CN107669525A - 具有亮白作用的茯苓提取液的应用及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种具有亮白作用的茯苓提取液的应用及其制备方法，所述茯苓提取液用于制备具有亮白作用的化妆品；该茯苓提取液采用以下步骤制备：提取：将茯苓粉浸泡后，采用水提取，得到粗提液；冷藏：将粗提液在2℃下放置8～10h，然后过滤；微滤：将过滤得到的提取液进行微滤，至渗出液不再渗出，然后补充等量的水继续微滤至渗出液的量等于微滤前的起始提取液的量；超滤：将渗出液采进行超滤，得第一提取液；配制：将第一提取液配制成相当于生药质量5％、且1,3丁二醇质量浓度为20％的茯苓提取液，即可。本发明所述的茯苓提取液作用于角质细胞，能改善皮肤的粗糙度和亮泽度，可广泛用于化妆品行业。

Description

具有亮白作用的茯苓提取液的应用及其制备方法

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种具有亮白作用的茯苓提取液的及其制备方法。

背景技术

表皮是一种复层鳞状上皮，是一种高度组织性，不断更新的器官，其更新过程表现为终末分化即角质化过程，正常皮肤中，钙以高浓度集中在表皮颗粒层中，Ca²⁺可以向细胞提供信号，而且科学家发现，细胞内的Ca²⁺随着细胞外的Ca²⁺浓度增加而增加，这就表明细胞内Ca²⁺是启动角质形成的真实信号。细胞外间隙中的Ca²⁺浓度比细胞内高四个数量级，需严密调节。当皮肤屏障发生损伤时(如UV、洗涤剂、有机溶剂)，Ca²⁺向细胞内流入，角质形成细胞内钙离子浓度增加引发胞膜去极化(膜电位的绝对值降低)，加速板层体分泌和胞吐，同时，细胞间隙与细胞内的Ca²⁺浓度消失，以细胞内有核、未成熟的角质细胞存在于角质层中，这就叫角化不全，表现为角质层复层剥离、局部干燥、有鳞屑，而干燥有鳞屑的角质层以非镜面反射的形式反射光线使皮肤显得暗淡无光。常见的保湿剂能改善这种状态，但是无法从根本上解决问题。

茯苓属于非褶菌目多孔菌科茯苓属，为真菌类中药。味甘、淡、平、归心、脾、肾经，具有利水渗湿、健脾宁心等功效。茯苓中的主要药效成分为茯苓多糖。茯苓多糖具有抗肿瘤，抗病毒、抗氧化、增强机体免疫力、保肝、催眠、抗炎、消石等作用，可广泛的应用于医疗保健、食品等领域。茯苓多糖可用于抗肿瘤药物的研发、从而为肿瘤、癌症的治疗提供新的方法，还可作为免疫增强剂，用于保健品的开发与研制。茯苓多糖的生产工艺有很多，目前国内外大多采用水提醇沉法、碱提醇沉法、微波超声波辅助法、发酵醇沉法提取，再进一步通过季铵盐沉淀法、分布沉淀法、凝胶层析法等方法对茯苓多糖进行分离纯化。专利文献CN103772523A公开了一种膜分离纯化技术制备茯苓多糖提取物新工艺，采用超声辅助逆流煮提方法代替传统的浸提方法，并结合集成膜分离制备茯苓多糖。但该方法由于温度高，多糖易分解，且为粉末状，若在化妆品中添加存在不如提取液添加方便、难以应用及添加到产品中易析出等问题。

发明内容

针对现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种具有亮白作用的茯苓提取液的应用及其制备方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明提供了一种茯苓提取液在制备具有亮白作用的化妆品中的应用。

