CN107998029B - 一种含角豆树叶提取物的漱口水的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种含角豆树叶提取物的漱口水的制备方法，涉及功能性口腔保健品——漱口水的生产技术领域。本发明通过采用绿色安全的乙醇提取工艺替代甲醇提取工艺，并将提取得到的角豆树叶乙醇提取物应用于漱口水的研制，开发出一种具有更强单增李斯特菌抑制效果的新型漱口水。本发明充分利用从角豆树叶中提取物作为漱口水的一个有效成分，与常规漱口水的生产原料配合，可使漱口水具有更强单增李斯特菌抑制效果，能有效抑制牙菌膜的滋长，防止牙周炎。

Description

一种含角豆树叶提取物的漱口水的制备方法

技术领域

该发明涉及一种功能性口腔保健品——漱口水的生产技术领域。

背景技术

食源性致病菌是引起食源性疾病的首要原因，食源性致病菌对人类健康带来严重危害，是食品安全的严重隐患。单核细胞增生性李斯特菌（简称单增李斯特菌，英文缩写LM）是常见的食源性致病菌。世界卫生组织WHO将其列为20世纪90年代四大食源性病原菌之一。20世纪80年代后，欧美国家李斯特菌食物中毒呈上升趋势，该菌除了可污染牛奶、肉制品等动物性食品外，尚可存在于蔬菜等植物性食品中，而且该菌可以在低温、酸性、高盐的环境中生长，人类受感染后可导致胃肠炎、败血症、脑膜炎、流产，对孕妇、婴儿、老年人及免疫力低下者如患有肿瘤、AIDS的人更容易引起感染。欧美国家曾多次发生该菌引起的食物中毒，死亡率达30 %以上。

随着社会进步，人们越来越注重自我形象，口腔卫生也是一方面，引起口臭的原因是口腔中含有大量的细菌，其中也包括致病性单增李斯特氏菌。单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中，不易被冻融，能耐受较高的渗透压，在土壤、地表水、污水、废水、植物、青储饲料、烂菜中均有该菌存在，所以人或动物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的途径进行传播。人们试图通过漱口水来杀灭口腔中的细菌，但是常用漱口水的生产原料是甘油、乙醇、色素、糖精、香精、表面活性剂、水、氯化锶和氟化钠，其灭菌功效极为有限，因而满足不了人们的需要。

近年来，研究者们通过在牙膏或漱口水中加入中药草本成分来达到预防细菌感染的目的，其中绿茶、桉树、芦荟提取物是应用较为广泛的抑菌成分，但这些天然成分的抑菌效果有待进一步的提高。随着人们对口腔卫生的重视，开发一种使用安全且抑菌（尤其是针对致病性单增李斯特氏菌）效果更强的牙膏或漱口水是一项非常有价值的研究。

植物提取物，在传统意义上被用作民间医药以及食品中的添加剂，这类提取物衍生出的功能源于大多数的次生代谢产物，如挥发性成分和多酚。这些化合物也被称为抗菌药物。角豆树（Ceratonia荚蛏）因其安全性和抑菌性具有替代这些抗菌药物的前景。长角豆（Ceratonia），产地在中海东部，常绿小乔木；叶为偶数羽状复叶，小叶2－3对，革质；花小，红色，两性或单性，组成单生或族生的总状花序生于老枝上；萼管陀螺状，裂片5，短，脱落；花瓣缺；雄蕊5；子房具短柄，有胚珠多数；荚果延长，扁平，不开裂；种子间充满肉瓤状物质，其荚瓤内含糖分和树脂，可食或为饲料，广州中山大学校园有栽培。已有研究显示角豆树叶甲醇提取物具有抑菌的效果，结果表明，角豆树叶的甲醇提取物具备抑制各种微生物生长的能力，尤其是对单核增生李斯特菌有强效抑制作用，并且角豆树叶的甲醇提取物抑制单核细胞增生李斯特氏菌的生长在28.12μg/mL。

发明内容

鉴于以上技术背景，本发明的目的是提供一种利用角豆树叶乙醇提取物的漱口水。

本发明包括以下步骤：

1）将粉碎的角豆树叶皮后浸泡于乙醇水溶液中，待形成桨状料后，采用乙醇回流法进行提取，得角豆树叶提取物；

2）将角豆树叶提取物、甘油、乙醇、色素、糖精、香精、氯化锶、氟化钠、表面活性剂和水混合均匀，以pH缓冲剂调整pH至6，得含角豆树叶提取物的漱口水。

本发明通过采用绿色安全的乙醇提取工艺替代甲醇提取工艺，并将提取得到的角豆树叶乙醇提取物应用于漱口水的研制，开发出一种具有更强单增李斯特菌抑制效果的新型漱口水。本发明充分利用从角豆树叶中提取物作为漱口水的一个有效成分，与常规漱口水的生产原料配合，可使漱口水具有更强单增李斯特菌抑制效果，能有效抑制牙菌膜的滋长，防止牙周炎。

本发明利用角豆树叶提取物制备出的漱口水，纯天然的草本植物精华，绿色工艺，其生物利用度高、安全可靠；具有清热消炎，镇痛的效果，对口腔常见的牙龈炎，牙周炎，牙龈出血有较好疗效；相比市面上销售的中草药成分的漱口水，抑菌效果更好，更适宜消费者使用。

进一步地，本发明所述角豆树叶提取物占漱口水总投量质量的10～50%。由于提取物中有效成分的含量不确定，而本发明采用以上占比形成的漱口水可保障产品对单增李斯特菌抑制效果。

