CN107787358A - 酶、洗涤剂组合物的用途以及衣物洗涤方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种或多种酶用于用水洗涤或漂洗衣物物品的用途，该水在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量和/或在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值。本发明进一步涉及一种洗涤剂组合物和一种湿洗方法。

Description

酶、洗涤剂组合物的用途以及衣物洗涤方法

序列表的引用

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发明领域

本发明涉及一种或多种酶用于用水洗涤或漂洗衣物物品的用途，该水在20℃下具有至少0.05％的盐含量和/或在20℃下具有至少1mg/L的BOD值。本发明进一步涉及一种用于这种用途的洗涤剂组合物和一种湿洗方法。

发明背景

水是所有活有机体生存的一个关键问题，因为包括绝大多数高等植物和大多数哺乳动物在内的许多有机体都必须有淡水才能生存。

水资源是有限的，并且在一些地区，水资源短缺已经成了问题。由于人口增长的步伐加快和单人使用的水量的增加，预期这种情况将继续恶化。世界上许多地区已经面临水可利用量的压力。未来水的短缺对人类将是有害的，因为它将影响到从公共卫生到整体健康和粮食生产的一切。

此外，淡水分布不均匀。虽然一些国家有充足的淡水供应，但另一些国家却没有那么多。例如，加拿大拥有20％的世界淡水供应，而印度只有10％的世界淡水供应，尽管印度的人口比加拿大人口高出30多倍。因此，在未来，海水和/或废水的用途可能变得很重要。

此外，在钻井平台、集装箱船或散装货船上，淡水是有限资源。在开发与海水一起使用的洗涤剂组合物方面，已经进行了若干次尝试。GB 2146323描述了一种来自脂肪油的α-烯烃磺酸钠，这是一种在海水中使用的新型肥皂。Rao B.S.和De C.P.推荐一种与海水一起使用的特定洗涤剂组合物(Defence Science Journal[国防科学杂志]，第6(1)卷，1956)。

当在硬水中使用衣物洗涤表面活性剂时，硬水中的钙和镁离子与表面活性剂发生反应，并形成不溶性的钙和镁皂，其不具有去垢力并且不具有起泡特性。因此，在硬水中使用表面活性剂时，其一部分是被浪费的，为了获得清洁效果，人们必须使用甚至更多的肥皂。

发明内容

本发明涉及一种或多种酶用于用水洗涤或漂洗衣物物品的用途，该水在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量和/或在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值。进一步要求保护一种洗涤剂组合物，其包含阴离子表面活性剂、助洗剂和选自下组的一种或多种酶，该组由以下各项组成：半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和/或黄原胶酶，其中该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例在1:62范围内。

此外，本发明涉及一种用于湿洗纺织品的方法，该方法包括以下步骤：

a.使该纺织品与洗液接触，该洗液包含根据权利要求17-44中任一项所述的洗涤剂组合物和在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量的水和/或在20℃下具有至少大于3mgO2/L的BOD5值的水；

b.完成至少一个洗涤周期；并且

c.任选地冲洗该纺织品。

定义

生化需氧量或B.O.D是生化需氧量。它指的是需氧生物有机体在一定的温度下经特定的时间段，分解有机物质所需要的溶解氧的量。BOD通常在5天内进行评估，并且于是该值被称为BOD₅。BOD₅值通常被用作水系统的有机污染程度指标。

根据地质条件和污染程度，在不同的水系统中BOD₅值不同，并且因此很难给出淡水系统的一般BOD₅值。欧洲环境署在20世纪90年代测量了欧洲各河站的BOD₅值，并发现该值在1.5和6mg O₂/L之间。(http://www.eea.europa.eu/data-and-maps/indicators/organic-matter-in-rivers/bod-and-ammonium-in-rivers)。通常，小于2mg O₂/L的BOD₅值表明干净的河流，而受污染的河流则具有大于5mg O₂/L的BOD₅值。

US EPA(美国环境保护署)已经开发了一种河流污染指数，其包括(RPI)BOD₅值作为参数(http://wq.epa.gov.tw/WQEPA/Code/Business/Standard.aspx？Languages＝en)。来自US EPA河流污染指数的BOD₅值和溶解氧值示于下表。

表：根据US EPA RPI，BOD₅值作为水污染指标。

根据US EPA，未受污染的河流具有低于3.0的BOD₅值。

相比之下，污水或废水的BOD₅值大于100mg O₂/L，并且往往相当高。

洗涤剂组合物：术语“洗涤剂组合物”是指用于从有待清洁的物品(如纺织品)去除不希望的化合物的组合物。该洗涤剂组合物可以用于例如清洁纺织品，用于家用清洁和工业清洁二者。这些术语涵盖选择用于希望的具体类型的清洁组合物和产品的形式(例如，液体、凝胶、粉末、颗粒、糊状、或喷雾组合物)的任何材料/化合物，并且包括但不限于洗涤剂组合物(例如，液体和/或固体衣物洗涤剂和精细织物洗涤剂；织物清新剂；织物柔软剂；以及纺织品和衣物预去污剂/预处理)。除了含有本发明的酶之外，该洗涤剂配制品还可以含有一种或多种另外的酶(如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代过氧合酶、过氧化氢酶以及甘露聚糖酶、或其任何混合物)，和/或洗涤剂佐剂成分，如表面活性剂、助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、增泡剂、抑泡剂、染料、香料、晦暗抑制剂、光学增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、防蚀剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、一种EPA种转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂和荧光染料、抗氧化剂以及增溶剂。

酶洗涤益处：在此将术语“酶洗涤益处”定义为将一种酶添加至洗涤剂中与不具有该酶的同一洗涤剂相比的有利效果。可以由酶提供的重要去污益处是污渍去除伴随在洗涤和/或清洁之后无可见污物或污物非常少、阻止或减少在洗涤过程中所释放的污物再沉积(一种又称作抗再沉积的作用)、完全或部分地恢复纺织品的白度(一种又称作增白的作用)，这些纺织品最初是白色的，但是在反复使用和洗涤后获得淡灰或淡黄色外观。不直接与污物的催化污渍去除或其再沉积的预防相关的纺织品护理益处对于酶洗涤益处而言也是重要的。此类纺织品护理益处的实例是预防或减少染料从一织物转移至另一织物或同一织物的另一部分(一种也被称作染料转移抑制或抗返染的作用)，从织物表面去除突出或断裂的纤维以减少起球倾向或去除已经存在的绒球或绒毛(一种也被称作抗起球的作用)，改进织物柔软性，织物的颜色澄清以及去除陷在织物或服装的纤维中的微粒状污垢。酶漂白是一种另外的酶洗涤益处，其中通常将催化活性用于催化漂白组分(如过氧化氢或其他过氧化物)的形成。

片段：术语“片段”意指从成熟多肽或结构域的氨基和/或羧基末端缺失的一个或多个(例如，若干个)氨基酸的多肽；其中该片段具有酶活性。

淡水：术语“淡水”意指地球表面上在冰川、冰盖、冰河、冰山、沼泽、池塘、湖泊、河流和溪流、以及地下(如水层和地下河中的地下水)中天然存在的水。淡水通常通过具有低浓度的溶解盐和其他完全溶解的固体来表征。该术语特别排除了海水、半咸水和具有大于3mg O₂/L的BOD₅值的水。

改进的洗涤性能：在此将术语“改进的洗涤性能”定义为相对于没有酶的相同洗涤剂组合物的洗涤性能，展示出洗涤剂组合物中增加的洗涤性能的酶，例如，通过增加去污或较少的再沉积。术语“改进的洗涤性能”包括在衣物中的洗涤性能。

分离的：术语“分离的”意思指处于自然界中不存在的形式或环境中的一种物质。分离的物质的非限制性实例包括(1)任何非天然存在的物质；(2)至少部分地从与它天然相关的一个或多个或所有天然存在的成分中去除的任何物质，包括但不限于：任何酶、变体、核酸、蛋白质、肽或辅因子；(3)相对于在自然界中发现的物质经过人为改变的任何物质；或(4)相对于与它天然相关的其他组分通过增加该物质的量(例如，在宿主细胞中的重组生产；编码该物质的基因的多个拷贝；以及使用比与编码该物质的基因天然相关联的启动子更强的启动子)而改变的任何物质。分离的物质可以存在于发酵液样品中，例如，可以将宿主细胞进行遗传修饰来表达本发明多肽。来自宿主细胞的发酵液将包含分离的多肽。

湿洗(laundering)：术语“湿洗”涉及家用湿洗和工业湿洗两者并且意指用一种含有本发明的清洁或洗涤剂组合物的溶液处理纺织品的过程。湿洗过程可以例如使用例如家用或工业洗衣机进行或可以手动进行。

反射值：洗涤性能被表达为染污的小块布样的反射值。洗涤并冲洗之后，将小块布样摊开铺平并且允许在室温下风干过夜。在洗涤的次日评估所有洗涤小块布样。使用具有非常小孔径的Macbeth Color Eye 7000反射分光光度计进行小块布样的光反射评估。在入射光中没有UV的条件下进行测量，并提取460nm下的反射率。

自来水：术语“自来水”意指具有一定质量因此其可用于人类消耗的水。

纺织品：术语“纺织品”意指任何纺织品材料，该任何纺织品材料包括纱线、纱线中间体、纤维、非机织物材料、天然材料、合成材料、以及任何其他纺织品材料，这些材料制造的织物和由这些织物制成的产品(例如，服装和其他物品)。该纺织品或织物可以处于针织品、机织物、牛仔布、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布的形式。这些纺织品可以是纤维素基的，如天然纤维素，包括棉、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维或人造纤维素(例如，来源于木浆)，包括纤维胶/人造丝、醋酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维(lyocell)或其共混物。纺织品或织物也可以不基于纤维素，如天然聚酰胺，包括羊毛、驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和蚕丝或合成聚合物如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨纶/弹性纤维(spandex/elastane)、或其共混物其以及基于纤维素和不基于纤维素的纤维的共混物。共混物的实例是棉和/或人造丝/纤维胶与一种或几种伴随材料的共混物，该伴随材料如羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚氯乙烯纤维、聚氨酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)和/或含纤维素的纤维(例如人造丝/纤维胶、苎麻、亚麻/亚麻布、黄麻、醋酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)。织物可以是常规的可洗涤衣物，例如染污的家居衣物。当使用术语织物或衣服时，旨在也包括广义术语纺织品。

变体：术语“变体”意指在一个或多个(例如，若干个)位置包含改变(即，取代、插入和/或缺失)的与亲本酶具有相同活性的多肽。取代意指占据一个位置的氨基酸由不同的氨基酸代替；缺失意指去除占据一个位置的氨基酸；以及插入意指在占据一个位置的氨基酸的毗邻处和紧邻处添加一个氨基酸。

洗涤周期：在此将术语“洗涤周期”定义为一个洗涤操作，其中将纺织品浸泡在洗液中，将某种机械作用施加至该纺织品，以释放污渍，并且协助洗液流进和流出该纺织品，并且最终去除多余的洗液。在一个或多个洗涤周期后，总体上对该纺织品进行漂洗和干燥。

洗液：在此将术语“洗液”定义为任选地包括表面活性剂和另外的洗涤剂成分的水和酶的溶液或混合物。

具体实施方式

水资源是有限的，并且在一些地区，水资源短缺已经成了问题。由于人口增长的步伐加快和单人使用的水量的增加，预期这种情况将继续恶化。世界上许多地区已经面临水可利用量的压力。未来水的短缺对人类将是有害的，人类将被迫探索新的用水方式。一种方法可以是在可能的情况下用盐水和/或废水代替淡水。此外，在钻井平台、集装箱船或散装货船上，淡水是有限资源。

用盐水洗涤或漂洗衣物物品在钻井平台或船上是很常见的。然而，由于表面活性剂与盐水中的阳离子反应，并因此降低了表面活性剂的洗涤效果，并且人们必须使用甚至更多的表面活性剂，所以用盐水洗涤可能会有问题。

发明人已经出人意料地发现，可以将在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量和/或在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值的水与一种或多种酶一起使用，用于洗涤和/或漂洗衣物物品，具有良好的洗涤效果。这些酶可以选自下组，该组由以下各项组成：蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、过氧化物酶和氧化酶。在本发明的一个实施例中，这些酶是蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的组合。本发明人已经发现，当用在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量和/或在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值的水洗涤时，使用一种或多种酶提高了洗涤性能。在本发明的一个实施例中，该酶选自下组，该组由以下各项组成：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、果胶裂解酶和甘露聚糖酶。

在一个实施例中，本发明涉及一种用于湿洗纺织品的方法，该方法包括以下步骤：

a.使该纺织品与洗液接触，该洗液包含根据本发明所述的洗涤剂组合物和在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量的水和/或在20℃下具有至少大于3mg O2/L的BOD5值的水；

b.完成至少一个洗涤周期；并且

c.任选地冲洗该纺织品。

在洗液中的该酶的浓度为每升洗液至少0.01g的酶蛋白，如每升洗液至少0.015g的酶蛋白、至少0.02g的酶蛋白、至少0.025g的酶蛋白、至少0.03g的酶蛋白。

该洗液的pH在1至11范围内，如在5.5至11范围内，如在7至9范围内，在7至8范围内或在7至8.5范围内。

该洗液可以具有如下的温度：在5℃至95℃范围内，或在10℃至80℃范围内，在10℃至70℃范围内，在10℃至60℃范围内，在10℃至50℃范围内，在15℃至40℃范围内或在20℃至30℃范围内。在一个实施例中，该洗液的温度是30℃。

在一个实施例中，本方法进一步包括在完成洗涤周期后排掉洗液或部分洗液。湿洗过程可以包括在第一个和任选地第二个或第三个洗涤周期过程中使物品与洗液接触。在一个实施例中，在与洗液接触后，漂洗该物品。可以将该物品用在20℃下具有至少0.05％的盐含量和/或在20℃下具有至少为1mg/L的BOD值的水漂洗，其中该水任选地包含调理剂。

在一个实施例中，将该物品用盐水或包含调理剂的盐水漂洗。在一个实施例中，将该物品用盐水和在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值的水的组合漂洗。在一个实施例中，将该物品用淡水或淡水、盐水和在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值的水的组合漂洗。

在一个实施例中，所使用的水是海水。海水的盐含量有所不同，并且取决于海洋。海洋的盐含量约为3％，大西洋的盐含量为3.5％，而存在于峡湾或靠近河口的海水的盐含量则较低。在本发明的一个实施例中，该水是废水。废水可以来自家庭住户、机构或工业。该废水不包括来自工业湿洗过程中的废水。

在一个实施例中，将该水用淡水稀释以获得较低的NaCl含量和/或较低的BOD5值。该水可以是海水。

在本发明的一个实施例中，将海水用淡水稀释，使得水的盐含量降低。在本发明的一个实施例中，将海水稀释，以获得低于3％盐的盐含量。在一个实施例中，将海水稀释至低于2.5％、低于2％或低于1.5％的盐含量

