CN107908924A - 一种评价酒类饮后兴奋程度的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于酿造技术领域，公开了一种简单有效的评价酒类饮后兴奋程度的方法及应用。针对现有方法依靠人工对实验数据的检测和收集评价酒醉度且尚不能评价兴奋程度的现状，本方法通过用动物精细行为学分析设备，同步记录和实时分析灌胃一定特定剂量的不同或相同酒精度的蒸馏酒、发酵酒或配制酒的小鼠在饮酒前和饮酒后30min和150min时的运动一分钟运动轨迹和行为参数，通过对行为参数行动距离、平均速度、移动时间、停滞时间、移动频度和停滞频度同步实时分析，结合小鼠血液乙醇浓度，对酒类样与酒类精对照的行为参数比、行为兴奋指数、酒类样的相对致兴奋程度指数，能简单有效科学的评价不同酒类的饮后行为兴奋程度及酒样本身的行为致兴奋程度。该方法可以应用于评价酒样饮后感觉，或用于评价酒样品质，用于蒸馏酒、发酵酒和配制酒生产过程的酒体设计和工艺优化。

Description

一种评价酒类饮后兴奋程度的方法
技术领域
本发明属于酿造技术领域，特别涉及一种评价酒类饮后兴奋程度的方法及应用。
背景技术
酒类是一种利用粮食、水果等含淀粉或糖的植物发酵制成的含乙醇的饮料。随着酿酒工艺近千年发展，酒的类型丰富多样，除了所含主要成分乙醇和水，还有其他多种微量成分。酒内的这些微量成分和主要成分相互辅助、相互作用，在一定程度上影响乙醇在人体的积累程度和代谢速度，影响人体饮酒后的舒适感受程度。在饮用某个特定剂量及一定时刻后，一些饮后舒适感较好的酒类会使人感觉兴奋、愉悦和运动能力提高，但是某些饮后舒适感较差的会使人感觉迟钝、呆滞和运动技能下降。消费和生产饮后舒适感较好的酒类长期以来一直是消费者和酒类饮料生产企业关注和追求的重点。酒类饮料生产企业需要通过消费者调查指导产品改进，需要在充分了解消费者饮后感受的基础上，进行酒样设计，开发出符合消费者需求的酒类饮料。目前，尽管有一些公开发表的研究方法可以检测酒的醉度，但是这些方法仍然依靠于人工对实验数据的检测和收集，受外界因素干扰较大，且耗时长，操作过程繁琐，成本较高，不利于企业进行酒样设计和评价饮后的感受。因此，发明一种更为简单有效的评价酒类饮后兴奋程度方法用于检测酒类的饮后感受，是非常迎合酿造技术领域需求的。
发明内容
本发明首要目的在于克服现有技术的缺点和不足，提供一种简单有效的评价酒类饮后兴奋程度方法用于评价不同酒类的饮后行为兴奋程度及酒样本身的行为致兴奋程度，或用于评价酒样饮后感觉，或用于评价酒样品质。
本发明的另一个目的在于提供所述评价酒类饮后兴奋程度的方法及应用。
本发明的目的通过以下技术方案实现：一种简单有效的评价酒类饮后兴奋程度的方法，包括如下步骤：
（1）用精馏和活性炭方法去除原酒中所有微量成分，只保留乙醇和水的俄罗斯伏特加与超纯水配制成各种酒精度的酒精标准溶液，分别按照所测定酒精度的酒样所对应的一定灌酒酒量给检测组和对照组每只小鼠灌酒；
（2）用小鼠为酒类样检测组和酒精标准溶液对照组，每个组10只，正常饲喂一周后开始实验，分别用待测酒样和酒精标准溶液按照所测定酒精度的酒样所对应的一定灌酒酒量给每只小鼠灌酒；
（3）根据世界卫生组织规定，成年男性（体重60-70kg）标准适量饮酒剂量为每天 12-15g 乙醇，相当 30-37.5mL 酒精度为40% vol 的酒类， 最大摄入酒精剂量不超过 30g 乙醇。因此，每只小鼠灌酒酒量按照人体标准饮酒量并依据小鼠单位体重与人体单位体重的药剂等效剂量比值（约为9倍）进行折算。以酒精度为42% vol 的酒类为例，小鼠（体重0.15-0.20kg）灌酒酒量为0.15-0.20mL/只。对于酒精度大于14%vol的酒类，小鼠灌酒酒量依据上述酒精度、体重与灌酒酒量进行折算；对于酒精度小于14%vol的酒类，小鼠灌酒酒量最大值为0.35mL/只，并依据酒精度和上述灌酒酒量进行折算；
