验期间保证生测管内空气流通，为试验螨及昆虫提供正常的生活环境，减小试验因素对试验结果的影响。

进一步优选的，吸取内管的管头部外径与生测管的开口端外径一致，通过采用磨砂、卡扣、螺纹或塑胶密封方式紧密连接。该连接方式既方便连接和拆卸又可达到良好的密封性。

进一步优选的，生测管的开口端大小与移液枪枪头大小相匹配。

本发明优选的，分流器上设置有2-6个分流管，可以与2-6个毒力测定部分连接。分流管具体分流数量根据需求而定，可以为2、3、4……枝，其目的在于可以利用1台吸气装置通过分流管带动多个毒力测定部分装置，提高试验速度和效率。

本发明吸气部分用于提供足够力量且稳定的气流；气流控制部分保证气流稳定，控制气流大小，并且可以连接多个毒力测定部分。

根据本发明优选的，所述吸气装置设置有进气孔和出气孔，进气孔通过软管与分流器连接，吸气装置为微型抽打气泵、电磁式空气压缩机气泵、真空泵等电动气泵或汽油空压机油动气泵。吸气装置具体发动机类型和功率大小根据具体试验需求进行配套。其目的在于提供足够力量且稳定的气流。

根据本发明优选的，所述气流计为玻璃转子流量计、浮子流量计或数显流量计等空气流量测量装置。

气流计其目的在于根据不同试验要求、虫体大小、毒力测定部分连接数量的多少等因素控制气流大小，既防止因气流过大造成螨及昆虫死亡，又防止气流过小无法将螨及昆虫吸入生测管体中。

本发明的毒力测定部分采用套管设计，其目的在于螨及昆虫被吸入后，进入内管管体前端和生测管体后端之间区域，气流不再对其产生影响或伤害，最大限度的保证的成活率。

根据本发明优选的，吸取内管的管体部为直线型，管体部的开口平面与吸取内管的管体中轴垂直，且吸取内管外径为生测管内径的1/3～1/15。以保证内管管体与生测管体之间有足够大的空间容纳试验昆虫。

进一步优选的，管体部的开口位于生测管梭型的中间部。

根据本发明优选的，吸取内管长度为生测管长度的2/3～4/5。既防止因吸取内管开口与生测管口距离过小而把螨及昆虫吸入吸取内管影响试验或损坏设备，又防止距离过大造成气流束分散无法将螨及昆虫吸入生测管体中。

根据本发明优选的，所述生测管开口端内径与目前常用移液枪枪头型号匹配，可以根据不同型号移液枪设计不同的生测管，满足不同试验要求。其作用在于可以将生测管直接与移液枪相连，利用移液枪吸取各浓度处理的药液制作药膜，方便快捷。

根据本发明优选的，所述生测管体整体呈梭型，以便于增大生测管空间，为试验螨及昆虫提供足够大的活动空间，降低试验中因试验螨及昆虫单位密度过大对试验的影响。

根据本发明优选的，所述下盖不与生测管体连接，采用分离式。此设计目的在于，试验时生测管要插入试验药剂中吸取药液，下盖连接会沾染药液且造成不便。另，在用生测管吸取试验螨及昆虫时，也给试验带来不便。

根据本发明优选的，吸气部分、气流控制部分和毒力测定部分均以软管相连，软管材质可以为pvc、塑料、橡胶等，应保证足够的软度，便于试验操作且不易试验操作时因弯折影响气流通畅。

利用上述采集与测定一体化农药室内毒力测定装置进行室内毒力测定的方法，包括步骤如下：

1)药膜制作：根据试验虫体种类、大小、数量，选择生测管大小、生测管斜切口直径，将生测管开口端与相匹配的移液枪连接，吸取药液至生测管内，盖上下盖及上盖，横置旋转生测管，使管壁与药液充分接触，倒掉药液，打开上盖，放入通风橱中，使溶剂充分挥发后在管壁上形成一层均匀的药膜；各药剂浓度及重复所用生测管依次制作并编号备用。

2)试虫采集：将1)中制作的带有药膜的生测管连接到吸取内管上，使吸取内管的管体部位于生测管内并密闭连接，打开吸气装置，调节气流计，使气流大小控制在0.4～5.0L/min；持装置毒力测定部分手持部，调整生测管体角度，使生测管的斜切口对准螨或昆虫的位置，将螨或昆虫吸入生测管内，操作完毕后，盖好下盖和上盖，并将生测管插入相应管架中。

