CN107831128A - 尼扎替丁的含量测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种尼扎替丁的含量测定方法。本发明采用荷移分光光度法测定波长通常在可见光区，消除了紫外吸收物质带来的干扰这一优点，另外，此方法还有很多优点：无需昂贵精密仪器、方法简单快速，具有较高灵敏度，能够实现对尼扎替丁含量的快速、准确、高重现性、高回收率的测定，操作简单快捷，适于应用推广，对控制尼扎替丁制剂的质量和保证临床疗效具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及化学技术领域，具体为一种尼扎替丁的含量测定方法。
背景技术
尼扎替丁分散片、胶囊剂、咀嚼片剂主要成分为尼扎替丁，化学名称为：N-[2-[[2-(二甲胺基甲基)-4-噻唑基]甲硫基]乙基]-N'(-甲基-2-硝基-1,1-乙烯二胺，分子式为C12H21N5O2S2，是一种强效H2受体拮抗药，通过阻滞胃粘膜壁细胞组胺H2受体而发挥作用，对治疗活动性十二指肠溃疡和良性溃疡是一种安全、有效的药物。尼扎替丁于1987年在美国上市，商品名爱希。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种尼扎替丁的含量测定方法，它测定准确，重现性好，操作简单、分析速度快。
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：尼扎替丁的含量测定方法，包括以下步骤：
1)尼扎替丁标准溶液的配制：将尼扎替丁标准品用乙腈溶解，定容得到浓度为1.0mg/ml的尼扎替丁溶液，在4℃下保存备用；使用时用乙腈逐级稀释；
2)氯冉酸溶液配制：取氯冉酸用乙腈溶解，定容得到浓度为1.0mg/mL的氯冉酸溶液，现配现用；
3)尼扎替丁样品溶液的制备：取尼扎替丁样品，研碎后，准确称取一定量的样品，用乙腈将尼扎替丁全部溶解后，过滤，滤液置于容量瓶中，滤纸用乙腈洗涤2～3次，合并滤液与洗液，用乙腈稀释到刻度，得到尼扎替丁的供试品溶液；
4)尼扎替丁测定：移取一定量的尼扎替丁溶液于5mL比色管中，加入1.0mg/mL氯冉酸溶液0.2～2.0mL，用乙腈稀释定容，摇匀，室温反应0～90min，以试剂空白为参比，用紫外-可见分光光度计在350～600nm范围内进行光谱扫描，确定络合物的最大吸收波长为516-520nm，从而测定尼扎替丁的含量。
有益效果
本发明提供了一种尼扎替丁的含量测定方法。具备以下有益效果：本发明采用荷移分光光度法测定波长通常在可见光区，消除了紫外吸收物质带来的干扰这一优点，另外，此方法还有很多优点：无需昂贵精密仪器、方法简单快速，具有较高灵敏度，能够实现对尼扎替丁含量的快速、准确、高重现性、高回收率的测定，操作简单快捷，适于应用推广，对控制尼扎替丁制剂的质量和保证临床疗效具有重要意义。
附图说明
图1为本发明的尼扎替丁、氯冉酸(pCA)、尼扎替丁和pCA反应液的紫外-可见吸收光谱图；
图1中a-尼扎替丁、b-氯冉酸(pCA)、c-100ug/mL的尼扎替丁和氯冉酸的反应液、d-150ug/mL的尼扎替丁和氯冉酸的反应液；
图2为不同溶剂对尼扎替丁-氯冉酸络合物形成的影响；
图3为不同表面活性剂对荷移反应的影响；
图4为氯冉酸用量对荷移反应的影响；
图5为反应时间对荷移络合物的影响；
图6为反应温度对荷移反应的影响；
图7为本发明的尼扎替丁与不同电子受体反应后的颜色变化；
