CN107646680A - 一种脱毒薄荷培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种脱毒薄荷培育方法，涉及薄荷种植技术领域，包括以下步骤：（1）对带毒母本薄荷进行脱毒处理；（2）组织培养；（3）生根培养；（4）移栽；经过本发明方法进行培育的薄荷在苗期，薄荷叶片接近圆形，叶片颜色浓绿，叶面有光泽，基部成紫色，茎节短，叶片茂盛，环境适应力得到大幅度的提高，收获的薄荷制成的薄荷原油香味、色泽得到极大的改善，品质显著提高。
Description
技术领域
本发明属于薄荷种植技术领域，具体涉及一种脱毒薄荷培育方法。
背景技术
薄荷为唇形科薄荷属的多年草本.以全草入药,薄荷味辛,性凉;归肺经、肝经;具有宣散风热, 清利头目 ,透疹功能;用于风热感冒 ,风温初起,头痛、目赤、喉痹、风疹、麻疹,胀闷等症。分布于全国南北各省 ,生于潮湿的环境 ,全国各地均有栽培,主产于江苏、江西、湖南等省 ,以江苏产的为最佳 。别名:升阳菜、婆荷、苏薄荷、野薄荷、土薄荷、仁丹草等。有清香,茎方形 ,单叶对生;轮伞花序腋生,花冠淡紫或白色;小坚果椭圆。薄荷是世界上三大香料之一,贸易量在10000 吨左右。在国际市场上 ,薄荷主要作为食品、化妆品的添加剂。用来改善口味和增加气味等。随着中国加入世界贸易组织 ,市场对薄荷的需求量也在逐步的攀升。但薄荷在生长的过程中, 品种更新缓慢 ,且易感毒导致优良性状退化 ,经济产量降低 。因此,改善品种 ,提高产量, 并使其优良品种迅速推广种植 ,已成为薄荷生产中亟待解决的一个重要问题。
发明内容
本发明的目的是针对现有的问题，提供了一种脱毒薄荷培育方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种脱毒薄荷培育方法，包括以下步骤：
（1）对带毒母本薄荷进行脱毒处理：将带毒母本薄荷在温度为30-35℃、空气相对湿度为80%环境下处理3-5小时，然后取带毒母本薄荷顶部段2cm，剪去1-2片叶片，然后用质量分数为80%的乙醇溶液浸泡80-100s，然后再采用超声处理15-20s，然后取出，采用γ-射线进行辐照处理5-8s，然后再放入质量分数为80%的乙醇溶液中浸泡30-40s，然后取出，再截取带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm，进行组织培养；
（2）组织培养：采用MS培养基对步骤（1）中带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm进行组织培养，培养条件为温度为22-24℃、光照强度为1200-1500lux，每天光照不低于12小时；所述MS培养基中含有其质量0.0012%的槲皮素；
（3）生根培养：待步骤（2）中组织培养中的薄荷苗生长至2.2cm时，转入生根培养基中进行生根培养，培养至薄荷苗生根后，得到完整薄荷幼苗，进行移栽；所述生根培养基所述生根培养基是在MS培养基中添加IAA、6-BA和 NAA、β-谷甾醇后得到的培养基， pH为5.8-6.0，所述IAA的终浓度为0.32-0.38mg/L，所述6-BA的终浓度为 0.6-1.0 mg/L，所述 NAA的终浓度为 0.04-0.12mg/L，所述β-谷甾醇的浓度为0.012-0.015mg/L；
（4）移栽：将步骤（3）培养的完整薄荷苗在质量分数为2.5%的维生素B1溶液中培养3-4小时，然后移栽到育苗地中。
进一步的，所述步骤（1）中带毒母本薄荷为茎细长, 分节少,叶变小或花叶扭曲,沿叶脉产生褪绿条纹,叶柄变红,萎蔫生长衰弱的薄荷植株。
进一步的，所述步骤（1）中γ-射线辐照剂量为30-40kGy。
进一步的，所述步骤（4）中完整薄荷苗在维生素B1溶液中培养温度为28-30℃。
本发明相比现有技术具有以下优点：经过本发明方法进行培育的薄荷在苗期，薄荷叶片接近圆形，叶片颜色浓绿，叶面有光泽，基部成紫色，茎节短，叶片茂盛，环境适应力得到大幅度的提高，收获的薄荷制成的薄荷原油香味、色泽得到极大的改善，品质显著提高，本发明通过在对薄荷母本进行脱毒时，采用γ-射线进行短时间的辐照处理，能够有效的提高对薄荷的脱毒效果，同时，不会诱导薄荷组织的基因突变，改变薄荷形状，通过在组织培养过程中的MS培养基中添加一定量的槲皮素，通过少量槲皮素的作用，能够有效的刺激薄荷组织中愈伤组织的形成，提高出芽率，通过在生根培养基中添加一定浓度的β-谷甾醇，能够有效的诱导薄荷组织根的发育与生长，从而有效的提高了薄荷的生根率，并且，增强了薄荷苗的活性和环境适应力，通过在移栽前采用一定浓度的维生素B1溶液进行处理，能够有效的进一步提高薄荷苗的环境适应力，增强其抵抗力，从而有效的提高薄荷苗的移栽成活率。
具体实施方式
实施例1
一种脱毒薄荷培育方法，包括以下步骤：