优选地，所述化妆品中，茯苓提取液的添加质量为3～5％。

优选地，所述茯苓提取液的制备方法包括如下步骤：

A1、提取：将茯苓粉浸泡2h后，采用10倍水、75～85℃温度提取3h，除去残渣，得到粗提液；

A2、冷藏：将粗提液在2℃下放置8～10h，然后过滤；

A3、微滤：将经步骤A2过滤后得到的提取液采用微滤膜进行微滤，至渗出液不再渗出，然后补充等量的水继续微滤至渗出液的量等于微滤前的起始提取液的量；

A4、超滤：将经微滤后得到的渗出液采用超滤膜进行超滤，得第一提取液；

A5、配制：将步骤A4制得的第一提取液配制成相当于生药质量5％、且1,3丁二醇质量浓度为20％的茯苓提取液，即可。

优选地，步骤A3中，所述微滤膜的截留分子量为30nm，操作压力为2～10bar，微滤温度为小于等于85℃。

优选地，步骤A4中，所述超滤膜的截留分子量为1000D，操作压力为1～12bar，微滤温度为小于等于85℃。

本发明还提供了一种茯苓提取液的制备方法，包括以下步骤：

A1、提取：将茯苓粉浸泡2h后，采用10倍水、75～85℃温度提取3h，除去残渣，得到粗提液；

A2、冷藏：将粗提液在2℃下放置8～10h，然后过滤；

A3、微滤：将经步骤A2过滤后得到的提取液采用微滤膜进行微滤，至渗出液不再渗出，然后补充等量的水继续微滤至渗出液的量等于微滤前的起始提取液的量；

A4、超滤：将经微滤后得到的渗出液采用超滤膜进行超滤，得第一提取液；

A5、配制：将步骤A4制得的第一提取液配制成相当于生药质量5％、且1,3丁二醇质量浓度为20％的茯苓提取液，即可。

优选地，步骤A3中，所述微滤膜的截留分子量为30nm，操作压力为2～10bar，微滤温度为小于等于85℃。

优选地，步骤A4中，所述超滤膜的截留分子量为1000D，操作压力为1～12bar，微滤温度为小于等于85℃。

本发明还提供了一种含有茯苓提取液的亮白润肤霜，所述亮白润肤霜中包括0.5～5％质量分数的茯苓提取液。

本发明还提供了一种含有茯苓提取液的亮白润肤霜的制备方法，包括以下步骤：

A1、称取各组分，将水相组分水、甘油、1,2-戊二醇、EDTA二钠依次加入水锅，加热至85-95℃，搅拌均匀，搅拌速度15-25rpm；

A2、将油相组分PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、胆甾醇羟基硬脂酸酯、鲸蜡醇、山嵛醇、聚二甲基硅氧烷、胆甾醇、茯苓提取液依次加入油锅，加热至80-85℃，搅拌均匀，搅拌速度15-25rpm；

A3、将油相组分与水相组分混合，并加入黄原胶与丁二醇的混合液，均质，然后保温；

A4、再依次加入苯氧乙醇与对羟基苯乙酮的混合溶液、透明质酸钠的水溶液和香精，搅拌均匀后，出料。

与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：

1、本发明所述的茯苓提取液作用于角质细胞，使角质细胞角化正常，排列平整、结合紧密，让皮肤滋润有光泽。

2、本发明所述茯苓提取液不需要像传统美白剂(比如抑制酪氨酸酶方向)要穿过角质层、黑色素细胞膜及黑素小体才能发挥作用，而是直接作用在角质层，作用效果更容易实现。

3、传统美白剂可以让角质层黑色素减少、皮肤白，但不能改善皮肤的粗糙度、亮泽度；而本发明所述的茯苓提取液却能改善皮肤的粗糙度和亮泽度。

4、采用本发明的提取方法，可减少茯苓多糖降解，得到的小分子多糖具有特定的亮白功效。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。

以下实施例和对比例所涉及的各组分原料均为市售通用产品，所涉及的实验方法均为本领域常用方法。

实施例1

本实施例提供了一种茯苓提取液的制备方法，包括以下步骤：

A1、提取：将茯苓粉浸泡2h后，采用10倍水(w/w)、85℃温度外循环设备提取3h，除去残渣，得到粗提液；

A2、冷藏：将粗提液在2℃下放置10h，蛋白及其他杂质析出，然后硅藻土拌土过滤；

A3、微滤：将经步骤A2过滤得到的上清液采用微滤膜的截留分子量为30nm的微滤膜进行微滤，操作压力为2～4bar，微滤温度为小于等于85℃；至渗出液不再渗出，然后补充等量的水继续微滤至渗出液的量等于起始提取液量；