3)试验结果观察及数据处理：按照试验设计的饲养条件、观察时间、死亡评判标准及试验有效性规则等进行结果观察及数据处理。

有益效果

1、采用本发明的装置药膜制作速度比传统毛笔法提高2.2～3.3倍，试虫采集速度提高10.4～14.9倍，而试验螨及昆虫的死亡率降低86.1％～97.3％，毒力回归方程相关系数提高到0.95以上。综合分析表明，说明利用本发明的装置药膜制作和试虫采集速度均显著提高，且因操作造成的螨及昆虫死亡率显著降低，各处理间线性更好，结果更稳定。

2、本发明通过分流器连接多个毒力测定部分，可将试验速度进一步提高和放大。

3、本发明可有效降低因虫量大，挑取时间过长而造成的人为计数误差。

4、本发明可以根据试验虫体大小和数量，选择不同生测管大小、生测管斜切口直径，气流大小，以提供足够的试验空间，并保证试验螨及昆虫的成活率。具体参数参照表1。

表1螨及昆虫不同试验要求推荐参数表

5、本发明成功将螨及昆虫采集设备和毒力测定设备完美结合，避免了螨及昆虫二次转移造成的伤害。

6、本发明设计构思巧妙，结构简单实用，作用明显，使用效果显著，提高了试验效率和试验精准度，具有良好的市场前景和推广应用价值。

附图说明

图1为本发明的农药室内毒力测定装置结构示意图；

其中，1、吸气装置，2、出气孔，3、进气孔，4、分流器，5、气流计，6、软管，7、吸取内管，8、管体部，9、管头部，10、手持部，11、生测管，12、上盖，13、下盖。

图2为利用本发明的装置进行毒力测定与传统的毛笔法进行毒力测定，药膜制作时间对比柱状图；

图3为利用本发明的装置进行毒力测定与传统的毛笔法进行毒力测定，试虫采集时间对比柱状图；

图4为利用本发明的装置进行毒力测定与传统的毛笔法进行毒力测定，试虫死亡率对比柱状图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步阐述，但本发明所保护范围不限于此。

实施例1

一种用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，结构如图1所示，该装置包括通过软管顺次连接的吸气部分、气流控制部分和毒力测定部分，所述的吸气部分包括吸气装置1，气流控制部分包括相连的分流器4和气流计5，吸气装置1设置有进气孔3和出气孔2，进气孔3通过软管与分流器4连接，分流器4通过软管与气流计连接，吸气装置为微型抽打气泵、电磁式空气压缩机气泵、真空泵等电动气泵或汽油空压机油动气泵。

毒力测定部分包括吸取内管7和生测管11，吸取内管7包括管头部9，管头部9的后端通过软管6与气流计5连接，前端设置有管体部8，管体部8的直径小于管头部9直径，管体部8置于生测管11内且与管头部9密闭连接。吸取内管的管体部8与管头部7一体连接且呈直线型，管体部8的开口端呈弧形收缩且开口为平口。

吸取内管的管头部9为圆柱形长管，在管头部外表面设置有手持部10。吸取内管的管头部9外径与生测管11的开口端外径一致，通过采用磨砂螺纹方式紧密连接。生测管的开口端大小与移液枪枪头大小相匹配。

生测管11的纵截面形状为梭型，梭型的两侧窄、中间宽，上下表面为弧形表面，生测管的一端开口，管体部8从该开口端伸入生测管11内，另一端在端部形成斜切口，斜切口外部设置有下盖13；斜切口斜度为45°。下盖13呈圆锥型，下盖内面有与生测管前端斜切口斜度相同的斜面。

生测管11的开口端一侧连接有上盖12，且上盖12设有若干通气孔，通气孔直径大小与试验螨及昆虫虫体大小匹配。其目的在于既可以防止试验螨及昆虫逃逸，又可以在试验期间保证生测管内空气流通，为试验螨及昆虫提供正常的生活环境，减小试验因素对试验结果的影响。

分流器上设置有2个分流管，可以与2个毒力测定部分连接。可以利用1台吸气装置通过分流管带动2毒力测定部分装置，提高试验速度和效率。

吸取内管的管体部8为直线型，管体部的开口平面与吸取内管的管体中轴垂直，且吸取内管外径为生测管内径的1/3；管体部的开口位于生测管梭型的中间部；吸取内管长度为生测管长度的2/3。既防止因吸取内管开口与生测管口距离过小而把螨及昆虫吸入吸取内管影响试验或损坏设备，又防止距离过大造成气流束分散无法将螨及昆虫吸入生测管体中。