（4）将小鼠依次在灌酒后t时刻置于一个局限的无可回避的压迫环境中例如旷场或泳池，采用高频摄像机和行为学分析软件实时录制与同步分析小鼠在t时刻时运动1分钟的行为轨迹；t时刻设为3个，分别是灌酒前、灌酒后30min和150min，分别定义为t0、t1和t2；
对小鼠行为参数进行测定和同步分析，这些行为参数分别为：
①行动距离At，1分钟内从记录起点到终点的运动路程，m；
②平均速度Bt，在1分钟内完成行动距离At过程中，单位时刻内通过的路程，m/s；
③移动时刻Ct，在1分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的移动时刻，s；
④停滞时刻Dt，在1分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的停滞时刻，s；
⑤移动频度Et，在1分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的移动次数，n/min；
⑥停滞频度Ft，在1分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的停滞次数，n/min；
（5）测定灌酒后t时刻的小鼠血液乙醇浓度Yt，mg/L；
（6）对步骤（4）得到的数据进行以下处理：
Ⅰ、行为参数比：
用于评价和判定小鼠行为受到酒样代谢影响后表现为兴奋，指标分别为：
①移动距离比X1t，灌酒后t时刻时1分钟内移动距离At/灌酒前1分钟移动距离A0；
②平均速度比X2t，灌酒后t时刻1分钟内平均速度Bt/灌酒前1分钟内平均速度B0；
③移动时刻比X3t，灌酒后t时刻1分钟内移动时刻Ct/灌酒前1分钟内移动时刻C0；
④停滞时刻比X4t，灌酒后t时刻1分钟内停滞时刻Dt/灌酒前1分钟内停滞时刻D0；
⑤移动频度比X5t，灌酒后t时刻1分钟内移动频度Et/灌酒前1分钟内移动频度E0；
⑥停滞频度比X6t，灌酒后t时刻1分钟内停滞频度Ft/灌酒前1分钟内停滞频度F0；
其中，若当所述行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t同时满足以下条件时：X1t≥1、X2t≥1、X3t≥1、X4t≥1、X5t≤1、X6t≤1，判定酒样对小鼠行为的影响表现为使其兴奋显著；若当所述行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t不同时满足以上条件时或仅满足上述一项条件时，判定酒样对小鼠行为的影响表现为兴奋不显著；
Ⅱ、行为兴奋指数St：
用于评价小鼠的兴奋行为的程度，小鼠行为兴奋指数：St=1-(a*X1t +b*X2t+c*X3t+d*X4t+e*X5t+f*X6t)；
其中，a=移动距离权重，b=平均速度权重，c=移动时刻权重，d=移动频度权重，e=停滞时刻权重，f=停滞频度权重；a+b+c+d+e+f=1，0≤St≤1；
St=0时，为灌酒酒样前，小鼠的行为兴奋程度正常，即X1t =X2t=X3t=X4t=X5t=X6t=1；
St=1时，为灌酒酒样后，小鼠的行为兴奋程度异常，表现为完全醉，行为停滞不动，即X1t =X2t=X3t=X4t=X5t=X6t=0；
以小鼠血液乙醇浓度Yt为横坐标，分别以行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t为纵坐标，做图，进行线性回归分析,得到回归直线方程，得到a、b、c、d、e、f的值，进而计算出St的值；
Ⅲ、酒类样的相对致兴奋程度指数Mt：
