CN107744514B - 一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法。步骤如下：第一步，MePEG‑Peptide‑Tri‑CL的制备；第二步，纳米粒的制备：以姜黄素为模型药物，将MePEG‑Peptide‑Tri‑CL和姜黄素溶于丙酮为脂相溶液，将表面活性剂溶于水中为水相，按不同的脂相/水相比将脂相慢慢滴入水相，持续搅拌，形成载姜黄素‑星状纳米粒原液。将制得的纳米粒溶液真空抽滤1h除去有机溶剂，6000r/min离心20min后，获得溶液纳米粒溶液。发明实现了姜黄素水中溶解度的提高，同时在抗肿瘤治疗过程中具有缓控释和靶向特性，适用于静注及口服等多种给药方式。

Description

一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法
技术领域：
本发明涉及药物高分子载体制备和药物纳米制剂技术领域，具体的说涉及一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法。
背景技术：
可降解生物靶向纳米材料，具有良好的生物相容性，常被用作疏水性抗癌药物的有效载体，但载药量低问题常常限制了两亲性高聚物载药体系的进一步发展。近来研究显示，相比较直链聚合物，星状聚合物具有更多的反应官能团并能形成更广阔的包载空腔，利于实现对纳米载体的优化修饰和载药量的提高。纳米载体通过提高药物的穿透性和滞留效应以增加在肿瘤部位的聚积效果。然而，被动的给药系统，由于多重药物的耐药性并不能保证药物具有较好的选择性。
基质金属蛋白酶(MMP)在正常细胞中的扮演着一个沉默者的角色。然而当机体发生病变时，如：炎症、胚胎发生，血管形成，肿瘤细出现转移、浸润和复发时，基质金属蛋白酶(MMP)的表达呈现上升趋势。使用MMP特异性剪切肽修饰药物载体，肿瘤部位实现药物的主动靶向释放的几率就会增大，可有效降低药物的毒副作用，并提高药物的生物利用度。同时，PEG化纳米粒在血液中有较长的循环时间，可以逃脱体内网状内皮系统或巨吞噬系统对纳米粒的被动靶向性清除，从而提高载药系统在血液中的停留时间，有助于改善药代动力学。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法。本发明制备通过高温聚合、常温开环和酯化等反应制备MePEG-peptide-Tri-CL(peptide：XGPLGIAGQr9X)作为载体材料，将MePEG-peptide-Tri-CL和姜黄素溶于丙酮形成脂相溶液；泊洛沙姆188(P-188)溶于去离子水形成水相溶液，通过溶剂乳化挥发法制备尺寸较小、粒径均一、包封率高的具有MMPs特异靶向性和缓控释特性的载姜黄素- 星状纳米粒制剂。
本发明解决其技术问题采用的技术方案如下：
一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，所述制备方法步骤如下：
第一步，MePEG-Peptide-Tri-CL的制备
(1)Tri-CL的合成
将1，2，3-丙烷三甲酸和ε-己内酯按比例加入到25mL三口烧瓶中，120℃-140℃下溶解后，在氮气保护下，加入一定量的辛酸亚锡，密封，120℃-140℃反应9.5-48h，产物趁热溶于适量二氯甲烷中，滴加至冰乙醚中，过滤得到的沉淀，25℃下干燥24h。
所述1，2，3-丙烷三甲酸、ε-己内酯、辛酸亚锡的投料物质的量之比为1∶20～80：0.05～0.40，优选1：30～60：0.05～0.20；
所述二氯甲烷/冰乙醚体积比为1∶5～1∶20；
所述二氯甲烷的体积用量以所述ε-己内酯的质量计为1～10mL/g；
所述冰乙醚的体积用量以所述ε-己内酯的质量计为10～100mL/g；
GPC检测Tri-CL分子量范围在8262.27～18665.83。
(2)Tri-CL-NHBoc的合成
合成：取Tri-CL溶于适量甲苯中，加入N-(叔丁氧羰基)乙醇胺。氮气保护下，加入一定量的三乙胺，密闭，30～60℃下反应12～60h，优选40℃下反应48h，得到 Tri-CL-NHBoc。
后处理：将反应混合物逐滴滴加到冰甲醇中，6000r/min离心30min，除去上清液，所得沉淀于25℃下真空干燥24h。
所述Tri-CL、N-(叔丁氧羰基)乙醇胺、三乙胺的投料物质的量之比为1∶3～6∶2～8；
