CN107648171A - 一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物、制备方法及其应用 - Google Patents

一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物、制备方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物及其制备方法，所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，由以下重量份数的组分制成：外壳成分：磷脂30～60份、胆固醇10～30份、睡莲根提取物1～10份、山茶籽提取物1～8份、苦瓜提取物0.1～5份和乳化剂2～8份；内核成分：高丽参干细胞提取物2～20份和玫瑰茄提取物1～15份。本发明将水溶性抗衰老活性成分包封在脂质体内部，而脂溶性抗衰老活性成分则包封在脂质体的疏水基团的夹层中，有利于抗衰老成分渗入深层肌肤，将活性成分释放出来被人体吸收；抗衰老活性成分包裹在脂质体中，可以稳定活性成分，防止活性成分氧化，并且活性成分在脂质体具有缓释的效果，起到长效抗衰老的作用，提高活性成分的利用率。

Description

一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物、制备方法及其应用
技术领域
本发明涉及护肤品领域，具体涉及一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物、制备方法及其应用。
背景技术
护肤是全球美容以及个人护理行业中重要的细分市场，而抗衰老护肤品在其中备受关注。自古以来，人类一直致力于寻找具有抗衰老作用的活性物质。造成皮肤衰老的原因主要有：1)紫外线的照射导致胶原蛋白流失，从而加速皮肤老化；2)体内氧自由基的攻击导致皮肤损伤；3)皮肤中的成纤维细胞自然老化。虽然皮肤衰老是人体的自然生理现象，但是环境因素会导致皮肤衰老加剧，而在护肤品中加入一些安全的抗衰老物质，可以延缓皮肤的衰老。
在市面上的抗衰老护肤品中，主要通过添加激素和植物提取物等对皮肤进行抗皱处理，然而激素的滥用容易导致副作用，植物提取物副作用小，但单一有效成分往往难以达到理想的效果，抗衰老短期效果不明显，另一方面，市面上的护肤品中，植物提取物多为直接添加使用，植物体提取物中的有效成分，如黄酮、花青素等化合物不稳定，以受环境因素影响，易被空气中的氧气所氧化失效。
植物干细胞是植物体内未分化的细胞，是生长发育的源泉和信号调控中心，具有很强的自我更新和持续分裂能力。研究表明，某些植物干细胞具有强大的抗氧化和抗衰老活性，可以作为人体干细胞的激活剂，为人类抗衰老提供一个新方法。
脂质体是利用天然的磷脂类化合物，制备出的具有双层分子结构的纳米级囊泡，脂质体安全性和生物降解性良好，具有缓释效果，将抗衰老活性成分包裹在脂质体中，能够保护和稳定活性成分，促进皮肤吸收，从根本上起到长效抗衰老作用。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
本发明的另一个目的在于提供一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法。
本发明的另一个目的在于提供一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的应用。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：
一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，由以下重量份数的组分制成：
外壳成分：磷脂30～60份、胆固醇10～30份、睡莲根提取物1～10份、山茶籽提取物1～8份、苦瓜提取物0.1～5份和乳化剂2～8份；
内核成分：高丽参干细胞提取物2～20份和玫瑰茄提取物1～15份。
上述技术方案中睡莲根提取物、山茶籽提取物和苦瓜提取物均含有脂溶性黄酮化合物，具有抗衰老抗氧化的活性；高丽参干细胞提取物水溶性的高丽参多糖，具有强大的抗氧化和抗衰老活性；玫瑰茄提取物也含有水溶性的多糖，具有抗氧化活性。水溶性活性成分包封在脂质体内部，而脂溶性活性成分则包封在脂质体的疏水基团的夹层中，有利于抗衰老成分渗入深层肌肤，将活性成分释放出来被人体吸收。抗衰老活性成分包裹在脂质体中，一方面可以稳定活性成分，防止活性成分氧化，另一方面活性成分在脂质体具有缓释的效果，起到长效抗衰老的作用，提高活性成分的利用率。
作为本发明所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的优选实施方式，所述外壳成分与内核成分的重量比为2～12:1。
作为本发明所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的优选实施方式，由以下重量份数的组分制成：
外壳成分：磷脂40～50份、胆固醇15～25份、睡莲根提取物3～8份、山茶籽提取物2～6份、苦瓜提取物1～4份和乳化剂2～8份；
内核成分：高丽参干细胞提取物5～15和玫瑰茄提取物5～12份。
作为本发明所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的优选实施方式，由以下重量份数的组分制成：
外壳成分：磷脂45份、胆固醇20份、睡莲根提取物6份、山茶籽提取物4份、苦瓜提取物3份和乳化剂6份；
内核成分：高丽参干细胞提取物10份和玫瑰茄提取物8份。
