CN107593353B - 一种提高绿豆活性成分含量的种植方法 - Google Patents

一种提高绿豆活性成分含量的种植方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107593353B
CN107593353B CN201710950795.6A CN201710950795A CN107593353B CN 107593353 B CN107593353 B CN 107593353B CN 201710950795 A CN201710950795 A CN 201710950795A CN 107593353 B CN107593353 B CN 107593353B
Authority
CN
China
Prior art keywords
parts
mung bean
weight
urea
days
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201710950795.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107593353A (zh
Inventor
赵华勤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201710950795.6A priority Critical patent/CN107593353B/zh
Publication of CN107593353A publication Critical patent/CN107593353A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107593353B publication Critical patent/CN107593353B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Fertilizers (AREA)

Abstract

本发明属于绿豆种植技术领域,尤其是一种提高绿豆活性成分含量的种植方法,具体方法如下:(1)种植前种植地的处理及播种;(2)种植后的田间管理;种子前施入生物有机肥并进行灌溉处理,有效提高种植土壤的生物活性,培肥土壤,抑制土壤有害菌的滋生,促进土壤有益菌的分泌,促进绿豆植株的健壮生长,增强其根系分泌能力的增强,有效提高其抗倒伏能力;种植后肥液的根施,能够促进绿豆幼苗的生长,增强植株吸收运输转化养分的能力,盛花期尿素水溶液结合摘荚期硫酸铜水溶液叶面喷施,有效抑制落花落荚现象的发生,延缓植株衰老,促进营养物质向库器官运输和分配,有效促进绿豆活性成分的合成和积累,促进籽粒饱满,有效增加绿豆的产量。