所述Tri-CL的甲苯浓度为0.09～0.12g/mL；
所述冰甲醇的体积用量以所述Tri-CL的质量计为20～200mL/g。
(3)Tri-CL-NH2的合成
合成：取Tri-CL-NHBoc溶于适量二氯甲烷中，加入三氟乙酸(TFA)，氮气保护，在室温下搅拌反应4～10h。
后处理：将反应液分别用5％KHCO3(w/w)水溶液萃取三次，合并下层有机相。蒸馏水洗涤三次，合并有机相加入一定量无水MgSO4干燥，搅拌过夜，次日过滤除去MgSO4固体，滤液滴加到冰甲醇中，6000r/min离心30min，除去上清液。所得沉淀于25℃真空干燥。
所述Tri-CL-NHBoc和TFA投料物质的量之比为1∶3～6；
所述Tri-CL-NHBoc二氯甲烷溶液浓度范围为0.5～1.0g/mL；
所述合并有机相与冰甲醇体积比范围为1∶5～1∶20；
GPC检测Tri-CL-NH2分子量范围在10000～18000。
(4)MePEG-COOH的合成
合成：MePEG和丁二酸酐按比例投入50mL三口烧瓶中，加入适量吡啶搅拌直到全部溶解。在氮气保护下，快速加入一定比例的4-二甲氨基吡啶(DMAP)、三乙胺(TEA)，密封后室温反应12～48h，优选24h。
后处理：反应液逐滴滴加到适量冰乙醚中。过滤，得到的沉淀为MePEG-COOH，沉淀于25℃真空干燥24h。
所述MePEG分子量范围为350～5000；
所述MePEG、丁二酸酐、DMAP和TEA投料物质的量之比为1∶1～3：0.2～0.8： 0.5～2，优选1∶2∶0.6：1。
所述MePEG吡啶溶液浓度范围为0.02～0.80g/mL；
所述反应液/冰乙醚体积比范围为1∶5～1∶20。
(5)MePEG-NHS的合成
合成：MePEG-COOH和N-羟基琥珀酰亚胺按比例加入50ml三口烧瓶中，加入适量的乙腈溶解。再加入一定量N，N-二环己基碳二亚胺(DCC)，室温反应12～48h，优选24h。
后处理：将反应液滴加到适量冰乙醚中，过滤得到的滤饼即为产物，产物于25℃真空干燥24h。
所述MePEG-COOH、N-羟基琥珀酰亚胺和DCC投料物质的量之比为1∶2～6： 0.1～3；
所述MePEG-COOH乙腈溶液浓度范围为6.4×10-3～0.6g/mL；
所述反应液/冰乙醚体积比范围在1∶5～1∶20。
(6)MePEG-Peptide的合成
合成：将适量DMAP和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)加入25mL三口烧瓶中，用少量乙腈：水混合溶液溶解，将50mg peptide溶于少量乙腈：水混合溶液，加入反应瓶中，氮气保护下在冰浴下搅拌，活化2小时。2小时后，移去冰浴，MePEG-NHS溶于适量乙腈中，投入反应瓶中，氮气保护，室温下反应48～96h。
后处理：冷冻干燥，所得固体为产物。
所述活化过程DMAP、EDC和Peptide投料物质的量之比为5～20∶5～20：1；
所述MePEG-NHS和peptide投料物质的量之比为1∶1～2；
所述乙腈：水混合溶液的比值为10∶1～1∶10；
所述MePEG-NHS乙腈溶液浓度为2×10-3～0.08g/mL；
GPC检测MePEG-Peptide分子量范围在为2800～7800。
(7)MePEG-Peptide-Tri-CL的合成
合成：称取MePEG-Peptide加入到25mL三口烧瓶中，加入适量二氯甲烷溶解，适量DCC和DMAP溶于适量二氯甲烷后加入到反应瓶中，氮气保护，冰浴下活化2小时。 2小时后，将适量Tri-CL-NH2溶于适量二氯甲烷中，投入到反应瓶。氮气保护，室温下反应48～96h。
后处理：反应液装入截留分子量14000的透析袋中，前5小时，每一小时换一次纯化水，之后，每隔2小时换一次纯化水。透析结束后，冷冻干燥得到产物。
所述MePEG-Peptide、Tri-CL-NH2、DCC和DMAP投料物质的量之比为1∶5～10： 0.17～0.33；
所述MePEG-Peptide二氯甲烷溶液浓度为2×10-3～0.02g/mL；
GPC检测MePEG-Peptide分子量范围在17000～22000。
本申请通过改变ε-己内酯投入量、MePEG分子量、反应温度和反应时间，获得一系列不同分子量和疏水特性的MePEG-Peptide-Tri-CL。
本发明MePEG-Peptide-Tri-CL的合成路线如下(式1-7)：
