CN107669521B - 一种基于皮肤脂质组学制备适用于早晚的仿生护肤组合物的方法 - Google Patents

一种基于皮肤脂质组学制备适用于早晚的仿生护肤组合物的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种基于皮肤脂质组学制备适用于早晚的仿生护肤组合物的方法。本发明以健康人早晚皮肤为研究对象，通过分析早晚皮肤表面脂质成分及含量，筛选出含量较高的脂质，然后将单一成分或合适比例的复合成分添加到护肤品中，以制备得到适应不同的节律，适应早晚不同的皮肤状态的仿生护肤品。临床试验证明，按照本发明的方法制备得到的护肤品更能够满足不同时间段皮肤对脂质的需求，具有良好的锁水保湿的作用，且无皮肤不适现象，具有很好的应用前景。

Description

一种基于皮肤脂质组学制备适用于早晚的仿生护肤组合物的 方法
技术领域
本发明涉及一种制备护肤品的方法，特别涉及一种基于皮肤脂质组学制备适用于早晚护肤组合物的方法，本发明属于化妆品技术领域。
背景技术
因为生物节律，人们早上与晚上的皮肤状态不同，此不同可表现为皮肤表面脂质的差异。皮肤表面脂质的含量及组成变化对皮肤状态的影响可分为三个方面：一，皮肤表面脂质改变可直接影响屏障功能；二，皮肤表面脂质变化可影响皮肤细胞代谢而间接影响皮肤状态；三，皮肤表面脂质变化可影响皮肤微生态而间接影响皮肤状态。
脂质组学(lipidomics)是对生物体、组织或细胞中的脂质以及与其相互作用的分子进行全面系统的分析、鉴定，了解脂质的结构和功能，进而揭示脂质代谢与细胞、器官乃至机体的生理、病理过程之间的关系的一门学科。
脂质组学研究类似于其他“组学”，是利用规模性的技术方法，通过对生命体、组织或细胞等的脂质组以及与其相互作用的分子进行系统研究，揭示生命体的多样性脂质及其代谢调控与生物功能，进而深入探索其与细胞、器官、生命体的生理、病理等过程之间的关系.
目前未见运用脂质组学方法分析早晚皮肤表面脂质的差异，更未见基于此差异所制作的护肤品。
发明内容
本发明的目的之一是建立一种基于皮肤脂质组学制备适用于早晚的仿生护肤组合物的方法。
本发明目的之二是提供通过该方法得到的护肤品组合，包括膏霜、面膜等。
为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：
本发明的一种基于皮肤脂质组学制备适用于早晚的仿生护肤组合物的方法，包括以下步骤：
(1)选择健康志愿者30-200人；
(2)清洁面部后，分别在8：00-9：00和20：00-21：00之间，使志愿者于恒温恒湿环境下静坐10-60分钟，用胶带粘贴法采集皮肤表面脂质，作为脂质检测的样本，分为早晚两组；
(3)采用脂质提取法分别回收所采集样本中的皮肤脂质；
(4)使用仪器分别测定提取的脂质中各脂质成分的含量，并得到每组样本中每种脂质成分含量的平均值；
(5)分别从每组中选择出含量高的1-10种脂质，以早晚组中各自胆固醇含量的平均值作为除数，计算所选择的脂质成分的相对含量比值；
(6)在《已使用化妆品原料名称目录》中分别选择与步骤(5)中含量高的1-10种脂质结构相同或者或相似的脂质；
(7)将步骤(6)得到的脂质按照步骤(5)确定的比值进行混合，得到脂质组合物，然后与常规的护肤品基质原料、辅助原料相混合，制备得到适用于早晚的仿生护肤组合物。
其中，优选的，所述的健康志愿者可以是女性、男性或是某一地区、某一特定年龄阶段、某一特定环境下的群体，针对不同的群体，按照本发明的方法均能够制备得到适合该群体的早晚护肤品组合物。
其中，优选的，步骤(2)中所述的环境的温度为20-30℃，湿度为30-50％。
其中，优选的，步骤(3)中采用Bligh-Dyer脂质提取法回收皮肤脂质。
其中，优选的，步骤(4)中所述的仪器为UPLC-QTOF/MS、GC-QTOF/MS、MALDI-TOF-MS、DART-MS或DESI-MS。