在一个实施例中，所使用的水是具有如下的BOD₅值的水：在20℃下3mg O₂/L至在20℃下100mg O₂/L范围内。废水的BOD₅值有所不同，并且取决于废水的处理。在本发明的一个实施例中，该水具有或被稀释成具有如下的BOD₅值：在20℃下，在5至100mg O₂/L范围内、在10至100mg O₂/L范围内、在20至100mg O₂/L范围内、在30至100mg O₂/L范围内、在40至100mgO₂/L范围内、在50至100mg O₂/L范围内、在60至100mg O₂/L范围内、在70至100mg O₂/L范围内、在80至100mg O₂/L范围内、或在90至100mg O₂/L范围内。

在本发明的一个实施例中，该水具有或被稀释成具有如下的BOD₅值：在20℃下，在3至20mg O₂/L范围内、在3至15mg O₂/L范围内、在3至10mg O₂/L范围内、在3至8mg O₂/L范围内、在3至6mg O₂/L范围内、在4至20mg O₂/L范围内、在4至15mg O₂/L范围内、在4至10mg O₂/L范围内、在4至8mg O₂/L范围内、在4至6mg O₂/L范围内、在5至20mg O₂/L范围内、在5至15mgO₂/L范围内、在5至10mg O₂/L范围内、在5至8mg O₂/L范围内、在5至6mg O₂/L范围内、在6至20mg O₂/L范围内、在6至15mg O₂/L范围内、在6至10mg O₂/L范围内、在6至8mg O₂/L范围内、在8至20mg O₂/L范围内、在8至15mg O₂/L范围内、在8至10mg O₂/L范围内、在10至20mg O₂/L或在10至15mg O₂/L范围内。

在本发明的一个实施例中，该水在20℃下具有或被稀释成具有在水中的如下NaCl含量：至少0.1％，如至少0.2％、至少0.3％、至少0.4％、至少0.5％、至少0.6％、至少0.7％、至少0.8％、至少0.9％、至少1.0％、至少1.1％、至少1.2％、至少1.3％、至少1.4％、至少1.5％、至少1.6％、至少1.7％、至少1.8％、至少1.9％、至少2.0％、至少2.2％、至少2.4％、至少2.6％、至少2.8％、至少3.0％、至少3.2％、至少3.4％、至少3.5％、至少3.6％、至少3.8％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％。

在本发明的一个实施例中，该水具有或被稀释成具有在水中的如下的NaCl含量：在20℃下，在0.05％至10％范围内。

在本发明的一个实施例中，将水稀释，以获得低于2％的NaCl含量和/或低于20的BOD₅值。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在0.05％至9％范围内、在0.05％至8％范围内、在0.05％至7％范围内、在0.05％至7％范围内、在0.05％至6％范围内、在0.05％至5％范围内、在0.05％至4％范围内、在0.05％至3.8％范围内、在0.05％至3.6％范围内、在0.05％至3.5％或在0.05％至3.3％范围内。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在0.1％至9％范围内、在0.1％至8％范围内、在0.1％至7％范围内、在0.1％至7％范围内、在0.1％至6％范围内、在0.1％至5％范围内、在0.1％至4％范围内、在0.1％至3.8％范围内、在0.1％至3.6％范围内、在0.1％至3.5％或在0.1％至3.3％范围内。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在0.2％至9％范围内、在0.2％至8％范围内、在0.2％至7％范围内、在0.2％至7％范围内、在0.2％至6％范围内、在0.2％至5％范围内、在0.2％至4％范围内、在0.2％至3.8％范围内、在0.2％至3.6％范围内、在0.2％至3.5％或在0.2％至3.3％范围内。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在0.3％至9％范围内、在0.3％至8％范围内、在0.3％至7％范围内、在0.3％至7％范围内、在0.3％至6％范围内、在0.3％至5％范围内、在0.3％至4％范围内、在0.3％至3.8％范围内、在0.3％至3.6％范围内、在0.3％至3.5％或在0.3％至3.3％范围内。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在0.4％至9％范围内、在0.4％至8％范围内、在0.4％至7％范围内、在0.4％至7％范围内、在0.4％至6％范围内、在0.4％至5％范围内、在0.4％至4％范围内、在0.4％至3.8％范围内、在0.4％至3.6％范围内、在0.4％至3.5％或在0.4％至3.3％范围内。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在0.5％至9％范围内、在0.5％至8％范围内、在0.5％至7％范围内、在0.5％至7％范围内、在0.5％至6％范围内、在0.5％至5％范围内、在0.5％至4％范围内、在0.5％至3.8％范围内、在0.5％至3.6％范围内、在0.5％至3.5％或在0.5％至3.3％范围内。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在1％至9％范围内、在1％至8％范围内、在1％至7％范围内、在1％至7％范围内、在1％至6％范围内、在1％至5％范围内、在1％至4％范围内、在1％至3.8％范围内、在1％至3.6％范围内、在1％至3.5％或在1％至3.3％范围内。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在2％至9％范围内、在2％至8％范围内、在2％至7％范围内、在2％至7％范围内、在2％至6％范围内、在2％至5％范围内、在2％至4％范围内、在2％至3.8％范围内、在2％至3.6％范围内、在2％至3.5％或在2％至3.3％范围内。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在3％至9％范围内、在3％至8％范围内、在3％至7％范围内、在3％至7％范围内、在3％至6％范围内、在3％至5％范围内、在3％至4％范围内、在3％至3.8％范围内、在3％至3.6％范围内、在3％至3.5％或在3％至3.3％范围内。

在一个实施例中，水的NaCl含量在20℃下在3,5％至9％范围内、在3,5％至8％范围内、在3,5％至7％范围内、在3,5％至7％范围内、在3,5％至6％范围内、在3,5％至5％范围内或在3,5％至4范围内。

在一个实施例中，本发明进一步包括除一种或多种酶之外的至少一种阴离子型表面活性剂和至少一种助洗剂的使用。该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例应该为约1:62。在本发明的一个实施例中，该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例在1:20至1:62范围内。

在一个实施例中，本发明涉及一种洗涤剂组合物，其包含阴离子表面活性剂、助洗剂和选自下组的一种或多种酶，该组由以下各项组成：半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和/或黄原胶酶，其中该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例在1:62范围内。在本发明的一个实施例中，该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例在1:20至1:62范围内。

该阴离子型表面活性剂选自下组，该组由以下各项组成：硫酸盐和磺酸盐、直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)、十二烷基硫酸钠(SDS)、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸的二酯和单酯或脂肪酸的盐(皂)。在优选实施例中，阴离子表面活性剂是LAS。

该洗涤剂组合物可以含有按重量计约0-65％，如约5％至约50％的洗涤剂助洗剂或共助洗剂、或其混合物。助洗剂和/或共助洗剂可以具体是与Ca和Mg形成水溶性络合物的螯合试剂。可以使用本领域中已知用于在洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐例如碳酸钠、可溶性硅酸盐如硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA，也称为2,2’-亚氨基二乙-1-醇)、三乙醇胺(TEA，也称为2,2’,2”-次氮基三乙-1-醇)、以及羧甲基菊粉(CMI)、及其组合。

该洗涤剂组合物还可以含有按重量计0-50％，如约5％至约30％的洗涤剂共助洗剂。洗涤剂组合物可以包括单独的共助洗剂、或与助洗剂如沸石助洗剂组合的共助洗剂。共助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物，如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性实例包括柠檬酸盐，螯合剂，如氨基羧酸盐、氨基多羧酸盐和磷酸盐，以及烷基-或烯基琥珀酸。另外的具体实例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二丁二酸(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N-(2-羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-单乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)、天冬氨酸-N-单丙酸(ASMP)、亚氨基二丁二酸(iminodisuccinicacid)(IDA)、N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、丝氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、异丝氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸(SLDA)、牛磺酸-N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羟乙基)-亚乙基二胺-N,N’,N”-三乙酸盐(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)及其组合和盐。其他示例性助洗剂和/或共助洗剂描述于例如WO09/102854、US 5977053中。

在优选实施例中，洗涤剂组合物中一种或多种酶选自下组，该组由以下各项组成：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、果胶裂解酶和甘露聚糖酶。

该蛋白酶选自下组，该组由以下各项组成：芽胞杆菌属，例如，枯草杆菌蛋白酶诺和(Novo)、枯草杆菌蛋白酶嘉士伯(Carlsberg)、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147、枯草杆菌蛋白酶168、牛源胰蛋白酶、猪源的胰蛋白酶和镰孢属蛋白酶。

在本发明的一个实施例中，蛋白酶与SEQ ID NO:1具有至少90％，如至少95％的序列一致性。在一个实施例中，该蛋白酶与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少90％一致性、或在以下位置中的一个或多个具有取代的其变体：27、36、57、76、87、97、101、104、120、123、167、170、194、206、218、222、224、235、和274，优选地，该变体是与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少90％一致性的碱性蛋白酶，其具有以下取代：M222S或取代N76D+G195E。

在本发明的一个实施例中，该脂肪酶是一种与SEQ ID NO:2具有至少90％，如至少95％的序列一致性的多肽或其变体，其中该多肽包含以下取代：T231R和N233R。

在本发明的一个实施例中，该淀粉酶是一种与SEQ ID NO:3 10或SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少90％的序列一致性的α-淀粉酶或其变体。

在本发明的一个实施例中，该酶是纤维素酶，其中该纤维素酶是表现出内切β-1,4-葡聚糖酶活性的碱性细菌酶(EC 3.2.1.4)。该纤维素酶可以是与SEQ ID NO:5具有至少90％，如至少95％或100％的序列一致性的多肽或其变体。

在本发明的一个实施例中，该酶具有果胶裂解酶活性并且可以是与SEQ ID NO:6具有至少90％，如至少95％或100％的序列一致性的多肽或其变体。

在本发明的一个实施例中，该酶是甘露聚糖酶，如与SEQ ID NO:7具有至少90％，如至少95％或100％的序列一致性的多肽或其变体。

该洗涤剂组合物可以包含一种选自下组的成分，该组由以下各项组成：表面活性剂、助洗剂、絮凝助剂、螯合试剂、染料转移抑制剂、酶、酶稳定剂、酶抑制剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预形成的过酸、聚合的分散剂、粘土去污剂/抗再沉淀剂、增白剂、抑泡剂、染料、香料、结构弹力剂、织物柔软剂、载体、助水溶物、助洗剂和共助洗剂、织物调色剂、防沫剂、分散剂、加工助剂、和/或颜料。

在本发明的一个实施例中，洗涤剂组合物中酶的浓度为至少3,7x10-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物、至少4,0x10-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物、至少4,5x10-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物、至少5x10-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物、或至少6,0x10-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物。

该洗涤剂组合物可以被配制为条、均匀的片剂、具有两个或更多个层的片剂、具有一个或多个室的袋、规则的或压缩的粉末、颗粒、膏、凝胶、或规则的、压缩的或浓缩的液体。

本发明进一步涉及一种液体洗涤剂组合物，该组合物包含总浓度按重量计是至少3％的表面活性剂和洗涤剂以及洗涤剂助洗剂，以及含酶的微囊，其中该微囊的膜是通过具有高于1kDa分子量的多支化的多胺的交联而产生。诸位发明人已经发现，将酶包封在本发明具有半透膜的微囊中，并且在这些胶囊(在添加至该液体洗涤剂之前)中具有高于该液体洗涤剂中的水活度时，当被添加到该洗涤剂(水正溢出)中时这些囊将经历(部分地)崩溃，因此在这些囊中留下更为浓缩的并且更粘的含酶内部。该膜的崩溃还可导致可透性的降低。这可以通过添加稳定剂/聚合物进一步使用，尤其是不会通过该膜可透的那些。该崩溃和所得黏度增加将降低/妨碍敌对组分(例如，表面活性剂或螯合剂)扩散进入这些囊中，并且因此增加液体洗涤剂中酶的储存稳定性。该液体洗涤剂中的对该酶敏感的组分(例如，充当该酶底物的组分)还被保护免于受该酶的降解。在洗涤过程中，该液体洗涤剂被水稀释，因此增加了水活度。水现在将扩散进这些囊(渗透作用)中。这些囊将溶胀并且该膜将变得对该酶可透过由此它们可以离开这些囊，或简单地胀裂并且以此方式释放该酶。该概念在稳定这些酶对抗液体洗涤剂中的敌对组分方面非常有效，反之亦然还保护该液体洗涤剂中酶敏感的组分不受酶的影响。该微囊可如WO 2014/177709中描述进行生产。

洗涤剂组合物

在一个实施例中，本发明涉及洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包含结合一种或多种额外的清洁组合物组分的本发明的酶。另外的组分的选择在普通技术人员技术内并且包括常规成分，包括以下列出的示例性、非限制性组分。

液体洗涤剂组合物

该液体洗涤剂组合物可以含括本发明的微囊，并且由此形成处于任何形式的任何洗涤剂组合物的一部分，如液体和粉末洗涤剂，以及皂和洗涤剂条。

在一个实施例中，本发明涉及液体洗涤剂组合物，这些组合物包含微囊(如上所述)与一种或多种另外的清洁组合物组分组合。

该微囊(如上所述)可以按对应于从0.0001％至5％(w/w)活性酶蛋白(AEP)的量被添加至该液体洗涤剂组合物；优选地从0.001％至5％，更优选地从0.005％至5％，更优选地从0.005％至4％，更优选地从0.005％至3％，更优选地从0.005％至2％，甚至更优选地从0.01％至2％，并且最优选地从0.01％至1％(w/w)活性酶蛋白。

该液体洗涤剂组合物具有一种物理形式，它不是固体(或气体)。它可以是可倾流的液体，糊剂，可倾流的凝胶或不可倾流的凝胶。它可以是各向同性的亦或或结构化的，优选是各向同性的。它可以是一种配制品，用于在自动洗衣机中洗涤或用于手洗。它还可以是个人护理产品，例如个人护理产品洗发水、牙膏、或洗手皂。

该液体洗涤剂组合物可以是水性的，典型地含有按重量计至少20％并且高达95％的水，如高达70％的水、高达50％的水、高达40％的水、高达30％的水、或高达20％的水。包括但不限于链烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他类型的液体可以被包括在水性液体洗涤剂中。水性液体洗涤剂可以含有从0-30％的有机溶剂。液体洗涤剂甚至可以是非水性的，其中水含量低于10％，优选低于5％。

洗涤剂成分可以通过水可溶性小袋中的区室彼此物理性地分开。由此可以避免组分之间的负面的储存相互作用。在洗涤溶液中，每个室的不同溶解曲线还可以引起选择的组分的延迟溶解。

该洗涤剂组分可以采用一种单位剂量产物的形式。单位剂量产品是不可重复使用的容器中的单一剂量的包装。它越来越多地用于针对衣物的洗涤剂中。一个洗涤剂单位剂量产品是在单次洗涤中所用的洗涤剂量值的包装(例如，在由一种水溶性膜制得的一个小袋中)。