Figure RE-GDA0001554161840000051
Figure RE-GDA0001554161840000061
第二步，纳米粒的制备：
以姜黄素为模型药物，将MePEG-Peptide-Tri-CL和姜黄素溶于丙酮为脂相溶液，将表面活性剂溶于水中为水相，按不同的脂相/水相比将脂相慢慢滴入水相，持续搅拌，形成载姜黄素-星状纳米粒原液。将制得的纳米粒溶液真空抽滤1h除去有机溶剂， 6000r/min离心20min后，获得溶液1(纳米粒溶液)。溶液1经15000r/min离心1h后，取上清液为溶液2。紫外-可见分光光度计分别检测溶液1和2中姜黄素浓度，包封率＝(溶液2浓度/溶液1浓度)*100％。所得纳米粒溶液经马尔文粒径仪进行表征，平均粒径 100～300nm，多分散指数(PDI)小于0.3，包封率大于70％。
所述表面活性剂选自吐温-80、P-188、PVA或十二烷基磺酸钠，优选P-188；
所述姜黄素、MePEG-Peptide-Tri-CL的质量比为1∶5～100，优选1∶20～50；
所述姜黄素的质量用量以有机溶剂的体积计为0.6～1.6mg/mL，优选 0.8～1.2mg/mL；
所述表面活性剂的质量用量以水的体积计为0.5～3.0mg/mL，优选1～2mg/mL；
所述脂相/水相比(V/V)为1∶5～30，优选1∶15～20。
相对于现有技术，本发明的有益效果在于：该纳米粒溶液实现了姜黄素水中溶解度的提高，同时在抗肿瘤治疗过程中具有缓控释和靶向特性，载体材料无毒副作用，适用于静注及口服等多种给药方式。
具体实施方式
下面通过具体实施例，对本发明的技术方案做进一步的说明。
MePEG-Peptide-Tri-CL合成
实施例1
将1，2，3-丙烷三甲酸(0.1765g，1mmol)、ε-己内酯(3.4245g，30mmol)和辛酸亚锡(120μL，0.37mmol)投入到50mL三口烧瓶中，N2保护下，120℃反应24小时，产物溶于10mlDCM慢慢滴入冰乙醚中(1∶15)析出，过滤所得沉淀于25℃真空干燥 24h，收得Tri-CL1.4343g。
取Tri-CL(1.0530g，0.1mmol)溶于10mL甲苯中，加入N-(叔丁氧羰基)乙醇胺(0.0645g，0.4mmol)。氮气保护下，加入三乙胺(94μL，0.68mmol)，密封，40℃下反应48h，反应液逐滴滴加到200mL冰甲醇中，6000r/min离心30min，除去上清液，所得沉淀于25℃下真空干燥24h，收得Tri-CL-NHBoc 0.7542g。
取Tri-CL-NHBoc(0.6576g，0.06mmol)溶于10mL二氯甲烷中，加入TFA (0.0274g，0.24mmol)，氮气保护，在室温下搅拌反应8h。将反应液分别用100mL 5％ KHCO3(w/w)水溶液萃取三次，合并下层有机相。100mL蒸馏水洗涤三次，合并有机相加入一定量无水MgSO4干燥，搅拌过夜，次日过滤除去MgSO4固体，滤液滴加到 250mL冰甲醇中，6000r/min离心30min，除去上清液，所得沉淀于25℃真空干燥，收得Tri-CL-NH20.4636g，收率为72.48％。经GPC检测平均分子量为14020，PDI为 1.35，
将MePEG1900(7.600g，4mmol)和丁二酸酐(0.8006g，8mmol)加入50mL三口烧瓶中，加入60mL吡啶搅拌直到全部溶解。在氮气保护下，快速加入DMAP (73.3020g，0.6mmol)、TEA(556μL，4mmol)，密封后室温下反应24h。反应结束后，将反应液逐滴滴加到600mL冰乙醚中。过滤，得到的沉淀于25℃真空干燥24h，收得MePEG-COOH 6.7796g。
取MePEG-COOH(3.0000g，1.5mmol)和N-羟基琥珀酰亚胺(0.6906g，6mmol) 加入50ml三口烧瓶中，加入15mL乙腈溶解。再加入DCC(1.0316g，5mmol)，室温反应24h。反应结束后，将反应液滴加到150mL冰乙醚中，过滤得到的沉淀于25℃真空干燥24h，收得MePEG-NHS2.5530g，收率81.2％，经GPC检测平均分子量为 2611，PDI为1.09。