其中，优选的，步骤(6)中，所述的相似的脂质是指与步骤(5)选择的脂质在LIPIDMAPS数据库中属于同一脂质亚类的脂质单体，或是其主要成分(含量大于50w/w％)与步骤(5)选择的脂质在LIPIDMAPS数据库中属于同一脂质亚类的脂质混合物，优选的，对于脂质单体，还满足以下条件之一：(a)与步骤(5)选择的脂质相比，相差±0-5个碳原子；(b)与步骤(5)选择的脂质相比，不饱和键数相差±0-5。
其中，优选的，步骤(7)中，所述的基质原料包括油性原料、粉质原料以及溶剂类原料其中之一或两种以上的组合，所述的辅助原料包括表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂、防晒剂、保湿剂、香精或香料以及颜料或色素其中之一或两种以上的组合；
其中，优选的，所述的油性原料包括：甘油、椰子油、蓖麻油、橄榄油、棕榈油、水貂油、蛇油、牛脂、羊毛脂及其衍生物、巴西棕榈蜡、鲸蜡、蜂蜡、液体石蜡、凡士林、微晶石蜡、角鲨烷、硅油及其衍生物、脂肪酸、脂肪醇以及碳原子数为12-18的酯；
其中，优选的，所述的粉质原料包括：滑石粉、高岭土、锌白粉、钛白粉、膨润土、硬脂酸锌/镁、碳酸钙/镁以及磷酸氢钙；
其中，优选的，所述的溶剂类原料包括：水、酒精、异丙醇、正丁醇、丙酮、丁酮、二乙二醇乙醚、乙酸乙酯以及乙酸丁酯。
其中，所述的辅助原料均为化妆品领域所使用的常用辅料，在此不再赘述。
其中，优选的，步骤(7)中，仿生护肤组合物中脂质组合物的重量百分比为10-20％。
进一步的，本发明还提出了按照所述的方法制备得到的适用于早晚的仿生护肤组合物，优选的，所述的护肤组合物为膏霜、乳液或面膜。
在本发明的一个具体实施例中，提供了一种按照本发明所述的方法制备得到的适用于青年女性(16-44岁)早晚的仿生护肤品组合，由日霜和晚霜组成：
其中，按照重量百分比计，所述的日霜由18％的脂质组合物以及82％的基质原料和辅助原料的混合物组成；其中，所述的脂质组合物由辛酸甘油三酯、甘油二月桂酸酯、霍霍巴油、角鲨烷、神经酰胺III、胆甾醇以及霍霍巴酯组成，且辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯的重量比＝198.04：12.75：3.99：1.39：1.91：1：2.69；按照重量百分比计，所述的基质原料和辅助原料的混合物由甘油3％，苯甲醇0.3％，山梨酸钾0.3％以及96.4％的精制水组成；
其中，按照重量百分比计，所述的晚霜由18％的脂质组合物以及82％的基质原料和辅助原料的混合物组成；其中，所述的脂质组合物由辛酸甘油三酯、甘油二月桂酸酯、霍霍巴油、角鲨烷、神经酰胺III、胆甾醇以及霍霍巴酯组成，且辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯的重量比＝560.49：19.08：6.10：1.44：2.41：1：3.69；按照重量百分比计，所述的基质原料和辅助原料的混合物由甘油3％，苯甲醇0.3％，山梨酸钾0.3％以及96.4％的精制水组成。
一种按照本发明所述的方法制备得到的适用于青年女性早晚的仿生护肤品组合，由日用面膜和夜用面膜组成；
其中，按照重量百分比计，所述的日用面膜由12％的A相、87.9％的B相以及0.1％的C相组成，其中，所述的A相为由辛酸甘油三酯、甘油二月桂酸酯、霍霍巴油、角鲨烷、神经酰胺III、胆甾醇以及霍霍巴酯按照辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯的重量比＝198.04：12.75：3.99：1.39：1.91：1：2.69混合而成的脂质组合物；所述的基质原料和辅助原料的混合物由B相和C相组成，其中所述的B相由1w/w％的卡波姆，2w/w％的丙二醇，0.4w/w％的苯甲醇，0.3％w/w的山梨酸钾以及96.3w/w％的精制水组成；所述的C相为三乙醇胺；