实施例2

同实施例1所述的一种用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，不同之处在于：

生测管11的斜切口斜度为60°。

分流器上设置有4个分流管，可以与4个毒力测定部分连接。可以利用1台吸气装置通过分流管带动4毒力测定部分装置，提高试验速度和效率。

吸取内管的管体部8为直线型，管体部的开口平面与吸取内管的管体中轴垂直，且吸取内管外径为生测管内径的1/10；管体部的开口位于生测管梭型的中间部；吸取内管长度为生测管长度的4/5。

实施例3

利用采集与测定一体化农药室内毒力测定装置进行阿维菌素对苹果全爪螨室内毒力测定的方法，步骤如下：

1)药膜制作：将阿维菌素原药用丙酮稀释成0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007mg/kg 7个浓度梯度，并以丙酮处理为空白对照。选择1mL生测管(斜切口长轴×短轴＝2mm×1mm)，并将其连接到Biohit proline 100-1000μL移液枪上，分别用不同生测管每浓度吸取药液1mL，盖上下盖，将生测管插入枪头盒中，按下除吸头推杆，盖上上盖，横置并旋转生测管，使管壁与药液充分接触，然后倒掉药液，把生测管放入通风橱中至丙酮挥发完全，使管壁上形成一层均匀的药膜。每浓度处理及空白对照重复4次，即分别制作药膜生测管4个备用。

2)试虫采集：将1)中制作的带有药膜的生测管连接到吸取内管上，使吸取内管的管体部位于生测管内并密闭连接，打开吸气装置，调节气流计，将气流大小控制在0.6L/min。左手摘取带有苹果全爪螨的苹果叶片，右手持装置毒力测定部分手持部，根据苹果全爪螨所在苹果叶片的位置及倾斜角度，调整生测管体角度，将苹果全爪螨雌成螨自生测管体前端开口吸入。每个生测管中吸取30头健康的3～5日龄雌成螨，共需雌成螨960头。操作完毕后，盖好下盖和上盖，并将生测管插入相应管架中。

3)试验结果观察及数据处理：正常饲养条件下放置24小时，用解剖镜观察每管的苹果全爪螨存活情况，用毛笔轻轻触动苹果全爪螨足、须，不动者视为死亡。数据用对照死亡率校正，其中对照死亡率大于10％为无效生物测定。

将本发明的方法与传统毛笔法处理进行比较。

毛笔法：

药膜制作：容器采用1mL离心管，其它步骤同采集和测定装置中药膜制作。

试虫采集：选择小型绘图毛笔，将毫端蘸水后，一边转动笔杆一边微微舔笔形成笔尖，利用笔尖上水的附着力及笔尖的作用力将苹果全爪螨雌成螨挑入已做好药膜的1mL离心管中。

试验结果观察及数据处理：同采集和测定装置方法。

利用该两种方法进行试验时，分别记录药膜制作时间和试虫采集时间，并对比毛笔法挑螨与装置取螨两种方法中空白对照的成活率，以及利用该两种方法测定结果计算的毒力方程。

试验结果表明，利用本发明的装置进行阿维菌素对苹果全爪螨毒力测定，药膜制作时间比毛笔法减少55％，速度提高了2.2倍，如图2所示，制作一个药膜管仅需时1.2min；试虫采集时间比毛笔法减少92％，速度提高了12.3倍，如图3所示；而苹果全爪螨的死亡率仅为毛笔法的8.0％，降至0.8％，如图4所示；毒力回归方程相关系数(表2)显著提高，达到0.98。说明利用采集和测定装置速度显著提高，且螨的死亡率显著降低，各处理间线性更好，结果更稳定。

表2螨及昆虫不同试验要求推荐参数表

实施例4

同实施例3所述的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置进行阿维菌素对苹果全爪螨室内毒力测定的方法，不同之处在于：

药膜制作：将多杀菌素原药用丙酮稀释成0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35mg/kg7个浓度梯度，并以丙酮处理为空白对照。选择3mL生测管(斜切口长轴×短轴＝4mm×3mm)进行试验，其它步骤按实施例3的药膜制作部分进行。