袋可以是适于保存该组合物的任意形式、任何形状、和任何材料，例如不允许该组合物在与水接触之前从该袋中释放出。袋由封装内体积的水溶性膜制成。可以将所述内体积分为具有袋的室。优选的膜是形成膜或片的聚合材料，优选是聚合物。优选的聚合物、共聚物或其衍生物选自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、糊精钠、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚甲基丙烯酸酯，最优选地是聚乙烯醇共聚物以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)。优选地，在膜中的聚合物(例如PVA)的水平是至少约60％。优选的平均分子量将典型地是约20,000至约150,000。膜还可以是一种混合组合物，包含可通过水解可降解的以及水溶性的聚合物混合物，如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在贸易参考(Trade reference)M8630下，由Chris Craft In.Prod.Of Gary，Ind.，US销售)，以及增塑剂，像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨糖醇及其混合物。这些袋可以包含固体衣物清洁组合物或部分组分和/或液体清洁组合物或由水溶性膜分开的部分组分。组合物中，液体组分的室可以与含固体的室不同(参见例如，US 2009/0011970)。

洗涤剂组分的选择可以包括(用于纺织品护理)有待清洁的纺织品的类型、污物的类型和/或程度、进行清洁时的温度、以及洗涤剂产品的配制的考虑。尽管根据一种具体的功能性对以下提及的组分由通用标题进行分类，但是这并不被解释为限制，因为如将被普通技术人员所理解，一种组分可以包含另外的功能性。

另外的组分的选择在普通技术人员技术内并且包括常规成分，包括以下列出的示例性、非限制性组分。

酶

洗涤剂添加剂连同洗涤剂组合物可以包含一种或多种另外的酶，如蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶(例如漆酶)、和/或过氧化物酶。

一般而言，所选的一种或多种酶的特性应与选定的洗涤剂相容(即，最适pH，与其他酶和非酶成分的相容性，等)，并且该酶应以有效量存在。

纤维素酶

适合的纤维素酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。适合的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、镰孢属、梭孢壳菌属、支顶孢属的纤维素酶，例如披露于US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691,178、US5,776,757以及WO 89/09259中的由特异腐质霉、嗜热毁丝霉和尖孢镰孢属产生的真菌纤维素酶。

特别适合的纤维素酶是具有颜色护理益处的碱性或中性纤维素酶。此类纤维素酶的实例是描述于EP 0 495 257、EP 0 531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中的纤维素酶。其他实例是例如描述于WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307以及WO 99/001544中的那些纤维素酶变体。

其他纤维素酶是具有以下序列的内切-β-1,4-葡聚糖酶，该序列与WO2002/099091的SEQ ID NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97％一致性，或家族44木葡聚糖酶，该木葡聚糖酶具有以下序列，该序列与WO 2001/062903的SEQ ID NO:2的位置40-559具有至少60％一致性。

可商购的纤维素酶包括Celluzyme^TM和Carezyme^TM(诺维信公司(Novozymes A/S))、Carezyme Premium^TM(诺维信公司)、Celluclean^TM(诺维信公司)、CellucleanClassic^TM(诺维信公司)、Cellusoft^TM(诺维信公司)、Whitezyme^TM(诺维信公司)、Clazinase^TM和Puradax HA^TM(杰能科国际公司(Genencor International Inc.))以及KAC-500(B)^TM(花王株式会社(Kao Corporation))。

蛋白酶

适合的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些，例如植物或微生物来源。优选微生物来源。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。它可以是碱性蛋白酶，如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草杆菌蛋白酶)。金属蛋白酶可以例如是来自例如家族M4的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶，如来自M5、M7或M8家族的那些。

术语“枯草杆菌酶”是指根据Siezen等人，Protein Engng.[蛋白质工程]4(1991)719-737和Siezen等人，Protein Science[蛋白质科学]6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶是通过在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸来表征的蛋白酶的一个亚组。枯草杆菌蛋白酶(subtilase)可以划分为6个亚部，即，枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶(Thermitase)家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶(Lantibioticpeptidase)家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。

枯草杆菌酶的实例是获得自芽孢杆菌属的那些，如描述于US 7262042和WO 09/021867中的迟缓芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和吉氏芽孢杆菌；和描述于WO 89/06279中的枯草杆菌蛋白酶迟缓(lentus)、枯草杆菌蛋白酶诺和、枯草杆菌蛋白酶嘉士伯、地衣芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168以及描述于(WO 93/18140)中的蛋白酶PD138。其他有用的蛋白酶可以是描述于WO 92/175177、WO 01/016285、WO 02/026024以及WO 02/016547中的那些。胰蛋白酶样蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰孢菌蛋白酶(描述于WO 89/06270、WO 94/25583和WO 05/040372中)，以及获得自纤维单胞菌(Cellumonas)的胰凝乳蛋白酶(描述于WO 05/052161和WO 05/052146中)。

进一步优选的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的碱性蛋白酶(如在例如WO95/23221中所述)、及其变体(在WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147以及EP 1921148中描述的)。

金属蛋白酶的实例是如描述于WO 07/044993(杰能科国际公司(Genencor Int.))中的中性金属蛋白酶，例如获得自解淀粉芽孢杆菌的那些。

有用的蛋白酶的实例是描述于WO 92/19729、WO 96/034946、WO 98/20115、WO 98/20116、WO 99/011768、WO 01/44452、WO 03/006602、WO 04/03186、WO 04/041979、WO 07/006305、WO 11/036263、WO 11/036264中的变体，尤其是在以下位置的一个或多个中具有取代的变体：3、4、9、15、27、36、57、68、76、87、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、106、118、120、123、128、129、130、160、167、170、194、195、199、205、206、217、218、222、224、232、235、236、245、248、252和274，使用BPN’编号。更优选地，这些枯草杆菌酶变体可以包含以下突变：S3T、V4I、S9R、A15T、K27R、*36D、V68A、N76D、N87S,R、*97E、A98S、S99G,D,A、S99AD、S101G,M,R S103A、V104I,Y,N、S106A、G118V,R、H120D,N、N123S、S128L、P129Q、S130A、G160D、Y167A、R170S、A194P、G195E、V199M、V205I、L217D、N218D、M222S、A232V、K235L、Q236H、Q245R、N252K、T274A(使用BPN’编号)。

适合的可商购蛋白酶包括以下列商品名出售的那些：Duralase^Tm、Durazym^Tm、Ultra、Ultra、Ultra、Ultra、和(诺维信公司)，以下列商品名出售的那些： Purafect Preferenz^Tm、PurafectPurafect Purafect Effectenz^Tm、以及(丹尼斯克/杜邦公司(Danisco/DuPont))、Axapem^TM(吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-BrocasesN.V.))、BLAP(示于US 5352604的图29中的序列)及其变体(汉高股份(Henkel AG))以及来自花王株式会社(Kao)的KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶)。

脂肪酶和角质酶

适合的脂肪酶和角质酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变酶。实例包括来自嗜热丝孢菌属(Thermomyces)(例如来自疏绵状嗜热丝孢菌(T.lanuginosus)(以前命名为柔毛腐质霉(Humicola lanuginosa))的脂肪酶(如描述于EP258 068和EP 305 216中)、来自腐质霉(例如特异腐质霉(H.insolens)(WO 96/13580))的角质酶、来自假单胞菌属(Pseudomonas)(这些假单胞菌属中的一些现在重命名为伯克氏菌属(Burkholderia))的脂肪酶(例如，产碱假单胞菌(P.alcaligenes)或类产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligene))(EP 218272)、洋葱假单胞菌(P.cepacia)(EP 331 376)、菌株SD705(WO 95/06720和WO 96/27002)、威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO 96/12012)、GDSL型链霉菌属脂肪酶(WO 10/065455)、来自稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)(WO10/107560)的角质酶、来自门多萨假多胞菌(Pseudomonas mendocina)(US 5,389,536)的角质酶、来自嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412)、嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)脂肪酶(WO 11/084417)、来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO 11/084599)、以及来自灰色链霉菌(WO 11/150157)和始旋链霉菌(WO 12/137147)的脂肪酶。

其他实例是脂肪酶变体，例如描述于EP 407225、WO 92/05249、WO 94/01541、WO94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中的那些。

优选的商业化脂肪酶产品包括Lipolase^TM、Lipex^TM；Lipolex^TM和Lipoclean^TM(诺维信公司)，Lumafast(来自杰能科公司(Genencor))以及Lipomax(来自吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocades))。

再其他实例是有时称为酰基转移酶或过水解酶的脂肪酶，例如与南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO 09/67279)以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体(特别是来自亨斯迈纺织品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业产品Gentle Power Bleach中所用的S54V变体)(WO 10/100028)。

淀粉酶

可以与本发明的酶一起使用的适合的淀粉酶可以是α-淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以具有细菌或真菌起源。包括化学修饰的或蛋白质工程处理的突变体。淀粉酶包括例如获得自芽孢杆菌属的α-淀粉酶，例如GB 1,296,839中更详细描述的地衣芽孢杆菌具体株系的α-淀粉酶。

合适的淀粉酶包括具有在WO 95/10603中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或与SEQ IDNO:3具有90％序列一致性的其变体。优选变体描述于WO 94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424以及WO 99/019467的SEQ ID NO:4中，如在一个或多个以下位置中具有取代的变体：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408、以及444。

不同的适合的淀粉酶包括具有WO 02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或与SEQID NO:6具有90％序列一致性的其变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在位置181和182中具有缺失并且在位置193中具有取代的那些。

其他适合的淀粉酶是包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO：6中的获得自解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO：4中的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶的残基36-483的杂合α-淀粉酶或其具有90％序列一致性的变体。此杂合α-淀粉酶的优选变体是在一个或多个以下位置中具有取代、缺失或插入的那些：G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209以及Q264。包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的获得自解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和SEQ ID NO:4的残基36-483的杂合α-淀粉酶的最优选变体是具有以下取代的那些：

M197T；

H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S；或

G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。

另外的合适的淀粉酶是具有在WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或与SEQID NO:6具有90％序列一致性的其变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在一个或多个以下位置中具有取代、缺失或插入的那些：R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216以及K269。特别优选的淀粉酶是在位置R181和G182或位置H183和G184中具有缺失的那些。

能被使用的另外的淀粉酶是那些具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的淀粉酶或与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7具有90％序列一致性的其变体。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7的优选变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304、以及476，使用WO 96/023873的SEQ ID2用于编号。更优选的变体是在选自181、182、183和184的两个位置上具有缺失的那些，如181和182、182和183、或位置183和184。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的最优选淀粉酶变体是在位置183和184具有缺失并在位置140、195、206、243、260、304和476中的一个或多个具有取代的那些。

其他能被使用的淀粉酶是具有WO 08/153815的SEQ ID NO:2、WO 01/66712的SEQID NO:10的淀粉酶或与WO 08/153815的SEQ ID NO:2或WO 01/66712的SEQ ID NO:10具有90％序列一致性的其变体。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选变体是在一个或多个以下位置中具有取代、缺失或插入的那些：176、177、178、179、190、201、207、211以及264。

另外的适合的淀粉酶是具有WO 09/061380的SEQ ID NO:2的淀粉酶或与SEQ IDNO:2具有90％序列一致性的其变体。SEQ ID NO:2的优选变体是在一个或多个以下位置中具有C-末端截短和/或取代、缺失或插入的那些：Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444和G475。SEQ ID NO:2的更优选变体是在一个或多个以下位置中具有取代的那些：Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E以及G475K和/或在位置R180和/或S181或T182和/或G183中具有缺失的那些。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是那些在以下位置具有取代的变体：

N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；

N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K；

S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；或

S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K，其中这些变体是C-末端截短的并且任选地进一步在位置243处包含取代和/或在位置180和/或位置181处包含缺失。

其他的合适的淀粉酶是具有在WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的淀粉酶或与SEQID NO:12具有90％序列一致性的变体。优选的淀粉酶变体是在WO 01/66712中的SEQ IDNO:12的一个或多个以下位置中具有取代、缺失或插入的那些：R28、R118、N174；R181、G182、D183、G184、G186、W189、N195、M202、Y298、N299、K302、S303、N306、R310、N314、R320、H324、E345、Y396、R400、W439、R444、N445、K446、Q449、R458、N471、N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有取代R118K、N195F、R320K和R458K的变体，并且另外在一个或多个选自下组的位置处具有取代的变体：M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345以及A339，最优选的是另外在所有这些位置处具有取代的变体。

其他的实例是淀粉酶变体，如在WO 2011/098531、WO 2013/001078、和WO 2013/001087中描述的那些。

可商购的淀粉酶是Duramyl^TM、Termamyl^TM、Fungamyl^TM、Stainzyme ^TM、StainzymePlus^TM、Natalase^TM、Liquozyme X及BAN^TM(来自诺维信公司)，以及Rapidase^TM、Purastar^TM/Effectenz^TM、Powerase及Preferenz S100(来自杰能科国际有限公司/杜邦公司(GenencorInternational Inc./DuPont))。

过氧化物酶/氧化酶

根据本发明的过氧化物酶是由如由国际生物化学与分子生物学联合会命名委员会(IUBMB)陈述的酶分类EC 1.11.1.7包括的过氧化物酶，或获得自其中的表现出过氧化物酶活性的任何片段。

适合的过氧化物酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自拟鬼伞属，例如来自灰盖拟鬼伞(C.cinerea)的过氧化物酶(EP 179,486)，及其变体，如在WO 93/24618、WO 95/10602以及WO 98/15257中描述的那些。

根据本发明的过氧化物酶还包括卤代过氧化物酶，如氯过氧化物酶、溴过氧化物酶以及表现出氯过氧化物酶或溴过氧化物酶活性的化合物。根据其对卤素离子的特异性将卤代过氧化物酶加以分类。氯过氧化物酶(E.C.1.11.1.10)催化从氯根离子形成次氯酸盐。

在实施例中，本发明的卤代过氧化物酶是氯过氧化物酶。优选地，该卤代过氧化物酶是钒卤代过氧化物酶，即含钒酸盐的卤代过氧化物酶。在本发明的优选方法中，将含钒酸盐的卤代过氧化物酶与氯根离子来源组合。

已经从许多不同真菌，特别是从暗色丝孢菌(dematiaceous hyphomycete)真菌组中分离出了卤代过氧化物酶，如卡尔黑霉属(Caldariomyces)(例如煤卡尔黑霉(C.fumago))、链格孢属、弯孢属(例如疣枝弯孢(C.verruculosa)和不等弯孢(C.inaequalis))、内脐蠕孢属、细基格孢属以及葡萄孢属。

还已经从细菌，如假单胞菌属(例如，吡咯假单胞菌(P.pyrrocinia))和链霉菌属(例如，金色链霉菌(S.aureofaciens))中分离出了卤代过氧化物酶。

在优选实施例中，该卤代过氧化物酶可源自弯孢属，特别是疣枝弯孢(Curvulariaverruculosa)或不等弯孢，如描述于WO 95/27046中的不等弯孢CBS 102.42或描述于WO97/04102中的疣枝弯孢CBS 147.63或疣枝弯孢CBS444.70；或可源自如描述于WO 01/79459中的Drechslera hartlebii，如描述于WO 01/79458中的盐沼小树状霉(Dendryphiellasalina)、如描述于WO 01/79461中的Phaeotrichoconis crotalarie或如描述于WO 01/79460中的Geniculosporium物种。

根据本发明的氧化酶具体包括由酶分类EC 1.10.3.2囊括的任何漆酶或获得自其中的表现出漆酶活性的片段、或展示出类似活性的化合物，如儿茶酚氧化酶(EC1.10.3.1)、邻氨基苯酚氧化酶(EC 1.10.3.4)或胆红素氧化酶(EC 1.3.3.5)。

