CN107929282A - 银杏内酯组合物的医药用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了银杏内酯组合物在制备预防/治疗额颞叶失智症药物中的应用。通过实验证明银杏内酯组合物剂量依赖性抑制额颞叶失智症患者外周血淋巴细胞的活力，抑制淋巴细胞中TDP‑43蛋白的磷酸化，从而可通过抑制TDP‑3蛋白磷酸化促进活化的TDP‑43蛋白由胞浆到胞核移位，减少胞浆中TDP‑43蛋白的积累，以及通过降低淋巴细胞中CDK6蛋白的表达从而抑制细胞增殖。同时实验还证明银杏内酯组合物剂量依赖性抑制依他尼酸EA诱导损伤的人神经母细胞瘤细胞的增殖，抑制细胞中TDP‑43蛋白的磷酸化和降低细胞中CDK6蛋白的表达。因此，银杏内酯组合物具有制备成缓解额颞叶失智症药物的作用与应用价值。
Description
技术领域
本发明属于涉及医药技术领域，特别是涉及银杏内酯组合物在治疗/预防额颞叶失智症中的应用。
背景技术
额颞叶失智症(frontotemporal lobar degeneration，FTLD)是一种隐匿起病、进行性的神经退行性疾病，是仅次于阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)的第二大常见的早发型痴呆类型，临床上以进行性行为改变、额叶执行功能损害和(或)语言障碍为主要特点。FTLD分为三种主要的临床综合征：行为变异型FTLD、语义性痴呆和进行性非流利型失语。而依据脑中沉积的蛋白包涵体的主要成分进行划分，50％患者属于泛素阳性包涵体额颞叶变性(ubiquitin-positive，tau-，andα-synuclein-negativefrontotemporaldementia，FTLD-U now referred to as FTLD-TDP)，其蛋白包涵体中的主要病理蛋白是反式激活-反应性DNA结合蛋白-43(transactive response DNA-binding protein of 43kuTDP-43)。FTLD发病年龄相对较早，在60岁和70岁达到高峰，且进展较快，迄今无治疗FTLD的特异性药物，给患者家属及照料者增加了很多负担。
TDP-43是由TARDBP编码的高度保守的核蛋白，具有DNA/RNA结合能力的多功能蛋白，参与转录抑制、RNA剪接和应激反应过程中的RNA代谢。TDP-43是肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis，ALS)和泛素阳性包涵体额颞叶变性中细胞内泛素化包涵体的主要蛋白质。除了ALS和FTLD-TDP外，病理性TDP-43被发现还存在于其他多种神经退行性疾病中，包括路易体病、Guam-帕金森综合征、皮质基底节变性、AD、佩里综合征和海马硬化症(hippocampal sclerosis，HS)等，因此，目前认为TDP-43是神经退行性疾病的主要病理学标志蛋白。神经病理学和遗传学的证据表明，TDP-43是额颞叶变性病理中泛素化胞浆包涵体的主要蛋白，也是与生长因子颗粒蛋白前体(progranulin，GRN)基因突变有关的的神经病理学标志。生理状态下TDP-43主要定位于胞核，在FTLD病理情况下，TDP-43在Ser409/410位点被过度磷酸化，且由胞核移位至胞质。磷酸化的TDP-43蛋白可调节依赖细胞周期蛋白的激酶6(CDK-6)的表达，改变细胞周期，导致细胞的增殖活化，最终引起细胞损伤。同时，已有研究报道表明，激活的CDK-6通路可通过降低细胞中线粒体的通透性，抑制细胞色素C由线粒体到胞浆的释放以及降低凋亡执行蛋白的活性等途径抑制FTLD-TDP患者外周血淋巴细胞的凋亡从而刺激淋巴细胞的增殖活化。因此，FTLD-TDP患者外周血淋巴细胞模型成为深入研究FTLD疾病病理机制以及评价治疗FTLD的新型药物药效活性的简单且可靠的平台。有大量证据表明，活性氧(ROS)和氧化应激与许多神经退行性疾病包括ALS有关，且谷胱甘肽耗竭增强细胞的氧化应激谷胱甘肽耗竭诱导的氧化应激能够导致TDP-43C-末端在Ser403/404和409/410位点的磷酸化，C-末端片段，在NSC34细胞和原代皮层神经元胞浆中分布。有研究表明EA能够通过上述机制诱导TDP-43病理改变。
银杏叶提取物是目前国际上使用最为广泛的中药提取物之一，其中银杏内酯是银杏叶提取物及其制剂主要的药效活性成分，具有拮抗血小板活化聚集、降脂、抗炎、抗过敏、抗肿瘤、保护神经系统等广泛的药理作用。目前还未见银杏叶提取物能对额颞叶失智症具有治疗或预防作用的相关报道。