用来评价某个特定酒精度的酒类时，在饮后30min(t1)和饮后150min(t2)，酒类样对兴奋行为的影响程度；Mt=灌酒酒类样后小鼠行为兴奋指数Stw/灌酒酒类精标准溶液后小鼠行为兴奋指数Sts；
其中，灌酒酒样和灌酒酒精标准溶液的所用剂量是步骤（3）中选定的一个灌酒酒量，酒精标准溶液是步骤（1）中所述的俄罗斯伏特加配制的某个特定酒精度的标准溶液；
酒样的相对致兴奋程度指数Mt是相对某个特定酒精度、且在饮后的特定时刻而言的，不同酒精度酒类样的相对致兴奋程度指数Mt不同：
其中，若酒类样K1的饮后30min(t1) 相对致兴奋程度指数M1t1、酒类样K2的饮后30min(t1) 相对致兴奋程度指数M2t1、酒类样K1的饮后150min(t2) 相对致兴奋程度指数M1t2、酒类样K2的饮后150min(t2)相对致兴奋程度指数M2t2同时满足：①M1t1＞M2t1、②M1t1＜M2t1≤1、③M1t1接近于零时，则认为酒类样K1比酒类样K2较易引起相对兴奋，具有适度饮用、适度兴奋、低停滞度和代谢转化快的特点；
步骤（2）所述的酒样类型为蒸馏酒、发酵酒和配制酒，不限于相同类型或相同品牌；所述酒精度不限于相同酒精度；
步骤（2）所述小鼠为清洁（CL）级小鼠和无特定病原体动物（SPF）级小鼠，优选为SPF级小鼠，小鼠规格优选为C57/BL6，雄性，体重 18-20g，鼠龄 4-6 周；
步骤（5）所述的乙醇浓度优选通过气相色谱法测定，其具体测定步骤优选如下：
（A）血液预处理：先后将灌酒后t时刻的 30min（t1）和 150min（t2）后的小鼠尾部取血与断头取血，各取 0.5mL血液，放入提前加入 50 μL 肝素钠（180 u/mg）溶液抗凝的试管内，用超纯水稀释至 1mL，混匀后冰冻保存；
（B）色谱条件：PE Aoutosystem XL 型气相色谱仪，PE TurboMatrix 40 自动顶空进样器。色谱柱: Agilent J&W-GC 型 30 m×0. 53mm×1.00 m 硅烷化玻璃柱。温度：检测器250℃，进样口 240℃，柱温起 40℃，以 10℃/min 升到 60℃，保持 0 min，再以 20℃/min升到 120℃，保持 0 min，再以 40℃/min 升到 215℃，顶空 55℃，加热时刻 40 min，载气N2、H2和空气的流速分别为30 mL/min、 45 mL/min、 450 mL/min， FID 耦合火焰离子化检测器，进样量: 1μL，时间9.38 min。
（C）标准曲线：使用分析乙醇配制浓度为120mg/100mL、60mg/100mL、30mg/mL、15mg/mL、7.5mg/mL的标准溶液，按照步骤（B）气相色谱条件制作测定血液乙醇的出峰时刻，为 3.39 min/L；
（D）血液乙醇浓度测定，将按照步骤（A）预处理好的样品，按照步骤（B）气象色谱条件分析，将得到的数据和步骤（C）比对，得到血液乙醇浓度；
本发明相对于现有技术具有以下特点：本发明所述的方法评价酒类饮后兴奋程度的方法特别适合在蒸馏酒、发酵酒和配制酒制备过程的工艺优化中进行应用，可以只用于一个动物精细行为学分析设备，例如旷场或泳池，采用高频摄像机和行为学分析软件实时录制与同步分析小鼠的饮后行为轨迹和行为参数，简单准确的评价不同酒类的小鼠饮后行为兴奋程度及酒样本身的行为致兴奋程度，有助于科学的评价酒样饮后感觉，有助于判断酒样中微量成分与乙醇的互作机制对机体行为的影响，有助于酒类企业提高酒样品质，有助于开发适度饮用、适度兴奋、低停滞度和代谢转化快的酒类产品。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式做进一步详细描述，但本发明的实施方式不限于此。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同与在此描述的其他方式来实施，本领域技术人员可以在不违背发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下列公开具体实施例的限制。