优选的漆酶是微生物来源的酶。这些酶可以获得自植物、细菌或真菌(包括丝状真菌和酵母)。

来自真菌的适合实例包括可源自以下项的菌株的漆酶：曲霉属，脉孢菌属(例如，粗糙脉孢菌)，柄孢壳菌属，葡萄孢属，金钱菌属(Collybia)，层孔菌属(Fomes)，香菇属，侧耳属，栓菌属(例如，长绒毛栓菌和变色栓菌)，丝核菌属(例如，立枯丝核菌(R.solani))，拟鬼伞属(例如，灰盖拟鬼伞、毛头拟鬼伞(C.comatus)、弗瑞氏拟鬼伞(C.friesii)及C.plicatilis)，小脆柄菇属(Psathyrella)(例如，白黄小脆柄菇(P.condelleana))，斑褶菇属(例如，蝶形斑褶菇(P.papilionaceus))，毁丝霉属(例如，嗜热毁丝霉)，Schytalidium(例如，S.thermophilum)，多孔菌属(例如，P.pinsitus)，射脉菌属(例如，射脉侧菌(P.radiata))(WO 92/01046)或革盖菌属(例如，毛革盖菌(C.hirsutus))(JP 2238885)。

来自细菌的适合实例包括可源自芽孢杆菌属的菌株的漆酶。

优选的是获得自拟鬼伞属或毁丝霉属的漆酶；特别是获得自灰盖拟鬼伞的漆酶，如披露于WO 97/08325中；或来自嗜热毁丝霉，如披露于WO 95/33836中。

该一种或多种洗涤剂酶可以通过添加含有一种或多种酶的单独的添加剂，或通过添加包含所有这些酶的组合添加剂而被包括于洗涤剂组合物中。本发明的洗涤剂添加剂，即独立添加剂或组合添加剂，可以被配制为，例如颗粒、液体、浆体等。优选的洗涤剂添加剂配制品是颗粒，尤其是非尘颗粒；液体，尤其是稳定化的液体；或浆体。

非尘颗粒可以例如如在US 4,106,991和4,661,452中所披露而产生，并且可以任选地通过本领域已知的方法进行包衣。蜡状包衣材料的实例为具有1000至20000的平均摩尔重量的聚(环氧乙烷)产物(聚乙二醇，PEG)；具有从16至50个环氧乙烷单元的乙氧化壬基苯酚；乙氧化脂肪醇，其中该醇含有从12至20个碳原子，并且其中具有15至80个环氧乙烷单元；脂肪醇；脂肪酸；以及脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯以及甘油三酯。适用于通过流化床技术应用的成膜包衣材料的实例在GB 1483591中给出。液体酶制品可以例如通过根据已确立的方法添加多元醇(如丙二醇)、糖或糖醇、乳酸或硼酸而稳定化。受保护的酶可以根据EP238,216中披露的方法来制备。

洗涤剂产品的配制

本发明的洗涤剂组合物可以处于任何常规形式，例如条、均匀的片剂、具有两个或更多个层的片剂、具有一个或多个室的袋、规则的或压缩的粉末、颗粒、膏、凝胶、或规则的、压缩的或浓缩的液体。

袋可以被配置为单个或多个的室。它可以具有适合容持该组合物的任何形式、形状和材料，例如在与水接触之前，不允许该组合物从袋中释放出来。袋由封装内体积的水溶性膜制成。所述内部体积可以分成袋的室。优选的膜是高分子材料，优选被制成膜或薄片的形式的聚合物。优选的聚合物、共聚物或其衍生物选自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、糊精钠、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚甲基丙烯酸酯，最优选地是聚乙烯醇共聚物以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)。优选地，在膜中的聚合物(例如PVA)的水平是至少约60％。优选的平均分子量将典型地是约20,000至约150,000。膜还可以是共混组合物，该共混组合物包含可水解降解并且水可溶的聚合物共混物，如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在贸易参考M8630下，如由美国印第安纳州的MonoSol LLC公司销售的)加增塑剂，像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨醇及其混合物。这些袋可以包含固体衣物清洁组合物或部分组分和/或液体清洁组合物或由水溶性膜分开的部分组分。用于液体组分的室在构成上可以与含固体的室不同。US 2009/0011970 A1。

可以由水可溶的袋中或片剂的不同层中的室来将洗涤剂成分物理地彼此分开。由此可以避免组分之间的负面的存储相互作用。在洗涤溶液中，每个室的不同溶解曲线还可以引起选择的组分的延迟溶解。

非单位剂量的液体或凝胶洗涤剂可以是水性的，典型地含有按重量计至少20％并且高达95％的水，如高达约70％的水、高达约65％的水、高达约55％的水、高达约45％的水、高达约35％的水。包括但不限于链烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他类型的液体可以被包括在水性液体或凝胶中。含水液体或凝胶洗涤剂可以含有从0-30％的有机溶剂。

液体或凝胶洗涤剂可以是非水性的。

衣物皂条

这些酶可以被添加至衣物皂条中并且用于手洗衣物、织物和/或纺织品。术语衣物皂条包括衣物条、皂条、组合条(combo bar)、合成洗涤剂条以及洗涤剂条。条的类型通常区别在于它们包含的表面活性剂的类型，并且术语衣物皂条包括包含来自脂肪酸的皂和/或合成皂的那些。衣物皂条具有在室温下为固体而非液体、凝胶或粉末的物理形式。术语固体被定义为不随时间显著变化的物理形式，即如果固体物体(如衣物肥皂条)被放置在容器里，该固体物体不会改变以填充其放置的容器。该条是固体时典型地是条的形式但也可能是其他的固体形状如圆形或椭圆。

该衣物肥皂条可以含有一个或多个另外的酶、蛋白酶抑制剂如肽醛类(或次硫酸盐加合物或半缩醛加合物)、硼酸、硼酸盐、硼砂和/或苯基硼酸衍生物如4-甲酸基本硼酸、一个或多个肥皂或合成的表面活性剂、多元醇如甘油、pH控制化合物如脂肪酸、柠檬酸、乙酸和/或甲酸、和/或一价阳离子和有机阴离子的盐，其中该一价阳离子可以是例如Na⁺、K⁺或NH₄ ⁺并且该有机阴离子可以是例如甲酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐或乳酸盐，使得该一价阳离子和有机阴离子的盐可以是例如甲酸钠。

衣物皂条还可以含有络合剂像EDTA和HEDP，香料和/或不同类型的填充剂，表面活性剂例如阴离子型合成表面活性剂，助洗剂，聚合的污物释放剂，洗涤剂螯合剂，稳定剂，填充剂，染料，着色剂，染料转移抑制剂，烷氧基化的聚碳酸酯，抑泡剂，结构剂，粘合剂，浸出剂，漂白活化剂，粘土去污剂，抗再沉积剂，聚合分散剂，增白剂，织物柔软剂，香料和/或本领域已知的其他化合物。

衣物皂条可以在常规的衣物皂条制造设备中进行加工，衣物皂条制造设备如但不限制于：混合器、压条机例如双级真空压条机、挤出机、切割机、标识压模机(logo-stamper)、冷却隧道以及包装机。本发明不局限于通过任何单一方法制备衣物皂条。可以在过程的不同阶段向肥皂中添加本发明的预混料。例如，可以制备包含肥皂、任选地一种或多种另外的酶、蛋白酶抑制剂以及一价阳离子和有机阴离子的盐的预混料并且然后将该混合物压条。可以同时添加作为例如处于液态的蛋白酶抑制剂的另外的酶。除了混合步骤和出条步骤，该过程可以进一步包含以下步骤：研磨、挤出、切割、冲压、冷却和/或封装。

共颗粒中酶的配制品

这些酶可以被配制为颗粒，例如，配制为结合一种或多种酶的共颗粒。然后，每种酶将存在于多种颗粒中，这些颗粒确保酶在洗涤剂中的分布更均匀。这还减少了由于不同的粒度，不同酶的物理隔离。用于生产针对洗涤剂工业的多酶共颗粒的方法披露于IP.com公开内容IPCOM000200739D中。

通过使用共颗粒配制酶的另一个实例披露在WO 2013/188331中，其涉及洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包含(a)多酶共颗粒；(b)少于10wt沸石(无水基底)；和(c)少于10wt磷酸盐(无水基底)，其中所述共颗粒包含从10wt％至98wt％水分汇组分，并且该组合物另外包含从20wt％至80wt％的洗涤剂水分汇组分。

WO 2013/188331还涉及处理和/或清洁表面的方法，优选织物表面，该方法包括以下步骤：(i)将所述表面与在含水洗液中如在此要求保护的并且描述的洗涤剂组合物接触，(ii)冲洗和/或干燥该表面。

该多酶共颗粒可以包含两种或更多种选自下组的酶，该组由以下各项组成：首次洗涤脂肪酶、清洁纤维素酶、木葡聚糖酶、过水解酶、过氧化物酶、脂加氧酶、漆酶以及其混合物；以及(b)一种或多种选自下组的酶，该组由以下各项组成：半纤维素酶、蛋白酶、护理纤维素酶、纤维二糖脱氢酶、木聚糖酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、地衣多糖酶、葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、淀粉酶及其混合物。

在以下各段中进一步概述本发明：

1.一种或多种酶用于用水洗涤或漂洗衣物物品的用途，该水在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量和/或在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值。

2.根据段落1所述的用途，其中这些酶选自下组，该组由以下各项组成：半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和黄原胶酶。

3.根据前述段落中任一项所述的用途，其中这些酶选自下组，该组由以下各项组成：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、果胶裂解酶和甘露聚糖酶。

4.根据前述段落中任一项所述的用途，其中该水是海水。

5.根据前述段落中任一项所述的用途，其中该水是来自家庭住户、机构或工业的废水。

6.根据前述段落中任一项所述的用途，其中该水具有如下的BOD₅值：在20℃下3mgO₂/L至在20℃下100mg O₂/L范围内。

7.根据前述段落中任一项所述的用途，其中该水具有如下的BOD₅值：在20℃下，在5至100mg O₂/L范围内、在10至100mg O₂/L范围内、在20至100mg O₂/L范围内、在30至100mgO₂/L范围内、在40至100mg O₂/L范围内、在50至100mg O₂/L范围内、在60至100mg O₂/L范围内、在70至100mg O₂/L范围内、在80至100mg O₂/L范围内、或在90至100mg O₂/L范围内。

8.根据段落1-6中任一项所述的用途，其中该水具有如下的BOD₅值：在20℃下，在3至20mg O₂/L范围内、在3至15mg O₂/L范围内、在3至10mg O₂/L范围内、在3至8mg O₂/L范围内、在3至6mg O₂/L范围内、在4至20mg O₂/L范围内、在4至15mg O₂/L范围内、在4至10mg O₂/L范围内、在4至8mg O₂/L范围内、在4至6mg O₂/L范围内、在5至20mg O₂/L范围内、在5至15mgO₂/L范围内、在5至10mg O₂/L范围内、在5至8mg O₂/L范围内、在5至6mg O₂/L范围内、在6至20mg O₂/L范围内、在6至15mg O₂/L范围内、在6至10mg O₂/L范围内、在6至8mg O₂/L范围内、在8至20mg O₂/L范围内、在8至15mg O₂/L范围内、在8至10mg O₂/L范围内、在10至20mg O₂/L范围内、或在10至15mg O₂/L范围内。

9.根据前述段落中任一项所述的用途，其中该水的NaCl含量在20℃下为至少0.1％，如至少0.2％、至少0.3％、至少0.4％、至少0.5％、至少0.6％、至少0.7％、至少0.8％、至少0.9％、至少1.0％、至少1.1％、至少1.2％、至少1.3％、至少1.4％、至少1.5％、至少1.6％、至少1.7％、至少1.8％、至少1.9％、至少2.0％、至少2.2％、至少2.4％、至少2.6％、至少2.8％、至少3.0％、至少3.2％、至少3.4％、至少3.5％、至少3.6％、至少3.8％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％。

10.根据段落1-8中任一项所述的用途，其中该水的NaCl含量在20℃下在0.05％至10％范围内。

11.根据前述段落中任一项所述的用途，其中将该水用淡水稀释以获得较低的NaCl含量和/或较低的BOD₅值。

12.根据段落11所述的用途，其中将该水稀释以获得低于2％的NaCl含量和/或低于20的BOD₅值。

13.根据前述段落中任一项所述的用途，其中除一种或多种酶之外，还使用至少一种阴离子表面活性剂和至少一种助洗剂。

14.根据段落13所述的用途，其中该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例为1:62。

15.根据段落13-14中任一项所述的用途，其中该阴离子表面活性剂选自下组，该组由以下各项组成：硫酸盐和磺酸盐、直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)、十二烷基硫酸钠(SDS)、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸的二酯和单酯或脂肪酸的盐(皂)。

16.一种洗涤剂组合物，其包含阴离子表面活性剂、助洗剂和选自下组的一种或多种酶，该组由以下各项组成：半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和/或黄原胶酶，其中该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例在1:62范围内。

17.根据段落16所述的洗涤剂组合物，其中该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例在1:20至1:62范围内。

18.根据段落16-17中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该一种或多种酶选自下组，该组由以下各项组成：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、果胶裂解酶和甘露聚糖酶。

19.根据段落16-18中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该蛋白酶选自下组，该组由以下各项组成：芽胞杆菌属，例如，枯草杆菌蛋白酶诺和、枯草杆菌蛋白酶嘉士伯、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147、枯草杆菌蛋白酶168、牛源胰蛋白酶、猪源的胰蛋白酶和镰孢属蛋白酶。

20.根据段落16-19中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该蛋白酶与SEQ ID NO:1具有至少90％，如至少95％或100％的序列一致性。

21.根据段落19-20中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该蛋白酶与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少90％，如至少95％或100％的序列一致性，或在以下位置中的一个或多个具有取代的其变体：27、36、57、76、87、97、101、104、120、123、167、170、194、206、218、222、224、235、和274，优选地，该变体是与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少90％一致性的碱性蛋白酶，其具有以下取代：M222S或取代N76D+G195E。

22.根据段落18所述的洗涤剂组合物，其中该脂肪酶是与SEQ ID NO:2具有至少90％，如至少95％或100％序列一致性的多肽或其变体。

23.根据段落18所述的洗涤剂组合物，其中该α-淀粉酶是与SEQ ID NO:3或SEQ IDNO:4的氨基酸序列具有至少90％序列一致性，如至少95％或100％序列一致性的多肽或其变体。

24.根据段落18所述的洗涤剂组合物，其中该纤维素酶是表现出内切β-1,4-葡聚糖酶活性的碱性细菌酶(EC 3.2.1.4)。

25.根据段落24所述的洗涤剂组合物，其中该纤维素酶是与SEQ ID NO:5具有至少90％，如至少95％或100％序列一致性的多肽或其变体。

26.根据段落16-18中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该果胶裂解酶是与SEQ IDNO:6具有至少90％，如至少95％或100％序列一致性的多肽或其变体。