发明内容
本发明以在两种细胞模型上进行验证的方式对银杏内酯组合物进行研究，旨在得到一种具有治疗或预防额颞叶失智症的银杏内酯组合物。
由此，本发明提出了银杏内酯组合物在制备治疗或预防额颞叶失智症药物中的应用。
具体地，额颞叶失智症包括行为变异型额颞叶失智症、语义性痴呆和/或进行性非流利型失语等情形。
本发明还提出了一种银杏内酯组合物在改善p-TDP-43蛋白过表达引起的神经细胞退行性疾病药物中的应用。过表达是指，TDP-43在Ser409/410位点被过度磷酸化转移至胞浆中聚集造成细胞损伤。
具体地，该银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其中，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～40)：(50～75):(0.2～5)。
进一步地，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～35)：(50～70):(0.5～4)。更进一步地，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～30)：(50～65):(0.8～4)。
进一步地，上述额颞叶失智症药物或TDP-43蛋白活化引起的神经细胞退行性疾病药物中，银杏内酯组合物静脉滴注注射治疗有效量推荐为0.2-0.8mg/kg/d以上。需要注意的是，该治疗有效量作为推荐剂量并不对剂量范围产生严格限制。本领域人员能理解，实际给药的用量可能低于上述剂量范围。针对某一对象的治疗有效量和具体治疗方案可受诸多因素的影响，包括给药对象的年龄、体重、性别、饮食、给药时间、疾病易感性、疾病进程、医生的判断。此外，本发明所述银杏内酯组合物可用于相关疾病的单一用药或联合用药治疗。
具体地，银杏内酯组合物可以使用各种药学上可接受的辅料制备成口服给药剂型、注射给药剂型、外用给药制剂。
进一步地，银杏内酯组合物可以制备成胶囊剂、片剂、粉针剂、透皮剂等等。
本发明通过分离培养额颞叶失智症患者外周血淋巴细胞，给予银杏内酯组合物药物干预后发现银杏内酯组合物剂量依赖性抑制额颞叶失智症患者外周血淋巴细胞的增殖，抑制淋巴细胞中TDP-43蛋白的磷酸化，从而可促进活化的TDP-43蛋白由胞浆到胞核移位，减少胞浆中TDP-43蛋白的积累，以及降低淋巴细胞中CDK6蛋白的表达。同时实验还证明银杏内酯组合物剂量依赖性抑制依他尼酸(ethacrynic acid，EA)诱导损伤的人神经母细胞瘤细胞的增殖，抑制细胞中TDP-43蛋白的磷酸化和降低细胞中CDK6蛋白的表达。因此，由对于非神经细胞的细胞模型和神经细胞的细胞模型的药效均证实银杏内酯组合物具有治疗额颞叶失智症的作用。
具体实施方式
以下通过具体实施方式对本发明进行更加详细的说明，以便能够更好地理解本发明的方案及其各个方面的优点。然而，以下描述的具体实施方式的内容仅是说明的目的，而不是对本发明的限制。
需要注意的是，如未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行，所用原料药或辅料，以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例或份数按重量计。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用与本发明。
银杏内酯组合物对额颞叶失智症患者外周血淋巴细胞中TDP-43活性的抑制作用
1、实验材料
1.1药物及试剂
原料银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)、银杏内酯K(GK)以及银杏内酯组合物1-4由江苏康缘药业股份有限公司自制，具体如下；
人外周血淋巴细胞分离液试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；细胞培养所需试剂均购自Invitrogen公司；CCK-8试剂盒购自日本同仁公司；抗人TDP-43抗体、抗TDP-43磷酸化(Ser409/410)抗体购自Proteintech公司；抗CDK-6抗体、抗β-actin抗体；HRP标记的羊抗兔的二抗购自CST公司；BCA蛋白定量试剂盒购自北京普利莱基因有限公司；其余试剂均购自于Sigma公司，未经特别提出纯度均为分析级。
1.2主要耗材与仪器