实施例1
一种简单有效的评价酒类饮后兴奋程度的方法，包括以下步骤：
1、评价酒样与标样的准备：
用精馏和活性炭方法去除原酒中所有微量成分，只保留乙醇和水的酒类俄罗斯伏特加与超纯水配制成各种酒精度（7.5%vol-70%vol）的酒精标准溶液，用于在不同剂量对小鼠灌酒时进行选择合适的浓度。选用2种不同品牌的酒精度为52 % vol的市售白酒进行评价；
2、检测饮后兴奋反应对象的选定：
C57BL/6小鼠，清洁Ⅱ级，雄性，平均体重 18-20g，鼠龄 4-6周。由北京维通利华公司实验动物有限公司提供。喂养环境为国家规定普通研究及试验环境，正常饲喂一周后开始实验。设为52 % vol白酒K1检测组、52 % vol白酒K2检测组、52 % vol酒类精对照组共3个实验组，每个组10只；
3、灌酒酒量的设定：
2种不同品牌酒精度为52%vol的白酒：0.07mL/只；
3、饮后兴奋程度的测定：
将每组小鼠依次在灌酒前（t0），灌酒后30min（t1）和灌酒后150min（t2）这3个时刻置于动物精细行为学分析装置旷场中（直径100cm的白底透明壁的圆柱形设备）中，采用高频摄像机和行为学分析软件Any-maze（美国Stoelting公司）分别实时录制与同步分析小鼠在上述3个时刻时小鼠自由运动1分钟的行为轨迹；
Any-maze软件在完成每组小鼠的所有时刻的行为学轨迹录制后，同步自动分析获得以下行为参数：
①行动距离At，1分钟内从记录起点到终点的运动路程，m；
②平均速度Bt，在1分钟内完成行动距离At过程中，单位时刻内通过的路程，m/s；
③移动时刻Ct，在1分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的移动时刻，s；
④停滞时刻Dt，在1分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的停滞时刻，s；
⑤移动频度Et，在1分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的移动次数，n/min；
⑥停滞频度Ft，在1分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的停滞次数，n/min；
根据获得的灌酒前和灌酒后的以上行为学参数，分析计算得到以下行为学参数：
Ⅰ、行为参数比：
用于评价和判定小鼠行为受到酒样代谢影响后表现为兴奋，这些判定指标分别为：
①移动距离比X1t，灌酒后t时刻1分钟内移动距离At/灌酒前1分钟移动距离A0；
②平均速度比X2t，灌酒后t时刻1分钟内平均速度Bt/灌酒前1分钟内平均速度B0；
③移动时刻比X3t，灌酒后t时刻1分钟内移动时刻Ct/灌酒前1分钟内移动时刻C0；
④停滞时刻比X4t，灌酒后t时刻1分钟内停滞时刻Dt/灌酒前1分钟内停滞时刻D0；
⑤移动频度比X5t，灌酒后t时刻1分钟内移动频度Et/灌酒前1分钟内移动频度E0；
⑥停滞频度比X6t，灌酒后t时刻1分钟内停滞频度Ft/灌酒前1分钟内停滞频度F0；
其中，t时刻取值灌酒前（t0）、灌酒后30min（t1）和灌酒后150min（t2）；
其中，若当所述行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t同时满足以下条件时：X1t≥1、X2t≥1、X3t≥1、X4t≥1、X5t≤1、X6t≤1，判定酒样对小鼠行为的影响表现为使其兴奋显著；若当所述行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t不同时满足以上条件时或仅满足上述一项条件时，判定酒样对小鼠行为的影响表现为兴奋不显著；