图7中尼扎替丁(NIZ)、茜素红(AZR)、四氰基乙烯(TCNE)、茜素(AZ)、氯冉酸(pCA)、2,3-二氯-5,6-二氰基对苯醌(DDQ)；
图8为本发明的尼扎替丁与不同浓度pCA反应后的颜色变化；
图9为本发明的尼扎替丁-pCA络合物的标准曲线。
具体实施方式
本发明的实施例：尼扎替丁的含量测定方法，包括以下步骤：
1)尼扎替丁标准溶液的配制：精密称取尼扎替丁标准品25.0mg于烧杯中，用适量乙腈溶解，然后定容到25mL的容量瓶中，浓度为1.0mg/ml，于4℃冰箱保存备用；使用时用乙腈逐级稀释；
2)氯冉酸溶液配制：精密称取氯冉酸50.0mg于烧杯中，用适量乙腈溶解，定容到50mL的容量瓶中，浓度为1.0mg/mL，现配现用；
3)尼扎替丁样品溶液的制备：取尼扎替丁分散片20片(标示量为0.15g/片)内容物，研碎，准确称取相当于尼扎替丁45.0mg的量，用乙腈使尼扎替丁全部溶解后，过滤，滤纸用乙腈溶液洗2～3次，合并滤液与洗液，置100mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，得约0.45mg/mL尼扎替丁乙腈溶液；
4)尼扎替丁测定：移取一定量的尼扎替丁溶液于5mL比色管中，加入1mg/mLpCA溶液0.2～2mL，用乙腈稀释至5mL刻度，摇匀，于室温反应0～90min，以试剂空白为参比，用紫外-可见分光光度计在350～600nm范围内扫描进行光谱扫描，确定络合物的最大吸收波长518nm，从而测定尼扎替丁的含量。
为了进一步验证本发明的技术方案，申请人进行了如下方案：
荷移分光光度法测定尼扎替丁的含量荷移反应条件的选择。
测定波长的选择：按实验方法以试剂空白为参比，在350-600nm范围内进行光谱扫描，绘制吸收光谱，见附图1。由附图1可知：尼扎替丁(曲线a)350-600nm范围内没有明显的吸收峰；氯冉酸(pCA)(曲线b)的最大吸收峰为432nm；加入尼扎替丁后(曲线c)在518nm处出现新的吸收峰，最大吸收峰发生红移至518nm，所以本实验选取518nm作为测定波长。
溶剂的选择：试验考察了甲醇、乙醇、水、二甲亚砜、乙腈、二氯甲烷、1-正丙醇以及95％乙醇常用溶剂对吸光度的影响，结果表明：在相同条件下，当溶剂为水和二甲亚砜时，氯冉酸和水、二甲亚砜发生反应，当溶剂为乙腈时，体系的吸光度最大。试验选择乙腈作为溶剂，结果见附图2。
表面活性剂的影响：按照试验方法，选用十六烷基硫酸钠(SDS)、十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)、乳化剂(OP)、吐温-80、聚氧乙烯蓖麻油(EL-40)、氧化蓖麻油聚氧乙烯醚(RH-40)作为表面活性剂，考察表面活性剂对体系吸光度的影响。结果表明，表面活性剂对反应体系的吸光度没有促进作用，结果见附图3。
氯冉酸用量的影响：在其他条件不变的情况下，固定尼扎替丁的质量浓度为0.6mg/mL，试验考察了1.0mg/mL氯冉酸溶液的用量对测定的影响，结果表明，当氯冉酸的用量为1.0mL时，体系的吸光度最大，随着氯冉酸用量的增加，吸光度反而下降。试验选择氯冉酸的用量为1.0mL，结果见附图4。
反应时间的影响：试验考察了反应时间在0～90min范围内对吸光度的影响，结果表明：当反应时间为10min时，体系吸光度最大，且90min内吸光度无明显变化，试验选择反应时间为10min，结果见附图5。
温度的影响：试验考察了20、25、30、35、40、45、50℃时吸光度的变化。结果表明：不同温度下的吸光度变化不明显。因此，试验选择反应在室温下进行，结果见附图6.
