CN107578684A - 一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法，包括以下步骤：a、制备卡介苗悬液；b、鸡蛋清准备；c、研磨；d、保存。本法制备的标本为模拟标本，标本用于医学微生物实验教学中的实验内容——结核痰标本抗酸染色。模拟标本的使用便于医学微生物学实验教学中学生对基本操作技术的学习，模拟标本所用替代菌卡介苗对人体环境没有任何危害，操作更安全，获取更方便，成本较低廉，经Ziehl‑Neelsen抗酸染色后染色性与被代替菌结核分枝杆菌相同，形态相似，标本制备过程简单，操作方便，非常适合用于教学。

Description

一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法
技术领域
本发明涉及一种模拟标本的制备方法，特别涉及一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法，属于微生物教学领域。
背景技术
在医学微生物实验教学中，结核痰标本的抗酸染色是重要的实验操作项目之一，一般收集结核痰标本最好取肺结核病人的早晨第一次咳痰，咳痰可直接涂片，如标本中结核分枝杆菌量少，还需进一步做浓缩集菌处理，操作繁杂。由于结核分支杆菌属高致病性病原微生物，整个痰涂片的制备，固定过程应在生物安全柜中进行，以免污染工作环境，对操作人员造成生物危害。因此，限于生物安全对结核杆菌的操作限制，使得教学用结核痰标本不易获得，操作环境要求高也导致操作成本较高，不易实现教学目的。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：提供一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法，通过用鸡蛋清和卡介苗悬液一起混合研磨，制取结核痰模拟标本，解决了目前实验教学中结核痰标本获取难，受生物安全的限制而操作成本较高的问题。
本发明的技术方案是：一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备卡介苗悬液：皮内注射用卡介苗含卡介菌0.5mg/支，每支加入1ml生理盐水，放置1～2分钟，摇动使之充分混合均匀；
(2)鸡蛋清准备：先用消毒液对鸡蛋外壳进行消毒，并于外壳上开一小孔，从小孔处分离出鸡蛋清备用；
(3)研磨：用步骤（1）制得的卡介苗悬液以每mg卡介苗加入5～10ml鸡蛋清的量置于无菌研钵中研磨；
(4)保存：研磨后将步骤（3）制得的混合物收集于玻璃容器中，即制得模拟结核痰标本，在-20℃以下保存备用。
所述步骤（2）中的消毒液为碘伏。
所述步骤（3）中，研磨过程中用接种环取研钵中混合物制备细菌涂片，进行Ziehl-Neelsen抗酸染色后拿到显微镜下观察，直至显微镜下看到被染成红色的细菌没有成团，分散均匀的分布于镜下视野中。
本发明的有益效果是：本法制备的标本为模拟标本，标本用于医学微生物实验教学中的实验内容——结核痰标本抗酸染色。模拟标本的使用便于医学微生物学实验教学中学生对基本操作技术的学习。模拟标本所用替代菌卡介苗为减毒牛型结核杆菌，对人体和环境没有任何危害，操作更安全，获取更方便，成本较低廉，经Ziehl-Neelsen抗酸染色后染色性与被代替菌结核分枝杆菌相同，标本制备过程简单，操作方便，非常适合用于教学。
附图说明
图1：一种结核痰模拟标本图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将参照本说明书对本发明作进一步的详细描述。
实施例1：一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备卡介苗悬液：皮内注射用卡介苗含卡介菌0.5mg/支，每支加入1ml生理盐水，放置约1分钟，摇动使之充分混合均匀；
(2)鸡蛋清准备：先用碘伏消毒鸡蛋外壳，于消毒位置处开一小孔，分离出鸡蛋清备用；
(3)研磨：用步骤（1）制得的卡介苗悬液以每mg卡介苗加入5ml鸡蛋清的量置于无菌研钵中反复研磨，研磨过程中不时用接种环取研钵中混合物制备细菌涂片，进行Ziehl-Neelsen抗酸染色后拿到显微镜下观察，直至显微镜下看到被染成红色的细菌没有成团，分散均匀的分布于镜下视野中即可；
(4)保存：停止研磨后将步骤（3）制得的混合物收集于玻璃容器中，即制得模拟结核痰标本，在-20℃以下保存备用。
本法制备的标本为模拟标本，标本用于医学微生物实验教学中的实验内容——结核痰标本抗酸染色。模拟标本的使用便于医学微生物学实验教学中学生对基本操作技术的学习。模拟标本所用替代菌卡介苗为减毒牛型结核杆菌，对人体和环境没有任何危害，操作更安全，获取更方便，成本较低廉，经Ziehl-Neelsen抗酸染色后染色性与被代替菌结核分枝杆菌相同，标本制备过程简单，操作方便，非常适合用于教学。
实施例2：一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备卡介苗悬液：皮内注射用卡介苗含卡介菌0.5mg/支，每支加入1ml生理盐水，放置约2分钟，摇动使之充分混匀；
(2)鸡蛋清准备：先用碘伏消毒鸡蛋外壳，于消毒位置处开一小孔，分离出鸡蛋清备用；
(3)研磨：用步骤（1）制得的卡介苗悬液以每mg卡介苗加入10ml鸡蛋清的量置于无菌研钵中反复研磨，研磨过程中不时用接种环取研钵中混合物制备细菌涂片，进行Ziehl-Neelsen抗酸染色后拿到显微镜下观察，直至显微镜下看到被染成红色的细菌没有成团，分散均匀的分布于镜下视野中即可；
(4)保存：停止研磨后将步骤（3）制得的混合物收集于玻璃容器中，即制得模拟结核痰标本，-20℃保存备用。
本法制备的标本为模拟标本，标本用于医学微生物实验教学中的实验内容——结核痰标本抗酸染色。模拟标本的使用便于医学微生物学实验教学中学生对基本操作技术的学习。模拟标本所用替代菌卡介苗为减毒牛型结核杆菌，对人体和环境没有任何危害，操作更安全，获取更方便，成本较低廉，经Ziehl-Neelsen抗酸染色后染色性与被代替菌结核分枝杆菌相同，标本制备过程简单，操作方便，非常适合用于教学。
本发明未详述之处，均为本技术领域技术人员的公知技术。最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (3)

1.一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
制备卡介苗悬液：皮内注射用卡介苗含卡介菌0.5mg/支，每支加入1ml生理盐水，放置1～2分钟，摇动使之充分混合均匀；
鸡蛋清准备：先用消毒液对鸡蛋外壳进行消毒，并于外壳上开一小孔，从小孔处分离出鸡蛋清备用；
研磨：用步骤（1）制得的卡介苗悬液以每mg卡介苗加入5～10ml鸡蛋清的量置于无菌研钵中研磨；
保存：研磨后将步骤（3）制得的混合物收集于玻璃容器中，即制得模拟结核痰标本，在-20℃以下保存备用。
2.根据权利要求1所述的一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中的消毒液为碘伏。
3.根据权利要求1所述的一种医学微生物教学中结核痰模拟标本的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中，研磨过程中用接种环取研钵中混合物制备细菌涂片，进行Ziehl-Neelsen抗酸染色后拿到显微镜下观察，直至显微镜下看到被染成红色的细菌没有成团，分散均匀的分布于镜下视野中。
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