Ⅱ、血液乙醇浓度：
用气相色谱法测定灌酒后t时刻的小鼠血液乙醇浓度Yt，单位mg/L；其中，t时刻取值灌酒后30min（t1）和灌酒后150min（t2）；
（A）血液预处理：先后将灌酒后t时刻的 30min（t1）和 150min（t2）后的小鼠尾部取血与断头取血，各取 0.5mL血液，放入提前加入 50 μL 肝素钠（180 u/mg）溶液抗凝的试管内，用超纯水稀释至 1mL，混匀后冰冻保存；
（B）色谱条件：PE Aoutosystem XL 型气相色谱仪，PE TurboMatrix 40 自动顶空进样器。色谱柱: Agilent J&W-GC 型 30 m×0. 53mm×1.00 m 硅烷化玻璃柱。温度：检测器250℃，进样口 240℃，柱温起 40℃，以 10℃/min 升到 60℃，保持 0 min，再以 20℃/min升到 120℃，保持 0 min，再以 40℃/min 升到 215℃，顶空 55℃，加热时刻 40 min，载气N2、H2和空气的流速分别为30 mL/min、45 mL/min、450 mL/min，FID 耦合火焰离子化检测器，进样量: 1μL，时间9.38 min。
（C）标准曲线：使用分析乙醇配制浓度为120mg/100mL、60mg/100mL、30mg/mL、15mg/mL、7.5mg/mL的标准溶液，按照步骤（B）气相色谱条件制作测定血液乙醇的出峰时刻，为 3.39 min/L；
（D）血液乙醇浓度测定，将按照步骤（A）预处理好的样品，按照步骤（B）气象色谱条件分析，将得到的数据和步骤（C）比对，得到血液乙醇浓度；
Ⅲ、行为兴奋指数：
根据行为参数比，设定行为兴奋指数，用于评价小鼠的兴奋行为的程度，小鼠行为兴奋指数：St=1-（a*X1t +b*X2t+c*X3t+d*X4t+e*X5t+f*X6t）；
其中，a=移动距离权重，b=平均速度权重，c=移动时刻权重，d=移动频度权重，e=停滞时刻权重，f=停滞频度权重；a+b+c+d+e+f=1， 0≤St≤1；
St=0时，为灌酒酒样前，小鼠的行为兴奋程度正常，即X1t =X2t=X3t=X4t=X5t=X6t=1；
St=1时，为灌酒酒样后，小鼠的行为兴奋程度异常，表现为完全醉，行为停滞不动，即X1t=X2t=X3t=X4t=X5t=X6t=0；
以小鼠血液乙醇浓度Yt为横坐标，分别以行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t为纵坐标，做图，进行线性回归分析，得到回归直线方程，得到a、b、c、d、e、f的值，进而计算出St的值；
Ⅲ、52%vol白酒的相对致兴奋程度指数Mt：
用来评价某个特定酒精度的酒类时，在饮后30min(t1)和饮后150min(t2)，52%vol白酒对兴奋行为的影响程度；Mt=52%vol白酒后小鼠行为兴奋指数Stw/灌酒52%vol酒精标准溶液后小鼠行为兴奋指数Sts；
其中，灌酒酒精度为52%vol两种白酒和灌酒酒精度为52%vol酒精标准溶液的所用剂量为0.07mL/只；
酒精度为52%vol白酒的相对致兴奋程度指数Mt是相对52%vol酒精度、且在饮后的特定时刻30min(t1)和饮后150min(t2)而言的：