将DMAP(17.3775mg，0.1422mmol)和EDC(27.2674mg，0.1422mmol)加入 25mL三口烧瓶中，用2mL乙腈∶水＝2∶8混合溶液溶解，将peptide(50.0000mg， 0.0213mmol)溶于8mL乙腈：水混合溶液，加入反应瓶中，氮气保护下在冰浴下搅拌，活化2小时。2小时后，移去冰浴，MePEG-NHS(49.8656mg，0.0178mmol)溶于2mL乙腈中，投入反应瓶中，氮气保护，室温下反应72h。反应液冷冻干燥，得到 MePEG-peptide 138.3mg。
称取MePEG-Peptide(138.3mg，0.0229mmol)加入到25mL三口烧瓶中，加入13mL 二氯甲烷溶解，DCC(35.7mg，0.1718mmol)和DMAP(21.2mg，0.1718mmol)溶于 2mL二氯甲烷后加入到反应瓶中，氮气保护，冰浴下活化2小时。2小时后，将 Tri-CL-NH2(92.0mg，0.0057mmol)溶于2mL二氯甲烷中，投入到反应瓶。氮气保护，室温下反应120h。反应液装入截留分子量14000的透析袋中，前5小时，每一小时换一次纯化水，之后，每隔2小时换一次纯化水。透析结束后，冷冻干燥得到 MePEG-Peptide-Tri-CL 149.8mg，最终收率77.02％。经GPC检测平均分子量为 18862.18，PDI为1.19。
溶剂乳化挥发法制备纳米粒
实施例2
考察表面活性剂对纳米粒成粒的影响
将6mg姜黄素用丙酮定容至10mL，配制成0.6mg/mL的姜黄素丙酮溶液，取制得的MePEG-Peptide-Tri-CL 24mg溶于2mL姜黄素丙酮溶液，形成脂相；分别将50mg P-188、PVA、吐温-80和十二烷基磺酸钠溶于100mL水中，形成水相，将所得脂相逐滴滴加到高速搅拌的水相中，滴加完毕后搅拌0.5h，抽真空1h，除去丙酮，6000r/min 离心20min后，所得上清液即为载姜黄素-星状纳米粒溶液。
表面活性剂种类对纳米粒成粒的影响见表1。
表1表面活性剂种类对纳米粒成粒影响
Figure RE-GDA0001554161840000091
优选P-188。
实施例3
考察姜黄素浓度对纳米粒成粒的影响
将6mg、8mg、10mg、12mg、14mg和16mg姜黄素分别用丙酮定容至10mL，配制成0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL、1.4mg/mL和1.6mg/mL的姜黄素丙酮溶液，分别取六份制得的MePEG-Peptide-Tri-CL 24mg溶于2mL姜黄素丙酮溶液，形成脂相；分别将500mg P-188溶于250mL水中，形成水相，将所得脂相逐滴滴加到高速搅拌的水相中，滴加完毕后搅拌0.5h，抽真空1h，除去丙酮，6000r/min 离心20min后，所得上清液即为载姜黄素-星状纳米粒溶液。
表2姜黄素浓度对纳米粒成粒影响
Figure RE-GDA0001554161840000101
姜黄素浓度优选范围为0.8～1.2mg/mL。
实施例4
考察表面活性剂P-188浓度对纳米粒成粒的影响
将20mg姜黄素用丙酮定容至25mL，配制成0.8mg/mL的姜黄素丙酮溶液，取制得的MePEG-Peptide-Tri-CL 24mg溶于2mL姜黄素丙酮溶液，形成脂相；分别将 12.5mg、25mg、37.5mg、50mg、62.5mg和75mg P-188溶于25mL水中，形成浓度分别为0.5mg/mL、1.0mg/mL、1.5mg/mL、2.0mg/mL、2.5mg/mL和3.0mg/mL水相，将所得脂相逐滴滴加到高速搅拌的水相中，滴加完毕后搅拌0.5h，抽真空1h，除去丙酮， 6000r/min离心20min后，所得上清液即为载姜黄素-星状纳米粒溶液。
表3P-188浓度对纳米粒成粒影响
Figure RE-GDA0001554161840000102
Figure RE-GDA0001554161840000111
P-188浓度对纳米粒成粒的影响不大，优选P-188浓度为1～2mg/mL。
实施例5
考察药物/载体比对纳米粒成粒的影响
将20mg姜黄素用丙酮定容至25mL，配制成0.8mg/mL的姜黄素丙酮溶液，分别取8mg、16mg、32mg、48mg、64mg和80mg MePEG-Peptide-Tri-CL溶于2mL姜黄素丙酮溶液，形成脂相；分别将200mg P-188溶于100mL水中，形成水相，将所得脂相逐滴滴加到高速搅拌的水相中，滴加完毕后搅拌0.5h，抽真空1h，除去丙酮， 6000r/min离心20min后，所得上清液即为载姜黄素-星状纳米粒溶液。