尼扎替丁的含量测定方法的方法学考察
线性关系考察：
在最优反应条件下，对尼扎替丁质量浓度为16.0、32.0、48.0、64.0、80.0、120.0、160.0、200.0、240.0ug/mL的系列工作溶液进行测定，绘制体系的标准曲线，结果表明，尼扎替丁的质量浓度在16.0～240.0ug/mL范围内与吸光度A呈良好的线性关系，其线性回归方程为A＝0.0039c+0.01898，相关系数r＝0.9997。
检测限和定量限：
基于响应值的标准偏差和标准曲线斜率法计算。按照LOD＝3.3δ/S，LOQ＝10δ/S(δ是截距的标准偏差，S是标准曲线的斜率)计算，得到其检测限和定量限为3.22和9.77ug/mL。
重复性：
按本发明的实施例所述的含量测定方法制备6份尼扎替丁分散片供试品溶液，再按照步骤4)进行检测，计算得尼扎替丁分散片的标示量为99.55％，RSD＝0.62％，(n＝6)，说明该方法的重复性良好。
干扰物影响
在本发明的最佳条件下，考察了常见辅料以及一些无机离子存在对荷移反应的影响，确定了这些物质无干扰时的最大存在倍数，结果见表1.当尼扎替丁浓度为176.5ug/mL，相对误差在±5％范围内，淀粉、葡萄糖、乳糖等大量存在也不会对测定有影响。
表1共存物质对荷移反应的影响
耐用性：
取尼扎替丁分散片20(标示量0.15g/片)片，精密称定，研细，精密称取93.0mg至烧杯中，用适量乙腈溶解，滤过。滤液及洗液置50mL容量瓶中，用乙腈定容，取1.0mL滤液至5mL容量瓶中，微小改变荷移条件，测定其含量。结果见表2，由表2可知，微小改变荷移条件时，对其测定无显著影响。
表2耐用性测定结果
样品含量测定：
取尼扎替丁分散片20片(标示量为0.15g/片)或尼扎替丁胶囊20粒(标示量为0.15g/粒)内容物，研碎，准确称取相当于尼扎替丁45.0mg的量，用乙腈使尼扎替丁全部溶解后，过滤，滤纸用乙腈溶液洗2～3次，合并滤液与洗液，置100mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，得约0.45mg/mL尼扎替丁乙腈溶液。取2种样品溶液各1.0mL，按实验方法，分别测定2种药物中尼扎替丁的标示百分含量，并与高效液相色谱法测得的标示百分含量结果相比较，结果见表3。
表3尼扎替丁制剂中含量测定结果(n＝5)
回收率实验：
分别取2种已测知含量的尼扎替丁样品溶液1mL至5.0mL比色管中，精密加入相当于尼扎替丁含量80％、100％、120％对照品溶液，按本发明步骤(3)的测定方法进行回收试验，结果见表4。由表4可知，本法的准确度较高，数据可靠，可用于药物制剂中尼扎替丁含量的测定。
表4尼扎替丁制剂样品回收率
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (1)
1.一种尼扎替丁的含量测定方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)尼扎替丁标准溶液的配制：将尼扎替丁标准品用乙腈溶解，定容得到浓度为1.0mg/ml的尼扎替丁溶液，在4℃下保存备用；使用时用乙腈逐级稀释；
2)氯冉酸溶液配制：取氯冉酸用乙腈溶解，定容得到浓度为1.0mg/mL的氯冉酸溶液，现配现用；
3)尼扎替丁样品溶液的制备：取尼扎替丁样品，研碎后，称取一定量的的样品，用乙腈将尼扎替丁全部溶解后，过滤，滤液置于容量瓶中，滤纸用乙腈洗涤2～3次，合并滤液与洗液，用乙腈稀释到刻度，得到尼扎替丁的供试品溶液；
4)尼扎替丁测定：移取一定量的尼扎替丁溶液于5mL比色管中，加入1.0mg/mL氯冉酸溶液0.2～2.0mL，用乙腈稀释定容，摇匀，室温反应0～90min，以试剂空白为参比，用紫外-可见分光光度计在350～600nm范围内进行光谱扫描，确定络合物的最大吸收波长为516-520nm，从而测定尼扎替丁的含量。
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| CN109164055A (zh) * | 2018-09-25 | 2019-01-08 | 遵义医学院 | 一种盐酸雷尼替丁的含量测定方法 |
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