其中，若52%vol白酒K1的饮后30min(t1) 相对致兴奋程度指数M1t1、52%vol白酒K2的饮后30min(t1) 相对致兴奋程度指数M2t1、52%vol白酒K1的饮后150min(t2) 相对致兴奋程度指数M1t2、52%vol白酒K2的饮后150min(t2)相对致兴奋程度指数M2t2同时满足：①M1t1＞M2t1、②M1t1＜M2t1≤1、③M1t1接近于零时，则认为52%vol白酒K1比52%vol白酒K2较易引起相对兴奋，具有适度饮用、适度兴奋、低停滞度和代谢转化快的特点。
结果与分析
通过行为学分析软件Any-maze自动分析获得测试组和对照组小鼠在灌饮52% vol白酒K1、K2与52% vol酒类精的过程中，灌酒前（t0），灌酒后30min（t1）和灌酒后150min（t2）这3个时刻在旷场中自由运动1分钟的行为参数，如表1、表2和表3所示：
表1 灌酒前（t0）小鼠行为参数
表2 灌酒后30 min（t1）小鼠行为参数
表3 灌酒后150min时（t2）小鼠行为参数
小鼠行为参数比：通过计算获得测试组和对照组小鼠在灌饮52% vol白酒K1、K2与52%vol酒类精的过程中，灌酒后30min（t1）和灌酒后150min（t2）这2个时刻在旷场中自由运动1分钟的行为参数比，如表4、表5 所示：
表4 灌酒后30 min（t1）小鼠行为参数比
表5 灌酒后150 min（t2）小鼠行为参数比
对酒体K1和酒体K2来说，饮后30min，酒体K1和酒体K2同时满足以下条件时：X1t≥1、X2t≥1、X3t≥1、X4t≥1、X5t≤1、X6t≤1，认为对小鼠行为的影响表现均为兴奋显著；饮后150min，行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t不同时满足以上条件时或仅满足上述一项条件时，认为酒体K1和酒体K2对小鼠行为的影响表现均表现为兴奋不显著；
血液乙醇浓度：用气相色谱法测定灌酒后t时刻的小鼠血液乙醇浓度Yt，单位mg/L，如表6所示；
表6 灌酒后30 min（t1）和150 min（t2）小鼠血液乙醇浓度（mg/L）
分别以30 min（t1）和150 min（t2）的血液浓度Y1、Y2为横坐标，其对应时刻的行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t为纵坐标，得到针对每个酒的每个行为参数比的线性回归直线方程，根据小鼠行为兴奋指数St，St=1-（a*X1t +b*X2t+c*X3t+d*X4t+e*X5t+f*X6t）；算出每个行为参数的权重a、b、c、d、e、f, 进而得到酒体K1、酒体K2和酒类精的St值，进而计算得到52%vol白酒的相对致兴奋程度指数Mt的值。
对于白酒K1和K2来说，52%vol白酒K1的饮后30min(t1) 相对致兴奋程度指数M1t1、52%vol白酒K2的饮后30min(t1) 相对致兴奋程度指数M2t1、52%vol白酒K1的饮后150min(t2)相对致兴奋程度指数M1t2、52%vol白酒K2的饮后150min(t2)相对致兴奋程度指数M2t2同时满足：①M1t1＜M2t1、②M1t1＞M2t1＞1、③M2t2接近于零时，则认为52%vol白酒K2比52%vol白酒K1较易引起相对兴奋，具有适度饮用、适度兴奋、低停滞度和代谢转化快的特点。
在灌酒后30min，小鼠血液乙醇浓度达到峰值，此时刻对于饮用K1，小鼠行为反应能力降低，对于K2，小鼠表现为兴奋行为反应增加；在灌酒后150min，小鼠血液乙醇浓度几乎趋近于零，此时刻对于饮用K2，小鼠行为反应能力与灌酒前行为接近，对于K1，小鼠行为表现并未恢复到灌酒前，与灌酒前行为相比，表现为迟钝；
这些行为表现可用于评价酒体K1和酒体K2，K2酒体与K1相比，K2中的一些微量成分和乙醇相互作用下，在一定程度上能降低小鼠血液乙醇积累量，加速血液中乙醇代谢，降低酒后带来的行动迟缓程度。

Claims (10)