27.根据段落18所述的洗涤剂组合物，其中该甘露聚糖酶是与SEQ ID NO:7具有至少90％，如至少95％或100％序列一致性的多肽或其变体。

28.根据前述组合物段落中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该洗涤剂组合物进一步包含选自下组的一种或多种成分，该组由以下各项组成：表面活性剂、助洗剂和共助洗剂、絮凝助剂、螯合试剂、染料转移抑制剂、稳定剂、酶抑制剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预形成的过酸、聚合的分散剂、粘土去污剂/抗再沉淀剂、增白剂、抑泡剂、染料、香料、结构弹力剂、织物柔软剂、载体、助水溶物、织物调色剂、防沫剂、分散剂、加工助剂、和/或颜料。

29.根据前述组合物段落中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该阴离子表面活性剂选自下组，该组由以下各项组成：硫酸盐和磺酸盐、直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)、十二烷基硫酸钠(SDS)、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸的二酯和单酯或脂肪酸的盐(皂)。

30.根据段落29所述的洗涤剂组合物，其中该阴离子表面活性剂是LAS。

31.根据前述组合物段落中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该酶的浓度为至少3,7x10^-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物、至少4,0x10^-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物、至少4,5x10^-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物、至少5x10^-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物、或至少6,0x10^-7g酶蛋白/克洗涤剂组合物。

32.根据以上组合物段落中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该组合物是条，均匀的片剂，具有两个或更多个层的片剂，具有一个或多个室的袋，规则的或压缩的粉末，颗粒，膏，凝胶，或规则的、压缩的或浓缩的液体。

33.根据段落32所述的洗涤剂组合物，其中该组合物是一种液体洗涤剂组合物，包含总浓度按重量计是至少3％的表面活性剂和助洗剂，和含酶的微囊，其中该微囊的膜是通过具有高于1kDa分子量的多支化的多胺的交联而产生。

34.根据段落33所述的洗涤剂组合物，其中该多支化的多胺的这些反应性氨基构成该分子量的至少15％。

35.根据段落33-34中任一项所述的洗涤剂组合物，其中通过使用酰基氯作为交联剂生成该微囊。

36.根据段落33-35中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该微囊的直径是至少50微米，或大于50微米。

37.根据段落33-36中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该微囊含有按重量计至少1％的活性酶。

38.根据段落33-37中任一项所述的洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物进一步包括醇，例如多元醇。

39.根据段落33-38中任一项所述的洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物是液体衣物洗涤剂组合物。

40.根据段落33-39中任一项所述的洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物含有按重量计少于90％的水。

41.根据段落33-40中任一项所述的洗涤剂组合物，其中使用酰基氯作为交联剂，通过界面聚合来生成该微囊。

42.根据段落33-41中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该多支化的多胺是聚乙亚胺。

43.根据段落33-42中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该微囊包含Mg2+、Ca2+、或Zn2+离子的来源，如Mg2+、Ca2+、或Zn2+的难溶盐。

44.一种用于湿洗纺织品的方法，该方法包括以下步骤：

a.使该纺织品与洗液接触，该洗液包含根据段落16-43中任一项所述的洗涤剂组合物和在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量的水和/或在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值的水。

b.完成至少一个洗涤周期；并且

c.任选地冲洗该纺织品。

45.根据段落44所述的方法，其中该水是海水。

46.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该水具有如下的BOD₅值：在20℃下3mg O₂/L至在20℃下100mg O₂/L范围内。

47.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该水具有如下的BOD₅值：在20℃下，在5至100mg O₂/L范围内、在10至100mg O₂/L范围内、在20至100mg O₂/L范围内、在30至100mg O₂/L范围内、在40至100mg O₂/L范围内、在50至100mg O₂/L范围内、在60至100mg O₂/L范围内、在70至100mg O₂/L范围内、在80至100mg O₂/L范围内、或在90至100mg O₂/L范围内。

48.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该水具有如下的BOD₅值：在20℃下，在3至20mg O₂/L范围内、在3至15mg O₂/L范围内、在3至10mg O₂/L范围内、在3至8mg O₂/L范围内、在3至6mg O₂/L范围内、在4至20mg O₂/L范围内、在4至15mg O₂/L范围内、在4至10mg O₂/L范围内、在4至8mg O₂/L范围内、在4至6mg O₂/L范围内、在5至20mg O₂/L范围内、在5至15mg O₂/L范围内、在5至10mg O₂/L范围内、在5至8mg O₂/L范围内、在5至6mg O₂/L范围内、在6至20mg O₂/L范围内、在6至15mg O₂/L范围内、在6至10mg O₂/L范围内、在6至8mgO₂/L范围内、在8至20mg O₂/L范围内、在8至15mg O₂/L范围内、在8至10mg O₂/L范围内、在10至20mg O₂/L范围内、或在10至15mg O₂/L范围内。

49.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该水的NaCl含量在20℃下为至少0.1％，如至少0.2％、至少0.3％、至少0.4％、至少0.5％、至少0.6％、至少0.7％、至少0.8％、至少0.9％、至少1.0％、至少1.1％、至少1.2％、至少1.3％、至少1.4％、至少1.5％、至少1.6％、至少1.7％、至少1.8％、至少1.9％、至少2.0％、至少2.2％、至少2.4％、至少2.6％、至少2.8％、至少3.0％、至少3.2％、至少3.4％、至少3.5％、至少3.6％、至少3.8％、至少4.0％、至少4.5％、至少5.0％。

50.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该水的NaCl含量在20℃下在0.05％至10％范围内。

51.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中将该水用淡水稀释以获得较低的NaCl含量和/或较低的BOD₅值。

52.根据段落51所述的方法，其中将该水稀释以获得在20℃下低于2％的NaCl含量和/或在20℃下低于20mg O₂/L的BOD₅值。

53.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中在该洗液中的一种或多种酶的浓度为至少每升洗液0.01g酶蛋白，如每升洗液至少0.015g酶蛋白、至少0.02g酶蛋白、至少0.025g酶蛋白、至少0.03g酶蛋白。

54.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该方法进一步包括在完成洗涤周期后排掉洗液或部分洗液。

55.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中在第一个并且任选地第二个或第三个洗涤周期过程中，使该纺织品与该洗液接触。

56.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中在与该洗液接触后，漂洗该纺织品。

57.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中将该物品用水漂洗，该水具有在20℃下至少0.05％的NaCl含量和/或在20℃下至少大于3mg O₂/L的BOD₅值。

58.根据段落56所述的方法，其中将该纺织品用淡水漂洗

59.根据段落56所述的方法，其中该用于漂洗的水是淡水和具有在20℃下至少0.05％的NaCl含量和/或在20℃下至少大于3mg O₂/L的BOD₅值的水的组合。

测定和洗涤剂组合物

洗涤剂组合物

可以将以下提及的洗涤剂组合物结合本发明的酶一起使用。

Biotex黑(液体)

5％-15％的阴离子表面活性剂、<5％非离子表面活性剂、香料、酶、DMDM和乙内酰脲。

WFK IEC-A标准洗涤剂的组合物(粉末)

成分：直链烷基苯磺酸钠8.8％、乙氧基化的脂肪醇C12-18(7EO)4.7％、钠皂3.2％、消泡剂DC2-4248S 3.9％、硅酸铝钠沸石4A 28.3％、碳酸钠11.6％、丙烯酸和马来酸的共聚物的钠盐(Sokalan CP5)2.4％、硅酸钠3.0％、羧甲基纤维素1.2％、Dequest 20662.8％，光学增白剂0.2％、硫酸钠6.5％、蛋白酶0.4％。

标准洗涤剂A组合物(液体)

成分：12％LAS、11％AEO Biosoft N25-7(NI)、7％AEOS(SLES)、6％MPG(丙二醇)、3％乙醇、3％TEA、2.75％可可皂、2.75％大豆皂、2％甘油、2％氢氧化钠、2％柠檬酸钠、1％甲酸钠、0.2％DTMPA和0.2％PCA(所有的百分数都是w/w)

宝莹小&强大洗涤剂组合物(液体)

成分：15％-30％阴离子表面活性剂、非离子型表面活性剂、5％-15％皂、<5％聚羧酸盐、香料、磷酸盐、光学增亮剂

宝莹2合1与舒适西番莲粉末

硫酸钠、碳酸钠、十二烷基苯磺酸钠、膨润土、碳酸钠过氧化物、硅酸钠、沸石、水、柠檬酸、TAED、C12-15Pareth-7、硬脂酸、香精、丙烯酸钠/MA共聚物、纤维素胶、所修饰的玉米淀粉、氯化钠、羟乙磷酸四钠、EDTMP钙钠、苯胺吗啉三嗪基-氨基苯磺酸二钠、碳酸氢钠、苯丙基乙基聚甲基硅氧烷、丁苯基甲基丙醛、甘油硬脂酸酯、碳酸钙、聚丙烯酸钠、α-异甲基紫罗兰酮、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、纤维素、蛋白酶、柠檬烯、PEG-75、二氧化钛、糊精、蔗糖、聚芳基磺酸钠、CI 12490、CI 45100、CI42090、硫代硫酸钠、CI 61585。

宝莹生物粉末

蔗糖、山梨醇、硅酸铝、聚甲醛三聚氰胺、聚芳基磺酸钠、CI 61585、CI 45100、脂肪酶、淀粉酶、黄胞胶、羟丙基甲基纤维素、CI 12490、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、硫代硫酸钠、CI 42090、甘露聚糖酶、CI 11680、羟乙磷酸、EDTA四钠。

宝莹生物片剂

碳酸钠、碳酸钠过氧化物、碳酸氢钠、沸石、水、硅酸钠、月桂基硫酸钠、纤维素、TAED、十二烷基苯磺酸钠、半纤维素、木质素、月桂基葡糖苷、丙烯酸钠/MA共聚物、膨润土、氯化钠、香精、羟乙磷酸四钠、硫酸钠、聚丙烯酸钠、二甲硅油、苯胺基吗啉代三嗪基氨基芪磺酸二钠盐、十二烷基苯磺酸、三甲基硅氧基硅酸盐、碳酸钙、纤维素、PEG-75、二氧化钛、糊精、蛋白酶、所修饰的玉米淀粉、蔗糖、CI 12490、聚芳基磺酸钠、硫代硫酸钠、淀粉酶、高岭土。

宝莹色彩护理生物粉末

枯草杆菌蛋白酶、咪唑啉酮、己基肉桂醛、蔗糖、山梨醇、硅酸铝、聚甲醛三聚氰胺、CI 61585、CI 45100、脂肪酶、淀粉酶、黄胞胶、羟丙基甲基纤维素、CI 12490、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、硫代硫酸钠、CI 42090、甘露聚糖酶、CI 11680、羟乙磷酸、EDTA四钠。

宝莹色彩护理生物片剂

碳酸氢钠、碳酸钠、沸石、水、硅酸钠、十二烷基硫酸钠、纤维素胶、十二烷基苯磺酸钠、月桂基葡糖苷、氯化钠、丙烯酸钠/MA共聚物、香精、硫代乙酸钠、PVP、硫酸钠、羟乙磷酸四钠、聚丙烯酸钠、二甲硅油、膨润土、十二烷基苯磺酸、三甲基硅氧基硅酸盐、碳酸钙、纤维素、PEG-75、二氧化钛、糊精、蛋白酶、所修饰的玉米淀粉、蔗糖、硫代硫酸钠、淀粉酶、CI74160、高岭土。

宝莹双效胶囊生物制品

MEA-十二烷基苯磺酸、MEA-氢化椰油酸、C12-15Pareth-7、二丙二醇、水、羟乙磷酸四钠、聚乙烯醇、甘油、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、丙二醇、香精、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、山梨醇、MEA-硫酸、乙醇胺、枯草杆菌蛋白酶、乙二醇、丁苯基甲基丙醛、硼酸、(4-甲酰苯基)、己基肉桂醛、柠檬烯、芳樟醇、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、α-异甲基紫罗兰酮、香叶醇、淀粉酶、聚合的蓝色着色剂、聚合的黄色着色剂、滑石粉、氯化钠、苯并异噻唑啉酮、甘露聚糖酶、苯酸苄铵酰胺。

宝莹2合1与舒适晴天粉末

硫酸钠、碳酸钠、十二烷基苯磺酸钠、膨润土、碳酸钠过氧化物、硅酸钠、沸石、水、柠檬酸、TAED、C12-15Pareth-7、香精、硬脂酸、丙烯酸钠/MA共聚物、纤维素胶、所修饰的玉米淀粉、氯化钠、羟乙磷酸四钠、EDTMP钙钠、苯胺吗啉三嗪基-氨基苯磺酸二钠、碳酸氢钠、苯丙基乙基聚甲基硅氧烷、丁苯基甲基丙醛、甘油硬脂酸酯、碳酸钙、聚丙烯酸钠、香叶醇、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、纤维素、蛋白酶、PEG-75、二氧化钛、糊精、蔗糖、聚芳基磺酸钠、CI 12490、CI 45100、CI 42090、硫代硫酸钠、CI 61585。

宝莹小&强大2合1余舒适晴天

水、C12-15Pareth-7、十二烷基苯磺酸钠、丙二醇、氢化椰油酸钠、三乙醇胺、甘油、TEA-氢化椰油酸酯、香精、氯化钠、聚季铵盐-10、PVP、聚合的粉色着色剂、硫酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、丁苯基甲基丙醛、苯乙烯/丙烯酸酯共聚物、己基肉桂醛、香茅醇、丁子香酚、聚乙烯醇、乙酸钠、异丙醇、聚合的黄色着色剂、十二烷基硫酸钠。

宝莹小&强大生物制品

水、MEA-十二烷基苯磺酸、丙二醇、月桂醇醚硫酸钠、C12-15Pareth-7、TEA-氢化椰油酸酯、MEA-柠檬酸、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、MEA-羟乙磷酸、三乙醇胺、香精、丙烯酸酯共聚物、山梨醇、MEA-硫酸、亚硫酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、丁苯基甲基丙醛、苯乙烯/丙烯酸酯共聚物、香茅醇、硫酸钠、肽、盐、来自发酵(工艺)的糖、枯草杆菌蛋白酶、甘油、硼酸、(4-甲酰苯基)、香叶醇、果胶裂解酶、淀粉酶、十二烷基硫酸钠、甘露聚糖酶、CI42051。

宝莹小&强大胶囊生物制品

MEA-十二烷基苯磺酸、MEA-氢化椰油酸、C12-15Pareth-7、二丙二醇、水、甘油、聚乙烯醇、香精、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、丙二醇、山梨醇、MEA-硫酸、乙醇胺、枯草杆菌蛋白酶、乙二醇、丁苯基甲基丙醛、己基肉桂醛、淀粉、硼酸、(4-甲酰苯基)、柠檬烯、芳樟醇、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、α-异甲基紫罗兰酮、香叶醇、淀粉酶、滑石粉、聚合的蓝色着色剂、氯化钠、苯并异噻唑啉酮、苯酸苄铵酰胺、聚合的黄色着色剂、甘露聚糖酶。