其中，按照重量百分比计，所述的夜用面膜由12％的A相、87.9％的B相以及0.1％的C相组成，其中，所述的A相为由辛酸甘油三酯、甘油二月桂酸酯、霍霍巴油、角鲨烷、神经酰胺III、胆甾醇以及霍霍巴酯按照辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯的重量比＝560.49：19.08：6.10：1.44：2.41：1：3.69混合而成的脂质组合物；所述的基质原料和辅助原料的混合物由B相和C相组成，其中所述的B相由1w/w％的卡波姆，2w/w％的丙二醇，0.4w/w％的苯甲醇，0.3％w/w的山梨酸钾以及96.3w/w％的精制水组成；所述的C相为三乙醇胺。
相较于现有技术，本发明的有益效果是：
本发明以健康人早晚皮肤状态为研究对象，通过分析早晚皮肤表面脂质成分及含量，筛选出含量较高的脂质，然后将单一成分或合适比例的复合成分添加到护肤品中，以制备得到适应不同的节律，适应早晚不同的皮肤状态的仿生护肤品。临床试验证明，按照本发明的方法制备得到的护肤品更能够满足不同时间段皮肤对脂质的需求，具有良好的锁水保湿的作用，且无皮肤不适现象，具有很好的应用前景。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
实施例1适用于青年女性早晚的仿生护肤品组合(日霜、晚霜)的制备
1、选择女性健康志愿者35人，年龄在16-44岁之间，排除皮肤疾病、系统性疾病等；
2、清洁面部后(去除皮肤分泌的脂质成分)，分别于早上8：00-9：00和晚上20：00-21：00之间，使志愿者在温度25℃，相对湿度50％的恒温恒湿环境中静坐30分钟后，用胶带粘贴于右侧脸颊部位，3min后取下胶带置于样品管内，作为脂质检测的样本，分为早晚两组；
3、采用Bligh-Dyer脂质提取法(Bligh EG,Dyer WJ.Canadian journal ofbiochemistry and physiology,1959,37(8):911-917.)对采集的样本中的脂质进行提取。
4、使用UPLC-QTOF-MS检测提取的脂质的各种脂质成分，，共检测出3314种脂质，对脂质进行分类，并分析各种成分的含量，得到每组样本中每种脂质成分含量的平均值，选择出含量较高的脂质。
5、对早晚脂质含量进行分析，结果发现含量排在前七位的脂质为三酰甘油、二酰甘油、脂肪酸、角鲨烯、神经酰胺、胆固醇和蜡酯。以每组胆固醇含量的平均值作为除数，计算早上含量排在前七位的脂质含量比例如下：三酰甘油：二酰甘油：脂肪酸：角鲨烯：神经酰胺：胆固醇：蜡酯＝198.04：12.75：3.99：1.39：1.91：1：2.69；晚上含量比例如下：三酰甘油：二酰甘油：脂肪酸：角鲨烯：神经酰胺：胆固醇：蜡酯＝560.49：19.08：6.10：1.44：2.41：1：3.69。
6、根据这七种脂质成分的结构，在《已使用化妆品原料名称目录》中选择原料，选择与其结构相同或相似的脂质成分，其中，相似的脂质满足与步骤(5)选择的脂质在LIPIDMAPS数据库中属于同一脂质亚类的脂质单体，或是其主要成分(含量大于50w/w％)与步骤(5)选择的脂质在LIPIDMAPS数据库中属于同一脂质亚类的脂质混合物；进一步优选的，对于脂质单体还满足：(a)与步骤(5)选择的脂质相比，相差±(0-5)个碳原子；(b)与步骤(5)选择的脂质相比，不饱和键数相差±(0-5)。
三酰甘油不在《已使用化妆品原料名称目录》中，在LIPIDMAPS数据库中，辛酸甘油三酯与三酰甘油同属于甘油脂类，因此选择辛酸甘油三酯代替三酰甘油；二酰甘油不在《已使用化妆品原料名称目录》中，在LIPIDMAPS数据库中，甘油二月桂酸酯与二酰甘油同属于甘油脂类，因此选择甘油二月桂酸酯代替二酰甘油；脂肪酸不在《已使用化妆品原料名称目录》中，在LIPIDMAPS数据库中，霍霍巴油的主要成份11-二十烯酸(64.4w/w％)与脂肪酸同属于脂肪酸类，因此选择霍霍巴油代替脂肪酸；其他原料的替代选择方法一样：角鲨烷代替角鲨烯，神经酰胺III代替神经酰胺，胆甾醇代替胆固醇，霍霍巴酯代替蜡酯。