1.一种评价酒类饮后兴奋程度的方法，包括如下步骤：
（1）用伏特加与超纯水配制成各种酒精度的酒精标准溶液，用于小鼠灌胃；
（2）将小鼠分为酒样检测组和酒精标准溶液检测对照组，每组各10只，正常饲喂一周后开始实验，分别按照所设定的灌胃量将不同酒精度的酒样给检测组和对照组小鼠灌胃；
（3）将小鼠依次在灌胃前后t时刻时置于一个局限的无可回避的压迫环境中，采用高频摄像机和行为学分析软件实时录制与同步分析小鼠在t时刻时运动一分钟的行为轨迹；t时刻设为3个，分别是灌酒前t0、灌酒后30min（t1）和150min（t2）；
（4）对小鼠行为参数进行测定和同步分析，这些行为参数分别为：
行动距离At，一分钟内从记录起点到终点的运动路程，m；
平均速度Bt，在一分钟内完成行动距离At过程中，单位时间内通过的路程， m/s；
移动时间Ct，在一分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的移动时间，s；
停滞时间Dt，在一分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的停滞时间，s；
移动频度Et，在一分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的移动次数，n/min；
停滞频度Ft，在一分钟内完成行动距离At过程中，持续累加的停滞次数，n/min；
（5）测定灌酒后t时刻的小鼠全血乙醇浓度Yt，mg/L；
（6）对步骤（4）得到的数据进行以下处理：
Ⅰ、行为参数比：用于评价和判定小鼠行为受到酒样代谢影响后表现为兴奋，指标分别为：
行动距离比X1t，灌酒后t时刻一分钟内移动距离At/灌酒前一分钟内移动距离A0；
平均速度比X2t，灌酒后t时刻一分钟内平均速度Bt/灌酒前一分钟内平均速度B0；
移动时间比X3t，灌酒后t时刻一分钟内移动时间Ct/灌酒前一分钟内移动时间C0；
停滞时间比X4t，灌酒后t时刻一分钟内停滞时间Dt/灌酒前一分钟内停滞时间D0；
移动频度比X5t，灌酒后t时刻一分钟内移动频度Et/灌酒前一分钟内移动频度E0；
停滞频度比X6t，灌酒后t时刻一分钟内停滞频度Ft/灌酒前一分钟内停滞频度F0；
其中，若当所述行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t同时满足以下条件时：X1t≥1、X2t≥1、X3t≥1、X4t≥1、X5t≤1、X6t≤1，判定酒样对小鼠行为的影响表现为使其兴奋显著；若当所述行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t不同时满足以上条件时或仅满足上述一项条件时，判定酒样对小鼠行为的影响表现为兴奋不显著；
Ⅱ、行为兴奋指数St：用于评价小鼠的兴奋行为的程度；
小鼠行为兴奋指数：St=1-（a*X1t +b*X2t+c*X3t+d*X4t+e*X5t+f*X6t）；
其中，a=移动距离权重，b=平均速度权重，c=移动时间权重，d=移动频度权重，e=停滞时间权重，f=停滞频度权重；a+b+c+d+e+f=1,0≤St≤1；
St=0时，为灌胃酒样前，小鼠的行为兴奋程度正常，即X1t =X2t=X3t=X4t=X5t=X6t=1；
St=1时，为灌胃酒样后，小鼠的行为兴奋程度异常，表现为完全醉，行为停滞不动，即X1t =X2t=X3t=X4t=X5t=X6t=0；
以小鼠全血乙醇浓度Yt为横坐标，分别以行为参数比X1t、X2t、X3t、X4t、X5t、X6t为纵坐标，做图，进行线性回归分析，得到回归直线方程，得到a、b、c、d、e、f的值，进而计算出St的值；
Ⅲ、酒样的相对致兴奋程度指数Mt：