作为本发明所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的优选实施方式，所述高丽参干细胞为高丽参形成层干细胞。
作为本发明所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的优选实施方式，所述高丽参干细胞提取物包括培养高丽参干细胞后的高丽参干细胞培养基和高丽参干细胞的裂解物。
作为本发明所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的优选实施方式，所述磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂或氢化卵磷脂。
作为本发明所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的优选实施方式，所述乳化剂为吐温-80、吐温-60、硬脂酸、甘油单硬脂酸酯中的至少一种。
本发明还提供一种上述任一项所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将培养高丽参干细胞后的高丽参干细胞培养基和高丽参干细胞的裂解物冷冻干燥，得到高丽参干细胞提取物；
(2)按比例称取各组分原料；
(3)将内核成分按1:30～40的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:40～60的重量比溶于氯仿中，70～80℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，使脂质在器壁形成薄膜，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在60～70℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
本发明还提供上述任一项所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物在化妆品中的应用。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1)脂质体对于抗衰老活性成分具有缓释作用，能够延长活性成分的作用时间，起到长效抗衰老的作用；
2)将不稳定、易氧化的抗衰老活性成分包裹在脂质体中，活性成分得到脂质体双层膜的保护，在很大程度上提高了活性成分的稳定性；
3)脂质体的类脂膜作为活性成分的控释膜，包裹的活性成分通过扩散的方式释放，服从透皮吸收机制进入体内，水溶性活性成分包封在脂质体内部，而脂溶性活性成分则包封在脂质体的疏水基团的夹层中，有利于抗衰老成分渗入深层肌肤，将活性成分释放出来被人体吸收，提高抗衰老效果。
附图说明
图1为本发明皮肤角质层含水量测定结果图。
图2为实施例1、实施例6、对比例1和对比例2累计释放曲线。
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明进一步说明。本领域技术人员应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
本发明高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法的一种实施例，本实施例所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法为：
(1)制备高丽参干细胞提取物
1)高丽参形成层干细胞的分离及培养
将高丽参的块根经过消毒处理后，切下包括形成层在内的半圆切片；
将半圆型切片放置在WPM培养基上，25℃下黑暗培养；
两周后将形成层明显增殖的外增殖体取出，分离形成层干细胞并转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到高丽参形成层干细胞；
2)收集培养高丽参形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和高丽参形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到高丽参干细胞提取物。
(2)按以下重量比例称取各组分原料
外壳成分：大豆卵磷脂40份、胆固醇15份、睡莲根提取物3份、山茶籽提取物6份、苦瓜提取物1份和吐温-80 8份；
内核成分：高丽参干细胞提取物5和玫瑰茄提取物5份。
睡莲根提取物购自西安瑞林生物科技有限公司；山茶籽提取物购自西安通泽生物科技有限公司；苦瓜提取物购自西安维珍生物科技有限公司；玫瑰茄提取物购自西安优硕生物科技有限公司。
(3)将内核成分按1:30的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:60的重量比溶于氯仿中，70℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，使脂质在器壁形成薄膜，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在70℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
实施例2
本发明高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法的一种实施例，本实施例所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法为：