7、以上述各种原料，按照各成分比例(日霜中，辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯＝198.04：12.75：3.99：1.39：1.91：1：2.69；晚霜中：辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯＝560.49：19.08：6.10：1.44：2.41：1：3.69)，分别配成适用于青年女性早晚皮肤的脂质组合物。
8、以上述脂质组合物为基础，制作适用于青年女性早上和晚上的日霜和晚霜，100g产品的制作方法如下：
日霜：取A相(脂质组合物)18g，B相(甘油3w/w％，苯甲醇0.3w/w％，山梨酸钾0.3w/w％，精制水补充至100％，)82g，制备方法如下，将A相和B相分别加热至80℃，在不断搅拌情况下，将B相加入A相中，不断搅拌慢慢冷却至60℃。均质直至原料完全分散，开始冷却至室温，即得。
晚霜：取A相(脂质组合物)18g，B相82g(甘油3w/w％，苯甲醇0.3w/w％，山梨酸钾0.3w/w％，精制水补充至100％)，制备方法如下，将A相和B相分别加热至80℃，在不断搅拌情况下，将B相加入A相中，不断搅拌慢慢冷却至60℃。均质直至原料完全分散，开始冷却至室温，即得。
实施例2适用于青年女性早晚的仿生护肤品组合(日用面膜、夜用面膜)的制备
1、选择女性健康志愿者35人，年龄在16-44岁之间，排除皮肤疾病、系统性疾病等。
2、清洁面部后(去除皮肤分泌的脂质成分)，分别于早上8：00-9：00和晚上20：00-21：00之间，使志愿者在温度25℃，相对湿度50％的恒温恒湿环境中静坐30分钟后，用胶带粘贴于右侧脸颊部位，3min后取下胶带置于样品管内，作为脂质检测的样本，分为早晚两组；
3、采用Bligh-Dyer脂质提取法(Bligh EG,Dyer WJ.Canadian journal ofbiochemistry and physiology,1959,37(8):911-917.)对采集的样本中的脂质进行提取。
4、使用UPLC-QTOF-MS检测提取的脂质的各种脂质成分，，共检测出3314种脂质，对脂质进行分类，并分析各种成分的含量，得到每组样本中每种脂质成分含量的平均值，选择出含量较高的脂质。
5、对早晚脂质含量进行分析，结果发现含量排在前七位的脂质为三酰甘油、二酰甘油、脂肪酸、角鲨烯、神经酰胺、胆固醇和蜡酯。以每组胆固醇含量的平均值作为除数，计算早上含量排在前七位的脂质含量比例如下：三酰甘油：二酰甘油：脂肪酸：角鲨烯：神经酰胺：胆固醇：蜡酯＝198.04：12.75：3.99：1.39：1.91：1：2.69；晚上含量比例如下：三酰甘油：二酰甘油：脂肪酸：角鲨烯：神经酰胺：胆固醇：蜡酯＝560.49：19.08：6.10：1.44：2.41：1：3.69。
6、根据这七种脂质成分的结构，在《已使用化妆品原料名称目录》中选择原料，选择与其结构相同或相似的脂质成分，其中，相似的脂质满足与步骤(5)选择的脂质在LIPIDMAPS数据库中属于同一脂质亚类的脂质单体，或是其主要成分(含量大于50w/w％)与步骤(5)选择的脂质在LIPIDMAPS数据库中属于同一脂质亚类的脂质混合物；进一步优选的，对于脂质单体还满足(a)与步骤(5)选择的脂质相比，相差±(0-5)个碳原子；(b)与步骤(5)选择的脂质相比，不饱和键数相差±(0-5)。
三酰甘油不在《已使用化妆品原料名称目录》中，在LIPIDMAPS数据库中，辛酸甘油三酯与三酰甘油同属于甘油脂类，因此选择辛酸甘油三酯代替三酰甘油；二酰甘油不在《已使用化妆品原料名称目录》中，在LIPIDMAPS数据库中，甘油二月桂酸酯与二酰甘油同属于甘油脂类，因此选择甘油二月桂酸酯代替二酰甘油；脂肪酸不在《已使用化妆品原料名称目录》中，在LIPIDMAPS数据库中，霍霍巴油的主要成份11-二十烯酸(64.4w/w％)与脂肪酸同属于脂肪酸类，因此选择霍霍巴油代替脂肪酸；其他原料的替代选择方法一样：角鲨烷代替角鲨烯，神经酰胺III代替神经酰胺，胆甾醇代替胆固醇，霍霍巴酯代替蜡酯。