表4药物/载体比对纳米粒成粒影响
Figure RE-GDA0001554161840000112
优选药物/载体比为1∶20～1∶50。
实施例6
考察油相/水相比对纳米粒成粒的影响
将20mg姜黄素用丙酮定容至25mL，配制成0.8mg/mL的姜黄素丙酮溶液，分别取五份24mg MePEG-Peptide-Tri-CL溶于2mL姜黄素丙酮溶液，形成脂相；分别将500mg P-188溶于250mL水中，形成水相，将所得脂相逐滴滴加到高速搅拌的水相中，滴加完毕后搅拌0.5h，抽真空1h，除去丙酮，6000r/min离心20min后，所得上清液即为载姜黄素-星状纳米粒溶液。
表5脂相/水相比对纳米粒成粒影响
Figure RE-GDA0001554161840000121
优选脂相/水相比为1∶15～20。

Claims (10)

1.一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法步骤如下：
第一步，MePEG-Peptide-Tri-CL的制备
(1)Tri-CL的合成
将1，2，3-丙烷三甲酸和ε-己内酯按比例加入到25mL三口烧瓶中，120℃-140℃下溶解后，在氮气保护下，加入一定量的辛酸亚锡，密封，120℃-140℃反应9.5-48h，产物趁热溶于适量二氯甲烷中，滴加至冰乙醚中，过滤得到的沉淀，25℃下干燥24h；所述1，2，3-丙烷三甲酸、ε-己内酯、辛酸亚锡的投料物质的量之比为1∶20～80∶0.05～0.40；
(2)Tri-CL-NHBoc的合成
取Tri-CL溶于适量甲苯中，加入N-(叔丁氧羰基)乙醇胺，氮气保护下，加入一定量的三乙胺，密闭，30～60℃下反应12～60h，得到Tri-CL-NHBoc，将反应混合物逐滴滴加到冰甲醇中，6000r/min离心30min，除去上清液，所得沉淀于25℃下真空干燥24h；所述Tri-CL、N-(叔丁氧羰基)乙醇胺、三乙胺的投料物质的量之比为1∶3～6∶2～8；
(3)Tri-CL-NH2的合成
取Tri-CL-NHBoc溶于适量二氯甲烷中，加入三氟乙酸，氮气保护，在室温下搅拌反应4～10h，将反应液用质量分数5％KHCO3水溶液萃取三次，合并下层有机相，蒸馏水洗涤三次，合并有机相加入一定量无水MgSO4干燥，搅拌过夜，次日过滤除去MgSO4固体，滤液滴加到冰甲醇中，6000r/min离心30min，除去上清液，所得沉淀于25℃真空干燥；所述Tri-CL-NHBoc和TFA投料物质的量之比为1∶3～6；
(4)MePEG-COOH的合成
MePEG和丁二酸酐按比例投入50mL三口烧瓶中，加入适量吡啶搅拌直到全部溶解，在氮气保护下，快速加入一定比例的4-二甲氨基吡啶、三乙胺，密封后室温反应12～48h，反应液逐滴滴加到适量冰乙醚中，过滤，得到的沉淀为MePEG-COOH，沉淀于25℃真空干燥24h；所述MePEG分子量范围为350～5000，所述MePEG、丁二酸酐、DMAP和TEA投料物质的量之比为1∶1～3∶0.2～0.8∶0.5～2；
(5)MePEG-NHS的合成
MePEG-COOH和N-羟基琥珀酰亚胺按比例加入50ml三口烧瓶中，加入适量的乙腈溶解，再加入一定量N，N-二环己基碳二亚胺(DCC)，室温反应12～48h，将反应液滴加到适量冰乙醚中，过滤得到的滤饼即为产物，产物于25℃真空干燥24h；所述MePEG-COOH、N-羟基琥珀酰亚胺和DCC投料物质的量之比为1∶2～6∶0.1～3；
(6)MePEG-Peptide的合成
将适量DMAP和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)加入25mL三口烧瓶中，用少量乙腈：水混合溶液溶解，将50mgpeptide溶于少量乙腈：水混合溶液，加入反应瓶中，氮气保护下在冰浴下搅拌，活化2小时，2小时后，移去冰浴，MePEG-NHS溶于适量乙腈中，投入反应瓶中，氮气保护，室温下反应48～96h，反应液冷冻干燥，所得固体为产物；所述活化过程DMAP、EDC和Peptide投料物质的量之比为5～20∶5～20∶1；
所述MePEG-NHS和peptide投料物质的量之比为1∶1～2；
所述乙腈∶水混合溶液的比值为10∶1～1∶10；所述Peptide为XGPLGIAGQr9X；