CO2细胞培养箱购自美国Thermo公司；
微孔板检测系统Flex Station3购自美国MD公司；
ChemiDoc XRS系统购自美国Bio-Rad公司。
2、实验方法
2.1人外周血淋巴细胞的分离与培养
选取无额颞叶失智症表征为Control对照组志愿者，确诊为额颞叶失智症作为模型对照即FTLD-TDP组志愿者。均采取书面通知后征得患者或其家属的同意后进行静脉取血(200ml，连云港市第一人民医院提供)。采用密度梯度离心法提取人外周血淋巴细胞，具体方法为：将采到的肝素抗凝血取样计数白细胞总数。使用Hank’s液将血样1：1稀释，混匀时要沿管壁吹出，避免产生气泡吹匀后于37℃水浴中平衡。从冰箱中取出4℃避光保存的淋巴细胞分离液。摇匀后在无菌状态下加入刻度离心管中。操作中尽量避免吸管碰触管壁。原则上分离液的高度不超过管高的1/4。将盛有分离液的离心管放入37℃水浴中平衡。随后用吸管将稀释的血液沿离心管壁徐徐加到分离液面上，用力要轻，避免血液冲入分离液中，使得稀释血重叠在分离液面以上，拧紧管盖。稀释血与分离液的高度比在1：2-2：1之间。原则上两者的总高度不超过离心管的2/3。然后将离心管放置于水平离心机中，室温下2000rpm离心20min。离心过程中要观察离心速度是否正确，且在停止时选择“no break”，避免因为急剧减速将已经分离的单个核细胞层重新弄混。注意离心结束时的减速过程，不要太快。离心结束后可见管内分为四层，从上至下分别为：血浆层(含部分血小板)、白膜层(含单个核细胞及少量血小板)、分离液层、粒细胞及红细胞层。将吸管轻轻穿过血浆层至白膜层，沿离心管周缘吸出血浆层与分离液层界面间的白膜层细胞，置于新离心管中。尽量少吸取分离液。然后加吸出体积5倍以上的Hank’s液体，用吸管吹打均匀，避免产生气泡，液柱高度不要超过离心管的2/3。室温1500rpm离心10min，快速倾倒出上清液。然后用Hank’s重悬细胞，注意吹打均匀，不要有细胞团块。室温下1500rpm离心5min，洗涤两次。最后一次洗涤时定量加入RPMI 1640，吹打均匀后取样计数细胞。最后一次离心完毕倾倒出上清液后轻轻晃动离心管，将管底细胞摇匀。根据上一步的计数结果，用含10％FBS、青链霉素的RPMI 1640培养液将细胞配成所需浓度，将分离培养的外周血淋巴细胞进行EBV转染，制备成永生化细胞株。
2.2细胞活力测定实验
将control组外周血制备的永生化的淋巴细胞和FTLD-TDP组外周血制备的永生化的淋巴细胞株传代后接种于96孔细胞板中，细胞密度为1×106/mL，100uL/孔，待生长至对数生长期后，并分为FTLD-TDP对照组细胞和FTLD-TDP+银杏内酯组合物1、2、3、4低、中、高(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL)组。FTLD-TDP+银杏内酯组合物各剂量组分别进行药物干预，药物作用72h后，向各孔中加入10uL的CCK-8溶液，37℃下孵育1-4小时，应用微孔板检测系统Flex Station 3测定细胞各孔450nm处的OD值，以control组培养孔的细胞活力计100％，计算其他各组细胞活力百分比。
2.3Western blot检测TDP-43蛋白磷酸化和CDK-6蛋白水平的实验
将control组外周血制备的永生化的淋巴细胞和FTLD-TDP组外周血制备的永生化的淋巴细胞株传代后接种于细胞培养皿中，细胞密度为1×106/mL。待生长至对数生长期后，并分为FTLD-TDP对照组细胞和FTLD-TDP+银杏内酯组合物1、2、3、4低、中、高(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL)组。FTLD-TDP+银杏内酯组合物各剂量组分别进行药物干预，药物作用72h，用全蛋白提取试剂盒/细胞浆与细胞核蛋白提取试剂盒提取蛋白，应用BCA法测定样品蛋白浓度。
经SDS-PAGE电泳后，电转蛋白至PVDF膜，封闭，分别加入稀释的抗人的TDP-43抗体(1:1000,Proteintech公司)、p-TDP-43(Ser409/410)抗体(1:1000,Proteintech公司)、CDK-6抗体(1:1000,SantaCruz公司)、β-actin抗体(1:2000,Santa Cruz公司)，4℃孵育过夜，TBST洗涤3次，加入HRP标记的羊抗兔二抗(1：3000,CST公司)溶液室温孵育2h后洗涤膜，ECL法显影，应用ChemiDoc XRS系统拍照，采用Gel-Pro analyzer4图像分析软件进行显影条带灰度值分析。