7、以上述各种原料，按照各成分比例(日用面膜中，辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯＝198.04：12.75：3.99：1.39：1.91：1：2.69；夜用面膜中：辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯＝560.49：19.08：6.10：1.44：2.41：1：3.69)，分别配成适用于青年女性早晚皮肤的脂质组合物。
8、以上述脂质组合物为基础，制作适用于青年女性早上和晚上使用的日用面膜和夜用面膜，100g产品的制作方法如下：
日用面膜：A相12g(适用于早上的脂质组合物)，B相87.9g(卡波姆1w/w％，丙二醇2w/w％，苯甲醇0.4w/w％，山梨酸钾0.3％w/w，精制水补充至100％)，C相0.1g三乙醇胺。制备方法如下，将A相组合混合，加热至70℃。将B相组分混合至均匀，加热至70℃。在中等速度搅拌下，将B相加入A相中，用C相中和混合物。不断搅拌冷却至室温，即得。
夜用面膜：A相12g(适用于晚上的脂质组合物)，B相87.9g(卡波姆1w/w％，丙二醇2w/w％，苯甲醇0.4w/w％，山梨酸钾0.3％w/w，精制水补充至100％，)，C相0.1g三乙醇胺。制备方法如下，将A相组合混合，加热至70℃。将B相组分混合至均匀，加热至70℃。在中等速度搅拌下，将B相加入A相中，用C相中和混合物。不断搅拌冷却至室温，即得。
实施例3本发明护肤组合物的功效试验及临床试验
实验一：
从实施例1的女性健康志愿者中选择30人，分阶段使用三种受试护肤品进行实验，每一阶段持续4周，一个阶段结束后，停用受试护肤品28天，进行下一个阶段的实验。
三种受试护肤品如下：
受试护肤品1：按照实施例1方法制备的日霜以及晚霜
受试护肤品2：按照实施例1方法制备，区别在于不添加脂质组合物
受试护肤品3：按照实施例1方法制备，区别在于将实施例1中的脂质组合物替换为以下脂质组合物：
聚二甲基硅氧烷、硬脂酸、异壬酸异壬酯、霍霍巴油、Ve醋酸酯、鲸蜡硬脂醇、石蜡、氢化聚癸稀，其比值为：1.0：0.1：1.5：3.0：3.0：5.0：3.0：0.3。
方法：
第一阶段：每日早晚洁肤后，在面部皮肤上分别使用受试护肤品1的日霜和晚霜。分别在使用第7天，14天，21天，28天测定皮肤角质层含水量，经皮水散失量，并根据志愿者的主观评价统计结果。第一阶段结束后，停用受试护肤品28天，进行第二个阶段的实验。
第二阶段：每日早晚洁肤后，在面部皮肤上分别使用受试护肤品2。分别在使用第7天，14天，21天，28天测定皮肤角质层含水量，经皮水散失量，并根据志愿者的主观评价统计结果。第二阶段结束后，停用受试护肤品28天，进行第三个阶段的实验。
第三阶段：每日早晚洁肤后，在面部皮肤上分别使用受试护肤品3。分别在使用第7天，14天，21天，28天测定皮肤角质层含水量，经皮水散失量，并根据志愿者的主观评价统计结果。
评判标准：皮肤角质层水含量、经皮水散失量的测定及主观感受(轻微改善，明显改善，无改善、皮肤不适)。
结果：
受试护肤品1的使用结果：1)2周后皮肤角质层水含量显著上升，经皮水散失量显著下降，47％的志愿者主观感受皮肤状态有显著改善，17％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，36％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象；2)4周后皮肤角质层水含量显著上升，经皮水散失量显著下降，60％的志愿者主观感受皮肤状态有显著改善，27％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，13％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象。