(1)制备高丽参干细胞提取物
1)高丽参形成层干细胞的分离及培养
将高丽参的块根经过消毒处理后，切下包括形成层在内的半圆切片；
将半圆型切片放置在WPM培养基上，25℃下黑暗培养；
两周后将形成层明显增殖的外增殖体取出，分离形成层干细胞并转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到高丽参形成层干细胞；
2)收集培养高丽参形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和高丽参形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到高丽参干细胞提取物。
(2)按以下重量比例称取各组分原料
外壳成分：大豆卵磷脂50份、胆固醇25份、睡莲根提取物8份、山茶籽提取物2份、苦瓜提取物4份、硬脂酸2份和吐温-60 2份；
内核成分：高丽参干细胞提取物15和玫瑰茄提取物12份。
睡莲根提取物购自西安瑞林生物科技有限公司；山茶籽提取物购自西安通泽生物科技有限公司；苦瓜提取物购自西安维珍生物科技有限公司；玫瑰茄提取物购自西安优硕生物科技有限公司。
(3)将内核成分按1:40的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:40的重量比溶于氯仿中，80℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，使脂质在器壁形成薄膜，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在60℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
实施例3
本发明高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法的一种实施例，本实施例所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法为：
(1)制备高丽参干细胞提取物
1)高丽参形成层干细胞的分离及培养
将高丽参的块根经过消毒处理后，切下包括形成层在内的半圆切片；
将半圆型切片放置在WPM培养基上，25℃下黑暗培养；
两周后将形成层明显增殖的外增殖体取出，分离形成层干细胞并转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到高丽参形成层干细胞；
2)收集培养高丽参形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和高丽参形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到高丽参干细胞提取物。
(2)按以下重量比例称取各组分原料
外壳成分：蛋黄卵磷脂30份、胆固醇10份、睡莲根提取物10份、山茶籽提取物1份、苦瓜提取物0.1份和甘油单硬脂酸酯8份；
内核成分：高丽参干细胞提取物2份和玫瑰茄提取物1份。
睡莲根提取物购自西安瑞林生物科技有限公司；山茶籽提取物购自西安通泽生物科技有限公司；苦瓜提取物购自西安维珍生物科技有限公司；玫瑰茄提取物购自西安优硕生物科技有限公司。
(3)将内核成分按1:35的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:58的重量比溶于氯仿中，75℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，使脂质在器壁形成薄膜，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在55℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
实施例4
本发明高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法的一种实施例，本实施例所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法为：
(1)制备高丽参干细胞提取物
1)高丽参形成层干细胞的分离及培养
将高丽参的块根经过消毒处理后，切下包括形成层在内的半圆切片；
将半圆型切片放置在WPM培养基上，25℃下黑暗培养；
两周后将形成层明显增殖的外增殖体取出，分离形成层干细胞并转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到高丽参形成层干细胞；
2)收集培养高丽参形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和高丽参形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到高丽参干细胞提取物。
(2)按以下重量比例称取各组分原料
外壳成分：蛋黄卵磷脂60份、胆固醇30份、睡莲根提取物1份、山茶籽提取物8份、苦瓜提取物5份和甘油单硬脂酸酯2份；
内核成分：高丽参干细胞提取物20份和玫瑰茄提取物15份。
睡莲根提取物购自西安瑞林生物科技有限公司；山茶籽提取物购自西安通泽生物科技有限公司；苦瓜提取物购自西安维珍生物科技有限公司；玫瑰茄提取物购自西安优硕生物科技有限公司。