A4、超滤：将经微滤后得到的渗出液采用截留分子量为1000D的超滤膜进行超滤，操作压力为8～12bar，微滤温度为小于等于85℃；得第一提取液；

A5、配制：将步骤A4制得的第一提取液配制成相当于生药质量5％、且1,3丁二醇浓度为20％的茯苓提取液，即可。

实施例2

本实施例提供了一种茯苓提取液的制备方法，包括以下步骤：

A1、提取：将茯苓粉浸泡2h后，采用10倍水(w/w)、75℃温度外循环设备提取3h，除去残渣，得到粗提液；

A2、冷藏：将粗提液在2℃下放置8h，蛋白及其他杂质析出，然后硅藻土拌土过滤；

A3、微滤：将经步骤A2过滤得到的上清液采用微滤膜的截留分子量为30nm的微滤膜进行微滤，操作压力为4～6bar，微滤温度为小于等于85℃；至渗出液不再渗出，然后补充等量的水继续微滤至渗出液的量等于起始提取液量；

A4、超滤：将经微滤后得到的渗出液采用截留分子量为1000D的超滤膜进行超滤，操作压力为4～8bar，微滤温度为小于等于85℃；得第一提取液；

A5、配制：将步骤A4制得的第一提取液配制成相当于生药质量5％、且1,3丁二醇浓度为20％的茯苓提取液，即可。

实施例3

本实施例提供了一种茯苓提取液的制备方法，包括以下步骤：

A1、提取：将茯苓粉浸泡2h后，采用10倍水(w/w)、85℃温度外循环设备提取3h，除去残渣，得到粗提液；

A2、冷藏：将粗提液在4℃下放置10h，蛋白及其他杂质析出，然后硅藻土拌土过滤；

A3、微滤：将经步骤A2过滤得到的上清液采用微滤膜的截留分子量为30nm的微滤膜进行微滤，操作压力为8～10bar，微滤温度为小于等于85℃；至渗出液不再渗出，然后补充等量的水继续微滤至渗出液的量等于起始提取液量；

A4、超滤：将经微滤后得到的渗出液采用截留分子量为1000D的超滤膜进行超滤，操作压力为1～4bar，微滤温度为小于等于85℃；得第一提取液；

A5、配制：将步骤A4制得的第一提取液配制成相当于生药质量5％、且1,3丁二醇浓度为20％的茯苓提取液，即可。

对比例1

本对比例提供了一种茯苓提取液的制备方法，包括以下步骤：

A1、提取：将茯苓粉浸泡2h；10倍水(w/w)95℃搅拌提取3h，除去残渣，得到粗提液；

A2、絮凝：在粗提液中加入1％的壳聚糖絮凝剂，100rpm常温搅拌，过滤；

A3、过滤：在经步骤A2过滤后的粗提液中加入硅藻土拌土过滤，得提取液；

A4、配制：将步骤A3得到的提取液配成相当于生药质量5％，1,3-丁二醇浓度为20％的茯苓提取液。

对比例2

本对比例提供了一种茯苓提取液的制备方法，包括以下步骤：

A1、提取：将茯苓粉浸泡2h，采用5倍水煮沸提取3h，得第一滤液和药渣；将药渣加5倍水煮沸1h，得第二滤液，将第一滤液和第二滤液合并得粗提液；

A2、冷藏：将粗提液在4℃下放置10h，过滤；

A3、过滤：将经步骤A2过滤后的粗提液加入硅藻土拌土过滤，得提取液；

A4、配制：将步骤A3所得的提取液与1,3-丁二醇和水混合，配成相当于生药质量5％，1,3-丁二醇浓度为20％的山茶花提取液。

对比例3

本对比例提供了一种茯苓提取液的制备方法，与实施例1的步骤基本相同，不同之处仅在于：本对比例的步骤A2中，将粗提液不进行冷藏，直接过滤。

对比例4

本对比例提供了一种茯苓提取液的制备方法，与实施例1的步骤基本相同，不同之处仅在于：本对比例的步骤A3中，采用的微滤膜的截留分子量为100nm。

对比例5

本对比例提供了一种茯苓提取液的制备方法，与实施例1的步骤基本相同，不同之处仅在于：本对比例的步骤A4中，采用的超滤膜的截留分子量为3000D。

对比例6

本对比例提供了一种茯苓提取液的制备方法，与实施例1的步骤基本相同，不同之处仅在于：本对比例的步骤A1中，采用10倍水(w/w)煮沸提取3h。

性能测试：

将上述实施例和对比例制备的茯苓提取液进行稳定性测试和多糖含量测试，测试结果如表1和表2所示。

表1稳定性测试结果

由表1可见，不使用超滤膜或者使用较大孔径的膜、不冷藏等工艺会造成稳定性差的问题。

表2多糖含量测试结果(采用苯酚硫酸法)

