CN107751057B - 一种大型溞食物链式单缸保种培养方法 - Google Patents

一种大型溞食物链式单缸保种培养方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种大型溞食物链式单缸保种培养方法，其特征在于：包括如下步骤：S1：取自来水进行灭菌处理后冷却至室温并装入容器，接种蛋白核小球藻，同时用增氧泵曝气；S2：一定天数后接种成年大型溞，加入有益菌，同时停止增氧泵曝气；S3：接种斑马鱼幼鱼；S4：将容器放入无阳光直射的环境，温度保持在21±1℃，pH6.5～8.5，光暗比为16:8；S5：每隔一定时间往容器中添加蒸发掉的水分，使容器内水量维持稳定，同时添加大型溞生长的有益菌；本发明培养系统无须曝气，操作简单，人力消耗少，且大型溞能够达到稳定生长和繁殖，免去一般培养中经常换水，清除杂质，移除过量大型溞的麻烦，大大减少了工作量，达到简单的实验室保种目的。

Description

一种大型溞食物链式单缸保种培养方法
技术领域
本发明属于枝角浮游动物培养领域，涉及一种大型溞食物链式简易保种培养方法。
背景技术
大型溞是生活在自然水域的一种浮游甲壳类动物。其生命周期短，繁殖快、饲养经济、对环境中多种污染物敏感，因此是国际上常用的一种标准试验生物，且因其在水域生态中的关键作用，逐渐被用作污染生态的水体修复。
试验溞的来源可以从实验室已有的纯培养中挑选、引种，也可以从野外采集。野外采集的溞要经分离、鉴定、纯化，耗时耗力。实验室或企业在室内如何对获得的溞种进行简单的保种培养，免去野外采集的繁琐工作，是亟待解决的问题。
通常情况下大型溞采用单性的孤雌繁殖方式，在适宜的条件下会大量繁殖，适宜繁殖的条件为21±1℃，pH6.5-8.5，培养用水常用经曝气至少24h的自来水或人工配制的稀释水，在该条件下大型溞能健康快速的繁殖。但是大型溞是一种对污染物和环境敏感的生物，根据国际标准组织规定，大型溞必需约束在孤雌生殖的状态下才能保持纯种和活力。进行毒性实验的大型溞保种培养需要频繁投喂饵料，更换水源，定期大量的移除过量的大型溞，操作繁琐，工作量大，长期占用培养箱的空间资源和人力资源，且不利于纯种的保存。
发明内容
本发明克服现有的实验室培养技术缺陷，提供了一种操作简单，需求空间少，水质相对稳定的食物链式大型溞单缸保种培养的方法。
本发明所采用的技术方案：一种大型溞食物链式单缸保种培养方法，包括如下步骤：
S1：取自来水进行灭菌处理后冷却至室温并装入容器，接种蛋白核小球藻，同时用增氧泵曝气；
S2：一定天数后接种成年大型溞，加入有益菌，同时停止增氧泵曝气；
S3：接种斑马鱼幼鱼；
S4：将容器放入无阳光直射的环境，温度保持在21±1℃，pH6.5～8.5，光暗比为16:8；
S5：每隔一定时间往容器中添加蒸发掉的水分，使容器内水量维持稳定，同时添加大型溞生长的有益菌。
步骤S1中的自来水为1L-4L，蛋白核小球藻的密度为4×103-6×103个/L。
步骤S2中，所述的一定天数为3-7天，成年大型溞的密度100-300个/L。
步骤S3中，按照1-5条/L的密度接种斑马鱼幼鱼。
步骤S5中，所述每隔一定时间为每隔7-12天。
所述的容器为立方体形状。
所述的容器为玻璃容器。
所述的有益菌为发光细菌。