用来评价某个特定酒精度的酒类时，在饮后30min(t1)和饮后150min(t2)，酒样对兴奋行为的影响程度；Mt=灌胃酒样后小鼠行为兴奋指数Stw/灌胃酒精标准溶液后小鼠行为兴奋指数Sts；
其中，若酒样K1的饮后30min(t1) 相对致兴奋程度指数M1t1、酒样K2的饮后30min(t1) 相对致兴奋程度指数M2t1、酒样K1的饮后150min(t2) 相对致兴奋程度指数M1t2、酒样K2的饮后150min(t2)相对致兴奋程度指数M2t2同时满足：①M1t1＞M2t1、②M1t1＜M2t1≤1、③M1t1接近于零时，则认为酒样K1比酒样K2较易引起相对兴奋，具有适度饮用、适度兴奋、低停滞度和代谢转化快的特点。
2.根据权利要求1所述的评价酒类饮后兴奋程度的方法，其特征在于：步骤（1）所述的酒精为用精馏和活性炭方法去除原酒中所有微量成分，只保留乙醇和水的俄罗斯伏特加。
3.根据权利要求1所述的评价酒类饮后兴奋程度的方法，其特征在于：步骤（2）所述的酒样类型为蒸馏酒、发酵酒和配制酒，不限于相同类型或相同品牌；所述酒精度不限于相同酒精度。
4.根据权利要求1所述的评价酒类饮后兴奋程度的方法，其特征在于：步骤（2）所述的灌胃酒量按照人体标准饮酒量并依据小鼠单位体重与人体单位体重的药剂等效剂量比值进行折算。
5.根据权利要求1所述的评价酒类饮后兴奋程度的方法，其特征在于：步骤（2）所述的小鼠为雄性，体重 18-20g，鼠龄 4-6 周。
6.根据权利要求1所述的评价酒类饮后兴奋程度的方法，其特征在于：步骤（3）所述的局限的无可回避的压迫环境为一个具备独立设置模块的动物精细行为学实验系统，具有高频摄像机和行为学分析软件，可以同步记录分析动物行为轨迹和行为参数。
7.根据权利要求1所述的评价酒类饮后兴奋程度的方法，其特征在于：步骤（5）所述全血乙醇浓度Yt测定方法为气相色谱外标法，步骤如下：
（A）血液预处理：先后将灌胃后t时刻的 30min（t1）和 150min（t2）后的小鼠尾部取血与断头取血，各取 0.5mL全血，放入提前加入 50 μL 肝素钠（180 u/mg）溶液抗凝的试管内，用超纯水稀释至 1mL，混匀后冰冻保存；
（B）色谱条件：PE Aoutosystem XL 型气相色谱仪，PE TurboMatrix 40 自动顶空进样器。
8.色谱柱: Agilent J&W-GC 型 30 m×0. 53mm×1.00 m 硅烷化玻璃柱。
9.温度：检测器 250℃，进样口 240℃，柱温起 40℃，以 10℃/min 升到 60℃，保持 0min，再以 20℃/min 升到 120℃，保持 0 min，再以 40℃/min 升到 215℃，顶空 55℃，加热时间 40 min，载气、N2、H2和空气的流速分别为30 mL/min、 45 mL/min、 450 mL/min，FID 耦合火焰离子化检测器，进样量: 1μL，时间9.38 min；
（C）标准曲线：使用分析乙醇配制浓度为120mg/100mL、60mg/100mL、30mg/mL、15mg/mL、7.5mg/mL的标准溶液，按照步骤（B）气相色谱条件制作测定血液乙醇的出峰时间，乙醇出峰时间为 3.39 min/L；
（D）血液乙醇浓度测定，将按照步骤（A）预处理好的样品，按照步骤（B）气象色谱条件分析，将得到的数据和步骤（C）比对，得到血液乙醇浓度。
10.权利要求1-7任一项所述的评价酒类饮后兴奋程度的方法及应用，其特征在于：所述的评价酒类饮后兴奋程度在蒸馏酒、发酵酒和配制酒生产过程的工艺优化中进行应用，用于评价不同酒类的饮后行为兴奋程度及酒样本身的行为致兴奋程度，或用于评价酒样饮后感觉，或用于评价酒样品质。
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