受试护肤品2的使用结果：1)2周后皮肤角质层水含量、经皮水散失量无显著变化，10％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，90％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象；2)4周后皮肤角质层水含量、经皮水散失量无显著变化，13％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，87％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象。
受试护肤品3的使用结果：1)2周后皮肤角质层水含量、经皮水散失量无显著变化，10％的志愿者主观感受皮肤状态有显著改善，13％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，77％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象；2)4周后皮肤角质层水含量有所上升、经皮水散失量略有下降，17％的志愿者主观感受皮肤状态有显著改善，13％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，70％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象。
实验二：
从实施例1的女性健康志愿者中选择30人，分阶段使用三种受试护肤品进行实验，每一阶段持续4周，一个阶段结束后，停用受试护肤品28天，进行下一个阶段的实验。
三种受试护肤品如下：
受试护肤品4：按照实施例2方法制备的日用面膜以及夜用面膜
受试护肤品5：按照实施例2方法制备，区别在于不添加脂质组合物
收拾护肤品6：按照实施例2方法制备，区别在于将实施例2中的脂质组合物替换为以下脂质组合物：
聚二甲基硅氧烷、硬脂酸、异壬酸异壬酯、霍霍巴油、Ve醋酸酯、鲸蜡硬脂醇、石蜡、氢化聚癸稀，其比值为：1.0：0.1：1.5：3.0：3.0：5.0：3.0：0.3。
方法：
第一阶段：每日早晚洁肤后，在面部皮肤上分别使用受试护肤品4的日用面膜以及夜用面膜。分别在使用第7天，14天，21天，28天测定皮肤角质层含水量，经皮水散失量，并根据志愿者的主观评价统计结果。第一阶段结束后，停用受试护肤品28天，进行第二个阶段的实验。
第二阶段：每日早晚洁肤后，在面部皮肤上分别使用受试护肤品5。分别在使用第7天，14天，21天，28天测定皮肤角质层含水量，经皮水散失量，并根据志愿者的主观评价统计结果。第二阶段结束后，停用受试护肤品28天，进行第三个阶段的实验。
第三阶段：每日早晚洁肤后，在面部皮肤上分别使用受试护肤品6。分别在使用第7天，14天，21天，28天测定皮肤角质层含水量，经皮水散失量，并根据志愿者的主观评价统计结果。
评判标准：皮肤角质层水含量、经皮水散失量的测定及主观感受(轻微改善，明显改善，无改善、皮肤不适)。
结果：
受试护肤品4的使用结果：1)2周后皮肤角质层水含量显著上升，经皮水散失量显著下降，53％的志愿者主观感受皮肤状态有显著改善，17％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，30％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象；2)4周后皮肤角质层水含量显著上升，经皮水散失量显著下降，67％的志愿者主观感受皮肤状态有显著改善，23％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，10％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象。