(7)MePEG-Peptide-Tri-CL的合成
称取MePEG-Peptide加入到25mL三口烧瓶中，加入适量二氯甲烷溶解，适量DCC和DMAP溶于适量二氯甲烷后加入到反应瓶中，氮气保护，冰浴下活化2小时，2小时后，将适量Tri-CL-NH2溶于适量二氯甲烷中，投入到反应瓶，氮气保护，室温下反应48～96h，反应液装入截留分子量14000的透析袋中，前5小时，每一小时换一次纯化水，之后，每隔2小时换一次纯化水，透析结束后，冷冻干燥得到产物；所述MePEG-Peptide、Tri-CL-NH2、DCC和DMAP投料物质的量之比为2.29:0.57:17.18:17.18；
第二步，纳米粒的制备
以姜黄素为模型药物，将MePEG-Peptide-Tri-CL和姜黄素溶于丙酮为脂相溶液，将表面活性剂溶于水中为水相，按不同的脂相/水相比将脂相慢慢滴入水相，持续搅拌，形成载姜黄素-星状纳米粒原液，将制得的纳米粒溶液真空抽滤1h除去有机溶剂，6000r/min离心20min后，获得纳米粒溶液，所述姜黄素、MePEG-Peptide-Tri-CL的质量比为1∶5～100，所述表面活性剂为P-188。
2.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述二氯甲烷/冰乙醚体积比为1∶5～1∶20；
所述二氯甲烷的体积用量以所述ε-己内酯的质量计为1～10mL/g；
所述冰乙醚的体积用量以所述ε-己内酯的质量计为10～100mL/g；
GPC检测Tri-CL分子量范围在8262.27～18665.83。
3.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，
所述Tri-CL的甲苯浓度为0.09～0.12g/mL；
所述冰甲醇的体积用量以所述Tri-CL的质量计为20～200mL/g。
4.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述Tri-CL-NHBoc二氯甲烷溶液浓度范围为0.5～1.0g/mL；
所述合并有机相与冰甲醇体积比范围为1∶5～1∶20；
GPC检测Tri-CL-NH2分子量范围在10000～18000。
5.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述MePEG吡啶溶液浓度范围为0.02～0.80g/mL；
所述反应液/冰乙醚体积比范围为1∶5～1∶20。
6.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述MePEG-COOH乙腈溶液浓度范围为6.4×10-3～0.6g/mL；所述反应液/冰乙醚体积比范围在1∶5～1∶20。
7.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，
所述MePEG-NHS乙腈溶液浓度为2×10-3～0.08g/mL；
GPC检测MePEG-Peptide分子量范围在为2800～7800。
8.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述MePEG-Peptide二氯甲烷溶液浓度为2×10-3～0.02g/mL；
GPC检测MePEG-Peptide分子量范围在17000～22000。
9.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述星状给药纳米粒的平均粒径100～300nm，多分散指数小于0.3，包封率大于70％；
所述姜黄素的质量用量以有机溶剂的体积计为0.6～1.6mg/mL；
所述表面活性剂的质量用量以水的体积计为0.5～3.0mg/mL；
所述脂相/水相体积比为1∶5～30。
10.如权利要求9所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述表面活性剂为P-188；
所述姜黄素、MePEG-Peptide-Tri-CL的质量比为1∶20～50；
所述姜黄素的质量用量以有机溶剂的体积计为0.8～1.2mg/mL；
所述表面活性剂的质量用量以水的体积计为1～2mg/mL；
所述脂相/水相体积比为1∶15～20。
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