CN1076829C - 一种快速测定循环水中含菌量的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种测定循环水中含菌量的方法。它采用TTC为染色剂，并与蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、蒸馏水配制成染色培养基液，经组装试管后灭菌备用；再将定量的被测水移入备好的染色培养基液试管中封闭摇匀后，置入恒温培养箱内培养，至试管内培养液变为浅粉红色，按所培养时间得出单位容积被测水中含菌数。本发明操作简便，测定快速，能及时为生产现场提供水质含菌量的测定报告，系一种快速测定工业循环水中含菌量的新方法。
Description
本发明涉及一种含有微生物的定量测定方法，尤其是一种测定循环水中含菌量的方法。
在工业生产的循环水系统中，需要经常测定水中含菌情况，特别是所含有的异养菌，以进行水中含菌的控制和处理，确保生产装置的正常运行及提高设备的使用周期。目前，现有的测定循环水中含菌量的方法是平板菌落计数法，主要采用琼脂、蛋白胨、肉膏为培养基，需在无菌室内进行培养基的制备和操作，且操作繁琐，从测定准备到制出培养液需要8-10小时，再将培养液置于专门的细菌培养箱中经72小时培养后方才能出结果，测定时间较长，为生产现场提供的水质含菌数测定报告滞后，特别是在水质恶化时难以及时测定出含菌量，从而给水处理造成损失。
本发明之目的是提供一种改进的测定循环水中含菌量的方法，使其制备培养液操作工艺简便，测定菌数时间短，快速，能及时为生产现场提供水质含菌量测定结果，适应水处理及相关生产装备的需要。
为实现上述目的，本发明采用的解决方案是：选择氯化三苯基四氮唑(TTC)作为测定循环中含菌量的染色剂，将TTC和蛋白胨、牛肉膏、氯化钠加蒸馏水按重量比为TTC0.1-0.2、蛋白胨4-6、牛肉膏1-2、氯化钠2-3、蒸馏水800-1200配制成PH7.5-8.5的染色培养基液，组装入试管经灭菌后备用；再取定量的被测循环水移入备好的染色培养基液试管中封闭摇匀后，置入温度为35-38℃的恒温培养箱中培养，至试管内培养液变成为浅粉红色，按所用培养时间计算出单位容积被测水中所含菌数。
由于氯化三苯基四氮唑(TTC)溶解于水呈无色溶液。它能进入生物的细胞内，作为人工受氢体，接受脱氢酶从基质上脱下来的氢，而本身被还原成红色的沉淀物。因此，TTC能使包括好氧及厌氧、自养及异养等活菌体染上红色。经数次试验结果表明，选择TTC染色法，应用染色培养基液培养测定循环水含菌量仅需几小时至十几小时，在常规化验室便可操作，其操作简便，测定快速，节省人力物力，能及时为生产现场提供水质含菌量的测定报告。该方法可广泛应用于化肥、炼油、化工、制药、纺织等行业循环水系统中测定含菌量，亦适用于筛选评价杀菌药剂的功效性能，系一种快速测定工业循环水中含菌量的新方法。
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。
本发明实施例：
1、染色培养基液的配制
(1)染色培养基液配方：(重量比)
材料名称 配方1 配方2
TTC 0.15g 0.18g
蛋白胨 4.5g 5g
牛内膏 1.4g 1.8g
氯化钠 2.2g 2.6g
蒸馏水 1000g 1000g
(2)配制方法：
如按上述配方1配制成PH8的染色培养基液，分别按每管5毫升组装试管，再进行灭菌后备用。
2、菌数测定方法：
取1毫升被测水移入备好的5毫升染色培养液试管中，在酒精灯上将试管盖塞封闭，充分摇匀。每种被测水样做三支平行样管，并做一支不加被测水样的空白培养液试管。然后移入37±1℃的细菌培养箱中培养，至装有被测水样的试管中培养液变为浅粉红色，按所用培养时间由下列“含菌量与TTC变色时间对应表”得出单位容积被测水中含菌量。
对含菌量较大的被测水，也可用无菌水稀释一定倍数后再对照检测。
3、含菌量与TTC变色时间对应表
| TTC变色时间(小时) | 含菌量/毫升 |
| 2.5-5.0 | 108 |
| 5.0-7.0 | 107 |
| 7.0-9.0 | 106 |
| 9.0-12.0 | 105 |
| 12.0-14.0 | 104 |
| 14.0-16.0 | 103 |
| 16.0-18.0 | 102 |
| 18.0-20.0 | 101 |
Claims (2)
1、一种快速测定循环水中含菌量的方法，其特征是包括以下步骤：
(1)染色培养基液的配方：氯化三苯基四氮唑0.1-0.2克、蛋白胨4-6克、牛肉膏1-2克、氯化钠2-3克、蒸馏水800-1200克；
(2)染色培养基液的配制方法：按上步骤(1)配方配制成为PH7.5～8.5的染色培养基液，组装试管，再进行灭菌后备用；
(3)循环水中含菌量测定方法：将定量的被测水移入由步骤(2)备好的染色培养基液试管中封闭摇匀后，置入温度为35～38℃的培养箱内培养，至试管内培养基液变成浅粉红色，按所用培养时间由含菌量与氯化三苯基四氮唑变色时间对应表得出单位容积被测水中的含菌量。
2、根据权利要求1所述的快速测定循环水中含菌量的方法，其特征是含菌量与氯化三苯基四氮唑变色时间对应表为：
氯化三苯基四氮唑变色时间一小时
含菌量/毫升
2.5-5.05.0-7.07.0-9.09.0-12.012.0-14.014.0-16.016.0-18.018.0-20.0
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