所述的环境为室内环境。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：(1)本发明的大型溞培养方法能在实验室条件下长年保存，为实验室提供充足的健康的大型溞；(2)本发明的方法操作简单，材料来源广，可长期保持水质稳定，建立起良好的水生生态环境；(3)本发明使用的有益菌为发光细菌，可以降解有机物、有毒物质，以及大型溞蜕的皮，鱼和溞的排泄物；(4)本发明本发明成功解决了传统培养中大型溞大量繁殖导致孤雌生殖而进行有性生殖、需频繁换水、需频繁清理杂质、占用培养箱空间的问题。传统的大型溞培养每周换水，要经常性移除过量的大型溞，防止密度过高，本发明无需换水，由于蒸发导致的水分流失，故要每隔一定时间添加曝气水，大型溞密度保持稳定，无需经常移除过量的大型溞，无需清除培养过程中产生的废物，大大的减少了工作量；(5)本发明的生态系统中，大型溞以蛋白核小球藻为食，大型溞蜕皮遗下的甲壳有利于蛋白核小球藻的生长，从而可以相辅相成，从而可以保持水生生态系统水质的稳定性。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步说明本发明的技术方案。
一种大型溞食物链式单缸保种培养方法，包括如下步骤：
S1：取自来水进行灭菌处理后冷却至室温并装入容器，接种蛋白核小球藻，同时用增氧泵曝气；
S2：一定天数后接种成年大型溞，加入有益菌，同时停止增氧泵曝气；
S3：接种斑马鱼幼鱼；
S4：将容器放入无阳光直射的环境，温度保持在21±1℃，pH6.5～8.5，光暗比为16:8；
S5：每隔一定时间往容器中添加蒸发掉的水分，使容器内水量维持稳定，同时添加大型溞生长的有益菌。
步骤S1中的自来水为1L-4L，蛋白核小球藻的密度为4×103-6×103个/L。
步骤S2中，所述的一定天数为3-7天，成年大型溞的密度100-300个/L。
步骤S3中，按照1-5条/L的密度接种斑马鱼幼鱼。
步骤S5中，所述每隔一定时间为每隔7-12天。
实施例一
本发明通过以下技术方案来实现一种大型溞食物链式单缸保种培养方法，建立菌-藻-溞-鱼食物链食式水生生态系统，包括如下步骤：
S1：取自来水进行灭菌处理后冷却至室温并装入容器，接种蛋白核小球藻，同时用增氧泵曝气；
S2：一定天数后接种成年大型溞，加入有益菌，同时停止增氧泵曝气；
S3：接种斑马鱼幼鱼；
S4：将容器放入无阳光直射的环境，温度保持在21±1℃，pH6.5～8.5，光暗比为16:8；
S5：每隔一定时间往容器中添加蒸发掉的水分，使容器内水量维持稳定，同时添加大型溞生长的有益菌。
在本发明的具体技术方案中，步骤S1中，自来水为4L，蛋白核小球藻的密度为4×103-6×103个/L，所用溞为科研用纯种大型溞，大型溞蜕皮遗下的甲壳有利于蛋白核小球藻的生长，从而可以相辅相成，从而可以保持水生生态系统水质的稳定性；所述灭菌用实验室的高压灭菌锅灭菌，增氧泵曝气三天，除去水中残余的氯气的同时为藻类的生长提供氧气，使其大量繁殖；
步骤S2中，所述的一定天数为3天，成年大型溞的密度为100个/L，按照1条/L的密度接种斑马鱼幼鱼，所述每隔一定时间为每隔10天，每隔10天往容器中添加蒸发掉的水分，使容器内水量维持在4L；有益菌可以降解有机物、有毒物质，以及大型溞蜕的皮，鱼和溞的排泄物，添加有益菌可保证有足够的的有益菌处理污染物。
本发明的容器为立方体形状，为玻璃容器，市场容易购买，大型溞蜕皮较容易聚集在角落形成有机物，容器质地便于观察，容器大小为5L；所述的有益菌为发光细菌，所述的环境为室内环境。
本发明的菌-藻-溞-鱼水生生态系统的建立为大型溞的长期稳定存在提供了可能性，原因如下：