受试护肤品5的使用结果：1)2周后皮肤角质层水含量、经皮水散失量无显著变化，13％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，87％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象；2)4周后皮肤角质层水含量、经皮水散失量无显著变化，17％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，83％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象。
受试护肤品6的使用结果：1)2周后皮肤角质层水含量、经皮水散失量无显著变化，10％的志愿者主观感受皮肤状态有显著改善，20％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，70％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象；2)4周后皮肤角质层水含量有所上升、经皮水散失量略有下降，20％的志愿者主观感受皮肤状态有显著改善，13％的志愿者主观感受皮肤状态有轻微改善，67％的志愿者主观感受无改善，无皮肤不适等现象。

Claims (10)

1.一种基于皮肤脂质组学制备适用于早晚的仿生护肤组合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）选择健康志愿者30-200人；
（2）清洁面部后，分别在8：00-9：00和20：00-21：00之间，使志愿者于恒温恒湿环境下静坐10-60分钟，用胶带粘贴法采集皮肤表面脂质，作为脂质检测的样本，分为早晚两组；
（3）采用脂质提取法分别回收所采集样本中的皮肤脂质；
（4）使用仪器分别测定提取的脂质中各脂质成分的含量，并得到每组样本中每种脂质成分含量的平均值；
（5）分别从每组中选择出含量高的1-10种脂质，以早晚组中各自胆固醇含量的平均值作为除数，计算所选择的脂质成分的相对含量比值；
（6）在《已使用化妆品原料名称目录》中分别选择与步骤（5）中含量高的1-10种脂质结构相同或者或相似的脂质；所述的相似的脂质是指与步骤（5）选择的脂质在LIPIDMAPS数据库中属于同一脂质亚类的脂质单体，或是其中含量大于50w/w%的主要成分与步骤（5）选择的脂质在LIPIDMAPS数据库中属于同一脂质亚类的脂质混合物，对于脂质单体，还满足以下条件之一：（a）与步骤（5）选择的脂质相比，相差±0-5个碳原子；（b）与步骤（5）选择的脂质相比，不饱和键数相差±0-5；
（7）将步骤（6）得到的脂质按照步骤（5）确定的比值进行混合，得到脂质组合物，然后与常规的护肤品基质原料、辅助原料相混合，制备得到适用于早晚的仿生护肤组合物，仿生护肤组合物中脂质组合物的重量百分比为10-20%。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的环境的温度为20-30℃，湿度为30-50%。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中采用Bligh-Dyer脂质提取法回收皮肤脂质。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）中所述的仪器为UPLC-QTOF/MS、GC-QTOF/MS、MALDI-TOF-MS、DART-MS或DESI-MS。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（7）中，所述的基质原料包括油性原料、粉质原料以及溶剂类原料其中之一或两种以上的组合，所述的辅助原料包括表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂、防晒剂、保湿剂、香精或香料以及颜料或色素其中之一或两种以上的组合。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的油性原料包括：甘油、椰子油、蓖麻油、橄榄油、棕榈油、水貂油、蛇油、牛脂、羊毛脂及其衍生物、巴西棕榈蜡、鲸蜡、蜂蜡、液体石蜡、凡士林、微晶石蜡、角鲨烷、硅油及其衍生物、脂肪酸、脂肪醇以及碳原子数为12-18的酯；