2.4数据处理
实验结果以Mean±SD.表示，所有数据用SPSS 17.0软件进行分析。采用方差分析统计，p﹤0.05有统计学差异。
3实验结果
3.1银杏内酯组合物抑制FTLD患者外周血淋巴细胞的增殖
应用CCK-8试剂盒测定银杏内酯组合物干预后FTLD患者和control组外周血淋巴细胞的细胞活力，结果显示相比较control组，FTLD-TDP组细胞活力极显著增加，同时给药组给予4种银杏内酯组合物干预后，各银杏内酯组合物均剂量依赖性的显著抑制FTLD患者外周血淋巴细胞的增殖(见表1)，因而能够调整过度活化的淋巴细胞的细胞周期。
表1银杏内酯组合物对淋巴细胞增殖的抑制
###p＜0.001vs Control组；*p＜0.05vs FTLD-TDP组；**p＜0.01vs FTLD-TDP组；***p＜0.001vs FTLD-TDP组。
3.2银杏内酯组合物抑制FTLD患者外周血淋巴细胞中TDP-43蛋白磷酸化
应用Western blot检测银杏内酯组合物干预后FTLD患者和control组外周血淋巴细胞中TDP-43总蛋白和磷酸化蛋白水平，结果显示，相比较control组，FTLD-TDP组淋巴细胞中磷酸化TDP-43蛋白极显著增加，同时给药组给予4种银杏内酯组合物干预后，各银杏内酯组合物均剂量依赖性的显著降低磷酸化TDP-43蛋白的水平(见表2)。结果表明银杏内酯组合物可显著抑制额颞叶变性病理中泛素化胞浆包涵体的主要疾病蛋白TDP-43的过度磷酸化，抑制TDP-43蛋白的活性，治疗额颞叶失智症。
表2银杏内酯组合物对TDP-43蛋白磷酸化的抑制
###p＜0.001vs Control组；*p＜0.05vs FTLD-TDP组；**p＜0.01vs FTLD-TDP组；***p＜0.001vs FTLD-TDP组
3.3银杏内酯组合物抑制FTLD患者外周血淋巴细胞中CDK-6蛋白表达
应用Western blot检测FTLD患者和control组外周血淋巴细胞中CDK-6总蛋白水平，结果显示，相比较control组，FTLD-TDP组淋巴细胞中CDK-6总蛋白极显著增加，同时给药组给予4种银杏内酯组合物干预后，各银杏内酯组合物均剂量依赖性的显著降低CDK-6总蛋白水平(见表3)。结果表明银杏内酯组合物可显著抑制额颞叶变性中CDK-6蛋白的表达，从而抑制CDK-6蛋白依赖性的淋巴细胞增殖抑制细胞变性损伤。
表3银杏内酯组合物对CDK-6蛋白表达的抑制
###p＜0.001vs Control组；*p＜0.05vs FTLD-TDP组；**p＜0.01vs FTLD-TDP组；***p＜0.001vs FTLD-TDP组
银杏内酯组合物对EA造模的人神经母细胞瘤细胞TDP-43活性的抑制作用
1、实验材料
1.1药物及试剂
原料银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)、银杏内酯K(GK)以及银杏内酯组合物1-4由江苏康缘药业股份有限公司自制，具体如下；
细胞培养基、胎牛血清、双抗等细胞培养所需试剂均购自Invitrogen公司；CCK-8试剂盒购自日本同仁公司；抗人TDP-43抗体、抗TDP-43磷酸化(Ser409/410)抗体购自Proteintech公司；抗CDK-6抗体、抗β-actin抗体抗体购自Santa Cruz公司；BCA蛋白定量试剂盒购自北京普利莱基因有限公司；EA和其余试剂均购自于Sigma公司，未经特别提出纯度均为分析级。
1.2细胞株
人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)购自上海细胞库。
1.3主要耗材与仪器
CO2细胞培养箱购自美国Thermo公司；
微孔板检测系统Flex Station 3购自美国MD公司；
ChemiDoc XRS系统购自美国Bio-Rad公司；
2、实验方法
2.1SH-SY5Y细胞株的培养和EA造模
SH-SY5Y细胞(购自上海细胞库)培养于RPMI 1640培养基(含体积分数10％胎牛血清，100kU·L-1青霉素，100mg·L-1链霉素)(细胞培养所需试剂均购自Invitrogen公司)中，置于37℃，含5％CO2的细胞培养箱中培养，选取对数生长期细胞进行实验。对数生长期的SH-SY5Y细胞培养基中添加终浓度为20uM的EA进行造模，同时设置正常培养细胞为control组，给药组给予一定浓度的银杏内酯组合物与EA共培养12h后进行相应指标的测定。