宝莹小&强大胶囊色彩护理

MEA-十二烷基苯磺酸、MEA-氢化椰油酸、C12-15Pareth-7、二丙二醇、水、甘油、聚乙烯醇、香精、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、丙二醇、MEA-硫酸、乙醇胺、PVP、山梨醇、丁苯基甲基丙醛、枯草杆菌蛋白酶、己基肉桂醛、淀粉、柠檬烯、芳樟醇、硼酸、(4-甲酰苯基)、α-异甲基紫罗兰酮、香叶醇、滑石粉、聚合的蓝色着色剂、苯酸苄铵酰胺、聚合的黄色着色剂。

宝莹小&强大色彩护理

水、MEA-十二烷基苯磺酸、丙二醇、月桂醇醚硫酸钠、C12-15Pareth-7、TEA-氢化椰油酸酯、MEA-柠檬酸、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、MEA-羟乙磷酸、三乙醇胺、香精、丙烯酸酯共聚物、山梨醇、MEA-硫酸、亚硫酸钠、甘油、丁苯基甲基丙醛、香茅醇、硫酸钠、肽、盐、来自发酵(工艺)的糖,苯乙烯/丙烯酸酯共聚物、枯草杆菌蛋白酶、硼酸、(4-甲酰苯基)、香叶醇、果胶裂解酶、淀粉酶、十二烷基硫酸钠、甘露聚糖酶、CI 61585、CI45100。

宝莹小&强大洗涤剂组合物(液体)

成分：15％-30％阴离子表面活性剂、非离子型表面活性剂、5％-15％皂、<5％聚羧酸盐、香料、磷酸盐、光学增亮剂

宝莹Megaperls组合物(粉末)

成分：以下的15％-30％：阴离子表面活性剂、基于氧的漂白剂和沸石，以下的少于5％：非离子表面活性剂、磷酸盐、聚羧酸盐、肥皂、另外成分：香料、己基肉桂醛、水杨酸苄酯、芳樟醇、光学增亮剂、酶和香茅醇。

HEY SPORT纺织品洗涤剂

水、十二烷基苯磺酸、月桂醇聚醚-11、peg-75羊毛脂、丙二醇、改性醇、大豆油酸钾、氢氧化钾、椰油两性二乙酸二钠、乙二胺三乙椰子烷基酰胺、香精、蓖麻醇酸锌、氯化钠、苯并异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、ci16255、苯甲醇。

碧浪灵敏性白色与彩色衣物洗涤剂组合物、液体洗涤剂组合物

水、酒精乙氧基硫酸盐、醇乙氧基化物、氨基氧化物、柠檬酸、C12-18拔顶棕榈仁脂肪酸、蛋白酶、糖苷酶、淀粉酶、乙醇、1,2丙二醇、甲酸钠、氯化钙、氢氧化钠、有机硅乳液、跨硫酸EHDQ(这些成分以递减次序列出)。

碧浪Actilift组合物(液体)

成分：5％-15％阴离子表面活性剂；<5％非离子型表面活性剂、磷酸盐、肥皂；酶、光学增亮剂、苯并异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、香料、α-异甲基紫罗兰酮、香茅醇、香叶醇、芳樟醇。

碧浪Actilif组合物(粉末)

成分：15％-30％阴离子表面活性剂、<5％非离子表面活性剂、磷酸盐、聚羧酸盐、沸石；酶、香料、己基肉桂醛。

标准洗涤剂T组合物(粉末)

成分：11％LAS、2％AS/AEOS、2％肥皂、3％AEO、15.15％碳酸钠、3％硅酸钠、18.75％沸石、0.15％螯合剂、2％柠檬酸钠、1.65％AA/MA共聚物、2.5％CMC和0.5％SRP(所有的百分数都是w/w)。

标准洗涤剂X组合物(粉末)

成分：16.5％LAS、15％沸石、12％二硅酸钠、20％碳酸钠、1％sokalan、35.5％硫酸钠(所有的百分数都是w/w)。

汰渍液体，原版：

成分：直链烷基苯磺酸酯、丙二醇、柠檬酸、氢氧化钠、硼砂、乙醇胺、乙醇、醇硫酸盐、聚乙烯亚胺乙氧基化物、脂肪酸钠、乙氧基硫酸二季铵盐、蛋白酶、二乙二醇、月桂醇聚醚-9、烷基二甲胺氧化物、香味、淀粉酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、DTPA、甲酸钠、甲酸钙、聚乙二醇4000、甘露聚糖酶、Liquitint^TM蓝、二甲硅油。

汰渍冷水液体，清香型：水、醇乙氧基硫酸酯、直链烷基苯磺酸酯、二乙二醇、丙二醇、乙醇胺、柠檬酸、硼砂、醇硫酸盐、氢氧化钠、聚乙烯亚胺、乙氧基化物、脂肪酸钠、乙醇、蛋白酶、月桂醇聚醚-9、乙氧基硫酸二季铵盐、月桂基胺氧化物、异丙苯钠、磺酸盐、香味、DTPA、淀粉酶、二钠、二氨基二苯乙烯、二磺酸盐、甲酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、甲酸钙、聚乙二醇4000、甘露聚糖酶、果胶酶、Liquitint^TM蓝、二甲硅油

液体汰渍加漂白剂Alternative^TM，生动白和鲜艳、最初以及清洁微风：

水、醇乙氧基硫酸钠、烷基硫酸钠、MEA柠檬酸、直链烷基苯磺酸酯、MEA盐、丙二醇、二乙二醇、聚乙烯亚胺乙氧基化物、乙醇、脂肪酸钠、乙醇胺、月桂基胺氧化物、硼砂、月桂醇聚醚-9、DTPA、枯烯磺酸钠、甲酸钠、甲酸钙、直链烷基苯磺酸酯、钠盐、醇硫酸盐、氢氧化钠、乙氧基硫酸二季铵盐、香味、淀粉酶、蛋白酶、甘露聚糖酶、果胶酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、苯并异噻唑啉酮、Liquitint^TM蓝、二甲硅油、二丙基乙四胺。

汰渍简单洁净与清新：水、醇乙氧化物硫酸盐、直链烷基苯磺酸钠/Mea盐、丙二醇、二乙二醇、甲酸钠、乙醇、硼砂、脂肪酸钠、香味、月桂基胺氧化物、DTPA、聚乙烯胺乙氧基化物、甲酸钙、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、二甲硅油、四胺、Liquitint^TM蓝。

汰渍舱，海雾，神秘森林，春天牧场：直链烷基苯磺酸酯、C12-16Pareth-9、丙二醇、醇乙氧基硫酸酯、水、聚乙烯亚胺乙氧基化物、甘油、脂肪酸盐、PEG-136聚乙酸乙烯酯、乙二胺琥珀酸盐、单乙醇胺柠檬酸、亚硫酸氢钠、乙二烯三胺五乙酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、甲酸钙、甘露聚糖酶、木葡聚糖酶、甲酸钠、氢化蓖麻油、natalase、染料、termamyl、枯草杆菌蛋白酶、苯并异噻唑啉、香料。

汰渍去污笔(Tide to Go)：去离子水、二丙二醇丁基醚、烷基硫酸钠、过氧化氢、乙醇、硫酸镁、烷基二甲基氧化胺、柠檬酸、氢氧化钠、三甲氧基苯甲酸、香味。

汰渍污渍释放液体：水、烷基乙氧基化物、直链烷基苯磺酸盐、过氧化氢、乙氧基硫酸二季铵盐、乙醇胺、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、四丁基乙叉基双酚、F&DC黄3、香味。

汰渍污渍释放粉末：过碳酸钠、硫酸钠、碳酸钠、铝硅酸钠、壬酰氧基苯磺酸盐、聚丙烯酸钠、水、烷基苯磺酸钠、DTPA、聚乙二醇、棕榈酸钠、淀粉酶、蛋白酶、修饰的淀粉、FD&C蓝1、香味。

汰渍污渍释放，预处理器喷雾：

水、烷基乙氧基化物、MEA硼酸盐、直链烷基苯磺酸盐、丙二醇、乙氧基硫酸二季铵盐、氯化钙酶、蛋白酶、乙醇胺、苯并异噻唑啉酮、淀粉酶、柠檬酸钠、氢氧化钠、香味。

汰渍去污渍橡皮擦：水、烷基氧化胺、二丙二醇苯基醚、过氧化氢、柠檬酸、乙二胺二琥珀酸钠盐、烷基硫酸钠、香味。

汰渍氧化加强：

碳酸氢钠、碳酸钠、过碳酸钠、醇乙氧化物、氯化钠、马来酸/丙烯酸共聚物、壬酰氧基苯磺酸盐、硫酸钠、着色剂、乙二烯三胺五乙酸钠盐、水合硅铝酸盐(沸石)、聚乙二醇、烷基苯磺酸钠、棕榈酸钠、淀粉、水、香味。

超级汰渍自由粉状洗涤剂：碳酸钠、铝硅酸钠、烷基硫酸盐、硫酸钠、直链烷基苯磺酸酯、水、聚丙烯酸钠、硅酸盐、乙氧基化物、过碳酸钠、聚乙二醇4000、蛋白酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、硅胶、纤维素酶。

测定

测定I：生化需氧量(BOD₅)的确定，参考：丹麦标准/R 254

一般原理：

将样品用含氧的水稀释。然后允许所稀释样品在黑暗中在20℃±0.5℃下静置于封闭的瓶子里120±4小时。从在孵育前后所稀释样品中溶解氧含量的差异来计算BOD。

装置：

1.200-300ml的带玻璃塞的玻璃瓶

2.20℃±1℃培养箱

试剂：

1.磷酸盐缓冲液：将8.5g KH₂P0₄、21.75g K₂HP0₄、33.4g Na₂HP0₄·7H₂0、和1.7gNH₄Cl溶解于水中，并稀释至1L的最终体积。pH应为7.2。储存于4℃冰箱中。

2.硫酸镁溶液：将22.5g MgSO₄·7H₂0溶解于水中并稀释至1L。

3.氯化钙溶液：将27.5g CaCl₂溶解于水中并稀释至1L。

4.氯化铁溶液：将0.25g FeCl₃·6H₂0溶解于水中并稀释至1L。

5.稀释水：向去离子化或蒸馏水充气约15分钟，并允许在使用前在20℃下静置至少一个小时。稀释水的BOD应该低于0.2mg/L，且不高于0.5mg/L。

6.葡萄糖-谷氨酸溶液：D-葡萄糖和L-谷氨酸在103℃下干燥并储存于干燥器中。将0.150g D-葡萄糖和0.150g L-谷氨酸溶解并稀释至1L。每日新鲜制备。

7.亚硫酸钠溶液：将0.16g无水Na₂SO₃溶解于水中并稀释至100mL。每日新鲜制备。

8.种子制备：允许家庭废水沉淀至少两个小时。BOD值应该在100-500mg/L之间且pH区间在6.5到8.5之间。为了测试种子的适宜性，用葡萄糖-谷氨酸进行对照试验。

样品制备：

1.用于确定BOD的所稀释的样品的pH值必须在6.5和8.5之间。根据需要，用1N硫酸或1N氢氧化钠来中和样品。

2.残余氯的测试。当测试启动时，如果有氯残留，则需要脱氯。在这种情况下，用硫酸将子样品调整至pH 5。添加碘化钠，并用亚硫酸钠溶液(试剂7)滴定样品直到转折点，使用淀粉作为指示剂。基于此，计算亚硫酸盐的需要量，并将其添加到样品中，该样品已调整至pH 5。振动后，允许该样品静置10分钟，然后与稀释的氢氧化钠进行中和。

3.在20℃下超过约8.6mg/l的被溶解氧过饱和的样品，需要进行预处理。为了防止在这些样品的孵育过程中氧气的损失，应该通过摇动样品或用过滤过的压缩空气使之通气来减少DO。

4.将温度调整至20℃±2℃。

取样

对BOD的分析应该在取样后尽快并且不迟于采样后24小时进行。

直到分析样品必须保持在0-4℃。

对照

确定了葡萄糖-谷氨酸溶液的BOD值。溶液的预期BOD应该在218±11mg/L以内。

样品的预期BOD的确定

分析应在取样后24小时内进行，如果5天后不能得到可接受的结果，则不能重复。如果在5天的孵育后，耗氧量低于80％且高于20％，那么这个结果被认为是可以接受的。

如果不能估计样品的大约BOD值，则样品的COD(化学需氧量)值应该在BOD分析之前确定。

分析

基于样本的估计的BOD，并且合适的稀释液可以从下表中选择：

选择的样品体积被转移到1L量筒中。小心地添加稀释水直至量筒填充了约500mL。添加1ml试剂1至4/升稀释水以及对应于约0.5的BOD值1至5mL种子。在不断搅拌的情况下缓慢小心添加稀释水使量筒填充至1L标记处。此后，将被稀释的样品分配到三个玻璃瓶中，这些玻璃瓶子被完全填满，并此后用玻璃塞立即封闭。避免在溶液中形成空气气泡。

这三个瓶子的一个中，在约15分钟后确定溶解的氧含量。

另两个瓶子在20℃±0.5℃下孵育120±4小时。孵育结束后，确定溶解氧含量。

同时也确定了种子和稀释水的BOD值。不添加种子，只需要添加试剂1-4，并按照上面描述的方法进行，而不添加种子。

结果

计算：

生化需氧量是根据以下公式从第0天和第5天的溶解氧的差异来计算的：BOD(mg/L)＝[(c₁-c₂)-P x(b/1000)-(F-0.2)x((1000-a-b)/1000)]x(1000/a)

其中：

P＝种子的BOD(mg/L)

F＝稀释水的BOD(mg/L)

a＝样品的体积(mL)

b＝种子的体积(mL)

c₁＝15min后的溶解氧(mg/L)

c₂＝120h(5天)后的溶解氧(mg/L)

c₂应该在0.2*c₁<c₂<0.8*c₁中

由于总耗氧量不等于样品、种子和稀释水的耗氧量之和，所以只校正超过0.2mg/L的稀释水的耗氧量。

上面的公式也用于计算P和F。对于F的计算，校正因子a＝996～1000，并且对于P，校正因子b＝0。此外，c₂<0.8*c₁不是F的需求。

DO测量仪的标准化-Winkler滴定技术

参考：标准方法，第18版，程序4500-O C

试剂：

1.硫酸锰溶液：将480g MnS0₄·H₂0溶解于试剂水中。过滤；稀释至1L。

2.碱性-碘化物-叠氮化物试剂：将500g NaOH和135g NaI溶解于试剂水中。稀释至1L。添加溶解于40ml试剂水中的10g NaN₃。当稀释和酸化时，该试剂不应给出与淀粉溶液的颜色。

3.浓缩的硫酸

4.标准硫代硫酸钠滴定剂，0.0250N：商业购买。

5.淀粉溶液：用少量蒸馏水，在研体或烧杯中制备5g可溶性淀粉的乳剂。将此乳剂倒入1L沸水中，允许煮几分钟，并且使其沉淀过夜。使用澄清的上清液。该溶液可以通过添加1.25g水杨酸/L来保存并在4℃下储存。

程序：

1.缓慢地将三份充气的稀释水虹吸到三个独立的BOD瓶中。避免将大气中的氧气添加到稀释水中。

2.向在这三种BOD瓶中的两个添加1ml MnS0₄溶液，接着添加1ml的碱性-碘化物-叠氮化物试剂。当添加试剂时，在样品中浸没移液管吸头。每次使用之间漂洗吸头。