所述的粉质原料包括：滑石粉、高岭土、锌白粉、钛白粉、膨润土、硬脂酸锌/镁、碳酸钙/镁以及磷酸氢钙；
所述的溶剂类原料包括：水、酒精、异丙醇、正丁醇、丙酮、丁酮、二乙二醇乙醚、乙酸乙酯以及乙酸丁酯。
7.按照权利要求1-6任一项所述的方法制备得到的适用于早晚的仿生护肤组合物。
8.如权利要求7所述的仿生护肤组合物，其特征在于，所述的护肤组合物为膏霜、乳液或面膜。
9.一种适用于青年女性早晚的仿生护肤品组合，由日霜和晚霜组成，其特征在于，所述的日霜和晚霜按照权利要求1-6任一项所述的方法制备得到；
其中，按照重量百分比计，所述的日霜由18%的脂质组合物以及82%的基质原料和辅助原料的混合物组成；其中，所述的脂质组合物由辛酸甘油三酯、甘油二月桂酸酯、霍霍巴油、角鲨烷、神经酰胺III、胆甾醇以及霍霍巴酯组成，且辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯的重量比=198.04：12.75：3.99：1.39：1.91：1：2.69；按照重量百分比计，所述的基质原料和辅助原料的混合物由甘油3%，苯甲醇0.3%，山梨酸钾0.3%以及96.4%的精制水组成；
其中，按照重量百分比计，所述的晚霜由18%的脂质组合物以及82%的基质原料和辅助原料的混合物组成；其中，所述的脂质组合物由辛酸甘油三酯、甘油二月桂酸酯、霍霍巴油、角鲨烷、神经酰胺III、胆甾醇以及霍霍巴酯组成，且辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯的重量比=560.49：19.08：6.10：1.44：2.41：1：3.69；按照重量百分比计，所述的基质原料和辅助原料的混合物由甘油3%，苯甲醇0.3%，山梨酸钾0.3%以及96.4%的精制水组成。
10.一种适用于青年女性早晚的仿生护肤品组合，由日用面膜和夜用面膜组成，其特征在于，所述的日用面膜和夜用面膜按照权利要求1-6任一项所述的方法制备得到；
其中，按照重量百分比计，所述的日用面膜由12%的 A相、87.9%的B相以及0.1%的C相组成，其中，所述的A相为由辛酸甘油三酯、甘油二月桂酸酯、霍霍巴油、角鲨烷、神经酰胺III、胆甾醇以及霍霍巴酯按照辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯的重量比=198.04：12.75：3.99：1.39：1.91：1：2.69混合而成的脂质组合物；所述的基质原料和辅助原料的混合物由B相和C相组成，其中所述的B相由1w/w%的卡波姆，2w/w%的丙二醇，0.4 w/w %的苯甲醇，0.3% w/w的山梨酸钾以及96.3w/w%的精制水组成；所述的C相为三乙醇胺；
其中，按照重量百分比计，所述的夜用面膜由12%的 A相、87.9%的B相以及0.1%的C相组成，其中，所述的A相为由辛酸甘油三酯、甘油二月桂酸酯、霍霍巴油、角鲨烷、神经酰胺III、胆甾醇以及霍霍巴酯按照辛酸甘油三酯：甘油二月桂酸酯：霍霍巴油：角鲨烷：神经酰胺III：胆甾醇：霍霍巴酯的重量比=560.49：19.08：6.10：1.44：2.41：1：3.69混合而成的脂质组合物；所述的基质原料和辅助原料的混合物由B相和C相组成，其中所述的B相由1w/w%的卡波姆，2w/w%的丙二醇，0.4 w/w %的苯甲醇，0.3% w/w的山梨酸钾以及96.3w/w%的精制水组成；所述的C相为三乙醇胺。
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