Description

一种提高绿豆活性成分含量的种植方法
技术领域
本发明属于绿豆种植技术领域,尤其是一种提高绿豆活性成分含量的种植方法。
背景技术
绿豆,为豆科草本植物菜豆属绿豆的成熟种子,在我国已有两千多年的栽培史,作为粮食作物在各地都有种植;长期以来,人们食用绿豆,用以清热解毒、消暑、利水,治暑热烦渴、水肿、泻利、丹毒、痈肿、解热药毒等;绿豆除了含有人体所需的营养素以外,还含有许多生物活性物质,绿豆生物活性的广泛研究和功能性开发,使绿豆已不仅仅是为人们食用,而且具有促进健康和临床应用等方面的潜在价值;因此,发明一种提高绿豆活性成分含量的种植方法能够有效提高绿豆的应用价值,进一步促进绿豆产业的高速发展。
发明内容
针对上述问题,本发明旨在提供一种提高绿豆活性成分含量的种植方法。
本发明通过以下技术方案实现:
一种提高绿豆活性成分含量的种植方法,具体方法如下:
(1)种植前种植地的处理及播种
4月上旬,选择土质疏松且排水良好的沙壤土,施入生物有机肥1800~2000kg/亩,浅耕17~19cm,作畦,灌溉水440~460m³/亩,7~9天后进行播种,播种量为1.2~1.3kg/亩;
所述的生物有机肥,由以下重量份的原料制成:牛粪920~980份、鹅粪280~300份、微白黄链霉菌1.2~1.4份、黄孢原毛平革菌1.7~1.9份、柑橘渣320~340份、木薯渣170~190份、紫花苜蓿秸秆130~150份、鲜萝卜叶45~50份、鲜火龙果皮34~38份、鲜香蕉皮58~64份;
(2)种植后的田间管理
出苗4~5天后开始根施肥液,之后每隔11~13天根施一次,直至开始采收;盛花期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;摘荚期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;
所述的肥液,由以下重量份的原料制成:过磷酸钙4.8~5.2份、黄腐酸钾0.45~0.55份、硼砂0.6~0.7份、氯化锰0.3~0.4份、维生素C0.12~0.16份、水420~440份。
作为发明进一步的方案:所述的生物有机肥的制备方法,具体包括以下步骤:
A.将柑橘渣、木薯渣、紫花苜蓿秸秆和鲜萝卜叶混合粉碎,置入温度为75~80℃的条件下恒温烘烤处理26~30min,取出,冷却,得渣秆叶料;
B.将牛粪、鹅粪、鲜火龙果皮和鲜香蕉皮混合粉碎,置入温度为210~220℃的条件下恒温蒸汽处理45~50min,取出,冷却,得粪皮料;
C.将渣秆叶料、粪皮料、微白黄链霉菌和黄孢原毛平革菌混合搅拌均匀,调整含水率为33%~37%,置入温度为37~39℃的条件下恒温发酵170~180h,得生物有机肥。
作为发明进一步的方案:所述的硫酸铜水溶液,按以下步骤进行制备:将1.2~1.4重量份的硫酸铜和0.34~0.38重量份的枸杞多糖投入900~950重量份的水中搅拌至完全溶解,得硫酸铜水溶液。
作为发明进一步的方案:所述的尿素水溶液,按以下步骤进行制备:将3.7~3.9重量份的尿素和0.15~0.19重量份的原儿茶酸投入850~900重量份的去离子水中搅拌至完全溶解,得尿素水溶液。
本发明的有益效果:本发明提供的一种提高绿豆活性成分含量的种植方法,种子前施入生物有机肥并进行灌溉处理,有效提高种植土壤的生物活性,培肥土壤,抑制土壤有害菌的滋生,促进土壤有益菌的分泌,从而为绿豆的生长提供均衡丰富的养分,促进绿豆植株的健壮生长,增强其根系分泌能力的增强,有效提高其抗倒伏能力;种植后肥液的根施,能够促进绿豆幼苗的生长,提高绿豆幼苗根系活力,增强植株吸收运输转化养分的能力,盛花期尿素水溶液结合摘荚期硫酸铜水溶液叶面喷施,提高开花结荚品质,有效抑制落花落荚现象的发生,延缓植株衰老, 维持源器官特别是主茎开花节位叶片较高的光合生产能力, 增强源库间的物质运输与分配, 促进物质向库器官运输和分配,有效促进绿豆活性成分的合成和积累,有效提升其营养保健价值,促进籽粒饱满,有效增加绿豆的产量。
具体实施方式
下面用具体实施例说明本发明,但并不是对本发明的限制。
实施例1
本发明实施例中,一种提高绿豆活性成分含量的种植方法,具体方法如下:
(1)种植前种植地的处理及播种
4月上旬,选择土质疏松且排水良好的沙壤土,施入生物有机肥1800kg/亩,浅耕17cm,作畦,灌溉水440m³/亩,7~9天后进行播种,播种量为1.2kg/亩;
所述的生物有机肥,由以下重量份的原料制成:牛粪920份、鹅粪280份、微白黄链霉菌1.2份、黄孢原毛平革菌1.7份、柑橘渣320份、木薯渣170份、紫花苜蓿秸秆130份、鲜萝卜叶45份、鲜火龙果皮34份、鲜香蕉皮58份;
(2)种植后的田间管理
出苗4~5天后开始根施肥液,之后每隔11~13天根施一次,直至开始采收;盛花期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;摘荚期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;
所述的肥液,由以下重量份的原料制成:过磷酸钙4.8份、黄腐酸钾0.45份、硼砂0.6份、氯化锰0.3份、维生素C0.12份、水420份。
作为发明进一步的方案:所述的生物有机肥的制备方法,具体包括以下步骤:
A.将柑橘渣、木薯渣、紫花苜蓿秸秆和鲜萝卜叶混合粉碎,置入温度为75℃的条件下恒温烘烤处理26min,取出,冷却,得渣秆叶料;
B.将牛粪、鹅粪、鲜火龙果皮和鲜香蕉皮混合粉碎,置入温度为210℃的条件下恒温蒸汽处理45min,取出,冷却,得粪皮料;
C.将渣秆叶料、粪皮料、微白黄链霉菌和黄孢原毛平革菌混合搅拌均匀,调整含水率为33%,置入温度为37℃的条件下恒温发酵170h,得生物有机肥。