1.大型溞蜕下的壳在容器底部形成有机物，经过发光细菌的降解，为藻类的生长提供了N、P等营养物质，促进藻生长繁殖。
2.蛋白核小球藻-大型溞-斑马鱼幼鱼为捕食关系，而发光细菌降解有机物可保持蛋白核小球藻生长所必须的营养元素，大型溞数量增多，斑马鱼幼鱼捕食大型溞使大型溞数量维持稳定，同时大型溞和斑马鱼幼鱼所产生的有机废物被发光细菌降解，蛋白核小球藻可在底部形成植被，维持系统中所需要的氧气，可使溶解氧维持在3mg/L以上，因此菌-藻-溞-鱼可以维持一个相对平衡的水生生态系统。
3.该水生生态的建立，使藻，溞和鱼生长稳定，水质良好，无需换水，系统能够自给自足废物再利用，不用经常性照料，充分利用了自然生态系统的循环性和稳定性。
实施例二
1.试验材料
5L的立方体容器，400只大型溞，4L自来水，1×106个/L的蛋白核小球藻，4条斑马鱼幼鱼，发光细菌，高压灭菌锅
2.试验过程
时间：2016.12-2017.9；
温度:21±1℃。
(1)取4L的自来水灭菌，冷却至室温，按照1×106个/L的密度接种蛋白核小球藻，同时用增氧泵曝气；
(2)三天后按照100个/L的密度接种成年大型溞；撒入有益菌，同时增氧泵不再曝气；
(3)按照1条/L的接种斑马鱼幼鱼；
(4)将容器放入无阳光直射的环境,温度保持在21±1℃，pH6.5～8.5，光暗比为16:8；
(5)每隔10天往容器中添加蒸发掉的水分，使容器内水量维持在4L，同时添加大型溞生长的有益菌。
(6)记录大型溞的生长情况。
3.试验结果
(1)随着室温和系统内藻类量的变化，大型溞的数量也会消长起伏，但是大型溞的总量维持稳定在300-500个左右，无需清除大型溞。
(2)系统建立后，水质良好，系统稳定，无需换水，只需每10天添加蒸发掉的水分和发光细菌即可。
(3)在这9个月的时间内，大型溞一直保持着孤雌生殖的状态，无水质恶化现象，可以达到为实验室长期提供优良纯种的目的。
对于本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及变形，而所有的这些改变以及变形都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种大型溞食物链式单缸保种培养方法，其特征在于：包括如下步骤：
S1：取自来水进行灭菌处理后冷却至室温并装入容器，接种蛋白核小球藻，同时用增氧泵曝气；
S2：一定天数后接种成年大型溞，加入有益菌，同时停止增氧泵曝气；
S3：接种斑马鱼幼鱼；
S4：将容器放入无阳光直射的环境，温度保持在21±1℃，pH6.5～8.5，光暗比为16:8；
S5：每隔一定时间往容器中添加蒸发掉的水分，使容器内水量维持稳定，同时添加大型溞生长的有益菌；
步骤S2中，所述的一定天数为3-7天，成年大型溞的密度100-300个/L；
步骤S5中，所述每隔一定时间为每隔7-12天；
步骤S1中的自来水为1L-4L，蛋白核小球藻的密度为4×103-6×103个/L；
步骤S3中，按照1-5条/L的密度接种斑马鱼幼鱼；
所述的有益菌为发光细菌。
2.根据权利要求1所述的一种大型溞食物链式单缸保种培养方法，其特征在于：所述的容器为立方体形状。
3.根据权利要求1所述的一种大型溞食物链式单缸保种培养方法，其特征在于：所述的容器为玻璃容器。
4.根据权利要求1所述的一种大型溞食物链式单缸保种培养方法，其特征在于：所述的环境为室内环境。
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