为了能确保粉碎的角豆树叶皮能完全浸没于乙醇水溶液中，并为了提高提取的有效性，在步骤1）中，所述角豆树叶皮与乙醇水溶液的混合质量比为1:1～4。

用于浸泡的粉碎的角豆树叶皮的细度小于60目。这样才能有效的最大程度地提取出其中的角豆树叶提取物。

采用超声技术对角豆树叶进行处理，可利用超声波产生的强烈振动、强烈空化效应、搅拌作用等，使溶剂分子渗透进入组织细胞中，更好地与溶剂接触，使细胞中有效成分更好的释放出来。

运用回流提取技术提取角豆树叶中的有效成分，可提升角豆树叶提取物的提取工艺。

具体实施方式

一、角豆树叶有效成分的提取：

将角豆树叶皮粉碎机粉碎后过60目筛。

取过筛的角豆树叶皮粉末100g浸泡在200～400g浓度为70～75w%的乙醇水溶液中，经过18h～24 h后，加热料液采用乙醇回流法进行提取有效成分，蒸馏提取 3h～5h，回流提取2～3次，提取温度控制在70～85℃，真空浓缩，得到角豆树叶提取物。

角豆树叶提取物抑菌活性评价及结果：

1、菌种的活化：冷藏保存的LM，临用前挑取一环接种于装BHI液体培养基（10ml）试管中，37℃恒温培养18-24h，作为种子菌液备用。并将半放线杆菌接种于TSB液体培养基，唾液链球菌接种于MRS液体培养基恒温培养18-24h，同样作为种子菌液备用。

2、抑菌效果观察：将LM 0.1ml均匀涂在BHI固体平板上，自然干燥30～60min，再在无菌条件下将牛津杯（内径为6mm）均匀放置在平板上，稍微下压，使其与平板培养基接触面无空隙，然后吸取等量漱口水于杯中，37℃培养24～48h，测量抑菌圈直径。

每类漱口水做三个重复，结果取平均值。半放线杆菌和唾液链球菌实验步骤如上。

3、稳定性测试：

温度试验：将角豆树叶提取物分别用60℃、80℃、100℃、121℃热处理30min后，用牛津杯法测定其抑菌圈直径，以未进行热处理的角豆树叶提取物为对照。

取得的各抑菌圈直径对比表如下：

注：牛津杯外径为8.000mm，即不显示抑菌圈。

由上表可见：经80℃热处理30min后的角豆树叶提取物所产生的抑菌圈直径最大，抑菌效果最好。

pH试验：用1mol/L的HCl、NaOH分别将角豆树叶提取物的pH值调至2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、11.0，用牛津杯法测定其抑菌圈直径。以为调节pH的AECL为对照。

取得的各抑菌圈直径对比表如下：

由上表可见：经1mol/L的HCl将角豆树叶提取物的pH值调至6.0，所产生的抑菌圈直径最大，抑菌效果最好。

结论：

二、含角豆树叶提取物的漱口水的制备：

1、将甘油，乙醇，香精，糖精，色素，氯化锶，氟化钠，表面活性剂称量后混合均匀。

2、将角豆树叶提取物与纯净水混合并充分溶解成透明溶液。

3、将以上2种溶液混合均匀，加入pH缓冲剂调pH为6。

4、包装，检验合格后进入成品仓。

各原料称量的示例：

例1：取巴氏杀菌后的角豆树叶提取物40g、甘油8 g、乙醇5 g、香精0.3 g、糖精2g、色素0.2 g、氯化锶0.5g、氟化钠0.3 g、表面活性剂0.6 g，pH缓冲剂0.02g，再以精制水加至100g。

例2：取巴氏杀菌后的角豆树叶提取物20g、甘油8g、乙醇5g、色素0.05g、糖精0.05g、香精0.3g、氯化锶0.2g、氟化钠0.2g、表面活性剂0.4g，pH缓冲剂0.02g，再以精制水加至100g。

例3：取巴氏杀菌后的角豆树叶提取物30g、甘油9g、乙醇7g、色素0.1g、糖精0.1g、香精0.2g、氯化锶0.5g、氟化钠0.5g、表面活性剂0.4g，pH缓冲剂0.02g，再以精制水加至100g。

三、对比分析本发明漱口水与市售漱口水对单增李斯特菌（LM）的抑制效果：

在市面上随机购买商业型和药用型漱口水，采用牛津杯法对市售漱口水及本发明漱口水进行抑菌对比试验：

对比得出各类漱口水抑菌效果结果。

。

由上表可见：市面上所售漱口水对李斯特菌抑制效果不明显，但是本发明漱口水能够明显抑制口腔中的李斯特菌。

Claims (1)

1.一种含角豆树叶提取物的漱口水的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）将细度小于60目的粉碎的角豆树叶皮浸泡于浓度为70～75w%的乙醇水溶液中，所述粉碎的角豆树叶皮与乙醇水溶液的混合质量比为1:1～4，待形成桨状料后，采用乙醇回流法进行提取，得角豆树叶提取物；

2）将角 豆树叶提取物经巴氏杀菌后制备漱口水，所述巴氏杀菌的温度为60～65℃，处理时间为2～15min，将经巴氏杀菌后的角豆树叶提取物、甘油、乙醇、色素、糖精、香精、氯化锶、氟化钠、表面活性剂和水混合均匀，所述角豆树叶提取物占漱口水总投量质量的10～50%，以pH缓冲剂调整pH至6，得含角豆树叶提取物的漱口水。