试虫采集：气流大小控制在2.5L/min。葱蓟马采用韭菜室内饲养。每个生测管中吸取20头健康的葱蓟马成虫，共需葱蓟马成虫640头。

试验结果观察及数据处理：48小时观察试验结果，其它同实施例3试验结果及数据处理部分。

毛笔法：

药膜制作：容器采用3mL离心管，实施例3药膜制作。

试虫采集：操作同实施例3毛笔法部分。

试验结果观察及数据处理：同实施例3。

利用该两种方法进行试验时，分别记录药膜制作时间和试虫采集时间，并对比毛笔法挑虫与装置取虫两种方法中空白对照的成活率，以及利用该两种方法测定结果计算的毒力方程。

试验结果表明，利用采集和测定装置进行多杀菌素对葱蓟马毒力测定，药膜制作时间比毛笔法减少60％，速度提高了2.5倍，制作一个药膜管仅需时1.6min，如图2所示；试虫采集时间比毛笔法减少90％，如图3所示，速度提高了10.4倍；而葱蓟马的死亡率仅为毛笔法的2.6％，如图3所示；降至0.2％。毒力回归方程相关系数(表2)显著提高，达到0.99。说明利用采集和测定装置速度显著提高，且蓟马的死亡率显著降低，各处理间线性更好，结果更稳定。

实施例5

同实施例3所述的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置进行阿维菌素对苹果全爪螨室内毒力测定的方法，不同之处在于：

药膜制作：将50％氟啶虫胺腈水分散粒剂用蒸馏水稀释成160、80、40、20、10、5mg/kg5个浓度梯度，并以蒸馏水处理为空白对照。选择5mL生测管(斜切口长轴×短轴＝4mm×4mm)，并将其连接到Biohit proline 5000μL移液枪上，每浓度吸取药液5mL，其它步骤按实施例3的药膜制作部分进行。

试虫采集：气流大小控制在4L/min。苹果黄蚜采用海棠苗进行室内饲养。每个(11)生测管中吸取30头健康的无翅雌成蚜，共需苹果黄蚜无翅雌成蚜600头。

试验结果观察及数据处理：放在[T＝25±1℃，L:D＝16:8h，RH＝(60±10)％]养虫室中，处理后48h检查蚜虫死亡数，以用毛笔触动蚜虫身体无自主性反应为死亡标准。数据用对照死亡率校正，其中对照死亡率大于10％为无效生物测定。

毛笔法：

药膜制作：容器采用5mL离心管，实施例3药膜制作。

试虫采集：操作同实施例3毛笔法部分。

试验结果观察及数据处理：同采集和测定装置方法。

利用该两种方法进行试验时，分别记录药膜制作时间和试虫采集时间，并对比毛笔法挑虫与装置取虫两种方法中空白对照的成活率，以及利用该两种方法测定结果计算的毒力方程。

试验结果表明，利用采集和测定装置进行氟啶虫胺腈对苹果黄蚜毒力测定，药膜制作时间比毛笔法减少70％，如图2所示，速度提高了3.3倍，制作一个药膜管仅需时1.3min；试虫采集时间比毛笔法减少93％，如图3所示，速度提高了14.9倍；而苹果黄蚜的死亡率仅为毛笔法的10.8％，如图4所示，降至1％。毒力回归方程相关系数(表2)显著提高，达到0.95。说明利用采集和测定装置速度显著提高，且蚜虫的死亡率显著降低，各处理间线性更好，结果更稳定。

实施例6

同实施例3所述的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置进行阿维菌素对苹果全爪螨室内毒力测定的方法，不同之处在于：

药膜制作：将吡虫啉原药用丙酮稀释成2.5、5、10、20、40、80、160mg/kg 7个浓度梯度，并以丙酮处理为空白对照。选择10mL生测管(斜切口长轴×短轴＝5mm×4mm)，并将其连接到Biohit proline 5000μL移液枪上，每浓度吸取药液5mL，其它试验步骤同实施例3药膜制作部分。

试虫采集：气流大小控制在5L/min。烟粉虱采用甘蓝苗进行室内饲养。每个生测管中吸取40头健康的烟粉虱成虫，共需烟粉虱成虫1120头。

试验结果观察及数据处理：放在常规饲养养虫室中，处理后48h检查烟粉虱死亡数，以用毛笔触动烟粉虱身体无自主性反应为死亡标准。数据用对照死亡率校正，其中对照死亡率大于10％为无效生物测定。