2.2细胞活力测定实验
将对数生长期的SH-SY5Y细胞培养基中添加终浓度为20uM的EA进行造模，并分为EA对照组细胞和EA+银杏内酯组合物1、2、3、4低、中、高(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL)组，同时设置正常培养细胞为control组，给药组进行EA损伤的同时给予4种银杏内酯组合物进行药物干预。EA与药物共培养12h后，向各孔中加入10uL的CCK-8溶液，37℃下孵育1-4小时，应用微孔板检测系统Flex Station3测定细胞各孔450nm处的OD值，以对照组的培养孔的细胞活力计100％计算其他各组细胞活力百分比。
2.3Western blot检测TDP-43蛋白和CDK-6蛋白水平的实验
将SH-SY5Y细胞株传代后接种于细胞培养皿中，细胞密度为1×106/mL。待生长至对数生长期后，在细胞培养基中添加终浓度为20uM的EA进行造模，并分为EA对照组细胞和EA+银杏内酯组合物1、2、3、4低、中、高(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL)组，同时设置正常培养细胞为control组，给药组进行EA损伤的同时给予4种银杏内酯组合物进行药物干预。EA与药物共培养12h后应用全蛋白提取试剂盒提取细胞蛋白，应用BCA法测定样品蛋白浓度。
经SDS-PAGE电泳后，电转蛋白至PVDF膜，封闭，分别加入稀释的抗人的TDP-43抗体(1:1000,Proteintech公司)、p-TDP-43(Ser409/410)抗体(1:1000,Proteintech公司)、CDK-6抗体(1:1000,SantaCruz公司)、β-actin抗体(1:2000,Santa Cruz公司)，4℃孵育过夜，TBST洗涤3次，加入HRP标记的羊抗兔二抗(1：3000,CST公司)溶液室温孵育2h后洗涤膜，ECL法显影，应用ChemiDoc XRS系统拍照，采用Gel-Pro analyzer4图像分析软件进行显影条带灰度值分析。
2.4数据处理
实验结果以Mean±SD.表示，所有数据用SPSS 17.0软件进行分析。采用方差分析统计，p﹤0.05有统计学差异。
3实验结果
3.1银杏内酯组合物保护EA造模损伤的人神经母细胞瘤细胞活力
应用CCK-8试剂盒测定EA造模损伤和给予不同浓度的银杏内酯组合物干预12h的细胞活力，结果显示相比较control组，EA造模后SH-SY5Y细胞活力极显著下降，同时给药组给予4种银杏内酯组合物干预后，各银杏内酯组合物均剂量依赖性的显著升高细胞活力，抑制细胞损伤，保护神经细胞(见表4)。
表4银杏内酯组合物对EA造模后SH-SY5Y细胞活力的提高
###p＜0.001vs Control组；*p＜0.05vs EA组；**p＜0.01vs EA组；***p＜0.001vsEA组。
3.2银杏内酯组合物抑制EA造模损伤的人神经母细胞瘤细胞TDP-43活性
应用Western blot检测EA造模损伤和给予不同浓度的银杏内酯物干预12h后SH-SY5Y细胞中TDP-43总蛋白和磷酸化蛋白水平，结果显示，相比较control组，EA造模后细胞中磷酸化TDP-43蛋白极显著增加，同时给药组给予4种银杏内酯组合物干预后，各银杏内酯组合物均剂量依赖性的显著降低磷酸化TDP-43蛋白的水平，减少TDP-43蛋白的过度磷酸化，抑制TDP-43蛋白的活性(见表5)。
表5银杏内酯组合物对TDP-43蛋白磷酸化的抑制
###p＜0.001vs Control组；*p＜0.05vs EA组；**p＜0.01vs EA组；***p＜0.001vsEA组。
3.3银杏内酯组合物抑制EA造模损伤的人神经母细胞瘤细胞CDK-6蛋白表达
应用Western blot检测EA造模损伤和给予不同浓度的银杏内酯物干预12h后SH-SY5Y细胞中CDK-6蛋白水平，结果显示，相比较control组，EA造模后细胞中CDK-6蛋白极显著增加，同时给药组给予4种银杏内酯组合物干预后，各银杏内酯组合物均剂量依赖性的显著降低CDK-6蛋白的水平(见图表6)。结果表明银杏内酯组合物可通过抑制CDK-6蛋白水平调整细胞周期，同时抑制TDP-43的过度磷酸化治疗额颞叶变性。
表6银杏内酯组合物对CDK-6蛋白表达的抑制