(3)将内核成分按1:38的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:50的重量比溶于氯仿中，70℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，使脂质在器壁形成薄膜，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在65℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
实施例5
本发明高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法的一种实施例，本实施例所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法为：
(1)制备高丽参干细胞提取物
1)高丽参形成层干细胞的分离及培养
将高丽参的块根经过消毒处理后，切下包括形成层在内的半圆切片；
将半圆型切片放置在WPM培养基上，25℃下黑暗培养；
两周后将形成层明显增殖的外增殖体取出，分离形成层干细胞并转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到高丽参形成层干细胞；
2)收集培养高丽参形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和高丽参形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到高丽参干细胞提取物。
(2)按以下重量比例称取各组分原料
外壳成分：大豆卵磷脂55份、胆固醇25份、睡莲根提取物3份、山茶籽提取物7份、苦瓜提取物0.8份和甘油单硬脂酸酯3份；
内核成分：高丽参干细胞提取物14份和玫瑰茄提取物9份。
睡莲根提取物购自西安瑞林生物科技有限公司；山茶籽提取物购自西安通泽生物科技有限公司；苦瓜提取物购自西安维珍生物科技有限公司；玫瑰茄提取物购自西安优硕生物科技有限公司。
(3)将内核成分按1:35的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:55的重量比溶于氯仿中，70℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，使脂质在器壁形成薄膜，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在60℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
实施例6
本发明高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法的一种实施例，本实施例所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法为：
(1)制备高丽参干细胞提取物
1)高丽参形成层干细胞的分离及培养
将高丽参的块根经过消毒处理后，切下包括形成层在内的半圆切片；
将半圆型切片放置在WPM培养基上，25℃下黑暗培养；
两周后将形成层明显增殖的外增殖体取出，分离形成层干细胞并转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到高丽参形成层干细胞；
2)收集培养高丽参形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和高丽参形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到高丽参干细胞提取物。
(2)按以下重量比例称取各组分原料
外壳成分：氢化卵磷脂45份、胆固醇20份、睡莲根提取物6份、山茶籽提取物4份、苦瓜提取物3份和吐温-80 6份；
内核成分：高丽参干细胞提取物10份和玫瑰茄提取物8份。
睡莲根提取物购自西安瑞林生物科技有限公司；山茶籽提取物购自西安通泽生物科技有限公司；苦瓜提取物购自西安维珍生物科技有限公司；玫瑰茄提取物购自西安优硕生物科技有限公司。
(3)将内核成分按1:40的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:55的重量比溶于氯仿中，75℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，使脂质在器壁形成薄膜，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在70℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
对比例1
(1)制备高丽参干细胞提取物
1)高丽参形成层干细胞的分离及培养
将高丽参的块根经过消毒处理后，切下包括形成层在内的半圆切片；
将半圆型切片放置在WPM培养基上，25℃下黑暗培养；
两周后将形成层明显增殖的外增殖体取出，分离形成层干细胞并转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到高丽参形成层干细胞；
2)收集培养高丽参形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和高丽参形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到高丽参干细胞提取物。
(2)按以下重量比例称取各组分原料
外壳成分：睡莲根提取物3份、山茶籽提取物6份、苦瓜提取物1份和吐温-80 8份；
内核成分：高丽参干细胞提取物5和玫瑰茄提取物5份。