毛笔法：

药膜制作：容器采用10mL离心管，实施例3药膜制作。

试虫采集：采用二氧化碳麻醉法将烟粉虱成虫进行处理后，用毛笔进行挑虫操作。操作同实施例3毛笔法部分。

试验结果观察及数据处理：同实施例3。

利用该两种方法进行试验时，分别记录药膜制作时间和试虫采集时间，并对比毛笔法挑虫与装置取虫两种方法中空白对照的成活率，以及利用该两种方法测定结果计算的毒力方程。

试验结果表明，利用采集和测定装置进行氟啶虫胺腈对苹果黄蚜毒力测定，药膜制作时间比毛笔法减少67％，如图2所示，速度提高了3.0倍，制作一个药膜管仅需时1.5min；试虫采集由于不用进行二氧化碳麻醉处理，时间比毛笔法减少90.4％，如图3所示，速度提高了10.5倍；而苹果黄蚜的死亡率仅为毛笔法的13.9％，如图4所示，降至1.1％。毒力回归方程相关系数(表2)显著提高，达到0.99。说明利用采集和测定装置速度显著提高，且烟粉虱成虫的死亡率显著降低，各处理间线性更好，结果更稳定。

Claims (10)

1.一种用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，该装置包括通过软管顺次连接的吸气部分、气流控制部分和毒力测定部分，所述的吸气部分包括吸气装置，气流控制部分包括相连的分流器和气流计，分流器与吸气装置连接，所述的毒力测定部分包括吸取内管和生测管，吸取内管包括管头部，管头部的后端通过软管与气流计连接，前端设置有管体部，管体部的直径小于管头部直径，管体部置于生测管内且与管头部密闭连接。

2.根据权利要求1所述的用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，其特征在于，吸取内管的管体部与管头部一体连接且呈直线型，管体部的开口端呈弧形收缩且开口为平口。

3.根据权利要求1所述的用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，其特征在于，吸取内管的管头部为圆柱形长管，在管头部外表面设置有手持部；所述的生测管的纵截面形状为梭型，梭型的两侧窄、中间宽，上下表面为弧形表面，生测管的一端开口，管体部从该开口端伸入生测管内，另一端在端部形成斜切口，斜切口外部设置有下盖。

4.根据权利要求1所述的用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，其特征在于，所述斜切口斜度为30～80°，生测管的斜切口长度为2-5mm，斜切口最宽处的宽度为1-5mm，生测管的容量为1-20mL；所述下盖呈圆锥型，下盖内面有与生测管前端斜切口斜度相同的斜面。

5.根据权利要求1所述的用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，其特征在于，生测管的开口端一侧连接有上盖，且上盖设有若干通气孔，通气孔直径大小与试验螨及昆虫虫体大小匹配；吸取内管的管头部外径与生测管的开口端外径一致，通过采用磨砂、卡扣、螺纹或塑胶密封方式紧密连接。

6.根据权利要求1所述的用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，其特征在于，生测管的开口端大小与移液枪相匹配；分流器上设置有2-6个分流管，与2-6个毒力测定部分连接。

7.根据权利要求1所述的用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，其特征在于，吸取内管的管体部为直线型，管体部的开口平面与吸取内管的管体中轴垂直，且吸取内管外径为生测管内径的1/3～1/15，管体部的开口位于生测管梭型的中间部。

8.根据权利要求1所述的用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，其特征在于，吸取内管长度为生测管长度的2/3～4/5。

9.根据权利要求1所述的用于微小生物的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置，其特征在于，生测管开口端内径与目前常用移液枪管嘴型号匹配，根据不同型号移液枪设计不同的生测管，满足不同试验要求，所述下盖不与生测管体连接，采用分离式；吸气部分、气流控制部分和毒力测定部分均以软管相连。

10.利用权利要求1的采集与测定一体化农药室内毒力测定装置进行室内毒力测定的方法，包括步骤如下：

1)药膜制作：根据试验虫体种类、大小和数量，选择生测管大小、生测管斜切口直径，将生测管开口端与相匹配的移液枪连接，吸取药液至生测管内，盖上下盖及上盖，横置旋转生测管，使管壁与药液充分接触，倒掉药液，打开上盖，放入通风橱中，使溶剂充分挥发后在管壁上形成一层均匀的药膜；

2)试虫采集：将1)中制作的带有药膜的生测管连接到吸取内管上，使吸取内管的管体部位于生测管内并密闭连接，打开吸气装置，调节气流计，使气流大小控制在0.4～5.0L/min；持装置毒力测定部分手持部，调整生测管体角度，使生测管的斜切口对准螨或昆虫的位置，将螨或昆虫吸入生测管内，操作完毕后，盖好下盖和上盖，并将生测管插入相应管架中。

3)试验结果观察及数据处理：按照试验设计的饲养条件、观察时间、死亡评判标准及试验有效性规则等进行结果观察及数据处理。