3.小心地用塞子塞住以阻止气泡的出现；通过颠倒瓶子若干次来混合。

4.当沉淀物沉淀至瓶体积的约一半时，小心地去除塞子并添加1.0ml的浓硫酸。重新用塞子塞住并通过温和倒置来混合，直到碘均匀地分布在整个瓶子里。

5.将203ml的样品转移到白色500ml的焙盘中，用0.0250N的硫代硫酸钠滴定到浅稻草色。添加1-2ml的淀粉溶液，并且继续滴定到蓝色的第一次消失。(200ml的原稀释水等于203毫升稀释水加上试剂。)

6.滴定三个样品中的两个。如果使用具有0.05mL增量的滴定管，结果应该在0.1mL以内。用第三个瓶子校准DO探针。

DO测量仪的标准化-空气校准

校正

Winkler滴定法是用于使DO测量仪标准化的最精确的方法。如果使用另一种方法，建议偶尔针对Winkler滴定来检查校准。如果测量仪是空气校准的，那么读数必须对大气压力进行校正。这最好用保存在实验室中的气压计来完成，但这个信息的另一个来源是当地的机场或新闻站。从机场获得的大气压力读数通常会针对海平面进行校正，并且必须针对实际高度进行重新校正。

如果你使用DO测量仪和探针，如果根据制造商的说明进行校准可能是最容易的。有两种类型的可用氧探针：其中一种采用基于水饱和空气的校准，并且另一种是基于空气饱和的水。水饱和空气过程涉及将电极储存在一个密封的BOD瓶里，该BOD瓶含有少量的水。对于空气饱和水的校准过程，你要么用力地摇动溶液，要么使空气鼓泡通过它。

氯化BOD样品试剂的预处理：

1.乙酸溶液，1+1：添加500ml的浓缩乙酸至500ml的蒸馏水中。

2.碘化钾溶液：将10克KI溶解于100ml容量瓶中。用蒸馏水定容。

3.亚硫酸钠溶液，0.0250N：将1.575克无水NA₂SO₃溶解于1,000ml容量瓶中。用蒸馏水定容。

注意：该溶液不稳定，并且必须每日制备。

4.淀粉指示剂溶液(用于用碘分析)：用少量蒸馏水，在研体或烧杯中制备5g可溶性淀粉的乳剂。将此乳剂倒入1L沸水中，允许煮几分钟，并且使其沉淀过夜。使用澄清的上清液。该溶液可以通过添加1.25g水杨酸/L来保存并在4℃下储存。

程序：

1.对所收集的样品中的一部分进行残余氯分析。碘化钾/淀粉纸可以用作对残余氯的快速定性测试。如果没有发现残余，则利用接种的稀释水进行BOD分析。如果发现了残余，那么在启动BOD测试之前，进行以下步骤。

2.亚硫酸钠的合适体积的确定

a.获得待测试样品的200毫升份。

b.添加10ml的1+1乙酸溶液

c.添加10ml的碘化钾溶液

d.添加2ml淀粉

e.用0.0250N亚硫酸钠滴定。当在完全混合后清晰的颜色仍然存在时，到达终点。

f.测量所使用的0.0250N亚硫酸钠的体积

3.样品预处理

a.获得另外200ml步骤2中所使用的相同样品。

b.向样品添加在步骤2e中确定的相同体积的0.0250N亚硫酸钠溶液，并且混合。

c.在允许样品静置10-20分钟后重新测试残余氯。

d.如果不存在残余氯，进行BOD分析。已被氯化的样品必须被接种。葡萄糖-谷氨酸标准品(GGA)的制备

试剂：

注意：葡萄糖/谷氨酸溶液是可商购的，但需要制备使得每个GGA浓度等于150mg/L。

1.试剂级别葡萄糖

2.试剂级别谷氨酸

程序：

1.在103℃下干燥试剂级别葡萄糖和谷氨酸1小时并在干燥器中冷却1小时。

2.将150mg(0.150g)的葡萄糖和150mg(0.150g)的谷氨酸溶解于蒸馏水中并补充体积至1L。

注意：该溶液将很快被污染，并且必须立即使用，除非完成以下操作。将一天中使用的GGA标准品的量放入若干牛奶稀释瓶或有盖子的试管中的每一个。把瓶子密封起来，并对其消毒。然后冷却这些消毒过的部分并储存在4℃下。当运行已知的标准品时，来自一个密封/消毒容器中的6毫升的GGA标准品被添加到每个BOD₅瓶中，并且这些瓶被填充了3/4的稀释水。(这是至关重要的！198±30.5mg氧气/L是基于2％的GGA稀释液(6mL/300)。重要的是不要使用不同于6mL的多种稀释液)。然后添加种子，并且将瓶充满稀释水。孵育这些瓶，并且与样品瓶相似确定BOD。

3.该标准品的可接受的BOD₅值为198±30.5mg/l。如果所计算的结果超出这个范围，则必须鉴定问题的原因。用相同的种子或稀释水作为标准品所获得的样品结果必须是合格的。一旦问题得到校正，另一个已知的问题应该立即建立。

BOD接种程序

种子的制备：

1.在进行测试前的一天，收集原进水抓样。如果进水含有显著的工业负荷，所沉淀的混合液可提供优于原进水的种子。如果用于种子，所沉淀的混合液不需要在20℃下孵育过夜。种子也可以商购获得。至少有两种产品被广泛使用：BioSeed^TM和PolySeed^TM。

2.将样品置于培养箱(20℃)中过夜。

种子对照的制备：

表8给出了用于确定添加到种子对照和样本的种子的量的总体方向。

1.从培养箱中取出孵育的原进水样品—不要混合。

2.分别用移液管吸取3、5、和7ml的澄清上清液于3个BOD瓶中。基于你的系统的强度，使用其他体积的上清液。你必须使用至少两种不同的稀释液。

3.用BOD稀释水来填满这三个瓶子。

4.确定这三个瓶的每一个瓶的最初的溶解氧。

接种的BOD样品的制备：

1.用稀释水填充瓶子约1/3-1/2。

2.用移液管吸取2ml的上清液至每个需要接种的BOD样品瓶。

3.添加大约量的样品至每个瓶子。

4.用稀释水填充BOD瓶。

5.确定这些瓶的每一个瓶的最初的溶解氧(IDO)。

种子校正的计算：

1.确定每一种子对照5天的DO浓度。

2.和在所有其他BOD中一样，使用相同的DO消耗的规则(至少2.0mg/L的消耗，以及至少1.0mg/L的残余DO(在5天之后)(标准方法，第18版))。

3.如果没有一个瓶能达到适当的消耗，在随后的测试中相应地调整种子的添加量。

4.对于每个种子对照稀释液，所使用的mg DO/ml种子＝

(IDO-种子对照的DO₅)

ml种子对照中的种子

5.如果两个种子对照符合DO消耗的标准，计算出所消耗的DO平均值mg/mL种子。

6.种子校正＝

(mg DO/ml对照种子中的种子)x(ml添加到样本^@的种子)

@如果种子在添加到样品瓶之前被稀释，那么添加到样品瓶的稀释的种子的ml就必须乘以稀释因子。(例如如果10ml种子+90ml水混合产生接种材料，则稀释系数是1/10。)

7.如果种子校正不在0.6-1.0范围内，但是种子对照符合DO消耗标准，那么在随后的测试中，样品瓶中使用的种子的量就必须进行调整。

样品中BOD的计算：

BOD₅＝BOD mg/l＝[(IDO-DO₅)-种子校正]x稀释因子

*稀释因子＝300

样本大小(mL)

表8-BOD种子稀释指南

如果种子的BOD是150mg/L或更少，种子可以直接添加到BOD样品中而不经稀释。如果需要稀释，使用列(4)中所注的体积。如列(2)所示设置种子对照稀释。用未稀释的种子制备种子对照。

种子校正样品计算：

注意：瓶A由于没有足够的最终DO而没有被使用。5天后，必须有至少1.0mg/L的残余DO。

(0.34+0.41)/2＝0.375mg DO/ml种子

如果添加2ml未稀释的种子至每个样品瓶中，

则种子校正＝(0.375mg DO/ml种子)(2ml种子)＝0.75mg DO

测定II

Terg-O-tometer(TOM)洗涤测定

Tergo-To-Meter(TOM)是一种中等规模标准洗涤系统，它可以应用于同时测试12种不同洗涤条件。TOM基本上是大型的具有多达12个开放金属烧杯淹没至其中的温度受控的水浴。每个烧杯构成一个小的顶部加载型洗涤机器并且在实验期间，它们中的每一者将含有特定洗涤剂/酶系统的溶液并且对弄脏的和未弄脏的织物测试其性能。通过旋转搅拌臂获得机械应力，该旋转搅拌臂搅拌在每个烧杯内的液体。因为TOM杯子不含盖子，所以有可能在TOM实验期间收回样品并且在洗涤期间在线分析信息。

TOM标准洗涤系统主要用于清洁剂和酶的中等规模测试，在例如US或LA/AP洗涤条件下。在TOM实验中，如压载物与污垢的比率和织物与洗液的比率的因素可以变化。因此，TOM提供了在小规模实验(如AMSA和微型洗涤)与在顶部加载型洗涤机中的更费时的全规模实验之间的联系。

设备：水浴具有12个钢制烧杯并且每个烧杯1个旋转臂，每个烧杯的容量是600mL或1200mL的洗涤剂溶液。温度范围是从5℃至80℃。水浴应当用去离子水填充。转速可以设定为70至120rpm/min。

设定Terg-O-Tometer中的温度并且开始在水浴中旋转。等待温度调整(公差是+/-0,5℃)

应该对所有烧杯进行清洁并且不含微量先前测试物质。

在一个桶中制备具有所希望的量的洗涤剂、温度和水硬度的洗涤溶液。在磁体搅拌10min期间使洗涤剂溶解。洗液应在制备后30-60分钟内使用。

测定III

洗涤并漂洗之后，将小块布样摊开铺平并且允许在室温下风干过夜。在洗涤的次日评估所有洗涤。使用具有非常小孔径的Macbeth Color Eye 7000反射分光光度计进行小块布样的光反射评估。在入射光中没有UV的情况下进行测量并且提取460nm处的反射。

实例

实例1

实例中使用的小块布样的名称
	EMPA 112，牛奶/可可
EMPA 118/1
	Wfk 20MU，化妆品
Wfk 10D，色素/皮脂
	KC-S-062，猪油，着色的
EMPA 106，油/碳黑
	Wfk 10TE，黏土
EMPA 101，橄榄油/碳黑
	EMPA 116，血液/牛奶
EMPA 117，血液/牛奶/墨水
	EMPA 164，草
EMPA 114，红酒
	Wfk 10U，咖喱
C-S-20，番茄
	Wfk 10WB，蓝莓汁
C-S-27，马铃薯淀粉
	C-S-28，大米淀粉
P01KC，柑橘
	C-S-06，色拉调味汁
Wfk 10A，100％棉，预洗的
	Wfk 30A，100％聚酯，预洗的

洗涤剂

NaCl g/600mL洗液

％	克
		3.5	21
3	18
		2	12
1	6
		0.5	3

酶

在如下条件下如测定II中描述的洗涤小块布样(TOM洗涤)：

洗涤时间：30min，温度＝22℃，其中示踪物为wfk 10A和30A的2个小块布样

TOM洗涤的程序，重复进行所有洗涤：

1.在30℃下启动TOM

2.将烧杯和搅拌棒置于TOM中

3.将搅拌器设置为110rpm

4.称量洗涤剂和NaCl并在搅拌的过程中，溶解在600ml水中，持续5分钟

5.这些纺织品被添加到烧杯中并且对于没有用酶洗涤的烧杯进行洗涤

6.对于那些用酶洗的烧杯，在添加纺织品后当直接将酶添加至烧杯中时开始洗涤

7.每一个烧杯在搅拌停止前洗涤30分钟，并且弃掉洗液；用手挤压小块布样并添加回TOM烧杯里。

8.当使用400mL冷自来水并施加搅拌110rpm时，开始漂洗。

9.漂洗运行持续5min

10.漂洗后，将水弃掉，并且将小块布样置于一个筛子里，以让水滴下来，并且然后将小块布样分类。

11.所有标记的小块布样都放在一个上面盖着纸的托盘上，上面盖着另一层纸，并且干燥过夜。

12.当它们干燥时，将小块布样在Color Eye上，大口径，没有UV光在460nm下进行测量。将来自同一烧杯的相同类型的2个小块布样在测量时彼此相对放置

13.结果的计算是通过从无酶的洗涤减去有酶的洗涤的反射结果来进行。

无酶洗涤的烧杯概述

	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
													NaCl g	21	21	18	18	12	12	6	6	3	3	0	0

用所添加的酶洗涤的烧杯概述

评估

Color Eye测量，在460nm处的反射，无UV，大孔径，如测定III中描述的。

结果：

Δ反射值(ΔRem)是在波长460nm处反射比或反射测量的结果。用一种具有类似颜色的小块布样，优选来自重复洗涤的小块布样作为背景测量该小块布样。在洗涤之前，测量代表每种小块布样类型的小块布样。Δ反射是用酶洗涤的小块布样的反射值减去不用酶洗涤的小块布样的反射值。

表1：

很明显，具有相关酶敏感底物如蛋白质、脂质、淀粉和其他含污渍的碳水化合物的小块布样在几乎所有的盐浓度下都能很好地反应。预期，如果在很高的盐浓度下进行洗涤，洗涤性能将会下降。在这种情况下，我们使用了一种主要是非离子表面活性剂的洗涤剂组合物。这些表面活性剂不会像阴离子表面活性剂那样受到盐含量的负面影响。

令人惊讶的是，我们可以看到蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、甘露聚糖酶和果胶裂解酶的酶混合物在与太平洋海水一样高的盐浓度(3,5％)下给出非常好的益处。酶的性能不受盐含量显著影响。

实例2

供方	测试中使用的小块布样的名称
		EMPA	EMPA 112，牛奶/可可
	EMPA 118/1
			Wfk 20MU，化妆品
	Wfk 10D，色素/皮脂
			EMPA 120被油脂/石英/氧化铁污染的棉布
	EMPA 106，油/碳黑
			Wfk 10TE，黏土
	EMPA 101，橄榄油/碳黑
			EMPA 116，血液/牛奶
	EMPA 117，血液/牛奶/墨水
			EMPA 164，草
	EMPA 114，红酒
			Wfk 10U，咖喱
	C-S-20，番茄
			Wfk 10WB，蓝莓汁
	C-S-27，马铃薯淀粉
			C-S-28，大米淀粉
	Wfk 10A，100％棉，预洗的
			Wfk 30A，100％聚酯，预洗的