（1）对带毒母本薄荷进行脱毒处理：将带毒母本薄荷在温度为30℃、空气相对湿度为80%环境下处理3小时，然后取带毒母本薄荷顶部段2cm，剪去1片叶片，然后用质量分数为80%的乙醇溶液浸泡80s，然后再采用超声处理15s，然后取出，采用γ-射线进行辐照处理5s，然后再放入质量分数为80%的乙醇溶液中浸泡30s，然后取出，再截取带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm，进行组织培养；
（2）组织培养：采用MS培养基对步骤（1）中带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm进行组织培养，培养条件为温度为22℃、光照强度为1200lux，每天光照不低于12小时；所述MS培养基中含有其质量0.0012%的槲皮素；
（3）生根培养：待步骤（2）中组织培养中的薄荷苗生长至2.2cm时，转入生根培养基中进行生根培养，培养至薄荷苗生根后，得到完整薄荷幼苗，进行移栽；所述生根培养基所述生根培养基是在MS培养基中添加IAA、6-BA和 NAA、β-谷甾醇后得到的培养基， pH为5.8，所述IAA的终浓度为0.32mg/L，所述6-BA的终浓度为 0.6mg/L，所述 NAA的终浓度为 0.04mg/L，所述β-谷甾醇的浓度为0.012mg/L；
（4）移栽：将步骤（3）培养的完整薄荷苗在质量分数为2.5%的维生素B1溶液中培养3小时，然后移栽到育苗地中。
进一步的，所述步骤（1）中带毒母本薄荷为茎细长, 分节少,叶变小或花叶扭曲,沿叶脉产生褪绿条纹,叶柄变红,萎蔫生长衰弱的薄荷植株。
进一步的，所述步骤（1）中γ-射线辐照剂量为30kGy。
进一步的，所述步骤（4）中完整薄荷苗在维生素B1溶液中培养温度为28℃。
实施例2
一种脱毒薄荷培育方法，包括以下步骤：
（1）对带毒母本薄荷进行脱毒处理：将带毒母本薄荷在温度为35℃、空气相对湿度为80%环境下处理5小时，然后取带毒母本薄荷顶部段2cm，剪去2片叶片，然后用质量分数为80%的乙醇溶液浸泡100s，然后再采用超声处理20s，然后取出，采用γ-射线进行辐照处理8s，然后再放入质量分数为80%的乙醇溶液中浸泡40s，然后取出，再截取带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm，进行组织培养；
（2）组织培养：采用MS培养基对步骤（1）中带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm进行组织培养，培养条件为温度为24℃、光照强度为1500lux，每天光照不低于12小时；所述MS培养基中含有其质量0.0012%的槲皮素；
（3）生根培养：待步骤（2）中组织培养中的薄荷苗生长至2.2cm时，转入生根培养基中进行生根培养，培养至薄荷苗生根后，得到完整薄荷幼苗，进行移栽；所述生根培养基所述生根培养基是在MS培养基中添加IAA、6-BA和 NAA、β-谷甾醇后得到的培养基， pH为6.0，所述IAA的终浓度为0.32-0.38mg/L，所述6-BA的终浓度为1.0 mg/L，所述 NAA的终浓度为0.12mg/L，所述β-谷甾醇的浓度为0.015mg/L；
（4）移栽：将步骤（3）培养的完整薄荷苗在质量分数为2.5%的维生素B1溶液中培养4小时，然后移栽到育苗地中。
进一步的，所述步骤（1）中带毒母本薄荷为茎细长, 分节少,叶变小或花叶扭曲,沿叶脉产生褪绿条纹,叶柄变红,萎蔫生长衰弱的薄荷植株。
进一步的，所述步骤（1）中γ-射线辐照剂量为40kGy。
进一步的，所述步骤（4）中完整薄荷苗在维生素B1溶液中培养温度为30℃。
实施例3
一种脱毒薄荷培育方法，包括以下步骤：
（1）对带毒母本薄荷进行脱毒处理：将带毒母本薄荷在温度为32℃、空气相对湿度为80%环境下处理4小时，然后取带毒母本薄荷顶部段2cm，剪去2片叶片，然后用质量分数为80%的乙醇溶液浸泡90s，然后再采用超声处理18s，然后取出，采用γ-射线进行辐照处理6s，然后再放入质量分数为80%的乙醇溶液中浸泡35s，然后取出，再截取带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm，进行组织培养；
（2）组织培养：采用MS培养基对步骤（1）中带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm进行组织培养，培养条件为温度为23℃、光照强度为1300lux，每天光照不低于12小时；所述MS培养基中含有其质量0.0012%的槲皮素；
（3）生根培养：待步骤（2）中组织培养中的薄荷苗生长至2.2cm时，转入生根培养基中进行生根培养，培养至薄荷苗生根后，得到完整薄荷幼苗，进行移栽；所述生根培养基所述生根培养基是在MS培养基中添加IAA、6-BA和 NAA、β-谷甾醇后得到的培养基， pH为5.9，所述IAA的终浓度为0.35mg/L，所述6-BA的终浓度为 0.8mg/L，所述 NAA的终浓度为 0.06mg/L，所述β-谷甾醇的浓度为0.013mg/L；
（4）移栽：将步骤（3）培养的完整薄荷苗在质量分数为2.5%的维生素B1溶液中培养3.5小时，然后移栽到育苗地中。
进一步的，所述步骤（1）中带毒母本薄荷为茎细长, 分节少,叶变小或花叶扭曲,沿叶脉产生褪绿条纹,叶柄变红,萎蔫生长衰弱的薄荷植株。
进一步的，所述步骤（1）中γ-射线辐照剂量为35kGy。
进一步的，所述步骤（4）中完整薄荷苗在维生素B1溶液中培养温度为29℃。
对比例1：与实施例1区别仅在于步骤（2）中MS培养基中不添加槲皮素。
对比例2：与实施例1区别仅在于生根培养基中不添加β-谷甾醇。
对比例3：与实施例1区别仅在于移栽将维生素B1溶液替换为清水处理。
试验：
分别采用实施例与对比例方法对同批薄荷进行培育处理，每组中样本为200个，对比试验过程中出芽率、生根率和移栽成活率，其中移栽的育苗地土壤理化性质相同，雨水与光照强度一致；
表1
| 出芽率% | 生根率% | 移栽成活率% | |
| 实施例1 | 100 | 100 | 98.3 |
| 实施例2 | 100 | 100 | 97.4 |
| 实施例3 | 100 | 100 | 98.1 |
| 对比例1 | 85.6 | 98.2 | 95.5 |
| 对比例2 | 100 | 90.4 | 94.2 |
| 对比例3 | 100 | 100 | 96.5 |
由表1可以看出，本发明方法能够有效的提高薄荷脱毒后培育过程中的出芽率、生根率和移栽成活率。
Claims (4)
1.一种脱毒薄荷培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）对带毒母本薄荷进行脱毒处理：将带毒母本薄荷在温度为30-35℃、空气相对湿度为80%环境下处理3-5小时，然后取带毒母本薄荷顶部段2cm，剪去1-2片叶片，然后用质量分数为80%的乙醇溶液浸泡80-100s，然后再采用超声处理15-20s，然后取出，采用γ-射线进行辐照处理5-8s，然后再放入质量分数为80%的乙醇溶液中浸泡30-40s，然后取出，再截取带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm，进行组织培养；
（2）组织培养：采用MS培养基对步骤（1）中带毒母本薄荷顶部段的尖端0.5mm进行组织培养，培养条件为温度为22-24℃、光照强度为1200-1500lux，每天光照不低于12小时；所述MS培养基中含有其质量0.0012%的槲皮素；
（3）生根培养：待步骤（2）中组织培养中的薄荷苗生长至2.2cm时，转入生根培养基中进行生根培养，培养至薄荷苗生根后，得到完整薄荷幼苗，进行移栽；所述生根培养基所述生根培养基是在MS培养基中添加IAA、6-BA和 NAA、β-谷甾醇后得到的培养基， pH为5.8-6.0，所述IAA的终浓度为0.32-0.38mg/L，所述6-BA的终浓度为 0.6-1.0 mg/L，所述 NAA的终浓度为 0.04-0.12mg/L，所述β-谷甾醇的浓度为0.012-0.015mg/L；
（4）移栽：将步骤（3）培养的完整薄荷苗在质量分数为2.5%的维生素B1溶液中培养3-4小时，然后移栽到育苗地中。
2.如权利要求1所述的一种脱毒薄荷培育方法，其特征在于，所述步骤（1）中带毒母本薄荷为茎细长, 分节少,叶变小或花叶扭曲, 沿叶脉产生褪绿条纹,叶柄变红,萎蔫生长衰弱的薄荷植株。
3.如权利要求1所述的一种脱毒薄荷培育方法，其特征在于，所述步骤（1）中γ-射线辐照剂量为30-40kGy。
4.如权利要求1所述的一种脱毒薄荷培育方法，其特征在于，所述步骤（4）中完整薄荷苗在维生素B1溶液中培养温度为28-30℃。
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Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN104272986A (zh) * | 2013-07-02 | 2015-01-14 | 宋燕文 | 一种植物成苗脱毒灭菌的方法 |
| CN105393920A (zh) * | 2015-12-18 | 2016-03-16 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 一种薄荷叶片高效再生体系的方法建立 |
| CN106797974A (zh) * | 2016-12-29 | 2017-06-06 | 广西壮族自治区药用植物园 | 提高罗汉果中赛门苷i含量的方法 |
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- 2017-09-30 CN CN201710916347.4A patent/CN107646680A/zh active Pending
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| CN106797974A (zh) * | 2016-12-29 | 2017-06-06 | 广西壮族自治区药用植物园 | 提高罗汉果中赛门苷i含量的方法 |
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