睡莲根提取物购自西安瑞林生物科技有限公司；山茶籽提取物购自西安通泽生物科技有限公司；苦瓜提取物购自西安维珍生物科技有限公司；玫瑰茄提取物购自西安优硕生物科技有限公司。
(3)将内核成分按1:40的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:55的重量比溶于氯仿中，75℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在70℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
对比例2
(1)制备高丽参干细胞提取物
1)高丽参形成层干细胞的分离及培养
将高丽参的块根经过消毒处理后，切下包括形成层在内的半圆切片；
将半圆型切片放置在WPM培养基上，25℃下黑暗培养；
两周后将形成层明显增殖的外增殖体取出，分离形成层干细胞并转移到继代培养基中培养，每两周继代一次，得到高丽参形成层干细胞；
2)收集培养高丽参形成层干细胞后的培养基，经超滤膜过滤，浓缩滤液，去除培养基中的酚红，保留培养基中的活性成分；将培养基和高丽参形成层干细胞的裂解物冷冻干燥，得到不含脂质体的高丽参干细胞提取物。
(2)按以下重量比例称取各组分原料
外壳成分：睡莲根提取物6份、山茶籽提取物4份、苦瓜提取物3份和吐温-80 6份；
内核成分：高丽参干细胞提取物10份和玫瑰茄提取物8份。
睡莲根提取物购自西安瑞林生物科技有限公司；山茶籽提取物购自西安通泽生物科技有限公司；苦瓜提取物购自西安维珍生物科技有限公司；玫瑰茄提取物购自西安优硕生物科技有限公司。
(3)将内核成分按1:40的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:55的重量比溶于氯仿中，75℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在70℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到不含脂质体的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
高丽参干细胞提取物抗衰老组合物功效评价
一、活性成分稳定性评价
以实施例1～6所制备的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物作为实验组，以对比例1～2所制备的不含脂质体的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物作为对照组，分别将实施例1～6和对比例1～2所制备的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物放置6个月后，进行相关功效测试。
(1)超氧阴离子清除测定
将实施例1～6和对比例1～2所制备的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物分别配制成浓度为50mg/mL的水溶液。取0.1mL分别加入1mL含557μmol/L的NaOH的16mmol/L Tris-HCl(pH＝8.0),1mL含45μmol/L PMS的16mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)，以及含108μmol/L的NBT的16mmol/L Tris-HCl(pH＝8.0)。25℃温浴5min，在酶标仪560nm下测吸光值，根据公式(1)计算超氧阴离子清除率，结果如表1所示。
超氧阴离子清除率＝(1-样品管A560/对照管A560)×100％ (1)
表1
编号 超氧阴离子清除率(％)
实施例1 61
实施例2 77
实施例3 68
实施例4 74
实施例5 76
实施例6 80
对比例1 47
对比例2 52
超氧阴离子是机体代谢过程产生的一种活性自由基，与皮肤老化有着密切的联系。由表1结果可知，放置6个月后，实施例制备的护肤组合物的超氧阴离子清除率明显高于对比例，抗衰老活性成分不稳定、易氧化失效，包裹在脂质体中，活性成分得到脂质体双层膜的保护，在很大程度上提高了活性成分的稳定性。
(2)羟自由基清除测定
将实施例1～6和对比例1～2所制备的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物分别配制成浓度为50mg/mL的水溶液。取0.1mL分别加入0.6mL反应缓冲液(含2.67mmol/L脱氧核糖和0.13mmol/L EDTA的0.2mol/L pH＝7.4的磷酸盐缓冲液)，0.4mmol/L硫酸亚铁0.2mL，2.0mmol/L抗坏血酸0.05mL，以及20mmol/L的H2O2 0.05mL，37℃温浴15min，取出后加入1％硫代巴比妥酸1mL和2％三氯乙酸1mL，沸水浴15min，取出后在冰上冷却，在酶标仪532nm下测吸光值，根据公式(2)计算羟自由基清除率，结果如表3所示。
羟自由基清除率＝(1－样品管A532/对照管A532)×100％ (2)
表2
羟自由基作为活性氧自由基，是造成生物有机体过氧化损伤的主要因素。由表2可知，放置6个月后，实施例制备的护肤组合物的羟自由基清除率明显高于对比例，表明脂质体对抗衰老活性成分具有保护作用，本发明制备的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物将抗衰老活性成分包裹在脂质体中，活性成分得到脂质体双层膜的保护，在很大程度上提高了活性成分的稳定性。
(3)皮肤角质层含水量测定