洗涤剂组合物
		名称	剂量
十二烷基苯磺酸钠	0,9g/L
		Na2CO3	4mM
Na2HC03	4mM

NaCl g/600mL洗液：

％	克
		3.5	21
3	18
		2	12
1	6
		0.5	3

TOM洗涤的程序，重复进行所有洗涤：

1.在30℃下启动在TOM中的加热池

2.将烧杯和搅拌棒置于TOM中，并添加600ml的洗涤剂溶液。

3.将搅拌器设置为110rpm。

4.称量洗涤剂组合物和NaCl并在搅拌的过程中，溶解5分钟

5.这些纺织品小块布样被添加到烧杯中并且对于没有用酶洗涤的烧杯进行洗涤

6.对于那些用酶洗的烧杯，在添加纺织品后当直接将酶添加至烧杯中时开始洗涤

7.每一个烧杯在搅拌停止前洗涤20分钟，并且弃掉洗涤水；用手挤压小块布样并添加回TOM烧杯里。

8.当使用400mL具有相应盐度的冷自来水并施加110rpm的搅拌时，开始漂洗

9.漂洗应运行5min

10.漂洗后，将水弃掉，并且将小块布样置于一个筛子里，以让水滴下来，并且然后将小块布样分类。

11.所有标记的小块布样都放在一个上面盖着纸的托盘上，上面盖着另一层纸，并且干燥过夜。

13.结果的计算是通过从无酶的洗涤减去有酶的洗涤的反射结果来进行。

结果示于下表。

表2

表3示出了洗涤性能：

表4显示了在不同的盐浓度下用酶的洗涤结果减去没用酶的洗涤结果之间的差异：

在基于LAS的洗涤剂中清洗性能非常受盐浓度影响。这可以与0％盐相比通过看在3,5％盐下的洗涤性能来观察。这反映在表3中。这显示了不加盐的洗涤和增加量的盐的洗涤之间的性能差异。很明显，无论用酶还是没用酶的情况下，性能都受盐的浓度干扰。然而，更近距离的观察表明，酶令人惊讶地可以补偿来自NaCl的一些性能的损失。这是一个惊喜，因为LAS是一种阴离子表面活性剂，该阴离子表面活性剂很容易就会被溶液中Cl^-和Na⁺离子占据。在表1中，Δ值表示，通过添加酶，小块布样变得更干净多少。特别是基于淀粉称为DS28和CS 27的污渍，示出当添加NaCl时淀粉酶的存在大大提升了性能。即使在3,5％盐浓度的情况下，性能也非常大且明显。此外，基于蛋白质的污渍像Empa116；117和112在很大程度上通过所添加的蛋白酶补偿。

序列表

<110> 诺维信公司

<120> 酶、洗涤剂组合物的用途以及衣物洗涤方法

<130> 12872-WO-PCT

<160> 7

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 269

<212> PRT

<213> 克劳氏芽孢杆菌()

<400> 1

Ala Gln Ser Val Pro Trp Gly Ile Ser Arg Val Gln Ala Pro Ala Ala

1 5 10 15

His Asn Arg Gly Leu Thr Gly Ser Gly Val Lys Val Ala Val Leu Asp

20 25 30

Thr Gly Ile Ser Thr His Pro Asp Leu Asn Ile Arg Gly Gly Ala Ser

35 40 45

Phe Val Pro Gly Glu Pro Ser Thr Gln Asp Gly Asn Gly His Gly Thr

50 55 60

His Val Ala Gly Thr Ile Ala Ala Leu Asn Asn Ser Ile Gly Val Leu

65 70 75 80

Gly Val Ala Pro Ser Ala Glu Leu Tyr Ala Val Lys Val Leu Gly Ala

85 90 95

Ser Gly Ser Gly Ser Val Ser Ser Ile Ala Gln Gly Leu Glu Trp Ala

100 105 110

Gly Asn Asn Gly Met His Val Ala Asn Leu Ser Leu Gly Ser Pro Ser

115 120 125

Pro Ser Ala Thr Leu Glu Gln Ala Val Asn Ser Ala Thr Ser Arg Gly

130 135 140

Val Leu Val Val Ala Ala Ser Gly Asn Ser Gly Ala Gly Ser Ile Ser

145 150 155 160

Tyr Pro Ala Arg Tyr Ala Asn Ala Met Ala Val Gly Ala Thr Asp Gln

165 170 175

Asn Asn Asn Arg Ala Ser Phe Ser Gln Tyr Gly Ala Gly Leu Asp Ile

180 185 190

Val Ala Pro Gly Val Asn Val Gln Ser Thr Tyr Pro Gly Ser Thr Tyr

195 200 205

Ala Ser Leu Asn Gly Thr Ser Met Ala Thr Pro His Val Ala Gly Ala

210 215 220

Ala Ala Leu Val Lys Gln Lys Asn Pro Ser Trp Ser Asn Val Gln Ile

225 230 235 240

Arg Asn His Leu Lys Asn Thr Ala Thr Ser Leu Gly Ser Thr Asn Leu

245 250 255

Tyr Gly Ser Gly Leu Val Asn Ala Glu Ala Ala Thr Arg

260 265

<210> 2

<211> 269

<212> PRT

<213> 疏棉状嗜热丝孢菌()

<400> 2

Glu Val Ser Gln Asp Leu Phe Asn Gln Phe Asn Leu Phe Ala Gln Tyr

1 5 10 15

Ser Ala Ala Ala Tyr Cys Gly Lys Asn Asn Asp Ala Pro Ala Gly Thr

20 25 30

Asn Ile Thr Cys Thr Gly Asn Ala Cys Pro Glu Val Glu Lys Ala Asp

35 40 45

Ala Thr Phe Leu Tyr Ser Phe Glu Asp Ser Gly Val Gly Asp Val Thr

50 55 60

Gly Phe Leu Ala Leu Asp Asn Thr Asn Lys Leu Ile Val Leu Ser Phe

65 70 75 80

Arg Gly Ser Arg Ser Ile Glu Asn Trp Ile Gly Asn Leu Asn Phe Asp

85 90 95

Leu Lys Glu Ile Asn Asp Ile Cys Ser Gly Cys Arg Gly His Asp Gly

100 105 110

Phe Thr Ser Ser Trp Arg Ser Val Ala Asp Thr Leu Arg Gln Lys Val

115 120 125

Glu Asp Ala Val Arg Glu His Pro Asp Tyr Arg Val Val Phe Thr Gly

130 135 140

His Ser Leu Gly Gly Ala Leu Ala Thr Val Ala Gly Ala Asp Leu Arg

145 150 155 160

Gly Asn Gly Tyr Asp Ile Asp Val Phe Ser Tyr Gly Ala Pro Arg Val

165 170 175

Gly Asn Arg Ala Phe Ala Glu Phe Leu Thr Val Gln Thr Gly Gly Thr

180 185 190

Leu Tyr Arg Ile Thr His Thr Asn Asp Ile Val Pro Arg Leu Pro Pro

195 200 205

Arg Glu Phe Gly Tyr Ser His Ser Ser Pro Glu Tyr Trp Ile Lys Ser

210 215 220

Gly Thr Leu Val Pro Val Arg Arg Arg Asp Ile Val Lys Ile Glu Gly

225 230 235 240

Ile Asp Ala Thr Gly Gly Asn Asn Gln Pro Asn Ile Pro Asp Ile Pro

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Ala His Leu Trp Tyr Phe Gly Leu Ile Gly Thr Cys Leu

260 265

<210> 3

<211> 483

<212> PRT

<213> 芽孢杆菌属物种 AA560()

<400> 3

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1 5 10 15

Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Ser Asp Ala Ser

20 25 30

Asn Leu Lys Asp Lys Gly Ile Ser Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp

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Lys Gly Ala Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr

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Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala Thr Gly

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<210> 4

<211> 483

<212> PRT

<213> 芽孢杆菌属物种 AA560()

<400> 4

His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Leu Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr

1 5 10 15

Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Ser Asp Ala Ser

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Asn Leu Lys Asp Lys Gly Ile Ser Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp

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Ile Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp

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Ile Tyr Lys Phe Arg Thr Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu

180 185 190

Phe Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Leu Tyr Ala Asp Ile Asp Met Asp His

195 200 205

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210 215 220

Thr Leu Gly Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His Ile Lys

225 230 235 240

Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala Ile Gly

245 250 255

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260 265 270

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275 280 285

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405 410 415

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435 440 445

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Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Trp

465 470 475 480

Val Asn Lys

<210> 5

<211> 773

<212> PRT

<213> 芽孢杆菌属物种()

<400> 5

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210 215 220

Asp His His Thr Met Tyr Thr Val His Phe Tyr Thr Gly Ser His Ala

225 230 235 240

Ala Ser Thr Glu Ser Tyr Pro Pro Glu Thr Pro Asn Ser Glu Arg Gly

245 250 255

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Gln Gly Phe Gly Val Asn Ser Asp Ser Pro Asn Lys Glu Leu Ile Ala

385 390 395 400

Val Asp Asn Glu Asn Asn Thr Leu Lys Val Ser Gly Leu Asp Val Ser

405 410 415

Asn Asp Val Ser Asp Gly Asn Phe Trp Ala Asn Ala Arg Leu Ser Ala

420 425 430

Asp Gly Trp Gly Lys Ser Val Asp Ile Leu Gly Ala Glu Lys Leu Thr

435 440 445

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770

<210> 6

<211> 399

<212> PRT

<213> 枯草芽孢杆菌()

<400> 6

Ala Asp Leu Gly His Gln Thr Leu Glu Ser Asn Asp Gly Trp Gly Ala

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Tyr Ser Thr Gly Thr Thr Gly Gly Ser Lys Ala Ser Ser Ser His Val

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195 200 205

Ser Thr Ser Pro Thr Tyr Phe Gly Arg Pro Tyr Gln His His Asp Gly

210 215 220

Gln Thr Asp Ala Ser Asn Gly Ala Asn Tyr Ile Thr Met Ser Tyr Asn

225 230 235 240

Tyr Tyr His Asp His Asp Lys Ser Ser Ile Phe Gly Ser Ser Asp Ser

245 250 255

Lys Ile Ser Asp Asp Gly Lys Leu Lys Ile Thr Leu His His Asn Arg

260 265 270

Tyr Lys Asn Ile Val Gln Arg Ala Pro Arg Val Arg Phe Gly Gln Val

275 280 285

His Val Tyr Asn Asn Tyr Tyr Glu Gly Ser Thr Ser Ser Ser Asp Tyr

290 295 300

Pro Phe Ser Tyr Ala Trp Gly Ile Gly Lys Ser Ser Lys Ile Tyr Ala

305 310 315 320

Gln Asn Asn Val Ile Asp Val Pro Gly Leu Pro Ala Ala Lys Thr Ile

325 330 335

Lys Val Phe Ser Gly Gly Thr Ala Leu Tyr Asp Ser Gly Thr Leu Leu

340 345 350

Asn Gly Thr Gln Ile Asn Ala Ser Ala Ala Asn Gly Leu Ser Ser Ser

355 360 365

Val Gly Trp Thr Pro Ser Leu His Gly Thr Ile Asp Ala Ser Ala His

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Val Lys Ser Asn Val Ile Ser Gln Ala Gly Ala Gly Lys Leu Asn

385 390 395

<210> 7

<211> 299

<212> PRT

<213> 芽孢杆菌属物种()

<400> 7

Ala Asn Ser Gly Phe Tyr Val Ser Gly Thr Thr Leu Tyr Asp Ala Asn

1 5 10 15

Gly Asn Pro Phe Val Met Arg Gly Ile Asn His Gly His Ala Trp Tyr

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Leu Val Ala Val Leu Glu Val His Asp Ala Thr Gly Tyr Asp Ser Ile

85 90 95

Ala Ser Leu Asn Arg Ala Val Asp Tyr Trp Ile Glu Met Arg Ser Ala

100 105 110

Leu Ile Gly Lys Glu Asp Thr Val Ile Ile Asn Ile Ala Asn Glu Trp

115 120 125

Phe Gly Ser Trp Glu Gly Asp Ala Trp Ala Asp Gly Tyr Lys Gln Ala

130 135 140

Ile Pro Arg Leu Arg Asn Ala Gly Leu Asn His Thr Leu Met Val Asp

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165 170 175

Glu Val Phe Asn Ala Asp Pro Gln Arg Asn Thr Met Phe Ser Ile His

180 185 190

Met Tyr Glu Tyr Ala Gly Gly Asn Ala Ser Gln Val Arg Thr Asn Ile

195 200 205

Asp Arg Val Leu Asn Gln Asp Leu Ala Leu Val Ile Gly Glu Phe Gly

210 215 220

His Arg His Thr Asn Gly Asp Val Asp Glu Ala Thr Ile Met Ser Tyr

225 230 235 240

Ser Glu Gln Arg Gly Val Gly Trp Leu Ala Trp Ser Trp Lys Gly Asn

245 250 255

Gly Pro Glu Trp Glu Tyr Leu Asp Leu Ser Asn Asp Trp Ala Gly Asn

260 265 270

Asn Leu Thr Ala Trp Gly Asn Thr Ile Val Asn Gly Pro Tyr Gly Leu

275 280 285

Arg Glu Thr Ser Arg Leu Ser Thr Val Phe Gln

290 295

Claims (15)

1.一种或多种酶用于用水洗涤或漂洗衣物物品的用途，该水在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量和/或在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值。

2.根据权利要求1所述的用途，其中这些酶选自下组，该组由以下各项组成：半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和黄原胶酶。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的用途，其中该水是海水。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其中该水是来自家庭住户、机构或工业的废水。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的用途，其中该水具有如下的BOD₅值：在20℃下3mgO₂/L至在20℃下100mg O₂/L范围内。

6.一种洗涤剂组合物，其包含阴离子表面活性剂、助洗剂和选自下组的一种或多种酶，该组由以下各项组成：半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和/或黄原胶酶，其中该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例在1:62范围内。

7.根据权利要求6所述的洗涤剂组合物，其中该阴离子表面活性剂和该助洗剂之间的比例在1:20至1:62范围内。

8.根据权利要求6-7中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该一种或多种酶选自下组，该组由以下各项组成：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、果胶裂解酶和甘露聚糖酶。

9.根据权利要求6-8中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该阴离子表面活性剂选自下组，该组由以下各项组成：硫酸盐和磺酸盐、直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)、十二烷基硫酸钠(SDS)、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸的二酯和单酯或脂肪酸的盐(皂)。

10.根据权利要求6-9中任一项所述的洗涤剂组合物，其中该酶的浓度为至少3,7x 10^{- 7}g酶蛋白/克洗涤剂组合物。

11.一种用于湿洗纺织品的方法，该方法包括以下步骤：

a.使该纺织品与洗液接触，该洗液包含根据权利要求16-43中任一项所述的洗涤剂组合物和在20℃下具有至少0.05％的NaCl含量的水和/或在20℃下具有至少大于3mg O₂/L的BOD₅值的水；

b.完成至少一个洗涤周期；并且

c.任选地冲洗该纺织品。

12.根据权利要求11所述的方法，其中该水是海水。

13.根据权利要求11-12中任一项所述的方法，其中该水具有如下的BOD₅值：在20℃下3mg O₂/L至在20℃下100mg O₂/L范围内。

14.根据权利要求11-13中任一项所述的方法，其中将该水用淡水稀释以获得较低的NaCl含量和/或较低的BOD₅值。

15.根据权利要求11-14中任一项所述的方法，其中在该洗液中的一种或多种酶的浓度为至少每升洗液0.01g酶蛋白，如每升洗液至少0.015g酶蛋白、至少0.02g酶蛋白、至少0.025g酶蛋白、至少0.03g酶蛋白。