样品	多糖含量
		实施例1	0.65％
实施例2	0.64％
		实施例3	0.64％
对比例1	0.56％
		对比例2	0.49％
对比例3	0.63％
		对比例4	0.65％
对比例5	0.65％
		对比例6	0.55％

由表2的结果可见，高温提取对多糖含量有较大影响。

效果验证：

细胞内Ca²⁺浓度测试的实验

1、将角质细胞放在培养基上培养一段时间；

2、将表皮角质细胞接种到盖玻片上培养；

3、24小时后，加入2μM钙敏感荧光素(fura2-AM)，对照组加入等量的钙敏感荧光素溶剂。

4、30分钟后，钙敏感荧光素进入细胞，空白对照组加入新鲜的缓冲溶液，对照组加入油酸及缓冲溶液，其他样品组加入实施例1-3或对比例1-6的制得茯苓提取液、不同浓度的油酸及缓冲液。

5、然后测量细胞内钙离子，(钙离子浓度为常见方法，以340nm的荧光值/360nm的荧光值的比值为测定结果)。实验结果如表3所示。

表3

由表3可知，油酸是一种刺激物，空白对照组由于没有加油酸，所以其值好于所有样品。空白对照组与对照组比，说明油酸对细胞有刺激，可以引起钙离子内流。而实施例组与对照组比，茯苓提取液可以减少钙离子内流，减少油酸对细胞的刺激。实施例组与对比例组比，采用实施例中方法制得的茯苓提取液可最大程度减少钙离子内流，减少油酸对细胞的刺激。因此，在一定的细胞内钙浓度条件下，本发明制得的茯苓提取液可明显减少外界刺激情况下细胞外的钙离子内流，减少角化不全，使角质细胞排列紧密。

人体测试

本研究采用国际上通用的基于CIE L*a*b*颜色体系的色度仪Skin-GlossymeterGL200(皮肤光泽度测试探头)，L*值表征的是皮肤的亮度，其变化表示产品使用前后皮肤光泽度的变化，L*越大，皮肤越亮，反之，皮肤颜色越暗沉。另外由测得的L*和b*可以计算得到ITA°，也可以用来评价亮白效果。

实验设计采用空白对照、随机、双盲的方法，比较对照组(20％1,3丁二醇)和用茯苓提取液前后的皮肤的L*值和ITA°值。受试志愿者人数为40人(30-60岁)，其中男性26人，女性14人。志愿者均为干性皮肤，皮肤相对粗糙暗沉，非过敏体质，且测试部位无疤痕或者毛发，测试期间，受试志愿者分别在左前臂和右前臂分别涂抹基础霜或者含有不同含量茯苓提取液的基础霜(即下述的茯苓亮白霜)，每天早晚分别涂抹一次(剂量为4mg/cm²)，测试周期为8周。测试之前先用水洗净皮肤，待30min后皮肤干后再进行测定(实验室环境温度控制在22±2℃，相对湿度为50±5％)。

茯苓亮白霜指标方法如下：

A1、称取各组分，将水相组分水、甘油、1,2-戊二醇、EDTA二钠依次加入水锅，加热至85-95℃，搅拌均匀，搅拌速度15-25rpm；

A2、将油相组分PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、胆甾醇羟基硬脂酸酯、鲸蜡醇、山嵛醇、聚二甲基硅氧烷、胆甾醇、茯苓提取液依次加入油锅，加热至80-85℃，搅拌均匀，搅拌速度15-25rpm；

