CN107847597A - 包含与抗体组合施予的ido抑制剂的肿瘤治疗剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提供用于治疗肿瘤的方法，其包括向需要接受治疗的人等施予有效量的下述抗体和吲哚胺2,3‑双加氧酶抑制剂的步骤，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合。

Description

包含与抗体组合施予的IDO抑制剂的肿瘤治疗剂
技术领域
本发明涉及包含与抗体组合施予的IDO抑制剂的肿瘤治疗剂等。
背景技术
近来有报道称，作为色氨酸代谢酶的吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)会抑制T细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)的增殖并激活调节性T细胞，从而导致宿主免疫系统减弱。IDO的表达在肿瘤组织中上升，并且在癌细胞和树突状细胞中通过IFN-γ刺激而被诱发(例如，J.Clin.Invest.,vol.117,No.5,pp.1147-1154(2007))。在人体中，作为必需氨基酸的色氨酸的90％在犬尿氨酸途径中代谢生成犬尿氨酸，继而生成3-羟基犬尿氨酸(3OH-kynurenine)、喹啉酸等，IDO参与了该途径的初始步骤。
IDO的活化以局部或整体的方式降低色氨酸浓度而提高犬尿氨酸的浓度，并且，包括犬尿氨酸在内的色氨酸代谢物可诱导T细胞和NK细胞的死亡(例如，J.Exp.Med.,vol.196,No.4,pp.447-457(2002))。色氨酸代谢还可诱导CD4+CD25-T细胞转化为调节性T细胞(例如，Blood,vol.109,No.7,pp.2871-2877(2007))。在经INF-γ诱发了IDO表达的树突状细胞的培养上清液中，色氨酸浓度降低，而犬尿氨酸浓度上升。将T细胞与该树突状细胞共培养时，较之与未经刺激的树突状细胞的共培养而言，T细胞的增殖受到抑制(例如，J.Exp.Med.,vol.196,No.4,pp.447-457(2002))。
基于上述结果，在IDO表达上升的肿瘤环境中，由色氨酸的代谢诱发犬尿氨酸浓度的上升，由此抑制抗肿瘤效应细胞，这被认为是肿瘤的免疫逃逸机制之一(例如，J.Clin.Invest.,vol.117,No.5,pp.1147-1154(2007))。
已报道了在结肠直肠癌和前列腺癌的肿瘤组织中，IDO的表达上升(例如，Clin.Cancer Res.,vol.12,No.4,pp.1144-1151(2006)；和Eur.J.Cancer,vol.44,No.15,pp.2266-2275(2008))。在急性髓细胞白血病细胞中，IDO持续地表达(例如，Leukemia,vol.21,pp.353-355(2007))。另外，还报道了当患有子宫内膜癌、黑色素瘤或卵巢癌的患者中IDO的表达上升时，该患者的预后差(例如，Br.J.Cancer,vol.95,No.11,pp.1555-1561(2006)；J.Clin.Invest.,vol.114,No.2,pp.280-290(2004)；和Clin.Cancer Res.,vol.11,No.16,pp.6030-6039(2005))。在成人T细胞白血病淋巴瘤和急性髓细胞白血病中，血液中的犬尿氨酸/色氨酸比率上升(例如，Leuk.Res.,vol.33,No.1,pp.39-45(2009)；和Leuk.Res.,vol.33,No.3,pp.490-494(2009))。此外，还报道了血中犬尿氨酸/色氨酸比率上升的黑色素瘤患者的预后差(例如，Dermatology,vol.214,No.1,pp.8-14(2007))。如上所述，可认为IDO及/或犬尿氨酸与各种类型的实体癌和血液学癌症有关。
作为色氨酸衍生物的1-甲基色氨酸(1-MT)通过与色氨酸进行拮抗来抑制犬尿氨酸的产生(例如，Cancer Res.,vol.67,No.2,pp.792-800(2007))。存在表达IDO的癌细胞或表达IDO的树突状细胞的情况下，1-MT可消除对于T细胞增殖的抑制(例如，Cancer Res.,vol.67,No.2,pp.792-800(2007))。此外，在同种异基因妊娠小鼠(allogeneic pregnantmice)中，1-MT可诱发主要组织相容性复合体(MHC)限制性的排斥反应(例如，Nat.Immunol.,vol.2,No.1,pp.64-68(2001))。这些结果表明，对IDO的抑制可阻遏犬尿氨酸的产生，并且可诱发免疫。
1-MT在具有小鼠黑色素瘤细胞的荷瘤小鼠中呈现了抗肿瘤效果。该效果在免疫缺陷小鼠中消失(例如，Cancer Res.,vol.67,No.2,pp.792-800(2007))。这些结果表明，1-MT的抗肿瘤效果是基于由IDO抑制介导的抑制犬尿氨酸产生的效果所引起的免疫刺激。
另外，针对犬尿氨酸的产生及/或IDO而呈现抑制效果的化合物可发挥免疫刺激作用也是已知的(例如，Nat.Immunol.,vol.2,pp.64-68(2001))。
IDO抑制剂的例子包括上述的色氨酸衍生物，其中包括WO99/29310中记载的1-MT、WO2010/053182、WO2011/142316和WO2013/069765中记载的喹喔啉衍生物、WO2006/122150和WO2010/005958中记载的1,2,5-噁二唑衍生物、WO2015/002918中记载的脲衍生物、和WO2015/002918中记载的酰苯胺衍生物。
已知IDO1在肿瘤或微环境中表达，并且在导致肿瘤逃避宿主免疫监控的免疫抑制机制中起到重要的调控作用。已报道了色氨酸(Trp)代谢物、例如犬尿氨酸(Kyn)可诱导NK细胞死亡，并且可通过抑制NK细胞受体的表达来减弱NK细胞的细胞毒性。因此，IDO1的活性有可能对抗体依赖性细胞毒性(ADCC，antibody dependent cellular cytotoxicity)造成影响。
来那度胺(Lenalidomide)是多发性骨髓瘤的标准治疗剂，已知其可增强例如抗CD20抗体和抗CD40抗体等治疗抗体的ADCC活性(参见非专利文献1和2)。
已知伊马替尼(Imatinib)可抑制c-kit(干细胞因子受体)和血小板衍生生长因子受体，并且还可经由树突状细胞激活NK细胞，由此呈现抗肿瘤效果(参见非专利文献3)。
此外，已知作为黑色素瘤治疗剂的氮烯唑胺(dacarbazine)、作为肾细胞癌和肝癌的治疗剂的索拉非尼(sorafenib)可激活NK细胞(参见非专利文献4和5)。
现有技术文献
非专利文献
非专利文献1：Clin.Cancer Res.vol.11,p5984,2005
非专利文献2：Br.J.Hematol.vol.144,p848,2009
非专利文献3：J Clin Invest.2004Aug 1；114(3)：379-388
非专利文献4：Journal of Investigative Dermatology(2013)133,499-508
非专利文献5：HEPATOLOGY,Vol.57,No.6,2013,2358-2368
发明内容
发明所要解决的课题
本发明的目的之一在于提供肿瘤治疗剂等，所述肿瘤治疗剂包含与抗体组合施予的IDO抑制剂。
用于解决课题的手段
本发明涉及以下(1)至(210)。
(1)用于治疗肿瘤的方法，其包括向需要接受治疗的人施予有效量的下述抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂(indoleamine2,3-dioxygenase inhibitor)的步骤，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合。
(2)如(1)所述的方法，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式1]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式2]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(3)如(1)或(2)所述的方法，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗(mogamulizumab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、利妥昔单抗(rituximab)或西妥昔单抗(cetuximab)。
(4)如(1)至(3)中任一项所述的方法，其中，同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
(5)如(1)至(4)中任一项所述的方法，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
(6)如(5)所述的方法，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
(7)如(5)所述的方法，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
(8)如(5)所述的方法，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
(9)如(5)所述的方法，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
(10)如(5)所述的方法，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
(11)如(10)所述的方法，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
(12)如(10)所述的方法，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
(13)如(12)所述的方法，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma)。
(14)如(12)所述的方法，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
(15)如(5)所述的方法，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌(coloncancer)、头颈癌(head and neck cancer)、胃癌、肝癌。
(16)阻遏下述抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低的方法，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合，所述方法包括施予吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的步骤。
(17)如(16)所述的方法，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式3]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式4]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(18)药物组合物，其用于施予有效量的下述抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合。
(19)如(18)所述的药物组合物，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式5]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式6]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(20)如(18)或(19)所述的药物组合物，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
(21)如(18)至(20)中任一项所述的药物组合物，其包含同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
(22)如(18)至(21)中任一项所述的药物组合物，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
(23)如(22)所述的药物组合物，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
(24)如(22)所述的药物组合物，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
(25)如(22)所述的药物组合物，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
(26)如(22)所述的药物组合物，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
(27)如(22)所述的药物组合物，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
(28)如(27)所述的药物组合物，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
(29)如(27)所述的药物组合物，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
(30)如(29)所述的药物组合物，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。
(31)如(29)所述的药物组合物，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
(32)如(22)所述的药物组合物，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌、头颈癌、胃癌、肝癌。
(33)吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合，所述组合用于治疗肿瘤。
(34)如(33)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式7]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式8]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(35)如(33)或(34)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
(36)如(33)至(35)中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
(37)如(33)至(36)中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
(38)如(37)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
(39)如(37)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
(40)如(37)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
(41)如(37)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
(42)如(37)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
(43)如(42)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
(44)如(42)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
(45)如(44)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。
(46)如(44)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
(47)如(37)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌、头颈癌、胃癌或肝癌。
(48)用于阻遏下述抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合。
(49)如(48)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式9]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式10]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(50)肿瘤治疗剂，其包含吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂作为活性成分，其中，治疗剂以与有效量的下述抗体组合的方式被施予，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合。
(51)如(50)所述的肿瘤治疗剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式11]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式12]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(52)如(50)或(51)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
(53)如(50)至(52)中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，治疗剂和抗体被同时或依次地施予。
(54)如(50)至(53)中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
(55)如(54)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
(56)如(54)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
(57)如(54)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
(58)如(54)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
(59)如(54)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
(60)如(59)所述的肿瘤治疗剂，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
(61)如(59)所述的肿瘤治疗剂，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
(62)如(61)所述的肿瘤治疗剂，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。
(63)如(61)所述的肿瘤治疗剂，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
(64)如(54)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌、头颈癌、胃癌或肝癌。
(65)阻遏剂(suppressing agent)，其用于阻遏与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低，所述阻遏剂包含吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂作为活性成分。
(66)如(65)所述的阻遏剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式13]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式14]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(67)如(16)或(17)所述的方法，其中，同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
(68)如(16)或(17)所述的方法，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
(69)如(48)或(49)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
(70)肿瘤治疗剂，其包含与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体作为活性成分，其中，治疗剂以与有效量的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂组合的方式被施予。
(71)如(70)所述的肿瘤治疗剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式15]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式16]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(72)如(70)或(71)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
(73)如(70)至(72)中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，治疗剂和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
(74)如(70)至(73)中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
(75)如(74)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
(76)如(74)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
(77)如(74)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
(78)如(74)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
(79)如(74)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
(80)如(79)所述的肿瘤治疗剂，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
(81)如(79)所述的肿瘤治疗剂，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
(82)如(81)所述的肿瘤治疗剂，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。
(83)如(81)所述的肿瘤治疗剂，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
(84)如(74)所述的肿瘤治疗剂，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌、头颈癌、胃癌或肝癌。
(85)如(65)或(66)所述的阻遏剂，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
(86)用于治疗肿瘤的方法，其包括向需要接受治疗的人施予有效量的下述抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的步骤，所述抗体与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合。
(87)如(86)所述的方法，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式17]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式18]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(88)如(86)或(87)所述的方法，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