实施例1～6和对比例1～2制得的护肤组合物，每个组分别选30名年龄在35～55岁的女性志愿者，志愿者洁面后在脸上涂抹护肤组合物，连续使用6个月，通过皮肤测试仪(MC750，德国CK)测定角质层含水量，测试结果如图1所示。
皮肤角质层中有结合水和游离水两种类型的水分，水分含量会影响角质层中水和油脂皮脂膜的形成，皮脂膜能防止水分过分蒸发，软化皮肤，对皮肤的抗衰老具有重要意义。由图1可知，志愿者使用实施例制备的高丽参干细胞护肤组合物后，皮肤角质层含水量明显优于对比例，表明抗衰老活性成分包裹在脂质体中，活性成分得到脂质体双层膜的保护，放置6个月后，仍然具有良好的抗衰老效果，可以减少皮肤水分流失。同时，将水溶性活性成分包封在脂质体内部，而脂溶性活性成分则包封在脂质体的疏水基团的夹层中，有利于抗衰老成分渗入深层肌肤，提高抗衰老效果。
(4)皮肤弹性测试
实施例1～6和对比例1～2制得的高丽参抗衰老护肤组合物，每组分别选30名年龄在35～55岁的女性志愿者，志愿者每日早、晚洁面后在脸上涂抹护肤组合物，连续使用3个月，通过皮肤测试仪(MC750，德国CK)测定皮肤弹性，测试结果如表3所示。
表3
皮肤弹性参数的数值越大，皮肤弹性越好。由表3可知，志愿者使用实验组制备的高丽参干细胞护肤组合物后，皮肤弹性参数明显高于对比例，脂质体能够有效提高抗衰老活性成分的稳定性。水溶性活性成分包封在脂质体内部，而脂溶性活性成分则包封在脂质体的疏水基团的夹层中，有利于抗衰老成分渗入深层肌肤，将活性成分释放出来被人体吸收，提高皮肤弹性，提高抗衰老效果。
二、抗衰老护肤品缓释功效测定
以实施例1和实施例6制备的高丽参干细胞抗衰老护肤品作为实验组，以对比例1～2作为对照组。采用透析袋法评价实验组和对照组的缓释功效，以生理盐水作为释放介质，定时取样检测透析袋外的溶液，结果如图2所示。
由图2可知，实验组的释放明显低于对照组，脂质体对于抗衰老活性成分具有缓释作用，能够延长活性成分的作用时间，起到长效抗衰老的作用。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.一种高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，其特征在于，由以下重量份数的组分制成：
外壳成分：磷脂30～60份、胆固醇10～30份、睡莲根提取物1～10份、山茶籽提取物1～8份、苦瓜提取物0.1～5份和乳化剂2～8份；
内核成分：高丽参干细胞提取物2～20份和玫瑰茄提取物1～15份。
2.根据权利要求1所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，其特征在于，所述外壳成分与内核成分的重量比为2～12:1。
3.根据权利要求1所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，其特征在于，由以下重量份数的组分制成：
外壳成分：磷脂40～50份、胆固醇15～25份、睡莲根提取物3～8份、山茶籽提取物2～6份、苦瓜提取物1～4份和乳化剂2～8份；
内核成分：高丽参干细胞提取物5～15和玫瑰茄提取物5～12份。
4.根据权利要求1所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，其特征在于，由以下重量份数的组分制成：
外壳成分：磷脂45份、胆固醇20份、睡莲根提取物6份、山茶籽提取物4份、苦瓜提取物3份和乳化剂6份；
内核成分：高丽参干细胞提取物10份和玫瑰茄提取物8份。
5.根据权利要求1所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，其特征在于，所述高丽参干细胞为高丽参形成层干细胞。
6.根据权利要求1所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，其特征在于，所述高丽参干细胞提取物包括培养高丽参干细胞后的高丽参干细胞培养基和高丽参干细胞的裂解物。
7.根据权利要求1所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，其特征在于，所述磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂或氢化卵磷脂。
8.根据权利要求1所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物，其特征在于，所述乳化剂为吐温-80、吐温-60、硬脂酸、甘油单硬脂酸酯中的至少一种。
9.根据权利要求1～8任一项所述的高丽参干细胞提取物抗衰老组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将培养高丽参干细胞后的高丽参干细胞培养基和高丽参干细胞的裂解物冷冻干燥，得到高丽参干细胞提取物；
(2)按比例称取各组分原料；
(3)将内核成分按1:30～40的重量比溶于95％的乙醇溶液中，得到内核溶液；
(4)将外壳成分按1:40～60的重量比溶于氯仿中，70～80℃水浴加热，搅拌均匀后，在减压旋转下除去氯仿，使脂质在器壁形成薄膜，随后将步骤(3)得到的内核溶液加入，在60～70℃下不断搅拌，混合均匀后，均质乳化得到所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物。
10.根据权利要求1～8任一项所述高丽参干细胞提取物抗衰老组合物在化妆品中的应用。
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