A3、将油相组分与水相组分混合，并加入黄原胶与丁二醇的混合液，均质，然后保温；

A4、再依次加入苯氧乙醇与对羟基苯乙酮的混合溶液、透明质酸钠的水溶液和香精，搅拌均匀后，出料。

统计学处理：采用SPSS19.0中T检验统计分析对照组与其他实验组的差异，各测试样品的组分组成如表4所示，实验结果如表5所示。

表4

对照组	基础霜
		实施例4	基础霜+5％茯苓提取液
实施例5	基础霜+4％茯苓提取液
		实施例6	基础霜+3％茯苓提取液
对比例7	基础霜+1％茯苓提取液
		对比例8	基础霜+0.5％茯苓提取液

表5

其中，**表示显著性高，P＜0.01；*表示显著差异，P＜0.05。

表5中的结果表明，涂抹茯苓提取液部位的L*值，ITA°值在整个测试期间均表现出高于对照组和对比例，其中测试第八周的效果最显著(P＜0.01)。

综上所述：以上结果表明，本方案通过促进角质细胞分化正常、排列平整紧密来改善皮肤粗糙，使皮肤滋润亮白。

本发明具体应用途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式。应当指出，以上实施例仅用于说明本发明，而并不用于限制本发明的保护范围。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进，这些改进也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种茯苓提取液在制备具有亮白作用的化妆品中的应用。

2.如权利要求1所述的茯苓提取液的应用，其特征在于，所述化妆品中，茯苓提取液的添加质量为3～5％。

3.根据权利要求1或2所述的茯苓提取液的应用，其特征在于，所述茯苓提取液的制备方法包括如下步骤：

A1、提取：将茯苓粉浸泡2h后，采用10倍水、75～85℃温度提取3h，除去残渣，得到粗提液；

A2、冷藏：将粗提液在2℃下放置8～10h，然后过滤；

A3、微滤：将经步骤A2过滤后得到的提取液采用微滤膜进行微滤，至渗出液不再渗出，然后补充等量的水继续微滤至渗出液的量等于微滤前的起始提取液的量；

A4、超滤：将经微滤后得到的渗出液采用超滤膜进行超滤，得第一提取液；

A5、配制：将步骤A4制得的第一提取液配制成相当于生药质量5％、且1,3丁二醇质量浓度为20％的茯苓提取液，即可。

4.根据权利要求1所述的保湿组合物，其特征在于，步骤A3中，所述微滤膜的截留分子量为30nm，操作压力为2～10bar，微滤温度为小于等于85℃。

5.根据权利要求1所述的保湿组合物，其特征在于，步骤A4中，所述超滤膜的截留分子量为1000D，操作压力为1～12bar，微滤温度为小于等于85℃。

6.一种茯苓提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

A1、提取：将茯苓粉浸泡2h后，采用10倍水、75～85℃温度提取3h，除去残渣，得到粗提液；

A2、冷藏：将粗提液在2℃下放置8～10h，然后过滤；

A3、微滤：将经步骤A2过滤后得到的提取液采用微滤膜进行微滤，至渗出液不再渗出，然后补充等量的水继续微滤至渗出液的量等于微滤前的起始提取液的量；

A4、超滤：将经微滤后得到的渗出液采用超滤膜进行超滤，得第一提取液；

A5、配制：将步骤A4制得的第一提取液配制成相当于生药质量5％、且1,3丁二醇质量浓度为20％的茯苓提取液，即可。

7.一种含有茯苓提取液的亮白润肤霜，其特征在于，所述亮白润肤霜中包括3～5％质量分数的茯苓提取液。

8.一种含有茯苓提取液的亮白润肤霜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

A1、称取各组分，将水相组分水、甘油、1,2-戊二醇、EDTA二钠依次加入水锅，加热至85-95℃，搅拌均匀，搅拌速度15-25rpm；

A2、将油相组分PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、胆甾醇羟基硬脂酸酯、鲸蜡醇、山嵛醇、聚二甲基硅氧烷、胆甾醇、茯苓提取液依次加入油锅，加热至80-85℃，搅拌均匀，搅拌速度15-25rpm；

A3、将油相组分与水相组分混合，并加入黄原胶与丁二醇的混合液，均质，然后保温；

A4、再依次加入苯氧乙醇与对羟基苯乙酮的混合溶液、透明质酸钠的水溶液和香精，搅拌均匀后，出料。