作为发明进一步的方案:所述的硫酸铜水溶液,按以下步骤进行制备:将1.2重量份的硫酸铜和0.34重量份的枸杞多糖投入900重量份的水中搅拌至完全溶解,得硫酸铜水溶液。
作为发明进一步的方案:所述的尿素水溶液,按以下步骤进行制备:将3.7重量份的尿素和0.15重量份的原儿茶酸投入850重量份的去离子水中搅拌至完全溶解,得尿素水溶液。
实施例2
本发明实施例中,一种提高绿豆活性成分含量的种植方法,具体方法如下:
(1)种植前种植地的处理及播种
4月上旬,选择土质疏松且排水良好的沙壤土,施入生物有机肥1900kg/亩,浅耕18cm,作畦,灌溉水450m³/亩,7~9天后进行播种,播种量为1.25kg/亩;
所述的生物有机肥,由以下重量份的原料制成:牛粪950份、鹅粪290份、微白黄链霉菌1.3份、黄孢原毛平革菌1.8份、柑橘渣330份、木薯渣180份、紫花苜蓿秸秆140份、鲜萝卜叶48份、鲜火龙果皮36份、鲜香蕉皮61份;
(2)种植后的田间管理
出苗4~5天后开始根施肥液,之后每隔11~13天根施一次,直至开始采收;盛花期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;摘荚期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;
所述的肥液,由以下重量份的原料制成:过磷酸钙5份、黄腐酸钾0.5份、硼砂0.65份、氯化锰0.35份、维生素C0.14份、水430份。
作为发明进一步的方案:所述的生物有机肥的制备方法,具体包括以下步骤:
A.将柑橘渣、木薯渣、紫花苜蓿秸秆和鲜萝卜叶混合粉碎,置入温度为78℃的条件下恒温烘烤处理28min,取出,冷却,得渣秆叶料;
B.将牛粪、鹅粪、鲜火龙果皮和鲜香蕉皮混合粉碎,置入温度为215℃的条件下恒温蒸汽处理48min,取出,冷却,得粪皮料;
C.将渣秆叶料、粪皮料、微白黄链霉菌和黄孢原毛平革菌混合搅拌均匀,调整含水率为35%,置入温度为38℃的条件下恒温发酵175h,得生物有机肥。
作为发明进一步的方案:所述的硫酸铜水溶液,按以下步骤进行制备:将1.3重量份的硫酸铜和0.36重量份的枸杞多糖投入925重量份的水中搅拌至完全溶解,得硫酸铜水溶液。
作为发明进一步的方案:所述的尿素水溶液,按以下步骤进行制备:将3.8重量份的尿素和0.17重量份的原儿茶酸投入875重量份的去离子水中搅拌至完全溶解,得尿素水溶液。
实施例3
本发明实施例中,一种提高绿豆活性成分含量的种植方法,具体方法如下:
(1)种植前种植地的处理及播种
4月上旬,选择土质疏松且排水良好的沙壤土,施入生物有机肥2000kg/亩,浅耕19cm,作畦,灌溉水460m³/亩,7~9天后进行播种,播种量为1.3kg/亩;
所述的生物有机肥,由以下重量份的原料制成:牛粪980份、鹅粪300份、微白黄链霉菌1.4份、黄孢原毛平革菌1.9份、柑橘渣340份、木薯渣190份、紫花苜蓿秸秆150份、鲜萝卜叶50份、鲜火龙果皮38份、鲜香蕉皮64份;
(2)种植后的田间管理
出苗4~5天后开始根施肥液,之后每隔11~13天根施一次,直至开始采收;盛花期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;摘荚期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;
所述的肥液,由以下重量份的原料制成:过磷酸钙5.2份、黄腐酸钾0.55份、硼砂0.7份、氯化锰0.4份、维生素C0.16份、水440份。
作为发明进一步的方案:所述的生物有机肥的制备方法,具体包括以下步骤:
A.将柑橘渣、木薯渣、紫花苜蓿秸秆和鲜萝卜叶混合粉碎,置入温度为80℃的条件下恒温烘烤处理30min,取出,冷却,得渣秆叶料;
B.将牛粪、鹅粪、鲜火龙果皮和鲜香蕉皮混合粉碎,置入温度为220℃的条件下恒温蒸汽处理50min,取出,冷却,得粪皮料;
C.将渣秆叶料、粪皮料、微白黄链霉菌和黄孢原毛平革菌混合搅拌均匀,调整含水率为37%,置入温度为39℃的条件下恒温发酵180h,得生物有机肥。
作为发明进一步的方案:所述的硫酸铜水溶液,按以下步骤进行制备:将1.4重量份的硫酸铜和0.38重量份的枸杞多糖投入950重量份的水中搅拌至完全溶解,得硫酸铜水溶液。
作为发明进一步的方案:所述的尿素水溶液,按以下步骤进行制备:将3.9重量份的尿素和0.19重量份的原儿茶酸投入900重量份的去离子水中搅拌至完全溶解,得尿素水溶液。
对比例
现有技术的绿豆的普通种植方法
使用实施例的种植方法和对比例的种植方法种植“苏绿2号”8亩,分为4组,平均每组2亩,采收后检测其杨梅黄酮含量、槲皮素含量、维生素E含量、硒含量、平均百粒重和平均亩产量,结果如表1:
表1 实施例和对比例的对比结果
实施例1 实施例2 实施例3 对比例
杨梅黄酮含量(mg/kg) 97.92 98.43 98.89 62.31
槲皮素含量(mg/kg) 308.65 311.54 309.76 211.32
维生素E含量(mg/100g) 17.48 17.65 17.87 8.98
硒含量(μg/100g) 13.65 13.50 13.54 4.34
平均百粒重(g) 7.32 7.14 7.21 5.815
平均亩产量(kg) 182.11 184.56 186.87 135.64
相对增产率(%) 34.26 36.07 37.77 ——
从表1可以看出,本发明的种植方法不但能够显著提升绿豆的活性成分含量,提升其营养保健价值,而且能够有效提高其百粒重,增加其产量。