###p＜0.001vs Control组；*p＜0.05vs EA组；**p＜0.01vs EA组；***p＜0.001vsEA组。
本发明的上述实施方式仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种银杏内酯组合物在制备治疗或预防额颞叶失智症药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～40)：(50～75):(0.2～5)。
3.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～35)：(50～70):(0.5～4)。
4.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～30)：(50～65):(0.8～4)。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于，所述额颞叶失智症包括行为变异型额颞叶失智症、语义性痴呆和/或进行性非流利型失语。
6.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于，所述额颞叶失智症药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
7.一种银杏内酯组合物在制备治疗或预防基于p-TDP-43蛋白过表达诱发的神经细胞退行性疾病药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～40)：(50～75):(0.2～5)。
9.根据权利要求7所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～35)：(50～70):(0.5～4)。
10.根据权利要求7-9任一所述的应用，其特征在于，所述p-TDP-43蛋白过表达引起的神经细胞退行性疾病药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
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Citations (5)
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|---|---|---|---|---|
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Patent Citations (5)
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|---|---|---|---|---|
| CN1424031A (zh) * | 2002-08-23 | 2003-06-18 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 含有银杏内酯的制剂及其制备工艺 |
| CN101396355A (zh) * | 2007-09-26 | 2009-04-01 | 北京鑫利恒医药科技发展有限公司 | 银杏内酯b在制备促进神经细胞再生的药物中的应用 |
| CN101732713A (zh) * | 2008-11-10 | 2010-06-16 | 毛力真 | 抗nogo-a抗体和银杏叶提取物治疗脑中风 |
| CN103599098A (zh) * | 2013-11-15 | 2014-02-26 | 山西省中医药研究院 | 姜黄素与银杏内酯b配伍组合物及其应用 |
| WO2016114655A1 (en) * | 2015-01-12 | 2016-07-21 | Ry Pharma B.V. | Treating neuromuscular or neurologic disease through reducing gabaergic and/or glycinergic inhibitory neurotransmitter overstimulation |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114828897A (zh) * | 2019-10-21 | 2022-07-29 | 麦考瑞大学 | 细胞活力的调节 |
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