(89)如(86)或(87)所述的方法，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自以下(a1)～(c1)中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
(90)如(86)或(87)所述的方法，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
(91)如(90)所述的方法，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(92)如(90)所述的方法，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(93)如(86)或(87)所述的方法，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
(94)如(93)所述的方法，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
(95)如(93)所述的方法，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
(96)如(86)至(95)中任一项所述的方法，其中，同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
(97)如(86)至(96)中任一项所述的方法，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
(98)如(97)所述的方法，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
(99)如(97)所述的方法，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
(100)如(97)所述的方法，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(granular lymphocytosis)(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征(hypereosinophilicsyndrome)、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤(lymphoblastic lymphoma)或卡斯特雷曼氏症(Castleman disease)。
(101)如(97)所述的方法，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(102)如(97)所述的方法，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
(103)如(97)所述的方法，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(104)阻遏与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低的方法，其包括施予吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的步骤。
(105)如(104)所述的方法，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式19]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式20]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(106)如(104)或(105)所述的方法，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
(107)如(104)或(105)所述的方法，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
(108)如(104)或(105)所述的方法，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
(109)如(108)所述的方法，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(110)如(108)所述的方法，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(111)如(104)或(105)所述的方法，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
(112)如(111)所述的方法，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
(113)如(111)所述的方法，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
(114)如(104)至(113)中任一项所述的方法，其中，同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
(115)药物组合物，其用于施予有效量的下述抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，所述抗体与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合。
(116)如(115)所述的药物组合物，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式21]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式22]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(117)如(115)或(116)所述的药物组合物，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
(118)如(115)或(116)所述的药物组合物，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
(119)如(115)或(116)所述的药物组合物，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
(120)如(119)所述的药物组合物，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(121)如(119)所述的药物组合物，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(122)如(115)或(116)所述的药物组合物，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
(123)如(122)所述的药物组合物，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
(124)如(122)所述的药物组合物，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
(125)如(115)或(116)所述的药物组合物，其包含同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
(126)如(115)至(125)中任一项所述的药物组合物，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
(127)如(126)所述的药物组合物，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
(128)如(126)所述的药物组合物，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
(129)如(126)所述的药物组合物，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤或卡斯特雷曼氏症。
(130)如(126)所述的药物组合物，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(131)如(126)所述的药物组合物，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
(132)如(126)所述的药物组合物，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(133)吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的组合，其用于治疗肿瘤。
(134)如(133)所述的组合，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式23]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式24]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(135)如(133)或(134)所述的组合，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
(136)如(133)或(134)所述的组合，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
(137)如(133)或(134)所述的组合，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
(138)如(137)所述的组合，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(139)如(137)所述的组合，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(140)如(133)或(134)所述的组合，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
(141)如(140)所述的组合，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
(142)如(140)所述的组合，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
(143)如(133)至(142)中任一项所述的组合，其中，抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
(144)如(133)至(143)中任一项所述的组合，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
(145)如(144)所述的组合，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
(146)如(144)所述的组合，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
(147)如(144)所述的组合，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤或卡斯特雷曼氏症。
(148)如(144)所述的组合，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(149)如(144)所述的组合，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
(150)如(144)所述的组合，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(151)用于阻遏下述抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，所述抗体与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合。
(152)如(151)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式25]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式26]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(153)如(151)或(152)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
(154)如(151)至(153)中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
(155)如(151)至(153)中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
(156)如(151)至(153)中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
(157)如(156)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(158)如(156)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(159)如(151)至(153)中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
(160)如(159)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
(161)如(159)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
(162)肿瘤治疗剂，其包含与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体作为活性成分，其中，治疗剂以与有效量的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂组合的方式被施予。
(163)如(162)所述的肿瘤治疗剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式27]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式28]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(164)如(162)或(163)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
(165)如(162)或(163)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
(166)如(162)或(163)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
(167)如(166)所述的肿瘤治疗剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(168)如(166)所述的肿瘤治疗剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(169)如(162)或(163)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
(170)如(169)所述的肿瘤治疗剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
(171)如(169)所述的肿瘤治疗剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
(172)如(162)至(171)中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，治疗剂和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
(173)如(162)至(172)中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
(174)如(173)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
(175)如(173)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
(176)如(173)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤或卡斯特雷曼氏症。
(177)如(173)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(178)如(173)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
(179)如(173)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(180)肿瘤治疗剂，其包含吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂作为活性成分，其中，治疗剂以与有效量的下述抗体组合的方式被施予，所述抗体与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合。
(181)如(180)所述的肿瘤治疗剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式29]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式30]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(182)如(180)或(181)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
(183)如(180)或(181)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
(184)如(180)或(181)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
(185)如(184)所述的肿瘤治疗剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(186)如(184)所述的肿瘤治疗剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(187)如(180)或(181)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
(188)如(187)所述的肿瘤治疗剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
(189)如(187)所述的肿瘤治疗剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
(190)如(180)至(189)中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，治疗剂和抗体被同时或依次地施予。
(191)如(180)至(190)中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
(192)如(191)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
(193)如(191)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
(194)如(191)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤或卡斯特雷曼氏症。
(195)如(191)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(196)如(191)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
(197)如(191)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
(198)阻遏剂，其用于阻遏与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低，所述阻遏剂包含吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂作为活性成分。
(199)如(198)所述的肿瘤治疗剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式31]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式32]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
(200)如(198)或(199)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
(201)如(198)或(199)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
(202)如(198)或(199)所述的阻遏剂，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
(203)如(202)所述的阻遏剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(204)如(202)所述的阻遏剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
(205)如(198)或(199)所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
(206)如(205)所述的阻遏剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
(207)如(205)所述的阻遏剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
(208)如(198)至(207)中任一项所述的阻遏剂，其中，阻遏剂和抗体被同时或依次地施予。
(209)如(48)或(49)所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体被同时或依次地施予。
(210)如(65)或(66)所述的阻遏剂，其中，阻遏剂和抗体被同时或依次地施予。
发明效果
根据本发明，可提供包含与抗体组合施予的IDO抑制剂的肿瘤治疗剂等。
附图说明
[图1]
图1示出了化合物A1和化合物B对于犬尿氨酸产生和色氨酸消耗的效果。将KATO-III细胞用25ng/mL重组人IFN-γ处理。将细胞用化合物A1(100nmol/L)或化合物B1(100nmol/L)处理。3天后，通过LC/MS/MS测定上清液中的犬尿氨酸(Kyn)和色氨酸(Trp)的浓度。(图A)纵轴表示犬尿氨酸(Kyn)浓度。自左侧起，各栏示出了在条件培养基1(KATO-III细胞)、条件培养基2(KATO-III细胞+IFN-γ)、条件培养基3(KATO-III细胞+IFN-γ+化合物A1)或条件培养基4(KATO-III细胞+IFN-γ+化合物B1)中的Kyn的浓度。各栏示出了平均值+SD。(图B)纵轴表示色氨酸(Trp)的浓度。自左侧起，各栏示出了在条件培养基1(KATO-III细胞)、条件培养基2(KATO-III细胞+IFN-γ)、条件培养基3(KATO-III细胞+IFN-γ+化合物A1)或条件培养基4(KATO-III细胞+IFN-γ+化合物B1)中的Trp浓度。各栏示出了平均值+SD。
[图2]
图2示出了NK细胞的检测。将人PBMC在(A)条件培养基1、(B)条件培养基2、(C)条件培养基3或(D)条件培养基4中孵育7天。图2的A、B、C和D中的数字表示CD3-细胞中的CD16+CD56+细胞(NK细胞)。
[图3]
图3示出了在各种条件培养基中对人外周血单核细胞(A：供体1，B、C：供体2)进行预孵育时的莫加木珠单抗针对TL-Om1细胞(A、B)或HH细胞(C)的抗体依赖性细胞毒性。
所有实验均以三次重复进行，并且，细胞毒性百分比以平均值表示。图A、B、及C的纵轴表示莫加木珠单抗的细胞毒性百分比，图A、B、及C的横轴表示莫加木珠单抗的浓度(自左侧起为0、0.1、1、及10μg/mL)。白色圆圈表示在KATO-III中的预孵育的细胞毒性百分比。白色三角标记表示在KATO-III和IFN-γ中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色圆圈表示在KATO-III、IFN-γ和化合物A1中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色三角标记表示在KATO-III、IFN-γ和化合物B1中预孵育的细胞毒性百分比。
[图4]
图4示出了在各种条件培养基中对人外周血单核细胞(A：供体1，B：供体2)进行预孵育时的曲妥珠单抗针对SK-BR3细胞的抗体依赖性细胞毒性。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值表示。图A和B的纵轴表示曲妥珠单抗的细胞毒性百分比，图A和B的横轴表示曲妥珠单抗的浓度(自左侧起为0、0.1、1、及10μg/mL)。白色圆圈表示在KATO-III中的预孵育的细胞毒性百分比。白色三角标记表示在KATO-III和IFN-γ中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色圆圈表示在KATO-III、IFN-γ和化合物A1中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色三角标记表示在KATO-III、IFN-γ和化合物B1中的预孵育的细胞毒性百分比。
[图5]
图5示出了在各种条件培养基中对人外周血单核细胞进行预孵育时的利妥昔单抗针对Raji细胞的抗体依赖性细胞毒性。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值表示。图的纵轴表示利妥昔单抗的细胞毒性百分比，图的横轴表示利妥昔单抗的浓度(自左侧起为0、0.1、1、及10μg/mL)。白色圆圈表示在KATO-III中的预孵育的细胞毒性百分比。白色三角标记表示在KATO-III和IFN-γ中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色圆圈表示在KATO-III、IFN-γ和化合物A1中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色三角标记表示在KATO-III、IFN-γ和化合物B1中的预孵育的细胞毒性百分比。
[图6]
图6示出了在各种条件培养基中对人外周血单核细胞进行预孵育时的西妥昔单抗针对A431细胞的抗体依赖性细胞毒性。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值表示。图的纵轴表示西妥昔单抗的细胞毒性百分比，图的横轴表示西妥昔单抗的浓度(自左侧起为0、0.1、1、及10μg/mL)。白色圆圈表示在KATO-III中的预孵育的细胞毒性百分比。白色三角标记表示在KATO-III和IFN-γ中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色圆圈表示在KATO-III、IFN-γ和化合物A1中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色三角标记表示在KATO-III、IFN-γ和化合物B1中的预孵育的细胞毒性百分比。
[图7]
图7示出了在各种条件培养基中对人NK细胞进行预孵育时的莫加木珠单抗针对TL-Om1细胞的抗体依赖性细胞毒性。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值表示。图的纵轴表示莫加木珠单抗的细胞毒性百分比，图的横轴表示莫加木珠单抗的浓度(自左侧起为0、0.1、1、及10μg/mL)。白色圆圈表示在KATO-III中的预孵育的细胞毒性百分比。白色三角标记表示在KATO-III和IFN-γ中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色圆圈表示在KATO-III、IFN-γ和化合物A1中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色三角标记表示在KATO-III、IFN-γ和化合物B1中的预孵育的细胞毒性百分比。
[图8]
图8示出了在各种条件培养基中对人NK细胞进行预孵育时的利妥昔单抗针对Raji细胞的抗体依赖性细胞毒性。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值表示。图的纵轴表示利妥昔单抗的细胞毒性百分比，图的横轴表示利妥昔单抗的浓度(自左侧起为0、0.1、1、及10μg/mL)。白色圆圈表示在KATO-III中的预孵育的细胞毒性百分比。白色三角标记表示在KATO-III和IFN-γ中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色圆圈表示在KATO-III、IFN-γ和化合物A1中的预孵育的细胞毒性百分比。黑色三角标记表示在KATO-III、IFN-γ和化合物B1中的预孵育的细胞毒性百分比。
[图9]
图9示出了在含有化合物A1或化合物B1的培养基中对人外周血单核细胞进行预孵育时的莫加木珠单抗针对TL-Om1细胞的抗体依赖性细胞毒性。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值表示。图的纵轴表示莫加木珠单抗的细胞毒性百分比，图的横轴表示莫加木珠单抗的浓度(自左侧起为0、0.1、1、及10μg/mL)。白色圆圈表示在培养基中的预孵育的细胞毒性百分比。白色三角标记表示在培养基和化合物A1中的预孵育的细胞毒性百分比。白色方形标记表示在培养基和化合物B1中的预孵育的细胞毒性百分比。
[图10]
图10示出了IDO在稳定表达IDO1shRNA的KATO-III细胞中的表达。(图A)图A的纵轴表示通过qPCR分析测得的经IFN-γ处理的IDO1mRNA表达水平(相对于亲本KATO-III细胞)。
自左侧起，各栏示出了在引入了IDO1shRNA#44、#45、#46、#47、载体、NegaCTRLshRNA或未经引入(亲本(parent))的KATO-III细胞中的IDO1mRNA水平。(图B)图B的上部示出了通过Western印迹分析测得的IDO1蛋白表达水平，图B的下部示出了通过Western印迹分析测得的亲本(β-肌动蛋白)蛋白表达水平。
[图11]
图11示出了IDO1敲低对于犬尿氨酸产生和色氨酸消耗的影响。(图A)图A的纵轴表示犬尿氨酸(Kyn)的浓度(μmol/mL)。自左侧起，各栏示出了条件培养基1[KATO-III细胞(亲本)]、条件培养基2[KATO-III细胞(NegaCTRL shRNA)]、条件培养基3[KATO-III细胞(亲本)+IFN-γ)]、条件培养基4[KATO-III细胞(NegaCTRL shRNA)+IFN-γ]、条件培养基5[KATO-III细胞(IDO1shRNA#44)+IFN-γ]、条件培养基6[KATO-III细胞(IDO1shRNA#45)+IFN-γ]或条件培养基7[KATO-III细胞(IDO1shRNA#46)+IFN-γ]中的Kyn浓度。(图B)图的纵轴表示色氨酸(Trp)的浓度(μmol/mL)。自左侧起，各栏示出了条件培养基1[KATO-III细胞(亲本)]、条件培养基2[KATO-III细胞(NegaCTRL shRNA)]、条件培养基3[KATO-III细胞(亲本)+IFN-γ)]、条件培养基4[KATO-III细胞(NegaCTRL shRNA)+IFN-γ]、条件培养基5[KATO-III细胞(IDO1shRNA#44)+IFN-γ]、条件培养基6[KATO-III细胞(IDO1shRNA#45)+IFN-γ]或条件培养基7[KATO-III细胞(IDO1shRNA#46)+IFN-γ]中的Trp浓度。各栏示出了平均值+SD。
[图12]
图12示出了NK细胞的检测。将人PBMC在条件培养基1(A)、条件培养基2(B)、条件培养基3(C)、条件培养基4(D)、条件培养基5(E)、条件培养基6(F)或条件培养基7(G)中孵育7天。A、B、C、D、E、F和G中的数字表示CD3-细胞中的CD16+CD56+细胞(NK细胞)。
[图13]
图13示出了在各种条件培养基中对人外周血单核细胞进行预孵育时的莫加木珠单抗针对TL-Om1细胞的抗体依赖性细胞毒性。
所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值表示。图的纵轴表示莫加木珠单抗的细胞毒性百分比，图的横轴表示莫加木珠单抗的浓度(自左侧起为0、0.1、1、及10μg/mL)。白色圆圈表示使用亲本KATO-III细胞的预孵育时的细胞毒性百分比。白色三角标记表示使用稳定表达阴性对照shRNA的KATO-III细胞的预孵育时的细胞毒性百分比。白色方形标记表示使用亲本KATO-III细胞和IFN-γ的预孵育时的细胞毒性百分比。白色菱形标记表示使用稳定表达阴性对照shRNA的KATO-III细胞和IFN-γ的预孵育时的细胞毒性百分比。黑色圆圈表示使用稳定表达IDO1shRNA#44的KATO-III细胞和IFN-γ的预孵育时的细胞毒性百分比。黑色三角标记表示使用稳定表达IDO1shRNA#45的KATO-III细胞和IFN-γ的预孵育时的细胞毒性百分比。黑色方形标记表示使用稳定表达IDO1shRNA#46的KATO-III细胞和IFN-γ的预孵育时的细胞毒性百分比。
[图14]
图14示出了通过Western印迹法测得的IDO1在卵巢癌细胞(OVISE、SKOV3、OVCAR3、和MCAS)中的表达。
[图15]
图15示出了化合物A1对于PBMC针对SKOV3细胞的自然杀伤活性(A)和细胞毒性(B)的影响。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值+SD表示。(图A)图A的纵轴表示PBMC的在无抗体C1的情况下的细胞毒性(自然杀伤活性)百分比，自左侧起，各栏示出了在条件培养基DMSO或化合物A1中的细胞毒性。(图B)图的纵轴表示抗体C1的细胞毒性百分比，图的横轴表示抗体C1的浓度(自左侧起为0.033、0.33、3.3、33、及333ng/mL)。黑色圆圈表示在含有经IFN-γ刺激的SKOV3细胞和化合物A1的条件培养基中的预孵育时的细胞毒性百分比。白色圆圈表示在含有经IFN-γ刺激的SKOV3细胞和DMSO的条件培养基中的预孵育时的细胞毒性百分比。
[图16]
图16示出了化合物B1对于PBMC针对SKOV3细胞的自然杀伤活性(A)和细胞毒性(B)的影响。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值+SD表示。(图A)图A的纵轴表示PBMC的在无抗体C1的情况下的细胞毒性(自然杀伤活性)百分比，自左侧起，各栏示出了在条件培养基DMSO或化合物B1中的细胞毒性。(图B)图的纵轴表示抗体C1的细胞毒性百分比，图的横轴表示抗体C1的浓度(自左侧起为0.033、0.33、3.3、33、及333ng/mL)。黑色圆圈表示在含有经IFN-γ刺激的SKOV3细胞和化合物B1的条件培养基中的预孵育时的细胞毒性百分比。白色圆圈表示在含有经IFN-γ刺激的SKOV3细胞和DMSO的条件培养基中的预孵育时的细胞毒性百分比。
[图17]
图17示出了化合物A1对于PBMC针对KG-1细胞(批号：A3951)的细胞毒性的影响。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值+/-SD表示。图的纵轴表示存在化合物A1时的PBMC的细胞毒性，图的横轴表示抗体D1的浓度(自左侧起为0.3、3、30、及300μg/mL)。黑色圆圈表示在含有经IFN-γ刺激的KATO-III细胞和化合物A1的条件培养基中的预孵育时的细胞毒性百分比。白色圆圈表示在含有经IFN-γ刺激的KATO-III细胞和DMSO的条件培养基中的预孵育时的细胞毒性百分比。
[图18]
图18示出了化合物A1对于PBMC针对EoL-1/人TIM-3细胞的细胞毒性的影响。所有实验均以三次重复进行，细胞毒性百分比以平均值+/-SD表示。图的纵轴表示存在化合物A1时的PBMC的细胞毒性，图的横轴表示抗体E1的浓度(自左侧起为0.3、3、30、及300μg/mL)。黑色圆圈表示在含有经IFN-γ刺激的KATO-III细胞和化合物A1的条件培养基中的预孵育时的细胞毒性百分比。白色圆圈表示在含有经IFN-γ刺激的KATO-III细胞和DMSO的条件培养基中的预孵育时的细胞毒性百分比。
具体实施方式
本发明中，ADCC活性是指下述细胞毒活性，其中，抗体与活体中肿瘤细胞上的细胞表面抗原结合，并经由存在于抗体Fc区和效应细胞表面的Fc受体而激活效应细胞，从而对肿瘤细胞等进行阻碍[Monoclonal Antibodies：Principles and Applications,Wiley-Liss,Inc.,Chapter 2.1(1955)]。效应细胞的例子包括杀伤细胞、自然杀伤细胞、活化的巨噬细胞等。
具有ADCC活性的抗体的例子包括莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗、西妥昔单抗等。
本发明中的与吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂组合的、与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体的ADCC活性、以及与人CC趋化因子受体4(CCR4)、HER2、人CD20或EGFR特异性结合的抗体的ADCC活性，可基于“Clin.Cancer Res.vol.11,p5984,2005.”、“Br.J.Hematol.vol.144,p848,2009.”等中记载的方法进行检验。
T细胞淋巴瘤的预后极差，并且尚无可发挥充分药效的治疗剂。人CC趋化因子受体4(CCR4)在包括成人T细胞白血病/淋巴瘤和皮肤T细胞淋巴瘤在内的特定种类的T细胞淋巴瘤中表达是已知的(Clinical Cancer Research,vol.9,p3625,2003and J InvestDermatol,vol.119,p1405,2002)。因此，包含与CCR4特异性结合的抗体成分的药物组合物可成为对于治疗表达CCR4的T细胞肿瘤而言有效的药物组合物(WO01/64754、WO03/18635、及WO2005/057341)。
与CCR4特异性结合的抗体的例子有莫加木珠单抗等。莫加木珠单抗为人源化的抗CCR4单克隆抗体，其用于治疗例如ATL、外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤等白血病和淋巴瘤。此外，莫加木珠单抗也具有高的ADCC活性。
莫加木珠单抗可诱发调节T细胞的减少是已知的[Clin Cancer Res；21(2)January 15,2015]。色氨酸代谢也可诱发CD4+CD25-T细胞向调节性T细胞的转化(例如，Blood,vol.109,No.7,pp.2871-2877(2007))。因此，可认为，莫加木珠单抗和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的组合对于减少调节性T细胞而言是优选的。
人表皮生长因子受体2(HER2或pl85neu)最初被鉴定为转化来自经化学处理的大鼠的神经母细胞瘤的基因后的产物。neu原癌基因的活化形态是由位于编码蛋白质的跨膜区的点突变(缬氨酸突变为谷氨酸)导致的。在乳腺癌和卵巢癌中可观察到neu的人同源物即HER2的扩增，且该现象与不良预后相关(Slamon et al.,Science,235：177-182(1987)；Slamon et al.,Science,244：707-7 12(1989)；US 4,968,603)。HER2的分子量为约185,000，其与表皮生长因子受体(EGFR或HER1)具有较高的同源性，但迄今为止并未明确鉴定出HER2的特异性配体。
此外，发现针对HER2受体的抗体4D5可使过表达HER2的乳腺肿瘤细胞系对于TNFα的细胞毒性作用敏感(US 5,677,171)。鼠抗ErbB2抗体4D5的重组人源化形态(huMAb4D5-8、rhuMAb HER2或曲妥珠单抗，US 5,821、337)在患有过表达HER2的转移性乳腺癌、且已接受过大规模抗癌疗法的患者中具有临床活性(Baselga et al.,J.Clin.Oncol.14：737-744(1996))。曲妥珠单抗已在1998年获得上市许可，用于对患有肿瘤过度表达HER2蛋白的转移性乳腺癌的患者进行治疗。在临床试验中呈现高疗效的代表例之一为吉非替尼(gefitinib)，其可用于NSCLC适应症(非小细胞肺癌)。
曲妥珠单抗通过与HER2蛋白特异性结合而发挥抗肿瘤效果，其用于治疗乳腺癌、胃癌等。此外，曲妥珠单抗也因其高ADCC活性而发挥抗肿瘤效果。
淋巴细胞是在造血过程中在骨髓中产生的多种白细胞之一。存在两大淋巴细胞群体：B淋巴细胞(B细胞)和T淋巴细胞(T细胞)。本发明中，尤其关注的淋巴细胞为B细胞。
B细胞在骨髓内成熟后脱离骨髓，同时在其细胞表面表达抗原结合抗体。在初始B细胞首次接触其膜结合抗体特异性针对的抗原时，细胞开始迅速分裂，其子代分化成记忆B细胞和被称作“浆细胞”的效应细胞。记忆B细胞具有更长的寿命，可继续表达具有与初始母细胞相同的特异性的膜结合抗体。
浆细胞不产生膜结合抗体，而是产生可分泌的形式的抗体。
被分泌的抗体是体液免疫的主要效应分子。
CD20抗原(也被称为人B淋巴细胞限制性分化抗原，Bp35)是一种分子量为约35kD的疏水性跨膜蛋白，其位于前体B淋巴细胞和成熟B淋巴细胞上(Valentine等，J.Biol.Chem.264(19)：11282-11287(1989)；和Einfeld等，EMBO J.7(3)：711-717(1988))。该抗原也在超过90％的非霍奇金淋巴瘤(NHL)B细胞中表达(Anderson等，Blood 63(6)：1424-1433(1984))，但并未在造血干细胞、前体B细胞、正常浆细胞或其他正常组织中发现(Tedder等，J.Immunol.135(2)：973-979(1985))。CD20调控细胞周期开始和分化的激活过程中的早期步骤(Tedder等，同上)，并且可能作为钙离子通道发挥作用(Tedder等，J.Cell.Biochem.14D：195(1990))。
与人CD20特异性结合的抗体的例子包括利妥昔单抗。
利妥昔单抗是包含抗人CD20嵌合人-鼠抗体的单克隆抗体，其用于治疗非霍奇金淋巴瘤、B细胞淋巴增生性障碍(B cell lymphoproliferative disorder)、肉芽肿性血管炎(granulomatosis with polyangiitis)、显微镜下多血管炎(microscopicpolyangiitis)等。并且，利妥昔单抗也具有高ADCC活性。
EGFR是一种170千道尔顿(kDa)的膜结合蛋白，其在上皮细胞的表面表达。EGFR是蛋白质酪氨酸激酶(一类细胞周期调控分子)的生长因子受体家族的成员之一(W.J.Gullick等，1986,Cancer Res.,46：285-292)。
EGFR在其配体(EGF或TGF-α)结合于胞外结构域时被活化，从而导致受体的细胞内酪氨酸激酶结构域发生自磷酸化(S.Cohen等，1980,J.Biol.Chem.,255：4834-4842；A.B.Schreiber等，1983,J.Biol.Chem.,258：846-853)。
EGFR是生长促进致癌基因erbB或ErbB1(原癌基因ERBB家族的一员)的蛋白质产物，确信其在多种人类癌症的发展和进展中起到关键作用。尤其在乳腺癌、膀胱癌、肺癌、头癌、颈癌、胃癌及胶质母细胞瘤中观察到EGFR的表达上升。致癌基因ERBB家族编码四种结构上相关的跨膜受体，即EGFR、HER-2/neu(erbB2)、HER-3(erbB3)和HER-4(erbB4)。
临床上，已报道了肿瘤中的ERBB致癌基因扩增及/或受体过表达与病情复发和患者不良预后、以及疗法中的反应有关(L.Harris等，1999,Int.J.Biol.Markers,14：8-15；及J.Mendelsohn和J.Baselga,2000,Oncogene,19：6550-6565)。
EGFR由以下三个主要结构域构成：即，胞外结构域(ECD)，其经过糖基化，且包含具有2个半胱氨酸富含区的配体结合袋；短跨膜结构域；胞内结构域，其具有内源性酪氨酸激酶活性。跨膜区连接配体结合结构域与胞内结构域。氨基酸序列和DNA序列分析及对EGFR的非糖基化形式的研究表明，EGFR的蛋白主链的分子量为132kDa，且具有1186个氨基酸残基(A.L.Ullrich等，1984,Nature,307：418-425；J.Downward等，1984,Nature,307：521-527；C.R.Carlin等，1986,Mol.Cell.Biol.,6：257-264；F.L.V.Mayes和M.D.Waterfield,1984,The EMBO J.,3：531-537)。
EGF或TGF-α与EGFR的结合可激活信号转导途径，从而引起细胞增殖。EGFR分子的二聚、构象变化和内化起到传递胞内信号的作用，由此引起细胞生长调控(G.Carpenter和S.Cohen,1979,Ann.Rev.Biochem.,48：193-216)。影响生长因子受体功能调控或导致受体及/或配体的过表达的基因变异可引起细胞增殖。另外，已确定EGFR在细胞分化、细胞运动性增强、蛋白质分泌、新生血管形成、癌细胞的浸润、转移及其针对化学治疗剂和放疗的抵抗性中起到一定作用(M.J.Oh等，2000,Clin.Cancer Res.,6：4760-4763)。
与EGFR特异性结合的抗体的例子包括西妥昔单抗等。西妥昔单抗是与EGFR结合、且可抑制EGFR功能的单克隆抗体。
西妥昔单抗用于结肠癌、头颈癌等的治疗。西妥昔单抗也因其ADCC活性而被期待呈现抗肿瘤效果。
利妥昔单抗是包含抗人CD20嵌合人-鼠抗体的单克隆抗体，其用于治疗非霍奇金淋巴瘤、B细胞淋巴增生性障碍、肉芽肿性血管炎、显微镜下多血管炎等。并且，利妥昔单抗也具有高ADCC活性。
人叶酸受体1(FOLR1)是一种具有高叶酸亲和力的GPI锚定膜蛋白，其具有与细胞增殖或存活相关的重要功能[Int J Cancer,2006.119(2)：p.243-50.]。FOLR1在肾脏、肺、肠等的正常组织中呈限制性表达模式[Anal Biochem、2005。338(2)：p。284-93.]。
表达区域位于内腔。并且，FOLR1在癌组织中的表达并不限于内腔，在例如卵巢癌[Anal Biochem,2005.338(2)：p.284-93.,J Thorac Oncol,2012.7(5)：p.833-840.,JThorac Cardiovasc Surg,2001.121(2)：p.225-33.]、肾癌[Anal Biochem,2005.338(2)：p.284-93.]、肺癌[Anal Biochem,2005.338(2)：p.284-93.,J Thorac Oncol,2012.7(5)：p.833-840.]、乳腺癌[Anal Biochem,2005.338(2)：p.284-93.]、间皮瘤[J ThoracCardiovasc Surg,2001.121(2)：p.225-33.]等各种癌症中观察到其高水平表达。
具体而言，已报道了在卵巢癌中，FOLR1表达水平与恶性程度、病程及预后有关[Int J Cancer,1997.74(2)：p.193-8.,Int J Cancer,1998.79(2)：p.121-6.]。此外，还报道了较之健康供体的血清而言，卵巢癌患者血清中的可溶性FOLR1显著升高[PLoS One,2009.4(7)：p.e6292.]。因此，FOLR1是一种有望用于癌症治疗的靶分子。
IL-3Rα是IL-3受体的α链，其属于细胞因子受体家族，作为IL-3的配体而呈现较弱的亲和力。通过与其β链(CD131，在下文中亦称为IL-3Rβ)形成杂受体，IL-3受体具备强力结合，并将例如生长、分化等的信号经由胞内区而传递至细胞内。IL-5受体α链和GM-CSF受体α链共有同样的β链。
IL-3Rα为单次跨膜的I型膜蛋白，已知其基于下述序列，所述序列中，IL-3结合位点和III型纤连蛋白(fibronectin)位点存在于膜外区。已知在膜内区中不存在能够传递信号的结构。尽管尚未对IL-3Rα的三维结构进行分析，但可以推测，鉴于形成重要结构S-S键的半胱氨酸残基的位置在大多数情况下是保守的，各家族的细胞因子受体结构相似。已经对同一细胞因子受体中的IL-13受体α链、IL-4受体α链和GM-CSF受体α链的晶体结构进行了分析。基于这些细胞因子受体家族的信息可以推测，IL-3Rα的膜外区大致分成3个结构域(A-B-C结构域)。识别人IL-3Rα的A结构域的抗体7G3可阻断IL-3信号转导是已知的[Sun等，Blood,87:83(1996)]。另外，已报道了欠缺A结构域的IL-3Rα分子的表达[Chen等，J BiolChem,284：5763(2009)]]，毋庸置疑，识别A结构域的抗体无法识别欠缺A结构域的IL-3Rα。另外，认为C结构域是IL-3Rα分子的根结构(root)，其很可能在三维空间上抑制IL-3Rβ与IL-3Rα的缀合。
IL-3是IL-3Rα的唯一已知配体。已知IL-3是促进以下群落形成的造血因子：红细胞、巨核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞和单核细胞系统细胞(monocyte system cell)。已知IL-3也刺激具有多能性的前体细胞，但IL-3并不促进具有自主复制能力的不成熟干细胞的分化，而是促进定向分化的前体细胞的分化。
已知IL-3Rα与β链形成杂二聚体，将IL-3信号经由丝氨酸/苏氨酸磷酸化途径转导至细胞内，由此参与骨髓细胞的生长和分化。已知IL-3Rα在造血前体细胞中的粒细胞-巨噬细胞祖细胞(GMP)或共同髓系祖细胞(CMP)中表达，并且经由IL-3信号转导而诱导它们分化成嗜中性粒细胞和巨噬细胞系统。另一方面，已报道位于CMP下游的巨核细胞-红细胞祖细胞(MEP)不表达IL-3Rα，这不同于也位于CMP下游的GMP。
关于AML干细胞，Bonnet和Dick报道了AML干细胞存在于CD34阳性CD38阴性组分中(Bonnet等，Nat Med,1997；3：730)。此外，Jordan等人将AML干细胞与正常干细胞的同一组分(CD34阳性CD38阴性)进行比较，发现IL-3Rα在AML干细胞中高水平表达(Jordan等，Leukemia,2000；14：1777)。此后，也有多篇报告报道了IL-3Rα极可能作为AML干细胞及白血病干细胞的标志物(Haematologica,2001；86:1261，及LeukLymphoma,2006；47:207)。对包括白血病在内的癌症的治疗中，在尽可能不伤害正常细胞的情况下仅除去癌细胞是重要的，可以认为，IL-3Rα在正常干细胞和白血病干细胞中的表达差异可应用于以白血病干细胞作为靶标的治疗。
关于与IL-3Rα形成杂二聚体的IL-3Rβ，并没有IL-3Rβ在白血病干细胞中高水平表达的报道，而在将白血病干细胞和正常干细胞中的mRNA表达进行实际比较的微阵列中，并未将IL-3Rβ鉴定为在白血病干细胞中表达上升的分子(Majeti等，Proc Natl Acad SciUSA.2009；106:3396)。
依赖于IL-3的白血病细胞的存在是长期已知的，以往的研究聚焦于在白血病细胞中居于大多数的母细胞。根据关于白血病干细胞的近期研究，白血病干细胞可通过尽可能地抑制自身生长来获得抗肿瘤剂抗性。另外，认为IL-3反应性母细胞具有高增殖能力，从而可推测，这样的细胞在使用抗肿瘤剂的常规治疗中是有效的。
作为以IL-3R受体作为靶标的候选药剂，长期以来，将IL-3自身施予至造血功能不全的患者，但其并未因此成为药物。向IL-3添加白喉毒素而成的融合蛋白的临床试验正在进展中，其旨在将白血病作为目标疾病。至于白喉毒素与IL-3的融合产物，其并不适合作为以IL-3Rα的表达特异性上升的细胞作为靶标的药剂，其原因在于，鉴于IL-3的性质，IL-3与IL-3Rα和β形成的杂蛋白质紧密结合，而非仅与IL-3Rα紧密结合。另一方面，作为以IL-3R作为靶标的候选药剂，已报道了IL-3Rα人小鼠嵌合抗体7G3的第一阶段的结果(非专利文献19)。作为AML疗法的机制，7G3嵌合抗体的使用目的在于阻断IL-3信号转导，因此，该药剂并非以除去IL-3Rα阳性细胞为目的。并且，尽管已知一些其他的IL-3Rα抗体(9F5(BectonDickinson)、6H6(SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY)和AC 145(Miltenyi-Biotech))，但这些抗体并不具有除去高水平表达IL-3Rα的细胞的能力。
然而，已报道了具有除去高水平表达IL-3Rα的细胞的能力的单克隆抗体(WO2010/126066)。
TIM-3基因家族由8种小鼠基因和3种人类基因组成，上述各基因分别位于11号染色体及染色体5q33[Hafler DA等，JExp Med.205：2699-701(2008)]。已知这些基因区段与自身免疫疾病及过敏性疾病有关。TIM蛋白是一种I型跨膜蛋白，其具有结构保守性免疫球蛋白可变(IgV)结构域和黏蛋白(mucin)结构域。
认为TIM蛋白在T细胞上特异性表达，并且直接调控T细胞活性，但近期也有关于TIM-3蛋白在抗原呈递细胞中的表达及其功能的报道[Anderson AC等，Science 318：1141-3(2007)]。根据晶体结构分析，TIM蛋白具有保守型蛋白质结构，并在IgV结构域中具有配体结合位点。
TIM-3被鉴定为在小鼠Th1细胞而非Th2细胞上特异性表达的的分子[Monney L等，Nature 415：536-41(2002)]。TIM-3的DNA序列、氨基酸序列和三维结构可通过公开数据库获得，例如GenBank登录号NM_032782和NM_134250。TIM-3也被称为HAVCR2。
在人类中，与小鼠类似地，TIM-3在T细胞及例如巨噬细胞和树突状细胞等吞噬细胞上表达。TIM-3与蛋白配体(例如，半乳糖凝集素9)可经由细胞凋亡诱发机制而抑制Th1应答，由此导致例如外周耐受性的诱导。
通过利用siRNA降低人TIM-3的表达、或利用阻断抗体抑制人TIM-3，可增加来自CD4阳性T细胞的干扰素γ(IFN-γ)分泌，其证实了TIM-3在人T细胞中的抑制作用。在吞噬细胞中，TIM-3也作为识别凋亡细胞的受体而发挥作用。
针对来自自身免疫疾病患者的临床样本的分析显示，TIM-3不在CD4阳性细胞中表达。尤其在来自多发性硬化症患者的脑脊髓液的T细胞克隆中，TIM-3的表达水平较之正常健康人类而言更低，而IFN-γ的分泌水平则更高[Koguchi K等，J Exp Med.203：1413-8(2006)]。也有关于TIM-3与过敏性疾病或哮喘的关系的报道(WO96/27603和WO2003/063792)。
根据针对来自急性髓细胞白血病(后文中也称为“AML”)患者的造血干细胞和正常造血干细胞进行的微阵列分析，TIM-3在AML干细胞中表达，因此，该分析表明，TIM-3与血液恶性肿瘤有关[Majeti R等，Proc Natl Acad Sci USA 2009Mar 3；106(9)：3396-401.；及WO2009/091547]。
迄今为止确立的抗TIM-3单克隆抗体的例子包括抗人TIM-3大鼠单克隆抗体(克隆344823，R&D Systems制)、抗人TIM-3小鼠单克隆抗体(克隆F38-2E2、R&D Systems制)、及具有ADCC活性的抗人TIM-3小鼠单克隆抗体(WO2011/155607中的抗体512、抗体644、抗体4545和抗体4177)。
以下，将上述式(I)或(II)表示的化合物分别称为化合物(I)或(II)。这也同样适用于其他具有不同通式编号的化合物。
式(I)和式(II)中各基团的定义如下。
(i)低级烷基和低级烷氧基的低级烷基部分的例子包括具有1至10个碳原子的直链或支链烷基。其更具体的例子包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、新戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基等。
(ii)卤素是指氟原子、氯原子、溴原子、及碘原子中的各原子。
(iii)芳香族杂环基的例子包括：5元或6元的单环芳香族杂环基，其含有至少一个选自氮原子、氧原子、硫原子中的杂原子；将3元至8元环稠合而成的双环芳香族杂环基，其含有至少一个选自氮原子、氧原子、硫原子中的杂原子；将3元至8元环稠合而成的三环芳香族杂环基，其含有至少一个选自氮原子、氧原子、硫原子中的杂原子；等等。其更具体的例子包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、吡啶基-1-氧化物基团(pyridyl-1-oxide)、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、异吲哚基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、噁唑并嘧啶基、噻唑并嘧啶基、吡咯并吡啶基、吡咯并嘧啶基、咪唑并吡啶基、咪唑并嘧啶基、三唑并吡啶基、三唑并嘧啶基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基(phthalazinyl)、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基(naphthyridinyl)等。其中，优选的双环芳香族杂环基为苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、异吲哚基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、噁唑并嘧啶基、噻唑并嘧啶基、吡咯并吡啶基、吡咯并嘧啶基、咪唑并吡啶基、咪唑并嘧啶基、三唑并吡啶基、三唑并嘧啶基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基等。
(iv)任选被取代的低级烷基的取代基可以相同或不同，这些基团的取代基数量为1至能够取代的最高数量，优选为1至3，取代基的例子包括选自由卤素、羟基、氰基、羧基、氨基甲酰基等组成的组中的取代基。
(v)任选被取代的芳香族杂环基的取代基可以相同或不同，这些基团的取代基数量为1至能够取代的最高数量，优选为1至3，取代基的例子包括选自由卤素、羟基、氰基、羧基、氨基甲酰基、任选被取代的芳基(任选被取代的芳基的取代基的例子包括卤素、羟基、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-10烷基等)、任选被取代的芳香族杂环基(任选被取代的杂环基的取代基的例子包括卤素、羟基、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-10烷基等)组成的组中的取代基。
上述(iv)和(v)例示的基团中，芳基的例子包括单环芳基和由2个以上的环稠合而成的稠合芳基(fused aryl)。其更具体的例子包括具有6至14个成环碳原子的芳基，例如苯基、萘基、茚基、及氨茴基(anthranil)。C1-10烷基与上述低级烷基中的定义相同。卤素与上述卤素的定义相同。芳香族杂环基与上述芳香族杂环基的定义相同。
化合物(I)和(II)的药学上允许的盐的例子包括药学上允许的酸加成盐、金属盐、铵盐、有机胺加成盐、氨基酸加成盐等。酸加成盐包括例如盐酸盐、硫酸盐和磷酸盐等无机酸盐；有机酸盐包括例如乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、天冬氨酸盐及谷氨酸盐。金属盐包括例如钠盐、钾盐等碱金属盐；镁盐、钙盐等；及铝盐、锌盐等。铵盐包括铵、四甲基铵等的盐。有机胺加成盐包括吗啉盐、哌啶盐等。氨基酸加成盐包括赖氨酸盐、甘氨酸盐、苯丙氨酸盐等。
需要获得化合物(I)和(II)的盐时，若化合物(I)和(II)以盐的形式获得，则可直接将盐纯化，如果化合物(I)和(II)以游离形式获得，则可将其溶解或分散于适宜的溶剂中，然后添加酸或碱，由此形成盐。
化合物(I)和(II)中可存在位置异构体、几何异构体或光学异构体。包括这些异构体在内的所有可能的异构体、及这些异构体以任意比例混合而成的混合物均可用作本发明的IDO抑制剂。
化合物(I)和(II)或它们的药学上允许的盐可以以与水或各种溶剂形成的加合物的形式存在。这些加合物也可用作本发明的IDO抑制剂。
化合物(I)、(II)和具有ADCC活性的抗体可能无法通过单次施予获得充分的治疗结果，并且，高剂量施予上述化合物可能会导致副作用。
通过将上述化合物(I)或(II)与具有ADCC活性的抗体组合，本发明可提供较之施予任一种化合物而言更好的治疗结果，并且，上述化合物(I)或(II)中的任一者和具有ADCC活性的抗体可以以低剂量进行使用。
因此，本发明不仅可提供充分的治疗效果，还可以减轻副作用。
本发明中的化合物(I)和(II)或它们的药学上允许的盐可基于例如WO2011/42316和WO2010/05958中记载的方法合成。
本发明中使用的化合物(I)和(II)的例子各包括化合物A1至A5、化合物B1等等。
以下表A中，Me表示甲基。
[化学式33]
表A
本发明的抗体与CCR4、HER2、人CD20、EGFR、FOLR1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合。
本发明中的ADCC活性为下述细胞溶解反应，所述反应中，与CCR4、HER2、人CD20、EGFR、FOLR1、人IL-3Rα或人TIM-3于细胞表面结合的抗体主要在自然杀伤细胞(后文中称为NK细胞)的表面介由Fc部而与FcγRIIIa结合，结果，由NK细胞释放的例如穿孔素和粒酶等细胞毒性分子引起细胞溶解反应[Clark M,Chemical Immunology,65,88(1997)；Gorter A等，Immunol.Today,20,576(1999)]。
本发明中使用的抗体与CCR4、HER2、人CD20、EGFR、FOLR1、人IL-3Rα、人TIM-3的特异性结合可通过能够考察特定抗原、和与该特定抗原结合的抗体的方法确认，例如，使用固相CCR4、HER2、人CD20、EGFR、FOLR1、人IL-3Rα或人TIM-3的酶联免疫吸附分析(ELISA)、Western印迹法或免疫组织化学(IHC)或已知的免疫检测方法、或针对CCR4表达细胞、HER2表达细胞、人CD20表达细胞、EGFR表达细胞、FOLR1表达细胞、人IL-3Rα表达细胞或人TIM-3表达细胞的荧光细胞染色。
与人叶酸受体1(FOLR1)特异性结合的抗体记载于WO2014/087863和WO2015/186823中。与人IL-3Rα特异性结合的抗体为记载于WO2010/126066中。与人TIM-3特异性结合的记载于WO2011/155607中。
本发明中使用的以下抗体可基于例如WO2014/087863中记载的方法制备：
(A1)与FOLR1特异性结合的抗体；
(A2)与FOLR1特异性结合的单克隆抗体；及
(A3)选自以下(a1)～(c1)中的与FOLR1特异性结合的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
本发明中使用的以下抗体可基于例如WO2010/126066中记载的方法制备：
(B1)与人IL-3Rα特异性结合的抗体；
(B2)如(B1)所述的抗体，其不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合；
(B3)如(B2)所述的抗体，其包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列；及
(B4)如(B2)所述的抗体，其包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
本发明中使用的以下抗体可基于例如WO2011/155607中记载的方法制备：
(C1)与人TIM-3特异性结合的抗体；
(C2)与人TIM-3特异性结合的单克隆抗体，其与人TIM-3的胞外区结合；
(C3)如(C2)所述的单克隆抗体，其为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(C4)如(C2)所述的单克隆抗体，其为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
本发明的IDO抑制剂和与CCR4、HER2、人CD20或EGFR特异性结合的抗体的组合可用于治疗任何表达CCR4、HER2、人CD20或EGFR的肿瘤。此外，本发明的IDO抑制剂和与FOLR1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的组合也可用于治疗肿瘤。
与FOLR1相关的肿瘤的例子包括血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤、胰腺癌等。与FOLR1相关的肿瘤的优选例子包括卵巢癌。
与人IL-3Rα相关的肿瘤的例子包括急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤、卡斯特雷曼氏症等。与人IL-3Rα相关的肿瘤的优选例子包括急性髓细胞白血病(AML)。
与人TIM-3相关的肿瘤的例子包括血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、胰腺癌等。与人TIM-3相关的肿瘤的优选例子包括急性髓细胞白血病(AML)。
肿瘤的例子包括造血肿瘤、卵巢癌、乳腺癌、子宫体癌、宫颈癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌、胃癌、食道癌、肝癌、胆管癌、结肠癌、直肠癌、胰腺癌、肺癌、头颈癌、骨肉瘤、黑色素瘤、及脑瘤。
造血肿瘤的例子包括急性白血病、慢性白血病、霍奇金氏病(或霍奇金淋巴瘤)、非霍奇金氏病(或非霍奇金淋巴瘤)等。
急性白血病的例子包括急性淋巴细胞性白血病等，急性淋巴细胞性白血病的例子包括前体B细胞急性淋巴细胞性白血病、前体T细胞急性淋巴细胞性白血病等。
慢性白血病的例子包括慢性淋巴细胞性白血病等。
非霍奇金氏病的例子包括T细胞及NK细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤等，T细胞及NK细胞淋巴瘤的例子包括前体T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤、成熟T细胞肿瘤等。
B细胞淋巴瘤的例子包括伯基特淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤等。
成熟T细胞肿瘤的例子包括T细胞幼淋巴细胞性白血病、T细胞大颗粒淋巴细胞白血病、塞扎里综合征(Sezary syndrome)、蕈样肉芽肿、原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤、肠病型T细胞淋巴瘤、肝脾γδT细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤(anaplasticlarge cell lymphoma)、成人T细胞白血病/淋巴瘤等。
霍奇金淋巴瘤的例子包括结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤(nodularlymphocyte predominant Hodgkin’s lymphoma)、经典型霍奇金淋巴瘤等。经典型霍奇金淋巴瘤的例子包括结节硬化型霍奇金淋巴瘤、淋巴细胞丰富型经典型霍奇金淋巴瘤(lymphocyte-rich classical Hodgkin’s lymphoma)、混合细胞型霍奇金淋巴瘤(mixedcellularity Hodgkin’s lymphoma)、淋巴细胞消减型霍奇金淋巴瘤等。
与CCR4、HER2、人CD20、EGFR,FOLR1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的剂量取决于期望的治疗效果、施予途径、治疗时间、年龄、体重等。与CCR4、HER2、人CD20、EGFR、FOLR1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的成人剂量通常为每剂(per dose)0.1至100mg/kg或0.1至400mg/m2。优选的是，包含和与CCR4、HER2、人CD20、EGFR、FOLR1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体一同施予的IDO抑制剂的药剂等于或少于临床实践中的单独施予情况。
与CCR4、HER2、人CD20、EGFR、FOLR1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的施予频率为每2周1次或每周1次。
本发明的IDO抑制剂和抗体的组合的效果可利用基于以下“2.4试验步骤”的方法进行考察。可通过利用该方法、以及将单独施予IDO抑制剂与施予IDO抑制剂和抗体的组合的效果进行比较，从而对组合的效果进行评价。
所使用的培养细胞的例子包括TL-Om1细胞。TL-Om1细胞来自患有成人T细胞白血病的患者，可用作人类成人T细胞白血病的模型。
所使用的培养细胞的例子包括HH细胞。HH细胞来自患有皮肤T细胞淋巴瘤的患者，可用作人类成人T细胞白血病的模型。
所使用的培养细胞的例子包括SK BR-3细胞。SK BR-3细胞来自患有乳腺癌的患者，可用作乳腺癌的模型。
所使用的培养细胞的例子包括Raji细胞。Raji细胞来自患有伯基特淋巴瘤的患者，可用作伯基特淋巴瘤的模型。
所使用的培养细胞的例子包括A431细胞。A431细胞来自患有表皮样癌(epidermoid carcinoma)的患者，可用作EGFR阳性肿瘤的模型。
所使用的培养细胞的例子包括SKOV3细胞。SKOV3细胞来自患有卵巢癌的患者，可用作卵巢癌的模型。
所使用的培养细胞的例子包括KG-1细胞。KG-1细胞来自患有急性髓细胞白血病的患者，可用作急性髓细胞白血病的模型。
所使用的培养细胞的例子包括EoL-1细胞，其是EoL-1/人TIM-3的亲本株。EoL-1细胞来自患有急性髓细胞白血病的患者，EoL-1/人TIM-3可用作急性髓细胞白血病的模型。只要本发明的组合是例如化合物(I)、(II)或它们的药学上允许的盐等IDO抑制剂和与CCR4、HER2、人CD20、EGFR、FOLR1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的组合，即可以以单剂(混合物)或多种制剂的组合的方式使用、施予或制备上述组合。
单剂(混合物)或制剂期望具有适合口服施予、或例如注射等非肠胃施予的单元剂型(unit dose form)。使用或施予多种制剂的组合时，可同时使用、或间隔地分开使用这些制剂。
对于制剂而言，除了活性成分以外，可进一步使用药学上允许的稀释剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、表面活性剂、水、生理盐水、植物油、助溶剂、等渗剂、防腐剂、抗氧化剂等，通过常规方法进行制造。
制备片剂时，可以以通常方式使用例如下述成分：例如乳糖等赋形剂、例如淀粉等崩解剂、例如硬脂酸镁等润滑剂、例如羟丙基纤维素等粘合剂、例如脂肪酸酯等表面活性剂、例如甘油等增塑剂，等等。
制备注射剂时，可以以通常方式使用下述成分：例如，水、生理盐水、植物油、溶剂、助溶剂、等渗剂、防腐剂、抗氧化剂等。
将化合物(I)、(II)或它们的药学上允许的盐用于上述目的时，可进行口服施予、或以注射液等的形式进行非肠胃施予。药剂的有效剂量和施予次数取决于施予形式、患者的年龄、体重、症状等。化合物(I)、(II)或它们的药学上允许的盐的每日剂量通常为0.01至100mg/kg，优选为0.08至100mg/kg。
试验例1
1概述
在本研究中，我们使用人外周血单核细胞(PBMC)或经纯化的NK细胞，针对IDO1活性对于抗体依赖性细胞毒性(ADCC)的影响进行了验证。在ADCC分析之前，将人PBMC在KATO-III细胞培养物的条件培养基中进行孵育。为了验证IDO1活性的影响，向KATO-III细胞培养物中添加了IFN-γ及/或IDO1抑制剂(化合物A1和化合物B1)。
将人PBMC或经纯化的NK细胞在含有经IFN-γ刺激的KATO-III细胞的条件培养基中进行预孵育时，较之未经IFN-γ刺激的情况而言，莫加木珠单抗的ADCC减弱。该减弱现象可由化合物A1或化合物B1消除，从而表明ADCC的减弱是由IDO1活性诱发的。在使用曲妥珠单抗、利妥昔单抗和西妥昔单抗作为ADCC诱导抗体时，观察到相似的结果。
2材料和方法
2.1试验和对照物
2.1.1化合物A1
得到WO2011/142316中的实施例62的化合物64A作为化合物A1，并将化合物A1以100mmol/L的浓度溶解于二甲基亚砜(DMSO)中，制成储备溶液(stock solution)，在使用前于冷冻条件下保存。将化合物A1的储备溶液用分析培养基(2.4.2部分)稀释。
2.1.2化合物B1
得到WO2010/005958中实施例1的“4-({2-[(氨基磺酰基)氨基]乙基}氨基)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(4-({2-[(aminosulfonyl)amino]ethyl}amino)-N-(3-bromo-4-fluoropheny l)-N'-hydroxy-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide)”作为化合物B1。将化合物B1以100mmol/L的浓度溶解于DMSO中，制成储备溶液，在使用前于冷冻条件下保存。将化合物B1的储备溶液用分析培养基(2.4.2部分)稀释。
2.1.3莫加木珠单抗
通过与WO2011030841中记载的KM8760制备方法相似的方法制备莫加木珠单抗。将溶液(9.7mg/mL)用分析培养基(2.4.2部分)稀释。
2.1.4曲妥珠单抗
曲妥珠单抗(赫赛汀(Herceptin)(R)，440mg，批号：N3566B01B2060)购自F.Hoffmann-La Roche。将溶液(9.7mg/mL)用分析培养基(2.4.2部分)稀释。
2.1.5利妥昔单抗
利妥昔单抗(美罗华(Mabthera)(R)，10mg/mL，批号：B6061B01)购自F.Hoffmann-La Roche。将溶液(10mg/mL)用分析培养基(2.4.2部分)稀释。
2.1.6西妥昔单抗
西妥昔单抗(爱必妥(ERBITUX)(R)，5mg/mL，批号：MG1201)购自Merck Serono。将溶液(5mg/mL)用分析培养基(2.4.2部分)稀释。
2.2用于犬尿氨酸和色氨酸的定量的标准品、内标和试剂
2.2.1标准品
L-色氨酸(Trp，批号：PDQ6460)购自Wako Pure Chemical Industries。L-犬尿氨酸(Kyn，批号：BCBJ6934V)购自Sigma-Aldrich。
将Trp和Kyn以10mmol/L的浓度溶解于水中，制备储备溶液。将储备溶液在使用前于4℃保存。
2.2.2内标
L-犬尿氨酸(环-D4(ring-D4))(d4-Kyn，批号：L-KYNU-D4-005)购自Buchem B.V。L-色氨酸(吲哚-D5，98％)(d5-Trp，批号：I-15891)购自Cambridge Isotope Laboratories。将d4-Kyn和d5-Trp以10mmol/L的浓度溶解于水中，制备储备溶液。将储备溶液于4℃保存。将d4-Kyn和d5-Trp的储备溶液用水稀释后混合，由此制备IS溶液(含有0.6μmol/L的d4-Kyn和2μmol/L的d5-Trp)。将IS溶液在使用前于4℃保存。在即将使用之前，将IS溶液与三氟乙酸(TFA)混合，制备IS/TFA溶液(5/1，v/v)。
2.2.3试剂
HPLC级别的甲醇、TFA和甲酸购自Wako Pure Chemical Industries,Ltd。除非另有说明，则使用的其他所有试剂均为分析级别。
2.3试验体系
人胃癌细胞系KATO-III(86093004)自DS Pharma Biomedical Co.,Ltd获得。人类成人T细胞白血病/淋巴瘤细胞系TL Om1(TKG0289)自生物医学研究细胞资源中心(CellResource Center for Biomedical Research)获得。人皮肤T细胞淋巴瘤细胞系HH(CRL-2105)、人乳腺癌细胞系SK-BR-3(HTB30)和人淋巴瘤细胞系Raji(CCL-86)自ATCC获得。人表皮样癌细胞系A431(JCRB0004)自JCRB获得。
使用含有10vol％热灭活胎牛血清(heat-inactivated fetal bovine serum)(Invitrogen，商品编号：10099-141，批号：1108863)和1vol％青霉素-链霉素(nacalaitesque，商品编号：26253-84)的RPMI1640(Invitrogen，商品编号：11875-093)对人胃癌细胞系KATO-III(86093004)进行继代培养。使用含有20vol％热灭活胎牛血清和1vol％青霉素-链霉素的RPMI1640对人类成人T细胞白血病/淋巴瘤细胞系TL-Om1(TKG 0289)进行继代培养。使用含有10vol％热灭活胎牛血清、10mmol/L HEPES(nacalai tesque，商品编号：17557-94)、1mmol/L丙酮酸钠(Invitrogen，商品编号：11360-070)和1vol％青霉素-链霉素的RPMI1640对人皮肤T细胞淋巴瘤细胞系HH(CRL-2105)进行继代培养。使用含有10vol％热灭活胎牛血清和1vol％青霉素-链霉素的McCoy’s 5A(Invitrogen，商品编号：16600-082)对人乳腺癌细胞系SK-BR-3(HTB30)进行继代培养。使用含有10vol％热灭活胎牛血清、4.5g/L D-(+)-葡萄糖(Sigma-Aldrich，商品编号：G8769)、10mmol/L HEPES和1vol％青霉素-链霉素的RPMI1640对人淋巴瘤细胞系Raji(CCL-86)进行继代培养。使用含有10vol％热灭活胎牛血清和1vol％青霉素-链霉素的DMEM(Invitrogen，商品编号：11995-065)对人表皮样癌细胞系A431(JCRB0004)进行继代培养。
在条件培养基的制备中，所有细胞均在含有10vol％热灭活透析胎牛血清(Invitrogen，商品编号：30067334)的RPMI1640中进行培养。
来自三个个体的冷冻人外周血单核细胞(PBMC)购自Allcells[批号：A3457(供体1)和批号：A3951(供体2)]和Precision Bioservices[批号：13096(供体3)]，并分别进行使用。
2.4试验步骤
2.4.1条件培养基的制备
将KATO-III细胞(1.25×106个细胞)用25ng/mL重组人IFN-γ处理。添加化合物A1或化合物B1，使最终浓度为100nmol/L。将细胞在CO2培养箱中进行孵育。3天后，通过离心分离细胞和上清液。将上清液用作条件培养基。将条件培养基用于人PBMC或NK细胞的孵育(2.4.2部分)以及Kyn和Trp的测定(2.4.4部分)。Kyn和Trp的浓度示于图1。
条件培养基1：KATO-III细胞
条件培养基2：KATO-III细胞+IFN-γ
条件培养基3：KATO-III细胞+IFN-γ+化合物A1
条件培养基4：KATO-III细胞+IFN-γ+化合物B1
2.4.2ADCC
使用NK分离试剂盒(Miltenyi Biotec，商品编号：130-092-657)和autoMACS装置从人PBMC中分离NK细胞。使用条件培养基(2.4.1部分)，在CO2培养箱中对人PBMC或NK细胞进行培养。7天后，收集细胞并进行计数，将其用作效应细胞。将用作效应细胞的PBMC和NK细胞悬浮在分析培养基(含有10vol％热灭活胎牛血清和1vol％青霉素-链霉素的RPMI1640)中，使其为5×106个细胞/mL(PBMC)或4×105个细胞/mL(NK细胞)。对于TL-Om1细胞、HH细胞、SK-BR-3细胞、Raji细胞或A431细胞(1×106个细胞/各细胞系)，使用1.85MBq的Na2 51CrO4(PerkinElmer)，在CO2培养箱中于37℃标记超过1小时。将细胞用分析培养基洗涤3次。将经放射性标记的细胞用作靶细胞，悬浮于5mL分析培养基中，使其为2×105个细胞/mL。将莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗用分析培养基从30μg/mL至0.3μg/mL(最终浓度：10μg/mL至0.1μg/mL)以10倍进行系列稀释。将50μL靶细胞(1×104个细胞)接种至96孔圆底培养板中，与50μL上述中制备的抗体稀释液和50μL效应细胞(2.5×105个细胞)混合。将培养板于4℃短暂离心，在CO2培养箱中于37℃孵育约4小时。于4℃离心5分钟后，将上清液移至LumaPlate(PerkinElmer)，充分干燥。使用微量培养板闪烁计数器(microplatescintillation counter)(TopCount NXT，PerkinElmer)测量放射性(radioactivity)。
2.4.3NK细胞的流式细胞分析
使用条件培养基，将人PBMC在CO2培养箱中培养。7天后，收集细胞，并利用FixableViability Dye eFluor(R)506(eBioscience，商品编号：65-0866-14)进行染色。用MACS缓冲液[autoMACS洗涤溶液(Miltenyi Biotec，商品编号：130-091-222)，含有1w/v％BSA]洗涤2次后，利用PerCP抗人CD3抗体(Biolegend，商品编号：300428)、FITC抗人CD16抗体(BDPharmingenTM，商品编号：556618)和PE/Cy7抗人CD56抗体(BD PharmingenTM，商品编号：557747)将细胞染色。用MACS缓冲液洗涤2次后，将细胞悬浮于200μL的MACS缓冲液中，利用FACSVerseTM(BD Biosciences)、在FACSuite软件的辅助下进行分析。利用FlowJo软件(7.6.5版，FlowJo)测定CD3-细胞中的CD16+CD56+细胞(NK细胞)比例。所有染色过程均按照制造商的说明实施。CD3-细胞中的CD16+CD56+细胞比例示于图2的A、B、C和D。
2.4.4样品中Kyn和Trp的定量
2.4.4.1样品预处理
将50μL条件培养基(2.4.1部分)和60μL冰冷的IS/TFA溶液(5/1，v/v)混合，然后将混合物离心(5000×g，室温，10分钟)。将60μL上清液和50μL的0.05vol％甲酸/甲醇＝75/25(v/v)混合，将得到的混合物注入液相色谱串联质谱(LC/MS/MS)装置中。
2.4.4.2校准用标准样品(calibration standard sample)的制备
通过用水稀释Trp和Kyn的储备溶液，制备校准用标准溶液。校准用标准溶液的浓度范围为0.1至500μmol/L(Trp)和0.05至200μmol/L(Kyn)，将其于4℃保存。关于空白样品，使用水代替校准用标准溶液。通过与2.4.4.1部分的记载相同的步骤对50μL的校准用标准溶液和空白样品进行预处理。
2.4.4.3LC/MS/MS分析
<分析系统>
LC：Agilent 1200(Agilent Technologies)
自动取样器：HTC PAL(CTC Analytics)
MS/MS：API5000(AB SCIEX)
分析软件：Analyst 1.6.1(AB SCIEX)
柱：Atlantis T3(3μm，4.6mm×75mm，Waters)
预过滤器：A-103x(0.5μmUpchurch Scientific)
柱温：室温
<LC条件>
流动相A：0.05vol％甲酸
流动相B：甲醇
<LC条件>
流动相A：0.05vol％甲酸
流动相B：甲醇
[表1]
进样体积：10μL
<MS/MS条件>
电离模式：电喷雾电离，正离子
离子源温度：500℃
检测：多重反应监测
监测离子：
[表2]
2.5原始数据分析方法
使用Analyst软件(1.6.1版，AB SCIEX)计算Trp和Kyn的浓度。根据由校准用标准样品得到的峰面积比(被分析物/IS)，通过最小二乘法线性回归绘制校准曲线[Y＝aX+b；Y，峰面积比；X，浓度；加权系数，1/Y2]。回归分析不包括空白样品。
分别计算样品中的Kyn和Trp的浓度。低于定量下限的数值视为0μmol/L。
根据下式计算细胞毒性百分比：
[数学式1]
细胞毒性％＝(E-S)/(M-S)×100
E为实验释放放射性(experimental released radioactivity)(cpm)，S为通过添加分析培养基代替效应细胞和抗体而得到的自发释放放射性(spontaneous releasedradioactivity)的平均值(cpm)，M为通过添加10vol％的TritonTM X-100(Sigma-Aldrich，商品编号：T9284-100ML)代替效应细胞和抗体而得到的最大释放放射性(maximumreleased radioactivity)的平均值(cpm)。抗体的各浓度下的细胞毒性以三次重复的平均值来表示。
3结果
3.1化合物A1和化合物B1对于Kyn产生和Trp消耗的影响
为了确认KATO-III细胞中的IDO1活性，测定了含有KATO-III细胞培养物的条件培养基中的Kyn和Trp的浓度。如图1A和1B中所示，较之条件培养基1(KATO-III细胞)而言，在条件培养基2(KATO-III细胞+IFN-γ)中观察到Kyn浓度的上升和Trp浓度的下降。将KATO-III细胞用作为IDO1抑制剂的化合物A1(条件培养基3)或化合物B1(条件培养基4)处理时，在IFN-γ的存在下，Kyn产生和Trp消耗被抑制(图1A和1B)。
3.2NK细胞的检测
使用各条件培养基对人PBMC进行孵育后，对NK细胞(CD3-/CD16+/CD56+细胞)的存在进行了确认。如图2中所示，在使用所有条件培养基孵育的PBMC中均检测到了NK细胞。
3.3IDO1活性对于ADCC的影响
为了验证IDO1活性对于ADCC的影响，测定了在各条件培养基中预孵育的人PBMC的ADCC。将来自供体1和供体2的人PBMC在条件培养基2中预孵育时，较之条件培养基1而言，莫加木珠单抗针对TL-Om1细胞的ADCC减弱(图3A和3B)。化合物A1或化合物B1消除了上述减弱，在条件培养基3或4中预孵育的来自供体1和供体2的人PBMC的ADCC几乎与条件培养基1中相同。使用其他的靶细胞和抗体时，观察到了相似的结果；所有经测试的莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗和西妥昔单抗的针对HH细胞、SK-BR-3细胞、Raji细胞和A431细胞的ADCC分别被人PBMC在条件培养基2中的预培养所减弱，而化合物A1或化合物B1消除了这样的减弱(图3B、图4、图5和图6)。
为了确认条件培养基2时的ADCC的减弱并非是由NK细胞在PBMC中的比例下降而导致的，测定了在各条件培养基中进行了预孵育的经纯化的NK细胞的ADCC。与图3相似地，在条件培养基2中预孵育NK细胞时，莫加木珠单抗的ADCC减弱，而化合物A1或化合物B1消除了这样的减弱(图7)。使用利妥昔单抗、Raji细胞和经纯化的人NK细胞时，观察到相似的结果(图8)。
此外，为了考察化合物A1或化合物B1自身对于ADCC的影响，将人PBMC在含有100nmol/L化合物A1或化合物B1的培养基中预孵育7天。如图9中所示，化合物A1或化合物B1并未影响莫加木珠单抗的ADCC。
4考察
本研究的结果表明，IDO1活性减弱了ADCC，而IDO1抑制剂可消除这样的减弱。过往研究中暗示，Trp代谢物、例如Kyn可减少NK细胞数量[J Exp Med.2002；196(4):447-57]。本研究中，在ADCC分析之前，在各条件培养基中进行了预孵育的PBMC中的NK细胞均存活(图2)。
进而，使用经纯化的NK细胞时，观察到ADCC的减弱(图7和8)。这种情况下，对NK细胞数量进行了计数，各组中的相同数量的NK细胞被用于ADCC测定。这些数据表明，可认为由IDO1活性导致的ADCC减弱并非源于NK细胞数量的减少，而是源于对NK细胞功能的抑制。
使用曲妥珠单抗、利妥昔单抗和西妥昔单抗时，观察到了ADCC减弱，这表明，由IDO活性导致的ADCC减弱的发生与抗体形态(非岩藻糖基化IgG1和岩藻糖基化IgG1)无关。
在存在IFN-γ的情况下，KATO-III细胞的条件培养基中观察到了Kyn浓度的上升和Trp浓度的下降(图1)，而Kyn浓度的上升和Trp浓度的下降被化合物A1或化合物B1抑制。此外，化合物A1或化合物B1自身并不影响ADCC(图9)。综上所述，条件培养基中的Kyn产生或Trp消耗将削弱NK细胞功能。
试验例2
5概述
在本研究中，我们使用人外周血单核细胞(PBMC)，针对IDO1活性对于莫加木珠单抗的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)的影响进行了验证。在ADCC分析之前，在存在或不存在IFN-γ的条件下，将人PBMC在亲本KATO-III的条件培养基、或者稳定表达IDO1shRNA或阴性对照shRNA的KATO-III细胞的条件培养基中进行预孵育。
在IFN-γ的存在下将人PBMC在亲本KATO-III的条件培养基、或稳定表达阴性对照shRNA的KATO-III细胞的条件培养基中进行预孵育时，较之不存在IFN-γ的情况而言，人PBMC的莫加木珠单抗的ADCC被减弱。在IFN-γ的存在下将人PBMC在稳定表达IDO1shRNA的KATO-III细胞的条件培养基中预孵育时，ADCC并未被减弱，表明ADCC的减弱是由IDO1活性导致的。
6引言
已知IDO1在肿瘤或微环境中表达，并且在导致肿瘤逃避宿主免疫监控的免疫抑制机制中起到重要的调控作用[Nat Rev Cancer.2009；9(6):445-52]。已报道了色氨酸(Trp)代谢物、例如犬尿氨酸(Kyn)可诱导NK细胞死亡[J Exp Med.2002；196(4):447-57]，并且可通过抑制NK细胞受体表达来减弱NK细胞的细胞毒性[Blood.2006；108(13):4118-25]。因此，IDO1的活性有可能对抗体依赖性细胞毒性(ADCC)造成影响。
本研究中，我们利用IDO1敲低技术针对IDO1活性对于莫加木珠单抗的ADCC的影响进行了验证。
7材料和方法
7.1试验和对照物
7.1.1莫加木珠单抗
通过与WO2011030841中记载的KM8760制备方法相似的方法制备莫加木珠单抗。将溶液(9.7mg/mL)用分析培养基(7.4.5部分)稀释。
7.2用于犬尿氨酸和色氨酸的定量的标准品、内标和试剂
7.2.1标准品
L-色氨酸(Trp，批号：PDQ6460)购自Wako Pure Chemical Industries。L-犬尿氨酸(Kyn，批号：BCBJ6934V)购自Sigma-Aldrich。
将Trp和Kyn以10mmol/L的浓度溶解于水中，制备储备溶液。将储备溶液在使用前于4℃保存。
7.2.2内标
L-犬尿氨酸(环-D4)(d4-Kyn，批号：L-KYNU-D4-005)购自Buchem B.V。L-色氨酸(吲哚-D5，98％)(d5-Trp，批号：I-15891)购自Cambridge Isotope Laboratories。将d4-Kyn和d5-Trp以10mmol/L的浓度溶解于水中，制备储备溶液。将储备溶液于4℃保存。将d4-Kyn和d5-Trp的储备溶液用水稀释后混合，由此制备IS溶液(含有0.6μmol/L的d4-Kyn和2μmol/L的d5-Trp)。将IS溶液在使用前于4℃保存。在即将使用之前，将IS溶液与三氟乙酸(TFA)混合，制备IS/TFA溶液(5/1，v/v)。
7.2.3试剂
HPLC级别的甲醇、TFA和甲酸购自Wako Pure Chemical Industries,Ltd。除非另有说明，则使用的其他所有试剂均为分析级别。
7.3试验体系
人胃癌细胞系KATO-III(86093004)自DS Pharma Biomedical Co.,Ltd获得。TLOm1(TKG0289)自生物医学研究细胞资源中心获得。
使用含有10vol％热灭活胎牛血清(Invitrogen，商品编号：10099-141，批号：1108863)和1vol％青霉素-链霉素(nacalai tesque，商品编号：26253-84)的RPMI1640(Invitrogen，商品编号：11875-093)对人胃癌细胞系KATO-III(86093004)进行继代培养。使用含有20vol％热灭活胎牛血清和1vol％青霉素-链霉素的RPMI1640对人类成人T细胞白血病/淋巴瘤细胞系TL-Om1(TKG 0289)进行继代培养。
在条件培养基的制备中，细胞悬浮在含有10vol％热灭活透析胎牛血清(Invitrogen，商品编号：30067334)的RPMI1640中。冷冻人外周血单核细胞(PBMC)购自Allcells(批号：A3951)。
7.4试验步骤
7.4.1慢病毒感染
将4种不同的以人IDO1作为靶标的shRNA慢病毒颗粒[IDO1shRNA#44、#45、#46和#47(Sigma-Aldrich，商品编号：SHCLNV)]、空载体对照慢病毒颗粒[载体(Sigma-Aldrich，商品编号：SHC001)]或阴性对照shRNA慢病毒颗粒[NegaCTRL shRNA(Sigma-Aldrich，商品编号：SHC202)]接种于培养皿(TAKARA BIO，商品编号：T110A)中。向各培养皿中加入KATO-III细胞(1×105个细胞)，在CO2培养箱中进行孵育。将经感染的细胞使用含有嘌呤霉素(0.25μg/mL)的培养基筛选一星期。通过实时定量PCR(qPCR，7.4.2部分)和Western印迹分析(7.4.3部分)对IDO1的敲低进行分析。
7.4.2qPCR分析
将亲本KATO-III或稳定表达IDO1shRNA、载体或NegaCTRL shRNA的KATO-III细胞(9×103个细胞)用25ng/mL重组人IFN-γ处理。
将细胞在CO2培养箱中孵育约24小时。使用TaqMan(R)Gene Expression Cells-to-CTTM试剂盒(Applied Biosystems，商品编号：AM1728)，根据制造商的说明实施总RNA提取和cDNA合成。然后，使用人IDO1的特异性引物(Applied Biosystems，商品编号：4331182)和HPRT1(Applied Biosystems，商品编号：4448489)，通过qPCR分析cDNA样品。
7.4.3Western印迹分析
将亲本KATO-III或稳定表达IDO1shRNA、载体或NegaCTRL shRNA的KATO-III细胞(5.4×105个细胞)用25ng/mL重组人IFN-γ处理。
将细胞在CO2培养箱中进行孵育。3天后，收集细胞，在冰上使用100μL的裂解缓冲液[NP40细胞裂解缓冲液(Invitrogen，商品编号：FNN0221)，含有1vol％苯甲基磺酰氟溶液(Sigma-Aldrich，商品编号：93482)和1vol％蛋白酶抑制剂混合物(protease inhibitorcocktail)(Sigma-Aldrich，商品编号：P8340)]裂解30分钟以上。将裂解产物(lysate)于4℃以约14000×rpm离心10分钟。使用PierceTM BCA蛋白分析试剂盒(Pierce，商品编号：23225)，测定上清液的蛋白浓度。为了制备SDS-PAGE样品，将各裂解产物使用裂解缓冲液稀释至相同的浓度，与5×样品缓冲液(Thermo Fisher，商品编号：39000)混合，使蛋白质浓度为1.5μg/μL，然后于95℃加热5分钟。将各样品中的蛋白质通过SDS-PAGE分离，转移至聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上。使用PVDF封闭缓冲液[用于IDO1，(TOYOBO，商品编号：NYPBR01)]或封闭缓冲液[用于β-肌动蛋白，(50mmol/L Tris缓冲盐水(pH 8.0)，含有0.05vol％吐温20(TBST)、5w/v％脱脂乳)]对膜进行封闭后，于4℃将膜与用Can Get Signal溶液1(TOYOBO，商品编号：NKB-201)以1/100稀释后的抗IDO抗体(Upstate Biotechnology，商品编号：05-840)或用封闭缓冲液以1/3000稀释后的抗β-肌动蛋白抗体(Sigma-Aldrich，商品编号：061M4808)孵育过夜。用TBST洗涤3次(每次约10分钟)后，将膜与用封闭缓冲液以1/2000稀释后的辣根过氧化物酶联抗小鼠抗体(GE Healthcare，Cat#NA931V)孵育约1小时。用TBST洗涤3次(每次约10分钟)后，将膜浸入SuperSignal(R)West Pico化学发光底物(Chemiluminescent Substrate)(Pierce Biotechnology，商品编号：34080)中。使用荧光图像分析仪LAS3000，按照制造商的说明实施化学发光检测。
7.4.4条件培养基的制备
将亲本KATO-III或稳定表达IDO1shRNA或NegaCTRL shRNA的KATO-III细胞(1.25×106个细胞)用25ng/mL重组人IFN-γ处理。将细胞在CO2培养箱中进行孵育。3天后，通过离心分离细胞和上清液。将上清液用作条件培养基。将条件培养基用于人PBMC的孵育(7.4.5部分)、及Kyn和Trp的测定(7.4.7部分)。
条件培养基1：KATO-III细胞(亲本)
条件培养基2：KATO-III细胞(NegaCTRL shRNA)
条件培养基3：KATO-III细胞(亲本)+IFN-γ
条件培养基4：KATO-III细胞(NegaCTRL shRNA)+IFN-γ
条件培养基5：KATO-III细胞(IDO1shRNA#44)+IFN-γ
条件培养基6：KATO-III细胞(IDO1shRNA#45)+IFN-γ
条件培养基7：KATO-III细胞(IDO1shRNA#46)+IFN-γ
7.4.5ADCC
使用各条件培养基(7.4.4部分)，在CO2培养箱中对人PBMC进行培养。7天后，收集细胞并进行计数，将其用作效应细胞。将用作效应细胞的PBMC悬浮在分析培养基(含有10vol％热灭活胎牛血清和1vol％青霉素-链霉素的RPMI1640)中，使其为5×106个细胞/mL。使用1.85MBq的Na2 51CrO4(PerkinElmer)，将TL-Om1细胞(1×106个细胞)在CO2培养箱中于37℃标记超过1小时。将细胞用分析培养基洗涤3次。将经放射性标记的细胞用作靶细胞，悬浮于5mL分析培养基中，使其为2×105个细胞/mL。将莫加木珠单抗用分析培养基从30μg/mL至0.3μg/mL(最终浓度：10μg/mL至0.1μg/mL)以10倍进行系列稀释。将50μL靶细胞(1×104个细胞)接种至96孔圆底培养板中，与50μL上述中制备的抗体稀释液和50μL效应细胞(2.5×105个细胞)混合。将培养板于4℃短暂离心，在CO2培养箱中于37℃孵育约4小时。于4℃离心5分钟后，将上清液移至LumaPlate(PerkinElmer)，充分干燥。使用微量培养板闪烁计数器(TopCount NXT，PerkinElmer)测量放射性。
7.4.6NK细胞的流式细胞分析
将人PBMC在各条件培养基中培养并在CO2培养箱中孵育。7天后，收集细胞，并利用Fixable Viability Dye eFluor(R)506(eBioscience，商品编号：65-0866-14)进行染色。用MACS缓冲液[autoMACS洗涤溶液(Miltenyi Biotec，商品编号：130-091-222)，含有1w/v％BSA]洗涤2次后，利用PerCP抗人CD3抗体(Biolegend，商品编号：300428)、FITC抗人CD16抗体(BD PharmingenTM，商品编号：556618)和PE/Cy7抗人CD56抗体(BD PharmingenTM，商品编号：557747)将细胞染色。用MACS缓冲液洗涤2次后，将细胞悬浮于200μL的MACS缓冲液中，利用FACSVerseTM(BD Biosciences)、在FACSuite软件的辅助下进行分析。利用FlowJo软件(7.6.5版，FlowJo)测定CD3-细胞中的CD16+CD56+细胞(NK细胞)比例。所有染色过程均按照制造商的说明实施。
7.4.7样品中Kyn和Trp的定量
7.4.7.1样品预处理
将50μL条件培养基(2.4.1部分)和60μL冰冷的IS/TFA溶液(5/1，v/v)混合，然后将混合物离心(5000×g，室温，10分钟)。将60μL上清液和50μL的0.05vol％甲酸/甲醇＝75/25(v/v)混合，将得到的混合物注入液相色谱串联质谱(LC/MS/MS)装置中。
7.4.7.2校准用标准样品的制备
通过用水稀释Trp和Kyn的储备溶液，制备校准用标准溶液。校准用标准溶液的浓度范围为0.1至500μmol/L(Trp)和0.05至200μmol/L(Kyn)，将其于4℃保存。关于空白样品，使用水代替校准用标准溶液。通过与7.4.7.1部分的记载相同的步骤对50μL的校准用标准溶液和空白样品进行预处理。
7.4.7.3LC/MS/MS分析
<分析系统>
LC：Agilent 1200(Agilent Technologies)
自动取样器：HTC PAL(CTC Analytics)
MS/MS：API5000(AB SCIEX)
分析软件：Analyst 1.6.1(AB SCIEX)
柱：Atlantis(3μm，4.6mm×75mm，Waters)
预过滤器：A-103x(0.5μmUpchurch Scientific)
柱温：室温
<LC条件>
流动相A：0.05vol％甲酸
流动相B：甲醇
[表3]
进样体积：10μL
<MS/MS条件>
电离模式：电喷雾电离，正离子
离子源温度：500℃
检测：多重反应监测
监测离子：
[表4]
7.5原始数据分析方法
使用Analyst软件(1.6.1版，AB SCIEX)计算Trp和Kyn的浓度。根据由校准用标准样品得到的峰面积比(被分析物/IS)，通过最小二乘法线性回归绘制校准曲线[Y＝aX+b；Y，峰面积比；X，浓度；加权系数，1/Y2]。回归分析不包括空白样品。
分别计算样品中的Kyn和Trp的浓度。低于定量下限的数值视为0μmol/L。
采用比较Ct法(2-ddCt)[Methods.2001；25(4):402-8]，测定IDO1转录水平在亲本KATO-III细胞和稳定表达IDO1shRNA、载体或NegaCTRL shRNA的KATO-III细胞中的相对变化。
根据下式计算细胞毒性百分比：
[数学式2]
细胞毒性％＝(E-S)/(M-S)×100
E为实验释放放射性(cpm)，S为通过添加分析培养基代替效应细胞和抗体而得到的自发释放放射性的平均值(cpm)，M为通过添加10vol％的TritonTM X-100(Sigma-Aldrich，商品编号：T9284-100ML)代替效应细胞和抗体而得到的最大释放放射性的平均值(cpm)。抗体的各浓度下的细胞毒性以三次重复的平均值来表示。
8结果
8.1KATO-III细胞中的IDO1敲低的验证
为了确认稳定表达IDO1shRNA的KATO-III细胞中的IDO1mRNA的敲低，通过qPCR分析对经IFN-γ处理的KATO-III细胞中的IDO1mRNA水平进行检测。关于引入了IDO1shRNA的细胞，较之亲本KATO-III细胞而言，在全部4种不同的引入了shRNA的细胞中，IDO1的mRNA表达均降低了约80％(图10A)。载体或NegaCTRL shRNA的引入并未影响IDO1mRNA水平(图10A)。接着，通过Western印迹分析针对shRNA静默对于IDO1蛋白水平的影响进行了测定。较之亲本KATO-III细胞而言，在稳定表达IDO1shRNA#44、#45和#46的KATO-III细胞中，IDO1蛋白表达显著下降(图10B)。IDO1蛋白表达在稳定表达IDO1shRNA#47的KATO-III细胞中部分下降(图10B)。载体或NegaCTRL shRNA的引入并未影响IDO1蛋白水平(图10B)。
在后续实验中，我们利用稳定表达IDO1shRNA#44、#45和#46及NegaCTRL shRNA的KATO-III细胞，针对IDO1活性对于ADCC的影响进行了验证。
8.2IDO1敲低对于KATO-III细胞中Kyn产生和Trp消耗的影响
为了验证IDO1敲低对于KATO-III细胞中Kyn产生和Trp消耗的影响，在存在或不存在IFN-γ的情况下，对亲本KATO-III或者稳定表达IDO1shRNA或NegaCTRL shRNA的KATO-III细胞的条件培养基中的Kyn和Trp的浓度进行了测定。
如图11中所示，在不存在IFN-γ的情况下，在亲本KATO-III或稳定表达NegaCTRLshRNA的KATO-III细胞中并未观察到Kyn浓度的上升和Trp浓度的下降。将亲本KATO-III或稳定表达NegaCTRL shRNA的KATO-III细胞用IFN-γ处理时，观察到了Kyn浓度的上升和Trp浓度的下降。另一方面，即使存在IFN-γ时，在全部3种不同的引入了IDO1shRNA的细胞中，Kyn浓度的上升和Trp浓度的下降也均受到阻遏。
8.3NK细胞的检测
使用各条件培养基对人PBMC进行孵育后，对NK细胞(CD3-/CD16+/CD56+细胞)的存在进行了确认。如图12中所示，在使用所有条件培养基孵育的PBMC中均检测到了NK细胞。
8.4IDO1活性对于ADCC的影响
为了验证IDO1活性对于ADCC的影响，测定了在各条件培养基中预孵育的人PBMC的ADCC活性。将人PBMC在条件培养基3[KATO-III细胞(亲本)+IFN-γ]或4[KATO-III细胞(NegaCTRL shRNA)+IFN-γ]中进行预孵育时，较之条件培养基1[KATO-III细胞(亲本)]或2[KATO-III细胞(NegaCTRL shRNA)]而言，莫加木珠单抗的ADCC减弱(图13)。将人PBMC在条件培养基5[KATO-III细胞(IDO1shRNA#44)+IFN-γ]、6[KATO-III细胞(IDO1shRNA#45)+IFN-γ]或7[KATO-III细胞(IDO1shRNA#46)+IFN-γ]中进行预孵育时，较之条件培养基1或2而言，ADCC并未被减弱，而是呈现几乎相同的ADCC(图13)。
9考察
本研究的结果表明，IDO1活性导致ADCC下降。过往研究中暗示，Trp代谢物、例如Kyn可减少NK细胞数量[J Exp Med.2002；196(4):447-57]。然而，在本研究中，在含有经IFN-γ处理(诱发Kyn浓度上升)的KATO-III细胞的条件培养基中孵育的PBMC中，NK细胞的比例没有明显下降(图12)。这表明，可认为由IDO1活性导致的ADCC减弱并非源于NK细胞数量的减少，而是源于对NK细胞功能的抑制。在存在IFN-γ的情况下，在表达IDO1shRNA的KATO-III细胞的条件培养基中，Kyn浓度的上升和Trp浓度的下降受到阻遏，这表明，Kyn产生或Trp消耗是降低NK细胞功能的原因之一。
试验例3
概述
在本研究中，我们针对在存在或不存在HuRA15-7CTAcc(抗体C1)(抗叶酸受体α(人叶酸受体1，FOLR1)抗体，针对卵巢癌细胞)情况下的IDO1抑制剂对于人外周血单核细胞(PBMC)细胞毒性的影响进行了验证。首先，我们通过Western印迹法对IDO1在4种类型的卵巢癌细胞中的表达进行了检测。作为结果，在经IFNγ处理后的SKOV3、OVCAR3、和MCAS细胞中观察到IDO1表达，但在相同条件下并未在OVISE细胞中观察到IDO1表达(图14)。我们使用SKOV3细胞制备了条件培养基。在存在或不存在作为IDO1抑制剂的化合物A1或化合物B1的情况下，用IFNγ刺激SKOV3细胞，然后回收上清液作为用于PBMC预孵育的条件培养基。在于IDO1抑制剂的存在下制备的条件培养基中将PBMC进行预孵育时，PBMC的自然杀伤活性和抗体C1介导的细胞毒性被上调(图15和图16)。
10引言
FOLR1被认为有望成为当前研究中的癌症疗法的靶标(Ann Onco,2015年6月30日)。我们创建了HuRA15-7CTAcc(抗体C1)作为较之普通的抗FOLR1抗体而言具有更强的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)活性的新型抗FOLR1抗体。
已经报道了吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)在卵巢癌中的高水平表达，并已知其为卵巢癌患者不良预后的因素之一(Gynecologic Oncology 2009；115:185-192)。IDO1在导致肿瘤逃避宿主免疫监控的免疫抑制机制中起到重要的调控作用(Nat Rev Cancer.2009；9(6):445-52)。已报道了色氨酸代谢物、例如犬尿氨酸可诱导NK细胞死亡(J ExpMed.2002；196(4):447-57)，并且可通过抑制NK细胞受体表达来减弱NK细胞的细胞毒性(Blood.2006；108(13):4118-25)。因此，IDO1的活性有可能对ADCC活性造成影响。
实际上，在图3至8中，我们证明了KATO-III细胞的IDO1活性导致由曲妥珠单抗、利妥昔单抗、西妥昔单抗、及莫加木珠单抗诱导的人外周血单核细胞(PBMC)的细胞毒性降低。
因此，本研究中，我们针对在存在或不存在作为抗FOLR1抗体的抗体C1的情况下的、化合物A1和化合物B1对于人PBMC针对卵巢癌细胞的细胞毒性的影响进行了验证。
11材料和方法
11.1材料
11.1.1抗FOLR1抗体
得到WO2014/087863的实施例中记载的“HuRA15-7CTAcc抗体”作为抗体C1(HuRA15-7CTAcc)。抗体C1是利用AccretaMab(R)技术制备的、经过抗FOLR1人源化和CDR修饰的抗体。
11.1.2IDO1抑制剂
化合物A1和化合物B1为IDO1抑制剂。得到WO2011/142316中实施例62的化合物64A作为化合物A1，得到WO2010/005958中实施例1记载的“4-({2-[(氨基磺酰基)氨基]乙基}氨基)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒”作为化合物B1。
将化合物A1和B1以10mmol/L的浓度溶解于二甲基亚砜(DMSO)中，制成储备溶液。在使用前于冷冻条件下保存这些溶液。将储备溶液用培养基[含有10vol％热灭活胎牛血清(FCS，GIBCO)和青霉素-链霉素(GIBCO)的RPMI1640(GIBCO)]稀释，调节浓度用于分析。
11.1.3人PBMC
冷冻人PBMC购自Precision Bioservices(批号：2500113169)。解冻后，将PBMC用含有1mg/mL DNase(Roche)的培养基洗涤，用于分析。
11.1.4细胞和培养基
卵巢癌细胞OVISE(JCRB1043)和MCAS(JCRB0240)自JCRB获得，卵巢癌细胞SKOV3(HTB-77)和OVCAR3(HTB-161)自ATCC获得。使用培养基对这些细胞进行培养。
11.2方法
11.2.1Western印迹法
在存在(50或100ng/mL)或不存在IFNγ(R&D systems)的条件下，将卵巢癌细胞(OVISE、SKOV3、OVCAR3或MCAS)在培养基中培养4天。然后，将这些细胞用SDS样品缓冲液(Thermo)裂解并煮沸(100℃，5分钟)。通过Western印迹法，依次使用抗IDO1抗体(克隆10.1，Millipore)、抗小鼠抗体-辣根过氧化物酶(HRP，Zymed)或抗β-肌动蛋白抗体(兔多克隆抗体，abcam)、抗兔抗体-HRP(DAKO)分别对IDO1或β-肌动蛋白蛋白质在各样品中的表达进行检测。
11.2.2条件培养基的制备
将SKOV3细胞(1.0×106个细胞)在25mL含有50ng/mL IFNγ(PeproTech)和100nmol/L IDO1抑制剂(化合物A1或化合物B1)、或DMSO的培养基中培养3天。将各培养物的上清液用作用于PBMC预孵育的条件培养基。
条件培养基列表记载如下。
-条件培养基DMSO：用50ng/mL IFNγ和0.1vol％DMSO培养的SKOV3细胞
-条件培养基化合物A1：用50ng/mL IFNγ和100nmol/L化合物A1培养的SKOV3细胞
-条件培养基化合物B1：用50ng/mL IFNγ和100nmol/L化合物B1培养的SKOV3细胞
11.2.3细胞毒性分析
11.2.3.1靶细胞的制备
利用TrypLE Express(GIBCO)，将SKOV3细胞从培养瓶分离。利用ADCC分析培养基[无酚红RPMI1640(GIBCO)，含有10vol％经透析的热灭活FCS(GIBCO)]将活细胞调节至1.0×106个细胞。然后，使用约3.7MBq的Na2 51CrO4(PerkinElmer)，将细胞在CO2培养箱中于37℃标记超过1小时。将细胞用ADCC分析培养基洗涤3次，并调节至2.0×105个细胞/mL(1×104个细胞/50μL)，作为靶细胞。
11.2.3.2效应细胞的制备
将人PBMC在25mL条件培养基中培养7天。分别将2.8×107或2.4×107个细胞在条件培养基化合物A1或条件培养基化合物B1中进行预孵育。然后，用ADCC分析培养基洗涤，将细胞调节至5.0×106个细胞/mL(2.5×105个细胞/50μL)，作为效应细胞。
11.2.3.3抗体溶液的制备
使用ADCC分析培养基制备抗体C1溶液，以0.033、0.33、3.3、33、及333ng/mL的最终浓度用于ADCC分析。
11.2.3.4细胞毒性分析
通过测量各分析孔中上清液中的放射性，测定细胞毒性。96孔的U型底培养板中，各孔的总体积为150μL。
总样品、T spo样品、M样品或分析样品的定义及制备如下所述。
-总样品：靶细胞总放射性对照。将50μL靶细胞、15μL去垢剂(10×裂解液，Promega)和85μL的ADCC分析培养基混合，制备该样品。
-T spo样品：靶细胞自发放射性对照。将50μL靶细胞和100μL的ADCC分析培养基混合，制备该样品。
-M样品：ADCC分析培养基的参考对照。制备150μL的ADCC分析培养基，作为该样品。
-分析样品：将50μL靶细胞、效应细胞和抗体溶液混合，制备该样品。
各样品均制备三个重复。将样品培养板在CO2培养箱中孵育4小时。将培养板离心后，将50μL各上清液移至LumaPlate(PerkinElmer)，充分干燥。使用微量培养板闪烁计数器(TopCount NXT，PerkinElmer)测量放射性(cpm)。
使用各孔的cpm，通过下式计算细胞毒性(％)。首先，通过下式计算各孔的cpm校正值。
[数学式3]
各孔的Cpm校正值＝各孔的Cpm-M的平均cpm
然后，通过下式计算各分析样品的细胞毒性。
[数学式4]
各分析样品的细胞毒性以三次重复的平均值+标准差(SD)来表示。
12结果和考察
12.1卵巢癌细胞中的IDO1表达
我们使用了4种类型的卵巢癌细胞(OVISE、SKOV3、OVCAR3、和MCAS细胞)，针对卵巢癌细胞中IDO1是否被IFNγ刺激所诱导而进行了评价。如图14中所示，在经50或100ng/mL的IFNγ刺激的SKOV3、OVCAR3、和MCAS细胞中检测到IDO1。相反，在经IFNγ刺激的OVISE细胞中未观察到IDO1表达。在没有IFNγ刺激的情况下，所有被测试的卵巢癌细胞均不表达IDO1。
12.2化合物A1或化合物B1对于PBMC针对SKOV3细胞的细胞毒性的影响
为了评价IDO1抑制剂活性对于PBMC的细胞毒性的影响，将PBMC在如9.2.2(“条件培养基的制备”)中所述地制备的SKOV3细胞的条件培养基中预孵育7天，然后，使用各种浓度的抗体C1，对这些经预孵育的PBMC的针对经放射性标记的SKOV3细胞的细胞毒性进行评价。结果，在条件培养基化合物A1或化合物B1中预孵育的PBMC在没有抗体C1时的细胞毒性(自然杀伤活性)高于条件培养基DMSO(图15A和图16A)。此外，存在抗体C1的情况下，在条件培养基化合物A1或化合物B1中预孵育的PBMC的细胞毒性也高于条件培养基DMSO(图15B和图16B)。
总体而言，我们证明了包括SKOV3细胞在内的一些种类的卵巢癌细胞在IFNγ刺激后表达IDO1。此外，PBMC的自然杀伤活性和抗体C1介导的细胞毒性通过作为IDO1抑制剂的化合物A1或化合物B1而被上调。综上所述，可期待抗体C1与化合物A1或化合物B1的组合针对卵巢癌细胞呈现出协同性的细胞毒性效果。
试验例4
概述
在本研究中，我们验证了在存在或不存在作为抗人白细胞介素3受体α链(IL-3Rα)抗体的抗体D1的情况下、作为吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO1)抑制剂的化合物A1对于人外周血单核细胞(PBMC)针对急性髓细胞白血病(AML)细胞的细胞毒性的影响。
我们使用表达IDO1的细胞(KATO-III细胞)制备了条件培养基。在存在或不存在化合物A1的情况下，用IFN-γ刺激KATO-III细胞，然后回收上清液作为用于PBMC预孵育的条件培养基。在本研究中使用了PBMC。在条件培养基中预孵育7天后，测定PBMC针对AML细胞的细胞毒性。观察到明显的由化合物A1导致的细胞毒性上调，在存在或不存在抗体D1的情况下，较之含有DMSO的培养基而言，在含有化合物A1的条件培养基中孵育的PBMC诱导了更高的细胞毒性。
13引言
抗体D1为针对人白细胞介素-3受体α链(IL-3Rα)的未岩藻糖基化的全人源单克隆抗体。
化合物A1为吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)1的小分子抑制剂。
本研究中，我们验证了存在或不存在抗体D1的情况下的、化合物A1对于PBMC针对急性髓细胞白血病(AML)细胞的细胞毒性的影响。
14材料和方法
14.1材料
14.1.1抗体D1
得到WO2010/126066中实施例记载的“新102抗体(New102antibody)”作为抗体D1(19.59mg/mL)。
14.1.2IDO1抑制剂
得到WO2011/142316中的实施例62的化合物64A作为化合物A1，并将化合物A1以10mmol/L的浓度溶解于二甲基亚砜(DMSO)中，制成储备溶液。将溶液在使用前于冷冻条件下保存。将储备溶液用培养基[含有10vol％热灭活胎牛血清和1vol％青霉素-链霉素溶液的RPMI1640]稀释，调节至用于分析的浓度。
14.1.3人PBMC
冷冻PBMC购自Precision Bioservices(批号：13096)和Allcell(批号：A3951)。解冻后，将PBMC用培养基洗涤，用于分析。
14.1.4细胞和培养基
人胃癌细胞KATO-III(86093004)自DS Pharma Biomedical Co.,Ltd.获得，人AML细胞KG-1(CRL-8031)自ATCC获得。使用培养基对这些细胞进行培养。
14.2方法
14.2.1条件培养基的制备
将KATO-III细胞(1.25×106个细胞)在25mL含有50ng/mL IFN-γ(PeproTech)和100nmol/L化合物A1或DMSO的培养基(含有10vol％FBS的RPMI1640培养基)中培养3天。将各培养物的上清液用作用于PBMC预孵育的条件培养基。
条件培养基如下。
-条件培养基DMSO：用50ng/mL IFN-γ和0.1vol％DMSO培养的KATO-III细胞
-条件培养基化合物A1：用50ng/mL IFN-γ和100nmol/L化合物A1培养的KATO-III细胞
14.2.2细胞毒性分析
14.2.2.1靶细胞的制备
使用约3.7MBq的Na2 51CrO4(PerkinElmer)，将KG-1细胞(1×106个细胞)在CO2培养箱中于37℃标记1小时。将细胞用分析培养基洗涤2次，并调节至1.0×105个细胞/mL(0.5×104个细胞/50μL)，作为靶细胞。
14.2.2.2效应细胞的制备
将2批PBMC以5×105个细胞/mL在条件培养基中培养7天。用分析培养基洗涤，然后，使用分析培养基将细胞调节至2.5×106个细胞/mL(12.5×104个细胞/50μL)，作为效应细胞。
14.2.2.3抗体溶液的制备
用分析培养基将抗体D1溶液的浓度稀释为0、0.3、3或30μg/mL。
14.2.2.4细胞毒性分析
将PBMC用于细胞毒性分析。通过测量各分析孔中上清液中的放射性，测定细胞毒性。96孔的V型底培养板中，各孔的总体积为150μL。
总样品、T spo样品、M样品或分析样品的定义及制备如下所述。
-总样品：靶细胞总放射性对照。将50μL靶细胞和100μL的1vol％NP-40(用分析培养基稀释)混合，制备该样品。
-T spo样品：靶细胞自发放射性对照。将50μL靶细胞和100μL分析培养基混合，制备该样品。
-分析样品：将50μL靶细胞、效应细胞和抗体溶液混合，制备该样品。
分析样品中抗体D1的最终浓度为0、0.1、1、及10μg/mL。
各样品均制备三个重复。短暂离心后，将样品培养板在CO2培养箱中孵育4小时。将培养板离心后，将50μL各上清液移至LumaPlate(PerkinElmer)，充分干燥。使用微量培养板闪烁计数器(TopCount NXT，PerkinElmer)测量放射性(cpm)。
通过下式计算细胞毒性(％)。
[数学式5]
各分析样品的细胞毒性以三次重复的平均值+/-标准差(SD)来表示。
15结果和考察
为了评价化合物A1对于PBMC的细胞毒性的影响，将PBMC(批号：A3951)在如9.2.2中记载的那样制备的KATO-III细胞的条件培养基中预孵育7天。孵育后，在不存在或存在各种浓度的抗体D1的情况下，对经预孵育的PBMC针对经放射性标记的KG-1细胞的细胞毒性进行评价。
观察到明显的由化合物A1导致的细胞毒性上调，在存在或不存在抗体D1的情况下，较之含有DMSO的培养基而言，在含有化合物A1的条件培养基中孵育的PBMC诱导了更高的细胞毒性(图17)。
试验例5
16概述
在本研究中，我们验证了存在或不存在抗体E1(抗人T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(TIM-3)抗体)的情况下的、作为吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO1)抑制剂的化合物A1对于人外周血单核细胞(PBMC)针对TIM-3转染急性髓细胞白血病(AML)细胞的细胞毒性的影响。
我们使用表达IDO1的细胞(KATO-III细胞)制备了条件培养基。在存在或不存在化合物A1的情况下，用IFN-γ刺激KATO-III细胞，然后回收上清液作为用于PBMC预孵育的条件培养基。在条件培养基中预孵育7天后，测定PBMC针对TIM-3转染AML细胞的细胞毒性。观察到明显的由化合物A1导致的细胞毒性上调，在存在或不存在抗体E1的情况下，较之含有DMSO的培养基而言，在含有化合物A1的条件培养基中孵育的PBMC诱导了更高的细胞毒性。
17引言
抗体E1为针对人T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(TIM-3)的未岩藻糖基化的全人源单克隆抗体。
化合物A1为吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)1的小分子抑制剂。
本研究中，我们验证了存在或不存在抗体E1的情况下的、化合物A1对于PBMC针对TIM-3转染急性髓细胞白血病(AML)细胞的细胞毒性的影响。
18材料和方法
18.1材料
18.1.1抗体E1
得到WO2011/155607中实施例记载的“4545抗体”作为抗体E1(82.31mg/mL)。
18.1.2IDO1抑制剂
得到WO2011/142316中的实施例62的化合物64A作为化合物A1，并将化合物A1以10mmol/L的浓度溶解于二甲基亚砜(DMSO)中，制成储备溶液。将溶液在使用前于冷冻条件下保存。将储备溶液用培养基[含有10vol％热灭活胎牛血清和1vol％青霉素-链霉素溶液的RPMI1640]稀释，调节至用于分析的浓度。
18.1.3人PBMC
冷冻PBMC购自Precision Bioservices(批号：13096)。解冻后，将PBMC用培养基洗涤，用于分析。
18.1.4细胞和培养基
人胃癌细胞KATO-III(86093004)自DS pharma biomedical Co.,Ltd获得。EoL-1(RCB0641)自理研生物资源中心工程部(Engineering Division of Riken Bio ResourceCenter)获得。将人TIM-3基因转染至EoL-1细胞，得到EoL-1/人TIM-3细胞。使用培养基对该细胞进行培养。
18.2方法
18.2.1条件培养基的制备
将KATO-III细胞(1.25×106个细胞)在25mL含有50ng/mL IFN-γ(PeproTech)和100nmol/L化合物A1或DMSO的培养基(含有10vol％FBS的RPMI1640培养基)中培养3天。将各培养物的上清液用作用于PBMC预孵育的条件培养基。
条件培养基如下。
-条件培养基DMSO：用50ng/mL IFN-γ和0.1vol％DMSO培养的KATO-III细胞
-条件培养基化合物A1：用50ng/mL IFN-γ和100nmol/L化合物A1培养的KATO-III细胞
18.2.2细胞毒性分析
18.2.2.1靶细胞的制备
使用约3.7MBq的Na2 51CrO4(PerkinElmer)，将EoL-1/人TIM-3细胞(1×106个细胞)在CO2培养箱中于37℃标记1小时。将细胞用分析培养基洗涤2次，调节至1.0×105个细胞/mL(0.5×104个细胞/50μL)，作为靶细胞。
18.2.2.2效应细胞的制备
将人PBMC以5×105个细胞/mL在条件培养基中培养7天。用分析培养基洗涤，然后，使用分析培养基将细胞调节至2.5×106个细胞/mL(12.5×104个细胞/50μL)，作为效应细胞。
18.2.2.3抗体溶液的制备
用分析培养基将抗体E1溶液的浓度稀释为0、0.3、3或30μg/mL。
18.2.2.4细胞毒性分析
通过测量各分析孔中上清液中的放射性，测定细胞毒性。96孔的V型底培养板中，各孔的总体积为150μL。
总样品、T spo样品、M样品或分析样品的定义及制备如下所述。
-总样品：靶细胞总放射性对照。将50μL靶细胞和100μL的1vol％NP-40(用分析培养基稀释)混合，制备该样品。
-T spo样品：靶细胞自发放射性对照。将50μL靶细胞和100μL分析培养基混合，制备该样品。
-分析样品：将50μL靶细胞、效应细胞和抗体溶液混合，制备该样品。
分析样品中抗体E1的最终浓度为0、0.1、1、及10μg/mL。
各样品均制备三个重复。短暂离心后，将样品培养板在CO2培养箱中孵育4小时。将培养板离心后，将50μL各上清液移至LumaPlate(PerkinElmer)，充分干燥。使用微量培养板闪烁计数器(TopCount NXT，PerkinElmer)测量放射性(cpm)。
通过下式计算细胞毒性(％)。
[数学式6]
各分析样品的细胞毒性以三次重复的平均值±标准差(SD)来表示。
19结果和考察
为了评价化合物A1对于PBMC的细胞毒性的影响，将PBMC在如9.2.2中记载的那样制备的KATO-III细胞的条件培养基中预孵育7天。孵育后，在不存在或存在各种浓度的抗体E1的情况下，对经预孵育的PBMC针对经放射性标记的EoL-1/人TIM-3细胞的细胞毒性进行评价。
观察到明显的由化合物A1导致的细胞毒性上调，在存在或不存在抗体E1的情况下，较之含有DMSO的培养基而言，在含有化合物A1的条件培养基中孵育的PBMC诱导了更高的细胞毒性(图18)。序列表自由文本
序列号1：抗体C1HCDR1的氨基酸序列
序列号2：抗体C1HCDR2的氨基酸序列
序列号3：抗体C1HCDR3的氨基酸序列
序列号4：抗体C1LCDR1的氨基酸序列
序列号5：抗体C1LCDR2的氨基酸序列
序列号6：抗体C1LCDR3的氨基酸序列
序列号7：抗体C1H链的氨基酸序列
序列号8：抗体C1L链的氨基酸序列
序列号9：抗体D1-1HCDR1的氨基酸序列
序列号10：抗体D1-1HCDR2的氨基酸序列
序列号11：抗体D1-1HCDR3的氨基酸序列
序列号12：抗体D1-2HCDR1的氨基酸序列
序列号13：抗体D1-2HCDR2的氨基酸序列
序列号14：抗体D1-2HCDR3的氨基酸序列
序列号15：抗体D1-3HCDR1的氨基酸序列
序列号16：抗体D1-3HCDR2的氨基酸序列
序列号17：抗体D1-3HCDR3的氨基酸序列
序列号18：抗体D1-4HCDR1的氨基酸序列
序列号19：抗体D1-4HCDR2的氨基酸序列
序列号20：抗体D1-4HCDR3的氨基酸序列
序列号21：抗体D1-5HCDR1的氨基酸序列
序列号22：抗体D1-5HCDR2的氨基酸序列
序列号23：抗体D1-5HCDR3的氨基酸序列
序列号24：抗体D1-1LCDR1的氨基酸序列
序列号25：抗体D1-1LCDR2的氨基酸序列
序列号26：抗体D1-1LCDR3的氨基酸序列
序列号27：抗体D1-2LCDR1的氨基酸序列
序列号28：抗体D1-2LCDR2的氨基酸序列
序列号29：抗体D1-2LCDR3的氨基酸序列
序列号30：抗体D1-3LCDR1的氨基酸序列
序列号31：抗体D1-3LCDR2的氨基酸序列
序列号32：抗体D1-3LCDR3的氨基酸序列
序列号33：抗体D1-4LCDR1的氨基酸序列
序列号34：抗体D1-4LCDR2的氨基酸序列
序列号35：抗体D1-4LCDR3的氨基酸序列
序列号36：抗体D1-5LCDR1的氨基酸序列
序列号37：抗体D1-5LCDR2的氨基酸序列
序列号38：抗体D1-5LCDR3的氨基酸序列
序列号39：抗体E1-1HCDR1的氨基酸序列
序列号40：抗体E1-1HCDR2的氨基酸序列
序列号41：抗体E1-1HCDR3的氨基酸序列
序列号42：抗体E1-1LCDR1的氨基酸序列
序列号43：抗体E1-1LCDR2的氨基酸序列
序列号44：抗体E1-1LCDR3的氨基酸序列
序列号45：抗体E1-2HCDR1的氨基酸序列
序列号46：抗体E1-2HCDR2的氨基酸序列
序列号47：抗体E1-2HCDR3的氨基酸序列
序列号48：抗体E1-2LCDR1的氨基酸序列
序列号49：抗体E1-2LCDR2的氨基酸序列
序列号50：抗体E1-2LCDR3的氨基酸序列
序列号51：抗体E1-3HCDR1的氨基酸序列
序列号52：抗体E1-3HCDR2的氨基酸序列
序列号53：抗体E1-3HCDR3的氨基酸序列
序列号54：抗体E1-3LCDR1的氨基酸序列
序列号55：抗体E1-3LCDR2的氨基酸序列
序列号56：抗体E1-3LCDR3的氨基酸序列
序列号57：抗体E1-4VH的氨基酸序列
序列号58：抗体E1-4VL的氨基酸序列
序列号59：抗体E1-5VH的氨基酸序列
序列号60：抗体E1-5VL的氨基酸序列

Claims (210)

1.用于治疗肿瘤的方法，其包括向需要接受治疗的人施予有效量的下述抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的步骤，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合。
2.如权利要求1所述的方法，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式1]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式2]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
6.如权利要求5所述的方法，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
7.如权利要求5所述的方法，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
8.如权利要求5所述的方法，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
9.如权利要求5所述的方法，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
10.如权利要求5所述的方法，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
11.如权利要求10所述的方法，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
12.如权利要求10所述的方法，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
13.如权利要求12所述的方法，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。
14.如权利要求12所述的方法，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
15.如权利要求5所述的方法，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌、头颈癌、胃癌、肝癌。
16.阻遏下述抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低的方法，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合，所述方法包括施予吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的步骤。
17.如权利要求16所述的方法，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式3]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式4]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
18.药物组合物，其用于施予有效量的下述抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合。
19.如权利要求18所述的药物组合物，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式5]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式6]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
20.如权利要求18或19所述的药物组合物，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
21.如权利要求18至20中任一项所述的药物组合物，其包含同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
22.如权利要求18至21中任一项所述的药物组合物，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
23.如权利要求22所述的药物组合物，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
24.如权利要求22所述的药物组合物，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
25.如权利要求22所述的药物组合物，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
26.如权利要求22所述的药物组合物，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
27.如权利要求22所述的药物组合物，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
28.如权利要求27所述的药物组合物，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
29.如权利要求27所述的药物组合物，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
30.如权利要求29所述的药物组合物，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。
31.如权利要求29所述的药物组合物，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
32.如权利要求22所述的药物组合物，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌、头颈癌、胃癌、肝癌。
33.吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合，所述组合用于治疗肿瘤。
34.如权利要求33所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式7]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式8]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
35.如权利要求33或34所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
36.如权利要求33至35中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
37.如权利要求33至36中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
38.如权利要求37所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
39.如权利要求37所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
40.如权利要求37所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
41.如权利要求37所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
42.如权利要求37所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
43.如权利要求42所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
44.如权利要求42所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
45.如权利要求44所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。
46.如权利要求44所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
47.如权利要求37所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体的组合，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌、头颈癌、胃癌或肝癌。
48.用于阻遏下述抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合。
49.如权利要求48所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式9]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式10]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
50.肿瘤治疗剂，其包含吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂作为活性成分，其中，治疗剂以与有效量的下述抗体组合的方式被施予，所述抗体与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合。
51.如权利要求50所述的肿瘤治疗剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式11]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式12]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
52.如权利要求50或51所述的肿瘤治疗剂，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
53.如权利要求50至52中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，治疗剂和抗体被同时或依次地施予。
54.如权利要求50至53中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
55.如权利要求54所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
56.如权利要求54所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
57.如权利要求54所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
58.如权利要求54所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
59.如权利要求54所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
60.如权利要求59所述的肿瘤治疗剂，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
61.如权利要求59所述的肿瘤治疗剂，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
62.如权利要求61所述的肿瘤治疗剂，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。
63.如权利要求61所述的肿瘤治疗剂，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
64.如权利要求54所述的肿瘤治疗剂，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌、头颈癌、胃癌或肝癌。
65.阻遏剂，其用于阻遏与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低，所述阻遏剂包含吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂作为活性成分。
66.如权利要求65所述的阻遏剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式13]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式14]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
67.如权利要求16或17所述的方法，其中，同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
68.如权利要求16或17所述的方法，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
69.如权利要求48或49所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
70.肿瘤治疗剂，其包含与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体作为活性成分，其中，治疗剂以与有效量的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂组合的方式被施予。
71.如权利要求70所述的肿瘤治疗剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式15]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式16]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
72.如权利要求70或71所述的肿瘤治疗剂，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
73.如权利要求70至72中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，治疗剂和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
74.如权利要求70至73中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，肿瘤为表达人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体的肿瘤。
75.如权利要求74所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为T细胞淋巴瘤。
76.如权利要求74所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CC趋化因子受体4的肿瘤为外周T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤或成人T细胞白血病淋巴瘤。
77.如权利要求74所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌、胃癌、卵巢癌、骨肉瘤或子宫内膜癌。
78.如权利要求74所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人表皮生长因子受体2的肿瘤为乳腺癌。
79.如权利要求74所述的肿瘤治疗剂，其中，表达人CD20的肿瘤为慢性白血病或非霍奇金淋巴瘤。
80.如权利要求79所述的肿瘤治疗剂，其中，慢性白血病为慢性淋巴细胞性白血病。
81.如权利要求79所述的肿瘤治疗剂，其中，非霍奇金淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。
82.如权利要求81所述的肿瘤治疗剂，其中，B细胞淋巴瘤为套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。
83.如权利要求81所述的肿瘤治疗剂，其中，B细胞淋巴瘤为伯基特淋巴瘤。
84.如权利要求74所述的肿瘤治疗剂，其中，表达表皮生长因子受体的肿瘤为结肠癌、头颈癌、胃癌或肝癌。
85.如权利要求65或66所述的阻遏剂，其中，与人CC趋化因子受体4、人表皮生长因子受体2、人CD20、或表皮生长因子受体特异性结合的抗体分别为莫加木珠单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或西妥昔单抗。
86.用于治疗肿瘤的方法，其包括向需要接受治疗的人施予有效量的下述抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的步骤，所述抗体与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合。
87.如权利要求86所述的方法，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式17]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式18]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
88.如权利要求86或87所述的方法，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
89.如权利要求86或87所述的方法，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自以下(a1)～(c1)中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
90.如权利要求86或87所述的方法，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
91.如权利要求90所述的方法，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
92.如权利要求90所述的方法，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
93.如权利要求86或87所述的方法，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
94.如权利要求93所述的方法，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
95.如权利要求93所述的方法，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
96.如权利要求86至95中任一项所述的方法，其中，同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
97.如权利要求86至96中任一项所述的方法，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
98.如权利要求97所述的方法，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
99.如权利要求97所述的方法，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
100.如权利要求97所述的方法，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤或卡斯特雷曼氏症。
101.如权利要求97所述的方法，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
102.如权利要求97所述的方法，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
103.如权利要求97所述的方法，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
104.阻遏与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低的方法，其包括施予吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的步骤。
105.如权利要求104所述的方法，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式19]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式20]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
106.如权利要求104或105所述的方法，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
107.如权利要求104或105所述的方法，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
108.如权利要求104或105所述的方法，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
109.如权利要求108所述的方法，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
110.如权利要求108所述的方法，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
111.如权利要求104或105所述的方法，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
112.如权利要求111所述的方法，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
113.如权利要求111所述的方法，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
114.如权利要求104至113中任一项所述的方法，其中，同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
115.药物组合物，其用于施予有效量的下述抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，所述抗体与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合。
116.如权利要求115所述的药物组合物，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式21]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式22]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
117.如权利要求115或116所述的药物组合物，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
118.如权利要求115或116所述的药物组合物，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
119.如权利要求115或116所述的药物组合物，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
120.如权利要求119所述的药物组合物，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
121.如权利要求119所述的药物组合物，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
122.如权利要求115或116所述的药物组合物，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
123.如权利要求122所述的药物组合物，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
124.如权利要求122所述的药物组合物，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
125.如权利要求115或116所述的药物组合物，其包含同时或依次地施予抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂。
126.如权利要求115至125中任一项所述的药物组合物，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
127.如权利要求126所述的药物组合物，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
128.如权利要求126所述的药物组合物，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
129.如权利要求126所述的药物组合物，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤或卡斯特雷曼氏症。
130.如权利要求126所述的药物组合物，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
131.如权利要求126所述的药物组合物，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
132.如权利要求126所述的药物组合物，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
133.吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的组合，其用于治疗肿瘤。
134.如权利要求133所述的组合，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式23]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式24]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
135.如权利要求133或134所述的组合，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
136.如权利要求133或134所述的组合，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
137.如权利要求133或134所述的组合，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
138.如权利要求137所述的组合，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
139.如权利要求137所述的组合，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
140.如权利要求133或134所述的组合，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
141.如权利要求140所述的组合，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
142.如权利要求140所述的组合，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
143.如权利要求133至142中任一项所述的组合，其中，抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
144.如权利要求133至143中任一项所述的组合，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
145.如权利要求144所述的组合，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
146.如权利要求144所述的组合，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
147.如权利要求144所述的组合，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤或卡斯特雷曼氏症。
148.如权利要求144所述的组合，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
149.如权利要求144所述的组合，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
150.如权利要求144所述的组合，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
151.用于阻遏下述抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，所述抗体与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合。
152.如权利要求151所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式25]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式26]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
153.如权利要求151或152所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，抗体和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
154.如权利要求151至153中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
155.如权利要求151至153中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
156.如权利要求151至153中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
157.如权利要求156所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
158.如权利要求156所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
159.如权利要求151至153中任一项所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
160.如权利要求159所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
161.如权利要求159所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
162.肿瘤治疗剂，其包含与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体作为活性成分，其中，治疗剂以与有效量的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂组合的方式被施予。
163.如权利要求162所述的肿瘤治疗剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式27]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式28]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
164.如权利要求162或163所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
165.如权利要求162或163所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
166.如权利要求162或163所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
167.如权利要求166所述的肿瘤治疗剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
168.如权利要求166所述的肿瘤治疗剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
169.如权利要求162或163所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
170.如权利要求169所述的肿瘤治疗剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
171.如权利要求169所述的肿瘤治疗剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
172.如权利要求162至171中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，治疗剂和吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂被同时或依次地施予。
173.如权利要求162至172中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
174.如权利要求173所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
175.如权利要求173所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
176.如权利要求173所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤或卡斯特雷曼氏症。
177.如权利要求173所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
178.如权利要求173所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
179.如权利要求173所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
180.肿瘤治疗剂，其包含吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂作为活性成分，其中，治疗剂以与有效量的下述抗体组合的方式被施予，所述抗体与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合。
181.如权利要求180所述的肿瘤治疗剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式29]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式30]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
182.如权利要求180或181所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
183.如权利要求180或181所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
184.如权利要求180或181所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
185.如权利要求184所述的肿瘤治疗剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
186.如权利要求184所述的肿瘤治疗剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
187.如权利要求180或181所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
188.如权利要求187所述的肿瘤治疗剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
189.如权利要求187所述的肿瘤治疗剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
190.如权利要求180至189中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，治疗剂和抗体被同时或依次地施予。
191.如权利要求180至190中任一项所述的肿瘤治疗剂，其中，肿瘤为与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3相关的肿瘤。
192.如权利要求191所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌、间皮瘤或胰腺癌。
193.如权利要求191所述的肿瘤治疗剂，其中，与人叶酸受体1相关的肿瘤为卵巢癌。
194.如权利要求191所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、非典型白血病、慢性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病、NK/T细胞淋巴瘤、颗粒淋巴细胞增多症(LGL白血病)、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、嗜酸性粒细胞增多综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤或卡斯特雷曼氏症。
195.如权利要求191所述的肿瘤治疗剂，其中，与人IL-3Rα相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
196.如权利要求191所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为血癌、乳腺癌、子宫癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、小肠癌、前列腺癌和胰腺癌。
197.如权利要求191所述的肿瘤治疗剂，其中，与人TIM-3相关的肿瘤为急性髓细胞白血病(AML)。
198.阻遏剂，其用于阻遏与人叶酸受体1、人IL-3Rα或人TIM-3特异性结合的抗体的抗体依赖性细胞毒活性的降低，所述阻遏剂包含吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂作为活性成分。
199.如权利要求198所述的阻遏剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂为式(I)表示的化合物(I)或其药学上允许的盐、或者式(II)表示的化合物(II)或其药学上允许的盐，
[化学式31]
式(I)中，
R6和R7可以相同或不同，各自表示氢原子或任选被取代的低级烷基，
R8、R9、R10和R11可以相同或不同，各自表示氢原子、卤素、氰基或低级烷基，
R1表示可被低级烷氧基取代的低级烷基，并且
R3表示任选被取代的芳香族杂环基，
[化学式32]
式(II)中，
R21表示氨基或甲基，
R22表示卤素、氰基、三氟甲基或低级烷基，
R23表示氢原子或卤素，并且
n表示1或2。
200.如权利要求198或199所述的阻遏剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为单克隆抗体。
201.如权利要求198或199所述的阻遏剂，其中，与人叶酸受体1特异性结合的抗体为选自由以下(a1)～(c1)组成的组中的单克隆抗体：
(a1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列；
(b1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链的CDR 1～3分别包含序列号1、2和3所示的氨基酸序列，所述抗体的L链的CDR 1～3分别包含序列号4、5和6所示的氨基酸序列，且序列号3所示的氨基酸序列(抗体H链的CDR3)中的半胱氨酸被苏氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或谷氨酰胺取代；及
(c1)下述单克隆抗体，其中，所述抗体的H链包含序列号7所示的氨基酸序列，且所述抗体的L链包含序列号8所示的氨基酸序列。
202.如权利要求198或199所述的阻遏剂，其中，与人IL-3Rα特异性结合的抗体为针对人IL-3Rα链的抗体，所述抗体不抑制IL-3信号转导并与人IL-3Rα链的B结构域结合，但不与人IL-3Rα链的C结构域结合。
203.如权利要求202所述的阻遏剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含选自由以下(a2)至(e2)组成的组中的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(a2)重链的CDR 1至3分别为序列号9至11的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号24至26的氨基酸序列；
(b2)重链的CDR 1至3分别为序列号12至14的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号27至29的氨基酸序列；
(c2)重链的CDR 1至3分别为序列号15至17的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号30至32的氨基酸序列；
(d2)重链的CDR 1至3分别为序列号18至20的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号33至35的氨基酸序列；及
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
204.如权利要求202所述的阻遏剂，其中，针对人IL-3Rα链的抗体包含由以下(e2)组成的重链CDR和轻链CDR的氨基酸序列：
(e2)重链的CDR 1至3分别为序列号21至23的氨基酸序列，且轻链的CDR 1至3分别为序列号36至38的氨基酸序列。
205.如权利要求198或199所述的阻遏剂，其中，与人TIM-3特异性结合的抗体为单克隆抗体，所述单克隆抗体与人TIM-3的胞外区结合。
206.如权利要求205所述的阻遏剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(i)至(iii)组成的组中的一者：
(i)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号39至41所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号42至44所示的氨基酸序列的抗体的L链；
(ii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号45至47所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号48至50所示的氨基酸序列的抗体的L链；及
(iii)下述单克隆抗体，其包含所含的CDR 1至3分别含有序列号51至53所示的氨基酸序列的抗体的H链、和所含的CDR 1至3分别含有序列号54至56所示的氨基酸序列的抗体的L链。
207.如权利要求205所述的阻遏剂，其中，单克隆抗体为选自由以下(a3)和(b3)组成的组中的一者：
(a3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号57所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号58所示的氨基酸序列的抗体VL；及
(b3)下述单克隆抗体，其包含含有序列号59所示的氨基酸序列的抗体VH，且包含含有序列号60所示的氨基酸序列的抗体VL。
208.如权利要求198至207中任一项所述的阻遏剂，其中，阻遏剂和抗体被同时或依次地施予。
209.如权利要求48或49所述的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中，吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂和抗体被同时或依次地施予。
210.如权利要求65或66所述的阻遏剂，其中，阻遏剂和抗体被同时或依次地施予。
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