Claims (3)

1.一种提高绿豆活性成分含量的种植方法,其特征在于,具体方法如下:
(1)种植前种植地的处理及播种
4月上旬,选择土质疏松且排水良好的沙壤土,施入生物有机肥1800~2000kg/亩,浅耕17~19cm,作畦,灌溉水440~460m³/亩,7~9天后进行播种,播种量为1.2~1.3kg/亩;
所述的生物有机肥,由以下重量份的原料制成:牛粪920~980份、鹅粪280~300份、微白黄链霉菌1.2~1.4份、黄孢原毛平革菌1.7~1.9份、柑橘渣320~340份、木薯渣170~190份、紫花苜蓿秸秆130~150份、鲜萝卜叶45~50份、鲜火龙果皮34~38份、鲜香蕉皮58~64份;
所述的生物有机肥的制备方法,具体包括以下步骤:
A.将柑橘渣、木薯渣、紫花苜蓿秸秆和鲜萝卜叶混合粉碎,置入温度为75~80℃的条件下恒温烘烤处理26~30min,取出,冷却,得渣秆叶料;
B.将牛粪、鹅粪、鲜火龙果皮和鲜香蕉皮混合粉碎,置入温度为210~220℃的条件下恒温蒸汽处理45~50min,取出,冷却,得粪皮料;
C.将渣秆叶料、粪皮料、微白黄链霉菌和黄孢原毛平革菌混合搅拌均匀,调整含水率为33%~37%,置入温度为37~39℃的条件下恒温发酵170~180h,得生物有机肥;
(2)种植后的田间管理
出苗4~5天后开始根施肥液,之后每隔11~13天根施一次,直至开始采收;盛花期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;摘荚期叶面喷施一次硫酸铜水溶液,2~3天后叶面喷施一次尿素水溶液;
所述的肥液,由以下重量份的原料制成:过磷酸钙4.8~5.2份、黄腐酸钾0.45~0.55份、硼砂0.6~0.7份、氯化锰0.3~0.4份、维生素C0.12~0.16份、水420~440份。
2.根据权利要求1所述的提高绿豆活性成分含量的种植方法,其特征在于,所述的硫酸铜水溶液,按以下步骤进行制备:将1.2~1.4重量份的硫酸铜和0.34~0.38重量份的枸杞多糖投入900~950重量份的水中搅拌至完全溶解,得硫酸铜水溶液。
3.根据权利要求1所述的提高绿豆活性成分含量的种植方法,其特征在于,所述的尿素水溶液,按以下步骤进行制备:将3.7~3.9重量份的尿素和0.15~0.19重量份的原儿茶酸投入850~900重量份的去离子水中搅拌至完全溶解,得尿素水溶液。
CN201710950795.6A 2017-10-13 2017-10-13 一种提高绿豆活性成分含量的种植方法 Expired - Fee Related CN107593353B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710950795.6A CN107593353B (zh) 2017-10-13 2017-10-13 一种提高绿豆活性成分含量的种植方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710950795.6A CN107593353B (zh) 2017-10-13 2017-10-13 一种提高绿豆活性成分含量的种植方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107593353A CN107593353A (zh) 2018-01-19
CN107593353B true CN107593353B (zh) 2018-11-23

Family

ID=61068443

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710950795.6A Expired - Fee Related CN107593353B (zh) 2017-10-13 2017-10-13 一种提高绿豆活性成分含量的种植方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107593353B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108668734A (zh) * 2018-04-11 2018-10-19 霍山县庆中农林开发有限公司 一种油茶园养鸡的增质增效方法
CN114982578A (zh) * 2022-05-10 2022-09-02 云南天保桦生物资源开发有限公司 一种提升白芸豆籽粒中α-淀粉酶抑制剂含量的种植方法

Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101503318A (zh) * 2009-03-23 2009-08-12 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 一种有机无机复合肥料
EP2422612A1 (de) * 2010-08-27 2012-02-29 Simply Water GmbH Verfahren zur Pflanzenbehandlung
EP2422613A1 (de) * 2010-08-27 2012-02-29 Simply Water GmbH Verfahren zur Beizung
CN102746066A (zh) * 2012-07-19 2012-10-24 谭赫 一种植物营养液
CN102816003A (zh) * 2012-08-15 2012-12-12 甘朝生 一种纳米碳硫酸根有机肥料及其制备方法
CN103468620A (zh) * 2013-09-26 2013-12-25 山东省林业科学研究院 一株微白黄链霉菌及其在防治黄瓜霜霉病方面的应用
CN103477831A (zh) * 2013-09-10 2014-01-01 天津坂结土壤肥料技术开发有限公司 一种提高大豆产量的种植方法
CN103583189A (zh) * 2013-10-17 2014-02-19 固镇县玉鹏蔬菜开发有限责任公司 一种无公害绿豆快速生产方法
CN104355739A (zh) * 2014-10-31 2015-02-18 恩施茂和食品有限公司 绿豆含硒微量元素叶面肥及其用于富硒绿豆的栽培技术
CN105084955A (zh) * 2015-09-07 2015-11-25 定西华冠农牧业开发有限公司 利用牛羊粪配制有机肥的方法
CN105198569A (zh) * 2015-09-11 2015-12-30 张乔木 一种发酵复合有机肥及其制备方法

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101503318A (zh) * 2009-03-23 2009-08-12 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 一种有机无机复合肥料
EP2422612A1 (de) * 2010-08-27 2012-02-29 Simply Water GmbH Verfahren zur Pflanzenbehandlung
EP2422613A1 (de) * 2010-08-27 2012-02-29 Simply Water GmbH Verfahren zur Beizung
CN102746066A (zh) * 2012-07-19 2012-10-24 谭赫 一种植物营养液
CN102816003A (zh) * 2012-08-15 2012-12-12 甘朝生 一种纳米碳硫酸根有机肥料及其制备方法
CN103477831A (zh) * 2013-09-10 2014-01-01 天津坂结土壤肥料技术开发有限公司 一种提高大豆产量的种植方法
CN103468620A (zh) * 2013-09-26 2013-12-25 山东省林业科学研究院 一株微白黄链霉菌及其在防治黄瓜霜霉病方面的应用
CN103583189A (zh) * 2013-10-17 2014-02-19 固镇县玉鹏蔬菜开发有限责任公司 一种无公害绿豆快速生产方法
CN104355739A (zh) * 2014-10-31 2015-02-18 恩施茂和食品有限公司 绿豆含硒微量元素叶面肥及其用于富硒绿豆的栽培技术
CN105084955A (zh) * 2015-09-07 2015-11-25 定西华冠农牧业开发有限公司 利用牛羊粪配制有机肥的方法
CN105198569A (zh) * 2015-09-11 2015-12-30 张乔木 一种发酵复合有机肥及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN107593353A (zh) 2018-01-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104761375A (zh) 一种海藻生物肥及其制备方法
CN104945168A (zh) 一种马铃薯专用活性复合叶面肥
CN105367283A (zh) 一种香瓜的高产大棚种植方法
CN105706681A (zh) 一种秋葵的高产种植方法
CN107912256A (zh) 一种高产高营养大蒜的种植方法
CN107135766A (zh) 一种高产高质绿豆的种植方法
CN104838837A (zh) 一种莲藕的种植方法
CN107593353B (zh) 一种提高绿豆活性成分含量的种植方法
CN107306720A (zh) 一种高产柑橘的栽培方法
CN106211979A (zh) 一种秋葵丰产高效种植方法
CN103833442A (zh) 马蹄(又名荸荠)种植专用有机-无机肥
CN103664283B (zh) 一种大顶苦瓜种植专用肥
CN108812062A (zh) 一种芦荟液体肥辅助栽培蘑菇的方法
CN108739199A (zh) 一种富硒花生的冬季大棚种植方法
CN108739897A (zh) 一种酸枣种子催芽剂及其制备方法
CN106612740A (zh) 一种高产高质香菜的种植方法
CN105917893A (zh) 一种富碘空心菜的种植方法
CN109197375A (zh) 一种具有保健茶树菇栽培方法
CN108703025A (zh) 一种提升番茄口感的生态种植方法
CN108752103A (zh) 一种促进酸枣种子发芽的催芽剂及其制备方法
CN108887130A (zh) 一种黄花菜套种羊肚菌的种植方法
CN107637465A (zh) 一种天冬种子的育苗方法
CN107197736A (zh) 一种绿色无污染水蜜桃的种植方法
CN106576820A (zh) 富硒火麻的种植方法
CN109042168A (zh) 一种富硒水稻的种植方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20181123

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee